CZ298659B6 - ((4-(2-Azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl)hydrazono)propandinitril a zpusob a referencní prípravek pro stanovení potenciálne genotoxických necistot ve vzorcích šarže levosimendanu s jeho použitím - Google Patents
((4-(2-Azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl)hydrazono)propandinitril a zpusob a referencní prípravek pro stanovení potenciálne genotoxických necistot ve vzorcích šarže levosimendanu s jeho použitím Download PDFInfo
- Publication number
- CZ298659B6 CZ298659B6 CZ20004555A CZ20004555A CZ298659B6 CZ 298659 B6 CZ298659 B6 CZ 298659B6 CZ 20004555 A CZ20004555 A CZ 20004555A CZ 20004555 A CZ20004555 A CZ 20004555A CZ 298659 B6 CZ298659 B6 CZ 298659B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- levosimendan
- determination
- methyl
- azido
- propanedinitrile
- Prior art date
Links
- WHXMKTBCFHIYNQ-SECBINFHSA-N levosimendan Chemical compound C[C@@H]1CC(=O)NN=C1C1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 WHXMKTBCFHIYNQ-SECBINFHSA-N 0.000 title claims abstract description 41
- 229960000692 levosimendan Drugs 0.000 title claims abstract description 41
- 230000001738 genotoxic effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 239000012535 impurity Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 231100000024 genotoxic Toxicity 0.000 title claims abstract description 14
- CUONGYYJJVDODC-UHFFFAOYSA-N malononitrile Chemical compound N#CCC#N CUONGYYJJVDODC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 11
- -1 (4-(2-Azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)phenyl)hydrazono Chemical group 0.000 title claims abstract description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 31
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 9
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 7
- 239000012087 reference standard solution Substances 0.000 claims description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 125000002098 pyridazinyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- KWFMPQFMZALWEW-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-(2-azido-3-methyl-5-oxooxolan-2-yl)phenyl]hydrazinylidene]propanedinitrile Chemical compound CC1CC(=O)OC1(N=[N+]=[N-])C1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 KWFMPQFMZALWEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethyl sulfoxide Natural products CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 8
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 125000005638 hydrazono group Chemical group 0.000 description 2
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 2
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 description 2
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- AAILEWXSEQLMNI-UHFFFAOYSA-N 1h-pyridazin-6-one Chemical compound OC1=CC=CN=N1 AAILEWXSEQLMNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MNDMDCJDDYWWQK-UHFFFAOYSA-N 2-(4-aminophenyl)-5-methyl-4,5-dihydropyridazin-3-one Chemical compound NC1=CC=C(C=C1)N1N=CC(CC1=O)C MNDMDCJDDYWWQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJNZXLAFIPKXIG-UHFFFAOYSA-N 2-Chlorobenzylidenemalononitrile Chemical compound ClC1=CC=CC=C1C=C(C#N)C#N JJNZXLAFIPKXIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GDMRFHZLKNYRRO-UHFFFAOYSA-N 3-(4-aminophenyl)-4-methyl-4,5-dihydro-1h-pyridazin-6-one Chemical compound CC1CC(=O)NN=C1C1=CC=C(N)C=C1 GDMRFHZLKNYRRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010953 Ames test Methods 0.000 description 1
- 231100000039 Ames test Toxicity 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 239000013058 crude material Substances 0.000 description 1
- UKJLNMAFNRKWGR-UHFFFAOYSA-N cyclohexatrienamine Chemical group NC1=CC=C=C[CH]1 UKJLNMAFNRKWGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;toluene Chemical compound CCOC(C)=O.CC1=CC=CC=C1 OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000150 mutagenicity / genotoxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D307/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D307/32—Oxygen atoms
- C07D307/33—Oxygen atoms in position 2, the oxygen atom being in its keto or unsubstituted enol form
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D307/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N2030/042—Standards
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/145555—Hetero-N
- Y10T436/147777—Plural nitrogen in the same ring [e.g., barbituates, creatinine, etc.]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
((4-(2-Azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl)hydrazono)propandinitril vzorce I a jeho diastereomery. Použití tohoto dinitrilu jakožto referencní slouceniny pro stanovení potenciálne genotoxických necistot ve vzorcích šarže levosimendanu a referencní prípravek s jeho obsahem dinitrilu pro toto stanovení. Rešení se také týká analytického zpusobu stanovení potenciálne genotoxických necistotve vzorcích šarže levosimendanu.
