CZ298671B6

CZ298671B6 - Zpusob zlepšení ochrany membrány proti rozpadu a potlacení hemolýzy koncentrovaných trombocytu pri jejich uskladnení v kontejneru, zpusob jejich dusledné sterilizace, zpusob zpracování na potlacení leukocytu a kontejner s uskladnenými koncentrovanými

Info

Publication number: CZ298671B6
Application number: CZ0368199A
Authority: CZ
Inventors: Dottori@Secondo
Original assignee: Sigma-Tau Industrie Farmaceutiche Riunite S. P. A.
Priority date: 1997-04-16
Filing date: 1998-04-15
Publication date: 2007-12-19
Also published as: CN1252687A; NZ500534A; EP0975214A1; CN1698430A; KR100508408B1; HUP0001936A3; IL132271A0; SK142799A3; US20010049089A1; IL132271A; PT975214E; US20030022228A1; JP2001523225A; DK0975214T3; HUP0001936A2; BR9808911A; SK284688B6; DE69821002T2; PL192684B1; ATE257326T1

Abstract

Trvanlivost koncentrátu krevních produktu suspendovaných ve stabilizacním roztoku, jmenovite krevních desticek, resp. koncentrátu trombocytu (PC), sezlepší prídavkem 0,25 mM až 50 mM L-karnitinu a jeho derivátu. Zlepšení umožní zvýšení životnosti konzerv, resp. kontejneru s PC, nad bežnou dobu. Látky takto upravené vykazují navíc pri transfuzi pacientovi prodloužený cirkulacní polocas. Zlepšení odolnosti membrány dosažené tímto zpusobem umožnuje ozarování zapecetených kontejneru krevních produktu až k dosažení dusledné sterilizace a znicení vnich obsažených leukocytu.

Description

(54) Název vynálezu:

Způsob zlepšení ochrany membrány proti rozpadu a potlačení hemolýzy koncentrovaných trombocytů při jejich uskladnění v kontejneru, způsob jejich důsledné sterilizace, způsob zpracování na potlačení leukocytů a kontejner s uskladněnými koncentrovanými trombocyty (57) Anotace:

Trvanlivost koncentrátů krevních produktů suspendovaných ve stabilizačním roztoku, jmenovitě krevních destiček, resp. koncentrátu trombocytů (PC), se zlepší přídavkem 0,25 mM až 50 mM L-kamitinu ajeho derivátů. Zlepšení umožní zvýšení životnosti konzerv, resp. kontejnerů s PC, nad běžnou dobu. Látky takto upravené vykazují navíc při transfuzi pacientovi prodloužený cirkulační poločas. Zlepšení odolnosti membrány dosažené tímto způsobem umožňuje ozařováni zapečetěných kontejnerů krevních produktů až k dosažení důsledné sterilizace a zničení v nich obsažených leukocytů.

O

CN

N

O

Způsob zlepšení ochrany membrány proti rozpadu a potlačení hemolýzy koncentrovaných trombocytů při jejich uskladněni v kontejneru, způsob jejich důsledné sterilizace, způsob zpracování na potlačení leukocytů a kontejner s uskladněnými koncentrovanými trombocyty

Oblast techniky

Vynález se týká metod zlepšujících uskladnění a stabilitu včetně odolávání hemolýze a zlepšení životnosti krevních produktů, jmenovitě krevních destiček v podobě koncentrátu, skladovaného v kontejneru. Řeší se způsob prodloužení životnosti těchto produktů, rovněž tak jako odolávání vlivům poškozujícím jejich membránu jako je zejména záření, což je dosahováno metodami, zahrnujícími skladování produktu v suspenzi v podpůrném roztoku.

Dosavadní stav techniky

Trvale roste zájem jak na národních tak mezinárodních dodávkách krve. Bere se v úvahu jak integrita, tak spolehlivost současných dodávek a možnost udržování větších zásob po delší dobu.

