CZ300688B6 - Polypeptid, farmaceutický prostredek a vakcína s jeho obsahem, zpusob prípravy a použití polypeptidu, molekula rekombinantní DNA a její použití, expresní vektor, hostitelská bunka, fúsní porotein a diagnostický kit - Google Patents

Polypeptid, farmaceutický prostredek a vakcína s jeho obsahem, zpusob prípravy a použití polypeptidu, molekula rekombinantní DNA a její použití, expresní vektor, hostitelská bunka, fúsní porotein a diagnostický kit Download PDF

Info

Publication number
CZ300688B6
CZ300688B6 CZ20060387A CZ2006387A CZ300688B6 CZ 300688 B6 CZ300688 B6 CZ 300688B6 CZ 20060387 A CZ20060387 A CZ 20060387A CZ 2006387 A CZ2006387 A CZ 2006387A CZ 300688 B6 CZ300688 B6 CZ 300688B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
ala
seq
gly
pro
thr
Prior art date
Application number
CZ20060387A
Other languages
English (en)
Inventor
G. Reed@Steven
A. W. Skeiky@Yasir
C. Dillon@Davin
Campos-Neto@Antonio
Houghton@Raymond
H. Vedvick@Thomas
R. Twardzik@Daniel
Original Assignee
Corixa Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27541835&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ300688(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Corixa Corporation filed Critical Corixa Corporation
Publication of CZ300688B6 publication Critical patent/CZ300688B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/35—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Mycobacteriaceae (F)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A61P31/06—Antibacterial agents for tuberculosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Jsou popsány polypeptidy, farmaceutické prostredky a vakcíny s jejich obsahem, zpusob prípravy a použití takového polypeptidu, molekuly rekombinantní DNA a jejich použití, expresní vektor obsahující takovou molekulu, hostitelské bunky transformované tímto expresním vektorem, fúsní porotein obsahující uvedený polypeptid a diagnostický kit s obsahem polypeptidu. Predkládaný vynález se obecne týká detekce, lécby a prevence infekce Mycobacterium tuberculosis.

