CZ295705B6 - Cyklodepsipeptidové deriváty sloučeniny PF1022 a farmaceutický prostředek s jejich obsahem - Google Patents

Abstract

Nové deriváty látky PF1022, kterými jsou cyklodepsipeptidy obecného vzorce I nebo jejich soli, které jsou použitelné jako anthelmintické prostředky pro prevenci nebo léčení parazitárních infekcí, a farmaceutické prostředky s jejich obsahem.

Description

Oblast techniky

Vynález se týká nových derivátů sloučeniny PF 1022, které mají strukturu kostry cyklodepsipeptidu stejnou jako sloučeninu PF 1022, tj. cyklodepsipeptid známý jako fermentační produkt mikroorganismu s anthelmintickými účinky, a které mají vyšší anthelmintickou aktivitu. Vynález se také týká vermicidního nebo anthelmintického prostředku obsahujícího uvedený nový derivát PF1022. Nové deriváty PF1022 podle vynálezu mají vynikající anthelmintickou účinnost a jsou schopny vypuzovat řadu hlístů nebo parazitů žijících ve zvířatech, a proto jsou použitelné jako velmi účinný anthelmintický prostředek.

Dosavadní stav techniky

Látka PF1022 je známý cyklodepsipeptid, který byl objeven jako výsledek studií anthelmintických látek proti drůbežím hlísticím rodu Ascaris (japonská patentová přihláška Kokai No. Hei 3-35796, evropská patentová publikovaná přihláška EP 0 382 173-A2 a J. Antibiotics, 45, 692 (1992). Látka PF 1022 je fermentační produkt, vyráběný kultivací vláknité houby kmene PF 1022 (uložené podle Budapešťské smlouvy v National Institute of Bioscience and Human-Technology Agency in Tsukuba-City pod depozitním číslem FERM BP-2671) náležející do řádu Agonomycetales. Sloučenina PF 1022 je látka zařazená do třídy cyklodepsipeptidových sloučenin představovaných vzorcem A

kde Me znamená methylovou skupinu.

Cyklodepsipeptid představovaný výše uvedeným vzorcem A zahrnuje následujících osm konkrétních látek:

Sloučenina PF 1022: R¹ = R³ = Me,

R² = R⁴ = CH₂C₆H₅

Sloučenina PF 1022 B: R¹ = R² = R³ = R⁴ = CH₂C₆H₅

Sloučenina PF 1022 C: R¹ = Me

R² = R³ = R⁴ = CH₂C₆H₅

Sloučenina PF 1022 D: R^] = R³ = R⁴ = Me

Sloučenina PF 1022 E: R¹ = R³ = Me

R² = CH₂C₆H₄OH-p

-1 CZ 295705 B6

R⁴ = CH₂C₆H₅

Sloučenina PF 1022 F: R¹ = R² = R³ = R⁴ = Me

Sloučenina PF 1022 G: R¹ = R² = R³ = Me

R⁴ = CH₂C₆H₄OH-p

Sloučenina PF 1022 H: R¹ = R³ = Me

R³ = R⁴ = CH₂C₆H₄OH-p

Sloučenin PF 1022 je cyklodepsipeptid, vytvořený z L-N-methylleucinu [(CH₃)₂CHCH₂CH(NHCH₃)COOH] zkracovaného jako H-L-MeLeu-OH), kyseliny D-mléčné [CH₃CH(OH)COOH] (zkracované jako H-D-Lac-OH) a kyseliny D-fenylmléčné [C₆H₅CH₂(OH)COOH] (zkracované jako H-D-PhLac-OH) pomocí esterových vazeb a amidových vazeb, a který může být také popsán následujícím vzorcem B:

Vzorec B: Cyklo(L-MeLeu-D-Lac-L-MeLeu-D-PhLac-L-MeLeu-D-Lac-L-MeLeu-D-PhLac)

Kultivací vláknité houby kmene PF 1022 nevzniká pouze sloučenina PH 1022jako hlavní produkt, ale také sloučeniny PF 1022 B PF 1022 C, PF1022 D, PF 1022 E, PF1022 F, PF1022 G a PF 1022 H, které mají struktury popsané výše uvedeným vzorcem A [viz první publikace japonských patentových přihlášek Kokai No. Hei 3-35796, 5-170749 a 6-184126 a japonská patentová přihláška No. Hei 8-208201 (podaná 7. 8. 1996, dosud nevyložená)].