Jednou z příčin tohoto stavu je relativně krátká skladovací doba krevních produktů. Skladovací doba konzerv RBC (koncentráty červených krvinek nebo RCC), tedy běžně převažující formy krevních produktů pro transfuze a podobné úkony je omezena na 42denní skladování. Po této době značně klesá hladina ATP ve spojení s významnou změnou hodnoty pH, která intenzivně indikuje snížení životnosti, nebo pokud životnost trvá, indikuje to extrémně krátkou cirkulační dobu při infuzi. Samotnou krev není možno skladovat in vivo dostatečnou dobu. U krevních destiček je běžná skladovací doba ještě kratší a bývá normálně 5 dnů při 22 °C. Rozdíly ve skladovací stabilitě koncentrátů destiček (PC) oproti RBC závisí na probíhajících metabolických reakcích, částečně pro přítomnost mitochondrií v PC a jejich nepřítomnost v RBC. Zatímco oba krevní produkty vykazují pokles ATP spojený s poklesem pH v závislosti na čase, doprovázený tvor30 bou kyseliny mléčné, je přítomnost mitochondrií v PC spíše problémem aktivace vinou glykolýzy. Přitom přítomnost mitochondrií v PC pravděpodobně znásobuje tento problém. Z toho je patrné, že problém životnosti PC je výrazně závažnější, než u RBC.

Požadavky na spolehlivost a integritu dodávek krve současně vzrůstá. U krevních dodávek byly opakovaně zjištěny zvláště kontaminace bakteriemi nebo mikrobiálními látkami či vity. Taková situace je velmi vážná v zemích, kde nelze zajistit moderní způsoby odběru a skladování. I když je možno do odebraných produktů přidávat některá činidla pro snížení kontaminace, nelze to všeobecně doporučovat, protože při použití PC pro transfuzi se tato činidla při této transfuzi dostávají příjemci do jeho krevního oběhu. Jednou z doporučovaných alternativ je ozařování pro40 duktů po konzervování, které se obvykle provádí uskladněním do pružných plastových vinylových zásobníků. Takový ozařovací postup je nevhodný pro skladování RBC a PC, protože má za důsledek sníženou funkčnost buněk.

Malý, ale stále vzrůstající podíl populace, která je příjemcem krve, je pod rizikem obecně fatální příhody známé jako s transfuzí spojená porucha z příjmu transplantátu hostitelem (Transfusion Associated Grafit Versus Host Disease - TAGVHD), kde příčinou vzniku této nehody je přítomnost živých allogenních leukocytů. Tento syndrom se obvykle vyskytuje u imunosupresivních pacientů například s nádorem nebo u pacientů s transplantovanou kostní dření, avšak může také nastat u imunokompetentních osob s omezeným HLA (leukocytovým Locus A) polymorfizmem (Human Leukocyte Locus A - HLA).

Zvláštní pozornost byla věnována hledání způsobů k prodloužení stability při skladování. Jeden takový způsob k prodloužení doby skladování PC je citován ve spisu US 5 466 573. Tento patent je zaměřen na úpravu PC v přítomnosti zdroje acetátových iontů, které působí jak jako substrát

-1 CZ 298671 B6 pro oxidativní fosforylaci, tak jako pufr, působící proti snižování hodnoty pH, způsobené produkcí kyseliny mléčné. Takováto metoda ovšem nepůsobí přímo na hemolýzu a proti rozpadu membrány. Alternativní způsob je popsán ve spis US 5 496 821, resp. v analogickém spisu EP 0627161. V těchto spisech je patrné, že všechna krev se skladuje v preparátu obsahujícím L5 kamitin (LC) nebo deriváty alkanoyl-L-kamitinů. Není však zde popsáno, jakým způsobem na krevní produkty jako je PC nebo RBC suspenze působí a výklad se týká nejvýše působení LC na vlastnosti membrány. Také v příkladných provedeních se neilustruje působení na PC, ale jen na RBC nebo na erytrocyty. Lze tedy říci, že v posledně uvedených spisech je pouze spíše všeobecná zmínka o působení podpůrného roztoku s obsahem LC na prodloužení životnosti krevních ío produktů, ale není zde patrný ani rozbor mechanismu působení LC na trombocyty, resp. na jejich koncentráty (PC), ani účinky pro kombinaci s ozařováním produktů, zejména pak s produktem typu PC.