Description

Oblast techniky
Předkládaný vynález se obecně týká detekce, léčby a prevence infekce Mycobacterium tuberculosis. Vynález se přesněji týká polypeptidů, farmaceutického prostředku a vakcíny s jejich obsaio hem, způsobu přípravy a použití takového polypeptidu, molekuly rekombinantní DNA a jejího použití, expresní vektoru obsahujícího takovou molekulu, hostitelské buňky transformované tímto expresním vektorem, fúsního poroteinu obsahujícího uvedený polypeptid a diagnostického kitu s obsahem polypeptidu.
Dosavadní stav techniky
Tuberkulosa je chronické infekční onemocnění, které je obyčejně způsobeno Mycobacterium tuberculosis. Je hlavním onemocněním v rozvojových zemích a stejně tak je narůstajícím problé20 mem v rozvinutých oblastech světa, s asi 8 miliony nových případů a 3 miliony úmrtí za rok. Ačkoliv může být infekce asymptomatická po značně dlouhé časové období, nejčastěji se onemocnění manifestuje jako akutní plicní zánět, doprovázený horečkou a neproduktivním kašlem. Pokud není léčena, vede obvykle k závažným komplikacím a smrti.
Ačkoliv může být tuberkulosa obyčejně kontrolována za použití intenzivní antibiotické terapie, není taková léčba dostatečná pro prevenci šíření onemocnění. Infikovaní jedinci mohou být po určitou dobu asymptomatičtí, ale infekční. Kromě toho, ačkoliv je spolupráce nemocného při léčbě zásadní, je chování pacienta obtížně sledovatelné. Někteří pacienti nedokončí léčbu, což může vést k její nízké účinnosti a k vývoji resistence na léky.
Inhibice šíření tuberkulosy vyžaduje účinnou vakcinaci a přesnou, časnou diagnostiku onemocnění. v současné době je vakcinace živou bakterií nejúčinnějším způsobem pro indukci protektivní imunity. Nejčastěji používanou mykobakterií je pro tento účel Bacillus Calmette-Guerin (BCG), avirulentní kmen Mycobacterium bovis. Nicméně, bezpečnost a účinnost BCG je zdro35 jem kontroverse a některé země, jako například USA, nevakcinují populaci. Diagnóza je obyčejně provedena za použití kožního testu, který obsahuje intradermální expozici tuberculin PPD (přečištěný proteinový derivát). Antigen specifická odpověď T-buněk vede k měřitelné induraci v místě injekce po 48 až 72 hodinách po injekci, což ukazuje na expozici mykobakteriálním antigenům. Sensitivita a specifická tohoto testu jsou však problematické a jedinci vakcinovaní BCG nemohou být tímto testem odlišeni od infikovaných jedinců.
Ačkoliv bylo prokázáno, že makrofágy jsou hlavními efektorovými elementy v imunitě proti M. tuberculosis, jsou T-buňky převažujícími induktory takové imunity. Zásadní role T buněk v obraně proti infekci M. tuberculosis je doložena častým výskytem M, tuberculosis u pacientů s AIDS, díky depleci CD4 T buněk, která je spojena s infekcí virem lidské imunoeficience (HIV). Mycobacterium-reaktivní CD4 T buňky produkují ve značném množství interferon-gamma (IFN-τ), který, jak bylo prokázáno, spouští antimykobakteriální účinky makrofágů u myší. Ačkoliv je role IFN-τ u lidí méně jasná, ukazují studie, že 1,25-dihydroxy-vitamin D3, buď samostatně, nebo v kombinaci s IFN-τ nebo faktorem nekrosy nádorů alfa, aktivuje lidské makrofágy pro inhibici infekce M. tuberculosis. Kromě toho, je známo, že IFN-τ stimuluje lidské makrofágy k výrobě 1,25-dihydroxy vitaminu D3. Obdobně, bylo prokázáno, že IL—12 má významnou úlohu při stimulaci resistence k infekci M. tuberculosis. Pro přehled imunologie infekce M. tuberculosis viz Chán a Kaufmann v „Tuberculosis: Pathogenesis, Protection and Control“, Bloom (vyd.), ASM Press, Washington, D.C., 1994.
JUVUOO DO
V souladu s tím existuje v oboru potřeba vylepšené vakcíny a způsobů pro prevenci, léčbu a detekci tuberkulosy. Předkládaný vynález splňuje tyto potřeby a dále poskytuje s těmito potřebami související výhody.
Podstata vynálezu Předmětem tohoto vynálezu je:
Polypeptid obsahující imunogenní část solubilního antigenu M. tuberculosis, nebo variantu uvedeného antigenu, která se liší pouze v konzervativní substituci a/nebo modifikaci, kde uvedený antigen má N-koncovou sekvenci vybranou ze skupiny skládající se z:
(a) Asp-Pro-Val-Asp-Ala-V al-Ile-Asn-Thr-Thr-Cys-Asn-TyT-Gly-GlnVal-Val-Ala-Ala-Leu;(SEQIDNo. 120) (b) Ala-V al-GIu-Ser-Gly-Mei-Leu-Ala-Leu-Gly-Thr-Pro-.Ala-Pro-Ser;
(SEQÍDNo. 121) (c) Ala-Aia-Met-Lys-Přo-Arg-Thr-Gly-Asp-Gly-Pro-Leu-Glu-Ala-AíaLys-Glu-Gly-Arg; (SEQ ÍD No. 122) (d) Tyr-Tyr-Trp-Cys-Pro-Gly-Cjln-Pro-Phe-Asp-Pro-Aa^Trp-Gly-Pro;
(SEQ ID No. 123) (e) Asp-ne-Gly-Ser-Glu-Ser-lTir-Glu-Asp-Gln-Gln-Xaa-Ala-Val; (SEQ ID No. 124) (f) Ala-Glu-Glu-SerTle-Ser-Thr-Xaa-GIu-Xaa-Ile-Val-Pro; (SEQ ID No.
125) (g) Asp-Pro-Gíu-Pro-AIa-Pro-Pro-Val-Pro-Thr-Thr-Ala-Aía-Ser-Pro-Pro*
Ser; (SEQ ID No. 126) (h) Ala-Pro-Lys.Thr-Tyr-Xaa-Gtu-Glu-Leu-LysGIy-Thr-.Asp-Thr-Gly;
(SEQ ID No. 127) (i) Asp-Pro^Ala-Ser-Ala-Pro-Asp-Val-Pro-Thr-Ala-Ala-Gb-Leu-Thr-SerLeu-Leu-Asu-Ser-Leu-A!a-Asp-Pro-Asn-VaI-Ser-Phe’Ala-Asn; (SEQ ID No. 128) and
0) Ala-Pro-Glu-Ser-Gly-Ala^Gly-Leu-Gly-Gly-Thr-Val-Gln-Ala-Gly;
(SEQ ID No. 136) kde Xaa může být jakákoliv aminokyselina.
Polypeptid obsahující imunogenní část antigenu M. tuberculosis, nebo variantu uvedeného antigenu, která se tiší pouze v konzervativní substituci a/nebo modifikaci, kde uvedený antigen má N-koncovou sekvenci vybranou ze skupiny skládající se z:
Ί .
(a) Asp-Pro-Pro-Asp-Pto-HisOÍn^Xaa-Asp-Met-Thr-Lys-Gly-Tyr-TyrPro-Giy-Gly-Arg-Arg-Xaa-Phe; (SEQ ID No. 129) and (b) Xaa-Tyi-Ue-Ala-Tyr-Xaa-Thr-Thr-Ala-Gly-Ue-Val-Pro-Gly-Lys-Ile. Asn-Val-His-Leu-Val; (SEQ ID No. 137), kde Xaa může být jakákoliv aminokyselina.
Polypeptid obsahující imunogenní část solubilního antigenu M. tuberculosis, nebo variantu uve5 děného antigenu, která se liší pouze v konzervativní substituci a/nebo modifikaci, kde uvedený antigen obsahuje aminokyselinovou sekvence kódovanou DNA sekvencí vybranou ze skupiny sekvencí uvedených v SEQ ID NO: 1, 2, 4-10, 13-25, 52, 99 a 101, sekvencí komplementárních k uvedeným sekvencím a DNA sekvencí, které hybridizují na sekvence uvedené v SEQ ID NO: 1, 2, 4-10, 13-25, 52, 99 a 101 nebo jejich komplementární sekvence za podmínek střední io přísnosti.
Polypeptid obsahující imunogenní část antigenu M. tuberculosis, nebo variantu uvedeného antigenu, která se liší pouze v konzervativní substituci a/nebo modifikaci, kde uvedený antigen obsahuje aminokyselinovou sekvence kódovanou DNA sekvencí vybranou ze skupiny sekvencí uve15 děných v SEQ ID NO: 26-51, sekvencí komplementárních k uvedeným sekvencím a DNA sekvencí, které hybridizují na sekvence uvedené v SEQ ID NO: 26-51 nebo jejich komplementární sekvence za podmínek střední přísnosti.
DNA molekula obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptid podle jakéhokoliv z před20 metů uvedených výše.
Expresní vektor obsahující DNA molekulu uvedenou zde výše.
Hostitelská buňka transformovaná tímto expresním vektorem.
Hostitelská buňka uvedená výše, která je vybrána ze skupiny skládající se z E. coli, kvasinek a savčích buněk.
Farmaceutický prostředek (dále označován také jako přípravek) obsahující jeden nebo více poly30 peptidů popsaných výše a fyziologicky přijatelný nosič.
Farmaceutický prostředek obsahující jednu nebo více molekul DNA podle vymezení uvedeného výše a fyziologicky přijatelný nosič.
Farmaceutický prostředek obsahující jednu nebo více DNA sekvencí uvedených v SEQ ID NO: 3, 11 a 12; a fyziologicky přijatelný nosič,
Vakcína obsahující jeden nebo více polypeptidů podle jakékoliv zvýše uvedených definicí a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
Vakcína obsahující:
polypeptid mající N-koncovou sekvenci vybranou ze skupiny skládající se ze sekvencí uvedených v SEQ ID NO: 134 a 135; a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
-3Vakeína obsahující:
jeden nebo více polypeptidu kódovaných DNA sekvencí vybranou ze skupiny skládající se ze 5 SEQ ID NO: 3, 11 a 12, sekvencí komplementárních k uvedeným sekvencím a DNA sekvencí, které hybridizují na sekvence uvedené v SEQ ID NO: 3, 11 a 12; a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
io Jakákoli zvýše uvedených vakeín, kde nespecifickým zesilovačem imunitní odpovědi je adjuvans.
Vakeína obsahující jednu nebo více molekul DNA popsaných výše a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
Vakeína obsahující jednu nebo více DNA sekvencí uvedených v SEQ ID NO: 3, 11 a 12; a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
Vakeína popsaná v některém ze dvou předchozích odstavců, kde nespecifickým zesilovačem 2o imunitní odpovědi je adjuvans.
Způsob pro indukci protektivní imunity u pacienta, jehož podstata spočívá v tom, že pacientovi je podán farmaceutický prostředek popsaný výše.
Způsob pro indukci protektivní imunity u pacienta, jehož podstata spočívá v tom, že pacientovi je podána vakeína vymezená výše.
Fúsní protein obsahující dva nebo více polypeptidu vymezených v úvodní části kapitoly týkající se podstaty vynálezu, jak je obsažena v tomto popisu.
Fúsní protein obsahující jeden nebo více polypeptidů vymezených v úvodní části kapitoly týkající se podstaty vynálezu, jak je obsažena v tomto popisu, a ESAT-6.
Farmaceutický prostředek obsahující fúsní protein zde popsaný výše a fyziologicky přijatelný 35 nosič.
Vakeína obsahující fúsní protein zde popsaný výše a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
Vakeína uvedená výše, kde nespecifickým zesilovačem imunitní odpovědi je adjuvans.
Způsob pro indukci protektivní imunity u pacienta, jehož podstata spočívá v tom, že pacientovi je podán farmaceutický prostředek vymezený výše.
Způsob pro indukci protektivní imunity u pacienta, jehož podstata spočívá v tom, že pacientovi je 45 podávána vakeína vymezena výše.
Způsob pro detekci tuberkuíosy u pacienta, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje:
(a) kontaktování kožních buněk pacienta s jedním nebo více polypeptidy vymezenými výše a (b) detekování imunitní odpovědi kůže pacienta a tak detekování tuberkuíosy u pacienta.
-4Způsob pro detekci tuberkulosy u pacienta, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje:
(a) kontaktování kožních buněk pacienta s polypeptidem majícím N-koncovou sekvenci vybranou ze skupiny skládající se ze sekvencí uvedených v SEQ ID NO: 134 a 135; a (b) detekování imunitní odpovědi kůže pacienta a tak detekování tuberkulosy u pacienta.
Způsob pro detekci tuberkulosy u pacienta, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje:
ío (a) kontaktování kožních buněk pacienta sjedním nebo více polypeptidy kódovanými DNA sekvencí vybranou ze skupiny skládající se ze SEQ ID NO: 3, 11 a 12, sekvencí komplementárních k uvedeným sekvencím a DNA sekvencí, které hybridizují na sekvence uvedené v SEQ ID NO: 3, 11 a 12; a (b) detekování imunitní odpovědi kůže pacienta a tak detekování tuberkulosy u pacienta.
Jakýkoli výše uvedený způsob pro detekci tuberkulosy u pacienta, jehož podstata spočívá v tom, že imunitní odpovědí je indurace.
Diagnostický kit obsahuj ící:
(a) polypeptid vymezených v úvodní části kapitoly týkající se podstaty vynálezu, jak je obsažena v tomto popisu, a (b) přístroj umožňující kontaktování uvedeného polypeptidů s kožními buňkami pacienta.
Diagnostický kit obsahující:
(a) polypeptid mající N-koncovou sekvenci vybranou ze skupiny skládající se z sekvencí uve30 děných v SEQ ID NO: 134 a 135; a (b) přístroj umožňující kontaktování uvedeného polypeptidů s kožními buňkami pacienta.
Diagnostický kit obsahující:
(a) polypeptid kódovaný DNA sekvencí vybranou ze skupiny skládající se ze SEQ ID NO: 3,11 a 12, sekvencí komplementárních k uvedeným sekvencím a DNA sekvencí, které hybridizují na sekvence uvedené v SEQ ID NO: 3, 11 a 12; a (b) přístroj umožňující kontaktování uvedeného polypeptidů s kožními buňkami pacienta.
Uvedeno ve stručnosti, tento vynález tedy poskytuje sloučeniny a způsoby pro prevenci a diagnostiku tuberkulosy. V jednom aspektu jsou poskytnuty polypeptidy obsahující imunogenní část solubilního antigenu M. tuberculosis, nebo varianty takového antigenu, která se liší pouze kon45 zervativní substitucí a/nebo modifikací, v jednom provedení tohoto aspektu má solubilní antigen následující N-koncové sekvence:
-5CL JUUOHS B6 (a) Asp-Pro-Vai-Asp-Ala-Val-ne-Asn-Thr-TThr-Cys-Asn-Tyr-Gly· Gin-Val-Val-Ala-AIa-Leu; (SEQ ID No. 120) (b) Ala-Val-Glu-Ser-Gly-Met-Leu-Ala-Leu-Gly-Thr-Pro-Ala-ProSert(SEQ ID No. 121) (c) Ala-Ala-Met-Lys-Pro-Arg-Thr-Gly-Asp-Gly-Pro-Leu-Glu-Ala* Ala-Lys-Glu-Gíy-Arg; (SEQ ID No. 122) (d) Tyr-Tyr-Trp-Cys-Pro-Gly-GIn-Pro-Phe-Asp-Pro-Ala-Trp-GlyPro; (SEQ ID No. 123) (e) Asp-IIe-Gly-Ser-Glu-Ser-Thr-GIu-Asp-Gln-Gln-Xaa-Ala-Val;
(SEQ ID No. 124) (f) Ala-Glu-Glu-Ser-Ile-Ser-Thr-Xaa-Glu-Xaa-Ile-Val-Pro; (SEQ ID No. 125) (g) Asp-Pro-GIu-Pro-Ala-Pro-Pro-Val-Pro-Thr-Thr-Aia-Ala-SerPro-Pro-Ser; (SEQ ID No. 126) (h) Ala-Pro-Lys-Thr-Tyr-Xaa-Glu-Glu-Leu-Lys-Gly-Thr-Asp-ThrGly; (SEQ ID No. 127) (i) Asp-Pro-Ala-Ser-Ala-Pro-Asp-V al-Pro-Thr-Ala-Ala-Gln-LeuIhr-Ser-Leu-Leu-Asn-Ser-Leu-AIa-Asp-Pro-Asn-Val-Ser-PheAla-Asn; (SEQ ID No. 128)
0) Xaa-Asp-Ser-Glu-Lys-Ser-Ala-Thr-Ile-Lys-Va]-Thr-Asp-AlaScr; (SEQ ID No. 134) (k) Ala-Gly-Asp-Tkr-Xaa-Ile-Tyr-Ile-Val-Gly-Asn-Leu-Thr-AlaAsp; (SEQ ID No. 135) or (l) Ala-Pro-Glu-Ser-Gly-Ala-GIy-Leu-GIy-Gly-Thr-Val-Gln-AlaGly; (SEQ ID No. 136) kde Xaa může být jakákoliv aminokyselina.
V souvisejícím aspektu jsou poskytnuty polypeptidy obsahující imunogenní část solubi In ího anti genu M. tuberculosis, nebo varianty takového antigenů, která se liší pouze konzervativní substi tucí a/nebo modifikací, kde antigen má jednu z následujících N-koncových sekvencí:
-6(m) Xaa-Tyr-IIe-Ala-Tyr-Xaa-Thr-Thr-Ala-Gly-Ile-Val-Pro-Gly-LysIle-Asn-Val-His-Leu-Val; (SEQ ID No. 137) oř (n) Asp-Pro-Pro-Asp-Pro-His-Gln-Xaa-Asp-Met-Thr-LysXjly-TyrTyr-Pro-Gly.Gly-Arg-Arg-Xaa-Phe; (SEQ ID No. 129) kde Xaa může být jakákoliv aminokyselina.
V jiném provedení obsahuje antigen aminokyselinovou sekvencí kódovanou DNA sekvencí vybranou ze skupiny skládající se ze SEQ ID NO: 1, 2, 4-10, 13-25, 52, 99 a 101, komplementů uvedených sekvencí a DNA sekvencí, které hybridizují na sekvence SEQ ID NO: 1, 2, 4-10, 13-25, 52, 99 a 101 nebo komplementy uvedených sekvencí za podmínek střední přísnosti.
V souvisejícím aspektu polypeptidy obsahují imunogenní část antigenu M. tuberculosis, nebo io varianty takového antigenu, která se liší pouze konzervativní substitucí a/nebo modifikací, kde antigen obsahuje aminokyselinovou sekvenci kódovanou DNA sekvencí vybranou ze skupiny skládající se ze SEQ ID NO: 26-51, komplementů uvedených sekvencí a DNA sekvencí, které hybridizují na sekvence SEQ ID NO: 26-51 nebo komplementy uvedených sekvencí za podmínek střední přísnosti.
V souvisejícím aspektu jsou poskytnuty DNA sekvence kódující výše uvedené polypeptidy, expresní vektory obsahující tyto DNA sekvence a hostitelské buňky transformované nebo transferované takovými expresními vektory.
V jiném aspektu předkládaný vynález poskytuje fúsní proteiny obsahující první a druhý polypeptid podle předkládaného vynálezu, nebo alternativně, polypeptid podle předkládaného vynálezu a známý antigen M. tuberculosis.
V dalších aspektech předkládaný vynález poskytuje farmaceutické přípravky, které obsahují jeden nebo více z výše uvedených polypeptidů nebo DNA molekulu kódující takové polypeptidy, a fyziologicky přijatelný nosič. Vynález také poskytuje vakcínu obsahující jeden nebo více polypeptidů jak jsou popsány výše a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi, spolu s vakcínami obsahujícími jednu nebo více DNA sekvencí kódujících takové polypeptidy a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
V ještě jiném aspektu jsou poskytnuty způsoby pro indukci protektivní imunity u pacienta, ve kterých je pacientovi podáno účinné množství jednoho nebo více z výše uvedených polypeptidů.
V ještě jiném aspektu předkládaného vynálezu jsou poskytnuty způsoby a diagnostické kity pro detekci tuberkulosy u pacienta. Způsoby obsahují kontaktování kožních buněk pacienta s jedním nebo více z uvedených polypeptidů a detekci imunitní odpovědi kůže pacienta. Diagnostické kity obsahují jeden nebo více z výše uvedených 7 polypeptidů v kombinaci s přístrojem dostatečným pro kontaktování polypeptidu s buňkami kůže pacienta.
Tyto a další aspekty předkládaného vynálezu budou jasné z následujícího podrobného popisu a připojených obrázků. Všechny zde citované odkazy jsou zde uvedeny jako odkaz ve své úplnosti.
-7CZ ÓUObHX B6
Přehled obrázků na výkresech
Obrázky 1A a IB ilustrují stimulaci proliferace a produkce IFN-τ v T-buňkách odvozených od prvního a druhého M. tuberculosis-imunního dárce, v příslušném poradí, za použití 14 kDa,
20 kDa a 26 kDa antigenů, kde tato stimulace je popsána v příkladu 1.
Obrázek 2 ilustruje stimulací proliferace a produkce IFN-τ v T-buňkách odvozených od M. tuberculosis-imunního jedince za použití dvou representativních polypepeptidů TbRa3 a TbRa9.
io
SEQ ID NO: 1 je DNA sekvence TbRal.
SEQ ID NO: 2 je DNA sekvence TbRalO.
SEQ ID NO: 3 je DNA sekvence TbRal 1.
SEQ ID NO: 4 je DNA sekvence TbRal 2.
SEQ ID NO: 5 je DNA sekvence TbRal3.
SEQ ID NO: 6 je DNA sekvence TbRal 6.
SEQ ID NO: 7 je DNA sekvence TbRal 7.
SEQ ID NO: 8 je DNA sekvence TbRal8.
SEQ ID NO: Oje DNA sekvence TbRal9.
SEQ ID NO: 10 je DNA sekvence TbRa24.
SEQ ID NO: 11 je DNA sekvence TbRa26.
SEQ ID NO: 12 je DNA sekvence TbRa28,
SEQ ID NO: 13 je DNA sekvence TbRa29.
SEQ ID NO: 14 je DNA sekvence TbRa2A.
SEQ ID NO: 15 je DNA sekvence TbRa3.
SEQ ID NO: 16 je DNA sekvence TbRa32.
SEQ ID NO: 17 je DNA sekvence TbRa35.
SEQ ID NO: 18 je DNA sekvence TbRa36.
SEQ ID NO: 19 je DNA sekvence TbRa4.
SEQ ID NO: 20 je DNA sekvence TbRa9.
SEQ ID NO: 21 je DNA sekvence TbRaB.
SEQ ID NO: 22 je DNA sekvence TbRaC.
SEQ ID NO: 23 je DNA sekvence TbRaD.
SEQ ID NO: 24 je DNA sekvence YYWCPG.
SEQ ID NO: 25 je DNA sekvence AAMK.
SEQ ID NO: 26 je DNA sekvence TbL-23.
SEQ ID NO: 27 je DNA sekvence TbL-24.
SEQ ID NO: 28 je DNA sekvence TbL- 25.
SEQ ID NO: 29 je DNA sekvence TbL-28.
SEQ ID NO: 30 je DNA sekvence TbL-29.
SEQ ID NO: 31 je DNA sekvence TbH-5.
SEQ ID NO: 32 je DNA sekvence TbH-8.
SEQ ID NO: 33 je DNA sekvence TbH-9.
SEQ ID NO: 34 je DNA sekvence TbM-1.
-8SEQ ID NO: 35 je DNA sekvence TbM-3.
SEQ ID NO: 36 je DNA sekvence TbM-6.
SEQ ID NO: 37 je DNA sekvence TbM-7.
SEQ ID NO: 38 je DNA sekvence TbM-9.
SEQ ID NO: 39 je DNA sekvence TbM-12.
SEQ ID NO: 40 je DNA sekvence TbM-13.
SEQ ID NO: 41 je DNA sekvence TbM-14.
SEQ ID NO: 42 je DNA sekvence TbM-15.
SEQ ID NO: 43 je DNA sekvence TbH-4.
io SEQ ID NO: 44 je DNA sekvence TbH-4-fwd.
SEQ ID NO: 45 je DNA sekvence TbH-12.
SEQ ID NO: 46 je DNA sekvence Tb38-1.
SEQ ID NO: 47 je DNA sekvence Tb38-4.
SEQ ID NO: 48 je DNA sekvence TbL-17.
SEQ ID NO: 49 je DNA sekvence TbL-20.
SEQ ID NO: 50 je DNA sekvence TbL-21.
SEQ ID NO: 51 je DNA sekvence TbH-ló,
SEQ ID NO: 52 je DNA sekvence DPEP.
SEQ ID NO: 53 je odvozená aminokyselinová sekvence DPEP.
SEQ ID NO: 54 je proteinová sekvence DPV N-koncového antigenu. SEQ ID NO: 55 je proteinová sekvence AVGS N-koncového antigenu. SEQ ID NO: 56 je proteinová sekvence AAMK N-koncového antigenu. SEQ ID NO: 57 je proteinová sekvence YYWC N-koncového antigenu. SEQ ID NO: 58 je proteinová sekvence DIGS N-koncového antigenu.
SEQ ID NO: 59 je proteinová sekvence AEES N-koncového antigenu. SEQ ID NO: 60 je proteinová sekvence DPEP N-koncového antigenu. SEQ ID NO: 61 je proteinová sekvence APKT N-koncového antigenu. SEQ ID NO: 62 je proteinová sekvence DPAS N-koncového antigenu. SEQ ID NO: 63 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRal.
SEQ ID NO: 64 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa 10.
SEQ ID NO: 65 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRal l.
SEQ ID NO: 66 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRal2.
SEQ ID NO: 67 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRal3.
SEQ ID NO: 68 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRal 6.
SEQ ID NO: 69 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa 17.
SEQ ID NO: 70 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRal8.
SEQ ID NO: 71 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRal 9.
SEQ ÍD NO: 72 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa24.
SEQ ID NO: 73 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa26.
SEQ ID NO: 74 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa28.
SEQ ID NO: 75 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa29.
SEQ ID NO: 76 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa2A.
-9CZ 300688 B6
SEQ ID NO: 77 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa3.
SEQ ID NO: 78 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa32. SEQ ID NO: 79 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa35. SEQ ID NO: 80 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa36. SEQ ID NO: 81 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa4.
SEQ ID NO: 82 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRa9.
SEQ ID NO: 83 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRaB. SEQ ID NO: 84 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRaC. SEQ ID NO: 85 je odvozená aminokyselinová sekvence TbRaD. SEQ ID NO: 86 je odvozená aminokyselinová sekvence YYWCPG. SEQ ID NO: 87 je odvozená aminokyselinová sekvence TbAAMK. SEQ ID NO: 88 je odvozená aminokyselinová sekvence Tb38-1. SEQ ID NO: 89 je odvozená aminokyselinová sekvence TbFM. SEQ ID NO: 90 je odvozená aminokyselinová sekvence TbH-8. SEQ ID NO: 9] je odvozená aminokyselinová sekvence TbH-9.
SEQ ID NO: 92 je odvozená aminokyselinová sekvence TbH-12. SEQ ID NO: 93 je aminokyselinová sekvence Tb38— 1 peptid 1.
SEQ ID NO: 94 je aminokyselinová sekvence Tb38-1 peptid 2.
SEQ ID NO: 95 je aminokyselinová sekvence Tb38— 1 peptid 3.
SEQ ID NO: 96 je aminokyselinová sekvence Tb38-1 peptid 4.
SEQ ID NO: 97 je aminokyselinová sekvence Tb38-1 peptid 5.
SEQ ID NO: 98 je aminokyselinová sekvence Tb38-1 peptid 6.
SEQ ID NO: 99 je DNA sekvence DPAS.
SEQ ID NO: 100 je odvozená aminokyselinová sekvence DPAS. SEQ ID NO: 101 je DNA sekvence DPV.
SEQ ID NO: 102 je odvozená aminokyselinová sekvence DPV.
SEQ ID NO: 103 je DNA sekvence ESAT^Ó.
SEQ ID NO: 104 je odvozená aminokyselinová sekvence ESAT-ó. SEQ ID NO: 105 je DNA sekvence TbH-8-2.
SEQ ID NO: 106 je DNA sekvence TbH-9FL.
SEQ ID NO: 107 je odvozená aminokyselinová sekvence TbH-9FL. SEQ ID NO: 108 je DNA sekvence TbH-9-1.
SEQ ID NO: 109 je odvozená aminokyselinová sekvence TbH-9-1. SEQ ID NO: 110 je DNA sekvence TbH-9-4.
SEQ ID NO: 111 je odvozená aminokyselinová sekvence TbH-9-4. SEQ ID NO: 112 je DNA sekvence Tb38-1F2 ΓΝ.
SEQ ID NO: 113 je DNA sekvence Tb38-2F2 RP.
SEQ ID NO; 114 je odvozená aminokyselinová sekvence Tb37-FL. SEQ ID NO: 115 je odvozená aminokyselinová sekvence Tb38-IN. SEQ ID NO: 116 je DNA sekvence Tb38-1F3.
SEQ ID NO: 117 je odvozená aminokyselinová sekvence Tb38-1 F3. SEQ ID NO: 118 je DNA sekvence Tb38-1F5.
-10SEQ ID NO: 119 je DNA sekvence Tb38-1F6.
SEQ ID NO: 120 je dedukovaná N-koncová aminokyselinová sekvence DPV. SEQ ID NO: 121 je dedukovaná N-koncová aminokyselinová sekvence AVGS. SEQ ID NO: 122 je dedukovaná N-koncová aminokyselinová sekvence AAMK. SEQ ID NO: 123 je dedukovaná N-koncová aminokyselinová sekvence YYWC. SEQ ID NO: 124 je dedukovaná N-koncová aminokyselinová sekvence DIGS,
SEQ ID NO: 125 je dedukovaná N-koncová aminokyselinová sekvence AEES.
SEQ ID NO: 126 je dedukovaná N-koncová aminokyselinová sekvence DPEP.
SEQ ID NO: 127 je dedukovaná N-koncová aminokyselinová sekvence APKT.
SEQ ID NO: 128 je dedukovaná aminokyselinová sekvence DPAS.
SEQ ID NO: 129 je proteinová sekvence DPPN N-koncového antigenu.
SEQ ID NO: 130- 133 jsou proteinové sekvence čtyř DPPD bromkyanových fragmentů. SEQ ID NO: 134 je N-koncová proteinová sekvence XDS antigenu.
SEQ ID NO: 135 je N-koncová proteinová sekvence AGD antigenu.
SEQ ID NO: 136 je N-koncová proteinová sekvence APE antigenu.
SEQ ID NO: 137 je N-koncová proteinová sekvence XYI antigenu.
Jak bylo uvedeno výše, předkládaný vynález je obecně zaměřen na přípravky a způsoby pro prevenci, léčbu a diagnostiku tuberkuíosy. Přípravky podle předkládaného vynálezu zahrnují poly20 peptidy, které obsahují alespoň jednu imunogenní část antigenu M. tuberculosis, nebo varianty takového antigenu, která se liší pouze v konzervativních substitucích nebo modifikacích. Polypeptidy patřící do rozsahu předkládaného vynálezu zahrnují, ale nejsou omezeny na, imunogenní antigeny M. tuberculosis. „Solubilní protein M. tuberculosis“ je protein pocházející z M. tuberculosis, který je přítomen ve filtrátu kultury M. tuberculosis. Jak je zde použito, termín „polypep25 tid“ zahrnuje aminokyselinové řetězce jakékoliv délky, včetně kompletních proteinů (tj. antigenů), ve kterých jsou aminokyselinové zbytky navázány peptidovými vazbami. Proto, polypeptid obsahující imunogenní část jednoho zvýše uvedených antigenů se může skládat pouze z imunogenní části, nebo může obsahovat další sekvence. Další sekvence mohou být odvozeny od přirozených antigenů M. tuberculosis, nebo mohou být heterologní, a takové sekvence mohou (ale nemusí) být imunogenní.
„Imunogenní“, jak je zde použito, označuje schopnost vyvolat imunitní odpověď (například buněčnou) u pacienta, jako je člověk, a/nebo v biologickém vzorku. Konkrétně, antigeny, které jsou imunogenní (a imunogenní části nebo jiné varianty takových antigenů) jsou schopné stimu35 lovat proliferaci buněk, produkci interleukinu-12 a/nebo produkci interferonu-τ v biologickém vzorku obsahujícím jednu nebo více buněk vybraných ze skupiny skládající se zT-buněk, NK buněk, B-buněk a makrofágů, kde buňky jsou získány od jedince imunního proti M. tuberculosis. Polypeptidy obsahující alespoň imunogenní část jednoho nebo více antigenů M. tuberculosis mohou být, obecně, použity pro detekci tuberkuíosy nebo pro indukci protektivní imunity proti tuberkulose u pacienta.
Přípravky a způsoby podle předkládaného vynálezu také zahrnují varianty výše uvedených polypeptidů. „Varianta“, jak je zde použito, je polypeptid, který se liší od přirozeného antigenu pouze v konzervativních substitucích a/nebo modifikacích, takže je zachována schopnost polypeptidu indukovat imunitní odpověď. Takové varianty mohou být obecně identifikovány modifikací jedné z výše uvedených póly peptidových sekvencí a hodnocením imunogenních vlastností modifikovaného polypeptidu, za použití, například, reprezentativních postupů zde popsaných.
„Konzervativní substituce“ je taková substituce, při které je jedna aminokyselina substituována za jinou aminokyselinu, která má podobné vlastnosti, takže odborník v oboru peptidové chemie
-11 CZ 300688 B6 může očekávat, že se sekundární struktura a hydropatický charakter polypeptidú významně nezmění. Obecně, následující skupiny aminokyselin představují konzervativní změny; (1) ala, pro, gly, glu, asp, gin, asn, ser, thr; (2) cys, ser, tyr, thr; (3) val, ile, leu, met, ala, phe; (4) lys, arg, his; a (5) phe, tyr, trp, his.
Varianty mohou být také (nebo alternativně) modifikovány, například, deleci nebo adicí aminokyselin, které mají minimální vliv na imunogenní vlastnosti, sekundární strukturu a hydropatický charakter polypeptidú. Například, polypeptíd může být konjugován se signální (nebo leaderovou) sekvencí v oblasti N-konce proteinu, kde tato sekvence bude ko~translačně nebo post-translačně io řídit přenos proteinu. Polypeptíd může být také konjugován na spojovací sekvenci nebo na jinou sekvenci pro usnadnění syntesy, přečištění nebo identifikace polypeptidú (například poly-His), nebo pro zvýšení vazby polypeptidú na pevný nosič. Například, polypeptíd může být konjugován na Fc region imunoglobulinu.
V příbuzném aspektu jsou popsány kombinační polypeptidy. „Kombinační polypeptíd“ je polypeptid obsahující alespoň jednu zvýše uvedených imunogenních částí a jednu nebo více dalších imunogenních sekvencí M. tuberculosis, které jsou na sebe navázány peptidovou vazbou za vzniku jednoho aminokyselinového řetězce. Sekvence mohou být navázány přímo (tj. bez vmezerených aminokyselin), nebo mohou být navázány prostřednictvím spojovací sekvence (například
Gly-Cys-Gly), která nesnižuje významně imunogenní charakter složek polypeptidú.
Obecně, antigeny M. tuberculosis a DNA sekvence kódující takové antigeny, mohou být připraveny za použití jakéhokoliv z mnoha postupů. Například, solubilní antigeny mohou být izolovány z filtrátu kultury M. tuberculosis za použití postupů, které jsou odborníkům v oboru známé, včet25 ně aniontové výměnné chromatografie a chromatografie na reversní fázi. Přečištěné antigeny jsou potom hodnoceny na svou schopnost vyvolávat vhodnou imunitní odpověď (například buněčnou) za použití, například, reprezentativních metod zde popsaných. Imunogenní antigeny mohou být částečně sekvencovány za použití technik jako je klasická Edmanova chemie (Viz Edman a Berg, Eur, J. Biochem., 80: 116-132, 1967.
Imunogenní antigeny mohou také být produkovány rekombinantně za použití DNA sekvence, která kóduje antígen, která je insertována do expresního vektoru a která je exprivována ve vhodného hostiteli. DNA molekuly kódující solubilní antigeny mohou být izolovány vyšetřováním vhodných M. tuberculosis expresních knihoven s antisérem (například králičím) namířeným specificky proti solubilním antigenů M. tuberculosis. DNA sekvence kódující antigeny, které mohou nebo nemusí být solubilní, mohou být identifikovány vyšetřováním vhodných M. tuberculosis genomových nebo cDNA expresních knihoven sérem získaným od pacientů infikovaných M. tuberculosis. Takové vyšetření může být provedeno za použití technik dobře známých v oboru, jako jsou techniky popsané v Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual,
Cold Spring Harbor Laboratories, Cold Sprin Harbor, NY, 1989.
DNA sekvence kódující solubilní antigeny mohou být také získány vyšetřováním vhodných M. tuberculosis cDNA nebo genomových DNA knihoven na DNA sekvence, které hybridizují s degenerovanými oligonukleotidy odvozenými z částečných aminokyselinových sekvencí izolo45 váných solubilních antigenů. Degenerované oligonukleotidové sekvence pro použití v takovém vyšetřování mohou být navrženy a syntetizovány, a vyšetřování může být provedeno, například, jak je popsáno v Sambrook et al., Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Cold Sprin Harbor Laboratories, Cold Sprin Harbor, NY, 1989 (a odkazem tam uvedených). Také může být použita polymerasová řetězová reakce (PCR), za použití výše uvedených oligonukleotidů v metodě dobře v oboru známé, pro izolaci nukleokyselinové sondy z cDNA nebo genomové knihovny. Vyšetření knihovny může být potom provedeno za použití izolované sondy.
Alternativně, genomové nebo cDNA knihovny odvozené od M. tuberculosis mohou být vyšetřovány přímo za použití mononukleárních buněk periferní krve (PBMC) nebo T buněčných linií nebo klonů odvozených od jedinců imunních vůči M. tuberculosis. Obecně, PBMC a/nebo
- 12vvvuuu υυ
T buňky pro použití v takových vyšetřeních mohou být připraveny způsobem, který je popsán dále. Přímé vyšetřování knihovny může být obecně provedeno testováním souborů exprivovaných rekombinantních proteinů na jejich schopnost indukovat proliferaci a/nebo produkci interferonu-τ v T-buňkách odvozených od jedince imunního vůči M. tuberculosis. Alternativně, mohou být nejprve vybrány potenciální antigeny pro T-buňky na základě proti látkové reaktivity, jak je popsáno výše.
Bez ohledu na způsob přípravy mají antigeny (nebo jejich imunogenní část) podle předkládaného vynálezu (které mohou, ale nemusí být solubilní) schopnost indukovat imunitní odpověď. Přesně10 ji, antigeny mají schopnost indukovat proliferaci a/nebo produkci cytokinů (tj. interferonu-τ a/nebo interleukinu-12) v T-buňkách, NK buňkách, B-buňkách a/nebo makrofágách odvozených od jedinců imunních vůči M. tuberculosis. Výběr typu buněk pro hodnocení imunitní odpovědi na antigen bude, samozřejmě, záviset na požadované odpovědi. Například, produkce interleukinu-12 je nejlépe hodnocena za použití přípravků obsahujících B-bunky a/nebo makrofágy.
Jedinec imunní vůči M. tuberculosis je takový jedinec, který je považován za resistentního na tuberkulosu díky tomu, že má účinnou odpověď T-buněk na M. tuberculosis (tj. je v podstatě bez příznaků onemocnění). Takoví jedinci mohou být identifikováni na základě silně pozitivního (tj. índurace o průměru větším než 10 mm) intradermálního kožního testu v odpovědí na tuberkulosní proteiny (PPD) a podle absence jakýchkoliv známek nebo příznaků tuberkulosy. T-buňky,
NK buňky, B-buňky a makrofágy mohou být získány od jedinců imunních vůči M. tuberculosis za použití metod dobře známých v oboru. Například, může být použita příprava PBMC (tj. mononukleárních buněk periferní krve) bez další separace jednotlivých složek. PBMC mohou být připraveny, například, za použití densitní centrifugace v Ficoll™ (Winthrop Laboratories, NY). T-buňky použité v testech zde popsaných mohou být také přečištěny přímo z PBMC. Altema25 tivně, mohou být použity obohacené linie buněk reaktivních s mykobakteriálními proteiny, nebo klony T-buněk reaktivní sjednotlivými mykobakteriálními proteiny. Takové klony T buněk mohou být získány, například, kultivací PBMC od jedince imunního vůči M. tuberculosis s mykobakteriálními proteiny po dobu 2 až 4 týdnů. Tento postup umožní expansi pouze T.buněk specifických pro mykobakteriální proteiny, za vzniku linie složené pouze z takových buněk. Tyto buňky mohou být potom klonovány a testovány s jednotlivými proteiny, za použití metod odborníkům známých, pro přesnější definici individuální specificity T-buněk. Obecně, antigeny, které jsou pozitivní v testech na proliferaci a/nebo produkci cytokinů (tj. produkci interferonu-τ a/nebo interleukinu-12) provedených za použití T-buněk, NK-buněk, B-buněk a/nebo makrofágů získaných od jedince imunního vůči M. tuberculosis jsou považovány za imunogenní. Takové testy mohou být provedeny, například, za použití reprezentativních postupů popsaných dále. Imunogenní části takových antigenů mohou být identifikovány za použití stejných testů a mohou být prezentovány spolu s polypeptidy podle předkládaného vynálezu.
Schopnost polypeptidu (například imunogenního antigenu, nebo jeho části nebo varianty) indu40 kovat proliferaci buněk je hodnocena kontaktováním buněk (například T-buněk a/nebo NKbuněk) s polypeptidem a měřením proliferace buněk. Obecně, množství polypeptidu, které je dostatečné pro hodnocení asi 105 buněk, je v rozmezí od 10 ng/ml do asi 100 pg/ml a výhodně je 10 pg/ml. Inkubace polypeptidu s buňkami je typicky provedena při 37 °C po dobu šesti dnů. Po inkubaci s polypeptidem jsou buňky testovány na proliferační odpověď, která může být hodnocena za použití metod dobře v oboru známých, jako je expozice buněk pulsu radioaktivně značeného thymidinu a měření inkorporace značeného thymidinu do buněčné DNA. Obecně, polypeptid, který způsobí alespoň trojnásobné zvýšení proliferace proti základní hodnotě (tj. proliferace pozorované pro buňky kultivované bez polypeptidu) je považován za schopný vyvolání proliferace.
Schopnost polypeptidu stimulovat produkci interferonu-τ a/nebo interleukinu-12 může být hodnocena kontaktováním buněk s polypeptidem a měřením hladiny interferonu-τ nebo interleukinu-12 produkovaného buňkami. Obecně, množství polypeptidu, které je dostatečné pro hodnocení asi 105 buněk, je v rozmezí od 10 ng/ml do asi 100 gg/ml a výhodně je 10 pg/ml. Polypeptid
- 13CL JUU098 Βϋ může, ale nemusí, být imobilizován na pevném nosiči, jako jsou korálky nebo biodegradovatelné mikrosféry, například jak jsou popsány v US patentech 4897268 a 5075109. Inkubace polypeptidu je typicky provedena pri 37 °C po dobu Šesti dnů. Po inkubaci s polypeptidem jsou buňky testovány na produkci interferonu-τ a/nebo interleukinu-12 (nebo jedné nebo více jeho podjed5 notek), což může být provedeno za použití metod dobře v oboru známých, jako je enzymově vázaný imunosorbentní test (ELISA) nebo, v případě P70 podjednotky IL-12, biotest, například měřicí proliferaci T-buněk. Obecně, polypeptid, který způsobí produkci alespoň 50 pg interferonu-τ na ml supernatantu kultury (obsahující 104-105 buněk na ml) je považován za schopný stimulace produkce interferonu-τ. Polypeptid, který stimuluje produkci alespoň io 10 pg/ml P70 podjednotky IL—12 a/nebo alespoň 100 pg/ml P40 podjednotky IL-12, na 105 makrofágů nebo B-buněk (nebo na 3 χ 105 PBMC) je považován za schopný stimulace produkce IL-12.
Obecně, imunogenní antigeny jsou takové antigeny, které stimulují proliferaci a/nebo produkci eytokinň (tj, interferonu-τ a/nebo interleukinu-12) v T-buňkách, NK-buňkách, B-buňkách a/nebo makrofágách získaných od alespoň 25% jedinců imunních vůči M. tuberculosis. Mezi těmito imunogenními antigeny mohou být odlišeny polypeptidy mající výhodnější terapeutické vlastnosti na základě rozsahu odpovědi ve výše uvedených testech a na základě procenta jedinců, u kterých je odpověď pozorována. Kromě toho, antigeny, které mají nej výhodnější terapeutické vlastností, nebudou stimulovat proliferaci a/nebo produkci cytokinů in vitro u buněk získaných od více než 25% jedinců, kteří nejsou imunní vůči M. tuberculosis, což eliminuje odpovědi, které nejsou specifické díky buňkách reaktivním vůči M. tuberculosis. Ty antigeny, které indukují odpověď ve vysokém procentu T-buněk, NK-buněk, B-buněk a/nebo makrofágů od jedinců imunních vůči M. tuberculosis (s nízkou odpovědí u přípravků buněk od jiných jedinců) mají nej výhodnější terapeutické vlastnosti.
Antigeny s nejvýhodnějšími terapeutickými vlastnostmi mohou být také identifikovány na základě jejich schopnosti zmírňovat závažnost infekce M. tuberculosis u pokusných zvířat, pokud jsou podány jako vakcína. Vhodné přípravky pro vakcinaci pro použití u pokusných zvířat jsou podrobně popsány dále. Účinnost může být určena na základě schopnosti antigenu způsobit alespoň 50% redukci počtu bakterií a/nebo alespoň 40% snížení mortality po pokusné infekci. Vhodná pokusná zvířata zahrnují myši, morčata a primáty.
Antigeny mající nej výhodnější terapeutické vlastnosti mohou být obecně identifikovány na zákla35 dě schopnosti vyvolat odpověď v intradermálním testu provedeném u jedince s aktivní tuberkulosou, ale nikoliv v testu provedeném na jedinci, který není infikován M. tuberculosis. Obecně mohou být kožní testy provedeny způsobem popsaným dále, kdy za pozitivní odpovědné považována alespoň 5 mm indurace.
Imunogenní části antigenu podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny a identifikovány za použití dobře známých technik, jako jsou techniky shrnuté v Paul, Fundamental Immunology,
3. vydání, Raven Press, 1993, str. 243-247, a v odkazech tam citovaných. Takové techniky zahrnují vyšetřování polypeptidových částí přirozeného antigenu na jejich imunogenní vlastnosti. Reprezentativní testy proliferace a produkce cytokinů mohou být použity v těchto vyšetřováních.
Imunogenní část polypeptidů je část, která v takových representativních testech vyvolává imunologickou odpověď (například proliferaci, produkci interferonu-τ a/nebo interleukinu-12), která je významně podobná odpovědi, která je vyvolána kompletním antigenem. Jinými slovy, imunogenní část antigenu může vyvolávat alespoň 20%, a lépe 100%, proliferaci indukovanou kompletním antigenem v testu proliferace zde popsaném. Imunogenní část antigenu může také, nebo altema50 tivně, vyvolávat alespoň 20%, a lépe 100%, produkce interferonu-τ a/nebo interleukinu-12 indukovanou kompletním antigenem v testu proliferace zde popsaném.
Části a jiné varianty antigenu M. tuberculosis mohou být generovány prostřednictvím syntesy nebo rekombinantními prostředky. Syntetické polypeptidy mající méně než přibližně 100 amino-14kyselin, a obyčejně méně než 50 aminokyselin, mohou být generovány za použití technik v oboru dobře známých. Například, takové polypeptidy mohou být syntetizovány za použití jakékoliv z komerčně dostupných technik syntesy na pevné fázi, jako je Merrifieldova metoda syntesy na pevné fázi, ve které jsou aminokyseliny sekvenčně přidávány k rostoucímu aminokyselinovému řetězci (viz Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 85: 2 149 - 2 146, 1963). Vybavení pro automatizovanou syntesu polypeptidů je komerčně dostupné od dodavatelů, jako například od Applied Biosystems, lne., Foster City, CA, a může být použito podle návodu výrobce. Varianty přirozeného antigenu mohou být obecně připraveny za použití standardních technik mutagenese, jako je oligonukleotidy řízená místně specifická mutagenese. Sekce DNA sekvence mohou být také io odstraněny za použití standardních technik pro přípravu zkrácených polypeptidů.