Description
Předkládaný vynález se týká [[4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilu I a jeho použití jako referenční sloučeniny v analýze syntézy šarží levosi10 mendanu, zejména pro stanovení potencionálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarží levosimendanu. Předkládaný vynález se také týká analytického způsobu stanovení potencionálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarží levosimendanu, kde [[4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril I je použit jako referenční sloučenina.
Dosavadní stav techniky
Levosimendan, který je enantiomerem [[4-(1,4,5,6-tetrahydro-4-methyl-6-oxo-3-pyridazinyl)fenyljhydrazonojpropandinitrilu, a způsob jeho přípravy jsou popsány např. v patentu
EP 565 546 Bl. Levosimendan je účinný v léčbě srdečního selhání a významně se váže v závislosti na kalciu na troponin. Použití levosimendanu v léčbě ischémie myokardu je popsáno ve WO 93/21921. Hemodynamické účinky levosimendanu u člověka jsou popsány v práci Sundberg, S. et al. Am. J. Cardiol., 1995: 75: 1061-1066. Levosimendan je reprezentován vzorcem:
Klinické studie potvrdily prospěšné účinky levosimendanu u pacientů se srdečním selháním.
Levosimendan může být připraven vysoce čistý a v téměř kvantitativních výtěžcích reakcí (-)-630 (4-aminofenyl)-5-methyl-4,5-dihydro-3-(2H)-pyridazinonu s dusitanem sodným a malononitrilem, jak je popsáno v patentu EP 565 546 Bl. Bylo však zjištěno, že syntetizované vzorky levosimendanu vykazují občas v testu na mutagenitu bakterií (Ames test) potenciální genotoxické vlastnosti.
Podstata vynálezu
Nyní bylo zjištěno, že potenciální genotoxické vlastnosti vzorků levosimendanu jsou způsobeny nečistotou tvořenou azido derivátem majícím vzorec I
-1 CZ 298659 B6
Azido derivát je účinný mutagen, který se může vytvořit během syntézy levosimendanu v množství, které je dostatečné pro vytvoření pozitivního výsledku v testu mutageneze bakterií.
Tato sloučenina, nazývaná [[4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazonojpropandinitril I, je proto užitečná jako referenční sloučenina v rutinní analýze syntézy šarží levosimendanu, obzvláště pro stanovení potenciálně genotoxických nečistot v šaržích levosimendanu. Přítomnost sloučeniny I v šarži levosimendanu ukazuje, že je nezbytné provést další rekrystalizaci pro získání levosimendanu vhodného pro použití jako léku.
Předmětem vynálezu je ((4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl)hydrazono)propandinitril vzorce I a jeho diastereomery.
Dále je předmětem vynálezu také referenční přípravek pro stanovení potenciálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarže levosimendanu, jehož podstatou je, že obsahuje výše uvedený dinitril vzorce I, popřípadě spolu s analyticky přijatelným nosičem.
Ve výhodném provedení je tento přípravek v podstatě prostý pyridazinylových sloučenin.
Předmětem vynálezu je také použití dinitrilu vzorce I jakožto referenční sloučeniny pro stanovení potenciálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarže levosimendanu a analytický způsob stanovení potenciálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarže levosimendanu, při němž se jako referenční sloučeniny použije tohoto dinitrilu. Vzorek šarže levosimendanu se přednostně analyzuje pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie (HPLC).
Konečně je předmětem vynálezu také analytický způsob stanovení potenciálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarže levosimendanu, jehož podstata spočívá v tom, že se připraví referenční standardní roztok převedením dinitrilu vzorce I do roztoku, dále se připraví testovaný roztok převedením vzorku šarže levosimendanu do roztoku, pořídí se HPLC chromatogram jednak refe30 renčního standardního roztoku a jednak testovaného roztoku a určí se koncentrace dinitrilu podle nároku 1 ve vzorku.