Jak je už výše zmíněno, kontaminace dodávek krve mikrobiálními materiály nebo viry je dalším problémem v oblasti medicíny. Jedním ze způsobů sterilizace produktu a pro zlepšení spolehlivosti s ohledem na kontaminaci, je ozařování krevního produktu. Obecně se doporučuje gama záření, s hodnotami okolo 25 centigray (cGy), kde se produkt ozáří po jeho uzavření v plastovém, skleněném nebo jiném zásobníku, resp. kontejneru. Ozařování bohužel způsobuje léze buněčných membrán s hemolýzou RBC. Při ozařování krevních produktů, včetně samotné krve, konzerv RBC a PC, se pak sice řeší samotná sterilizace, ale problémy s životností produktů nejen přetrvávají, ale jsou ještě závažnější, a to zejména u koncentrátů trombocytů (PC).

Dosud nedostatečně řešeným úkolem pro práce odborníků v tomto oboru zůstává tedy vyvinutí metody, umožňující rozšíření doby životnosti a poločasu oběhu RBC a zejména PC při transfuzi, a to nad dosavadní běžný časový rámec. Cílem zkoumání odborníků navíc zůstává nalezení způsobu jakým se má provádět sterilizace krevních produktů, včetně samotné krve, konzerv RBC a zejména PC ozařováním, ovšem bez podstatného poškození membrány, lézí a hemolýzy.

Podstata vynálezu

Uvedené nevýhody se v podstatné míře potlačují a naznačené úkoly ke zlepšení odolnosti a životnosti krevních produktů, jmenovitě PC, se řeší ve shodě s předkládaným vynálezem. Řešení přináší především způsob zlepšení odolnosti membrány proti rozpadu a potlačení hemolýzy koncentrovaných trombocytů (PC) při jejich uskladnění v kontejneru, kde podstata spočívá v tom, že PC se suspendují v podpůrném roztoku, kde podpůrný roztok obsahuje kamitinový produkt (LC), vybíraný ze skupiny sestávající z L-kamitinu, alkanoyl-L-kamitinů nebo jejich farmakologicky přijatelných solí a jejich směsí, použitých v účinném množství ke zlepšení schopnosti PC udržovat odolnost membrány jmenovaných PC proti rozpadu a potlačit hemolýzu, v porov40 nání s identickými podpůrnými roztoky bez jmenovaného L-kamitinu, alkanoyl-L-kamitinů nebo jejich farmakologicky přijatelných solí a jejich směsí. S výhodou potom L-kamitin, alkanoyl-Lkamitin a jejich směsi jsou použity s koncentrací v rozmezí 0,25 až 50 mM, zejména pak je výhodné a potenciálně časté použití, kde L-kamitin, alkanoyl-L-kamitin a jejich směsi jsou použity s koncentrací v rozmezí 1 až 20 mM.

Další podstatou vynálezu je kontejner s uskladněným PC, upravený pro uskladnění PC s využitím popsaných způsobů zpracování, kde podstata spočívá v tom, že kontejner je vytvořen jako uzavřený obal, naplněný suspenzí PC ve stabilizačním roztoku, kde stabilizační roztok obsahuje L-kamitin, alkanoyl-L-kamitiny a jejich směsi v koncentraci v rozmezí 0,25 až 50 mM. S výho50 dou je takový kontejner vytvořen jako uzavřený obal, naplněný suspenzí PC ve stabilizačním roztoku, kde stabilizační roztok je ve stavu v uzavřeném obalu podrobeném ozáření, a to zářením, vybraným svým druhem a upraveným svojí intenzitou pro důslednou sterilizaci a zničení v něm obsažených leukocytů.

-2CZ 298671 B6

Ještě dále je podstatou vynálezu způsob důsledné sterilizace koncentrovaných trombocytů (PC), který spočívá v tom, že PC se suspendují v podpůrném roztoku, kde podpůrný roztok obsahuje LC v koncentraci v rozmezí 0,25 až 50 mM, načež po uzavření těchto PC do kontejneru se v tomto kontejneru PC ozařují, a to zářením, vybraným svým druhem a upraveným svojí intenzi5 tou pro důslednou sterilizaci, a zničení v něm obsažených leukocytů.