Rekombinantní polypeptidy obsahující částí a/nebo varianty přirozeného antigenu mohou být snadno připraveny z DNA sekvence kódující polypeptid za použití mnoha technik dobře v oboru známých. Například, supematant z vhodných systémů vektor/hostitel, které secemují rekombii5 nantní protein do kultivačního média, může být nejprve koncentrován za použití komerčně dostupného filtru. Po koncentraci může být koncentrát aplikován na vhodnou matrici pro přečištění jako je afinitní matrice nebo iontová výměnná pryskyřice. Nakonec, pro další přečištění rekombinantniho proteinu může být použit jeden nebo více kroků HPLC s reversní fází.
Jakýkoliv z mnoha expresních vektorů známých v oboru může být použit pro expresi rekombinantních polypeptidů podle předkládaného vynálezu. Exprese může být provedena v jakékoliv vhodné hostitelské buňce, která byla transformována nebo transfektována expresním vektorem obsahujícím DNA molekulu, která kóduje rekombinantní polypeptid. Vhodné hostitelské buňky zahrnují prokaryoty, kvasinky a vyšší eukaryotické buňky. Výhodně jsou jako hostitelské buňky použity E. coii, kvasinky nebo savčí buněčné linie jako je COS nebo CHO. DNA sekvence exprivovaná tímto způsobem může kódovat přirozeně se vyskytující antigeny, části přirozeně se vyskytujících antigenů nebo jejich jiné varianty.
Obecně, bez ohledu na způsob přípravy, jsou polypeptidy podle předkládaného vynálezu pripra30 vény ve významně přečištěné formě. Výhodně jsou polypeptidy alespoň 80% čistoty, lépe alespoň 90% čistoty a nejlépe alespoň 99% Čistoty, vjistých výhodných provedeních, podrobněji popsaných dále, jsou významně přečištěné polypeptidy inkorporovány do farmaceutických přípravků nebo vakeín pro použití v jedné nebo více způsobech podle předkládaného vynálezu.
V určitých specifických provedeních popisuje vynález polypeptidy obsahující alespoň imunogenní část solubilního antigenu M. tuberculosis, který má následující N-koncové sekvence, nebo jeho varianty, které se liší pouze konzervativní substitucí a/nebo modifikací:
-15CL B6 (a) Asp-Pro-Val-Asp-Ala-Val-He-Asn-Thr-Thr-Cys-Asn-Tyr-GlyGln-VabVal-Ala-Ala-Leu; (SEQ ID No. 120) (b) Ala-Val-Glu-Ser-Gly-Met-Leu-AIa-Leu-Gly-Thr-Pro-Ala-ProSer, (SEQ ID No. 121) (c) Ala-Ala-Met*Lys-Pro-Arg-Thr-Gly-Asp-Gly-Pro-Leu-Glu-AlaAla-Lys-Glu-Gly-Arg; (SEQ ID No. 122) (d) Tyr-Tyr-Trp-Cys-Pro-GIy-Gln-Pro-Phe-Asp-Pro-Ala-Trp-GlyPro; (SEQ ID No. 123) (e) Asp-He-Gly-Ser-Glu-Ser-Thr-Glu-Asp-Gln-Gln-Xaa-AIa-Val;
(SEQ ID No. 124) (f) Ala-Glu-Glu-Ser-ne-Ser-Thr-Xaa-Gtu-Xaa-IIe-Val-Pro; (SEQ ID No. 125) (g) Asp-Pro-Glu-Pro-Ala-Pro-Pro-Vai-Pro-Thr-Ala-AIa-Ala-SerPro-Pro-Ser; (SEQ ID No. 126) (h) Ala-Pro-Lys-Thr-T yr-Xaa-Glu-Glu-Leu-Lys-GÍ y-Thr- Asp-ThrGly; (SEQ ID No, 127) (í) Asp-Pro-AIa-Ser-Ala-Pro-Asp- V al-Pro-Thr-Ala-Ala-Gln-LeuThr-Ser-Leu-Leu-Asn-Ser-Leu^Ala-Asp-Pro-Asn-Val-Ser-Phe·'
Ala-Asn; (SEQ ID No. 128) (j) Xaa*Asp-Ser-Glu-Lys-Ser-AIa-Thr-Ile-Lys-Vaí-Thr-Asp-AlaSer, (SEQ ID No. 134) (k) Ala-Giy-Asp-ThrXaa-Ile-Tyr-Ile-Val-Gly-Asn-Leu-Thr-AlaAsp;(SEQ ID No. 135) oř (1) Ala-Pro-Glu-Ser-Gly-Ala-Gly-Leu-Gly-Gly-Thr-Val-Gln-AlaGly; (SEQ ID No. 136) kde Xaa může být jakákoliv aminokyselina, výhodně cysteinový zbytek. DNA sekvence kódující antigen identifikovaný jako (g), výše, je uvedena v SEQ ID NO: 52 a polypeptid kódovaný SEQ
ID NO: 52 je uveden v SEQ ID NO: 53. DNA sekvence kódující antigen označený (a) je uvedena v SEQ ID NO: 101; její odvozená aminokyselinová sekvence je uvedena v SEQ ID NO: 103. DNA sekvence odpovídající antigenu (d), výše, je uvedena v SEQ ID NO: 24 a DNA sekvence odpovídající antigenu (c)je uvedena v SEQ ID NO: 25 a DNA sekvence odpovídající antigenu (i) je uvedena v SEQ ID NO: 99; její odvozená aminokyselinová sekvence je uvedena v SEQ ID io NO: 100.
- 16t/VVVUU uu
V dalším specifickém provedení popisuje vynález polypeptidy obsahující alespoň imunogenní část antigenu M. tuberculosis, který má následující N-koncové sekvence, nebo jeho varianty, které se liší pouze konzervativní substitucí a/nebo modifikací:
(m) Xaa-Tyr-Ile-Ala-Tyr-Xaa-Thr-Thr-AIa-GIy-Ile-Val^Pro-Gly-LysIle-Asn*Val-His-Leu-Val; (SEQ ID No 137) or (n) Asp-Pro-Pro-Asp-Pro-Hís-Gln-Xaa-Asp-MeUThr-Lys-GIy-Tyr5 Tyr-Pro-Gly-Gly-Arg-Arg’Xaa*Phe; (SEQ ID No. 129) kde Xaa může být jakákoliv aminokyselina, výhodně cysteinový zbytek.
V jiných specifických provedeních popisuje vynález polypeptidy obsahující alespoň jednu imunogenní část solubilního antigenu M. tuberculosis (nebo variantu takového antigenu), která io obsahuje jednu nebo více aminokyselinových sekvencí kódovaných (a) DNA sekvencemi SEQ ID NO: l, 2, 4-10, 13, 25 a 52; (b) sekvencemi komplementárními k takovým DNA sekvencím, nebo (c) DNA sekvencemi významně homologními k sekvencím v (a) a (b).
V ještě jiných specifických provedeních popisuje vynález polypeptidy obsahující alespoň jednu imunogenní část antigenu M. tuberculosis (nebo variantu takového antigenu), který nemusí být solubilní, která obsahuje jednu nebo více aminokyselinových sekvencí kódovaných (a) DNA sekvencemi SEQ ID NO: 26 a 51; (b) sekvencemi komplementárními k takovým DNA sekvencím, nebo (c) DNA sekvencemi významně homologními k sekvencím v (a) a (b).
Ve specifických provedeních uvedených výše zahrnuje antigen M. tuberculosis varianty, které jsou kódovány DNA sekvencemi, které jsou významně homologní k jedné nebo více DNA sekvencemi zde uvedenými. „Významná homologie“, jak je zde použito, označuje DNA sekvence, které jsou schopné hybridizace za podmínek střední přísností. Vhodné podmínky střední přísnosti zahrnují předpromytí v roztoku 5xSSC, 0,5% SDS, 1,0 mM EDTA (pH 8,0); hybridizaci při 50 až 65 °C, 5X SSC, přes noc, nebo, v případě mezidruhové homologie při 45 °C, 0,5X SSC; potom dvakrát promytí při 65 °C po dobu 20 minut každým z 2X, 0,5X a 0,2X SSC obsahujícím 0,1% SDS). Takové hybridizující sekvence spadají také do rozsahu předkládaného vynálezu, stejně jako nukleotidové sekvence, které vzhledem k degeneraci genetického kódu, kódují imunogenní polypeptid, který je kódován hybridizující DNA sekvencí.
V souvisejícím aspektu poskytuje předkládaný vynález fúsní proteiny obsahující první a druhý polypeptid podle předkládaného vynálezu, nebo, alternativně, polypeptid podle předkládaného vynálezu a známý antigen M. tuberculosis, jako je 38 kDa antigen popsaný výše nebo ESAT-6 (SEQ ID NO: 103 a SEQ ID NO: 104), spolu s variantami takových fúsních proteinů. Fúsní proteiny podle předkládaného vynálezu mohou obsahovat spojovací peptid mezi prvním a druhým polypeptidem.
DNA sekvence kódující fúsní protein podle předkládaného vynálezu je konstruována za použití známých rekombinantních DNA technik pro seřazení separátních DNA sekvencí kódujících první a druhý polypeptid do vhodného expresního vektoru. 3'konec DNA sekvence kódující první polypeptid je ligován, snebo bez sekvence spojovacího peptidu, na 5'konec DNA sekvence kódující druhý polypeptid, takže čtecí rámečky sekvencí jsou ve fázi umožňující translaci mRNA dvou DNA sekvencí do fúsního proteinu, který sí uchovává biologickou aktivitu jak prvního, tak druhého polypeptidu.
Peptidová spojovací sekvence může být použita pro separací prvního a druhého polypeptidu dostatečnou vzdáleností pro to, aby bylo zajištěno pro každý polypeptid správné složení jeho sekundární a terciární struktury. Taková peptidová spojovací sekvence je vložena do fúsního
-17CZ JUUbSX B6 proteinu za použití technik v oboru dobře známých. Vhodné peptidové spojovací sekvence mohou být vybrány na základě následujících faktorů: (1) jejich schopnosti přijímat flexibilní roztaženou konťormaci; (2) jejich neschopnosti přijímat sekundární strukturu, která by mohla interagovat s funkčními epitopy na prvním nebo na druhém polypeptidu; a (3) chybění hydrofobních nebo nabitých zbytků, které by mohly interagovat s funkčními epitopy polypeptidů. Výhodné peptidové spojovací sekvence obsahují Gly, Asn, a Ser zbytky. Jiné příbuzné neutrální aminokyseliny, jako je Thr a Ala, mohou být také použity ve spojovací sekvenci. Aminokyselinové sekvence, které mohou být výhodně použity jako spojovací sekvence, zahrnují ty, které jsou popsány v Marata et al., Gene 40: 39-46, 1985; Murphy et al., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 83: ío 8 258-8 262, 1986; US patent 4935233 a US patent 4751180. Spojovací sekvence může mít délku od 1 do 20 aminokyselin. Peptidové sekvence nejsou nutné, pokud první a druhé polypeptidy mají neesenciální N-koncové aminokyselinové regiony, které mohou být použity pro separaci funkčních domén a zabránění sterické interference.
Ligované DNA sekvence jsou operativně navázané na vhodné transkripční a translační regulační regulační elementy. Regulační elementy odpovídající za expresi DNA jsou umístěny pouze na 5' konci DNA sekvence kódující první polypeptid. Podobně, stop kodony nutné pro ukončení translace a transkripční terminační signály jsou umístěny pouze na 3' konci DNA sekvence kódující druhý polypeptid.
Vjiném aspektu poskytuje předkládaný vynález způsob pro použití jednoho nebo více zvýše uvedených polypeptidů nebo fúsních proteinů (nebo DNA molekul kódujících takové polypeptidy) pro indukci protektivní imunity proti tuberkulose u pacienta. Jak je zde použito, „pacient“ označuje jakékoliv teplokrevného živočicha, výhodně člověka. Pacient může být postižen onemocněním, nebo může být bez detekovatelného onemocnění a/nebo infekce. Jinými slovy, protektivní imunita může být indukována pro prevenci nebo pro léčbu tuberkulosy.
V tomto aspektu je polypeptid, fúsní protein nebo molekula DNA obyčejně přítomna ve farmaceutickém přípravku a/nebo vakcíně. Farmaceutické přípravky mohou obsahovat jeden nebo více polypeptidů, z nichž každý může obsahovat jednu nebo více z výše uvedených sekvencí (nebo jejich variant) a fyziologicky přijatelný nosič. Vakcíny mohou obsahovat jeden nebo více z výše uvedených polypeptidů a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi, jako je adjuvans nebo liposom (do kterého je polypeptid inkorporován). Takové farmaceutické přípravky a vakcíny mohou také obsahovat další antigeny M. tuberculosis, buď v kombinovaném polypeptidu nebo vjiném separátním polypeptidu.
Alternativně může vakcína obsahovat DNA kódující jeden nebo více polypeptidů popsaných výše, jako jsou polypeptidy generované in sítu. v takových vakcínách může být DNA přítomna v jakémkoliv z mnoha systémů pro podání v oboru známých, včetně expresních systémů nukleo40 vých kyselin, bakteriálních a virových expresních systémů. Vhodné expresní systémy nukleových kyselin obsahují nezbytné DNA sekvence pro expresi u pacienta (jako je vhodný promotor a terminační signál). Bakteriální systémy pro podání obsahují podání bakterie (jako je Bacillus Calmette-Guerrin), která exprivuje imunogenní část polypeptidu na svém povrchu. Ve výhodném provedení může být DNA zavedena do organismu za použití virového expresního systému (napří45 klad viru vakcín ie nebo pox viru, retroviru nebo adenoviru), což může obsahovat použití nepatogenních (defektních), replikace-kompetentních virů. Techniky pro vložení DNA do takových expresních systémů jsou odborníkům v oboru dobře známé. DNA může také být „nahá“, jak je to popsáno, například, v Ulmer et al„ Science 259: 1745 - 1749, 1993 a Cohen, Science 259: 1691 - 1692, 1993. Vychytávání nahé DNA může být zvýšeno potažením DNA na biodegradovatelné korálky, které jsou účinně transportovány do buněk.
V souvisejícím aspektu může být DNA vakcína jak je popsána výše podána simultáně nebo sekvenčně s polypeptidem podle předkládaného vynálezu a nebo známým anti genem M. tuberculosis, jako je 38 kDa antigen popsaný výše. Například, podání DNA kódující polypeptid podle
-18předkládaného vynálezu, buď „nahé“, nebo v systému pro podání popsaném výše, může být následováno podáním antigenu pro zvýšení protektivního imunitního účinku vakcíny.
Způsoby a frekvence podání, stejně jako dávkování, se bude velmi lišit mezi jednotlivci a může být paralelní k v současné době používané imunizaci za použití BCG. Obecně, farmaceutické kompozice a vakcíny mohou být podány injekčně (například intrakutánně, intramuskulámě, intravenosně nebo subkutánně), intranasálně (například aspirací) nebo orálně. 1 až 3 dávky mohou být podány v průběhu 1 až 36 týdnů. Výhodně jsou podány 3 dávky, v intervalu 3 až 4 měsíců, a dosycovací imunizace mohou být potom podávány periodicky. Alternativní protokoly mohou io být vhodné pro jednotlivé pacienty. Vhodnou dávkou je množství DNA nebo polypeptidu, které, při podání popsaném výše, vyvolá imunitní odpověď u imunizovaného pacienta, která je dostatečná pro ochranu pacienta před infekcí M. tuberculosis po dobu alespoň 1 až 2 let. Obecně, množství polypeptidu v dávce (nebo produkované in šitu DNA) je v rozsahu od asi 1 pg do asi 100 mg na kg hostitele, typicky od asi 10 pg do asi l mg, a výhodně od asi 100 pg do asi 1 pg.
Vhodná velikost dávky se bude velmi lišit podle velikosti pacienta, ale typicky bude v rozmezí od asi 0,1 do asi 5 ml.
Ačkoliv ve farmaceutickém přípravku podle předkládaného vynálezu může být použit jakýkoliv vhodný nosič v oboru známý, bude se typ nosiče velmi lišit podle způsobu podání. Pro parente20 rální podání, jako je subkutánní injekce, bude nosič výhodně zahrnovat vodu, fyziologický roztok, alkohol, tuk, vosk nebo pufr. Pro orální podání může být použit jakýkoliv z výše uvedených nosičů nebo pevný nosič, jakoje manitol, laktósa, škrob, steran horečnatý, sacharin sodný, talek, celulosa, gluoosa, sacharosa a uhličitan hořečnatý. Biodegradovatelné mikrosféry (například galaktan kyseliny polymléčné) mohou být také použity jako nosiče pro farmaceutické přípravky podle předkládaného vynálezu. Vhodné biodegradovatelné mikrosféry jsou popsány, například, v US patentech 4897268 a 5075109.
Ve vakcínách podle předkládaného vynálezu může být pro nespecifické posílení imunitní odpovědi použito jakékoliv z mnoha adjuvans. Většina adjuvans obsahuje sloučeniny navržené pro ochranu antigenu před rychlým katabolismem, jako je hydroxid hlinitý a minerální olej, a nespecifické stimulátory imunitní odpovědi, jako je lipid A, Bordetella pertussis nebo Mycobacterium tuberculosis. Vhodná adjuvans jsou komerčně dostupná jako, například, Freundovo nekompletní adjuvans a Freundovo kompletní adjuvans (Difco laboratories) a Merck Adjutant 65 (Merck and Company, Inc., Rahway, NJ). Další vhodná adjuvans zahrnují síran hlinitodraselný, biodegrado35 vatelné mikrosféry, monofosforyl lipid A a quil A.
V jiném aspektu vynález poskytuje metody pro použití jednoho nebo více polypeptidů podle předkládaného vynálezu pro diagnostiku tuberkulosy za použití kožního testu. Jak je zde použito, „kožní test“ je test provedený přímo na pacientovi, ve kterém je měřena reakce oddáleného typu přecitlivělosti (DTH) (jakoje otok, zčervenání nebo dermatitis) po intradermální injekci jednoho nebo více polypeptidů podle předkládaného vynálezu. Taková injekce může být provedena za použití jakéhokoliv vhodného prostředku dostatečného pro kontaktování polypeptidu nebo polypeptidů s buňkami dermis pacienta, jako je například tuberkulinová injekční stříkačka nebo 1 ml injekční stříkačka. Výhodně je reakce měřena alespoň 48 hodin po injekci, lépe 48 až 72 hodin.
DTH reakce je imunitní odpověď zprostředkovaná buňkami, která je největší u pacientů, kteří byly dříve vystaveni testovanému antigenu (tj. imunogenní části použitého polypeptidu, nebo jeho varianty). Odpověď může být měřena vizuálně, za použití pravítka. Obecně, odpověď větší než 0,5 cm v průměru, lépe větší než 1,0 cm v průměru, je pozitivní odpověď, ukazující na tuber50 kulosní infekci, která se může nebo nemusí projevovat jako aktivní onemocnění.
Polypeptidy podle předkládaného vynálezu jsou výhodně formulovány, pro použití v kožním testu, jako farmaceutické přípravky obsahující polypeptid a fyziologicky přijatelný nosič, jak je popsáno výše. Takové přípravky typicky obsahují jeden nebo více z výše uvedených polypeptidů v množství od asi 1 do asi 100 pg, výhodně od 10 pg do asi 50 pg v objemu 0,1 ml. Výhodně je
- 19CZ 300688 B6 nosičem použitým v takových farmaceutických přípravcích fyziologický roztok s vhodnými konzervačními činidly, jako je fenol a/nebo Tween 80 ,
Ve výhodném provedení je polypeptid použitý v kožním testu dostatečné velikosti, aby zůstával v místě injekce po dobu trvání reakce. Obecně, dostatečný je polypeptid o délce alespoň 9 aminokyselin. Polypeptid je také výhodně zpracován makrofágy během několika hodin po injekci pro prezentaci Tbu fikám. Takové polypeptidy mohou obsahovat opakující se úseky jedné nebo více z výše uvedených sekvencí a/nebo další imunogenní nebo neimunogenní sekvence.
io Následující příklady jsou uvedeny pro ilustraci, nikoliv jako omezení předkládaného vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1 - Přečištění a charakterizace polypeptidů z filtrátu kultury M. tuberculosis
Tento příklad ilustruje přípravu solubilních polypeptidů M. tuberculosis z filtrátu kultury. Pokud není uvedeno jinak, jsou všechna procenta uvedena jako hmotnost na objem.
M. tuberculosis (buď H37Ra, ATCC č. 25177, nebo H37Rv, ATCC č. 25618) bylo kultivováno ve sterilním GAS médiu při 37 ĎC po dobu čtrnácti dnů. Médium bylo potom vakuově filtrováno (s ponecháním objemu buněk) přes 0.45 μ filtr do sterilní 2,5 I nádoby. Médium bylo potom filtrováno přes 0,2 μ filtr do sterilní 4 I nádoby a k filtrátu kultury byl přidán NaN3 v koncentraci
0,04%. Lahve byly potom umístěny v místnosti s teplotou 4 ÓC.
Filtrát kultury byl koncentrován umístěním filtrátu do 12 I reservoáru, který byl potom autoklavován a vložením filtrátu do Amicron míchací kyvety, která byla vypláchnuta ethanolem a obsahovala 10 000 kDa MWCO membránu. Tlak byl udržován na 60 psi za použití plynného dusíku.
Tento postup redukoval 12 1 objem na přibližně 50 ml.
Filtrát kultury byl dialyzován do 0,1% hydrogenuhličitanu amonného za použití 8000 kDa MWCO membrány z esteru celulosy, se dvěma výměnami roztoku hydrogenuhličitanu amonného. Koncentrace proteinu byla určena komerčně dostupným BCA testem (Pierce, Rocford, IL).
Dialyzovaný filtrát kultury byl potom lyofilizován a polypeptidy byly resuspendovány v destilované vodě. Polypeptidy byly znovu dialyzovány proti 0,01 mM 1,3 bis(tris(hydroxymethyl)~ methy!amino)propanu, pH 7,5 (Bis-Tris propanový pufr), což bylo východiskem pro aniontovou výměnnou chromatografii, Frakcionace byla provedena za použití gelové vylučovací chromato40 grafie na POROS 146 II Q/M aniontové výměnné koloně 4,6 x 100 mm (Perseptive BioSystems, Framingham, MA) uvedené do rovnováhy v 0,01 mM Bis-Tris propanového pufru pH 7,5. Polypeptidy byly eluovány lineárními gradienty 0 až 0,5 M NaCI ve výše uvedeném pufrovacím systému. Eluent z kolony byl sledován při vlnové délce 220 nm.
Soubory polypeptidů eluující z iontové výměnné kolony byly znovu dialyzovány proti destilované vodě a lyofilizovány. Výsledná materiál byl rozpuštěn v 0,1% kyselině trifluoroctové (TFA) pH 1,9 ve vodě a polypeptidy byly přečištěny na Delta-Pak CIS koloně (Waters, Milford, MA) s velikostí pórů 300 Angstromů, velikostí částic 5 mikronů (3,9x150 mm). Polypeptidy byly eluovány z kolony lineárním gradientem 0-60% ředicího pufru (0,1% TFA v acetonítrilu),
Rychlost průtoku byla 0,75 ml/minutu a HPLC eluent byl sledován při 214 nm. Frakce obsahující eluované polypeptidy byly odebrány pro maximalizaci čistoty jednotlivých vzorků. Bylo získáno asi 200 přečištěných polypeptidů.
Přečištěné polypeptidy byly potom vyšetřovány na schopnost indukovat proliferaci T-buněk v PBMC přípravcích. PBMC od dárců s pozitivním PPD kožním testem a ty T-buňky, které
-20vzj juuvjuo uu proliferovaly v odpovědi na PPD a surové solubilní proteiny od MTB byly kultivovány v médiu obsahujícím RPMI 1640 doplněné 10% odebraným lidským sérem a 50 pg/ml gentamicinu. Přečištěné polypeptidy byly přidány ve dvojím provedení v koncentracích 0,5 až 10 pg/ml. Po šesti dnech kultivace v 96-jamkových plotnách s plochým dnem v objemu 200 pí, bylo 50 pl média odebráno z každé jamky pro určení hladin IFN-τ, jak je popsáno výše. Plotny byly potom pulsovány 1 pCi/jamku tritiem značeného thymidinu po dobu dalších 18 hodin, potom byly sklízeny a byty určeno vychytávání tritia za použití plynné scintilační kamery. Frakce, které způsobovaly v obou provedeních proliferaci trojnásobně vyšší, než je pozorována u buněk kultivovaných pouze za přítomnosti média, byly považovány za pozitivní.
IFN-τ byl měřen za použití enzymově vázaného imunosorbentního testu (ELISA). ELISA plotny byly potaženy myší monoklonální protilátkou namířenou proti lidskému IFN-τ (PharMingen, San Diego, CA) v PBS po dobu 4 hodin při pokojové teplotě. Jamky byly potom blokovány PBS obsahujícím 5% (hmotnost/objem) odtučněné sušené mléko po dobu 1 hodiny při pokojové teplo15 tě. Plotny byly potom šestkrát promyty v PBS/0,2/ Tween-20 a vzorky ředěné 1:2 v kultivačním médiu na ELISA plotnách byly inkubovány přes noc při pokojové teplotě. Plotny byly znovu promyty a do každé jamky bylo přidáno polyklonální králičí anti—lidský IFN-τ sérum ředěné 1:3000 v PBS/10% normální kozí sérum. Plotny byly potom inkubovány po dobu 2 hodin při pokojové teplotě, byly promyty a byly přidány anti—králičí IgG s navázanou křenovou peroxidasou (Sigma
Chemicals So., st. Louis, MO) v ředění 1:2000 v PBS/5% odtučněné sušené mléko. Po dvou hodinách inkubace při pokojové teplotě byly plotny promyty a byl přidán TMB substrát. Optická densita byla určena při 450 nm za použití 570 nm jako referenční vlnové délky. Frakce, které měly v obou provedeních OD dvakrát vyšší než je průměrná OD pro buňky kultivované v médiu samotném, plus 3 standardní odchylky, byly považovány za pozitivní.
Pro sekvencování byly polypeptidy jednotlivě sušeny na Biobrene™ (Perkín Elmer/Applied BioSystems Division, Foster City, CA) ošetřených Filtrech ze skelných vláken. Filtry s polypeptidem byly vloženy do Perkin Elmer/Applied BioSystems Division procise 492 proteinového sekvenátoru. Polypeptidy byly sekvencovány z amino konce za použití tradiční Edmanovi chemie. Aminokyselinová sekvence byla určena pro každý polypeptid srovnáním retenční doby PTH aminokyselinového derivátu s vhodnými standardy PTH derivátu.
-21 CZ JUU088 B6
Za použití postupů popsaných výše byly izolovány antigeny mající následující N-koncové sekvence:
(a) Asp-Pro-Val-Asp-AIa-Val-IIe-Asn-Thr-Thr-Xaa-Asn-Tyr-GlyGln-Vai-Val-Ala-Ala-Leu; (SEQ ID No. 54) (b) Ala-Val-Glu-Ser-GIy-Met-Leu-Ala-Leu-Gly-Thr-Pro-Ala-ProSer, (SEQ ID No. 55) (c) Ala-Ala-Met-Lys-Pro-Arg-Thr-Gly-Asp-Gly-Pro-Leu-Glu-AlaAla-Lys-GluOly-Arg; (SEQ ID No. 56) (d) Tyr-Tyr-TipHCys-Pro-Gly-Gln-Pro-Phe-Asp-Pro-Ala-Trp-GlyPro; (SEQ ID No. 57) (e) Asp-Ile-Gly-Ser-GIu-Ser-Thr-Glu-Asp-Gln-Gln-Xaa-Ala-Val;
(SEQ ID No. 58) (f) AIa-GIU'GIu*Ser-Ile-Ser-Thr-Xaa-Glu*Xaa-IIe-Val-Pro; (SEQ ID No. 59) (g) Asp-Pro-GIu-Pro-Ala-Pro-Pro-Val-Pro-Thr-Ala-Ala-Ala-AlaPro-Pro-AIa; (SEQ ID No. 60) and (h) Ala-Pro-Lys-Thr-Tyr-Xaa-Glu-GIu-Leu-Lys-GIy-Thr-Asp-ThrGly; (SEQ ID No. 61) kde Xaa může být jakákoliv aminokyselina.
Další antigen byl získán za použití kroku přečištění na microbore HPCL navíc k postupu popsanému výše. Konkrétně, 20 μΙ frakce obsahující směs antigenů z dříve popsaného kroku chromatografického přečištění bylo přečištěno na Aquapore Cl8 koloně (Perkin Elmer/Applied Biosystems Divísion, Foster City, CA) s póry velikosti 7 mikronů, kolonou velikosti 1 mm x 100 mm, io na perkin Elmer/Applied Biosystems Division Model 172 HPLC. Frakce byly eluovány z kolony za použití lineárního gradientu 1%/minutu acetonitrilu (obsahujícího 0,05% TFA) ve vodě (0,05% TFA) rychlostí toku 80 μΙ/minutu. Eluent byl monitorován při 250 nm. Originální frakce byla separována do 4 hlavních plků plus dalších menších složek a byl získán polypeptid, který měl molekulovou hmotnost 12.054 kDa (podle hmotové spektrometrie) a který měl následující
N-koncovou sekvenci;
(i) Asp-Pro-Ala-Ser-Ala-Pro- Asp- V al-Pro-Thr- Ala-Ala*Gln-GlnThr'Ser-Leu-Leu-Asn-Asn-LeU'Ala-Asp'Pro-Asp-Val-Ser-PheAla-Asp (SEQ ID No. 62).
Bylo prokázáno, že tento polypeptid indukuje proliferaci a produkci IFNt v přípravcích PBMC za použití testů popsaných výše.
Další solubilní antigeny byly izolovány z Filtrátu kultury M. tuberculosis následujícím způsobem. Filtrát kultury M. tuberculosis byl připraven stejným způsobem jako výše. Po dialýze proti BisTris propanovému pufru, při pH 5,5, byla provedena frakcionace za použití aniontové výměnné chromatografie na Poros QE koloně 4,6 x 100 mm (Perseptive Biosystems) uvedené do rovnová-22hy Bis-Tris propanovým pufrem pH 5,5. Polypeptidy byly eluovány lineárním gradientem 0 až 1,5 M NaCl ve výše uvedeném pufrovacím systému při průtoku 10 ml/minutu. Eluens kolony byl monitorován při vlnové délce 214 nm.
Frakce eluující z iontové výměnné kolony byly shromážděny a byly podrobeny ehromatografií na reversní fázi za použití Poros R2 kolony 4,6 x 100 mm (Perseptive Biosystems). Polypeptidy byly eluovány z kolony lineárním gradientem od 0 až 100% acetonitrilu (0,1% TFA) při průtoku 5 ml/minutu. Eluens byl monitorován při 214 nm.
io Frakce obsahující eluované polypeptidy byly lyofilizovány a resuspendovány v 80 μΐ vodného 0,1% TFA a dále byly podrobeny ehromatografií ne reversní fázi na Vydac C4 koloně 4,6 x 150 mm (Western Analytical, Temecula, CA) s lineárním gradientem od 0 až 100% acetonitrilu (0,1% TFA) při průtoku 2 ml/minutu. Eluens byl monitorován při 214 nm.
Frakce s biologickou aktivitou byla separována do jednoho hlavního píku plus dalších menších složek. Western blot tohoto píku na PVDF membráně ukázal tri hlavní proužky o molekulové hmotnosti 14 kDa, 20 kDa a 26 kDa. U těchto polypeptidů byly určeny následující N-koncové sekvence, v příslušném pořadí:
(j) Xaa-Asp-Ser-Glu-Lys-Ser-Ala-Thr-Ile-Lys-Val-Thr-Asp-Ala·
Ser;(SEQ ID No. 134) (k) Ala-Gly-Asp-Thr-Xaa-Ile-Tyr-Ile- V al-Gly-Asn-Leu-Thr-AlaAsp; (SEQ ID No. 135) and (l) Ala-Pro-Glu-Ser-Gly-Ala-Gly-Leu-Gly-GIy-Thr-Val-Gln-AlaGly; (SEQ ID No. 136), kde Xaa může být jakákoliv aminokyselina.
Za použití testů popsaných výše bylo prokázáno, že tyto polypeptidy indukují proliferaci a produkci IFN-τ u PBMC. Obrázky ÍA a 1B ukazují výsledky takových testů za použití přípravků PBMC od prvního a druhého dárce, v příslušném pořadí.
DNA sekvence, které kódují antigeny označené jako (a), (c), (d) a (g), výše, byly získány vyšetřením genomové M. tuberculosis knihovny za použití 32p koncově značených degenerovaných oligonukleotidů odpovídajících N-koncové sekvenci a obsahující M. tuberculosis chybné kodony. Vyšetření provedené za použití sondy odpovídající antigenu (a), výše, identifikovalo klon mající sekvence uvedenou v SEQ ID NO: 101, Polypeptid kódovaný SEQ ID NO: 101 je uveden v SEQ ID NO: 102. Vyšetření provedené za použití sondy odpovídající antigenu (g), výše, identifikovalo klon mající sekvence uvedenou v SEQ ID NO: 52. Polypeptid kódovaný SEQ ID NO: 52 je uveden v SEQ ID NO: 53. Vyšetření provedené za použití sondy odpovídající antigenu (d), výše, identifikovalo klon mající sekvence uvedenou v SEQ ID NO: 24 a vyšetření provedené za použití sondy odpovídající antigenu (c), výše, identifikovalo klon mající sekvence uvedenou v SEQ ID NO: 25.
Výše uvedené aminokyselinové sekvence byly srovnávány se známými aminokyselinovými sekvencemi v genové bance za použití DNA STAR systému. Prozkoumávána databáze obsahovala okolo 173 000 proteinů a byla kombinována se Swiss, PIR databázemi spolu s translatovanými proteinovými sekvencemi (Verse 87). Nebyly detekovány žádné signifikantní homologie s aminokyselinovými sekvencemi pro antigeny (a) - (h) a (1),
-23CZ JUUOXX B6
Bylo zjištěno, že aminokyselinová sekvence pro antigen (i) je homologní se sekvencí z M. leprae. Kompletní sekvence M. leprae byla amplifíkována z genomové DNA za použití sekvence získané zGENBANK. Tato sekvence byla potom použita pro vyšetřování M. tuberculosis knihovny popsané dále v příkladu 2 a byla získána kompletní kopie homologu M. tuberculosis (SEQ ID
NO: 99).
Bylo zjištěno, že aminokyselinová sekvence pro antigen (j) je homologní k známému proteinu M. tuberculosis translatovanému z DNA sekvence. Podle vědomostí vynálezců nebylo doposud popsáno, že by tento protein měl stimulační aktivitu pro T-buňky. Bylo zjištěno, že aminokyseliio nové sekvence (k) je příbuzná sekvencí z M. leprae.
Výsledky pro reprezentativní antigeny uvedené výše v testech proliferace a IFN-τ produkce provedených za použití tří PPD pozitivních dárců jsou uvedeny v tabulce 1:
Tabulka l - Výsledky testu proliferace PBMC a produkce IFN-τ
Sekvence Proliferace IFN-T
(a) + —
(c) +++ +++
(d) ++
(g) +++ +++
(h) +++ +++
V tabulce 1 byla odpověď, která dávala stimulační index (SI) mezi 2 a 4 (vzhledem k buňkám kultivovaným pouze v médiu) počítána jako +, SI 4 - 8 nebo 2 - 4 v koncentraci 1 pg nebo menší
2o byla počítána jako ++ a SI vyšší než 8 byla počítána jako +++. Antigen sekvence (c) měl vysoký SI (+++) pro jednoho dárce a nižší Sl (++ a +) pro další dva dárce v prolíferačním i IFN-τ testu. Tyto výsledky ukazují, že tyto antigeny jsou schopné indukce proliferace a/nebo produkce IFN-τ.
Příklad 2 - Použití séra od pacienta pro izolaci antigenu M. tuberculosis
Tento příklad popisuje izolaci antigenu z lyzátů M. tuberculosis za pomoci vyšetřování sérem od jedinců infikovaných M. tuberculosis.
Vysušené M. tuberculosis H37Ra (Difco Laboratories) bylo přidáno k 2% roztoku NP40 a třikrát byla provedena střídavě homogenizace a sonikace. Vzniklá suspenze byla centrifugována při 13 000 rpm v mikrocentrifugových tubách a supematant byl protlačen přes 0,2 mikronový stříkačkový filtr. Filtrát byl navázán na Macro Prep DEAE korálky (BioRad, Hercules, CA).
Korálky byly důkladně promyty 20 mM Tris pH 7,5 a navázané proteiny byly eluovány 1 M NaCI. 1 M NaCI eluát byl dialyzován přes noc proti 10 mM Tris, pH 7,5. Dialyzovaný roztok byl ošetřen DNAsou a RNAsou při koncentraci 0,05 mg/ml po dobu 30 minut při pokojové teplotě a potom a-D-manosidasou, 0,5 U/mg při pH 4,5 po dobu 3 až 4 hodin při pokojové teplotě. Po návratu k pH 7,5 byl materiál frakcionován pomocí FPLC na Bio Scale Q-20 koloně (BioRad). Frakce byly kombinovány do 9 souborů, byly koncentrovány na Centriprep 10 (Amicon, Beverley, MA) a byly vyšetřovány ve Western blotu na svou serologickou aktivitu za použití
-24séra od pacientů infikovaných M. tuberculosis, které nebylo imunoreaktivní s jinými antigeny podle předkládaného vynálezu.
Nejvíce reaktivní frakce byla potom podrobena SDS-PAGE a byla přenesena do PVDF. Byl vyříznut proužek o přibližně 85 kDa za zisku sekvence:
(m) Xaa-Tyr-Ile-Ala-Tyr-Xaa-Thr-Thr-Ala-Gly-Ile-Val-Pro-Gly-LysIle-Asn-Val-His-Leu-Vak (SEQ ID No. 137), kde Xaa může být jakákoliv aminokyselina.
Srovnání této sekvence se sekvencemi v genové bance jak bylo popsáno výše neukázalo žádnou io signifikantní homologii se známými sekvencemi.
Příklad 3 - Příprava DNA sekvencí kódujících antigeny M. tuberculosis
Tento příklad popisuje přípravu DNA sekvencí kódujících antigeny M. tuberculosis za pomoci vyšetřování M. tuberculosis expresní knihovny sérem od pacientů infikovaných M. tuberculosis, nebo anti-séra proti solubilním antigenům M. tuberculosis.
A. Příprava solubilních antigenů M. tuberculosis za použití králičího antiséra
Genomová DNA byla izolována z M. tuberculosis kmene H37Ra. DNA byla náhodně rozstřižena a byla použita pro konstrukci expresní knihovny za použití Lambda ZAP expresního systému (Stratagene, La Jolla, CA). Bylo generováno králičí antisérum proti sekrečním proteinům M. tuberculosis kmenů H37Ra, H37Rv a Erdman imunizací králíků koncentrovaným supema25 tantem kultur M. tuberculosis. Přesněji, králíci byli nejprve imunizováni podkožně 200 μg proteinového antigenu v celkovém objemu 2 ml obsahujícím 10 gg muramyl dipeptidu (Calbiochem, La Jolla, CA) a 1 ml nekompletního Freundova adjuvans. O čtyři týdny později byla králíkům podána dosycovací dávka 100 μg antigenu v nekompletním Freundově adjuvans. Nakonec byli králíci imunizováni subkutánně 50 μg proteinového antigenu. Anti-sérum bylo použito pro vyšetřování expresní knihovny, jak je to popsáno v Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratories, Cold Sprin Harbor, NY, 1989. Bakteriofágové plaky exprivující imunoreaktivní antigen byly přečištěny. Byly získány fagetnidy z plaků a byla odvozena nukleotidové sekvence klonů M. tuberculosis.
Bylo přečištěno 32 klonů, z těchto 25 představovalo sekvence, které nebyly dříve identifikovány u lidského M. tuberculosis. Rekombinantní antigeny byly exprivovány a přečištěné antigeny byly použity v imunologické analýze popsané v příkladu 1. Proteiny byly indukovány IPTG a byly přečištěny gelovou elucí, jak je popsáno v Skeiky et al., J. Exp. Med. 181: 1527 - 1537, 1995. Representativní sekvence DNA molekul identifikovaných v tomto vyšetření jsou uvedeny v SEQ
ID NO: 1-25. Odpovídající předpokládané aminokyselinové sekvence jsou uvedeny v SEQ ID NO: 63-87.
Při srovnání těchto sekvencí se známými sekvencemi v genové bance za použití databáze uvedené výše bylo zjištěno, že klony, které jsou zde označené TbRA2A, TbRA16, TbRA18 a TbRA29 (SEQ ID NO: 76, 68, 70, 75) vykazují určitou homologii se sekvencemi dříve identifikovanými v Mycobacteríum leprae, ale nikoliv v M. tuberculosis, TbRAl 1, TbRA26, TbRA28 a TbDPEP (SEQ ID NO: 65, 73, 74 a 53) byty dříve identifikovány v M. tuberculosis. Žádná signifikantní homologie nebyla nalezena pro TbRAl, TbRA3, TbRA4, TbRA9, TbRAlO, TbRA13, TbRAí7, TbRA19, TbRA29, TbRA32, TbRA36 a překrývající se klony TbRA35 aTbRA12 (SEQ
ID NO: 63, 77, 81, 82, 64, 67, 69, 71, 75, 78, 80, 79, 66). Klon TbRa24 se překrývá s klonem
TbRa29.
-25CZ JUU688 B6
Výsledky testů proliferace PBMC a produkce IFN-τ provedených pro reprezentativní rekombinantní antigeny za použití přípravků T-buněk od několika různých pacientů imunních vůči M. tuberculosis jsou uvedeny v tabulkách 2 a 3.
Tabulka 2 - Výsledky proliferace PBMC v odpovědi na reprezentativní solubilní antigeny
Antigen Pacient
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
TbRal - - + ++ - - + + - - + +
TbRa3 - + ++ - - - ++ + - - - -
TbRa9 - - nt nt ++ ++ nt nt nt nt nt nt nt
TbRalO - - + + + nt ± - + + + -
TbRall + + + ++ ++ + nt - ++ ++ ++ + nt
TbRal2 - - + + ± ++ + + + - + - -
TbRal6 nt nt nt nt - + nt nt nt nt nt nt nt
TbRa24 nt nt nt nt - - nt nt nt nt nt nt nt
TbRa26 - + nt nt - - nt nt nt nt nt nt nt
TbRa29 nt nt nt nt - - nt nt nt nt nt nt nt
TbRa35 ++ nt ++ ++ ++ ++ nt ++ ++ ++ ++ ++ nt
TbRaB nt nt nt nt - - nt nt nt nt nt nt nt
TbRaC nt nt nt nt - - nt nt nt nt nt nt nt
TbRaD nt nt nt nt - » nt nt nt nt nt nt nt
AAMK - - + - - - nt - - - nt + nt
YY - - - - - - nt - - - nt + nt
DPEP - + - ++ - - nt ± + + + nt
Kontrola
-26Tabulka 3 - Výsledky produkce IFN-τ v PBMC v odpovědi na reprezentativní solubilní antigeny
Antigen Pacient
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
TbRal + ++ +++ + - + - — + ± -
TbRa3 - + ++ - + - - ++ + - - - -
TbRa9 ++ + nt nt ++ - nt nt nt nt nt nt nt
TbRalO + + + ± + + nt + - + + + -
TbRaii + + ++ ++ + nt - ++ ++ ++ ± nt
TbRal2 - - + + + +++ + + + - + - -
TbRal6 nt nt nt nt + + nt nt nt nt nt nt nt
TbRa24 nt nt nt nt + - nt nt nt nt nt nt nt
TbRa26 ++ ++ nt nt + + nt nt nt nt nt nt nt
TbRa29 nt nt nt nt + - nt nt nt nt nt nt nt
TbRa35 ++ nt ++ +4* +++ +++ nt ++ ++ +++ +++ ++ nt
TbRaB nt nt nt nt + nt nt nt nt nt nt nt
TbRaC nt nt nt nt + + nt nt nt nt nt nt nt
TbRaD nt nt nt nt + + nt nt nt nt nt nt nt
AAMK - - ± - - - nt - - - nt ± nt
YY - - - - - - nt - - nt + nt
DPEP -1- + + +++ - nt +++ + + + + nt
Kontrola
V tabulkách 1 a 2 byly odpovědi, které dávaly stimulační index ($1) mezi 1,2 a 2 (vzhledem k buňkám kultivovaným v médiu samotném) počítány jako ±, SI mezi 2^t byly počítány jako +,
SI 4-8 nebo 2-4 při koncentraci 1 pg nebo menší byly počítány jako ++ a SI vyšší než 8 byly počítány jako +++. Kromě toho, účinek koncentrace na proliferaci a produkci interferonu-τ je pro dva z výše uvedených antigenů ukázán na připojených obrázkách. Pro proliferaci i produkci interferonu-τ byl TbRa3 počítán jako ++ a TbRa9 jako +.
to Tyto výsledky naznačují, že tyto solubilní antigeny mohou indukovat proliferaci a/nebo produkci interferonu-τ v T-buňkách získaných od jedinců imunních vůči M. tuberculosis.
B. Použití séra od pacienta pro identifikaci DNA sekvence kódující antigeny M. tuberculosis
Genomová DNA knihovna popsaná výše a další H37Rv knihovna byly vyšetřovány za použití souborů séra získaného od pacientů s aktivní tuberkulosou. Pro přípravu H37Rv knihovny byla izolována gnomová DNA M. tuberculosis kmene H37Rv, byla podrobena částečnému trávení Sau3A a byla použita pro konstrukci expresní knihovny za použití Lambda Zap expresního systému (Stratagene, La Jolla, Ca). Tři různé soubory séra, každé obsahující sérum získané od tří jedinců s aktivním plicním nebo pleurálním onemocněním, byly použity při expresním vyšetřování. Soubory byly označeny TbL, TbM a TbH, s ohledem na reaktivitu sH37Ra lyzátem (tj. TbL = nízká reaktivita, TbM - střední reaktivita a TbH = vysoká reaktivita) v ELISA i imunoblotovém testu. Také byly použity čtyři soubory séra od sedmi pacientů s aktivní plicní tuberkulosou. Žádné sérum nemělo zvýšenou reaktivitu s 38 kDa fosfátovým vazebným proteinem od
M. tuberculosis H37Ra.
-27CZ ÓUUOSS Bb
Všechny soubory byly pre-adsorbovány lyzátem E. coii a byly použity pro vyšetřování H37Ra a H37Rv expresních knihoven, jak je popsáno v Sambrook et ak, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratories, Cold Sprin Harbor, NY, 1989, Bakteriofágové plaky exprivující imunoreaktivní antigen byly přečištěny. Byly získány fagemidy z plaků a byla odvozena nukleotidová sekvence klonů M. tuberculosis.
Bylo přečištěno 32 klonů, z těchto klonů 31 představuje sekvence, které nebyly dříve identifikovány u lidského M. tuberculosis. Reprezentativní sekvence identifikovaných DNA molekul jsou io uvedeny v SEQ ID NO: 26 - 51 a 105, z těchto sekvencí, TbH-8 a TbH-8-2 (SEQ ID NO: 105) jsou nesousedící DNA sekvence ze stejného klonu, a TbkM (SEQ ID NO: 43) a TbH-4-FWD (SEQ ID NO: 44) jsou nesousedící sekvence ze stejného klonu. Aminokyselinové sekvence pro antigeny zde identifikované jako Tb38-1, TbH-4, TbH-8, TbH-9 a TbH-12 jsou uvedeny v SEQ ID NO: 88 - 92. Srovnání těchto sekvencí se známými sekvencemi v genové bance za použití t5 databází uvedených výše neukázalo žádnou signifikantní homologií sTbH-4, TbH-8, TbH-9 a TbM-3, ačkoliv byly nalezeny slabé homologie s TbH-9. Bylo zjištěno, že TbH12 je homologní k 34 kDa antigennímu proteinu dříve identifikovanému u M. paratuberculosis (Acc. č. S28515). Bylo zjištěno, že Tb38-1 je umístěn 34 párů bází upstream od otevřeného čtecího rámečku pro antigen ESAT-6 dříve identifikovaný u M. bovis (Acc. č, U34848) a u M. tubercu20 losis (Sorensen etak, Infect. Immun. 63: 1 710-1 717, 1995).
Sondy odvozené od Tb38-1 a TbH-9, obě izolované z H37Ra knihovny, byly použity pro identifikaci klonů v H37Rv knihovně. Tb38-1 hybridizovala na Tb38-1F2, Tb38-1F3, Tb38-1F5 aTb38-lF6 (SEQ ID NO: 112, 113, 116, 118a 119). (SEQ ID NO: 112a 113 jsou nesousedící sekvence z klonu Tb38-1F2). vTb38-IF2 byly odvozeny dva otevřené čtecí rámečky; jeden odpovídající Tb37FL (SEQ ÍD NO: 114), druhý, částečná sekvence, může být homologní Tb381 a je nazván Tb38-1N (SEQ ID NO: 115). Odvozená aminokyselinová sekvence Tb38—1F3 je uvedena v SEQ ID NO: 117. TbH-9 sonda identifikovala tři klony v H37Rv knihovně: TbH-9FL (SEQ ID NO: 106), který může být homologní k TbH-9 (R37Ra), TbH-9-1 (SEQ ID