Termín „analyticky přijatelný nosič“ zde znamená nosič, který nezabraňuje kvalitativní nebo kvantitativní analýze sloučeniny I. Výběr vhodného analyticky přijatelného nosiče je dobře znám osobám znalým oboru. Příkladem analyticky přijatelného nosiče je dimethylsulfoxid.
Sloučenina I může být připravena reakcí 6-(4-aminofenyl)-5-methyl-4,5-dihydro-3-(2H-pyridazinonu s dusitanem sodným a malononitrilem, kde dusitan sodný je použit v molámím nadbytku, a dále separací sloučeniny I z reakční směsi. Postup je popsán detailně v příkladu 1.
Produkt šarže levosimendanu je přednostně analyzován za použití vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC). Vhodné zařízení zahrnuje například C-8 HPLC kolonu s reverzní fází sUV detekcí při 360 nm. Mobilní fází je například směs fosfátového pufru, pH 2,1, a acetonitrilu. Vzorek levosimendanu je rozpuštěn ve vhodném rozpouštědle, jako je například směs
-2CZ 298659 B6 dimethylsulfoxidu, methanolu a vody. Referenční roztoky jsou připraveny rozpuštěním sloučeniny I ve vhodném rozpouštědle. Retenční časy levosimendanu a sloučeniny I nebo jejich diastereomerů jsou stanoveny podle použitých chromatografických podmínek. Množství sloučeniny I ve vzorku levosimendanu je určeno srovnáním chromatogramů roztoku se vzorkem a roztoku referenčního. Postup je popsán detailně v příkladu 2.
Množství nežádoucí nečistoty I v šarži levosimendanu může být sníženo pomocí metod známých v oboru, jako je například rekrystalizace. Rekrystalizace levosimendanu může být provedena z jakéhokoli vhodného rozpouštědla, kdy přednostním rozpouštědlem je aceton.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 je HPLC chromatogram standardu [[4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-215 yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilu (0,04 pg/ml).
Obr. 2 je HPLC chromatogram levosimendanu ve formě surového materiálu.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1. Příprava [[4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilu (směsí diastereomerů)
6-(4-Aminofenyl)-4,5-dihydro-5-methyl-3-(2H)-pyridazinon (153 g, 0,75 mol) byl rozpuštěn v kyselině octové (750 ml). Do roztoku byl pomalu přidán při teplotě 10 až 20 °C dusitan sodný v pevné formě (210 g, 3,0 mmol). Reakční směs byla rychle nalita do roztoku malononitrilu (150 g, 2,3 mol) o teplotě 20 °C a vody (1500 ml). Výsledná směs byla promíchávána při teplotě 20 až 25 °C po dobu 60 minut a poté zfiltrována a promyta vodou. Vlhký pevný materiál byl postupně extrahován tetrahydrofuranem (300 ml) a ethyl acetátem (1900 ml). Zkombinované extrakty byly vysušeny síranem sodným a rozpouštědla byla odpařena ve vakuu. Reziduum bylo rozmělněno v ethylacetátu (200 ml), zfiltrováno a filtrát byl pod vakuem odpařen. Reziduum (8,0 g) bylo purifikováno chromatograficky na silikagelu za použití toluenu-ethyl acetátu 2:1 jako elučního činidla. Po krystalizaci z toluenu byl výtěžek čisté směsi diastereomerů 1,0 g.
Hlavní složka směsi může být obohacena vícečetnou krystalizaci z toluenu, ale pro účely analytické je směs dostatečná. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, σ) hlavní diastereomer 1,06 (d, 3H, J = 6 Hz), 2,55 (dd, 1H, J = 16 Hz, 11 Hz), 2,67 (m, 1H), 2,78 (dd, 1H, J = 16 Hz, 8 Hz), 7,59 (d, 1H, J = 9 Hz, 7,62 (d, 1H, J = 9 Hz), 12,6 (široké s, 1H), vedlejší diastereomer 0,60 (d, 3H, J = 7 Hz), 2,43 (dd, 1H, J = 18 Hz, 2 Hz), 2,78 (m, 1H), 3,14 (dd, 1H, J = 8 Hz, 18 Hz), 7,54 (d, 1H, J =9 Hz), 7,61 (d, 1H, J = 9 Hz), 12,6 (široké s, 1H).