Jedná se ještě i o způsob zpracování koncentrovaných trombocytů (PC) na potlačení přítomných leukocytů, spočívající v tom, že PC se suspendují v podpůrném roztoku, kde podpůrný roztok obsahuje LC v koncentraci v rozmezí 0,25 až 50 mM, načež po uzavření těchto PC do kontejneru ío se v tomto kontejneru PC ozařují, a to zářením, vybraným svým druhem a upraveným svojí intenzitou pro úplné zničení přítomných leukocytů za současného potlačení poškození membrány PC.

Dalším způsobem, v rámci rozsahu ochrany předkládaného vynálezu, je způsob zlepšení odolnosti membrány proti rozpadu a potlačení hemolýzy PC při jejich uskladnění po jejich ozařování pro zničení v nich obsažených imunocytů, kde podstatou je, že PC se suspendují v podpůrném roztoku, který obsahuje kamitinový produkt (LC) vybraný ze skupiny, sestávající z L-kamitinu, alkanoyl-L-kamitinu a jejich směsí v množství účinném pro zlepšení schopnosti PC udržet odolnost membrány PC proti rozpadu a tím potlačit hemolýzu v porovnání s identickými podpůrnými roztoky, neobsahujícími jmenovaný L-kamitin, alkanoyl-L-kamitiny a jejich směsi.

Předchozí způsoby jsou s výhodou provedeny za podmínky, kdy alkanoyl L-kamitin se vybírá ze skupiny, sestávající z acetyl-, propionyl-, butyryl-, izobutyryl-, valeryl- a izovaleryl-L-kamitinu.

Analogicky také kontejner s uskladněným PC, výše popsaný, bude vykazovat zvláště výhodné vlastnosti, jestliže v podpůrném roztoku, kde jsou suspendovány PC, obsažený alkanoyl-L-kamitin se vybírá ze skupiny sestávající z acetyl-, propionyl-, butyryl-, izobutyryl-, valeryl- a izovaleryl-L- kamitinu.

Popsanými způsoby, resp. v souvislosti s provozováním těchto způsobů vytvořeným kontejnerem s uskladněnými PC, se dosahuje požadovaných účinků na zvýšení životnosti a odolnosti PC.

Po rozsáhlém výzkumu bylo totiž zjištěno, že poškození membrány, způsobené zejména u PC při skladování nebo při skladování s ozařováním se může podstatně potlačit nebo odstranit suspendováním krevních produktů do běžného ochranného roztoku jako je AS-3, kde ochranný roztok dále obsahuje L-kamitin nebo deriváty alkanoyl-L. kamitinu v koncentraci 0,25 až 50 mM nebo vyšší. Přínos zde spočívá v poznání, že podstatný rozklad krevních produktů, který je běžně spojen s poklesem hodnoty ATP a pH, má spojitost s poškozením membrány a hemolýzou. Odolnost a rekonstrukci membrány lze podle provedených výzkumů ovlivnit reacylací lipidů, částečně Lkamitinem, irreverzibilní absorpcí na krevní produkty, především na PC.

Příklad provedení vynálezu

Tento vynález používá L-kamitin a jeho alkanoylderiváty jako činidla podporujícího odolnost a rekonstrukci buněčné membrány a k potlačení hemolýzy v krevních produktech. Alkanoyl-Lkamitiny jsou acetyl-, butyryl-, izobutyiyl-, valeryl-, izovaleryl- a zvláště propionyl-L-kamitin. Pokud se zde odkazuje na LC, jedná se vždy obecně o tuto skupinu L-kamitinů. Namísto L-karnitinu mohou být použity popsané alkanoyl-L-kamitiny a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Přídavek LC ke krevním produktům, zde tedy k PC, vyžaduje, aby byl LC přítomen v účinném množství k udržení odolnosti a funkce a k potlačení hemolýzy. Provedený výzkum ukazuje na oblast minimální účinnosti na produkt pro většinu dárců s koncentrací mezi 0,25 mM až 0,5 mM. Horní limit je praktičtější než fyziologický. Koncentrace 50 mM nebo vyšší je dobře tolerována. Hodnoty jsou v souladu s toxikologickými hodnotami a osmoticky přijatelné. Přednost se dává

-3 CZ 298671 B6 koncentracím 1 až 30 mM. Pro obor 1 až 10 mM nebo vyšší je vhodná oblast 4 až 6 mM, s možností značných rozdílů. Účinek tohoto vynálezu včetně prodloužení životnosti a prodloužení oběhového poločasu během transfuze může být silně závislý na dárci. Obecně řečeno, účinná koncentrace LC je 0,5 až 50 mM. Odborník znalý v oboru může dojít i k rozšíření této oblasti v obou směrech, pokud v závislosti na příslušném dárci se to jeví jako nutné, a to aniž by hrozily negativní účinky na produkt nebo na příjemce.