NO: 108) a TbH-9-4 (SEQ ID NO; 110), kde všechny tyto klony jsou těsně příbuzné sekvence k TbH-9. Odvozené aminokyselinové sekvence pro tyto klony jsou uvedeny v SEQ ID NO: 107, 109 a 111.
Výsledky testů na T-buňkách provedených sTb38-l, ESAT-6 a jinými reprezentativními rekombinantnímí antigeny jsou uvedeny v tabulkách 4A, B a 5, v příslušném pořadí, dále:
Tabulka 4A- Výsledky proliferace PBMC v odpovědi na reprezentativní solubilní antigeny
Antigen Dárce
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Tb38-1 +++ + - - - ++ - + ++ +++
ESAT-6 +++ + + + - + + ++ +++
TbH-9 ++ ++ ++ ± ± ++ ++ ++ ++ ++
-28Tabulka 4B- Výsledky produkce interferonu-τ PBMC v odpovědi na representativní solubilní antigeny
Antigen Dárce
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
Tb38-1 +++ + - + + +++ - ++ - +++ +++
ESAT-6 +++ + + + + + - + T +++ +++
TbH-9 ++ ++ - +++ + ± +++ +++ ++ +++ ++
Tabulka 5 - Souhrn odpovědi T-buněk na reprezentativní antigeny
Antigen Proliferace Interferon-T celkem
pac.4 pac.5 pac. 6 pac. 4 pac. 5 pac. 6
TbH9 ++ ++ ++ +++ ++ ++ 13
TbM7 + - ++ + - 4
TbH5 + + ++ ++ ++ 8
TbL23 + ++ ++ + 7,5
TbH4 ++ + ++ ++ + 7
kontrola - - - - 0
Tyto výsledky naznačují, že oba antigeny M. tuberculosis a ESAT-6 podle předkládaného vynálezu mohou indukovat proliferaci a/nebo produkcí interferonu-τ vT-buňkách získaných od jedinců imunních vůči M. tuberculosis. Podle znalostí vynálezců nebylo o ESAT-6 dříve známo, io že by stimuloval imunitní odpověď u lidí.
Sada šesti překrývajících se peptidů pokrývajících aminokyselinovou sekvenci antigenu Tb38-1 byla konstruována za použití metody popsané v příkladu 4. Sekvence těchto peptidů, zde označených jako pepl-6, jsou uvedeny v SEQ ÍD NO: 93-98, v příslušném pořadí. Výsledky testů na
T-buňkách za použití těchto peptidů jsou uvedeny v tabulkách 6 a 7. Tyto výsledky potvrzují existenci a napomáhají lokalizaci epitopů pro T-buňky v Tb38-1, které jsou schopné indukovat proliferaci a produkci interferonu-τ v T-buňkách získaných od jedinců imunních vůči M. tuberculosis.
-29cz óuuóxx bó
Tabulka 6 - Výstedky proliferace PBMC v odpovědi na Tb38-1 peptidy
Peptid Pacient
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
pepi - - - - + - - - + - +
pep2 + - - - ± - - + + - - +
pop 3 - - - - - - + - - - ±
pep4 ++ - - - - - + + + - - +
pepb ++ + - - - - + + - - - +
pepó - 4-+ - - - - ± ± - - +
kontrola
Tabulka 7 - Výsledky produkce interferonu-τ PBMC v odpovědi na Tb38—1 peptidy
Peptid Pacient
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
pepl + - - - + - - - - + - - +
pep2 - - - ± - - - + + - +
pep3 - - - - - - - - + - - - +
pep4 ++ - - - - * + - + + - - +
pep5 + 4- + - - - - + - + - - - +
pep6 + ++ - - - - + - + + - - +
kontrola
Příklad 4 - Přečištění a charakterizace polypeptidu z tuberkulinového přečištěného proteinového derivátu ío Polypeptid M. tuberculosis byl izolován z tuberkulinového přečištěného proteinového derivátu (PPD) následujícím způsobem.
PPD byl připraven podle publikovaného postupu s některými modifikacemi (Seibert, F. etal., Tuberculin purífied protein derivative. Preparation and analyses of large quantity for standart.
The American Review of Tuberculosis 44: 9 - 25, 1941).
M. tuberculosis kmen Rv byl kultivován po dobu 6 týdnů v syntetickém médiu ve válcových lahvích při 37 °C. Nádoby obsahující bakteriální kulturu byly potom zahřátý na 100 °C ve vodní páře po dobu 3 hodin. Kultury byly potom sterilně filtrovány za použití 0,22 μ filtru a kapalná fáze byla koncentrována 20-krát za použití membrány s rozlišovací schopností 3 kDa. Proteiny byly jedenkrát sráženy 50% roztokem síranu amonného a 8-krát 25% roztokem síranu amonného. Vzniklé proteiny (PPD) byly frakcionovány kapalinovou chromatografií na reversní fázi (RP-30HPLC) za použití Cl8 kolony (7,8 x 300 mM; Waters, Milford, MA) v Biocad HPLC systému (Perseptive Biosystems, Framingham, MA). Frakce byly eluovány z kolony lineárním gradientem od 0 až 100% pufru (0,1% TFA v acetonitrilu). Průtok byl 10 ml/minutu a eluent byl monitorován při 214 nm a při 280 nm.
Bylo získáno šest frakcí, byly sušeny, suspendovány v PBS a byly individuálně testovány na morčatech infikovaných M. tuberculosis na indukci reakce oddálené přecitlivělosti (DTH). Bylo zjištěno, že jedna frakce indukuje silnou DTH reakci a ta byla dále frakcionována RP-HPLC na microbore Vydac 08 koloně (katalogové č. 218TP5115) na Perkin Elmer/Applied Biosystems io Division Model 172 HPLC. Frakce byly eluovány lineárním gradientem 5 až 100% pufru (0,05%
TFA v acetonitrilu) s průtokem 80 μΙ/minutu. Eluent byl monitorován při 215 nm. Bylo získáno frakcí a byly testovány na indukci DTH u morčat infikovaných M. tuberculosis. Bylo zjištěno, že jedna frakce indukuje silnou DTH s asi 16 mm indurací. Další frakce neindukovaly detekovatelnou DTH. Pozitivní frakce byla podrobena SDS-PAGE gelové elektroforese a bylo zjištěno, že obsahuje jediný proteinový proužek o molekulové hmotnosti přibližně 12 kDa.
Tento polypeptid, zde označený jako DPPD, byt sekvencován z amino konce za použití perkin
Elmer/Applied Biosystems Division Procise 492 proteinového sekvenátoru jak bylo popsáno výše a bylo zjištěno, že má N-koncovou sekvenci uvedenou v SEQ ID NO: 129. Srovnání této sekvence se známými sekvencemi v genové bance jak je popsáno výše neukázalo žádné homologie. Byly izolovány čtyři bromkyanové fragmenty DPPD a bylo zjištěno, že mají sekvence uvedené v SEQ ID NO: 130 až 133.
Schopnost antigenu DPPD stimulovat lidské PBMC k prolíferaci a k produkci IFN-t byla testována způsobem popsaným v příkladu 1. Jak ukazuje tabulka 8, bylo zjištěno, že DPPD stimuluje proliferaci a vyvolává produkci velkých množství IFN-τ; větších než vyvolává komerční PPD.
Tabulka 8 - Výsledky testu proliferace a produkce IFN-τ v odpovědi na DPPD
Dárce pbmc Stimulátor Proliferace (CPM) IFM-T (0D450)
A medium 1,089 0,17
PPD (komerční) 8,394 1,29
DPPD 13,451 2,21
B medium 450 0,09
PPD (komerční) 3,929 1,26
DPPD 6,184 1,49
C medium 541 0,11
PPD (komerční) 8,907 0,76
DPPD 23,024 >2,70
-31Příklad 5 - Syntesa syntetických polypeptidů
Polypeptidy mohou být syntetizovány na Millipore 9050 sytezátoru peptidů za použití FMOC chemikálií s HPTU (o -benzotriazol-N,N,N',N'-tetramethyluroniumhexafluorfosfat) aktivací.
Gly Cys-Cily sekvence může být navázána na amino-konec peptidů pro umožnění konjugace nebo značení peptidů. Odštěpení peptidů ze solidního nosiče může být provedeno za použití následující štěpící směsi*, kyselina trifluoroctová:ethandithiol: thioanisol:voda:fenol (40:1:2:2:3). Po štěpení po dobu 2 hodin mohou být peptidy vy sráženy v chladném methy l-t-butyl-etheru. Peptidové pelety mohou potom být rozpuštěny ve vodě obsahující 0,1% kyselinu trifluoroctovou io (TFA) a mohou být lyofilizovány před přečištěním Cl8 HPCL na reversní fázi. Gradient 0 až 60% aeetonitrilu (obsahujícího 0,1% TFA) ve vodě (obsahující 0,1% TFA) může být použit pro eluci peptidů. Po lyofilizací přečištěných frakcí mohou být peptidy charakterizovány za použití elektrosprayové hmotové spektrometrie a aminokyselinovou analýzou.
Z předešlého popisu je zřejmé, že ačkoliv byla pro ilustraci popsána specifická provedení vynálezu, mohou být provedeny jejich různé modifikace, bez narušení rozsahu a duchu předkládaného vynálezu.
Seznam sekvencí (1) Obecné informace (i) Přihlašovatel: Corixa Corporation (ii) Název vynálezu: Sloučeniny a způsoby pro imunoterapii a diagnostiku tuberkulosy (iii) Počet sekvencí: 137 (iv) Adresa pro korespondenci:
(A) adresa: Seed and Berry LLP (B) Ulice: 6300 Columbia Center, 701 Fifth Avenue (C) Město: Seattle (D) Země: Washington (E) Stát: USA (F) ZIP: 98104-7092 (v) Počítačová čtecí forma:
(A) Typ média: Floppy disk (B) Počítač: IBM PC kompatibilní (C) Operační systém: PC-DOS/MS-DOS (D) Software: Petentln Release #1.0, verse #1.30 45 (vi) Data současné přihlášky:
(A) číslo přihlášky: US neznámé (B) Datum podání: 27. 8. 1996 (C) Klasifikace:
-32(viii) Zástupce/Agent - informace:
(A) Jméno: Maki, David J.
(B) Registrační číslo: 31392 (C) Odkaz/číslo rejstříku: 210121.411 PC (ix) Telekomunikační informace:
(A) Telefon: (206) 622-4900 io (B) Telefax: (206) 682-6031 (2) Informace pro SEQ ID NO: 1: ts (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 766 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 1:
CGAGGCACCG GTAGTTTGAA CCAAACGCAC AATCGACGGG CAAACGAACG GAAGAACACA 60
ACCATGAAGA TGGTGAAATC GATCGCCGCA GGTCTGACCG CCGCGGCTGC AATCGGCGCC 120
GCTGCGGCCG GTGTGACTTC GATCATGGCT GGCGGCCCGG TCGTATACCA GATGCAGCCG 180
GTCGTCTTCG GCGCGCCACT GCCGTTGGAC CCGGCATCCG CCCCTGACGT CCCGACCGCC 240
GCCCAGTTGA CCAGCCTGCT CAACAGCCTC GCCGATCCCA ACGTGTCGTT TGCGAACAAG 300
GGCAGTCTGG TCGAGGGCGG CATCGGGGGC ACCGAGGCGC GCATCGCCGA CCACAAGCTG 360
AAGAAGGCCG CCGAGCACGG GGATCTGCCG CTGTCGTTCA GCGT6ACGAA CATCCAGCCG 420
GCGGCCGCCG GTTCGGCCAC CGCCGACGTT TCCGTCTCGG GTCCGAAGCT CTCGTCGCCG 480
GTCACGCAGA ACGTCACGTT CGTGAATCAA GGCGGCTGGA TGCTGTCACG CGCATCGGCG 540
ATGGAGTTGC TGCAGGCCGC AGGGNAACTG ATTGGCGGGC CGGNTTCAGC CCGCTGTTCA 600
GCTACGCCGC CCGCCTGGTG ACGCGTCCAT GTCGAACACT CGCGCGTGTA GCACGGTGCG 660
GTNTGCGCAG GGNCGCACGC ACCGCCCGGT GCAAGCCGTC CTCGAGATAG GTGGTGNCTC 720
GNCACCAGNG ANCACCCCCN NNTCGNCNNT TCTCGNTGNT GNATGA 766
-33CZ JUUMHt B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 2:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 752 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 2:
ATGCATCACC ATCACCATCA CGATGAAGTC ACGGTAGAGA CGACCTCCGT CTTCCGCGCA 60
GACTTCCTCA GCGAGCTGGA CGCTCCTGCG CAAGCGGGTA CGGAGAGCGC GGTCTCCGGG 120
GTGGAAGGGC TCCCGCCGGG CTCGGCGTTG CTGGTAGTCA AACGAGGCCC CAACGCCGGG 180
TCCCGGTTCC TACTCGACCA AGCCATCACG TCGGCTGGTC GGCATCCCGA CAGCGACATA 240
TtTCTCGACG ACGTGACCGT GAGCCGTCGC CATGCTGAAT TCCGGTTCGA AAACAACGAA 300
TTCAATGTCG TCGATGTCGG GAGTCTCAAC GGCACCTACG TCAACCGCGA GCCCGTGGAT 360
TCGGCGGTGC TGGCGAACGG CGACGAGGTC CAGATCGGCA AGCTCCGGTT GGTGTTCTTG 420
ACCGGACCCA AGCAAGGCGA GGATGACGGG AGTACCGGGG GCCCGTGAGC GCACCCGATA 480
GCCCCGCGCT GGCCGGGATG TCGATCGGGG CGGTCCTCCG ACCTGCTACG ACCGGATTTT 540
CCCTGATGTC CACCATCTCC AAGAKCGAT TCTTGGGAGG CTTGAGGGTC NGGGTGACCC 600
CCCCGCGGGC CTCATTCNGG GGTNTCGGCN GGTTTCACCC CNTACCNACT GCCNCCCGGN 660
TTGCNAATTC NTTCTTCNCT GCCCNNAAAG GGACCNTTAN CTTGCCGCTN GAAANGGTNA 720
TCCNGGGCCC NTCCTNGAAN CCCCNTCCCC CT 752 (2) informace pro SEQ ID NO: 3:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 813 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 3:
-34CATATGCATC ACCATCACCA TCACACTTCT AACCGCCCAG CGCGTCGGGG GCGTGGAGCA 60
CCACGCGACA CCGGGCCCGA TCGATCTGCT AGCTTGAGTC TGGTCAGGCA TCGTCGTCAG 120
CAGCGCGATG CCCTATGTTT GTCGTCGACT CAGATATCGC GGCAATCCAA TCTCCCGCCT 180
GCGGCCGGCG GTGCTGCAAA CTACTCCCGG AGGAATTTCG ACGTGCGCAT CAAGATCTTC 240
ATGCTGGTCA CGGCTGTCGT TTTGCTCTGT TGTTCGGGTG TGGCCACGGC CGCGCCCAAG 300
ACCTACTGCG AGGAGTTGAA AGGCACCGAT ACCGGCCAGG CGTGCCAGAT TCAAATGTCC 360
GACCCGGCCT ACAACATCAA CATCAGCCTG CCCAGTTACT ACCCCGACCA GAAGTCGCTG 420
GAAAATTACA TCGCCCAGAC GCGCGACAAG TTCCTCAGCG CGGCCACATC GTCCACTCCA 480
CGCGAAGCCC CCTACGAATT GAATATCACC TCGGCCACAT ACCAGTCCGC GATACCGCCG 540
CGTGGTACGC AGGCCGTGGT GCTCAHGGTC TACCACAACG CCGGCGGCAC GCACCCAACG 600
ACCACGTACA AGGCCTTCGA TTGGGACCAG GCCTATCGCA AGCCAATCAC CTATGACACG 660
CTGTGGCAGG CTGACACCGA TCCGCTGCCA GTCGTCTTCC CCATTGTTGC AAGGTGAACT 720
GAGCAACGCA GACCGGGACA ACWGGTATCG ATAGCCGCCN AATGCCGGCT TGGAACCCNG 780
TGAAATTATC ACAACTTCGC AGTCACNAAA NAA 813 (2) Informace pro SEQ ID NO: 4:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 447 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární to (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 4:
-35CZ JVU688 B6
CGGTATGAAC ACGGCCGCGT CCGATAACTT CCAGCTGTCC CAGGGTGGGC AGGGATTCGC 60
CATTCCGATC GGGCAGGCGA TGGCGATCGC GGGCCAGATC CGATCGGGTG GGGGGTCACC 120
CACCGTTCAT ATCGGGCCTA CCGCCTTCCT CGGCTTGGGT GTTGTCGACA ACAACGGCAA 180
CGGCGCACGA GTCCAACGCG TGGTCGGGAG CGCTCCGGCG GCAAGTCTCG GCATCTCCAC 240
CGGCGACGTG ATCACCGCGG TCGACGGCGC TCCGATCAAC TCGGCCACCG CGATGGCGGA 300
CGCGCTTAAC GGGCATCATC CCGGTGACGT CATCTCGGTG AACTGGCAAA CCAAGTCGGG 360
CGGCACGCGT ACAGGGAACG TGACATTGGC CGAGGGACCC CCGGCCTGAT TTCGTCGYGG 420
ATACCACCCG CCGGCCGGCC AATTGGA 447 (2) Informace pro SEQ ID NO: 5:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 604 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineami (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 5:
GTCCCACTGC GGTCGCCGAG TATGTCGCCC AGCAAATGTC TGGCAGCCGC CCAACGGAAT 60
CCGGTGATCC GACGTCGCAG GTTGTCGAAC CCGCCGCCGC GGAAGTATCG GTCCATGCCT 120
AGCCCGGCGA CGGCGAGCGC CGGAATGGCG CGAGTGAGGA GGCGGGCAAT TTGGCGGGGC 180
CCGGCGACGG NGAGCGCCGG AATGGCGCGA GTGAGGAGGT GGNCAGTCAT GCCCAGNGTG 240
ATCCAATCAA CCTGNATTCG GNCTGNGGGN CCATTTGACA ATCGAGGTAG TGAGCGCAAA 300
TGAATGATGG AAAACGGGNG GNGACGTCCG NTGTTCTGGT GGTGNTAGGT GNCTGNCTGG 360
-36fcřWVW
NGTNGNGGNT ATCAG6ATGT TCTTCGNCGA AANCTGATGN CGAGGAACAG GGTGTNCCCG 420
NNANNCCNAN GGNGTCCNAN CCCNNNNTCC TCGNCGANAT CANANAGNCG NTTGATGNGA 480
NAAAAGGGTG GANCAGNNNN AANTN6NGGN CCNAANAANC NNNANNGNNG NNAGNTNGNT 540
NNNTNTTNNC ANNNNNNNTC NNGNNGNNCN NNNCAANCNN NTNNNNGNAA NNGGNTTNTT 600
NAAT 604 (2) Informace pro SEQ ID NO: 6:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 633 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 6:
TTGCANGTCG AACCACCTCA CTAAAGGGAA CAAAAGCTNG AGCTCCACCG CGGTGGCGGC 60
CGCTCTAGAA CTAGTGKATH YYYCKGGCTG CAGSAATYCG GYACGAGCAT TAGGACAGTC 120
TAACGGTCCT GTTACGGTGA TCGAATGACC GACGACATCC TGCTGATCGA CACCGACGAA 180
CGGGTGCGAA CCCTCACCCT CAACCGGCCG CAGTCCCGYA ACGCGCTCTC GGCGGCGCTA 240
CGGGATCGGT TTTTCGCGGY GTTGGYCGAC GCCGAGGYCG ACGACGACAT CGACGTCGTC 300
ATCCTCACCG GYGCCGATCC GGTGTTCTGC GCCGGACTGG ACCTCAAGGT AGCTGGCCGG 360
GCAGACCGCG CTGCCGGACA TCTCACCGCG GTGGGCGGCC ATGACCAAGC CGGTGATCGG 420
CGCGATCAAC GGCGCCGCGG TCACCGGCGG GCTCGAACTG GCGCTGTACT GCGACATCCT 480
GATCGCCTCC GAGCACGCCC GCTTCGNCGA CACCCACGCC CGGGTGGGGC TGCTGCCCAC 540
CTGGGGACTC AGTGTGTGCT TGCCGCAAM GGTCGGCATC GGNCTGGGCC GGTGGATGAG 600
CCTGACCGGC GACTACCTGT CCGTGACCGA CGC 633
-37CZ JUU6S8 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 7:
(i) Charakteristika sekvence:
(Λ) Délka: 1362 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 7:
CGACGACGAC GGCGCCGGAG AGCGGGCGCG AACGGCGATC GACGCGGCCC TGGCCAGAGT 50
CGGCACCACC CAGGAGGGAG TCGAATCATG AAATTTGTCA ACCATATTGA GCCCGTCGCG 120
CCCCGCCGAG CCGGCGGCGC GGTCGCCGAG GTCTATGCCG AGGCCCGCCG CGAGTTCGGC 180
CGGCTGCCCG AGCCGCTCGC CATGCTGTCC CCGGACGAGG GACTGCTCAC CGCCGGCTGG 240
GCGACGTTGC GCGAGACACT GCTGGTGGGC CAGGTGCCGC GTGGCCGCAA GGAAGCCGTC 300
GCCGCCGCCG TCGCGGCCAG CCTGCGCTGC CCCTGGTGCG TCGACGCACA CACCACCATG 350
CTGTACGCGG CAGGCCAAAC CGACACCGCC GCGGCGATCT TGGCCGGCAC AGCACCTGCC 420
GCCGGTGACC CGAACGCGCC GTATGTGGCG TGGGCGGCAG GAACCGGGAC ACCGGCGGGA 480
CCGCCGGCAC CGTTCGGCCC GGATGTCGCC GCCGAATACC TGGGCACCGC GGTGCAATTC 540
CACTTCATCG CACGCCTGGT CCTGGTGCTG CTGGACGAAA CCTTCCTGCC GGGGGGCCCG 600
CGCGCCCAAC AGCTCATGCG CCGCGCCGGT GGACTGGTGT TCGCCCGCAA GGTGCGCGCG 660
-38GAGCATCGGC CGGGCCGCTC CACCCGCCGG CTCGAGCCGC GAACGCTGCC CGACGATCTG 720
GCATGGGCAA CACCGTCCGA GCCCATAGCA ACCGCGTTCG CCGCGCTCAG CCACCACCTG 780
GACACCGCGC CGCACCTGCC GCCACCGACT CGTCAGGTGG TCAQGCGGGT CGTGGGGTCG 840
TGGCACGGCG AGCCAATGCC GATGAGCAGT CGCTGGACGA ACGAGCACAC CGCCGAGCTG 900
CCCGCCGACC TGCACGCGCC CACCCGTCTT GCCCTGCTGA CCGGCCTGGC CCCGCATCAG 960
GTGACCGACG ACGACGTCGC CGCGGCCCGA TCCCTGCTCG ACACCGATGC GGCGCTGGTT 1020
GGCGCCCTCG CCTGGGCCGC CTTCACCGCC GCGCGGCGCA TCGGCACCTG GATCGGCGCC 1080
GCCGCCGAGG GCCAGGTGTC GCGGCAAAAC CCGACTGGGT GAGTGTGCGC GCCCTGTCGG 1140
TAGGGTGTCA TCGCTGGCCC GAGGGATCTC GCGGCGGCGA ACGGAGGTGG CGACACAGGT 1200
GGAAGCTCCG CCCACTGGCT TGCGCCCCAA CGCCGTCGTG GGCGTTCGGT TGGCCGCACT 1260
GGCCGATCAG GTCGGCGCCG GCCCTTGGCC GAAGGTCCAG CTCAACGTGC CGTCACCGAA 1320
GGACCGGACG GTCACCGGGG GTCACCCTGC GCGCCCAAGG AA 1362 (2) Informace pro SEQ ID NO: 8:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1458 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-39CZ JVU08S Bb (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 8:
GCGACGACCC CGATATGCCG GGCACCGTAG CGAAAGCCGT CGCCGACGCA CTCGGGCGCG 60
GTATCGCTCC CGTTGAGGAC ATTCAGGACT GCGTGGAGGC CCGGCTGGGG GAAGCCGGTC 120
TGGATGACGT GGCCCGTGTT TACATCATCT ACCGGCAGCG GCGCGCCGAG CTGCGGACGG 180
CTAAGGCCTT GCTCGGCGTG CGGGACGAGT TAAAGCTGAG CKGGCC-GCC GTGACGGTAC 240
TGCGCGAGCG CTATCTGCTG CACGACGAGC AGGGCCGGCC GGCCGAGTCG ACCGGCGAGC 300
TGATGGACCG ATCGGCGCGC TGTGTCGCGG CGGCCGAGGA CCAGTATGA6 CCGGGCTCGT 360
CGAGGCGGTG GGCCGAGCGG TTCGCCACGC TATTACGCAA CCTGGAATTC CTGCCGMTT 420
CGCCCACGTT GAT6AACTCT GGCACCGACC TGGGACTGCT CGCCGGCTGT TTTGTTCTGC 480
CGATTGAGGA TTCGCTGCAA TCGATCTTTG CGACGCTGGG ACAGGCCGCC GAGCTGCAGC 540
GGGCTGGAGG CGGCACCGGA TATGCGTTCA GCCACCTGCG ACCCGCCGGG GATCGGGTGG 600
CCTCCACGGG CGGCACGGCC AGCGGACCGG TGTCGTÍTCT ACGGCTGTAT GACAGTGCCG 660
CGGGTGTGGT CTCCATGGGC GGTCGCCGGC GTGGCGCCTG TATGGCTGTG CTTGATGTGT 720
CGCACCCGGA TATCTGTGAT TTCGTCACCG CCAAGGCCGA ATCCCCCAGC GAGCTCCCGC 780
ATTTCAACCT ATCGGTTGGT GTGACCGACG CGTTCCTGCG GGCCGTCGAA CGCAACGGCC 840
TACACCGGCT GGTCAATCCG CGAACCGGCA AGATCGTCGC GCGGATGCCC GCCGCCGAGC 900
TGTTCGACGC CATCTGCAAA GCCGCGCACG CCGGTGGCGA TCCCGGGCTG GTGTTTCTCG 960
ACACGATCAA TAGGGCAAAC CCGGTGCCGG GGAGAGGCCG CATCGAGGCG ACCAACCCGT 1020
GCGGGGAGGT CCCACTGCTG CCTTACGAGT CATGTAATCT CGGCTCGATC AACCTCGCCC 1080
GGATGCTCGC CGACGGTCGC GTCGACTGGG ACCGGCTCGA GGAGGTCGCC GGTGTGGCGG 1140
TGCGGTTCCT TGATGACGTC ATCGATGTCA GCCGCTACCC CTTCCCCGAA CTGGGTGAGG 1200
CGGCCCGCGC CACCCGCMG ATCGGGCTGG GASTCATGGG TTTGGCGGAA CTGCTTGCCG 1260
CACTGGGTAT TCCGTACGAC AGTGAAGAAG CCGTGCGGTT AGCCACCCGG CTCATGCGTC 1320
GCATACAGCA GGCGGCGCAC ACGGCATCGC GGAGGCTGGC CGAAGAGCGG GGCGCATTCC 1380
CGGCGTTCAC CGATAGCCGG TTCGCGCGGT CGGGCCCGAG GCGCAACGCA CAGGTCACCT 1440
CCGTCGCTCC GACGGGCA 1458
-40(2) Informace pro SEQ ID NO: 9:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 862 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 9:
ACGGTGTAAT CGTGCTGGAT CTGGMCCGC GTGGCCCGCT ACCTACCGAG ATCTACTGGC 60
GGCGCAGGGG GCTGGCCCTG GGCATCGCGG TCGTCGTAGT CGGGATCGCG GTGGCCATCG 120
TCATCGCCTT CGTCGACAGC AGCGCCGGTG CCAAACCGGT CAGCGCCGAC AAGCCGGCCT 130
CCGCCCAGAG CCATCCGGGC TCGCCGGCAC CCCMGCACC CCAGCCGGCC GGGCAAACCG 240
AAGGTAACGC CGCCGCGGCC CCGCCGCAGG GCCAAAACCC CGAGACACCC ACGCCCACCG 300
CCGCGGTGCA GCCGCCGCCG GTGCTCAAGG AAGGGGACGA TTGCCCCGAT TCGACGCTGG 360
CCGTCAAAGG TTTGACCAAC GCGCCGCAGT ACTACGTCGG CGACCAGCCG AAGTTCACCA 420
TGGTGGTCAC CAACATCGGC CTGGTGTCCT GTAAACGCGA CGTTGGGGCC GCGGTGTTGG 480
CCGCCTACGT TTACTCGCTG GACAACAAGC GGTTGTGGTC CAACCTGGAC TGCGCGCCCT 540
CGAATGAGAC GCTGGTCAAG ACGITíTCCC CCGGTGAGCA GGTAACGACC GCGGTGACCT 600
GGACCGGGAT GGGATCGGCG CCGCGCTGCC CATTGCCGCG GCCGGCGATC GGGCCGGGCA 660
CCTACAATCT CGTGGTACAA CTGGGCAATC TGCGCTCGCT GCCGGTTCCG TTCATCCTGA 720
ATCAGCCGCC GCCGCCGCCG GGGCCGGTAC CCGCTCCGGG TCCAGCGCAG GCGCCTCCGC 780
CGGAGTCTCC CGCGCAAGGC GGATMTTAT TGATCGCTGA TGGTCGATTC CGCCAGCTGT 840
GACAACCCCT CGCCTCGTGC CG 862 (2) Informace pro SEQ ID NO: 10:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 622 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-41 VZ JUU088 liti (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 10:
TTGATCAGCA CCGGCAAGGC GTCACATGCC TCCCTGGGTG TGCAGGTGAC CAATGACAAA 60
GACACCCCGG GCGCCAAGAT CGTCGAAGTA GTGGCCGGTG GTGCTGCCGC GAACGCTGGA 120
GTGCCGAAGG GCGTCGTTGT CACCAAGGTC GACGACCGCC CGATCAACAG CGCGGACGCG 180
TTGGTTGCCG CCGTGCGGTC CAAAGCGCCG GGCGCCACGG TGGCGCTAAC CTTTCAGGAT 240
CCCTCGGGCG GTAGCCGCAC AGTGCAAGTC ACCCTCGGCA AGGCGGAGCA GTGATGAAGG 300
TCGCCGCGCA GTGTTCAAAG CTCGGATATA CGGTGGCACC CATGGAACAG CGTGCGGAGT 360
TGGTGGTTGG CCGGGCACTT GTCGTCGTCG TTGACGATCG CACGGCGCAC GGCGATGAAG 420
ACCACAGCGG GCCGCTTGTC ACCGAGCTGC TCACCGAGGC CGGGTTTGTT GTCGACGGCG 480
TGGTGGCGGT GTCGGCCGAC GAGGTCGAGA TCCGAAATGC GCTGAACACA GCGGTGATCG 540
GCGGGGTGGA CCTGGTGGTG TCGGTCGGCG GGACCGGNGT GACGNCTCGC GATGTCACCC 600 CGGAAGCCAC CCGNGACATT CT 622 (2) Informace pro SEQ ID NO: 11:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1200 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina o (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-42(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 11:
GGCGCAGCGG TAAGCCTGH GGCCGCCGGC ACACTGGTGT TGACAGCATG CGGCGGTGGC 60 ACCAACAGCT CGTCGTCAGG CGCAGGCGGA ACGTCTGGGT CGGTGCACTG CGGCGGCAAG 120
AAGGAGCTCC ACTCCAGCGG CTCGACCGCA CAAGAAAATG CCATGGAGCA GTTCGTCTAT 180
GCCTACSTGC GATCGTGCCC GGGCTACACG TTGGACTACA ACGCCAACGG GTCCGGTGCC 240
GGGGTGACCC AfiTTTCTCAA CAACGAAACC GATTTCGCCG GCTCGGATGT CCCGTTGAAT 300
CCGTCGACCG GTCAACCTGA CCGGTCGGCG GAGCGGTGCG GTTCCCCGGC ATGGGACCTG 360
CCGACGGTGT TCGGCCCGAT CGCGATCACC TACAATATCA AGGGCGTGAG CACGCTGAAT 420
CTTGACGGAC CCACTACCGC CAAGATTTTC AACGGCACCA TCACCGTGTG GAATGATCCA 480
CAGATCCAAG CCCTCAACTC CGGCACCGAC CTGCCGCCAA CACCGATTAG CGTTATCTTC 540
CGCAGCGACA AGTCCGGTAC GTCGGACAAC TTCCAGAAAT ACCTCGACGG TGTATCCAAC 600
GGGGCGTGGG GCAAAGGCGC CAGCGAAACG TTCAGCGGGG GCGTCGGCGT CGGCGCCAGC 660
GGGAACAACG GAACGTCGGC CCTACTGCAG ACGACCGACG GGTCGATCAC. CTACAACGAG 720
TGGTCGTTTG CGGTGGGTAA GCAGTTGAAC ATGGCCCAGA TCATCACGTC GGCGGGTCCG 780
GATCCAGTGG CGATCACCAC CGAGTCGGTC GGTAAGACAA TCGCCGGGGC CAAGATCATC 840
GGACAAGGCA ACGACCTGGT ATTGGACACG TCGTCGTTCT ACAGACCCAC CCAGCCTGGC 900
TCTTACCCGA TCCTGCTGGC GACCTATGAG ATCGTCTGCT CGAAATACCC GGATGCGACG 960
ACCGGTACTG CGGTAAGGGC GTTTATGCAA GCCGCGATTG GTCCAGGCCA AGAAGGCCTG 1020
GACCAATACG GCTCCATTCC GTTGCCCAAA TCGTTCCAAG CAAAATTQGC GGCCGCGGTG 1080
AATGCTATTT CTTGACCTAG TGAAGGGAAT TCGACGGTGA GCGATGCCGT TCCGCAGGTA 1140
GGGTCGCAAT TTGGGCCGTA TCAGCTATTG CGGCTGCTGG GCCGAGGCGG GATGGGCGAG 1200 (2) Informace pro SEQ ID NO: 12:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1155 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina
-43CZ JWJÓSS B6 (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 12:
GCAAGCAGCT GCAGGTCGTG CTGTTCGACG AACTGGGCAT GCCGAAGACC AAACGCACCA 60
AGACCGGCTA CACCACGGAT GCCGACGCGC TGCAGTCGTT GTTCGACAAG ACCGGGCATC 120
CGTTTCTGCA ACATCTGCTC GCCCACCGCG ACGTCACCCG GCTCAAGGTC ACCGTCGACG 180
GGTTGCTCCA AGCGGTGGCC GCCGACGGCC GCATCCACAC CACGTTCAAC CAGACGATCG 240
CCGCGACCGG CCGGCTCTCC TCGACCGAAC CCAACCTGCA GAACATCCCG ATCCGCACCG 300
ACGCGGGCCG GCGGATCCGG GACGCGTTCG TGGTCGGGGA CGGTTACGCC GAGTTGATGA 360
CGGCCGACTA CAGCCAGATC GAGATGCGGA TCATGGGGCA CCTGTCCGGG GACGAGGGCC 420
TCATCGAGGC GTTCAACACC C-GGGAGGACC TGTATTCGTT CGTCGCGTCC CGGGTGTTCG 480
GTGTGCCCAT CGAC6AGGTC ACCGGCGAGT TGCGGCGCCG GGTCAAGGCG ATGTCCTACG 540
GGCTGGTTTA CGGGTTGAGC GCCTACGGCC TGTCGCAGCA GTTGAAAATC TCCACCGAGG 600
AAGCCAACGA GCAGATGGAC GCGTATTTCG CCCGATTCGG CGGGGTGCGC GACTACCTGC 660
GCGCCGTAGT CGAGCGGGCC CGCAAGGACG GCTACACCTC GACGGTGCTG GGCCGTCGCC 720
GCTACCTGCC CGAGCTGGAC AGCAGCAACC GTCAAGTGCG GGAGGCCGCC GAGCGGGCGG 780
CGCTGAACGC GCCGATCCAG GGCAGCGCGG CCGACATCAT CAAGGTGGCC ATGATCCAGG 840
TCGACAAGGC GCTCAACGAG GCACAGCTGG CGTCGCGCAT GCTGCTGCAG GTCCACGACG 900
AGCTGCTGTT CGAAATCGCC CCCGGTGAAC GCGAGCGGGT CGAGGCCCTG GTGCGCGACA 960
AGATGGGCGG CGCHACCCG CTCGACGTCC CGCTGGAGGT GTCGGTGGGC TACGGCCGCA 1020
GCTGGGACGC GGCGGCGCAC TGAGTGCCGA GCGTGCATCT GGGGCGGGAA TTCGGCGATT 1080
TTTCCGCCCT GAGTTCACGC TCGGCGCAAT CGGGACCGAG TTTGTCCAGC GTGTACCCGT 1140 CGAGTAGCCT CGTCA 1155
-44(2) Informace pro SEQ ID NO: 13:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1771 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 13:
GAGCGCCGTC TGGTGTTTCA ACGGTTTTAC CGGTCGGCAT CGGCACGGGC GTTGCCGGGT 60
TCGGGCCTCG GGTTGGCGAT CGTCAAACAG GTGGTGCTCA ACCACGGCGG ATTGCTGCGC 120
ATCGAAGACA CCGACCCAGG CGGCCAGCCC CCTGGAACGT CGATTTACGT GCTGCTCCCC 180
GGCCGTCGGA TGCCGATTCC GCAGCTTCCC GGTGCGACGG CTGGCGCTCG GAGCACGGAC 240
ATCGAGAACT CTCGGGGTTC GGCGAACGTT ATCTCAGTGG AATCTCAGTC CACGCGCGCA 300
ACCTAGTTGT GCAGTTACTG TTGAAAGCCA CACCCATGCC AGTCCACGCA TGGCCAAGTT 360
GGCCCGAGTA GTGGGCCTAfi TACAGGAAGA GCAACCTAGC GACATGACGA ATCACCCACG 420
GTATTCGCCA CCGCCGCAGC AGCCGGGAAC CCCAGGTTAT GCTCAGGGGC AGCAGCAAAC 480
GTACAGCCAG CAGTTCGACT GGCGTTACCC ACCGTCCCCG CCCCCGCAGC CAACCCAGTA 540
CCGTCAACCC TACGAGGCGT TGGGTGGTAC CCGGCCGGGT CTGATACCTG GCGTGATTCC 600
GACCATGACG CCCCCTCCTG GGATGGTTCG CCAACGCCCT CGTGCAGGCA TGTTGGCCAT 660
CGGCGCGGTG ACGATAGCGG TGGTGTCCGC CGGCATCGGC GGCGCGGCCG CATCCCTGGT 720
CGGGTTCAAC CGGGCACCCG CCGGCCCCAG CGGCGGCCCA GTGGCTGCCA GCGCGGCGCC 780
AAGCATCCCC GCAGCAAACA TGCCGCCGGG GTCGGTCGAA CAGGTGGCGG CCAAGGTGGT 840
-45GCCCAGTGTC GTCATGTTGG AAACCGATCT GGGCCGCCAG TCGGAGGAGG GCTCCGGCAT CATTCTGTCT GCCGAGGGGC TGATCTTGAC CAACAACCAC GTGATCGCGG CGGCCGCCAA GCCTCCCCTG GGCAGTCCGC CGCCGAAAAC GACGGTAACC TTCTCTGACG GGCGGACCGC
ACCCTTCACG GTGGTGGGGG CTGACCCCAC CAGTGATATC GCCGTCGTCC GTGTTCAGGG
CGTCTCCGGG CTCACCCCGA TCTCCCTGGG TTCCTCCTCG GACCTGAGGG TCGGTCACCC
GGTGCTGGCG ATCGGGTCGC CGCTCGGTTT GGAGGGCACC GTGACCACGG GGATCGTCAG
CGCTCTCAAC CGTCCAGTGT CGACGACCGG CGAGGCCGGC AACCAGAACA CCGTGCTGGA
CGCCATTCAG ACCGACGCCG CGATCAACCC CGGTAACTCC GGGGGCGCGC TGGTGAACAT
GAACGCTCAA CTCGTCGGAG TCAACTCGGC CATTGCCACG CTGGGCGCGG ACTCAGCCGA
TGCGCAGAGC GGCTCGATCG GTCTCGGTTT T6CGATTCCA GTCGACCAGG CCAAGCGCAT
CGCCGACGAG TTGATCAGCA CCGGCAAGGC GTCACATGCC TCCCTGGGTG TGCAGGTGAC
CAATGACAAA GACACCCCGG GCGCCAAGAT CGTCGAAGTA GTGGCCGGTG GTGCTGCCGC
GAACGCTGGA GTGCCGAAGG GCGTCGTTGT CACCAAGGTC GACGACCGCC CGATCAACAG
CGCGGACGCG ttggttgccg ccgtgcggtc caaagcgccg ggcgccacgg TGGCGCTAAC CrrrCAGGAT CCCTCGGGCG gtagccgcac agtgcaagtc accctcggca aggcggagca gtgatgaagg tcgccgcgca gtgttcaaag c (2) Informace pro SEQ ID NO: 14:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1058 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
900
960
1020
1080
1140
1200
1260
1320
1380
1440
1500
1560
1620
1680
1740
1771
-46(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 14:
CTCCACCGCG GTGGCGGCCG CTCTAGAACT AGTGGATCCC CCGGGCTGCA GGAATTCGGC 60
ACGAGGATCC GACGTCGCAG GTTGTCGAAC CCGCCGCCGC GGAAGTATCG GTCCATGCCT 120
AGCCCGGCGA CGGCGAGCGC CGGAATGGCG CGAGTGAGGA GGCGGGCAAT nGGCGGGGC 180
CCGGCGACGG CGAGCGCCGG AATGGCGCGA GTGAGGAGGC GGGCAGTCAT GCCCAGCGTG 240
ATCCAATCAA CCTGCATTCG GCCTGCGGGC CCATTTGACA ATCGAGGTAG TGAGCGCAAA 300
TGAATGATCG AAAACGGGCG GTGACGTCCG CTCTTCTGGT GGTGCTAGGT GCCTGCCTGG 360
CGTTGTGGCT ATCAGGATGT TCTTCGCCGA AACCTGATGC CGAGGAACAG GGTGTTCCC6 420
TGAGCCCGAC GGCGTCCGAC CCCGCGCTCC TCGCCGAGAT CAGGCAGTCG CTTGATCCGA 480
CAAAAGGGTT GACCAGCGTG CACGTAGCGG TCCGAACAAC CGGGAAAGTC GACAGCTTGC 540
TGGGTATTAC CAGTGCCGAT GTCGACGTCC GGGCCAATCC GCTCGCGGCA AAGGGCGTAT 600
GCACCTACAA CGACGAGCAG GGTGTCCCGT TTCGGGTACA AGGCGACAAC ATCTCGGTGA 660
AACTGTTCGA CGACTGGAGC AATCTCGGCT CGATTTCTGA ACTGTCAACT TCACGCGTGC 720
TCGATCCTGC CGCTGGGGTG ACGCAGCTGC TGTCCGGTGT CACGAACCTC CAAGCGCAAG 780
GTACCGAAGT GATAGACGGA ATTTCGACCA CCAAAATCAC CGGGACCATC CCCGCGAGCT 840
CTGTCAAGAT GCTTGATCCT GGCGCCAAGA GTGCAAGGCC GGCGACCGTG TGGATTGCCC 900
AGGACGGCTC GCACCACCTC GTCCGAGCGA GCATCGACCT CGGATCCGGG TCGATTCAGC 960
TCACGCAGTC GAAATGGAAC GAACCCGTCA ACGTCGACTA GGCCGAAGTT GCGTCGACGC 1020
GTTCNTCGAA ACGCCCTTGT GAACGGTGTC AACGGNAC 1058 (2) Informace pro SEQ ID NO: 15:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 542 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-47CZ 300688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 15:
GAATTCGGCA CGAGAGGTGA TCGACATCAT CGGGACCAGC CCCACATCCT GGGAACAGGC 60
GGCGGCGGAG GCGGTCCAGC GGGCGCGGGA TAGCGTCGAT GACATCCGCG TCGCTCGGGT 120
CATTGAGCAG GACATGGCCG TGGACAGCGC CGGCAAGATC ACCTACCGCA TCAAGCTCGA 180
AGTGTCGTTC AAGATGAGGC CGGCGCAACC GCGCTAGCAC GGGCCGGCGA GCAAGACGCA 240
AAATCGCACG GTTTGCGGTT GATTCGTGCG ATTTTGTGTC TGCTCGCCGA GGCCTACCAG 300
GCGCGGCCCA GGTCCGCGTG CTGCCGTATC CAGGCGTGCA TCGCGATTCC GGCGGCCACG 360
CCGGAGTTAA TGCTTCGCGT CGACCCGAAC TGGGCGATCC GCCGGNGAGC TGATCGATGA 420
CCGTGGCCAG CCCGTCGATG CCCGAGTTGC CCGAGGAAAC GTGCTGCCAG GCCGGTAGGA 480
AGCGTCCGTA GGCGGCGGTG CTGACCGGCT CTGCCTGCGC CCTCAGTGCG GCCAGCGAGC 540
GG 542 (2) Informace pro SEQ ID NO: 16:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 913 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina o (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-48(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 16:
CGGTGCCGCC CGCGCCTCCG nGCCCCCAT TGCCGCCGTC GCCGATCAGC TGCGCATCGC 60
CACCATCACC GCCTTTGCCG CCGGCACCGC CGGTGGCGCC GGGGCCGCCG ATGCCACCGC 120
TTGACCCTGG CCGCCGGCGC CGCCATTGCC ATACAGCACC CCGCCGGGGG CACCGTTACC 180
GCCGTCGCCA CCGTCGCCGC CGCTGCCGH TCAGGCCGGG GAGGCCGAAT GAACCGCCGC 240
CAAGCCCGCC GCCGGCACCG TTGCCGCCH TTCCGCCCGC CCCGCCGGCG CCGCCAATTG 300
CCGAACAGCC AMGCACCGTT GCCGCCAGCC CCGCCGCCGT TAACGGCGCT GCCGGGCGCC 360
GCCGCCGGAC CCGCCATTAC CGCCGTTCCC GTTCGGTGCC CCGCCGTTAC CGGCGCCGCC 420
GTTTGCCGCC AATATTCGGC GGGCACCGCC AGACCCGCCG GQGCCACCAT TGCCGCCGGG 480
CACCGAAACA ACAGCCCAAC GGTGCCGCCG GCCCCGCCGT TTGCCGCCAT CACCGGCCAT 540
TCACCGCCAG CACCGCCGK AATGTTTATG AACCCGGTAC CGCCAGCGCG GCCCCTATTG 600
CCGGGCGCCG GAGNGCGTGC CCGCCGGCGC CGCCAACGCC CAAAAGCCCG GGGTTGCCAC 660
CGGCCCCGCC GGACCCACCG GTCCCGCCGA TCCCCCCGTT GCCGCCGGTG CCGCCGCCAT 720
TGGTGCTGCT GAAGCCGTTA GCGCCGGTTC CGCSGGTTCC GGCGGTGGCG CCNTGGCCGC 780
CGGCCCCGCC GTTGCCGTAC AGCCACCCCC CGGTGGCGCC GTTGCCGCCA TTGCCGCCAT 840
TGCCGCCGTT GCCGCCAHG CCGCCGTTCC CGCCGCCACC GCCGGNTTGG CCGCCGGCGC 900
CGCCGGCGGC CGC 913 (2) Informace pro SEQ ID NO: 17:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1872 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý io (D) Topologie: lineární
-49CZ JUU688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 17:
GACTACGTTG GTGTAGAAAA ATCCTGCCGC CCGGACCCTT AAGGCTGGGA CAATTTCTGA 60
TAGCTACCCC GACACAGGAG GTTACGGGAT GAGCAATTCG CGCCGCCGCT CACTCAGGTG 120
GTCATGGTTG CTGAGCGTGC TGGCTGCCGT CGGGCTGGGC CTGGCCACGG CGCCGGCCCA 180
GGCGGCCCGG CCGGCCTTGT CGCAGGACCG GTTCGCCGAC TTCCCCGCGC TGCCCCTCGA 240
CCCGTCCGCG ATGGTCGCCC AAGTGGCGCC ACAGGTGGTC AACATCAACA CCAAACTGGG 300
CTACAACAAC GCCGTGGGCG CCGGGACCGG CATCGTCATC GATCCCAACG GTGTCGTGCT 360
GACCAACAAC CACGTGATCG CGGGCGCCAC CGACATCAAT GCGTTCAGCG TCGGCTCCGG 420
CCAAACCTAC GGCGTCGATG TGGTCGGGTA TGACCGCACC CAGGATGTCG CGGTGCTGCA 480
GCTGCGCGGT GCCGGTGGCC TGCCGTCGGC GGCGATCGGT GGCGGCGTCG CGGTTGGTGA 540
GCCCGTCGTC GCGATGGGCA ACAGCGGTGG GCAGGGCGGA ACGCCCCGTG CGGTGCCTGG 600
CAGGGTGGTC GCGCTCGGCC AAACCGTGCA GGCGTCGGAT TCGCTGACCG GTGCCGAAGA 660
GACATTGAAC GGGTTGATCC AGTTCGATGC CGCAATCCAG CCCGGTGATT CGGGCGGGCC 720
CGTCGTCAAC GGCCTAGGAC AGGTGGTCGG TATGAACACG GCCGCGTCCG ATAACTTCCA 780
GCTGTCCCAG GGTGGGCAGG GATTCGCCAT TCCGATCGGG CAGGCGATGG CGATCGCGGG 840
CCAAATCCGA TCGGGTGGGG GGTCACCCAC CGTTCATATC GGGCCTACCG CCTTCCTCGG 900
CTTGGGTGTT GTCGACAACA ACGGCAACGG CGCACGAGTC CAACGCGTGG TCGGAAGCGC 960
TCCGGCGGCA AGTCTCGGCA TCTCCACCGG CGACGTGATC ACCGCGGTCG ACGGCGCTCC 1020
GATCAACTCG GCCACCGCGA TGGCGGACGC GCTTAACGGG CATCATCCCG GTGACGTCAT 1080
CTCGGTGAAC TGGCAAACCA AGTCGGGCGG CACGCGTACA GGGAACGTGA CATTGGCCGA 1140
GGGACCCCCG GCCTGATTTG TCGCGGATAC CACCCGCCGG CCGGCCAATT GGATTGGCGC 1200
CAGCCGTGAT TGCCGCGTGA GCCCCCGAGT TCCGTCTCCC GTGCGCGTGG CATTGTGGAA 1260
GCAATGAACG AGGCAGAACA CAGCGTTGAG CACCCTCCCG TC-CAGGGCAG TTACGTCGAA 1320
-50GGCGGTGTGG TCGAGCATCC GGATGCCAAG GACTTCGGCA GCGCCGCCGC CCTGCCCGCC
GATCCGACCT GGTTTAAGCA CGCCGTCTTC TACGAGGTGC TGGTCCGGGC GTTCTTCGAC
GCCAGCGCGG ACGGTTCCGN CGATCTGCGT GGACTCATCG ATCGCCTCGA CTACCTGCAG
TGGCTTGGCA TCGACTGCAT CTGTTGCCGC CGTTCCTACG ACTCACCGCT GCGCGACGGC
GGTTACGACA TTCGCGACTT CTACAAGGTG CTGCCCGAAT TCGGCACCGT CGACGATTTC GTCGCCCTGG TCGACACCGC TCACCGGCGA GGTATCCGCA TCATCACCGA CCTGGTGATG
AATCACACCT CGGAGTCGCA CCCCTGGTTT CAGGAGTCCC GCCGCGACCC AGACGGACCG
TACGGTGACT ATTACGTGTG GAGCGACACC AGCGAGCGCT ACACCGACGC CCGGATCATC
TTCGTCGACA CCGAAGAGTC GAACTGGTCA TTCGATCCTG TCCGCCGACA GTINCTACTG
GCACCGATTC π (2) informace pro SEQ ID NO: 18:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1482 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io
1380
1440
1500
1560
1620
1680
1740
1800
1860
1872
-51 \-ί. ονυοοα uo (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 18:
CTTCGCCGAA ACCTGATGCC GAGGAACAGG GTGTTCCCGT GAGCCCGACG GCGTCCGACC 60
CCGCGCTCCT CGCCGAGATC AGGCAGTCGC TTGATGCGAC AAAAGGGTTG ACCAGCGTGC 120
ACGTAGCGGT CCGAACAACC GGGAAAGTCG ACAGCTTGCT GGGTATTACC AGTGCCGATG 180
TCGACGTCCG GGCCAATCCG CTCGCGGCAA AGGGCGTATG CACCTACAAC GACGAGCAGG 240
GTGTCCCGTT TCGGGTACAA GGCGACAACA TCTCGGTGAA ACTGTTCGAC GACTGGAGCA 300
ATCTCGGCTC GATTTCTGAA CTGTCAACTT CACGCGTGCT CGATCCTGCC GCTGGGGTGA 360
CGCAGCTGCT GTCCGGTGTC ACGAACCTCC AAGCGCAAGG TACCGAAGTG ATAGACGGAA 420
TTTCGACCAC CAAAATCACC GGGACCATCC CCGCGAGCTC TGTCAAGATG CTTGATCCTG 480
GCGCCAAGAG TGCAAGGCCG GCGACCGTGT GGATTGCCCA GGACGGCTCG CACCACCTCG 540
TCCGAGCGAG CATCGACCTC GGATCCGGGT CGATTCAGCT CACGCAGTCG AAATGGAACG 600
AACCCGTCAA CGTCGACTAG GCCGAAGTTG CGTCGACGCG TTGCTCGAAA CGCCCTTGTG 660
AACGGTGTCA ACGGCACCCG AAAACTGACC CCCTGACGGC ATCTGAAAAT TGACCCCCTA 720
GACCGGGCGG TTGGTGGTTA TTCTTCGGTG GTTCCGGCTG GTGGGACGCG GCCGAGGTCG 780
CGGTCTTTGA GCCGGTAGCT GTCGCCTTTG AGGGCGACGA CTTCAGCATG GTGGACGAGG 840
CGGTCGATCA TGGCGGCAGC AACGACGTCG TCGCCGCCGA AAACCTCGCC CCACCGGCCG 900
AAGGCCTTAT TGGACGTGAC GATCAAGCTG GCCCGCTCAT ACCGGGAGGA CACCAGCTGG 960
AAGAAGAGGT TGGCGGCCTC GGGCTCAAAC GGAATGTAAC CGACTTCGTC AACCACCAGG 1020
AGCGGATAGC GGCCAAACCG GGTGAGTTCG GCGTAGATGC GCCCGGCGTG GTGAGCCTCG 1080
GCGAACCGTG CTACCCATTC GGCGGCGGTG GCGAACAGCA CCCGATGACC GGCCTGACAC 1140
GCGCGTATCG CCAGGCCGAC CGCAAGATGA GTCTTCCCGG TGCCAGGCGG GGCCCAAAAA 1200
CACGACGTTA TCGCGGGCGG TGATGAAATC CAGGGTGCCC AGATGTGCGA TGGTGTCGCG 1260
TTTGAGGCCA CGAGCATGCT CAAAGTCGAA CTCTTCCAAC GACTTCCGAA CCGGGAAGCG 1320
GGCGGCGCGG ATGCGGCCCT CACCACCATG GGACTCCCGG GCTGACACTT CCCGCTGCAG 1380
GCAGGCGGCC AGGTATTCTT CGTGGCTCCA GTTCTCGGCG CGGGCGCGAT CGGCCAGCCG 1440
GGACACTGAC TCACGCAGGG TGGGAGCTTT CAATGCTCTT GT 1482
-52(2) Informace pro SEQ ID NO: 19:
(i) Charakteristika sekvence:
s (A) Délka: 876 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 19:
GMTTCGGCA CGAGCCGGCG ATAGCTTCTG GGCCGCGGCC GACCAGATGG CTCGAGGGTT 60
CGTGCTCGGG GCCACCGCCG GGCGCACCAC CCTGACCGGT GAGGGCCTGC MCACGCCGA 120
CGGTCACTCG TTGCTGCTGG ACGCCACCAA CCCGGCGGTG GTTGCCTACG ACCCGGCCTT 180
CGCCTACGAA ATCGGCTACA TCGNGGAAAG CGGACTGGCC AGGATGTGCG GGGAGAACCC 240
GGAGAACATC TTCTTCTACA TCACCGTCTA CAACGAGCCG TACGTGCAGC CGCCGGAGCC 300
GGAGAACTTC GATCCCGAGG GCGTGCTGGG GGGTATCTAC CGNTATCACG CGGCCACCGA 360
GCAACGCACC AACAAGGNGC AGATCCTGGC CTCCGGGGTA GCGATGCCCG CGGCGCTGCG 420
GGCAGCACAG ATGCTGGCCG CCGAGTGGGA TGTCGCCGCC GACGTGTGGT CGGTGACCAG 480
TTGGGGCGAG CTAMCCGCG ACGGGGTGGT CATCGAGACC GAGAAGCTCC GCCACCCCGA 540
TCGGCCGGCG GGCGTGCCCT ACGTGACGAG AGCGCTGGAG AATGCTCGGG GCCCGGTGAT 600
CGCGGTGTCG GACTGGATGC GCGCGGTCCC CGAGCAGATC CGACCGTGGG TGCCGGGCAC 660
ATACCTCACG TTGGGCACCG ACGGGTTCGG nTTTCCGAC ACTCGGCCCG CCGGTCGTCG 720
TTACTTCAAC ACCGACGCCG AATCCCAGGT TGGTCGCGGT TTTGGGAGGG GTTGGCCGGG 780
TCGACGGGTG AATATCGACC CATTCGGTGC CGGTCGTGGG CCGCCCGCCC AGTTACCCGG 840
ATTCGACGM GGTGGGGGGT TGCGCCCGAN TMGTT 876
-53IZ JUUWÍM Bf>
(2) Informace pro SEQ ID NO: 20:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1021 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 20:
ATCCCCCCGG GCTGCAGGAA TTCGGCACGA GAGACAAAAT TCCACGCGTT AATGCAGGAA 60
CAGATTCATA ACGAATTCAC AGCGGCACAA CAATATGTCG CGATCGCGGT TTATTTCGAC 120
AGCGAAGACC TGCCGCAGTT GGCGAAGCAT TTTTACAGCC AAGCGGTCGA GGAACGAAAC 180
CATGCAATGA TGCTCGTGCA ACACCTGCTC GACCGCGACC TTCGTGTCGA AATTCCCGGC 240
GTAGACACGG TGCGAAACCA GTTCGACAGA CCCCGCGAGG CACTGGCGCT GGCGCTCGAT 300
CAGGAACGCA CAGTCACCGA CCAGGTCGGT CGGCTGACAG CGGTGGCCCG CGACGAGGGC 360
GATTTCCTCG GCGAGCAGTT CATGCAGTGG TTCTTGCAGG AACAGATCGA AGAGGTGGCC 420
TTGATGGCAA CCCTGGTGCG GGTTGCCGAT CGGGCCGGGG CCMCCTGK CGAGCTAGAG 480
AACTTCGTCG CACGTGAAGT GGATGTGGCG CCGGCCGCAT CAjGGCGCCCC GCACGCTGCC 540
GGGGGCCGCC TCTAGATCCC TGGGGGGGAT CAGCGAGTGG TCCCGTTCGC CCGCCCGTCT 600
TCCAGCCAGG CCTTGGTGCG GCCGGGGTGG TGAGTACCAA TCCAGGCCAC CCCGACCTCC 660
CGGNAAAAGT CGATGTCCTC GTACTCATCG ACGTTCCAGG AGTACACCGC CCGGCCCTGA 720
GCTGCCGAGC GGTCAACGAG TTGCGGATAT TCCTTTAACG CAGGCAGTGA GGGTCCCACG 780
GCGGTTGGCC CGACCGCCGT GGCCGCACTG CTGGTCAGGT ATCGGGGGGT CTTGGCGAGC 840
AACAACGTCG GCAGGAGGGG TGGAGCCCGC CGGATCCGCA GACCGGGGGG GCGAAAACGA 900
CATCAACACC GCACGGGATC GATCTGCGGA GGGGGGTGCG GGAATACCGA ACCGGTGTAG 960
GAGCGCCAGC AGTTGTTTTT CCACCAGCGA AGCGTTTTCG GGTCATCGGN GGCNNTTAAG 1020
T 1021
-54(2) Informace pro SEQ ID NO: 21:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 321 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 21:
CGTGCCGACG AACGGAAGAA CACAACCATG AAGATCGTGA AATCGATCGC CGCAGGTCTG 60 ACCGCCGCGG CTGCAATCGG CGCCGCTGCG GCCGGTGTGA CTTCGATCAT GGCTGGCGGN 120 CCGGTCGTAT ACCAGATGCA GCCGGTCGTC TTCGGCGCGC CACTGCCGTT GGACCCGGNA 180 TCCGCCCCTG ANGTCCCGAC CGCCGCCCAG TGGACCAGNC TGCTCAACAG NCTCGNCGAT 240
CCCAACGTGT CGTTTGNGAA CAAGGGNAGT CTGGTCGAGG GNGGNATCGG NGGNANCGAG 300 GGNGNGNATC GNCGANCACA A 321 (2) Informace pro SEQ ID NO: 22:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 373 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xí) Popis sekvence: SEQ ID NO: 22:
TCTTATCGGT TCCGGTTGGC GACGGGTTTT GGGNGCGGGT GGTTAACCCG CTCGGCCAGC 60
CGATCGACGG GCGCGGAGAC GTCGACTCCG ATACTCGGCG CGCGCTGGAG CTCCAGGCGC 120
CCTCGGTGGT GNACCGGCAA GGCGTGAAGG AGCCGTTGNA GACCGGGATC AAGGCGATTG 180
ACGCGATGAC CCCGATCGGC CGCGGGCAfiC GCCAGCTGAT CATCGGGGAC CGCAAGACCG 240
GCAAAAACCG CCGTCTGTGT CGGACACCAT CCTCAAACCA GCGGGAAGAA CTGGGAGTCC 300
GGTGGATCCC AAGAAGCAGG TGCGCTTGTG TATACGTTGG CCATCGGGCA AGAAGGGGAA 360
CTTACCATCG CCG 373
-55CZ JWJbSS B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 23:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 352 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 23:
GTGACGCCGT GATGGGATTC CTGGGCGGGG CCGGTCCGCT GGCGGTGGTG GATCAGCMC 60
TGGTTACCCG GGTGCCGCAA GGCTGGTCGT TTGCTCAGGC AGCCGCTGTG CCGGTGGTGT 120
TCTTGACGGC CTGGTACGGG TTGGCCGATT TAGCCGAGAT CAAGGCGGGC GAATCGGTGC 180
TGATCCATGC CGGTACCGGC GGTGTGGGCA TGGCGGCTGT GCAGCTGGCT CGCCAGTGGG 240
GCGTGGAGGT THCGTCACC GCCAGCCGTG GNAAGTGGGA CACGCTGCGC GCCATNGNGT 300
TTGACGACGA NCCATATCGG NGATTCCCNC ACATNCGAAG HCCGANGGA GA 352 (2) Informace pro SEQ ID NO: 24:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 726 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární ’56\--Zj tSUWUU MU (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 24:
GAAATCCGCG TTCATTCCGT TCGACCAGCG GCTGGCGATA ATCGACGAAG TGATCMGCC 60
GCGGTTCGCG GCGCTCATGG GTCACAGCGA GTAATCAGCA AGTTCTCTGG TATATCGCAC 120
CTAGCGTCCA GTTGCTTGCC AaATCGCTTT CGTACCGTCA TCGCATGTAC CGGTTCGCGT 180
GGCGCACGCT CATGCTGGCG GCGTGCATCC TGGCCACGGG TGTGGCGSÍT CTCGGGGTCG 240
GCGCGCAGTC CGCAGCCCAA ACCGCGCCGG TGCCCGACTA CTACTGGTGC CCGGGGCAGC 300
CTTTCGACCC CGCATGGGGG CCCAACTGGG ATCCCTACAC CTGCCATGAC GACTTCCACC 360
GCGACAGCGA CGGCCCCGAC CACAGCCGCG ACTACCCCGG ACCCATCCTC GAAGGTCCCG 420
TGCTTGACGA TCCCGGTGCT GCGCCGCCGC CCCCGGCTGC CGGTGGCGGC GCATAGCGCT 480
CGTTGACCGG GCCGCATCAG CGAATACGCG TATAAACCCG GGCGTGCCCC CGGCAAGCTA 540
CGACCCCCGG CGGGGCAGAT TTACGCTCCC GTGCCGATGG ATCGCGCCGT CCGATGACAG 600
AAAATAGGCG ACGGTTTTGG CAACCGCTTG GAGGACGCTT GAAGGGAACC TGTCATGAAC 660
GGCGACAGCG CCTCCACCAT CGACATCGAC AAGGTTGTTA CCCGCACACC CGTTCGCCGG 720
ATCGTG 726 (2) Informace pro SEQ ID NO: 25:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 580 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina o (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-57’
CZ JUU088 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 25:
CGCGACGACG ACGAACGTCG GGCCCACCAC CGCCTATGCG KGATGCAGG CGACCGGGAT 60
GGTCGCCGAC CATATCCAAG CATGCTGGGT GCCCACTGAG CGACCTTTTG ACCAGCCGGG 120
CTGCCCGATG GCGGCCCGGT GAAGTCATTG CGCCGGGGCT TGTGCACCTG ATGAACCCGA 180
ATAGGGAACA ATAGGGGGGT GATTTGGCAG TTCAATGTCG GGTATGGCTG GAAATCCAAT 240
GGCGGGGCAT GCTCGGCGCC GACCAGGCTC GCGCAGGCGG GCCAGCCCGA ATCTGGAGGG 300
AGCACTCAAT GGCGGCGATG AAGCCCCGGA CCGGCGACGG TCCTTTGGAA GCAACTAAGG 360
AGGGGCGCGG CATÍGTGATG CGAGTACCAC TTGAGGGTGG CGGTCGCCTG GTCGTCGAGC 420
TGACACCCGA CGAAGCCGCC GCACTGGGTG ACGAACTCAA AGGCGTTACT AGCTAAGACC 480
AGCCCAACGG CGAATGGTCG GCGTTACGCG CACACCTTCC GGTAGATGTC CAGTGTCTGC 540
TCGGCGATGT ATGCCCAGGA GAACTCTTGG ATACAGCGCT 580 (2) Informace pro SEQ ID NO: 26:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 160 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý io (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 26:
AACGGAGGCG CCGGGGGTTT TGGCGGGGCC GGGGCGGTCG GCGGCAACGG CGGGGCCGGC 60
GGTACCGCCG GGTTGTTCGG TGTCGGCGGG GCCG6TGGGG CCGGA6GCAA CG6CATCGCC 120