Sloučenina PF 1022 a všechny sloučeniny PF 1022 B až H mají anthelmintické účinky a mají specifické strukturní vlastnosti, tedy společnou cyklodepsipeptidovou strukturujako základní kostru, jako postranní řetězce 4 N-methylové skupiny, 4 izobutylové skupiny, 0-4 methylové skupiny, 0-4 benzylové skupiny a 0-2 p-hydroxybenzylové skupiny a mají ve svých molekulách také osm asymetrických atomů uhlíku. Navíc je možno předpokládat, že přítomnost 24-členného kruhu vytvořeného čtyřmi esterovými vazbami a čtyřmi amidovými vazbami jak je ukázána ve vzorci A výše, hraje důležitou úlohu při vyjádření biologických účinků. Tzv. helmintické infekce mohou způsobit vážná poškození zdraví člověka i zvířat a také škody v zemědělství a v průmyslu chovu dobytka, takže vždy existuje v oboru důležitý požadavek na nalezení a výrobu takových nových a použitelných látek, které mají anthelmintické účinky. Jak bylo vysvětleno výše, sloučenina PF 1022 byla původně nalezena jako produkt fermentace a později byla připravena chemickou syntézou [viz první zveřejnění japonské patentové přihlášky Kokai No. Hei 5-320148 a Bisci. Biotech. Biochem., 58.1193 (1994)].

Je známo, že sloučenina PF 1022 a látky PF 1022 B až H mají samy o sobě velmi vysoké anthelmické účinky, ale některé skupiny vědců stále pracují na vytvoření nových příbuzných látek s vyšší anthelmintickou účinností, které jako výchozích materiálů používají uvedené látky PF1022.

Autoři předkládaného vynálezu prováděli rovněž výzkumy z počátečního stupně, kde byla objevena látka PF1022, s cílem nalézt nové deriváty vycházející ze skupiny PF1022 a sloučenin PF 1022 B až Ha nalezli již několik nových derivátů (viz mezinárodní publikovaná přihláška WO 94/19334 (přihláška PCT/JP/00252 a evropská zveřejněná patentová přihláška EP 0 685 469-A1 a japonská patentová přihláška Hei 7-244051). Jedna z dalších výzkumných skupin objevila některé nové deriváty vytvořené celkovou chemickou syntézou (viz mezinárodní publikované přihlášky WO 93/19033 a WO 95/07272).

Podstata vynálezu

Cílem předkládaného vynálezu je poskytnout nový derivát (deriváty) s vyšším anthelmintickým účinkem než má sloučenina PF 1022 pomocí chemické syntézy s použitím látky PF 1022 jako výchozí sloučeniny. Výsledkem výzkumů je možnost výroby několika nových derivátů PF1022,

-2CZ 295705 B6 které mají stejný nebo vyšší anthelmintický účinek než jakákoliv známá sloučenina příbuzná PF 1022, uvedená ve výše specifikovaných pramenech.

Výzkumy autorů vynálezu dále pokračovaly se zaměřením na skupinu kyseliny D-fenylmléčné jako jednu ze skupin tvořících látku PF 1022 a nyní byly úspěšně syntetizovány nové cyklodepsipeptidy, které mohou být obecně popsány dále uvedeným obecným vzorcem I, přičemž uvedené látky se vyrábějí zcela syntetickými postupy nebo způsoby chemické syntézy s použitím sloučeniny PF 1022, PF 1022 E a PF 1022 H jako výchozích látek. Na základě testů na zvířatech bylo zjištěno, že tyto nové deriváty PF1022 mají silní anthelmintické účinky.