Příklad 2. Použití [[4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilu I jako referenční sloučeniny pro HPLC chromatografii
HPLC (vysokoúčinná kapalinová chromatografie) sloučeniny I v hrubém materiálu levosimendanu byla založena na chromatografii na C-8 HPLC koloně s reverzní fází s UV detekcí při 360 nm. Mobilní fáze byla tvořena acetonitrilem a fosfátovým pufrem, pH 2,1.
Činidla:
1. Methanol, HPLC čistota
2. Dihydrogenfosforečnan sodný, NaH2PO4 x H2O, Merck
3. Kyselina orthofosforečná, H3PO4, Merck
-3 CZ 298659 B6
4. Fosfátový pufr, pH 2,1:
Rozpusťte 1,8 g dihydrogenfosforečnanu sodného (NaffPCh) ve vodě a přidejte 2,0 ml kyseliny fosforečné. Upravte pH, pokud je nutné, pomocí 2M hydroxidu sodného nebo 1M kyseliny fosforečné. Nařeďte vodou do 1000,0 ml.
5. Dimethylsulfoxid, HPLC čistota, BDH
6. Acetonitril, HPLC čistota
7. Rozpouštědlo: Smíchejte 200 ml methanolu s 800 ml vody
8. Referenční standard [[4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril
Standardní roztoky (referenční preparáty sloučeniny I):
Zásobní roztok: 10,00 mg [[4-(2_azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilu je rozpuštěno ve 100 ml volumetrické nádobě v 20 ml dimethylsulfoxidu a nádoba je naplněna do objemu methanolem.
Standardní roztok 1 (50 pg/ml): 5,00 ml zásobního roztoku je rozpouštědlem naředěno do 10,0 ml.
Standardní roztok 2 (0,4 pg/ml = 40 ppm): 1,00 ml zásobního roztoku je rozpouštědlem naředěno do 250,0 ml.
Limitní roztok pro výpočet (0,1 pg/ml = 10 ppm): 5,00ml standardního roztoku 2 je rozpouš20 tědlem naředěno do 20,0 ml.
Testovaný roztok
100 mg testovaného vzorkuje rozpuštěno v 10 ml volumetrické nádobě v 8 ml dimethylsulfoxidu 25 a nádoba je naplněna rozpouštědlem do objemu nádoby.
Chromatografické podmínky:
Zařízení Detektor Kolona Teplota pece Mobilní fáze %B
Průtok
Kapalinový chromatograf
UV-VIS, detekční vlnová délka 360 nm Symetrická C8, 3,0 pm, 7,5 cm x 4,6 mm místnosti
A: fosfátový pufr, pH 2,1
B: acetonitril min 20% min 30% min 30% min 90%
0,8 ml/min
Injekční objem 100 μΐ
Trvání analýzy 30 minut
Vymývání 10 minut
Retenční časy: levosimendan 13 minut
Sloučenina I vedlejší diastereomer: okolo 24 minut Sloučenina I hlavní diastereomer: okolo 25 minut
Vhodnost systému
1. Replikátní nástřiky limitního roztoku pro výpočet musí být opakovatelné; 6 nástřiků, RSD = 10%.
-4CZ 298659 B6
Postup
Po splnění kritérií vhodnosti systému nastříkněte standardu a vzorek.
Výpočet
Koncentrace hlavního diastereomeru sloučeniny I v ppm bude vypočtena podle následující rovnice:
Cg.Ry. 10.1 000 000
Rst. w
Cst = koncentrace hlavního diastereomeru sloučeniny I v standardním roztoku [[4-(2-azido-315 methyl-5-oxotetrahydrofiiran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilu (mg/ml)
Rx = oblast vrcholu hlavního diastereomeru sloučeniny I v chromatogramu testovaného roztoku.
