NO325393B1 - Forbindelse, referansepreparat som inneholder forbindelsen, anvendelse av forbindelsen til a bestemme genotoksiske urenheter og fremgangsmater derav - Google Patents
Forbindelse, referansepreparat som inneholder forbindelsen, anvendelse av forbindelsen til a bestemme genotoksiske urenheter og fremgangsmater derav Download PDFInfo
- Publication number
- NO325393B1 NO325393B1 NO20006444A NO20006444A NO325393B1 NO 325393 B1 NO325393 B1 NO 325393B1 NO 20006444 A NO20006444 A NO 20006444A NO 20006444 A NO20006444 A NO 20006444A NO 325393 B1 NO325393 B1 NO 325393B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- compound
- levosimendan
- stated
- solution
- samples
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims description 40
- 230000001738 genotoxic effect Effects 0.000 title claims description 16
- 239000012535 impurity Substances 0.000 title claims description 16
- 231100000024 genotoxic Toxicity 0.000 title claims description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 8
- WHXMKTBCFHIYNQ-SECBINFHSA-N levosimendan Chemical compound C[C@@H]1CC(=O)NN=C1C1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 WHXMKTBCFHIYNQ-SECBINFHSA-N 0.000 claims description 39
- 229960000692 levosimendan Drugs 0.000 claims description 39
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 17
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 8
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 7
- 239000012087 reference standard solution Substances 0.000 claims description 4
- 125000002098 pyridazinyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- KWFMPQFMZALWEW-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-(2-azido-3-methyl-5-oxooxolan-2-yl)phenyl]hydrazinylidene]propanedinitrile Chemical compound CC1CC(=O)OC1(N=[N+]=[N-])C1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 KWFMPQFMZALWEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 8
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethyl sulfoxide Natural products CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960001760 dimethyl sulfoxide Drugs 0.000 description 5
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 4
- GDMRFHZLKNYRRO-UHFFFAOYSA-N 3-(4-aminophenyl)-4-methyl-4,5-dihydro-1h-pyridazin-6-one Chemical compound CC1CC(=O)NN=C1C1=CC=C(N)C=C1 GDMRFHZLKNYRRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical group [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- CUONGYYJJVDODC-UHFFFAOYSA-N malononitrile Chemical compound N#CCC#N CUONGYYJJVDODC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 2
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 2
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- JJNZXLAFIPKXIG-UHFFFAOYSA-N 2-Chlorobenzylidenemalononitrile Chemical compound ClC1=CC=CC=C1C=C(C#N)C#N JJNZXLAFIPKXIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010953 Ames test Methods 0.000 description 1
- 231100000039 Ames test Toxicity 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N Metaphosphoric acid Chemical compound OP(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JMCFZKWHGZNZFS-UHFFFAOYSA-N N-[4-(4-methyl-6-oxo-4,5-dihydro-1H-pyridazin-3-yl)anilino]ethanimidoyl cyanide Chemical compound CC1C(=NNC(C1)=O)C1=CC=C(C=C1)NN=C(C#N)C JMCFZKWHGZNZFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000496 cardiotonic agent Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;toluene Chemical compound CCOC(C)=O.CC1=CC=CC=C1 OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 125000005638 hydrazono group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 231100000150 mutagenicity / genotoxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D307/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D307/32—Oxygen atoms
- C07D307/33—Oxygen atoms in position 2, the oxygen atom being in its keto or unsubstituted enol form
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D307/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N2030/042—Standards
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/145555—Hetero-N
- Y10T436/147777—Plural nitrogen in the same ring [e.g., barbituates, creatinine, etc.]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Description
Den foreliggende oppfinnelse angår [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2- yl)fenyl]hydrazono]propandinitril (I) og dens anvendelse som en referanseforbindelse i analyse av porsjoner av levosimendansyntese, spesielt ved bestemmelse av potensielle genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon. Den foreliggende oppfinnelse angår også en analytisk fremgangsmåte for bestemmelse av potensielle genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon hvori [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril (I) bli brukt som en referanseforbindelse.