Podle prvního provedení předkládaného vynálezu se tedy poskytuje nový cyklodepsipeptidový derivát látky PF1022 popsaný následujícím obecným vzorcem I

kde (i) R¹ znamená atom vodíku a R² znamená kyano(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, thiokarbamoylo(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu se skupinou t-butoxykarbonyl jako ochrannou skupinu aminoskupiny, N-mono-(Ci-C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, N,N-di-(Ci-C6)alkylamino (Ci-C6)alkoxylovou skupinu, NjN-di-^Ci-CejalkoxyCCi-Cejalkylj-aminoíCj-Cejalkoxylovou skupinu, nebo cyklický amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, kde skupina cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo je skupina R² (Ci-C6)alkoxylová skupina, která má na sobě celý substituent nasycený nebo nenasycený 5- než 6-členný heterocyklický kruh zvolený ze skupiny pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5—(Cj—C₆)alkyl—1,2,4-oxadiazol, 5-(halosubstituovaný nebo nesubstituovaný fenyl)-l,2,4-oxadiazol, 5-(C₃-C₆)cykloalkyl-l,2,4-oxadiazol, halogen-substituovaný nebo nesubstituovaný pyridin a N-alkyl-substituovaný nebo nesubstituovaný tetrahydropyrimidin, a kde tento heterocyklický kruh může dále popřípadě obsahovat jako substituent fenylovou skupinu nebo (Ci-C₆)alkylovou skupinou nebo (C₃-C₆)cykloalkylovou skupinu nebo atom halogenu nebo skupinu fenyl substituovanou atomem halogenu zvoleným ze skupiny chlor, brom a fluor; nebo skupina R² je (C2-C6)alkanoylová skupina, popřípadě substituovaná substituentem zvoleným ze skupiny atom halogenu a hydroxylová skupina, nebo R² je karbamoylová skupina, N-mono-(Ci-C6)alkylkarbamoylová skupina nebo N,Ndi-(Ci~C₆)alkylkarbamoylová skupina nebo cyklický aminokarbonylová skupina, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo R² je N-mono-(Ci-C6)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina, nebo N,N-di(Ci-CfjalkylaminořCi-Cfijalkoxykarbonylová skupina nebo cyklický amino(Ci-C6)alkoxykarbonylová skupina, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo R² je formoyloxy(C]-C6)alkylkarbonylová skupina; nebo R² je karboxylová skupina nebo 2-aminothiazolylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou spolu identické a každá znamená kyano(Cj-C6)alkoxylovou skupinu, thiokarbamoyl-(C]-C6)alkoxylovou skupinu, amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu se skupinou /-butoxykarbonyl jako ochrannou skupinou aminoskupiny, N-mono-(Ci-C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, N,N-di-(CiC6)alkylamino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, N,N-di-((C]-C6)-alkoxy(Ci-C6)alkyl)amino(Ci-C6)alkoxyskupinou nebo cyklický amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, kde skupina cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo skupina R¹ a R² každá znamená (Ci-C6)alkoxylovou skupinu, která má na sobě jako substituent navázaný nasycený nebo nenasycený 5- nebo 6-členný heterocyklický kruh zvolený ze skupiny pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(Ci~C₆)alkyl1,2,4-oxadiazol, 5-(halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný fenyl)-l,2,4-oxadiazol, 5-(C₃-C6)cykloalkyl-l,2,4-oxadiazol, halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný pyridin a N-alkylsubstituovaný nebo nesubstituovaný tetrahydropyrimidin, a kde tento heterocyklický kruh může dále popřípadě obsahovat jako substituent fenylovou skupinu nebo (CiC₆)alkylovou skupinou nebo (C₃-C₆)cykloalkylovou skupinu nebo atom halogenu nebo skupinu fenyl substituovanou atomem halogenu zvoleným ze skupiny chlor, brom nebo fluor; nebo skupina R¹ a R² každá znamená (C2-C6)alkanoylovou skupinou, popřípadě substituovanou substituentem zvoleným ze skupiny atom halogenu nebo hydroxylová skupina, nebo skupina R¹ a R² každá znamená karbamoylovou skupinu, N-mono-(CiC6)alkylkarbamoylovou skupinou nebo N,N-di-(Ci-C₆)alkylkarbamoylovou skupinou nebo cyklický aminokarbonylovou skupinou, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo skupina R¹ a R² každá znamená Nmono-(Ci-C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxykarbonylovou skupinu, nebo N,N-di-(Ci-C6)alkylamino-(Ci-C6)alkoxykarbonylovou skupinu, nebo cyklický amino-(C]-C6)alkoxykarbonylovou skupinu, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo skupina R¹ a R² každá znamená formyloxy(Ci-C6)alkoxylkarbonylovou skupinu, nebo karboxylovou skupinu nebo 2-aminothiazolylovou skupinu a Me znamená methylovou skupinu.