LC je kompatibilní s konvenčními podpůrnými roztoky, resp. stabilizačními roztoky, které se připravují zvláště k zajištění pufrování. Obvykle používané roztoky obsahují ACED (kyselina citroío nová - citrát sodný - dextróza), CPD (citrát - fosfát - dextróza) a jejich modifikace včetně

CPD2/A-3 a odpovídající přípravky. Přípravek typicky obsahuje cukry jako je glukóza nebo mannitol, nejméně jednu fosforeěnanovou sůl, citrát a další soli pro dosažení rovnováhy. LC je normálně rozpustný a může se k těmto přípravkům volně přidávat v požadovaném množství.

Vhodné roztoky jsou popsány ve spisu US 5 496 821, resp. EP 0627161, zde uvedených jako odkaz. Lze používat i jiné, než běžně používané roztoky, včetně umělé plazmy a dalších fyziologicky přijatelných roztoků, pokud obsahují LC podle předkládaného vynálezu. Důležitou podpůrnou složkou roztoku je právě LC.

Schopnost LC, pokud je obsažen v suspenzi krevních produktů typu PC, prodloužit životnost a tím i skladovatelnost a cirkulační dobu při transfuzi příjemci, je dále uvedena jako příklad na pokusech in vitro a in vivo. Pokusy využívají LC, avšak lze použít i další alkanoyl-L-kamitiny. Zvláštní důležitost dále uvedené demonstrace je ve zlepšení odolnosti (včetně rekonstrukce) buněčné membrány a potlačení hemolýzy.

Ozařování

Problém kontaminace krevních produktů, zejména zde pak PC, bakteriemi nebo dalšími mikrobiálními materiály nebo viry je možno podstatně snížit ozařováním. Úroveň ozáření nutná k steri30 lizaci a důsledné, tedy 100% mortalitě výše uvedených kontaminantů byla dostatečně probádána.

Důležitější je, že leukocyty mohou být podobně ozařováním zničeny. Lze používat různé způsoby ozařování včetně gama záření (Kobalt GG, van de Graafův akcelerátor), UV záření, ozařování červeným nebo infračerveným ozařováním, atd. Dostatečnou dávkou je ekvivalent 20 až 50 cGy gama záření.

Celosvětově se ročně při transfuzní podpoře různých kategorií pacientů odebere a použije mezi 60 a 80 miliony transfuzních konzerv. V méně vyvinutých zemích je poměr odběrů na 1000 obyvatel nižší a většina krevních transfuzí se provádí u porodnických a pediatrických případů, zvláš40 tě při malárii a při s ní spojenou anemií. Ve vyspělých zemích je počet odběrů na 1000 obyvatel 50 až 10 krát vyšší a většina transfuzí se využívá pro pacienty při chirurgických zákrocích (50 %) nebo pro pacienty s nádory ve spojení s anemií, transplantací kostní dřeně a s nemaligním gastrointestinálním krvácením. Existuje mnoho potenciálních nepříznivých účinků spojených s transfuzemi allogenní krve. Jednou ze zvláštních komplikací nepříznivě spojenou s krevní transfuzí je vzácná a obvykle fatální entita spojená s transfuzí známá jako porucha z příjmu transplantátu hostitelem (grafit versus host disease - ΤΑ-GVHD), což je komplikace způsobená allogenními imunocyty.