Levosimendan som er (-)-enantiomeren av [[4-l,4,5,6-tetrahydro-4-metyl-6-okso-3- pyridazinyl)fenyl]hydrazono]propandinitril, og fremgangsmåte til dens fremstilling er beskrevet f.eks. i EP 565546 Bl. Levosimendan er kraftig ved behandling av hjertefeil og har signifikant kalsiumavhengig binding til troponin. Anvendelse av levosimendan i behandling av myokardial ischemi er beskrevet i WO 93/21921. De hemodynamiske virkninger av levosimendan hos mennesket er beskrevet i Sundberg, S. et al., Am. J. Cardiol., 1995; 75:1061-1066. Levosimendan er representert av formelen:
Kliniske undersøkelser har konfirmert de positive virkningene av levosimendan i pasienter med hjertefeil.
Levosimendan kan fremstilles med høy renhet og med nesten kvantitative utbytter ved å behandle (-)-6-(4-aminofenyl)-5-metyl-4,5-dihydro-3(2H)-pyridazinon med natriumnitritt og malononitril beskrevet i EP 565546 Bl. Det er imidlertid blitt funnet at prøver av levosimendan syntetisert slik viser potensielle genotoksiske egenskaper i den bakterielle mutagentesten (Ames test).
Det er videre beskrevet i WO 97/35841 en fremgangsmåte til fremstilling av optisk hovedsakelig rent (-)-[[4-(l,4,5,6-tetrahydro-4-metyl-6-okso-3-pyridazinyl)fenyl]hydrazono] propandinitril fra 6-(4-aminofenyl)-4,5-dihydro-5-metyl-3(2H)-pyradizinon mellomprodukt. Endeproduktet er nyttig som et kardiotont middel. En ny krystallisk polymorf form av endeproduktet er også beskrevet.
Det er nå blitt funnet at de potensielle genotoksiske egenskapene til levosimendanprøver blir forårsaket av en azidoderivat-urenhet med formel (I)
Dette azidoderivatet er et kraftig mutagen som kan dannes under levosimendansyntese i en mengde tilstrekkelig til å gi et positivt resultat i den bakterielle mutagenitetstest. Denne forbindelse som heter [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril (I) er derfor nyttig som en referanseforbindelse i rutineanalyse av porsjoner av levosimendansyntese, spesielt til bestemmelse av potensielle genotoksiske urenheter i levosimendanporsjoner. Nærvær av (I) i en levosimendanporsjon indikerer at ytterligere rekrystallisering er nødvendig for å oppnå levosimendanmateriale egnet for anvendelse som et legemiddel.
Kort beskrivelse av tegningene:
Fig. 1 er et HPLC-kromatogram av [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitrilstandard (0,4 ug/ml).
Fig. 2 er en HPLC-kromatogram av levosimendan råmateriale.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en referanseforbindelse som har struktur (I) for bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon. Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også referansepreparat for bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon som omfatter forbindelse (I) eventuelt sammen med en analytisk akseptabel bærer, og særlig hovedsakelig i fravær av pyridazinylderivater.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også anvendelse av (I) som en referanseforbindelse ved bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon.
Den foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også en analytisk fremgangsmåte for bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon karakterisert ved at forbindelsen (I) blir brukt som en referanseforbindelse, spesielt idet nevnte levosimendanprøve blir analysert ved høyttrykks væskekromatografi (HPLC).
Videre tilveiebringer foreliggende oppfinnelse en analytisk fremgangsmåte for bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon hvor metoden omfatter å fremstille en
referansestandardløsning ved å oppløse forbindelser (I) i oppløsning, fremstille en testoppløsning ved å oppløse en prøve av en levosimendanporsjon i oppløsning, å oppnå et HPLC-kromatogram av nevnte referanse standardoppløsning, oppnå et HPLC-kromatogram av nevnte testoppløsning og bestemme konsentrasjonen av forbindelse (I) i prøven.