Podle druhého provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsipeptidový derivát látky PF 1022 výše uvedeného obecného vzorce I, kde

R¹ znamená atom vodíku a R² je kyanomethoxylová skupina, thiokarbamoylmethoxylová skupina, 2-aminoethoxylová skupina a 2-(N-Z-butyloxykarbonylamino)ethoxylová skupina, 2-(N-mono-(Ci-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N-mono-(Ci-C6)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(Ci-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N,N-di-(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(Ci-C₆)alkoxy(Ci-C₆)alkyl)aminoethoxylová skupina,

2- morfolinoethoxylová skupina, 2-pyrrolidinoethoxylová skupina nebo 2-piperidinoethoxylová skupina; nebo R² je methoxylová skupina substituovaná heterocyklickým kruhem, kterým je pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(přímý nebo větvený C]-C6)alkyl1,2,4-oxadiazol, 5-(popřípadě halogenem substituovaný)fenyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(C3-C6)cykloalkyl-l,2,4-oxadiazol, pyridin popřípadě substituovaný atomem halogenu nebo N(Ci-C6)alkyltetrahydropyrimidin; nebo R² je acetylová skupina popřípadě substituovaná substituentem zvoleným ze skupiny atom halogenu a hydroxylová skupina; nebo R² je karbamoylová skupina, N-methylkarbamoylová skupina, N,N-dimethylkarbamoylová skupina, morfolinokarbonylová skupina, N-mono-(Ci-C6)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, N,N-di-(Ci-C₆)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, morfolinoethoxykarbonylová skupina, formyloxymethylkarbonylová skupina, karboxylová skupina, t-butylová skupina, 2-aminothiazolylová skupina nebo 2-aminothiazolylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně identické a každá jsou zvolená ze skupiny kyanomethoxylová skupina, thiokarbamoylmethoxylová skupina, 2-aminoethoxylová skupina, 2-(N-/-butyloxykarbonyl-amino)ethoxylová skupina, 2-(N-mono-(Ci-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo

3- (N-mono-(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(C_I-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N,N-di(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-((Ci-C₆)alkoxy-(Ci-C6)alkyl)aminoethoxylová skupina, 2-morfolinoethoxylová skupina, 2-pyrroli

-4CZ 295705 B6 dinoethoxylová skupina, 2-piperidinoethoxylová skupina; nebo R¹ a R² jsou každá methoxylová skupina substituovaná heterocyklickým kruhem, kterým je pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(přímý nebo větvený Ci-C6)alkyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(popřípadě halogenem substituovaný)fenyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(Cy-C6)cykloalkyl-l,2,4-oxadiazol, pyridin popřípadě substituovaný atomem halogenu nebo N-((Ci-C6)alkyltetrahydropyrimidin; nebo R¹ a R² znamenají každá acetylovou skupinu popřípadě substituovanou substituentem zvoleným ze skupiny atom halogenu a hydroxylová skupina; nebo R¹ a R² znamenají každá karbamoylovou skupinu, N-methylkarbamoylovou skupinu, Ν,Ν-dimethylkarbamoylovou skupinu, morfolinokarbonylovou skupinu, N-mono-(Ci-C6)alkylaminoethoxykarbonylovou skupinu, N,N-di-(Ci-C₆)alkylaminoethoxykarbonylovou skupinu, morfolinoethoxykarbonylovou skupinu, formyloxymethylkarbonylovou skupinu, karboxylovou skupinu nebo 2-aminothiazolylovou skupinu.