Rst = oblast vrcholu hlavního diastereomeru sloučeniny I v chromatogramu standardního roztoku 20 [[4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilu
W = váha vzorku = faktor ředění vzorku (ml)
Koncentrace vedlejšího diastereomeru sloučeniny I v ppm bude vypočtena podle následující rovnice:
C«,. Rx. 10.1 000 000.1,023
Rst. w
Cst = koncentrace vedlejšího diastereomeru sloučeniny I v standardním roztoku [[4-(2-azido-3methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilu (mg/ml)
Rx = oblast vrcholu vedlejšího diastereomeru sloučeniny I v chromatogramu testovaného roztoku.
Rst = oblast vrcholu vedlejšího diastereomeru sloučeniny 1 v chromatogramu standardního roztoku [[4-(2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilu
W = váha vzorku = faktor ředění vzorku (ml)
1,023 = korekční faktor pro vedlejší diastereomer sloučeniny (I)
Získaný chromatogram standardy [[4-(2-azido-3-methyl_5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl]hydrazonojpropandinitrilu (0,4 pg/ml) je uveden na Obr. 1. Retenční čas pro hlavní diastereomer sloučeniny I je 25,180 minut a pro vedlejší diastereomer sloučeniny I je 24,866 minut. Chromatogram levosimendanu ve formě hrubého materiálu je uveden na Obrázku 2.
-5CZ 298659 B6
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (6)
1. ((4-(2-Azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl)hydrazono)propandinitril vzorce I a jeho diastereomery.
2. Referenční přípravek pro stanovení potenciálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarže levosimendanu, vyznačující se tím, že obsahuje dinitril podle nároku 1, popřípadě
15 spolu s analyticky přijatelným nosičem.
3. Přípravek podle nároku 2, v y z n a č u j í c í se t í m , že je v podstatě prostý pyridazinylových sloučenin.
20
4. Použití dinitrilu podle nároku 1 jakožto referenční sloučeniny pro stanovení potenciálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarže levosimendanu.
5. Analytický způsob stanovení potenciálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarže levosimendanu, vyznačující se tím, že se jakožto referenční sloučeniny použije dinitrilu
25 podle nároku 1.
6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se vzorek šarže levosimendanu analyzuje pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie, HPLC.
30 7. Analytický způsob stanovení potenciálně genotoxických nečistot ve vzorcích šarže levosimendanu, vyznačující se tím, že se připraví referenční standardní roztok převedením dinitrilu podle nároku 1 do roztoku, dále se připraví testovaný roztok převedením vzorku šarže levosimendanu do roztoku, pořídí se chromatogram pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie, HPLC, jednak referenčního standardního roztoku ajednak testovaného roztoku a určí se
35 koncentrace dinitrilu podle nároku 1 ve vzorku.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI981428A FI104718B (fi) | 1998-06-18 | 1998-06-18 | [[4-(2-atsido-3-metyyli-5-oksotetrahydrofuran-2-yyli)fenyyli]hydratsono]propaanidinitriili käytettäväksi referenssiaineena levosimendaanierien analyysissä |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20004555A3 CZ20004555A3 (en) | 2001-05-16 |
| CZ298659B6 true CZ298659B6 (cs) | 2007-12-12 |
Family
ID=8552039
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20004555A CZ298659B6 (cs) | 1998-06-18 | 1999-06-18 | ((4-(2-Azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl)hydrazono)propandinitril a zpusob a referencní prípravek pro stanovení potenciálne genotoxických necistot ve vzorcích šarže levosimendanu s jeho použitím |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6340764B1 (cs) |
| EP (1) | EP1087956B1 (cs) |
| JP (1) | JP4550279B2 (cs) |
| KR (1) | KR100661772B1 (cs) |
| CN (1) | CN1129590C (cs) |
| AR (1) | AR018879A1 (cs) |