Betegnelsen "analytisk akseptabel bærer" betyr her en bærer som ikke hindrer den kvalitative eller kvantitative analyse av (I). Seleksjon av en egnet analytisk akseptabel bærer er velkjent for en med kunnskap på området. Et eksempel på en analytisk akseptabel bærer et dimetylsulfoksid.
Forbindelse (I) kan fremstilles ved å behandle 6-(4-aminofenyl)-5-metyl-4,5-dihydro-3(2H)-pyridazinon med natriumnitritt og malononitril hvori natriumnitritt blir brukt i molart overskudd og å adskille (I) fra reaksjonsblandingen. Fremgangsmåten er beskrevet i detalj i eksempel 1.
Produktet til en levosimendanporsjon blir fortrinnsvis analysert ved å bruke høyttrykks væskekromatografi (HPLC). Egnede apparater inkluderer f.eks. C-8 reversert fase HPLC-kolonne med UV-deteksjon på 360 nm. Den mobile fase er f.eks. en blanding av fosfatbuffer med pH-verdi 2,1 og acetonitril. Levosimendanprøven blir oppløst i egnede oppløsningsmidler såsom en blanding av dimetylsulfoksid, metanol og vann. Referanseoppløsningene blir fremstilt ved å oppløse forbindelse (I) i egnet oppløsningsmiddel. Retensjonstidene til levosimendan og forbindelse (I) eller diastereomerer derav blir bestemt ved de kromatografiske betingelser som blir brukt. Mengden av (I) i levosimendanprøven blir bestemt ved å sammenligne kromatogrammene oppnådd fra prøveoppløsningen og referanseoppløsningen. Fremgangsmåten er beskrevet i detalj i eksempel 2.
Mengden av uønsket urenhet (I) i en levosimendanporsjon kan reduseres ved fremgangsmåter kjent på området såsom rekrystallisering. Rekrystallisering av levosimendan kan utføres fra ethvert egnet oppløsningsmiddel, hvor aceton er det foretrukne oppløsningsmiddel.
EKSEMPLER
Eksempel 1. Fremstilling av [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril (blanding av diastereomerer).
6-(4-aminofenyl)-4,5-dihydro-5-metyl-3(2H)-pyridazinon (153 g, 0,75 mol) ble oppløst i eddiksyre (750 ml). Fast natriumnitritt (210 g, 3,0 mol) ble langsomt tilsatt oppløsningen ved 10-20°C. Etter tilsetting ble blandingen omrørt i 90 min. ved 10-20°C. Reaksjonsblandingen ble hurtig helt på en 20°C oppløsning av malononitril (150 g, 2,3 mol) og vann (1500 ml). Den resulterende blanding ble
omrørt ved 20-25°C i 60 min. og deretter filtrert og vasket med vann. Det våte faststoffet ble ekstrahert suksessivt med tetrahydro-furan (300 ml) og etylacetat (1900 ml). De kombinerte ekstrakter ble tørket med natriumsulfat og oppløsningsmidlet inndampet under vakuum. Resten ble triturert med etylacetat (200 ml), filtrert og filtratet ble inndampet under vakuum. Resten (8,0 g) ble renset kromatografisk på silikagel ved å bruke toluen-etylacetat 2:1 som eluenten. Etter krystallisering fra toluen var utbyttet for den rene blanding av diastereomerer 1,0 g. Den viktigste komponenten i blandingen kan anrikes ved et flertall krystalleringer fra toluen, men for analyseformål er blandingen adekvat. 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, a) viktig diastomer 1,06 (d, 3H, J=6 Hz), 2,55 (dd, 1H, J=16 Hz, 11 Hz), 2,67 (m, 1H), 2,78 (dd, 1H, J=16 Hz, 8 Hz), 7,59 (d, 1H, 3=9 Hz), 7,62 (d, 1H, J=9 Hz), 12,6 (bred s, 1H), mindre diastereomer 0,60 (d, 3H, J=7 Hz), 2,43 (dd, 1H, J=18 Hz, 2 Hz), 2,78 (m, 1H), 3,14 (dd, 1H, J=8 Hz, 18 Hz), 7,54 (d, 1H, J=9 Hz), 7,61 (d, 1H, J=9 Hz), 12,6 (bred s, 1H).