Onemocnění ΤΑ-GVHD je vzácnou komplikaci krevní transfuze vyskytující se potenciálně u dvou typů příjemců krevní transfuze. TA- GVHD má mortalitu dosahující až 100 % a prevencí je pouze účinný včasný zákrok. Prvním typem jsou imunokompromisní pacienti jako jsou pacienti po transplantaci kostní dřeně nebo jiných orgánů, s Hodgkinsovou chorobou nebo vrozenou nedostatečností imunitního systému. Druhým typem jsou neimunokompromisní pacienti, u nichž existuje příbuznost HLA mezi dárcem a příjemcem. To se často vyskytuje u dárců z blízkého

-4CZ 298671 B6 příbuzenstva nebo u populace s omezenějším HLA polymorfizmem jako tomu je u obyvatel v Japonsku nebo Izraeli. Na základě tohoto zjištění je univerzální praktikou ozařování krevních produktů gama zářením o střední dávce přibližně 25 centigray (cGy) za účelem odbourání replikační schopnosti životaschopných imunocytů. Je však nutno poznamenat, že TA-GVHD je spojena s čerstvými buněčnými produkty, tj. obecně čerstvějšími než 15 dnů. K předcházení této komplikaci však přesto není „stárnutí“ krve přijatou praxí. Přestože jsou imunocyty součástí populace s allogenními leukocyty, není stupeň leukodeplece dosahovaný běžně filtrací do třetí generace dostatečnou zárukou pro prevenci této komplikace. Gama záření zůstává proto až dosud jediným přijatelným profylaktickým zákrokem.

Co se týče ozařování PC, pak i zde byly zaznamenány ztráty, resp. zkracování životnosti, vzniklé jako následek takového ozařování. S ohledem na obecně kratší životnost PC se potom u PC jeví tento problém jako závažnější, než u ostatních krevních produktů.

Značný počet důkazů ukazuje, že gama záření způsobuje tvorbu aktivovaných kyslíkových produktů jako je atomární kyslík, hydroxylový radikál a peroxidový aniont. Tyto radikály způsobují intracelulámí poškození DNK, čímž zabraňují replikaci buněk nezbytných při TA-GVHD. Ty samé kyslíkové radikály však mohou oxidovat membránové lipidy červených krvinek a možná i membrány destiček, včetně membránových lézí, které snižují kvalitu (potenci) buněčného produktu.

Je známo, že L-kamitin hraje klíčovou roli při transportu mastných kyselin s dlouhým řetězcem mitichondriální membránou. Dědičné poruchy, u kterých jde o poruchu kamitinového systému při transportu mastných kyselin s dlouhým řetězcem, mají za následek značné poškození funkce kosterního svalstva.

L-kamitin nebo výše uvedené alkanoyl-L-kamitiny mohou být použity k odstranění nebo prevenci membránových lézí způsobených ozařováním.

K omezení citlivosti PC k membránovým lézím a hemolýze, mohou být krevní produkty nejprve suspendovány v roztoku obsahujícím L-kamitin nebo výše uvedené alkanoyl-L-kamitiny v množství 0,25 mM až 50 mM. Odolnosti buněčné membrány a potlačení hemolýzy je dosaženo v dostatečném stupni, aby mohl být produkt ozařován za účelem sterilizace a následně mu byla prodloužena skladovací doba a poločas cirkulace během transfuze. Lze tak dosáhnout životnosti řádu běžné životnosti pomocí látek, které mohou být s jistotou považovány za sterilní a s nepravděpodobnou možností zavlečení TA-GVHD, vlivem ozáření po zapečetění suspenze krevního produktu. Je nutno zdůraznit, že termín krevní produkt v tomto smyslu se zde interpretuje tak, že obsahuje krevní destičky, resp. koncentrované trombocyty (PC).

Předložený vynález skýtá možnosti obměn, v návaznosti na to, jak byl popsán jak v obecné formě, tak i s odkazy na některé specifické parametry. Varianty, vzniklé uvedenými obměnami, budou pak pro oborníky z příslušného oboru zřejmé již bez vynaložení další vynálezecké činnosti. Zvláště lze alternativně upravovat stabilizační přípravky, ochranné přípravky krevních produktů, inhibitory a podobně. Od dárce k dárci a od příjemce k příjemci se navíc budou měnit speci45 fícké koncentrace, životnosti a cirkulační poločas. Takovéto odchylky zůstávají v rozsahu vynálezu, pokud to není specificky vyloučeno ve vztahu ke znění patentových nároků, dále uvedených.