| AT (1) | ATE253566T1 (cs) |
| AU (1) | AU755699B2 (cs) |
| BR (1) | BR9911230A (cs) |
| CA (1) | CA2334864C (cs) |
| CZ (1) | CZ298659B6 (cs) |
| DE (1) | DE69912604D1 (cs) |
| EA (1) | EA002854B1 (cs) |
| ES (1) | ES2211113T3 (cs) |
| FI (1) | FI104718B (cs) |
| HR (1) | HRP20000866B1 (cs) |
| HU (1) | HU229582B1 (cs) |
| ID (1) | ID29239A (cs) |
| IL (1) | IL139964A (cs) |
| MX (1) | MXPA00012436A (cs) |
| NO (1) | NO325393B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ508557A (cs) |
| PL (1) | PL201772B1 (cs) |
| RS (1) | RS49929B (cs) |
| SK (1) | SK284353B6 (cs) |
| WO (1) | WO1999065888A2 (cs) |
| ZA (1) | ZA200006993B (cs) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1646612B1 (en) | 2004-04-21 | 2009-07-01 | Teva Pharmaceutical Industries Ltd | Processes for preparing montelukast sodium |
| FR2877013A1 (fr) * | 2004-10-27 | 2006-04-28 | Assist Publ Hopitaux De Paris | Indentification d'une mutation de jak2 impliquee dans la polyglobulie de vaquez |
| EP1904448B1 (en) * | 2005-07-05 | 2011-02-02 | Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. | Purification of montelukast |
| CN104230816B (zh) * | 2014-09-19 | 2017-02-15 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种左西孟旦潜在基因毒性杂质及其制备、检测方法 |
| CN104478809B (zh) * | 2014-11-14 | 2016-08-17 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种左西孟旦杂质及其制备和检测方法 |
| CN105817632A (zh) * | 2015-01-09 | 2016-08-03 | 中国科学院宁波材料技术与工程研究所 | 片状粉末的制备装置及方法 |
| CN105784895B (zh) * | 2015-10-30 | 2018-05-22 | 成都欣捷高新技术开发有限公司 | 一种用高效液相色谱仪检测左西孟旦中杂质的方法 |
| CN111474289A (zh) * | 2019-10-31 | 2020-07-31 | 武汉嘉诺康医药技术有限公司 | 一种利用反相色谱分离分析左西孟旦中右西孟旦的方法 |
| CA3161960A1 (en) | 2019-12-16 | 2021-06-24 | Tenax Therapeutics, Inc. | Levosimendan for treating pulmonary hypertension with heart failure with preserved ejection fraction (ph-hfpef) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0359439A1 (en) * | 1988-09-07 | 1990-03-21 | Orion-Yhtymä Oy | Substituted pyridazinones |
| EP0383449A2 (en) * | 1989-02-11 | 1990-08-22 | Orion-Yhtymà Oy | Pyridazinone derivatives and processes for preparing the same |
| WO1997035841A2 (en) * | 1996-03-27 | 1997-10-02 | Orion-Yhtymä Oy | Method for obtaining pure enantiomers of a pyridazinone derivative |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB383449A (en) * | 1931-12-12 | 1932-11-17 | Percy Charles Barton | Improvements relating to masts, poles, or like supports and their manufacture |
| GB565546A (en) * | 1943-04-13 | 1944-11-15 | Leslie Frederick Reeve | A pneumatically operated pickup unit for use in electric organs and the like |
| GB2251615B (en) * | 1991-01-03 | 1995-02-08 | Orion Yhtymae Oy | (-)-[[4-(1,4,5,6-tetrahydro-4-methyl-6-oxo-3-pyridazinyl)phenyl]hydrazono]pro panedinitrile |
| GB2266841A (en) * | 1992-05-06 | 1993-11-17 | Orion Yhtymae Oy | Compounds for use as anti-ischemic medicaments |
| GB9614098D0 (en) * | 1996-07-05 | 1996-09-04 | Orion Yhtymae Oy | Transdermal delivery of levosimendan |
| GB9915179D0 (en) * | 1999-06-29 | 1999-09-01 | Orion Corp | A method for the treatment or prevention of coronary graft vasospasm |
-
1998
- 1998-06-18 FI FI981428A patent/FI104718B/fi not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-06-16 AR ARP990102890A patent/AR018879A1/es active IP Right Grant
- 1999-06-18 CN CN99807544A patent/CN1129590C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 US US09/719,806 patent/US6340764B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 AU AU47863/99A patent/AU755699B2/en not_active Expired
- 1999-06-18 BR BR9911230-2A patent/BR9911230A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-06-18 HU HU0102020A patent/HU229582B1/hu unknown