Eksempel 2. Anvendelse av [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril (I) som referanseforbindelse i HPLC-kromatografi.
HPLC (høyttrykks væskekromatografi) fremgangsmåte til analyse av forbindelse (I) i levosimendan råmateriale ble basert på C-8 reversert fase HPLC-kolonne med UV-deteksjon på 360 nm. Den mobile fasen består av acetonitril og fosfatbuffer med pH-verdi 2,1.
Reagenser:
1. Metanol, HPLC-finhet
2. Natriumdihydrogenfosfat, Na^PCMX^O, Merck
3. Ortofosforsyre, H3PO4, Merck
4. Fosfatbuffer pH-verdi 2,1:
Oppløs 1,8 g natriumdihydrogenfosfat (NaH2PO<t) i vann og tilsett 2,0 ml fosforsyre. Juster pH-verdien hvis nødvendig med 2 M natriumhydroksid eller 1 M fosforsyre. Fortynn til 1000,0 ml med vann.
5. Dimetylsulfoksid, BDH
6. Acetonitril, HPLC-finhet
7. Oppløsningsmiddel: bland 200 ml metanol med 800 ml vann
8. [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril referansestandard.
Standardoppløsninger (referansepreparater av forbindelse (I)):
Stamløsning: 10,00 mg [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril blir oppløst i en 100 ml volumetrisk flaske i 20 ml dimetylsulfoksid og fylt til volum med metanol.
Standardoppløsning 1 (50 ug/ml): 5,00 ml av stamløsningen blir fortynnet til 10,0 ml med oppløsningsmiddel.
Standardoppløsning 2 (0,4 ug/ml = 40 ppm): 1,00 ml av stamløsningen blir fortynnet til 250,0 ml med oppløsningsmiddel.
Kvantiteringsgrenseoppløsning (0,1 ug/ml = 10 ppm): 5,00 ml av standardoppløsning 2 blir fortynnet til 20,0 ml med oppløsningsmiddel.
Testoppløsning
100 mg testprøve blir oppløst i en 10 ml volumetrisk flaske i 8 ml av dimetylsulfoksid og fylt til volum med oppløsningsmiddel.
Kromatografiske betingelser:
Systemegnethet
1. Replikate injeksjoner av kvantitiseringsgrenseoppløsninger må vøre aksepterbare; 6 injeksjoner, RSD = 10,0 %.
Fremgangsmåte
Etter at systemegnethetskriteriet er møtt, fortsett med standard og prøveinjeksjoner.
Beregninger
Konsentrasjonen av den viktigste diastereomer i forbindelse (I) i ppm vil kunne beregnes i henhold til følgende ligning:
Cst = konsentrasjon av hoveddiastomeren av forbindelse (I) i [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril standardoppløsning
(mg/ml)
Rx = toppområdet til den viktigste diastereomer i forbindelse (I) i kromatogrammet av testoppløsningen
Rst = toppområdet til den viktigste diastereomer av forbindelse (I) i kromatogrammet til [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril standardoppløsning
w = vekt av prøven
10 = fortynningsfaktor av prøven (ml)
Konsentrasjonen av den mindre diastereomer av forbindelse (I) i ppm vil kunne beregnes i henhold til følgende ligning. Den viktigste diastereomer av forbindelse (I) ble brukt som en referansestandard.
Cst = konsentrasjon av den mindre diastereomer av forbindelse (I) i [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril standardoppløsning (mg/ml)
Rx = toppområdet til den mindre diastereomer av forbindelse (I) i kromatogrammet fra testoppløsningen
Rst = toppområdet fra den mindre diastereomer av forbindelse (I) i kromatogrammet fra [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril standardoppløsning
w = vekt av prøven
10 = fortynningsfaktoren til prøven (ml)
1,023 = korreksjonsfaktoren for den mindre diastereomer av forbindelsen (I)
Kromatogrammet til [[4-(2-azido-3-metyl-5-oksotetrahydro-furan-2-yl)fenyl]hydrazono]propandinitril standard (0,4 ug/ml) oppnådd er vist i fig. 1. Retensjonstiden for den viktigste diastereomer av forbindelse (I) er 25,180 min. og for den mindre diastereomer av forbindelse (I) 24,866 min. Kromatogrammet av levosimendan råmateriale er vist i fig. 2.