GGTGTCACGG GTACGTCGGC CAGCACACCG GGTGGATCCG 160 (2) Informace pro SEQ ID NO: 27:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 272 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-58(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 27:
GACACCGATA CGATGGTGAT GTACGCCAAC GTTGTCGACA CGCTCGAGGC GTTCACGATC
CAGCGCACAC CCGACGGCGT GAGCATCGGC GATGCGGCCC CGTTCGCGGA GGCGGCT6CC 120 AAGGCGATGG GAATCGACAA GCTGCGGGTA ATTCATACCG GAATGGACCC CGTCGTCGCT 180 GAACGCGAAC AGTGGGACGA cggcaacaac ACGTTGGCGT TGGCGCCCGG TGTCGTTGTC 240 GCCTACGAGC GCAACGTACA GACCAACGCC CG 272 (2) Informace pro SEQ ID NO: 28:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 317 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina io (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 28:
GCAGCCGGTG GTTCTCGGAC TATCTGCGCA CGGTGACGCA GCGCGACGTG CGCGAGCTGA 60
AGCGGATCGA GCAGACGGAT CGCCTGCCGC GG7TCATGCG CTACCTGGCC GCTATCACCG 120
CGCAGGAGCT GAACGTGGCC GAAGCGGCGC GGGTCATCGG GGTCGACGCG GGGACGATCC 180
GTTCGGATCT GGCGTGGTTC GAGACGGTCT ATCTGGTACA TCGCCTGCCC GCCTGGTCGC 240
GGAATCTGAC CGCGAAGATC AA6AAGCGGT CAAAGATCCA CGTCGTCGAC AGTGGCTTCG 300
CGGCCTGGTT GCGCGGG 317 (2) Informace pro SEQ ID NO: 29:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 182 párů bází 20 (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-59CZ JUUftS» B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 29:
GATCGTGGAG CTGTCGATGA ACAGCGTTGC CGGACGCGCG GCGGCCAGCA CGTCGGTGTA 60
GCAGCGCCGG ACCACCTCGC CGGTGGGCAG CATGGTGATG ACCACGTCGG CCTCGGCCAC 120
CGCTTCGGGC GCGCTACGAA ACACCGCGAC ACCGTGCGCG GCGGCGCCGG ACGCCGCCGT 180
GG 182 (2) Informace pro SEQ ID NO: 30:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 308 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina io (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 30:
GATCGCGAAG TTTGGTGA6C AGGTGGTCGA CGCGAAAGTC TGGGCGCCTG CGAAfiCGGGT 60
CGGCGTTCAC GAGGCGAAGA CACGCCTGTC CGAGCTGCTG CGGCTCGTCT ACGGCGGGCA 120
GAGGTTGAGA TTGCCCGCCG CGGCGAGCCG GTAGCAAAGC TTGTGCCGCT GCATCCTCAT ISO
GAGACTCGGC GGTTAGGCAT TGACCATGGC GTGTACCGCG TGCCCGACGA TTTGGACGCT 240
CCGTTGTCAG ACGACGTGCT CGAACGCTTT CACCGGTGAA GCGCTACCTC ATCGACACCC 300
ACGTTTGG 308 (2) Informace pro SEQ ID NO: 31: (i) Charakteristika sekvence;
(A) Délka: 267 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-60(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 31:
CCGACGACGA GCAACTCACG TGGATGATGG TCGGCAGCGG CATTGAGGAC GGAGAGAATC 60
CGGCCGAAGC TGCCGCGCGG CAAGTGCTCA TAGTGACCGG CCGTAGAGGG CTCCCCCGAT 120
GGCACCGGAC TATTCTGGTG TGCCGCTGGC CGGTAAGAGC GGGTAAAAGA ATGTGAGGGG 180
ACACGATGAG CAATCACACC TACCGAGTGA TCGAGATCGT CGGGACCTCG CCCGACGGCG 240
TCGACGCGGC AATCCAGGGC GGTCTGG 267 (2) Informace pro SEQ ID NO: 32:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 189 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina io (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 32:
CTCGTGCCGA AAGAATGTGA GGGGACACGA T6AGCAATCA CACCTACCGA GTGATCGAGA 60 TCGTCGGGAC CTCGCCCGAC GGCGTCGACG CGGCAATCCA GGGCGGTCTG GCCCGAGCTG 120 CGCAGACCAT GCGCGCGCTG GACTGGTTCG AAGTACAfiTC AATTCGAGGC CACCTGGTCG 180 ACGGAGCGG 189 i5 (2) Informace pro SEQ ID NO: 33:
(i) Charakteristika sekvence;
(A) Délka: 851 párů bází 20 (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-61 LZ. JUV099 BO (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 33:
CTGCAGGGTG GCGTGGATGA GCGTCACCGC GGGGCAGGCC GAGCTGACCG CCGCCCAGGT 60
CCGGGTTGCT GCGGCGGCCT ACGAGACGGC GTATGGGCTG ACGGTGCCCC CGCCGGTGAT 120
CGCCGAGAAC CGTGCTGAAC TGATGATTCT GATAGCGACC AACCTCTTGG GGCAAAACAC 180
CCCGGCGATC GCGGTCAACG AGGCCGAATA CGGCGAGATG TGGGCCCAAG ACGCCGCCGC 240
GATGTTTGGC TACGCCGCGG CGACGGCGAC GGCGACGGCG ACGTTGCTGC CGTTCGAGGA 300
GGCGCCGGAG ATGACCAGCG CGGGTGGGCT CCTCGAGCAG GCCGCCGCGG TCGAGGAGGC 360
CTCCGACACC GCCGCGGCGA ACCAGTTGAT GAACAATGTG CCCCAGGCGC TGAAACAGTT 420
GGCCCAGCCC ACGCAGGGCA CCACGCCTTC TTCCAAGCTG GGTGGCCTGT GGAAGACGGT 480
CTCGCCGCAT CGGTCGCCGA TCAGCAACAT GGTGTCGATG GCCAACAACC ACATGTCGAT 540
GACCAACTCG GGTGTGTCGA TGACCAACAC CTTGAGCTCG ATGTTGAAGG GCTTTGCTCC 600
GGCGGCGGCC GCCCAGGCCG TGCAAACCGC GGCGCAAAAC GGGGTCCGGG CGATGAGCTC 660
GCTCGGCAGC TCGCTGGGTT CTTCGGGTCT GGGCGGTGGG GTGGCCGCCA ACTTGGGTCG 720
GGCGGCCTCG GTACGGTATG GTCACCGGGA TGGCG6AAAA TATGCANAGT CTGGTCGGCG 780
GAACGGTGGT CCGGCGTAAG GTTTACCCCC GTTTTCTGGA TGCGGTGAAC TTCGTCAACG 840
GAAACAGTTA C 851 (2) Informace pro SEQ ID NO: 34:
(t) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 254 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina o (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-62(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO; 34;
GATCGATCGG GCGGAAATTT GGACCAGATT CGCCTCCGGC GATAACCCAA TCAATCGAAC 60
CTAGATTTAT TCCGTCCAGG GGCCCGAGTA ATGGCTCGCA GGAGAGGAAC CTTACTGCTG 120
CGGGCACCTG TCGTAGCTCC TCGATACGGC GGAAGGCGTC GACATíTTCC ACCGACACCC 180
CCATCCAAAC GTTCGAGGGC CACTCCAGCT TGTGAGCGAG GCGACGCAGT CGCAGGCTGC 240
GCTTGGTCAA GATC 254 (2) Informace pro SEQ ID NO: 35:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 408 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý io (D) Topologie; lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 35:
CGGCACGAGG ATCCTGACCG AAGCGGCCGC CGCCAAGGCG AAGTCGCTGT TGGACCAGGA 60
GGGACGGGAC GATCTGGCGC T6CG6ATCGC GGTTCAGCCG GGGGGGTGCG CTGGATTGCG 120
CTATAACCTT TTCTTCGACG ACCGGACGCT GGATGGTGAC CAAACCGCGG AGTTCGGTGG 180
TGTCAGGnG ATCGTGGACC GGATGAGCGC GCCGTATGTG GAAGGCGCGT CGATCGATTT 240
CGTCGACACT ATTGAGAAGC AAGGNTTCAC CATCGACAAT CCCAACGCCA CCGGCTCCTG 300
CGCGTGCGGG GATTCGTTCA ACTGATAAAA CGCTAGTACG ACCCCGCGGT GCGCAACACG 360
TACGAGCACA CCAAGACCTG ACCGCGCTGG AAAAGCAACT GAGCGATG 408 (2) Informace pro SEQ ID NO: 36: 15 (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 181 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-63LZ JUUOOe «6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 36:
GCGGTGTCGG CGGATCCGGC GGGTGGTTGA ACGGCAACGG CGGGGCCGGC GGGGCCGGCG 60
GGACCGGCGC TAACGGTGGT GCCGGCGGCA ACGCCTGGIT GTTCGGGGCC GGCGGGTCCG 120
GCGGNGCCGG CACCAATGGT GGNGTCG6CG GGTCCGGCGG ATTTGTCTAC GGCAACGGCG 180
G 181 (2) Informace pro SEQ ID NO: 37:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 290 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý io (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 37:
GCGGTGTCGG CGGATCCGGC GGGTGGTTGA ACGGCAACGG CGGTGTCGGC GGCCGGGGCG 60
GCGACGGCGT CTTTGCCGGT GCCGGCGGCC AGGGCGGCCT CGGTGGGCAG GGCGGCAATG 120
GCGGCGGCTC CACCGGCGGC AACGGCGGTC TTGGCGGCGC GGGCGGTGGC GGAGGCAACG 180
CCCCGGACGG CGGCTTCGGT GGCAACGGCG GTAAGGGTGG CCAGGGCGGN ATTGGCGGCG 240
GCACTCAGAG CGCGACCGGC CTCGGNGGTG ACGGCGGTGA CGGCGGTGAC 290 (2) Informace pro SEQ ID NO: 38:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 34 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina zo (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 38:
GATCCAGTGG CATGGNGGGT GTCAGTGGAA GCAT 34 (2) Informace pro SEQ ID NO: 39:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 155 párů bází (B)Typ: nukleová kyselina
-64(C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 39:
GATCGCTGCT CGTCCCCCCC TTGCCGCCGA CGCCACCGGT CCCACCGTTA CCGAACAAGC 60 TGGCGTGGTC GCCAGCACCC CCGGCACCGC CGACGCCGGA GTCGAACAAT GGCACCGTCG 120 TATCCCCACC ATTGCCGCCG GNCCCACCGG CACCG 155 (2) Informace pro SEQ ID NO: 40:
(i) Charakteristika, sekvence:
io (A) Délka: 53 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 40:
ATGGCGTTCA CGGGGCGCCG GGGACCGGGC AGCCCGGNGG GGCCGGGGGG TGG (2) Informace pro SEQ ID NO: 41:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 132 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 41:
GATCCACCGC GGGTGCAGAC GGTGCCCGCG GCGCCACCCC GACCAGCGGC GGCAACGGCG 60 GCACCGGCGG CAACGGCGCG AACGCCACCG TCGTCGGNGG GGCCGGCGGG GCCGGCGGCA 120 AGGGCGGCAA CG 132 (2) Informace pro SEQ ID NO: 42: 30 (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 132 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-65CZ JUU688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 42:
GATCGGCGGC CGGNACGGNC GGGGACGGCG GCAAGGGCGG NAACGGGGGC GCCGNAGCCA 60 CCNGCCAAGA ATCCTCCGNG TCCNCCAATG GCGCGAATGG CGGACAGGGC GGCAACGGCG 120
GCANCGGCGG CA 132 (2) Informace pro SEQ ID NO: 43:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 702 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý io (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 43:
CGGCACGAGG ATCGGTACCC CGCGGCATCG GCAGCTGCCG ATTCGCCGGG TTTCCCCACC 60
CGAGGAAAGC CGCTACCAGA TGGCGCTGCC GAAGTAGGGC GATCCGTTCG CGATGCCGGC 120
ATGAACGGGC GGCATCAAAT TAGTGCAGGA ACCTTTCAGT TTAGCGACGA TAATGGCTAT 180
AGCACTAAGG AGGATGATCC GATATGACGC AGTCGCAGAC CGTGACGGTG GATCAGCAAG 240
AGATTTTGAA CAGGGCCAAC GAGGTGGAGG CCCCGATGGC GGACCCACCG ACTGATGTCC 300
CCATCACACC GT3CGAACTC ACGGNGGNTA AAAACGCCGC CCAACAGNTG GThfTTGTCCG 360
CCGACAACAT GCGGGAATAC CTGGCGGCCG GTGCCAAAGA GCGGCAGCGT CTGGCGACCT 420
CGCTGCGCAA CGCGGCCAAG GNGTATGGCG AGGTTGATGA GGAGGCTGCG ACCGCGCTGG 480
ACAACGACGG CGAAGGAACT GTGCAGGCAG AATCGGCCGG GGCCGTCGGA GGGGACAGTf 540
CGGCCGAACT AACCGATACG CCGAGGGTGG CCACGGCCGG TGAACCCAAC TÍCATGGATC 600
TCAAAGAAGC GGCAAGGAAG CTCGAAACGG GCGACCAAGG CGCATCGCTC GCGCACTGNG 660
GGGATGGGTG GAACACTTNC ACCCTGACGC TGCAAGGCGA CG 702
-66(2) Informace pro SEQ ID NO: 44:
(i) Charakteristika sekvence (A) Délka: 298 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 44:
GAAGCCGCAG CGCTGTCGGG CGACGTGGCG GTCAAAGCGG CATCGCTCGG TGGCGGTGGA 60
GGCGGCGGGG TGCCGTCGGC GCCGTTGGGA TCCGCGATCG GGGGCGCCGA ATCGGTGCGG 120
CCCGCTGGCG CTGGTGACAT TGCCGGCTTA GGCCAGGGAA GGGCCGGCGG CGGCGCCGCG 180
CTGGGCGGGG GTGGCATGGG AATGCCGATG GGTGCCGCGC ATCAGGGACA AGGGGGCGCC 240
AAGTCCAAGG GTTCTCAGCA GGAAGACGAG GCGCTCTACA CCGAGGATCC TCGTGCCG 298 (2) Informace pro SEQ ID NO: 45: (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1058 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-67CL iWIbSS B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 45:
CGGCACGAGG ATCGAATCGC GTCGCCGGGA GCACAGCGTC GCACTGCACC AGTGGAGGAG 60
CCATGACCTA CTCGCCGGGT AACCCCGGAT ACCCGCAAGC GCAGCCCGCA GGCTCCTACG 120
GAGGCGTCAC ACCCTCGTTC GCCCACGCCG ATGAGGGTGC GAGCAAGCTA CCGATGTACC 180
TGAACATCGC GGTGGCAGTG CTCGGTCTGG CTGCGTACTT CGCCAGCTTC GGCCCAATGT 240
TCACCCTCAG TACCGAACTC GGGGGGGGTG ATGGCGCAGT GTCCGGTGAC ACTGGGCTGC 300
CGGTCGGGGT GGCTCTGCTG GCTGCGCTGC TTGCCGGGGT GGTTCTGGTG CCTAAGGCCA 360
AGAGCCATGT GACGGTAGTT GCGGTGCTCG GGGTACTCGG CGTATTTCTG ATGGTCTCGG 420
CGACGTTTAA CAAGCCCAGC GCCTATTCGA CCGGTTGGGC ATTGTGGGTT GTGTTGGCTT 480
TCATCGTGTT CCAGGCGGTT GCGGCAGTCC TGGCGCTCTT GGTGGAGACC GGCGCTATCA 540
CCGCGCCGGC GCCGCGGCCC AAGTTCGACC CGTATGGACA GTACGGGCGG TACGGGCAGT 600
ACGGGCAGTA CGGGGTGCAG CCGGGTGGGT ACTACGGTCA GCAGGGTGCT CAGCAGGCCG 660
CGGGACTGCA GTCGCCCGGC CCGCAGCAGT CTCCGCAGCC TCCCGGATAT GGGTCGCAGT 720
ACGGCGGCTA TTCGTCCAGT CCGAGCCAAT CGGGCAGTGG ATACACTGCT CAGCCCCCGG 780
CCCAGGCGCC GGCGCAGTCC GGGTCGCAAC AATCGCACCA GGGCCCATCC ACGCCACCTA 840
CCGGCTTTCC GAGCTTCAGC CCACCACCAC CGGTCAGTGC CGGGACGGGG TCGCAGGCTG 900
GTTCGGCTCC AGTCAACTAT TCAAACCCCA GCGGGGGCGA GCAGTCGTCG TCCCCCGGGG 960
GGGCGCCGGT CTAACCGGGC GTTCCCGCGT CCGGTCGCGC GTGTGCGCGA AGAGTGAACA 1020
GGGTGTCAGC AAGCGCGGAC GATCCTCGTG CCGAATTC 1058 (2) Informace pro SEQ ID NO: 46:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 327 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina o (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-68(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 46:
CGGCACGAGA GACCGATGCC GCTACCCTCG CGCAGGAGGC AGGTAATTTC GAGCGGATCT 60
CCGGCGACCT GAAAACCCAG ATCGACCAGG TGGAGTCGAC GGCAGGTTCG TTCCAGGGCC 120
AGTGGCGCGG CGCGGCGGGG ACGGCCGCCC AGGCCGCGGT GGTGCGCTTC CAAGAAGCAG ISO
CCAATAAGCA GAAGCAGGAA CTCGACGAGA TCTCGACGAA TATTCGTCAG GCCGGCGTCC 240
AATACTCGAG GGCCGACGAG GAGCAGCAGC AGGCGCTGTC CTCGCAAATG GGCTTCTGAC 300
CCGCTAATAC GAAAAGAAAC GGAGCAA n?· (2) Informace pro SEQ ID NO: 47:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 170 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina ío (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 47;
CGGTCGCGAT GATGGCGHG TCGAACGTGA CCGATTCTGT ACCGCCGTCG TTGAGATCAA 60
CCAACAACGT GTTGGCGTCG GCAAATGTGC CGNACCCGTG GATCTCGGTG ATCTTGTTCT 120
TCTTCATCAG GAAGTGCACA CCGGCCACCC TGCCCTCGGN TACCTTTCGG 170 (2) Informace pro SEQ ID NO: 48:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 127 párů bází 20 (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 48:
GATCCGGCGG CACGGGGGGT GCCGGCGGCA GCACCGCTGG CGCTGGCGGC AACGGCGGGG 60
CCGGGGGTGG CGGCGGAACC GGTGGGTTGC TCTTCGGCAA CGGCGGTGCC GGCGGGCACG 120
GGGCCGT 127
-69(2) Informace pro SEQ ID NO: 49:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 81 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 49:
CGGCGGCAAG GGCGGCACCG CCGGCAACGG GAGCGGCGCG GCCGGCGGCA ACGGCGGCAA 60 CGGCGGCTCC GGC TCAACG G 81 (2) Informace pro SEQ ID NO: 50:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 149 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 50:
GATCAGGGCT GGCCGGCTCC GGCCAGAAGG GCGGTAACGG AGGAGCTGCC GGATTGTÍTG 60 GCAACGGCGG GGCCGGNGGT GCCGGCGCGT CCAACCMGC CGGTAACGGC GGNGCCGGCG 120 GAAACGGTGG TGCCGGTGGG CTGATCTGG 149 (2) Informace pro SEQ ID NO: 51: 25 (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 355 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
70(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 51:
CGGCACGAGA TCACACCTAC CGAGTGATCG AGATCGTCGG GACCTCGCCC GACGGTGTCG 60
ACGCGGNAAT CCAGGGCGGT CTGGCCCGAG CTGCGCAGAC CATGCGCGCG CTGGACTGGT 120
TCGAAGTACA GTCAATTCGA GGCCACCTGG TCGACGGAGC GGTCGCGCAC 7TCCAGGTGA 180
CTATGAAAGT CGGCTTCCGC CTGGAGGAK CCTGAACCTT CAAGCGCGGC CGATAACTGA 240
GGTGCATCAT TAAGCGACTT TTCCAGAACA TCCTGACGCG CTCGAAACGC GGTTCAGCCG 300
ACGGTGGCTC CGCCGAGGCG CTGCCTCCAA AATCCCTGCG ACAATTCGTC GGCGG 355 (2) Informace pro SEQ ID NO: 52:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 999 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý io (D) Topologie: lineární
-71 (xí) Popis sekvence: SEQ ID NO: 52:
ATGCATCACC ATCACCATCA CATGCATCAG GTGGACCCCA ACTTGACACG TCGCAAGGGA 60 CGAKGGCGG CACTGGCTAT CGCGGCGATG GCCAGCGCCA GCCTGGTGAC CGTTGCGGTG 120
CCCGCGACCG CCAACGCCGA TCCGGAGCCA GCGCCCCCGG TACCCACAAC GGCCGCCTCG 180
CCGCCGTCGA CCGCTGCAGC GCCACCCGCA CCGGCGACAC CTGTTGCCCC CCCACCACCG 240
GCCGCCGCCA ACACGCCGAA TGCCCAGCCG GGCGATCCCA ACGCAGCACC TCCGCCGGCC 300
GACCCGAACG CACCGCCGCC ACCTGTCATT GCCCCAAACG CACCCCAACC TGTCCGGATC 360
GACAACCCGG TTGGAGGATT CAGCTTCGCG CTGCCTGCTG GCTGGGTGGA GTCTGACGCC 420
GCCCACTTCG ACTACGGTTC AGCACTCCTC AGCAAAACCA CCGGGGACCC GCCATTTCCC 480
GGACAGCCGC CGCCGGTGGC CAATGACACC CGTATCGTGC TCGGCCGGCT AGACCAAAAG 540
CTTTACGCCA GCGCCGAAGC CACCGACTCC AAGGCCGCGG CCCGGTTGGG CTCGGACATG 600
GGTGAGTTCT ATATGCCCTA CCCGGGCACC CGGATCAACC AGGAAACCGT CTCGCTCGAC 660
GCCAACGGGG TGTCTGGAAG CGCGTCGTAT TACGAAGTCA AGTTCAGCGA TCCGAGTAAG 720
CCGAACGGCC AGATCTGGAC GGGCGTAATC GGCTCGCCCG CGGCGAACGC ACCGGACGCC 780
GGGCCCCCTC AGCGCTGGTT TGTGGTATGG CTCGGGACCG CCAACAACCC GGTGGACAAG 840
GGCGCGGCCA AGGCGCTGGC CGAATCGATC CGGCCTTTGG TCGCCCCGCC GCCGGCGCCG 900
GCACCGGCTC CTGCAGAGCC CGCTCCGGCG CCGGCGCCGG CCGGGGAAGT CGCTCCTACC 960
CCGACGACAC CGACACCGCA GCGGACCTTA CCGGCCTGA 999 (2) Informace pro SEQ ID NO: 53:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka; 332 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina o (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-72(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 53:
Met His His His His His His Met His Gin Val Asp Pro Asn Leu Thr 15 10 15
Arg Arg Lys Gly Arg Leu Ala Ala Leu Ala Ile Ala Ala Met Ala Ser 20 25 30
Ala Ser Leu Val Thr Val Ala Val Pro Ala Thr Ala Asn Ala Asp Pro 35 40 45
Glu Pro Ala Pro Pro Val Pro Thr Thr Ala Ala Ser Pro Pro Ser Thr 50 55 60
Ala Ala Ala Pro Pro Ala Pro Ala Thr Pro Val Ala Pro Pro Pro Pro
70 75 80
Ala Alf Ala Asn Thr Pro Asn Ala Gin Pro Gly Asp Pro Asn Ala Ala
90 95
Pro Pro Pro Ala Asp Pro Asn Ala Pro Pro Pro Pro Val Ile Ala Pro 100 105 110
Asn Ala Pro Gin Pro Val Arg Ile Asp Asn Pro Val Gly Gly Phe Ser 115 120 125
Phe Ala Leu Pro Ala Gly Trp Val Glu Ser Asp Ala Ala His Phe Asp 130 135 140
Tyr Gly Ser Ala Leu Leu Ser Lys Thr Thr Gly Asp Pro Pro Phe Pro
145 150 155 160
Gly Gin Pro Pro Pro Val Ala Asn Asp Thr Arg Ile Val Leu Gly Arg
165 170 175
Leu Asp Gin Lys Leu Tyr Ala Ser Ala Glu Ala Thr Asp Ser Lys Ala 180 185 190
Ala Ala Arg Leu Gly Ser Asp Met Gly Glu Phe Tyr Met Pro Tyr Pro 195 200 205
Gly Thr Arg Ile Asn Gin Glu Thr Val Ser Leu Asp Ala Asn Gly Val 210 215 220
-73CZ JlfObbS B6
Ser Gly Ser Ala Ser Tyr Tyr Glu Val Lys Phe Ser Asp Pro Ser Lys
225 230 235 240
Pro Asn Gly Gin Ile Trp Thr Gly Val Ile Gly Ser Pro Ala Ala Asn
245 250 255
Ala Pro Asp Ala Gly Pro Pro Gin Arg Trp Phe Val Val Trp Leu Gly 260 265 270
Thr Ala Asn Asn Pro Val Asp Lys Gly Ala Ala Lys Ala Leu Ala Glu 275 280 285
Ser Ile Arg Pro Leu Val Ala Pro Pro Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro 290 295 300
Ala Glu Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Gly Glu Val Ala Pro Thr 305 310 315 320
Pro Thr Thr Pro Thr Pro Gin Arg Thr Leu Pro Ala 325 330 (2) Informace pro SEQ ID NO: 54:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 20 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 54:
Asp Pro Val Asp Ala Val Ile Asn Thr Thr Xaa Asn Tyr Gly Gin Val 15 10 15
Val Ala Ala Leu 20 (2) Informace pro SEQ ID NO: 55: 15 (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární
-74(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 55:
Ala Val Glu Ser Gly Met leu Ala Leu Gly Thr Pro Ala Pro Ser 15 10 15 (2) Informace pro SEQ ID NO: 56:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 19 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina io (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 56:
Ala Ala Met lys Pro Arg Thr Gly Asp Gly Pro Leu Glu Ala Ala lys 15 10 15
Glu Gly Arg (2) Informace pro SEQ ID NO: 57:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 15 aminokyselin 20 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 57:
Tyr Tyr Trp Cys Pro Gly Gin Pro Phe Asp Pro Ala Trp Gly Pro 15 10 15 (2) Informace pro SEQ ID NO: 58:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 14 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární
75CZ 300688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 58:
Asp Ile Gly Ser Glu Ser Thr Glu Asp Gin Gin Xaa Ala Val 1 5 10 (2) Informace pro SEQ ID NO: 59:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 13 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina io (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 59:
Ala Glu Glu Ser Ile Ser Thr Xaa Glu Xaa Ile Val Pro 1 5 10 (2) Informace pro SEQ ID NO: 60:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 17 aminokyselin 20 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 60:
Asp Pro Glu Pro Ala Pro Pro Val Pro Thr Ala Ala Ala Ala Pro Pro 15 10 15 (2) Informace pro SEQ ÍD NO: 61:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO; 61:
Ala Pro Lys Thr Tyr Xaa Glu Glu Leu Lys Gly Thr Asp Thr Gly 15 10 15
-76(2) Informace pro SEQ ID NO: 62: (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 30 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 62:
Asp Pro Ala Ser Ala Pro Asp Val Pro Thr Ala Ala Gin Gin Thr Ser 15 10 15
Leu Leu Asn Asn Leu Ala Asp Pro Asp Val Ser Phe Ala Asp 20 25 30 (2) Informace pro SEQ ID NO: 63:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 187 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-77CZ 300688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 63:
Thr Gly Ser Leu Asn Gin Thr His Asn Arg Arg Ala Asn Glu Arg Lys 15 10 15
Asn Thr Thr Het Lys Met Val Lys Ser Ile Ala Ala Gly Leu Thr Ala 20 25 30
Ala Ala Ala Ile Gly Ala Ala Ala Ala Gly Val Thr Ser Ile Met Ala 35 40 45
Gly Gly Pro Val Val Tyr Gin Met Gin Pro Val Val Phe Gly Ala Pro 50 55 60
Leu Pro Leu Asp Pro Ala Ser Ala Pro Asp Val Pro Thr Ala Ala Gin
70 75 80
Leu Thr Ser Leu Leu Asn Ser Leu Ala Asp Pro Asn Val Ser Phe Ala
90 95
Asn Lys Gly Ser Leu Val Glu Gly Gly Ile Gly Gly Thr Glu Ala Arg 100 105 110
Ile Ala Asp His Lys Leu Lys Lys Ala Ala Glu His Gly Asp Leu Pro 115 120 125
Leu Ser Phe Ser Val Thr Asn Ile Gin Pro Ala Ala Ala Gly Ser Ala 130 135 140
Thr Ala Asp Val Ser Val Ser Gly Pro Lys Leu Ser Ser Pro Val Thr
145 150 155 160
Gin Asn Val Thr Phe Val Asn Gin Gly Gly Trp Met Leu Ser Arg Ala
165 170 175
Ser Ala Met Glu Leu Leu Gin Ala Ala Gly Xaa 180 185 (2) Informace pro SEQ ID NO: 64:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 148 aminokyselin 10 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
78i/UUVUU UV (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 64:
Asp Glu Val Thr Val Glu Thr Ihr Ser Val Phe Arg Ala Asp Phe Leu 15 10 15
Ser Glu Leu Asp Ala Pro Ala Gin Ala Gly Thr Glu Ser Ala Val Ser 20 25 30
Gly Val Glu Gly Leu Pro Pro Gly Ser Ala Leu Leu Val Val Lys Arg 35 40 45
Gly Pro Asn Ala Gly Ser Arg Phe Leu Leu Asp Gin Ala Ile Thr Ser 50 55 60
Ala Gly Arg His Pro Asp Ser Asp Ile Phe Leu Asp Asp Val Thr Val
70 75 80
Ser Arg Arg His Ala Glu Phe Arg Leu Glu Asn Asn Glu Phe Asn Val
90 95
Val Asp Val Gly Ser Leu Asn Gly Thr Tyr Val Asn Arg Glu Pro Val 100 105 110
Asp Ser Ala Val Leu Ala Asn Gly Asp Glu Val Gin Ile Gly Lys Leu 115 120 125
Arg Leu Val Phe Leu Thr Gly Pro Lys Gin Gly Glu Asp Asp Gly Ser 130 135 140
Thr Gly Gly Pro 145 (2) Informace pro SEQ ID NO: 65:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka; 230 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina io (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-79CZ 300688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 65:
Thr Ser Asn Arg Pro Ala Arg Arg Gly Arg Arg Ala Pro Arg Asp Thr 15 10 15
Gly Pro Asp Arg Ser Ala Ser Leu Ser Leu Val Arg His Arg Arg Gin 20 25 30
Gin Arg Asp Ala Leu Cys Leu Ser Ser Thr Gin Ile Ser Arg Gin Ser 35 40 45
Asn Leu Pro Pro Ala Ala Gly Gly Ala Ala Asn Tyr Ser Arg Arg Asn 50 55 60
Phe Asp Val Arg Ile Lys Ile Phe Met Leu Val Thr Ala Val Val Leu
70 75 80
Leu Cys Cys Ser Gly Val Ala Thr Ala Ala Pro Lys Thr Tyr Cys Glu
90 95
Glu Leu Lys G1y Thr Asp Thr Gly Gin Ala Cys Gin Ile Gin Met Ser 100 105 110
Asp Pro Ala Tyr Asn Ile Asn Ile Ser Leu Pro Ser Tyr Tyr Pro Asp 115 120 125
Gin Lys Ser Leu Glu Asn Tyr Ile Ala Gin Thr Arg Asp Lys Phe Leu 130 135 140
Ser Ala Ala Thr Ser Ser Thr Pro Arg Glu Ala Pro Tyr Glu Leu Asn
145 150 155 160
Ile Thr Ser Ala Thr Tyr Gin Ser Ala Ile Pro Pro Arg Gly Thr Gin
165 170 175
Ala Val Val Leu Xaa Val Tyr His Asn Ala Gly Gly Thr His Pro Thr 180 185 190
Thr Thr Tyr Lys Ala Phe Asp Trp Asp Gin Ala Tyr Arg Lys Pro Ile 195 200 205
Thr Tyr Asp Thr Leu Trp Gin Ala Asp Thr Asp Pro Leu Pro Val Val
210 215 220
Phe Pro Ile Val Ala Arg 225 230
-80UV (2) Informace pro SEQ ID NO: 66:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 132 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 66:
Thr Ala Ala Ser Asp Asn Phe Gin Leu Ser Gin Gly Gly Gin Gly Phe 15 10 15
Ala Ile Pro Ile Gly Gin Ala Met Ala Ile Ala Gly Gin Ile Arg Ser 20 25 30
Gly Gly Gly Ser Pro Thr Val His Ile Gly Pro Thr Ala Phe Leu Gly 35 40 45
Leu Gly Val Val Asp Asn Asn Gly Asn Gly Ala Arg Val Gin Arg Val 50 55 60
Val Gly Ser Ala Pro Ala Ala Ser Leu Gly Ile Ser Thr Gly Asp Val
70 75 80
Ile Thr Ala Val Asp Gly Ala Pro Ile Asn Ser Ala Thr Ala Met Ala
90 95
Asp Ala Leu Asn Gly His His Pro Gly Asp Val Ile Ser Val Asn Trp 100 105 110
Gin Thr Lys Ser Gly Gly Thr Arg Thr Gly Asn Val Thr Leu Ala Glu 115 120 125
Gly Pro Pro Ala 130 (2) Informace pro SEQ ID NO: 67:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 100 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-81 CL JUUOSS Bb (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 67:
Val Pro Leu Arg Ser Pro Ser Met Ser Pro Ser Lys Cys Leu Ala Ala 15 10 15
Ala Gin Arg Asn Pro Val Ile Arg Arg Arg Arg Leu Ser Asn Pro Pro 20 25 30
Pro Arg Lys Tyr Arg Ser Met Pro Ser Pro Ala Thr Ala Ser Ala Gly 35 40 45
Met Ala Arg Val Arg Arg Arg Ala Ile Trp Arg Gly Pro Ala Thr Xaa 50 55 60
Ser Ala Gly Met Ala Arg Val Arg Arg Trp Xaa Val Met Pro Xaa Val
70 75 80
Ile Gin Ser Thr Xaa Ile Arg Xaa Xaa Gly Pro Phe Asp Asn Arg Gly
90 95
Ser Glu Arg Lys 100 (2) Informace pro SEQ ID NO: 68:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 163 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-82(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 68:
Het Thr Asp Asp Ile Leu Leu Ile Asp Thr Asp Glu Arg Val Arg Thr 15 10 15
Leu Thr Leu Asn Arg Pro Gin Ser Arg Asn Ala Leu Ser Ala Ala Leu 20 25 30
Arg Asp Arg Phe Phe Ala Xaa Leu Xaa Asp Ala Glu Xaa Asp Asp Asp 35 40 45
Ile Asp Val Val Ile Leu Thr Gly Ala Asp Pro Val Phe Cys Ala Gly 50 55 60
Leu Asp Leu Lys Val Ala Gly Arg Ala Asp Arg Ala Ala Gly His Leu
70 75 80
Thr Ala Val Gly Gly His Asp Gin Ala Gly Asp Arg Arg Asp Gin Arg
90 95
Arg Arg Gly His Arg Arg Ala Arg Thr Gly Ala Val Leu Arg His Pro 100 105 110
Asp Arg Leu Arg Ala Arg Pro Leu Arg Arg His Pro Arg Pro Gly Gly 115 120 125
Ala Ala Ala His Leu Gly Thr Gin Cys Val Leu Ala Ala Lys Gly Arg 130 135 140
His Arg Xaa Gly Pro Val Asp Glu Pro Asp Arg Arg Leu Pro Val Arg 145 150 155 160
Asp Arg Arg (2) Informace pro SEQ ID NO: 69:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 344 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý io (D) Topologie: lineární
-83CZ 300688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 69:
Met Lys Phe Val Asn His Ile Glu Pro Val Ala Pro Arg Arg Ala Gly 15 10 15
Gly Ala Val Ala Glu Val Tyr Ala Glu Ala Arg Arg Glu Phe Gly Arg 20 25 30
Leu Pro Glu Pro Leu Ala Met Leu Ser Pro Asp Glu Gly Leu Leu Thr 35 40 45
Ala Gly Trp Ala Thr Leu Arg Glu Thr Leu Leu Val Gly Gin Val Pro 50 55 60
Arg Gly Arg Lys Glu Ala Val Ala Ala Ala Val Ala Ala Ser Leu Arg
70 75 80
Cys Pro Trp Cys Val Asp Ala His Thr Thr Met Leu Tyr Ala Ala Gly
90 95
Gin Thr Asp Thr Ala Ala Ala Ile Leu Ala Gly Thr Ala Pro Ala Ala 100 105 110
Gly Asp Pro Asn Ala Pro Tyr Val Ala Trp Ala Ala Gly Thr Gly Thr 115 120 125
Pro Ala Gly Pro Pro Ala Pro Phe Gly Pro Asp Val Ala Ala Glu Tyr 130 135 140
Leu Gly Thr Ala Val Gin Phe His Phe Ile Ala Arg Leu Val Leu Val
145 150 155 160
Leu Leu Asp Glu Thr Phe Leu Pro Gly Gly Pro Arg Ala Gin Gin Leu
165 170 175
-84fc/VVVW MV
Met Arg Arg Ala Gly Gly Leu Val Phe Ala Arg Lys Val Arg Ala Glu 180 185 190
His Arg Pro Gly Arg Ser Thr Arg Arg Leu Glu Pro Arg Thr Leu Pro 195 200 205
Asp Asp Leu Ala Trp Ala Thr Pro Ser Glu Pro Ile Ala Thr Ala Phe 210 215 220
Ala Ala Leu Ser His His Leu Asp Thr Ala Pro His Leu Pro Pro Pro
225 230 235 240
Thr Arg Gin Val Val Arg Arg Val Val Gly Ser Trp His Gly Glu Pro
245 250 255
Met Pro Met Ser Ser Arg Trp Thr Asn Glu His Thr Ala Glu Leu Pro 260 265 270
AT a Asp Leu His Ala Pro Thr Arg Leu Ala Leu Leu Thr Gly Leu Ala 275 280 285
Pro His Gin Val Thr Asp Asp Asp Val Ala Ala Ala Arg Ser Leu Leu 290 295 300
Asp Thr Asp Ala Ala Leu Val Gly Ala Leu Ala Trp Ala Ala Phe Thr
305 310 315 320
Ala Ala Arg Arg Ile Gly Thr Trp Ile Gly Ala Ala Ala Glu Gly Gin
325 330 335
Val Ser Arg Gin Asn Pro Thr Gly 340 (2) Informace pro SEQ ID NO: 70:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 485 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-85CZ JUUO»» Bt) (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 70:
Asp Asp Pro Asp Met Pro Gly Thr Val Ala Lys Ala Val Ala Asp Ala 15 10 15
Leu Gly Arg Gly lle Ala Pro Val Glu Asp lle Gin Asp Cys Val Glu 20 25 30
Ala Arg Leu Gly Glu Ala Gly Leu Asp Asp Val Ala Arg Val Tyr lle
40 45 lle Tyr Arg Gin Arg Arg Ala Glu Leu Arg Thr Ala Lys Ala Leu Leu 50 55 60
Gly Val Arg Asp Glu Leu Lys Leu Ser Leu Ala Ala Val Thr Val Leu
70 75 80
Arg Glu Arg Tyr Leu Leu His Asp Glu Gin Gly Arg Pro Ala Glu Ser
90 95
Thr Gly Glu Leu Met Asp Arg Ser Ala Arg Cys Val Ala Ala Ala Glu 100 105 110
Asp Gin Tyr Glu Pro Gly Ser Ser Arg Arg Trp Ala GlU Arg Phe Ala 115 120 125
Thr Leu Leu Arg Asn Leu Glu Phe Leu Pro Asn Ser Pro Thr Leu Met 130 135 140
Asn Ser Gly Thr Asp Leu Gly Leu Leu Ala Gly Cys Phe Val Leu Pro
145 150 155 160 lle Glu Asp Ser Leu Gin Ser lle Phe Ala Thr Leu Gly Gin Ala Ala
165 170 175
Glu Leu Gin Arg Ala Gly Gly Gly Thr Gly Tyr Ala Phe Ser His Leu 180 185 190
Arg Pro Ala Gly Asp Arg Val Ala Ser Thr Gly Gly Thr Ala Ser Gly 195 200 205
Pro Val Ser Phe Leu Arg Leu Tyr Asp Ser Ala Ala Gly Val Val Ser 210 215 220
-86Met Gly Gly Arg Arg Arg Gly Ala Cys Met Ala Val Leu Asp Val Ser
225 230 235 240
His Pro Asp Ile Cys Asp Phe Val Thr Ala Lys Ala Glu Ser Pro Ser
245 250 255
Glu Leu Pro His Phe Asn Leu Ser Val Gly Val Thr Asp Ala Phe Leu 260 265 270
Arg Ala Val Glu Arg Asn Gly Leu His Arg Leu Val Asn Pro Arg Thr 275 280 285
Gly Lys Ile Val Ala Arg Met Pro Ala Ala Glu Leu Phe Asp Ala Ile 290 295 300
Cys Lys Ala Ala His Ala Gly Gly Asp Pro Gly Leu Val Phe Leu Asp
305 310 315 320
Thr Ile Asn Arg Ala Asn Pro Val Pro Gly Arg Gly Arg Ile Glu Ala
325 330 335
Thr Asn Pro Cys Gly Glu Val Pro Leu Leu Pro Tyr Glu Ser Cys Asn 340 345 350
Leu Gly Ser Ile Asn Leu Ala Arg Met Leu Ala Asp Gly Arg Val Asp 355 360 365
Trp Asp Arg Leu Glu Glu Val Ala Gly Val Ala Val Arg Phe Leu Asp 370 375 380
Asp Val Ile Asp Val Ser Arg Tyr Pro Phe Pro Glu Leu Gly Glu Ala
385 390 395 400
Ala Arg Ala Thr Arg Lys Ile Gly Leu Gly Val Met Gly Leu Ala Glu
405 410 415
Leu Leu Ala Ala Leu Gly Ile Pro Tyr Asp Ser Glu Glu Ala Val Arg 420 425 430
Leu Ala Thr Arg Leu Met Arg Arg Ile Gin Gin Ala Ala His Thr TLI a 435 440 445
Ser Arg Arg Leu Ala 61u Glu Arg Gly Ala Phe Pro Ala Phe Thr Asp 450 455 460
-87CZ 300688 B6
Ser Arg Phe Ala Arg Ser Gly Pro Arg Arg Asn Ala Gin Val Thr Ser 465 470 475 480
Val Ala Pro Thr Gly 485 (2) Informace pro SEQ ID NO: 71:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 267 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 71:
Gly Val Ile Val Leu Asp Leu Glu Pro Arg Gly Pro Leu Pro Thr Glu 15 10 15
Ile Tyr Trp Arg Arg Arg Gly Leu Ala Leu Gly Ile Ala Val Val Val 20 25 30
Val Gly Ile Ala Val Ala Ile Val Ile Ala Phe Val Asp Ser Ser Ala 35 40 45
Gly Ala Lys Pro Val Ser Ala Asp Lys Pro Ala Ser Ala Gin Ser His 50 55 60
Pro Gly Ser Pro Ala Pro Gin Ala Pro Gin Pro Ala Gly Gin Thr Glu
70 75 80
Gly Asn Ala Ala Ala Ala Pro Pro Gin Gly Gin Asn Pro Glu Thr Pro
90 95
Thr Pro Thr Ala Ala Val Gin Pro Pro Pro Val Leu Lys Glu Gly Asp 100 105 110
Asp Cys Pro Asp Ser Thr Leu Ala Val Lys Gly Leu Thr Asn Ala Pro
115 120 125
Gin Tyr Tyr Val Gly Asp Gin Pro Lys Phe Thr Met Val Val Thr Asn
-88fe/WVUU UV
Ile Gly Leu Val Ser Cys Lys Arg Asp Val Gly Ala Ala Val Leu Ala
145 150 155 160
Ala Tyr Val Tyr Ser Leu Asp Asn Lys Arg Leu Trp Ser Asn Leu Asp
165 170 175
Cys Ala Pro Ser Asn Glu Thr Leu Val Lys Thr Phe Ser Pro Gly Glu 180 185 190
Gin Val Thr Thr Ala Val Thr Trp Thr Gly Met Gly Ser Ala Pro Arg 195 200 205
Cys Pro Leu Pro Arg Pro Ala Ile Gly Pro Gly Thr Tyr Asn Leu Val 210 215 220
Val Gin Leu Gly Asn Leu Arg Ser Leu Pro Val Pro Phe Ile Leu Asn
225 230 235 240
Gin Pro Pro Pro Pro Pro Gly Pro Val Pro Ala Pro Gly Pro Ala Gin
245 250 255
Ala Pro Pro Pro Glu Ser Pro Ala Gin Gly Gly 260 265 (2) Informace pro SEQ ID NO: 72:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 97 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 72:
Leu Ile Ser Thr Gly Lys Ala Ser His Ala Ser Leu Gly Val Gin Val 15 10 15
Thr Asn Asp Lys Asp Thr Pro Gly Ala Lys Ile Val Glu Val Val Ala 20 25 30
-89CZ 300688 B6
Gly Gly Ala Ala Ala Asn Ala Gly 35 40
Lys Val Asp Asp Arg Pro Ile Asn 50 55
Val Arg Ser Lys Ala Pro Gly Ala 65 70
Pro Ser Gly Gly Ser Arg Thr Val 85
Gin
Val Pro Lys Gly Val Val Val Thr
45
Ser Ala Asp Ala Leu Val Ala Ala
60
Thr Val Ala Leu Thr Phe Gin Asp
75 80
Gin Val Thr Leu Gly Lys Ala Glu
90 95
(2) Informace pro SEQ ID NO: 73:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 364 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 73:
Gly Ala Ala Val Ser Leu Leu Ala Ala Gly Thr Leu Val Leu Thr Ala 15 10 15
Cys Gly Gly Gly Thr Asn Ser Ser Ser Ser Gly Ala Gly Gly Thr Ser 20 25 30
Gly Ser Val His Cys Gly Gly Lys Lys Glu Leu His Ser Ser Gly Ser 35 40 45
Thr Ala Gin Glu Asn Ala Met Glu Gin Phe Val Tyr Ala Tyr Val Arg 50 55 60
Ser Cys Pro Gly Tyr Thr Leu Asp Tyr Asn Ala Asn Gly Ser Gly ATa 65 70 75 80
- Qft.
ι-'Μ
Gly Val Thr Gin Phe Leu Asn Asn Glu Thr Asp Phe Ala Gly Ser Asp 85 90 95
Val Pro Leu Asn Pro Ser Thr Gly Gin Pro Asp Arg Ser Ala Glu Arg 100 105 110
Cys Gly Ser Pro Ala Trp Asp Leu Pro Thr Val Phe Gly Pro Ile Ala 115 120 125
Ile Thr Tyr Asn Ile Lys Gly Val Ser Thr Leu Asn Leu Asp Gly Pro 130 135 140
Thr Thr Ala Lys Ile Phe Asn Gly Thr Ile Thr Val Trp Asn Asp Pro
145 150 155 160
Gin Ile Gin Ala Leu Asn Ser Gly Thr Asp Leu Pro Pro Thr Pro Ile
165 170 175
Ser Val Ile Phe Arg Ser Asp Lys Ser Gly Thr Ser Asp Asn Phe Gin 180 185 190
Lys Tyr Leu Asp Gly Val Ser Asn Gly Ala Trp Gly Lys Gly Ala Ser 195 200 205
Glu Thr Phe Ser Gly Gly Val Gly Val Gly Ala Ser Gly Asn Asn Gly 210 215 220
Thr Ser Ala Leu Leu Gin Thr Thr Asp Gly Ser Ile Thr Tyr Asn Glu
225 230 235 240
Trp Ser Phe Ala Val Gly Lys Gin Leu Asn Met Ala Gin Ile Ile Thr
245 250 255
Ser Ala Gly Pro Asp Pro Val Ala Ile Thr Thr Glu Ser Val Gly Lys 260 265 270
Thr Ile Ala Gly Ala Lys Ile Met Gly Gin Gly Asn Asp Leu Val Leu 275 280 285
Asp Thr Ser Ser Phe Tyr Arg Pro Thr Gin Pro Gly Ser Tyr Pro Ile 290 295 300
Val Leu Ala Thr Tyr Glu Ile Val Cys Ser Lys Tyr Pro Asp Ala Thr 305 310 315 320
-91 CL dUVWW B6
Thr Gly Thr Ala Val Arg Ala Phe Met Gin Ala Ala Ile Gly Pro Gly 325 330 335
Gin Glu Gly Leu Asp Gin Tyr Gly Ser Ile Pro Leu Pro Lys Ser Phe 340 345 350
Gin Ala Lys Leu Ala Ala Ala Val Asn Ala Ile Ser 355 350 (2) Informace pro SEQ ID NO: 74:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 309 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 74:
Gin Ala Ala Ala Gly Arg Ala Val Arg Arg Thr Gly His Ala Glu Asp 15 10 15
Gin Thr His Gin Asp Arg Leu His His Gly Cys Arg Arg Ala Ala Val 20 25 30
Val Val Arg Gin Asp Arg Ala Ser Val Ser Ala Thr Ser Ala Arg Pro 35 40 45
Pro Arg Arg His Pro Ala Gin Gly His Arg Arg Arg Val Ala Pro Ser 50 55 60
Gly Gly Arg Arg Arg Pro His Pro His His Val Gin Pro Asp Asp Arg
70 75 80
Arg Asp Arg Pro Ala Leu Leu Asp Arg Thr Gin Pro Ala Glu His Pro
90 95
Asp Pro His Arg Arg Gly Pro Ala Asp Pro Gly Arg Val Arg Gly Arg 100 105 110
Gly Arg Leu Arg Arg Val Asp Asp Gly Arg Leu Gin Pro Asp Arg Asp
-92Ala Asp His Gly Ala Pro Val Arg Gly Arg Gly Pro His Arg Gly Val 130 135 140
Gin His Arg Gly Gly Pro Val Phe Val Arg Arg Val Pro Gly Val Arg
145 150 155 160
Cys Ala His Arg Arg Gly His Arg Arg Val Ala Ala Pro Gly Gin Gly
165 170 175
Asp Val Leu Arg Ala Gly Leu Arg Val Glu Arg Leu Arg Pro Val Ala 180 185 190
Ala Val Glu Asn Leu His Arg Gly Ser Gin Arg Ala Asp Gly Arg Val 195 200 205
Phe Arg Pro Ile Arg Arg Gly Ala Arg Leu Pro Ala Arg Arg Ser Arg 210 215 220
Ala Gly Pro Gin Gly Arg Leu His Leu Asp Gly Ala Gly Pro Ser Pro
225 230 235 240
Leu Pro Ala Arg Ala Gly Gin Gin Gin Pro Ser Ser Ala Gly Gly Arg
245 250 255
Arg Ala Gly Gly Ala Glu Arg Ala Aso Pro Gly Gin Arg Gly Arg His 260 265 270
His Gin Gly Gly His Ašp Pro Gly Arg Gin Gly Ala Gin Arg Gly Thr 275 280 285
Ala Gly Val Ala His Ala Ala Ala Gly Pro Arg Arg Ala Ala Val Arg 290 295 300
Asn Arg Pro Arg Arg 305
-93CZ 300688 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 75:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 580 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 75:
Ser Ala Val Trp Cys Leu Asn Gly Phe Thr Gly Arg His Arg His Gly 15 10 15
Arg Cys Arg Val Arg Ala Ser Gly Trp Arg Ser Ser Asn Arg Trp Cys 20 25 30
Ser Thr Thr Ala Asp Cys Cys Ala Ser Lys Thr Pro Thr Gin Ala Ala 35 40 45
Ser Pro Leu Glu Arg Arg Phe Thr Cys Cys Ser Pro Ala Val Gly Cys 50 55 60
Arg Phe Arg Ser Phe Pro Val Arg Arg Leu Ala Leu Gly Ala Arg Thr
70 75 80
Ser Arg Thr Leu Gly Val Arg Arg Thr Leu Ser Gin Trp Asn Leu Ser
90 95
Pro Arg Ala Gin Pro Ser Cys Ala Val Thr Val Glu Ser His Thr His 100 105 110
Ala Ser Pro Arg Met Ala Lys Leu Ala Arg Val Val Gly Leu Val Gin 115 120 125
Glu Glu Gin Pro Ser Asp Met Thr Asn His Pro Arg Tyr Ser Pro Pro 130 135 140
Pro Gin Gin Pro Gly Thr Pro Gly Tyr Ala Gin Gly Gin Gin Gin Thr
145 150 155 160
Tyr Ser Gin Gin Phe Asp Trp Arg Tyr Pro Pro Ser Pro Pro Pro Gin
165 170 175
Pro Thr Gin Tyr Arg Gin Pro Tyr Glu Ala Leu Gly Gly Thr Arg Pro 180 185 190
Gly Leu Ile Pro Gly Val Ile Pro Thr Met Thr Pro Pro Pro Gly Met 195 200 205
-94·
VL· wwuu uv
Val Arg Gin Arg Pro Arg Ala Gly Met Leu Ala Ile Gly Ala Val Thr 210 215 220
Ile Alí^Val Val Ser Ala Gly Ile Gly Gly Ala Ala Ala Ser Leu Val
225 230 235 240
Gly Phe Asn Arg Ala Pro Ala Gly Pro Ser Gly Gly Pro Val Ala Ala
245 250 255
Ser Ala Ala Pro Ser Ile Pro Ala Ala Asn Met Pro Pro Gly Ser Val 260 265 270
Glu Gin Val Ala Ala Lys Val Val Pro Ser Val Val Met Leu Glu Thr 275 280 285
Asp Leu Gly Arg Gin Ser Glu Glu Gly Ser Gly Ile Ile Leu Ser Ala 290 295 300
Glu Gly Leu Ile Leu Thr Asn Asn His Val Ile Ala Ala Ala Ala Lys 305 310 315 320
Pro Pro Leu Gly Ser Pro Pro Pro Lys Thr Thr Val Thr Phe Ser Asp
325 330 335
Gly Arg Thr Ala Pro Phe Thr Val Val Gly Ala Asp Pro Thr Ser Asp
340 345 350
Ile Ala Val Val Arg Val Gin Gly Val Ser Gly Leu Thr Pro Ile Ser
355 360 365
Leu Gly Ser Ser Ser Asp Leu Arg Val Gly Gin Pro Val Leu Ala Ile
370 375 380
Gly Ser Pro Leu Gly Leu Glu Gly Thr Val Thr Thr Gly Ile Val Ser
385 390 395 400
Ala Leu Asn Arg Pro Val Ser Thr Thr Gly Glu Ala Gly Asn Gin Asn
405 410 415
Thr Val Leu Asp Ala Ile Gin Thr Asp Ala Ala Ile Asn Pro Gly Asn
420 425 430
Ser Gly Gly Ala Leu Val Asn Met Asn Ala Gin Leu Val Gly Val Asn 435 440 445
-95CZ JUU688 B6
Ser Ala Ile Ala Thr Leu Gly Ala Asp Ser Ala Asp Ala Gin Ser Gly
450 455 460
Ser ně Gly Leu Gly Phe Ala Ile Pro Val Asp Gin Ala Lys Arg Ile
465 470 475 480
Ala Asp Glu Leu Ile Ser Thr Gly Lys Ala Ser His Ala Ser Leu Gly
485 490 495
Val Gin Val Thr Asn Asp Lys Asp Thr Pro Gly Ala Lys Ile Val Glu
500 505 510
val Val Ala Gly Gly Ala Ala Ala Asn Ala Gly Val Pro Lys Gly Val
515 520 525
Val Val Thr Lys Val Asp Asp Arg Pro Ile Asn Ser Ala Asp Ala Leu
530 535 540
Val Ala Ala Val Arg Ser Lys Ala Pro Gly Ala Thr Val Ala Leu Thr
545 550 555 560
Phe Gin Asp Pro Ser Gly Gly Ser Arg Thr Val Gin Val Thr Leu Gly
565 570 575
Lys Ala Glu Gin 580 (2) Informace pro SEQ ID NO: 76:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 233 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 76:
Met Asn Asp Gly Lys Arg Ala Val Thr Ser Ala Val Leu Val Val Leu 15 10 15
Gly Ala Cys Leu Ala Leu Trp Leu Ser Gly Cys Ser Ser Pro Lys Pro 20 25 30
-96\-·<-ι h/υνυυυ uv
Asp Ala Glu Glu Gin Gly Val Pro Val Ser Pro Thr Ala Ser Asp Pro 35 40 45
Ala Leu Leu Ala Glu lle Arg Gin Ser Leu Asp Ala Thr Lys Gly Leu 50 55 60
Thr Ser Val His Val Ala Val Arg Thr Thr Gly Lys Val Asp Ser Leu
70 75 80
Leu Gly lle Thr Ser Ala Asp Val Asp Val Arg Ala Asn Pro Leu Ala
90 95
Ala Lys Gly Val Cys Thr Tyr Asn Asp Glu Gin Gly Val Pro Phe Arg 100 105 110
Val Gin Gly Asp Asn lle Ser Val Lys Leu Phe Asp Asp Trp Ser Asn 115 120 125
Leu Gly Ser lle Ser Glu Leu Ser Thr Ser Arg Val Leu Asp Pro Ala 130 13S 140
Ala Gly Val Thr Gin Leu Leu Ser Gly Val Thr Asn Leu Gin Ala Gin
145 150 155 160
Gly Thr Glu Val lle Asp Gly lle Ser Thr Thr Lys lle Thr Gly Thr
165 170 175 lle Pro Ala Ser Ser Val Lys Met Leu Asp Pro Gly Ala Lys Ser Ala 180 185 190
Arg Pro Ala Thr Val Trp lle Ala Gin Asp Gly Ser His His Leu Val 195 200 205
Arg Ala Ser lle Asp Leu Gly Ser Gly Ser lle Gin Leu Thr Gin Ser 210 215 220
Lys Trp Asn Glu Pro Val Asn Val Asp 225 230
-97CZ 300688 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 77:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 66 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 77:
Val Ile Asp Ile Ile Gly Thr Ser Pro Thr Ser Trp Glu Gin Ala Ala 15 10 15
Ala Glu Ala Val Gin Arg Ala Arg Asp Ser Val Asp Asp Ile Arg Val 20 25 30
Ala Arg Val Ile Glu Gin Asp Met Ala Val Asp Ser Ala Gly Lys Ile 35 40 45
Thr Tyr Arg Ile Lys Leu Glu Val Ser Phe Lys Met Arg Pro Ala Gin 50 55 60
Pro Arg (2) Informace pro SEQ ID NO: 78:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 69 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 78:
Val Pro Pro Ala Pro Pro Leu Pro Pro Leu Pro Pro Ser Pro Ile Ser 15 10 15
Cys Ala Ser Pro Pro Ser Pro Pro Leu Pro Pro Ala Pro Pro Val Ala 20 25 30
-98Vij uvuvuu uu
Pro Gly Pro Pro Met Pro Pro Leu Asp Pro Trp Pro Pro Ala Pro Pro 35 40 45
Leu Pro Tyr Ser Thr Pro Pro Gly Ala Pro Leu Pro Pro Ser Pro Pro 50 55 60
Ser Pro Pro Leu Pro (2) Informace pro SEQ ID NO: 79:
(i) Charakteristika sekvence;
(A) Délka: 355 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 79:
Met Ser Asn Ser Arg Arg Arg Ser Leu Arg Trp Ser Trp Leu Leu Ser 15 10 15
Val Leu Ala Ala Val Gly Leu Gly Leu Ala Thr Ala Pro Ala Gin Ala 20 25 30
Ala Pro Pro Ala Leu Ser Gin Asp Arg Phe Ala Asp Phe Pro Ala Leu 35 40 45
Pro Leu Asp Pro Ser Ala Met Val Ala Gin Val Ala Pro Gin Val Val 50 55 60
Asn Ile Asn Thr Lys Leu Gly Tyr Asn Asn Ala Val Gly Ala Gly Thr
70 75 80
Gly Ile Val Ile Asp Pro Asn Gly Val Val Leu Thr Asn Asn His Val
90 95
Ile Ala Gly Ala Thr Asp Ile Asn Ala Phe Ser Val Gly Ser Gly Gin 100 105 110
-99CZ JUUÓXX B6
Thr Tyr Gly Val Asp Val Val Gly Tyr Asp Arg Thr Gin Asp Val Ala
115 120 125
Vel Leu Gin Leu Arg Gly Ala Gly Gly Leu Pro Ser Ala Ala Ile Gly
130 135 140
Gly Gly Val Ala Val Gly Glu Pro Val Val Ala Met Gly Asn Ser Gly
145 150 155 160
Gly Gin Gly Gly Thr Pro Arg Ala Val Pro Gly Arg Val Val Ala Leu
165 170 175
Gly Gin Thr Val Gin Ala Ser Asp Ser Leu Thr Gly Ala Glu Glu Thr
180 185 190
Leu Asn Gly Leu Ile Gin Phe Asp Ala Ala Ile Gin Pro Gly Asp Ser
195 200 205
Gly Gly Pro Val Val Asn Gly Leu Gly Gin Val Val Gly Met Asn Thr
210 215 220
Ala Ala Ser Asp Asn Phe Gin Leu Ser Gin Gly Gly Gin Gly Phe Ala
225 230 235 240
Ile Pro Ile Gly Gin Ala Met Ala Ile Ala Gly Gin Ile Arg Ser Gly
245 250 255
Gly Gly Ser Pro Thr Val His Ile Gly Pro Thr Ala Phe Leu Gly Leu 260 265 270
Gly Val Val Asp Asn Asn Gly Asn Gly Ala Arg Val Gin Arg Val Val 275 230 285
Gly Ser Ala Pro Ala Ala Ser Leu Gly Ile Ser Thr Gly Asp Val Ile 290 295 300
Thr Ala Val Asp Gly Ala Pro Ile Asn Ser Ala Thr Ala Het Ala Asp
305 310 315 320
Ala Leu Asn Gly His His Pro Gly Asp Val Ile Ser Val Asn Trp Gin
325 330 335
Thr Lys Ser Gly Gly Thr Arg Thr Gly Asn Val Thr Leu Ala Glu Gly 340 345 350
Pro Pro Ala 355
- 100(2) Informace pro SEQ ID NO: 80: (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 205 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 80:
Ser Pro Lys Pro Asp Ala Glu Glu Gin Gly Val Pro Val Ser Pro Thr 15 10 15
Ala Ser Asp Pro Ala Leu Leu Ala Glu Ile Arg Gin Ser Leu Asp Ala 20 25 30
Thr Lys Gly Leu Thr Ser Val His Val Ala Val Arg Thr'Thr Gly Lys 35 40 45
Val Asp Ser Leu Leu Gly Ile Thr Ser Ala Asp Val Asp Val Arg Ala 50 55 60
Asn Pro Leu Ala Ala Lys Gly Val Cys Thr Tyr Asn Asp Glu Gin Gly
70 75 80
Val Pro Phe Arg Val Gin Gly Asp Asn Ile Ser Val Lys Leu Phe Asp
90 95
Asp Trp Ser Asn Leu Gly Ser Ile Ser Glu Leu Ser Thr Ser Arg Val 100 105 110
Leu Asp Pro Ala Ala Gly Val Thr Gin Leu Leu Ser Gly Val Thr Asn 115 120 125
Leu Gin Ala Gin Gly Thr Glu Val Ile Asp Gly Ile Ser Thr Thr Lys 130 135 140
Ile Thr Gly Thr Ile Pro Ala Ser Ser Val Lys Het Leu Asp Pro Gly
145 150 155 160
Ala Lys Ser Ala Arg Pro Ala Thr Val Trp Ile Ala Gin Asp Gly Ser
165 170 175
His His Leu Val Arg Ala Ser Ile Asp Leu Gly Ser Gly Ser Ile Gin 180 185 190
Leu Thr Gin Ser Lys Trp Asn Glu Pro Val Asn Val Asp 195 200 205
- 101 LZ JUUD8S BO (2) Informace pro SEQ ID NO: 81:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 286 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 81:
Gly Asp Ser Phe Trp Ala Ala Ala Asp Gin Met Ala Arg Gly Phe Val 15 10 15
Leu Gly Ala Thr Ala Gly Arg Thr Thr Leu Thr Gly Glu Gly Leu Gin 20 25 30
His Ala Asp Gly His Ser Leu Leu Leu Asp Ala Thr Asn Pro Ala Val 35 40 45
Val Ala Tyr Asp Pro Ala Phe Ala Tyr Glu Ile Gly Tyr Ile Xaa Glu 50 55 60
Ser Gly Leu Ala Arg Met Cys Gly Glu Asn Pro Glu Asn Ile Phe Phe
70 75 80
Tyr Ile Thr Val Tyr Asn Glu Pro Tyr Val Gin Pro Pro Glu Pro Glu
90 95
Asn Phe Asp Pro Glu Gly Val Leu Gly Gly Ile Tyr Arg Tyr His Ala 100 105 110
- 102Ala Thr Glu Gin Arg Thr Asn Lys Xaa Gin Ile Leu Ala Ser Gly Val 115 120 125
Ala Met Pro Ala Ala Leu Arg Ala Ala Gin Met Leu Ala Ala Glu Trp 130 135 140
Asp Val Ala Ala Asp Val Trp Ser Val Thr Ser Trp Gly Glu Leu Asn
145 150 155 160
Arg Asp Gly Val Val Ile Glu Thr Glu Lys Leu Arg His Pro Asp Arg
165 170 175
Pro Ala Gly Val Pro Tyr Val Thr Arg Ala Leu Glu Asn Ala Arg Gly 180 185 190
Pro Val Ile Ala Val Ser Asp Trp Met Arg Ala Val Pro Glu Gin Ile 195 200 205
Arg Pro Trp Val Pro Gly Thr Tyr Leu Thr Leu Gly Thr Asp Gly Phe 210 215 220
Gly Phe Ser Asp Thr Arg Pro Ala Gly Arg Arg Tyr Phe Asn Thr Asp
225 230 235 240
Ala Glu Ser Gin Val Gly Arg Gly Phe Gly Arg Gly Trp Pro Gly Arg
245 250 255
Arg Val Asn Ile Asp Pro Phe Gly Ala Gly Arg Gly Pro Pro Ala Gin 260 265 270
Leu Pro Gly Phe Asp Glu Gly Gly Gly Leu Arg Pro Xaa Lys 275 280 285
- 103(2) Informace pro SEQ ID NO: 82:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 173 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 82:
Thr Lys Phe His Ala Leu Met Gin Glu Gin Ile His Asn Glu Phe Thr 15 10 15
Ala Ala Gin Gin Tyr Val Ala Ile Ala Val Tyr Phe Asp Ser Glu Asp 20 25 30
Leu Pro Gin Leu Ala Lys His Phe Tyr Ser Gin Ala Val Glu Glu Arg 35 40 45
Asn His Ala Het Met Leu Val Gin His Leu Leu Asp Arg Asp Leu Arg 50 55 60
Val Glu Ile Pro Gly Val Asp Thr Val Arg Asn Gin Phe Asp Arg Pro
70 75 80
Arg Glu Ala Leu Ala Leu Ala Leu Asp Gin Glu Arg Thr Val Thr Asp
90 95
Gin Val Gly Arg Leu Thr Ala Val Ala Arg Asp Glu Gly Asp Phe Leu 100 105 110
Gly Glu Gin Phe Met Gin Trp Phe Leu Gin Glu Gin Ile Glu Glu Val 115 120 125
Ala Leu Met Ala Thr Leu Val Arg Val Ala Asp Arg Ala Gly Ala Asn 130 135 140
Leu Phe Glu Leu Glu Asn Phe Val Ala Arg Glu Val Asp Val Ala Pro 145 150 155 160
Ala Ala Ser Gly Ala Pro His Ala Ala Gly Gly Arg Leu 165 170
-104w/VWWJ UV (2) Informace pro SEQ ID NO: 83: (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 107 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 83:
Arg Ala Asp Glu Arg Lys Asn Thr Thr Met Lys Met Val Lys Ser Ile 15 10 15
Ala Ala Gly Leu Thr Ala Ala Ala Ala Ile Gly Ala Ala Ala Ala Gly 20 25 30
Val Thr Ser Ile Met Ala Gly Gly Pro Val Val Tyr Gin Met Gin Pro 35 40 45
Val Val Phe Gly Ala Pro Leu Pro Leu Asp Pro Xaa Ser Ala Pro Xaa 50 55 60
Val Pro Thr Ala Ala Gin Trp Thr Xaa Leu Leu Asn Xaa Leu Xaa Asp
70 75 80
Pro Asn Val Ser Phe Xaa Asn Lys Gly Ser Leu Val Glu Gly Gly Ile
90 95
Gly Gly Xaa Glu Gly Xaa Xaa Arg Arg Xaa Gin 100 105 (2) informace pro SEQ ID NO: 84:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 125 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
105CZ 3UU688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO; 84:
Val Leu Ser Val Pro Val Gly Asp Gly Phe Trp Xaa Arg Val Val Asn
10 15
Pro Leu Gly Gin Pro Ile Asp Gly Arg Gly Asp Val Asp Ser Asp Thr 20 25 30
Arg Arg Ala Leu Glu Leu Gin Ala Pro Ser Val Val Xaa Arg Gin Gly 35 40 45
Val Lys Glu Pro Leu Xaa Thr Gly Ile Lys Ala Ile Asp Ala Met Thr 50 55 60
Pro Ile Gly Arg Gly Gin Arg Gin Leu Ile Ile Gly Asp Arg Lys Thr
70 75 80
Gly Lys Asn Arg Arg Leu Cys Arg Thr Pro Ser Ser Asn Gin Arg Glu
90 95
Glu Leu Gly Val Arg Trp Ile Pro Arg Ser Arg Cys Ala Cys Val Tyr 100 105 110
Val Gly His Arg Ala Arg Arg Gly Thr Tyr His Arg Arg 115 120 125 (2) Informace pro SEQ ID NO: 85:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 117 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý to (D) Topologie: lineární
- 106uv (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 85:
Cys Asp Ala Val Met Gly Phe Leu Gly Gly Ala Gly Pro Leu Ala Val 15 10 15
Val Asp Gin Gin Leu Val Thr Arg Val Pro Gin Gly Trp Ser Phe Ala 20 25 30
Gin Ala Ala Ala Val Pro Val Val Phe Leu Thr Ala Trp Tyr Gly Leu 35 40 45
Ala Asp Leu Ala Glu lle Lys Ala Gly Glu Ser Val Leu lle His Ala 50 55 60
Gly Thr Gly Gly Val Gly Met Ala Ala Val Gin Leu Ala Arg Gin Trp 65 70 75 00
Gly Val Glu Val Phe Val Thr Ala Ser Arg Gly Lys Trp Asp Thr Leu
90 95
Arg Ala Xaa Xaa Phe Asp Asp Xaa Pro Tyr Arg Xaa Phe Pro His Xaa 100 105 110
Arg Ser Ser Xaa Gly 115 (2) Informace pro SEQ ID NO: 86:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 103 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
107Cl 300688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 86:
Met Tyr Arg Phe Ala Cys Arg Thr Leu Met Leu Ala Ala Cys Ile Leu 15 10 15
Ala Thr Gly Val Ala Gly Leu Gly Val Gly Ala Gin Ser Ala Ala Gin 20 25 30
Thr Ala Pro Val Pro Asp Tyr Tyr Trp Cys Pro Gly Gin Pro Phe Asp 35 40 45
Pro Ala Trp Gly Pro Asn Trp Asp Pro Tyr Thr Cys His Asp Asp Phe 50 55 60
His Arg Asp Ser Asp Gly Pro Asp His Ser Arg Asp Tyr Pro Gly Pro
70 75 80
Ile Leu Glu Gly Pro Val Leu Asp Asp Pro Gly Ala Ala Pro Pro Pro
90 95
Pro Ala Ala Gly Gly Gly Ala 100 (2) Informace pro SEQ ID NO: 87:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 88 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý io (D) Topologie: lineární
- ins.
juuuoo du (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 87:
Val Gin Cys Arg Val Trp Leu Glu Ile Gin Trp Arg Gly Met Leu Gly 15 10 15
Ala Asp Gin Ala Arg Ala Gly Gly Pro Ala Arg Ile Trp Arg Glu His 20 25 30
Ser Met Ala Ala Met Lys Pro Arg Thr Gly Asp Gly Pro Leu Glu Ala 35 40 45
Thr Lys Glu Gly Arg Gly Ile Val Met Arg Val Pro Leu Glu Gly Gly 50 55 60
Gly Arg Leu Val Val Glu Leu Thr Pro Asp Glu Ala Ala Ala Leu Gly 65 70 75 80
Asp Glu Leu Lys Gly Val Thr Ser 85 (2) Informace pro SEQ ID NO: 88:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 95 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý io (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 88:
Thr Asp Ala Ala Thr Leu Ala Gin Glu Ala Gly Asn Phe Glu Arg Ile 15 10 15
Ser Gly Asp Leu Lys Thr Gin Ile Asp Gin Val Glu Ser Thr Ala Gly 20 25 30
Ser Leu Gin Gly Gin Trp Arg Gly Ala Ala Gly Thr Ala Ala Gin Ala 35 40 45
Ala Val Val Arg Phe Gin Glu Ala Ala Asn Lys Gin Lys Gin Glu Leu 50 55 60
Asp Glu Ile Ser Thr Asn Ile Arg Gin Ala Gly Val Gin Tyr Ser Arg 65 70 75 80
Ala Asp Glu Glu Gin Gin Gin Ala Leu Ser Ser Gin Het Gly Phe 85 90 95
- 109CZ 300688 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 89:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 166 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 89:
Met Thr Gin Ser Gin Thr Val Thr Val Asp Gin Gin Glu Ile Leu Asn 15 10 15
Arg Ala Asn Glu Val Glu Ala Pro Met Ala Asp Pro Pro Thr Asp Val 20 25 30
Pro Ile Thr Pro Cys Glu Leu Thr Xaa Xaa Lys Asn Ala Ala Gin Gin 35 40 45
Xaa Val Leu Ser Ala Asp Asn Met Arg Glu Tyr Leu Ala Ala Gly Ala 50 55 60
Lys Glu Arg Gin Arg Leu Ala Thr Ser Leu Arg Asn Ala Ala Lys Xaa
70 75 80
Tyr Gly Glu Val Asp Glu Glu Ala Ala Thr Ala Leu Asp Asn Asp Gly
90 95
Glu Gly Thr Val Gin Ala Glu Ser Ala Gly Ala Val Gly Gly Asp Ser 100 105 110
Ser Ala Glu Leu Thr Asp Thr Pro Arg Val Ala Thr Ala Gly Glu Pro 115 120 125
Asn Phe Met Asp Leu Lys Glu Ala Ala Arg Lys Leu Glu Thr Gly Asp 130 135 140
Gin Gly Ala Ser Leu Ala His Xaa G1y Asp Gly Trp Asn Thr Xaa Thr 145 150 155 160
Leu Thr Leu Gin Gly Asp 165
- no Vij fcřVVVUO 1JU (2) Informace pro SEQ ID NO: 90:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 5 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 90:
Arg Ala Glu Arg Met 1 5 (2) Informace pro SEQ ID NO: 91:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 263 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xt) Popis sekvence: SEQ ID NO: 91:
Val Ala Trp Met Ser Val Thr Ala Gly Gin Ala Glu Leu Thr Ala Ala 15 10 15
Gin Val Arg Val Ala Ala Ala Ala Tyr Glu Ttir Ala Tyr Gly Leu Thr 20 25 30
Val Pro Pro Pro Val Ile Ala Glu Asn Arg Ala Glu Leu Met Ile Leu 35 40 45
Ile Ala Thr Asn Leu Leu Gly Gin Asn Thr Pro Ala Ile Ala Val Asn 50 55 60
Glu Ala Glu Tyr Gly Glu Met Trp Ala GTn Asp Ala Ala Ala Met Phe
70 75 80
Gly Tyr Ala Ala Ala Thr Ala Thr Ala Thr Ala Thr Leu Leu Pro Phe
90 95
Glu Glu Ala Pro Glu Met Thr Ser Ala Gly Gly Leu Leu Glu Gin Ala 100 105 110
Ala Ala Val Glu Glu Ala Ser Asp Thr Ala Ala Ala Asn Gin Leu Met 115 120 125
Asn Asn Val Pro Gin Ala Leu Lys Gin Leu Ala Gin Pro Thr Gin Gly 130 135 140
Thr Thr Pro Ser Ser Lys Leu Gly Gly Leu Trp Lys Thr Val Ser Pro
145 150 155 160
His Arg Ser Pro Ile Ser Asn Met Val Ser Met Ala Asn Asn His Met
165 170 175
Ser Met Thr Asn Ser Gly Val Ser Met Thr Asn Thr Leu Ser Ser Met 180 185 190
Leu Lys Gly Phe Ala Pro Ala Ala Ala Ala Gin Ala Val Gin Thr Ala
- 112195
200
205
Ala Gin Asn Gly Val Arg Ala Met Ser Ser Leu Gly Ser Ser Leu Gly 210 215 220
Ser Ser Gly Leu Gly Gly Gly Val Ala Ala Asn Leu Gly Arg Ala Ala
225 230 235 240
Ser Val Arg Tyr Gly His Arg Asp Gly Gly Lys Tyr Ala Xaa Ser Gly
245 250 255
Arg Arg Asn Gly Gly Pro Ala 260 (2) Informace pro SEQ ID NO: 92:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 303 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 92:
Met Thr Tyr Ser Pro Gly Asn Pro Gly Tyr Pro Gin Ala Gin Pro Ala 15 10 15
Gly Ser Tyr Gly Gly Val Thr Pro Ser Phe Ala His Ala Asp Glu Gly 20 25 30
Ala Ser Lys Leu Pro Met Tyr Leu Asn Ile Ala Val Ala Val Leu Gly 35 40 45
Leu Ala Ala Tyr Phe Ala Ser Phe Gly Pro Met Phe Thr Leu Ser Thr 50 55 60
Glu Leu Gly Gly Gly Asp Gly Ala Val Ser Gly Asp Thr Gly Leu Pro
70 75 80
Val Gly Val Ala Leu Leu Ala Ala Leu Leu Ala Gly Val Val Leu Val
90 95
-113Pro Lys Ala Lys Ser His Val Thr Val Val Ala Val Leu Gly Val Leu 100 105 110
Gly Val Phe Leu Met Val Ser Ala Thr Phe Asn Lys Pro Ser Ala Tyr 115 120 125
Ser Thr Gly Trp Ala Leu Trp Val Val Leu Ala Phe Ile Val Phe Gin 130 135 140
Ala Val Ala Ala Val Leu Ala Leu Leu Val Glu Thr Gly Ala Ile Thr
145 150 155 160
Ala Pro Ala Pro Arg Pro Lys Phe Asp Pro Tyr Gly Gin Tyr Gly Arg
165 170 175
Tyr Gly Gin Tyr Gly Gin Tyr Gly Val Gin Pro Gly Gly Tyr Tyr Gly 180 185 190
Gin Gin Gly Ala Gin Gin Ala Ala Gly Leu Gin Ser Pro Gly Pro Gin 195 200 205
Gin Ser Pro Gin Pro Pro Gly Tyr Gly Ser Gin Tyr Gly Gly Tyr Ser 210 215 220
Ser Ser Pro Ser Gin Ser Gly Ser Gly Tyr Thr Ala Gin Pro Pro Ala
225 230 235 240
Gin Pro Pro Ala Gin Ser Gly Ser Gin Gin Ser His Gin Gly Pro Ser
245 250 255
Thr Pro Pro Thr Gly Phe Pro Ser Phe Ser Pro Pro Pro Pro Val Ser 260 265 270
Ala Gly Thr Gly Ser Gin Ala Gly Ser Ala Pro Val Asn Tyr Ser Asn 275 280 285
Pro Ser Gly Gly Glu Gin Ser Ser Ser Pro Gly Gly Ala Pro Val 290 295 300
-114(2) Informace pro SEQ ID NO: 93:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 28 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec; jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 93:
Gly Cys Gly Glu Thr Asp Ala Ala Thr Leu Ala Gin Glu Ala Gly Asn 15 10 15
Phe Glu Arg Ile Ser Gly Asp Leu Lys Thr Gin Ile 20 25 (2) Informace pro SEQ ID NO: 94:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 16 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec; jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 94:
Asp Gin Val Glu Ser Thr Ala Gly Ser Leu Gin Gly Gin Trp Arg Gly 15 10 15 (2) Informace pro SEQ ID NO: 95:
(i) Charakteristika sekvence;
(A) Délka: 27 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 95:
Gly Cys Gly Ser Thr Ala Gly Ser Leu Gin Gly Gin Trp Arg Gly Ala 15 10 15
Ala Gly Thr Ala Ala Gin Ala Ala Val Val Arg 20 25
-115CZ 300688 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 96:
(i) Charakteristika sekvence:
(Λ) Délka: 27 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 96:
Gly Cys Gly Gly Thr Ala Ala Gin Ala Ala Val Val Arg Phe Gin Glu 15 10 15
Ala Ala Asn Lys Gin Lys Gin Glu Leu Asp Glu 20 25 (2) Informace pro SEQ ID NO: 97:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 27 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 97:
Gly Cys Gly Ala Asn Lys Gin Lys Gin Glu Leu Asp Glu Ile Ser Thr 15 10 15
Asn Ile Arg Gin Ala Gly Val Gin Tyr Ser Arg 20 25 (2) Informace pro SEQ ID NO: 98:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 28 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 98:
Gly Cys Gly Ile Arg Gin Ala Gly Val Gin Tyr Ser Arg Ala Asp Glu 15 10 15
Glu Gin Gin Gin Ala Leu Ser Ser Gin Met Gly Phe 20 25
-116wvww uv (2) Informace pro SEQ ID NO: 99:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 507 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 99:
ATGAAGATGG TGAAATCGAT CGCCGCAGGT CTGACCGCCG CGGCTGCAAT CGGCGCCGCT 60
GCGGCCGGTG TGACTTCGAT CATGGCTGGC GGCCCGGTCG TATACCAGAT GCAGCCGGTC 120
GTCTTCGGCG CGCCACTGCC GTTGGACCCG GCATCCGCCC CTGACGTCCC GACCGCCGCC 180
CAGTTGACCA GCCTGCTCAA CAGCCTCGCC GATCCCAACG TGTCGTTTGC GAACAAGGGC 240
AGTCTGGTCG AGGGCGGCAT CGGGGGCACC GAGGCGCGCA TCGCCGACCA CAAGCTGAAG 300
AAGGCCGCCG AGCACGGGGA TCTGCCGCTG TCGTTCAGCG TGACGAACAT CCAGCCGGCG 360
GCCGCCGGTT CGGCCACCGC CGACGTTTCC GTCTCGGGTC CGAAGCTCTC GTCGCCGGTC 420
ACGCAGAACG TCACGTTCGT GAATCAAGGC GGCTGGATGC TGTCACGCGC ATCGGCGATG 480
GAGTTGCTGC AGGCCGCAGG GAACTGA 507 (2) Informace pro SEQ ID NO: 100: 15 (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 168 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-117CZ 300688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 100;
Met Lys Met Val Lys Ser Ile Ala Ala Gly Leu Thr Ala Ala Ala Ala 15 10 15
Ile Gly Ala Ala Ala Ala Gly Val Thr Ser Ile Met Ala Gly Gly Pro 20 25 30
Val Val Tyr Gin Met Gin Pro Val Val Phe Gly Ala Pro Leu Pro Leu 35 40 45
Asp Pro Ala Ser Ala Pro Asp Val Pro Thr Ala Ala Gin Leu Thr Ser 50 55 60
Leu Leu Asn Ser Leu Ala Asp Pro Asn Val Ser Phe Ala Asn·Lys Gly
70 75 80
Ser Leu Val Glu Gly Gly Ile Gly Gly Thr Glu Ala Arg Ile Ala Asp
90 95
His Lys Leu Lys Lys Ala Ala Glu His Gly Asp Leu Pro Leu Ser Phe 100 105 110
Ser Val Thr Asn Ile Gin Pro Ala Ala Ala Gly Ser Ala Thr Ala Asp 115 120 125
Val Ser Val Ser Gly Pro Lys Leu Ser Ser Pro Val Thr Gin Asn Val 130 135 140
Thr Phe Val Asn Gin Gly Gly Trp Met Leu Ser Arg Ala Ser Ala Met 145 150 155 160
Glu Leu Leu Gin Ala Ala Gly Asn 165 (2) Informace pro SEQ ID NO: 101:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka; 500 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
-lis«zvvvuu υυ (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 101:
CGTGGCAATG TCGTTGACCG TCGGGGCCGG GGTCGCCTCC GCAGATCCCG TGGACGCGGT 60
CATTAACACC ACCTGCAATT ACGGGCAGGT AGTAGCTGCG CTCAACGCGA CGGATCCGGG 120
GGCTGCCGCA CAGTTCAACG CCTCACCGGT GGCGCAGTCC TATTTGCGCA ÁTTTCCTCGC 180
CGCACCGCCA CCTCAGCGCG CTGCCATGGC CGCGCAATTG CAAGCTGTGC CGGGGGCGGC 240
ACAGTACATC GGCCTTGTCG AGTCGGTTGC CGGCTCCTGC AACAACTATT AAGCCCATGC 300
GGGCCCCATC CCGCGACCCG GCATCGTCGC CGGGGCTAGG CCAGAKGCC CCGCTCCTCA 360
ACGGGCCGCA TCCCGCGACC CGGCATCGTC GCCGGGGCTA GGCCAGATTG CCCCGCTCCT 420
CAACGGGCCG CATCTCGTGC CGAATTCCTG CAGCCCGGGG GATCCACTAG TTCTAGAGCG 480
GCCGCCACCG CGGTGGAGCT 500 (2) Informace pro SEQ ID NO: 102:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 96 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina ío (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 102:
Val Ala Met Ser Leu Thr Val Gly Ala Gly Val Ala Ser Ala Asp Pro 15 10 15
Val Asp Ala Val Ile Asn Thr Thr Cys Asn Tyr Gly Gin Val Val Ala 20 25 30
Ala Leu Asn Ala Thr Asp Pro Gly Ala Ala Ala Gin Phe Asn Ala Ser 35 40 45
Pro Val Ala Gin Ser Tyr Leu Arg Asn Phe Leu Ala Ala Pro Pro Pro 50 55 60
Gin Arg Ala Ala Met Ala Ala Gin Leu Gin Ala Val Pro Gly Ala Ala
70 75 80
Gin Tyr Ile Gly Leu Val Glu Ser Val Ala Gly Ser Cys Asn Asn Tyr
90 95
-119CZ 3M688 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 103:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 154 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 103:
ATGACAGAGC AGCAGTGGAA TTTCGCGGGT ATCGAGGCCG CGGCAAGCGC AATCCAGGGA 60
AATGTCACGT CCATTCATTC CCTCCTTGAC GAGGGGAAGC AGTCCCTGAC CAAGCTCGCA 120
GCGGCCTGGG GCGGTAGCGG TTCGGAAGCG TACC 154 (2) Informace pro SEQ ID NO: 104:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 51 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 104:
Met Thr Glu Gin Gin Trp Asn Phe Ala Gly Ile Glu Ala Ala Ala Ser 15 10 15
Ala Ile Gin Gly Asn Val Thr Ser Ile His Ser Leu Leu Asp Glu Gly 20 25 30
Lys Gin Ser Leu Thr Lys Leu Ala· Ala Ala Trp Gly Gly Ser Gly Ser 35 40 45
Glu Ala Tyr 50 (2) Informace pro SEQ ID NO: 105:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 282 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
- 120(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 105:
CGGTCGCGCA CTTCCAGGTG ACTATGAAAG TCGGCTTCCG NCTGGAGGAT TCCTGAACCT 60
TCAAGCGCGG CCGATAACTG AGGTGCATCA TTAAGCGACT T7TCCAGAAC ATCCTGACGC 120
GCTCGAAACG CGGCACAGCC GACGGTGGCT CCGNCGAGGC GCTGNCTCCA AAATCCCTGA 180
GACAATTCGN CGGGGGCGCC TACAAGGMG TCGGTGCTGA ATTCGNCGNG TATCTGCTCG 240
ACCTGTGTGG TCTGNAGCCG GACGAAGCGG TGCTCGACGT CG 282 (2) Informace pro SEQ ID NO: 106:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1565 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina io (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 106:
GTATGCGGCC ACTGAAGTCG CCAATGCGGC GGCGGCCAGC TAAGCCAGGA ACAGTCGGCA 60
CGAGAAACCA CGAGAAATAG GGACACGTAA TGGTGGATTT CGGGGCGTTA CCACCGGAGA 120
TCAACTCCGC GAGGATGTAC GCCGGCCCGG GTTCGGCCTC GCTGGTGGCC GCGGCTCAGA 180
TGTGGGACAG CGTGGCGAGT GACCTGTTTT CGGCCGCGTC GGCGTTTCAG TCGGTGGTCT 240
GGGGTCTGAC GGTGGGGTCG TGGATAGGTT CGTCGGCGGG TCTGATGGTG GCGGCGGCCT 300
CGCCGTATGT GGCGTGGATG AGCGTCACCG CGGGGCAGGC CGAGCTGACC GCCGCCCAGG 360
TCCGGGTTGC TGCGGCGGCC TACGAGACGG CGTATGGGCT GACGGTGCCC CCGCCGGTGA 420
TCGCCGAGAA CCGTGCTGAA CTGATGATTC TGATAGCGAC CAACCTCTTG GGGCAAAACA 480
CCCCGGCGAT CGCGGTCAAC GAGGCCGAAT ACGGCGAGAT GTGGGCCCAA GACGCCGCCG 540
CGATGTTTGG CTACGCÍGCG GCGACGGCGA CGGCGACGGC GACGTTGCTG CCGTTCGAGG 600
-121CZ 3(10688 B6
AGGCGCCGGA GATGACCAGC GCGGGTGGGC TCCTCGAGCA GGCCGCCGCG GTCGAGGAGG 660
CCTCCGACAC CGCCGCGGCG AACCAGTTGA TGAACAATGT GCCCCAGGCG CTGCAACAGC 720
TGGCCCAGCC CACGCAGGGC ACCACGCCTT CTTCCAAGCT GGGTGGCCTG TGGAAGACGG 780
TCTCGCCGCA TCGGTCGCCG ATCAGCAACA TGGTGTCAAT GGCCAACAAC CACATGTCAA 840
TGACCAACTC GGGTGTGTCA ATGACCAACA CCTTGAGCTC GATGTTGAAG GGCTTTGCTC 900
CGGCGGCGGC CGCCCAGGCC GTGCAAACCG CGGCGCAAAA CGGGGTCCGG GCGATGAGCT 960
CGCTGGGCAG CTCGCTGGGT TCTTCGGGTC TGGGCGGTGG GGTGGCCGCC AACTTGGGTC 1020
GGGCGGCCTC GGTCGGTTCG TTGTCGGTGC CGCAGGCCTG GGCCGCGGCC AACCAGGCAG 1080
TCACCCCGGC GGCGCGGGCG CTGCCGCTGA CCAGCCTGAC CAGCGCCGCG GAAAGAGGGC 1140
CCGGGCAGAT GCTGGGCGGG CTGCCGGTGG GGCAGATGGG CGCCAGGGCC GCTGGTGGGC 1200
TCAGTGGTGT GCTGCGTGTT CCGCCGCGAC CCTATGTGAT GCCGCATTCT CCGGCGGCCG 1260
GCTAGGAGAG GGGGCGCAGA CTGTCGTTAT TTGACCAGTG ATCGGCGGTC TCGGTGTTTC 1320
CGCGGCCGGC TATGACAACA GTCAATGTGC ATGACAAGTT ACAGGTATTA GGTCCAGGTT 1380
CAACAAGGAG ACAGGCAACA TGGCCTCACG TTTTATGACG GATCCGCACG CGATGCGGGA 1440
CATGGCGGGC CGTTTTGAAG TGCACGCCCA GACGGTGGAG GACGAGGCTC GCCGGATGTG 1500
GGCGTCCGCG CAAAACATTT CCGGTGCGGG CTGGAGTGGC ATGGCCGAGG CGACCTCGCT 1560
AGACA 1565
- 122(2) Informace pro SEQ ID NO: 107:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 391 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 107;
Met Val Asp Phe Gly Ala Leu Pro Pro Glu Ile Asn Ser Ala Arg Met 15 10 15
Tyr Ala Gly Pro Gly Ser Ala Ser Leu Val Ala Ala Ala Gin Met Trp 20 25 30
Asp Ser Val Ala Ser Asp Leu Phe Ser Ala Ala Ser Ala Phe Gin Ser
40 45
Val VaT Trp Gly Leu Thr Val Gly Ser Trp Ile Gly Ser Ser Ala Gly 50 55 50
Leu Met Val Ala Ala Ala Ser Pro Tyr Val Ala Trp Met Ser Val Thr
70 75 80
Ala Gly Gin Ala Glu Leu Thr Ala Ala Gin Val Arg Val Ala Ala Ala
90 95
Ala Tyr Glu Thr Ala Tyr Gly Leu Thr Val Pro Pro Pro Val Ile Ala
100 105 110
Glu Asn Arg Ala Glu Leu Met Ile Leu Ile Ala Thr Asn Leu Leu Gly 115 120 125
Gin Asn Thr Pro Ala Ile Ala Val Asn Glu Ala Glu Tyr Gly Glu Met 130 135 140
Trp Ala Gin Asp Ala Ala Ala Met Phe Gly Tyr Ala Ala Ala Thr Ala
145 150 155 160
Thr Ala Thr Ala Thr Leu Leu Pro Phe Glu Glu Ala Pro Glu Met Thr
165 170 175
Ser Ala Gly Gly Leu Leu Glu Gin Ala Ala Ala Val Glu Glu Ala Ser
180 185 190
- 123CZ 300688 B6
Asp Thr Ala Ala Ala Asn Gin Leu Met Asn Asn Val Pro Gin Ala Leu 195 200 205
Gin Gin Leu Ala Gin Pro Thr Gin Gly Thr Thr Pro Ser Ser Lys Leu 210 215 220
Gly Gly Leu Trp Lys Thr Val Ser Pro His Arg Ser Pro Ile Ser Asn
225 230 235 240
Met Val Ser Met Ala Asn Asn His Met Ser Met Thr Asn Ser Gly Val
245 250 255
Ser Met Thr Asn Thr Leu Ser Ser Met Leu Lys Gly Phe Ala Pro Ala 260 265 270
Ala Ala Ala Gin Ala Val Gin Thr Ala Ala Gin Asn Gly Val Arg Ala 275 280 285
Met Ser Ser Leu Gly Ser Ser Leu Gly Ser Ser Gly Leu Gly Gly Gly 290 295 300
Val Ala Ala Asn Leu Gly Arg Ala Ala Ser Val Gly Ser Leu Ser Val
305 310 315 320
Pro Gin Ala Trp Ala Ala Ala Asn Gin Ala Val Thr Pro Ala Ala Arg
325 330 335
Ala Leu Pro Leu Thr Ser Leu Thr Ser Ala Ala Glu Arg Gly Pro Gly 340 345 350
Gin Met Leu Gly Gly Leu Pro Val Gly Gin Met Gly Ala Arg Ala Gly 355 360 365
Gly Gly Leu Ser Gly Val Leu Arg Val Pro Pro Arg Pro Tyr Val Met 370 375 380
Pro His Ser Pro Ala Ala Gly
385 390
- I?4 VZ, JUUVOO DO (2) Informace pro SEQ ID NO: 108:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 259 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 108:
ACCAACACCT TGCACTCNAT GTTGAAGGGC TTAGCTCCGG CGGCGGCTCA GGCCGTGGAA 60
ACCGCGGCGG AAAACGGGGT CTGGGCAATG AGCTCGCTGG GCAGCCAGCT GGGTTCGTCG 120
CTGGGTTCTT CGGGTCTGGG CGCTGGGGTG GCCGCCAACT TGGGTCGGGC GGCCTCGGTC 180
GGTTCGTTGT CGGTGCCGCC AGCATGGGCC GCGGCCAACC AGGCGGTCAC CCCGGCGGCG 240
CGGGCGCTGC CGCTGACCA 259 (2) Informace pro SEQ ID NO: 109:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 86 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 109:
ihr Asn Thr Leu His Ser Met Leu Lys Gly Leu Ala Pro Ala Ala Ala 15 10 15
Gin Ala Val Glu Thr Ala Ala Glu Asn Gly Val Trp Ala Met Ser Ser 20 25 30
Leu Gly Ser Gin Leu Gly Ser Ser Leu Gly Ser Ser Gly Leu Gly Ala 35 40 45
Gly Val Ala Ala Asn Leu Gly Arg Ala Ala Ser Val Gly Ser Leu Ser 50 55 60
Val Pro Pro Ala Trp Ala Ala Ala Asn Gin Ala Val Thr Pro Ala Ala 65 70 75 80
Arg Ala Leu Pro Leu Thr 85
-125CL J0U68S B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 110:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: i 109 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 110:
TACTTGAGAG AATCTGACCT GTCGCCGACG TCGTTTGCTG TCCATCATTG GTGCTAGTTA 60
TGGCCGAGCG GAAGGATCAT CGAAGTGGTG GACTTCGGGG CGTTACCACC GGAGATCAAC 120
TCCGC6AGGA TGTACGCCGG CÍCGGGTTCG GCCTCGCTGG TGGCCGCCGC GAAGATGTGG 180
GACAGCGTGG CGAGTGACCT GTTTTCGGCC GCGTCGGCGT TTCAGTCGGT GGTCTGGGGT 240
CTGACGACGG GATCGTGGAT AGGTTCGTCG GCGGGTCTGA TGGTGGCGGC GuCCTCGCCG 300
TATGTGGCGT GGATGAGCGT CACCGCGGGG CAGGCCGAGC TGACCGCCGC CCAGGTCCGG 360
GTTGCTGCGG CGGCCTACGA GACGGCGTAT GGGCTGACGG TGCCCCCGCC GGTGATCGCC 420
GAGAACCGTG CTGAACTGAT GATCCTGATA GCGACCAACC TCTCGGGGCA AAACACCCCG 480
GCGATCGCGG TCAACGAGGC CGAATACGGG GAGATGTGGG CCCAAGACGC CGCCGCGATG 540
TTTGGCTACG CCGCCACGGC GGCGACGGCG ACCGAGGCGT TGCTGCCGTC CGAGGACGCC 600
CCACTGATCA CCAACCCCGG CGGGCTCCTC GAGCAGGCCG TCGCGGTCGA GGAGGCCATC 660
GACACCGCCG CGGCGAACCA GTTGATGAAC AATGTGCCCC AAGCGCTGCA ACAACTGGCC 720
CAGCCCACGA AAÁGCATCTG GCCGTTCGAC CAACTGAGTG AACTCTGGAA AGCCATCTCG 780
CCGCATCTGT CGCCGCTCAG CAACATCGTG TCGATGCTCA ACAACCACGT GTCGATGACC 840
AACTCGGGTG TGTCAATGGC CAGCACCTTG CACTCAATGT TGAAGGGCTC TGCTCCGGCG 900
GCGGCTCAGG CCGTGGAAAC CGCGGCGCAA AACGGGGTCC AGGCGATGAG CTCGCTGGGC 960
AGCCAGCTGG GTTCGTCGCT GGGTCCTCCG GGTCTGGGCG CTGGGGTGGC CGCCAACTTG 1020
GGTCGGGCGG CCTCGGTCGG TTCGTTGTCG GTGCCGCAGG CCTGGGCCGC GGCCAACCAG 1080
GCGGTCACCC CGGCGGCGCG GGCGCTGCC 11 no
- 126ft/WVW (2) Informace pro SEQ ID NO: 111:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 341 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 111:
Val Val Asp Phe Gly Ala Leu Pro Pro Glu Ile Asn Ser Ala Arg Met 15 10 15
Tyr Ala Gly Pro Gly Ser Ala Ser Leu Val Ala Ala Ala Lys Met Trp 20 25 30
Asp Ser Val Ala Ser Asp Leu Phe Ser Ala Ala Ser Ala Phe Gin Ser 35 40 45
Val Val Trp Gly Leu Thr Thr Gly Ser Trp Ile Gly Ser Ser Ala Gly 50 55 60
Leu Met Val Ala Ala Ala Ser Pro Tyr Val Ala Trp Met Ser Val Thr 7n 7R an
Ala Gly Gin Ala Glu Leu Thr Ala Ala Gin Val Arg Val Ala Ala Ala 85 90 95
Ala Tyr Glu Thr Ala Tyr Gly Leu Thr Val Pro Pro Pro Val Ile Ala 100 105 110
Glu Asn Arg Ala Glu Leu Met Ile Leu Ile Ala Thr Asn Leu Leu Gly 115 120 125
Gin Asn Thr Pro Ala Ile Ala Val Asn. Glu Ala Glu Tyr Gly Glu Met 130 135 140
Trp Ala Gin Asp Ala Ala Ala Met Phe Gly Tyr Ala Ala Thr Ala Ala
145 ISO 155 160
Thr Ala Thr Glu Ala Leu Leu Pro Phe Glu Asp Ala Pro Leu Ile Thr
165 170 175
Asn Pro Gly Gly Leu Leu Glu Gin Ala Val Ala Val Glu Glu Ala Ile 180 185 190
Asp Thr Ala Ala Ala Asn Gin Leu Met Asn Asn Val Pro Gin Ala Leu 195 200 205
- 127CZ 300688 B6
Gin Gin Leu Ala Gin Pro Thr Lys Ser Ile Trn Pro Phe Asp Gin Leu 210 215 ' 220
Ser Glu Leu Trp Lys Ala Ile Ser Pro His Leu Ser Pro Leu Ser Asn
225 230 235 240
Ile Val Ser Het Leu Asn Asn His Val Ser Het Thr Asn Ser Gly Val
245 2S0 255
Ser Met Ala Ser Thr Leu His Ser Het Leu Lys Gly Phe Ala Pro Ala 260 265 270
Ala Ala Gin Ala Val Glu Thr Ala Ala Gin Asn Gly Val Gin Ala Met 275 280 285
Ser Ser Leu Gly Ser Gin Leu Gly Ser Ser Leu Gly Ser Ser Gly Leu 290 295 300
Gly Ala Gly Val Ala Ala Asn Leu Gly Arg Ala Ala Ser Val Gly Ser 305 310 315 320
Leu Ser Val Pro Gin Ala Trp Ala Ala Ala Asn Gin Ala Val Thr Pro 325 330 335
Ala Ala Arg Ala Leu 340 (2) Informace pro SEQ ID NO: 112: 5 (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 1256 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý to (D) Topologie: lineární
- I7R VZj juuwoo do (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 112:
CATCGGAGGG AGTGATCACC ATGCTGTGGC ACGCAATGCC ACCGGAGNTA AATACCGCAC 60 GGCTGATGGC CGGCGCGGGT CCGGCTCCAA TGCTTGCGGC GGCCGCGGGA TGGCAGACGC 120 TTTCGGCGGC TCTGGACGCT CAGGCCGTCG AGTTGACCGC GCGCCTGAAC TCTCTGGGAG 180 AAGCCTGGAC TGGAGGTGGC AGCGACAAGG CGCTTGCGGC TGCAACGCCG ATGGTGGTCT 240 GGCTACAAAC CGCGTCAACA CAGGCCAAGA CCCGTGCGAT GCAGGCGACG GCGCAAGCCG 300 CGGCATACAC CCACGCCATG GCCACGACGC CGTCGCTGCC GGAGATCGCC GCCAACCACA 360 TCACCCAGGC CGTCCTTACG GCCACCAACT TCTTCGGTAT CAACACGATC CCGATCGCGT 420 TGACCGAGAT GGATTATTTC ATCCGTATGT GGAACCAGGC AGCCCTGGCA ATGGAGGTCT 480
ACCAGGCCGA GACCGCGGTT AACACGCTTT TCGAGAAGCT CGAGCCGATG GCGTCGATCC 540
TTGATCCCGG CGCGAGCCAG AGCACGACGA ACCCGATCTT CGGAATGCCC TCCCCTGGCA 600 GCTCAACACC GGTTGGCCAG TTGCCGCCGG CGGCTACCCA GACCCTCGGC CAACTGGGTG 660 AGATGAGCGG CCCGATGCAG CAGCTGACCC AGCCGCTGCA GCAGGTGACG TCGTTGTTCA 720 GCCAGGTGGG CGGCACCGGC GGCGGCAACC CAGCCGACGA GGAAGCCGCG CAGATGGGCC 780 TGCTCGGCAC CAGTCCGCTG TCGAACCATC CGCTGGCTGG TGGATCAGGC CCCAGCGCGG 840 GCGCGGGCCT GCTGCGCGCG GAGTCGCTAC CTGGCGCAGG TGGGTCGTTG ACCCGCACGC 900 CGCTGATGTC TCAGCTGATC GAAAAGCCGG TTGCCCCCTC GGTGATGCCG GCGGCTGCTG 960 CCGGATCGTC GGCGACGGGT GGCGCCGCTC CGGTGGGTGC GGGAGCGATG GGCCAGGGTG 1020
CGCAATCCGG CGGCTCCACC AGGCCGGGTC TGGTCGCGCC GGCACCGCTC GCGCAGGAGC 1080 GTGAAGAAGA CGACGAGGAC GACTGGGACG AAGAGGACGA CTGGTGAGCT CCCGTAATGA 1140 CAACAGACíT CCCGGCCACC CGGGCCGGAA GACTTGCCAA CATTTTGGCG AGGAAGGTAA 1200 AGAGAGAAAG TAGTCCAGCA TGGCAGAGAT GAAGACCGAT GCCGCTACCC TCGCGC 1256
-129CZ 300688 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 113:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 432 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 113:
CTAGTGGATG GGACCATGGC CATTTTCTGC AGTCTCACTG CCTTCTGTGT TGACATTTTG 60
GCACGCCGGC GGAAACGAAG CACTGGGGTC GAAGAACGGC TGCGCTGCCA TATCGTCCGG 120
AGCTTCCATA CCTTCGTGCG GCCGGAAGAG CTTGTCGTAG TCGGCCGCCA TGACAACCTC 180
TCAGAGTGCG CTCAAACGTA TAAACACGAG AAAGGGCGAG ACCGACGGAA GGTCGAACTC 240
GCCCGATCCC GTGTTTCGCT ATTCTACGCG AACTCGGCGT TGCCCTATGC GAACATCCCA 300
GTGACGITGC CTTCGGTCGA AGCCATTGCC TGACCGGCTT CGCTGATCGT CCGCGCCAGG 360
TTCTGCAGCG CGTTGTTCAG CTCGGTAGCC GTGGCGTCCC ATTTTTGCTG GACACCCTGG 420
TACGCCTCCG AA 432 (2) Informace pro SEQ ID NO: 114:
is (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 368 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární
- lín.
b/VVWU UV (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 114:
Met Leu Trp His Ala Met Pro Pro Glu Xaa Asn Thr Ala Arg Leu Met 15 10 15
Ala Gly Ala Gly Pro Ala Pro Met Leu Ala Ala Ala Ala Gly Trp Gin 20 25 30
Thr Leu Ser Ala Ala Leu Asp Ala Gin Ala Val Glu Leu Thr Ala Arg 35 40 45
Leu Asn Ser Leu Gly Glu Ala Trp Thr Gly Gly Gly Ser Asp Lys Ala 50 55 60
Leu Ala Ala Ala Thr Pro Met Val Val Trp Leu Gin Thr Ala Ser Thr
70 75 80
Gin Ala Lys Thr Arg Ala Met Gin Ala Ihr Ala Gin Ala Ala Ala Tyr
90 95
Thr Gin Ala Met Ala Thr Thr Pro Ser Leu Pro Glu Ile Ala Ala Asn 100 105 110
His Ile Thr Gin Ala Val Leu Thr Ala Thr Asn Phe Phe Gly Ile Asn 115 120 125
Thr Ile Pro Ile Ala Leu Thr Glu Met Asp Tyr Phe Ile Arg Met Trp 130 135 140
Asn Gin Ala Ala Leu Ala Met Glu Val Tyr Gin Ala Glu Thr Ala Val
145 150 155 160
Asn Thr Leu Phe Glu Lys Leu Glu Pro Met Ala Ser Ile Leu Asp Pro
165 170 175
Gly Ala Ser Gin Ser Thr Thr Asn Pro Ile Phe Gly Met Pro Ser Pro 180 185 190
Gly Ser Ser Thr Pro Val Gly Gin Leu Pro Pro Ala Ala Thr Gin Thr 195 200 205
- 131 V Δ. JUUUOO DO
Leu Gly Gin Leu Gly Glu Met Ser Gly Pro Met Gin Gin Leu Thr Gin 210 215 220
Pro Leu Gin Gin Val Thr Ser Leu Phe Ser Gin Val Gly Gly Thr Gly
225 230 235 240
Gly Gly Asn Pro Ala Asp Glu Glu Ala Ala Gin Met Gly Leu Leu Gly
245 250 255
Thr Ser Pro Leu Ser Asn H1s Pro Leu Ala Gly Gly Ser Gly Pro Ser 260 265 270
Ala Gly Ala Gly Leu Leu Arg Ala Glu Ser Leu Pro Gly Ala Gly Gly 275 280 285
Ser Leu Thr Arg Thr Pro Leu Met Ser Gin Leu Ile Glu Lys Pro Val 290 295 300
Ala Pro Ser Val Met Pro Ala Ala Ala Ala Gly Ser Ser Ala Thr Gly
305 310 315 320
Gly Ala Ala Pro Val Gly Ala Gly Ala Met Gly Gin Gly Ala Gin Ser
325 330 335
Gly Gly Ser Thr Arg Pro Gly Leu Val Ala Pro Ala Pro Leu Ala Gin 340 345 350
Glu Arg Glu Glu Asp Asp Glu Asp Asp Trp Asp Glu Glu Asp Asp Trp 355 360 365 (2) Informace pro SEQ ID NO: 115:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 12 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 115:
Met Ala Glu Met Lys Thr Asp Ala Ala Thr Leu Ala 1 5 10
- 132(2) Informace pro SEQ ID NO: 116:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 396 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 116:
GATCTCCGGC GACCTGAAA4 CCCAGATCGA CCAGGTGGAG TCGACGGCAG GTTCGTTGCA SC
GGGCCAGTGG CGCGGCGCGG CGGGGACGGC CGCCCAGGCC GCGGTGGTGC GCTTCCAAGA 120
AGCAGCCAAT AAGCAGAAGC AGGAACTCGA CGAGATCTCG ACGMTATTC GTCAGGCCGG 180
CGTCCAATAC TCGAGGGCGG ACGAGGAGCA GCAGCAGGCG CTGTCCTCGC AAATGGGCTT 240
CTGACCCGCT AATACGAAAA GAAACGGAGC AAAAACATGA CAGAGCAGCA GTGGAATTTC 300
GCGGGTATCG AGGCCGCGGC AAGCGCAATC CAGGGAAATG TCACGTCCAT TCATTCCCTC 360
CTTGACGAGG GGAAGCAGTC CCTGACCAAG CTCGCA 396 (2) Informace pro SEQ ID NO: 117:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 80 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 117:
Ile Ser Gly Asp Leu Lys Thr Gin Ile Asp Gin Val Glu Ser Thr Ala 15 10 15
Gly Ser Leu Gin Gly Gin Trp Arg Gly Ala Ala Gly Thr Ala Ala Gin 20 25 30
Ala Ala Val Val Arg Phe Gin Glu Ala Ala Asn Lys Gin Lys Gin Glu 35 40 45
Leu Asp Glu Ile Ser Thr Asn Ile Arg Gin Ala Gly Val Gin Tyr Ser 50 55 60
Arg Ala Asp Glu Glu Gin Gin Gin Ala Leu Ser Ser Gin Het Gly Phe 65 70 75 80
-133CZ 300688 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 118:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 387 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec; jednoduchý (D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 118:
GTGGATCCCG ATCCCGTGK TCGCTAITCT ACGCGAACTC G6CGTTGCCC TATGCGAACA 60
TCCCAGTGAC GTTGCCTTCG GTCGAAGCCA TTGCCTGACC GGCTTCGCTG ATCGTCCGCG 120
CCAGGTTCTG CAGCGCGTTG TTCAGCTCGG TAGCCGTGGC GTCCCATíTT TGCTGGACAC 180
CCTGGTACGC CTCCGAACCG CTACCGCCCC AGGCCGCTGC GAGCTTGGTC AGGGACTGCT 240
TCCCCTCGTC AAGGAGGGAA TGAATGGACG TGACATTTCC CTGGATTGCG CTTGCCGCGG 300
CCTCGATACC CGCGAAATTC CACTGCTGCT CTGTCATGTT TTTGCTCCGT TTCTTTTCGT 360
ATTAGCGGGT CAGAAGCCCA TTTGCGA 387 (2) Informace pro SEQ ID NO: 119:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 272 párů bází (B) Typ: nukleová kyselina (C) Řetězec: jednoduchý (D) Topologie: lineami (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 119:
CGGCACGAGG ATCTCGGTTG GCCCAACGGC GCTGGCGAGG GCTCCGTTCC GGGGGCGAGC 60 TGCGCGCCGG ATGCTTCCTC TGCCCGCAGC CGCGCCTGGA TGGATGGACC AGTTGCTACC 120 TTCCCGACGT TTCGTTCGGT GTCTGTGCGA TAGCGGTGAC CCCGGCGCGC ACGTCGGGAG 180 TGTTGGGGGG CAGGCCGGGT CGGΪGGTTCG GCCGGGGACG CAGACGGTCT GGACGGAACG 240 C-GCGGGGGn CGCCGATTGG CATCITTGCC CA 272
-134uvuuuu UV (2) Informace pro SEQ ID NO: 120:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 20 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 120:
Asp Pro Val Asp Ala Val Ile Asn Thr Thr Cys Asn Tyr Gly Gin Val 15 10 15
Val Ala Ala Leu 20 (2) Informace pro SEQ ID NO: 121:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 121:
Ala Val Glu Ser Gly Met Leu Ala Leu Gly Thr Pro Ala Pro Ser 15 10 15 (2) Informace pro SEQ ID NO: 122:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 19 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 122:
Ala Ala Met Lys Pro Arg Thr Gly Asp Gly Pro Leu Glu Ala Ala Lys 15 10 15
Glu Gly Arg
135CZ JUU688 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 123:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární io (xi) popis sekvence: SEQ ID NO: 123:
Tyr Tyr Trp Cys Pro Gly Gin Pro Phe Asp Pro Ala Trp Gly Pro 15 10 15 (2) Informace pro SEQ ID NO: 124:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 14 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 124:
Asp Ile Gly Ser Glu Ser Thr Glu Asp Gin Gin Xaa Ala Val 1 5 10 (2) Informace pro SEQ ID NO: 125:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 13 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie; lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 125:
Ala Glu Glu Ser Ile Ser Thr Xaa Glu Xaa Ile Val Pro 1 5 10 (2) Informace pro SEQ ID NO: 126:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 17 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární
- 136(xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 126:
Asp Pro Glu Pro Ala Pro Pro Val Pro Tbr Tbr Ala Ala Ser Pro Pro 15 10 15
Ser (2) Informace pro SEQ ID NO: 127:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina io (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 127:
Ala Pro Lys Thr Tyr Xaa Glu Glu Leu Lys Gly Thr Asp Thr Gly 15 10 15 (2) Informace pro SEQ ID NO: 128:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 30 aminokyselin 20 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) popis sekvence: SEQ ID NO: 128:
Asp Pro Ala Ser Ala Pro Asp Val Pro Thr Ala Ala Gin Leu Thr Ser 15 10 15
Leu Leu Asn Ser Leu Ala Asp Pro Asn Val Ser Phe Ala Asn 20 25 30 (2) Informace pro SEQ ID NO: 129: (i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 22 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární
- 137CZ 300688 B6 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 129:
Asp Pro Pro Asp Pro His Gin Xaa Asp Met Thr Lys Gly Tyr Tyr Pro 15 10 15
Gly Gly Arg Arg Xaa Phe 20 (2) Informace pro SEQ ID NO: 130:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 7 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina to (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 130:
Asp Pro Gly Tyr Thr Pro Gly 1 5 (2) Informace pro SEQ ID NO: 131:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 10 aminokyselin 20 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (ix) Vlastnosti:
(D) Jiné informace: /poznámka - „Druhý zbytek může být buď Pro, nebo Thr (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 131:
Xaa Xaa Gly Phe Thr Gly Pro Gin Phe Tyr 1 5 10 (2) Informace pro SEQ ID NO: 132:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 9 aminokyselin 35 (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární
- HftWWW V»V (ix) Vlastnosti:
(D) Jiné informace: /poznámka = „Třetí zbytek může být buď Gin, nebo Leu“ 5 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 132:
Xaa Pro Xaa Val Thr Ala Tyr Ala Gly I 5 (2) Informace pro SEQ ID NO: 133:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 9 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) popis sekvence: SEQ ID NO: 133:
Xaa Xaa Xaa Glu Lys Pro Phe Leu Arg 1 5 (2) Informace pro SEQ ID NO: 134:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 134:
Xaa Asp Ser Glu Lys Ser Ala Thr Ile Lys Val Thr Asp Ala Ser 15 10 15 (2) Informace pro SEQ ID NO: 135:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 135:
Ala Gly Asp Thr Xaa Ile Tyr Ile Val Gly Asn Leu Thr Ala Asp
- 139CZ 300688 B6 (2) Informace pro SEQ ID NO: 136:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 15 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 136:
Ala Pro Glu Ser Gly Ala Gly Leu Gly Gly Thr Val Gin Ala Gly 15 10 15 (2) Informace pro SEQ ID NO: 137:
(i) Charakteristika sekvence:
(A) Délka: 21 aminokyselin (B) Typ: aminokyselina (C) Řetězec:
(D) Topologie: lineární (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 137:
Xaa Tyr Ile Ala Tyr Xaa Thr Thr Ala Gly Ile Val Pro Gly Lys Ile 15 10 15
Asn Val His Leu Val