-5CZ 298671 B6

PATENTOVÉ NÁROKY

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

5 1. Způsob zlepšení odolnosti membrány proti rozpadu a potlačení hemolýzy koncentrovaných trombocytů (PC) při jejich uskladnění v kontejneru, vyznačující se tím, že PC se suspendují v podpůrném roztoku, kde podpůrný roztok obsahuje kamitinový produkt (LC), vybíraný ze skupiny sestávající z L-kamitinu, alkanoyl-L-kamitinů nebo jejich farmakologicky přijatelných solí a jejich směsí, použitých v účinném množství ke zlepšení schopnosti PC udržovat ío odolnost membrány jmenovaných PC proti rozpadu a potlačit hemolýzu, v porovnání s identickými podpůrnými roztoky bez jmenovaného L-kamitinu, alkanoyl-L-kamitinů nebo jejich farmakologicky přijatelných solí a jejich směsí.
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že L-kamitin, alkanoyl-L-kamitin

15 a jejich směsi jsou použity s koncentrací v rozmezí 0,25 až 50 mM.
3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že L-kamitin, alkanoyl-L-kamitin a jejich směsi jsou použity s koncentrací v rozmezí 1 až 20 mM.

20
4. Kontejner s uskladněnými PC, upravený pro uskladnění PC s využitím způsobu podle nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že je vytvořen jako uzavřený obal, naplněný suspenzí PC ve stabilizačním roztoku, kde stabilizační roztok obsahuje L-kamitin, alkanoyl-L-kamitiny a jejich směsí s koncentrací v rozmezí 0,25 až 50 mM.

25
5. Kontejner s uskladněnými PC, podle nároku 4, vyznačující se tím, že je vytvořen jako uzavřený obal, naplněný suspenzí PC ve stabilizačním roztoku, kde stabilizační roztok je ve stavu v uzavřeném obalu podrobeném ozáření, a to zářením, vybraným svým druhem a upraveným svojí intenzitou pro důslednou sterilizaci a zničení v něm obsažených leukocytů.

30
6. Způsob důsledné sterilizace koncentrovaných trombocytů (PC), vyznačující se tím, že PC se suspendují v podpůrném roztoku, kde podpůrný roztok obsahuje LC s koncentrací v rozmezí 0,25 až 50 mM, načež po uzavření těchto PC do kontejneru se v tomto kontejneru PC ozařují, a to zářením, vybraným svým druhem a upraveným svojí intenzitou pro důslednou sterilizaci a zničení v něm obsažených leukocytů.
7. Způsob zpracování koncentrovaných trombocytů (PC) na potlačení přítomných leukocytů, vyznačující se tím, že PC se suspendují v podpůrném roztoku, kde podpůrný roztok obsahuje LC s koncentrací v rozmezí 0,25 až 50 mM, načež po uzavření těchto PC do kontejneru se v tomto kontejneru PC ozařují, a to zářením, vybraným svým druhem a upraveným svojí inten40 žitou pro úplné zničení přítomných leukocytů, a to při potlačení poškození membrány PC.
8. Způsob zlepšení odolnosti membrány proti rozpadu a potlačení hemolýzy PC při jejich uskladnění po jejich ozařování pro zničení v nich obsažených imunocytů, vyznačující se tím, že PC se suspendují v podpůrném roztoku, který obsahuje kamitinový produkt (LC)

45 vybraný ze skupiny, sestávající z L-kamitinu, alkanoyl-L-kamitinu a jejich směsí v množství účinném pro zlepšení schopnosti PC udržet odolnost membrány PC proti rozpadu a tím potlačit hemolýzu v porovnání s identickými podpůrnými roztoky, neobsahujícími jmenovaný L-kamitin, alkanoyl-L-kamitiny a jejich směsi.

-6CZ 298671 B6
9. Způsob podle nároků 1,2, 3, 6, 7a 8, vyznačující se tím, že alkanoyl-L-kamitin se vybírá ze skupiny, sestávající z acetyl-, propionyl-, butyryl-, izobutyryl-, valeryl- a izovalerylL-kamitinu.
10. Kontejner s uskladněným PC podle nároků 4a 5, vyznačující se tím, že alkanoyl-L-kamitin se vybírá ze skupiny sestávající z acetyl-, propionyl-, butyryl-, izobutyryl-, valeryl- a izovaleryl-L-kamitinu.

2 výkresy

-7CZ 298671 B6

Obrázek 1 životnost dnů