Claims (9)
1. Forbindelse,
karakterisert ved at den har strukturen til formel I
og diastereomerer derav.
2. Referansepreparat for bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon,
karakterisert ved at det omfatter forbindelsen som angitt i krav 1.
3. Preparat som angitt i krav 2,
karakterisert ved essensielt fravær av pyridazinylforbindelser.
4. Referansepreparat for bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon,
karakterisert ved at det omfatter forbindelsen som angitt i krav 1 sammen med en analytisk akseptabel bærer.
5. Preparat som angitt i krav 4,
karakterisert ved essensielt fravær av pyridazinylforbindelser.
6. Anvendelse av forbindelse som angitt i krav 1 som en referanseforbindelse til bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon.
7. Analytisk fremgangsmåte til bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon,
karakterisert ved at forbindelsen som angitt i krav 1 blir brukt som en referanseforbindelse.
8. Fremgangsmåte som angitt i krav 7,
karakterisert ved at en prøve av en levosimendanporsjon blir analysert ved høyttrykks væskekromatografi (HPLC).
9. Analytisk fremgangsmåte til bestemmelse av potensielt genotoksiske urenheter i prøver av en levosimendanporsjon,
karakterisert ved at den omfatter å fremstille en referansestandardoppløsning ved å oppløse forbindelsen som angitt i krav 1 i oppløsning, fremstille en testoppløsning ved å oppløse en prøve av en levosimendanporsjon i oppløsning, oppnå et HPLC-kromatogram av nevnte referansestandardoppløsning, oppnå et HPLC-kromatogram av nevnte testoppløsning og bestemme konsentrasjonen av forbindelsen som angitt i krav 1 i prøven.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI981428A FI104718B (fi) | 1998-06-18 | 1998-06-18 | [[4-(2-atsido-3-metyyli-5-oksotetrahydrofuran-2-yyli)fenyyli]hydratsono]propaanidinitriili käytettäväksi referenssiaineena levosimendaanierien analyysissä |
| PCT/FI1999/000539 WO1999065888A2 (en) | 1998-06-18 | 1999-06-18 | A reference compound for use in the analysis of levosimendan batches |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20006444D0 NO20006444D0 (no) | 2000-12-15 |
| NO20006444L NO20006444L (no) | 2000-12-15 |
| NO325393B1 true NO325393B1 (no) | 2008-04-21 |
Family
ID=8552039
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20006444A NO325393B1 (no) | 1998-06-18 | 2000-12-15 | Forbindelse, referansepreparat som inneholder forbindelsen, anvendelse av forbindelsen til a bestemme genotoksiske urenheter og fremgangsmater derav |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6340764B1 (no) |
| EP (1) | EP1087956B1 (no) |
| JP (1) | JP4550279B2 (no) |
| KR (1) | KR100661772B1 (no) |
| CN (1) | CN1129590C (no) |
| AR (1) | AR018879A1 (no) |
| AT (1) | ATE253566T1 (no) |
| AU (1) | AU755699B2 (no) |
| BR (1) | BR9911230A (no) |
| CA (1) | CA2334864C (no) |
| CZ (1) | CZ298659B6 (no) |
| DE (1) | DE69912604D1 (no) |
| EA (1) | EA002854B1 (no) |
| ES (1) | ES2211113T3 (no) |
| FI (1) | FI104718B (no) |
| HK (1) | HK1032779A1 (no) |
| HR (1) | HRP20000866B1 (no) |
| HU (1) | HU229582B1 (no) |
| ID (1) | ID29239A (no) |
| IL (1) | IL139964A (no) |
| MX (1) | MXPA00012436A (no) |
| NO (1) | NO325393B1 (no) |
| NZ (1) | NZ508557A (no) |
| PL (1) | PL201772B1 (no) |
| RS (1) | RS49929B (no) |
| SK (1) | SK284353B6 (no) |