Claims (16)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    30 1. Izolovaný polypeptid (í) obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 Mycobacterium tuberculosis nebo (ii) sestávající zjeho imunogenní části.
  2. 2. Izolovaný polypeptid podle nároku 1, obsahující aminokyselinovou sekvencí SEQ ID NO: 107.
  3. 3. Polypeptid buď podle nároku 1 nebo podle nároku 2, mající aminokyselinovou sekvenci 40 SEQ ID NO: 107.
    - 140 «ZWVW uw
  4. 4. Molekula rekombinantní deoxyribonukleové kyseliny, obsahující nukleotidovou sekvenci kódující polypeptíd mající aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107.
  5. 5. Molekula rekombinantní deoxyribonukleové kyseliny podle nároku 4, obsahující nukleotí5 dovou sekvenci kódující polypeptíd mající aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107.
  6. 6. Molekula rekombinantní deoxyribonukleové kyseliny buď podle nároku 4 nebo podle nároku 5, obsahující nukleotidovou sekvenci SEQ ID NO: 106.
    io
  7. 7. Molekula rekombinantní deoxyribonukleové kyseliny podle nároku 6, mající nukleotidovou sekvenci SEQ ID NO: 106.
  8. 8. Expresní vektor obsahující molekulu deoxyribonukleové kyseliny podle jakéhokoli z nároků 4 až 7.
  9. 9. Izolovaná hostitelská buňka transformovaná expresním vektorem podle nároku 8.
  10. 10. Hostitelská buňka podle nároku 9, která je vybrána ze souboru sestávajícího z E. coli, kvasinek a savčích buněk.
  11. 11. Fúsní protein obsahující polypeptíd (i) obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 Mycobacteríum tuberculosis nebo
    25 (ii) sestávající z jeho imunogenní části,
  12. 12. Fúsní protein podle nároku 11, obsahující polypeptíd mající aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107.
    30
  13. 13. Kombinace polypeptidú obsahujícího aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 Mycobacterium tuberculosis a jednu nebo více dalších imunogenních sekvencí M. tuberculosis, které jsou spojeny peptidovou vazbou.
  14. 14. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje polypeptíd (i) obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 Mycobacteríum tuberculosis nebo (ií) sestávající z jeho imunogenní části a fyziologicky přijatelný nosič.
    40 15. Farmaceutický prostředek podle nároku 14, vyznačující se tím, že polypeptíd sestává z aminokyselinové sekvence SEQ ID NO: 107 a fyziologicky přijatelného nosiče.
    16. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje molekulu rekombinantní deoxyribonukleové kyseliny podle jakéhokoli z nároků 4 až 7 a fyziologicky přijatelný
    45 nosič.
    17. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje fúsní protein podle jakéhokoli z nároků 11 a 12 a fyziologicky přijatelný nosič.
    50 18. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje kombinaci polypeptidu podle nároku 13 a fyziologicky přijatelný nosič.
    19. Farmaceutický prostředek podle jakéhokoli z nároků 14 až 18 pro použití pro indukcí protektivní imunity u pacienta.
    -141CZ JUUbSB Bó
    20. Vakcína, vyznačující se tím, že obsahuje polypeptid (i) obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 Mycobacterium tuberculosis nebo
    5 (i i) sestávající z jeho imunogenní části a a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
    21. Vakcína podle nároku 20, vyznačující se tím, že obsahuje polypeptid mající io aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107.
    22. Vakcína, vyznačující se tím, že obsahuje molekulu rekombinantní deoxyribonukleové kyseliny podle jakéhokoli z nároků 4 až 7 a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
  15. 15 23. Vakcína, vyznačující se tím, že obsahuje fúzní protein buď podle nároku 11 nebo podle nároku 12 a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
    24. Vakcína, vyznačující se tím, že obsahuje kombinaci polypeptidu podle nároku 13 a nespecifický zesilovač imunitní odpovědi.
    25. Vakcína podle jakéhokoli z nároků 20 až 24, vyznačující se tím, že nespecifickým zesilovačem imunitní odpovědi je adjuvans.
    26. Použití polypeptidu (i) obsahujícího aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 Mycobacterium tuberculosis nebo (i i) sestávajícího z jeho imunogenní části pro výrobu vakcíny pro indukci proteklivní imunity u pacienta.
    27. Použití podle nároku 26, kde polypeptid má aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107.
    35 28. Použití rekombinantní deoxyribonukleové kyseliny podle jakéhokoli z nároků 4 až 7, fúsního proteinu buď podle nároku 11 nebo podle nároku 12, kombinace polypeptidu podle nároku 13 nebo farmaceutického prostředku podle jakéhokoli z nároků 14 až 18 pro výrobu vakcíny pro indukci protektivní imunity u pacienta.
    40 29. Použití polypeptidu (i) obsahujícího aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 Mycobacterium tuberculosis nebo
    45 (ii) sestávajícího z jeho imunogenní části pro výrobu diagnostika pro detekci tuberkulosy u pacienta,
    30. Použití podle nároku 29, kde polypeptid má aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107.
    - 142»/VWW MV
    31. Diagnostický kit, vyznačující se tím, že obsahuje (a) polypeptid (í) obsahující aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 Mycobacterium tuberculosis nebo (ii) sestávající z její imunogenní části a io (b) přístroj umožňující kontaktování uvedeného polypeptidů s kožními buňkami pacienta.
    32. Diagnostickýkitpodlenároku 31, vyznačující se t í m, že obsahuje (a) polypeptid mající aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 a 15 (b) přístroj umožňující kontaktování uvedeného polypeptidů s kožními buňkami pacienta.
    33. Způsob přípravy polypeptidů
  16. 20 (i) obsahujícího aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107 Mycobacterium tuberculosis nebo (ii) sestávajícího z jeho imunogenní části, vyznačující se tím, že obsahuje tyto kroky:
    (a) insertování DNA sekvence, která kóduje uvedený polypeptid, do expresního vektoru, (b) transformování nebo transfekování vhodné izolované hostitelské buňky tímto expresním vektorem a (c) exprimování polypeptidů v uvedené hostitelské buňce.
    34. Způsob podle nároku 33, vyznačující se tím, že polypeptid má aminokyselinovou sekvenci SEQ ID NO: 107.
    35. Způsob podle nároku 33 nebo 34, vyznačující se tím, že DNA sekvence, která kóduje polypeptid, obsahuje nukleotidovou sekvenci SEQ ID NO: 106.
    36. Způsob podle nároku 35, vyznačující se tím, že DNA sekvence, která kóduje 40 polypeptid, má nukleotidovou sekvenci SEQ ID NO: 106.
CZ20060387A 1995-09-01 1996-08-30 Polypeptid, farmaceutický prostredek a vakcína s jeho obsahem, zpusob prípravy a použití polypeptidu, molekula rekombinantní DNA a její použití, expresní vektor, hostitelská bunka, fúsní porotein a diagnostický kit CZ300688B6 (cs)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US52343695A 1995-09-01 1995-09-01
US53363495A 1995-09-22 1995-09-22
US62087496A 1996-03-22 1996-03-22
US65968396A 1996-06-05 1996-06-05
US68057496A 1996-07-12 1996-07-12