- 1999-06-18 IL IL13996499A patent/IL139964A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 DE DE69912604T patent/DE69912604D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 CZ CZ20004555A patent/CZ298659B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 WO PCT/FI1999/000539 patent/WO1999065888A2/en active IP Right Grant
- 1999-06-18 AT AT99931312T patent/ATE253566T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 PL PL347577A patent/PL201772B1/pl unknown
- 1999-06-18 HR HR20000866A patent/HRP20000866B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 SK SK1872-2000A patent/SK284353B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 EA EA200100055A patent/EA002854B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 CA CA002334864A patent/CA2334864C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 KR KR1020007014413A patent/KR100661772B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 MX MXPA00012436A patent/MXPA00012436A/es active IP Right Grant
- 1999-06-18 ES ES99931312T patent/ES2211113T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 ID IDW20010086A patent/ID29239A/id unknown
- 1999-06-18 EP EP99931312A patent/EP1087956B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 NZ NZ508557A patent/NZ508557A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 RS YUP-767/00A patent/RS49929B/sr unknown
- 1999-06-18 JP JP2000554714A patent/JP4550279B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-11-28 ZA ZA200006993A patent/ZA200006993B/en unknown
- 2000-12-15 NO NO20006444A patent/NO325393B1/no not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0359439A1 (en) * | 1988-09-07 | 1990-03-21 | Orion-Yhtymä Oy | Substituted pyridazinones |
| EP0383449A2 (en) * | 1989-02-11 | 1990-08-22 | Orion-Yhtymà Oy | Pyridazinone derivatives and processes for preparing the same |
| WO1997035841A2 (en) * | 1996-03-27 | 1997-10-02 | Orion-Yhtymä Oy | Method for obtaining pure enantiomers of a pyridazinone derivative |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112763598B (zh) | Hplc法分离测定噁拉戈利钠关键中间体及其相关杂质的方法 | |
| CZ298659B6 (cs) | ((4-(2-Azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl)fenyl)hydrazono)propandinitril a zpusob a referencní prípravek pro stanovení potenciálne genotoxických necistot ve vzorcích šarže levosimendanu s jeho použitím | |
| SK165795A3 (en) | 3-phenylizoquinoline-1(2h)-one derivatives, preparation method and pharmaceutical compounds containing these derivatives | |
| US20080145946A1 (en) | Impurity of anastrozole intermediate, and uses thereof | |
| JP2008510020A6 (ja) | アナストロゾール中間体の不純物及びその使用 | |
| CA2560080A1 (en) | Solifenacin-containing composition | |
| CN102482288B (zh) | 由4种同分异构体的混合物组成的酞菁衍生物 | |
| US6060483A (en) | Antineurodegenerative ergoline derivatives | |
| HK1032779B (en) | A reference compound for use in the analysis of levosimendan batches | |
| JP3686657B2 (ja) | ステロイド性生体内微量物質の測定方法 | |
| JP2002537388A (ja) | Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−５−メチルイソキサゾール−４−カルボキサミドの結晶化方法 | |
| CN119490448A (zh) | 一种尼莫地平杂质e及其制备方法与应用 | |
| KR101884455B1 (ko) | 정량적 질량 분석을 위한 수소 동위원소 치환 가능한 질량표지 분자로서의 트리아졸 유도체 및 그 제조방법 | |
| CN114805200A (zh) | 一种盐酸丙卡特罗杂质及其制备方法和用途 | |
| CN116283646A (zh) | 一种葡萄糖酸钙锌杂质及其制备方法、检测方法和用途 | |
| AU2021214518A1 (en) | Method for evaluating quality of (3S)-3-(4-(3-(1,4-dioxaspiro(4,5)dec-7-en-8-yl)benzyloxy)phenyl)hex-4-inoic acid | |
| US20070191425A1 (en) | Solifenacin-containing composition | |
| CA2606945A1 (en) | An impurity of anastrozole intermediate, and uses thereof | |
| JPH07238083A (ja) | インドロカルバゾール誘導体 | |
| MXPA99002202A (en) | Computeros marcadores y su su | |
| MX2007015695A (en) | An impurity of anastrozole intermediate, and uses thereof | |
| CZ82099A3 (cs) | Způsob zjištění čistoty a stálosti vzorku lanotriginu |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20190618 |