| WO (1) | WO1999065888A2 (no) |
| ZA (1) | ZA200006993B (no) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2563776A1 (en) | 2004-04-21 | 2005-11-10 | Teva Pharmaceutical Industries Ltd. | Processes for preparing montelukast sodium |
| FR2877013A1 (fr) * | 2004-10-27 | 2006-04-28 | Assist Publ Hopitaux De Paris | Indentification d'une mutation de jak2 impliquee dans la polyglobulie de vaquez |
| ES2358923T3 (es) | 2005-07-05 | 2011-05-16 | Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. | Purificación de montelukast. |
| CN104230816B (zh) * | 2014-09-19 | 2017-02-15 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种左西孟旦潜在基因毒性杂质及其制备、检测方法 |
| CN104478809B (zh) * | 2014-11-14 | 2016-08-17 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种左西孟旦杂质及其制备和检测方法 |
| CN105817632A (zh) * | 2015-01-09 | 2016-08-03 | 中国科学院宁波材料技术与工程研究所 | 片状粉末的制备装置及方法 |
| CN105784895B (zh) * | 2015-10-30 | 2018-05-22 | 成都欣捷高新技术开发有限公司 | 一种用高效液相色谱仪检测左西孟旦中杂质的方法 |
| CN111474289A (zh) * | 2019-10-31 | 2020-07-31 | 武汉嘉诺康医药技术有限公司 | 一种利用反相色谱分离分析左西孟旦中右西孟旦的方法 |
| CA3161960A1 (en) | 2019-12-16 | 2021-06-24 | Tenax Therapeutics, Inc. | Levosimendan for treating pulmonary hypertension with heart failure with preserved ejection fraction (ph-hfpef) |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB383449A (en) * | 1931-12-12 | 1932-11-17 | Percy Charles Barton | Improvements relating to masts, poles, or like supports and their manufacture |
| GB565546A (en) * | 1943-04-13 | 1944-11-15 | Leslie Frederick Reeve | A pneumatically operated pickup unit for use in electric organs and the like |
| FI894035A (fi) | 1988-09-07 | 1990-03-08 | Orion Yhtymae Oy | Foerfarande foer framstaellning av nya substituerade pyridazinoner. |
| GB8903130D0 (en) | 1989-02-11 | 1989-03-30 | Orion Yhtymae Oy | Substituted pyridazinones |
| GB2251615B (en) * | 1991-01-03 | 1995-02-08 | Orion Yhtymae Oy | (-)-[[4-(1,4,5,6-tetrahydro-4-methyl-6-oxo-3-pyridazinyl)phenyl]hydrazono]pro panedinitrile |
| GB2266841A (en) * | 1992-05-06 | 1993-11-17 | Orion Yhtymae Oy | Compounds for use as anti-ischemic medicaments |
| GB9606474D0 (en) | 1996-03-27 | 1996-06-05 | Orion Yhytmo Oy | Method for obtaining pure enantiomers of a pyridazinone derivative |
| GB9614098D0 (en) * | 1996-07-05 | 1996-09-04 | Orion Yhtymae Oy | Transdermal delivery of levosimendan |
| GB9915179D0 (en) * | 1999-06-29 | 1999-09-01 | Orion Corp | A method for the treatment or prevention of coronary graft vasospasm |
-
1998
- 1998-06-18 FI FI981428A patent/FI104718B/fi not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-06-16 AR ARP990102890A patent/AR018879A1/es active IP Right Grant
- 1999-06-18 MX MXPA00012436A patent/MXPA00012436A/es active IP Right Grant
- 1999-06-18 US US09/719,806 patent/US6340764B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 EA EA200100055A patent/EA002854B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 WO PCT/FI1999/000539 patent/WO1999065888A2/en active IP Right Grant
- 1999-06-18 KR KR1020007014413A patent/KR100661772B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 CN CN99807544A patent/CN1129590C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 CZ CZ20004555A patent/CZ298659B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 HU HU0102020A patent/HU229582B1/hu unknown