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ300688B6 true CZ300688B6 (cs) 2009-07-15

Family

ID=27541835

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0062898A CZ297406B6 (cs) 1995-09-01 1996-08-30 Polypeptid, DNA molekula, fúzní protein, farmaceutický prostredek a vakcína s jejich obsahem, expresní vektor, hostitelská bunka, prostredek pro detekci a diagnostický kit
CZ20060387A CZ300688B6 (cs) 1995-09-01 1996-08-30 Polypeptid, farmaceutický prostredek a vakcína s jeho obsahem, zpusob prípravy a použití polypeptidu, molekula rekombinantní DNA a její použití, expresní vektor, hostitelská bunka, fúsní porotein a diagnostický kit
CZ20090166A CZ300953B6 (cs) 1995-09-01 1996-08-30 Polypeptid, farmaceutický prostredek a vakcína s jeho obsahem, zpusob prípravy a použití polypeptidu, DNA molekula a její použití, expresní vektor, hostitelská bunka, fúsní protein a diagnostický kit

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0062898A CZ297406B6 (cs) 1995-09-01 1996-08-30 Polypeptid, DNA molekula, fúzní protein, farmaceutický prostredek a vakcína s jejich obsahem, expresní vektor, hostitelská bunka, prostredek pro detekci a diagnostický kit

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20090166A CZ300953B6 (cs) 1995-09-01 1996-08-30 Polypeptid, farmaceutický prostredek a vakcína s jeho obsahem, zpusob prípravy a použití polypeptidu, DNA molekula a její použití, expresní vektor, hostitelská bunka, fúsní protein a diagnostický kit

Country Status (24)

Country Link
EP (5) EP1203817B9 (cs)
JP (5) JP4382160B2 (cs)
KR (1) KR100433750B1 (cs)
CN (1) CN1117149C (cs)
AT (5) ATE323165T1 (cs)
AU (1) AU727602B2 (cs)
BR (2) BR9612997B1 (cs)
CA (3) CA2684425A1 (cs)
CY (2) CY2570B1 (cs)
CZ (3) CZ297406B6 (cs)
DE (4) DE69637879D1 (cs)
DK (4) DK1398379T3 (cs)
ES (4) ES2262595T3 (cs)
HK (1) HK1059282A1 (cs)
HU (2) HU227778B1 (cs)
IL (1) IL123506A (cs)
MX (1) MX9801638A (cs)
NO (4) NO324372B1 (cs)
NZ (1) NZ319377A (cs)
PL (1) PL186774B1 (cs)
PT (4) PT1398379E (cs)
SI (1) SI0851927T1 (cs)
TR (5) TR200806258T2 (cs)
WO (1) WO1997009428A2 (cs)

Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6641814B1 (en) 1997-04-02 2003-11-04 Statens Serum Institut Nucleic acids fragments and polypeptide fragments derived from M. tuberculosis
US6991797B2 (en) 1993-07-02 2006-01-31 Statens Serum Institut M. tuberculosis antigens
US6458366B1 (en) 1995-09-01 2002-10-01 Corixa Corporation Compounds and methods for diagnosis of tuberculosis
US6592877B1 (en) 1995-09-01 2003-07-15 Corixa Corporation Compounds and methods for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis
US6290969B1 (en) * 1995-09-01 2001-09-18 Corixa Corporation Compounds and methods for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis
EP0934415A2 (en) * 1996-10-11 1999-08-11 Corixa Corporation Compounds and methods for diagnosis of tuberculosis
US6350456B1 (en) 1997-03-13 2002-02-26 Corixa Corporation Compositions and methods for the prevention and treatment of M. tuberculosis infection
US6627198B2 (en) 1997-03-13 2003-09-30 Corixa Corporation Fusion proteins of Mycobacterium tuberculosis antigens and their uses
US6544522B1 (en) * 1998-12-30 2003-04-08 Corixa Corporation Fusion proteins of mycobacterium tuberculosis antigens and their uses
US6982085B2 (en) 1997-04-02 2006-01-03 Statens Serum Institut TB diagnostic based on antigens from M. tuberculosis
CA2285625C (en) * 1997-04-02 2015-06-30 Statens Serum Institut Nucleic acid fragments and polypeptide fragments derived from m. tuberculosis
US7037510B2 (en) 1997-04-18 2006-05-02 Statens Serum Institut Hybrids of M. tuberculosis antigens
US6555653B2 (en) * 1997-05-20 2003-04-29 Corixa Corporation Compounds for diagnosis of tuberculosis and methods for their use
US6613881B1 (en) * 1997-05-20 2003-09-02 Corixa Corporation Compounds for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis and methods of their use
WO1999004005A1 (en) * 1997-07-16 1999-01-28 Institut Pasteur A polynucleotide functionally coding for the lhp protein from mycobacterium tuberculosis, its biologically active derivative fragments, as well as methods using the same
EP1029053A1 (en) * 1997-11-10 2000-08-23 Statens Seruminstitut Nucleic acid fragments and polypeptide fragments derived from mycobacterium tuberculosis
EP1484405A1 (en) * 1997-11-10 2004-12-08 Statens Serum Institut Nucleic acid fragments and polypeptide fragments derived from M. Tuberculosis
IL138809A0 (en) * 1998-04-07 2001-10-31 Corixa Corp Fusion proteins of mycobacterium tuberculosis antigens and pharmaceutical compositions containing the same
GB9808720D0 (en) * 1998-04-23 1998-06-24 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
WO2000026248A2 (en) * 1998-11-04 2000-05-11 Isis Innovation Limited Tuberculosis diagnostic test
US6465633B1 (en) 1998-12-24 2002-10-15 Corixa Corporation Compositions and methods of their use in the treatment, prevention and diagnosis of tuberculosis
AU2594500A (en) * 1998-12-24 2000-07-31 Corixa Corporation Methods for using mycobacterium tuberculosis molecules as immunological adjuvants
ATE429245T1 (de) 1999-05-04 2009-05-15 Univ New Jersey Med Durch mycobacterium tuberculosis und nicht durch bcg exprimierte proteine und ihre verwendung als diagnostische reagenzien und impfstoffe
US7009042B1 (en) * 1999-10-07 2006-03-07 Corixa Corporation Methods of using a Mycobacterium tuberculosis coding sequence to facilitate stable and high yield expression of the heterologous proteins
US6316205B1 (en) 2000-01-28 2001-11-13 Genelabs Diagnostics Pte Ltd. Assay devices and methods of analyte detection
AU2001241738A1 (en) 2000-02-25 2001-09-03 Corixa Corporation Compounds and methods for diagnosis and immunotherapy of tuberculosis
AU2001268678B2 (en) 2000-06-20 2006-11-16 Corixa Corporation Fusion proteins of mycobacterium tuberculosis
US7026465B2 (en) 2002-02-15 2006-04-11 Corixa Corporation Fusion proteins of Mycobacterium tuberculosis
ITRM20040091A1 (it) 2004-02-19 2004-05-19 Istituto Naz Per Le Malattie Test immunologico rapido per la diagnosi ed il monitoraggio dell'infezione tubercolare.
FI119445B (fi) * 2004-10-29 2008-11-14 Waertsilae Finland Oy Polttomoottorin polttoaineen syöttöjärjestelmän paineen värähtelyn vaimennin
SG159554A1 (en) 2004-11-16 2010-03-30 Crucell Holland Bv Multivalent vaccines comprising recombinant viral vectors
CN106390108B (zh) 2005-04-29 2020-09-08 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 用于预防或治疗结核分枝杆菌感染的新方法
FR2952058B1 (fr) 2009-10-29 2013-10-04 Centre Nat Rech Scient Procede de ligation native de polypeptides
BR112012018669A2 (pt) 2010-01-27 2017-09-05 Glaxosmithkline Biologicals Sa Proteína rv3616c modificada, uso de uma proteína rv3616c modificada, polinucleotídeo, uso de um polinucleotídeo, composição farmacêutica, composição imunogênica, proteína de fusão, e, polipeptídeo.
CN103260642B (zh) 2010-12-14 2018-03-16 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 分枝杆菌抗原组合物
FR2971509B1 (fr) * 2011-02-16 2013-02-22 Centre Nat Rech Scient Procede de preparation de peptides par assemblage de multiples fragments peptidiques
CN103290030A (zh) * 2012-02-23 2013-09-11 上海交通大学 一种结核分枝杆菌标志物HtdY的重组蛋白及其制备方法和临床应用
KR20200075023A (ko) * 2012-05-04 2020-06-25 화이자 인코포레이티드 전립선 관련된 항원 및 백신 기재 면역치료 요법
CN106414485A (zh) * 2014-04-04 2017-02-15 韦斯塔隆公司 人工活化的毒性肽
GB201513176D0 (en) 2015-07-27 2015-09-09 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel methods for inducing an immune response
FR3048286B1 (fr) * 2016-02-26 2021-01-22 Omunis Peptides immunogenes et leur utilisation
CN107304231B (zh) * 2016-04-18 2021-01-01 华中农业大学 一种结核分枝杆菌融合蛋白及应用
GB201614485D0 (en) * 2016-08-25 2016-10-12 Univ Oxford Innovation Ltd Immunogenic composition

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995001440A1 (en) * 1993-07-02 1995-01-12 Statens Seruminstitut Diagnostic skin test for tuberculosis
WO1995001441A1 (en) * 1993-07-02 1995-01-12 Statens Serumsinstitut Tuberculosis vaccine

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2244539A1 (en) * 1973-07-13 1975-04-18 Mitsui Pharmaceuticals Tuberculin active proteins and peptides prepn - from tubercle bacillus
FR2265402A1 (en) * 1974-03-29 1975-10-24 Mitsui Pharmaceuticals Tuberculin active proteins and peptides prepn - from tubercle bacillus
US4876089A (en) * 1984-09-06 1989-10-24 Chiron Corporation Feline leukemia virus protein vaccines
US4751180A (en) 1985-03-28 1988-06-14 Chiron Corporation Expression using fused genes providing for protein product
US4935233A (en) 1985-12-02 1990-06-19 G. D. Searle And Company Covalently linked polypeptide cell modulators
US5075109A (en) 1986-10-24 1991-12-24 Southern Research Institute Method of potentiating an immune response
US4897268A (en) 1987-08-03 1990-01-30 Southern Research Institute Drug delivery system and method of making the same
FR2677365B1 (fr) * 1991-06-07 1995-08-04 Pasteur Institut Proteines de mycobacterium et applications.
US5330754A (en) * 1992-06-29 1994-07-19 Archana Kapoor Membrane-associated immunogens of mycobacteria

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995001440A1 (en) * 1993-07-02 1995-01-12 Statens Seruminstitut Diagnostic skin test for tuberculosis
WO1995001441A1 (en) * 1993-07-02 1995-01-12 Statens Serumsinstitut Tuberculosis vaccine

Also Published As

Publication number Publication date
JP4324618B2 (ja) 2009-09-02
CA2684425A1 (en) 1997-03-13
JP2001517069A (ja) 2001-10-02
DE69636046T2 (de) 2006-11-23
EP1203817B1 (en) 2006-04-12
EP1712628A3 (en) 2007-05-23
EP1398379A2 (en) 2004-03-17
ES2262595T3 (es) 2006-12-01
EP0851927B1 (en) 2003-10-22
HUP9900902A3 (en) 2001-03-28
EP1203817A3 (en) 2003-01-29
DE69636487D1 (de) 2006-10-05
PT1398379E (pt) 2007-01-31
KR100433750B1 (ko) 2004-09-01
EP1347055B1 (en) 2009-03-18
EP1347055A2 (en) 2003-09-24
CY2570B1 (en) 2008-07-02
DK1203817T3 (da) 2006-08-14
WO1997009428A3 (en) 1997-07-17
HU227778B1 (en) 2012-02-28
NO20070621L (no) 1998-04-27
ES2210392T3 (es) 2004-07-01
BR9610262A (pt) 1999-07-06
DE69630457T2 (de) 2004-11-25
CA2230885A1 (en) 1997-03-13
TR200806258T2 (tr) 2008-10-21
ES2324529T3 (es) 2009-08-10
JP2009159982A (ja) 2009-07-23
MX9801638A (es) 1998-05-31
EP1712628B1 (en) 2011-06-22
ATE252640T1 (de) 2003-11-15
HUP9900902A2 (hu) 1999-07-28
TR199800411T1 (xx) 1998-05-21
CY2612B2 (en) 2010-12-22
DE69636046D1 (de) 2006-05-24
BR9610262B1 (pt) 2013-11-26
EP1398379A3 (en) 2004-07-14
WO1997009428A2 (en) 1997-03-13
IL123506A (en) 2004-12-15
DE69636487T2 (de) 2007-05-03
NO980883D0 (no) 1998-02-27
DE69637879D1 (de) 2009-04-30
ATE337399T1 (de) 2006-09-15
BR9612997B1 (pt) 2012-01-10
PT851927E (pt) 2004-03-31
CN1200147A (zh) 1998-11-25
NO20070619L (no) 1998-04-27
CZ297406B6 (cs) 2006-12-13
EP1347055A3 (en) 2003-11-26
EP1203817B9 (en) 2006-08-16
JP2006149406A (ja) 2006-06-15
EP1712628A2 (en) 2006-10-18
PL325373A1 (en) 1998-07-20
DK0851927T3 (da) 2004-01-26
JP4324596B2 (ja) 2009-09-02
CA2230885C (en) 2010-02-02
ES2271449T3 (es) 2007-04-16
AU727602B2 (en) 2000-12-14
JP2007228972A (ja) 2007-09-13
CA2653566A1 (en) 1997-03-13
PL186774B1 (pl) 2004-02-27
TR200403064T2 (tr) 2005-08-22
EP1398379B1 (en) 2006-08-23
PT1347055E (pt) 2009-06-19
NO324372B1 (no) 2007-10-01
CZ300953B6 (cs) 2009-09-23
CA2653566C (en) 2013-06-25
HU225979B1 (en) 2008-02-28
KR19990044347A (ko) 1999-06-25
IL123506A0 (en) 1998-10-30
ATE513915T1 (de) 2011-07-15
ATE323165T1 (de) 2006-04-15
CZ62898A3 (cs) 1999-10-13
TR200806259T2 (tr) 2008-10-21
ATE426025T1 (de) 2009-04-15
NO336288B1 (no) 2015-07-13
EP0851927A2 (en) 1998-07-08
NO20070618L (no) 1998-04-27
JP4324597B2 (ja) 2009-09-02
HK1059282A1 (en) 2004-06-25
EP1203817A2 (en) 2002-05-08
DE69630457D1 (de) 2003-11-27
NZ319377A (en) 2000-01-28
TR200901109T1 (tr) 2012-02-21
AU7158696A (en) 1997-03-27
DK1398379T3 (da) 2007-01-08
NO980883L (no) 1998-04-27
SI0851927T1 (en) 2004-02-29
DK1347055T3 (da) 2009-06-29
PT1203817E (pt) 2006-08-31
JP4382160B2 (ja) 2009-12-09
CN1117149C (zh) 2003-08-06
JP2006187292A (ja) 2006-07-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU727602B2 (en) Compounds and methods for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis
US6290969B1 (en) Compounds and methods for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis
US6592877B1 (en) Compounds and methods for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis
US6458366B1 (en) Compounds and methods for diagnosis of tuberculosis
US6350456B1 (en) Compositions and methods for the prevention and treatment of M. tuberculosis infection
PT2154248E (pt) Compostos e métodos para diagnóstico de tuberculose
SA99200488B1 (ar) تركيبات وطرق لاج والوقاية من الاصابة بعدوي بكتيريا العصيات الفطرية للدرنM.tuberculosis
EP1012293B1 (en) Compounds for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis and methods of their use
US6338852B1 (en) Compounds and methods for diagnosis of tuberculosis
WO1998016646A9 (en) Compounds and methods for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis
CZ126699A3 (cs) Polypeptid obsahující antigenní část rozpustného antigenu M. tuberculosis nebo variantu uvedeného antigenu, molekula DNA kódující tento polypeptid, expresivní vektor, hostitelská buňka, způsoby diagnostiky infekce M. tuberculosis a diagnostické kity
AU4036597A (en) Compounds and methods for treatment and diagnosis of mycobacterial infections
AU765833B2 (en) Compounds and methods for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis
MXPA99003392A (en) Compounds and methods for immunotherapy and diagnosis of tuberculosis
MXPA99003393A (en) Compounds and methods for diagnosis of tuberculosis

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20130830