- 1999-06-18 NZ NZ508557A patent/NZ508557A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 PL PL347577A patent/PL201772B1/pl unknown
- 1999-06-18 IL IL13996499A patent/IL139964A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 JP JP2000554714A patent/JP4550279B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 AT AT99931312T patent/ATE253566T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 DE DE69912604T patent/DE69912604D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 ID IDW20010086A patent/ID29239A/id unknown
- 1999-06-18 BR BR9911230-2A patent/BR9911230A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-06-18 ES ES99931312T patent/ES2211113T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 RS YUP-767/00A patent/RS49929B/sr unknown
- 1999-06-18 SK SK1872-2000A patent/SK284353B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 AU AU47863/99A patent/AU755699B2/en not_active Expired
- 1999-06-18 EP EP99931312A patent/EP1087956B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 CA CA002334864A patent/CA2334864C/en not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-11-28 ZA ZA200006993A patent/ZA200006993B/en unknown
- 2000-12-15 HR HR20000866A patent/HRP20000866B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2000-12-15 NO NO20006444A patent/NO325393B1/no not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-05-05 HK HK01103183A patent/HK1032779A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100322354B1 (ko) | 화합물 및 그의 용도 | |
| US20080287680A1 (en) | Solifenacin Succinate-Containing Composition | |
| UA79229C2 (en) | 3-nitrogen-6,7-dioxygen steroids and uses related thereto | |
| AU2014230569A1 (en) | Pyrazole-amide compound and medicinal uses therefor | |
| NO325393B1 (no) | Forbindelse, referansepreparat som inneholder forbindelsen, anvendelse av forbindelsen til a bestemme genotoksiske urenheter og fremgangsmater derav | |
| CN109705071A (zh) | Hdac抑制剂及其制备方法和用途 | |
| Palazzino et al. | 1, 3-Diarylpyrazolo [4, 5-c]-and-[5, 4-c] quinolin-4-ones. 4. Synthesis and specific inhibition of benzodiazepine receptor binding | |
| JP2002540070A (ja) | ジヒドロウアベイン様因子並びに診断及び治療組成物及び方法 | |
| JP2008510020A6 (ja) | アナストロゾール中間体の不純物及びその使用 | |
| EP1441224B1 (en) | Enzyme inhibition immunoassay | |
| EP1444236B1 (en) | Separation of regioisomers of metal phthalocyanines | |
| JP7328657B2 (ja) | 化合物及び誘導体化試薬、並びに化合物の合成方法 | |
| JP4279718B2 (ja) | Ｍｐｔｐ親和性標識 | |
| KR890003838B1 (ko) | 인데노피리미딘 유도체 | |
| SU1540656A3 (ru) | Способ получени стероидов или их фармацевтически приемлемых солей | |
| PL199365B1 (pl) | Sposób wydzielania N-(4-trifluorometylofenylo)-5-metylo-izoksazolo-4-karboksyamidu | |
| EP3966565B1 (en) | Mixture of isomers of aminaphtone, analytical method for identifying them and pharmaceutical composition comprising said isomers | |
| US20090325918A1 (en) | Synthesis and separation of optically active isomers and cyclopropyl derivatives of spironolactone and their biological action | |
| CN114671818A (zh) | 化合物和衍生物化试剂、以及化合物的合成方法 | |
| US4869895A (en) | Radiolabeled benzazepine | |
| CA2528952A1 (en) | Process for the synthesis of high purity d-(17alpha)-13-ethyl-17hydroxy-18,19-dinorpre:gn-4-ene-20-yne-3-one-oxime | |
| WO2023143386A1 (zh) | 作为钾通道调节剂的芳环并杂环类化合物及其制备和应用 | |
| CN114805200A (zh) | 一种盐酸丙卡特罗杂质及其制备方法和用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK1K | Patent expired |