Podle třetího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsipeptidový derivát látky PF 1022 popsaný výše uvedeným obecným vzorcem I, kde (i) R¹ je atom vodíku a R² je kyano(Ci-C₆)alkoxylová skupina, thiokarbamoyl(Ci-C₆)alkoxylová skupina, amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina s Z-butoxykarbonylovou skupinou jako ochrannou skupinou aminoskupiny, N-mono-(Ci-C₆)alkylammo-(Ci-C₆)alkoxylová skupina, N,N-di-((Ci-C₆)alkylamino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, N,N-di-((Ci-C₆)alkoxy(Ci-C₆)alkyl)amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina nebo cyklický amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, kde skupina cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně identické a každá je zvolená ze skupiny kyano(Ci-C6)alkoxylová skupina, thiokarbamoyl(Ci-C6)alkoxylová skupina, amino(Cr-C6)alkoxylová skupina, amino (C]-C6)alkoxylová skupina s Z-butoxykarbonylovou skupinou jako ochrannou skupinou aminoskupiny, N-mono-(Ci-C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxylová skupina, N,N-di((C!C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxylová skupina nebo N,N-di-((Ci-C6)alkoxy(Ci-C6)alkyl)amino(C]-C6)alkoxylová skupina, nebo R¹ a R² jsou každá cyklický amino-(Cj-C6)alkoxylová skupina, kde skupina cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino.

Podle dalšího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsinový derivát látky PF 1022 popsaný výše uvedeným obecným vzorcem I, kde (i) R¹ je atom vodíku, a R² je kyanomethoxylová skupina, thiokarbamoylmethoxylová skupina, 2-aminoethoxylová skupina, 2-(N-Z-butyloxykarbonylamino)ethoxylová skupina, 2-(N-mono-(Ci-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N-mono-(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(Ci-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N,N-di-(C!-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(Ci-C6)alkoxy-(Ci-C₆)alkyl)amino)ethoxylová skupina, 2-rnorfolinoethoxylová skupina, 2-pyrrolidinoethoxylová skupina nebo 2-piperidinoethoxylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně stejné a každá je zvolená ze skupiny kyanomethoxylová skupina, 2-aminoethoxylová skupina, 2-(N-Z-butoxylkarbonylamino)ethoxylová skupina, 2-(Nmono-(Ci-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N-mono-(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(Ci-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N,N-di-(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(Ci-C₆)alkoxy-(Ci-C₆)alkyl)amino)ethoxylová skupina, 2-morfolinoethoxylová skupina, 2-pyrrolidinoethoxylová skupina nebo 2-piperidinoethoxylová skupina.

Podle dalšího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsipeptidový derivát látky PF 1022 popsaný výše uvedeným obecným vzorcem I, kde (i) R¹ je atom vodíku, a R² je (C!-C₆)alkoxylová skupina, která má jako substituent takový nasycený nebo nenasycený 5- nebo 6-členný heterocyklický kruh, který je zvolený ze skupiny pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(Ci-C₆)alkyl-l,2,4-oxadiazol,

-5CZ 295705 B6

5-(halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný fenyl)-l,2,4-oxadiazol, 5-(C₃-C₆)-cykloalkyl-l,2,4-oxadiazol, halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný pyridin a N-alkylsubstituovaný nebo nesubstituovaný tetrahydropyrimidin, a kde tento heterocyklický kruh může popřípadě obsahovat jako substituent (Ci~C₆)alkylovou skupinu nebo (C₃-C₆)cykloalkylovou skupinu nebo atom halogenu nebo skupinu fenyl substituovanou atomem halogenu; nebo alternativně (ii) R¹ a R²jsou každá nezávisle (Ci-C₆)alkoxylová skupina, která má jako substituent takový nasycený nebo nenasycený 5- nebo 6-členný heterocyklický kruh který je zvolený ze skupiny pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(Ci-C₆)alkyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný fenyl)-l,2,4-oxadiazol, 5-(C₃-C₆)cykloalkyl-l,2,4-oxadiazo, halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný tetrahydropyrimidin, a kde tento heterocyklický kruh může popřípadě obsahovat jako substituent (Ci-C₆)alkylovou skupinou nebo (C₃-C₆)cykloalkylovou skupinu nebo atom halogenu nebo skupinu fenyl substituovanou atomem halogenu.

Podle dalšího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsipeptidový derivát látky PF 1022 popsaný výše uvedeným obecným vzorcem I, kde (i) R¹ je atom vodíku a R² je (C2-C6)alkanoylová skupina popřípadě substituovaná atomem halogenu nebo hydroxylovou skupinou; nebo R² je karbamoylová skupina, N-mono-(CiC6)alkylkarbamoylová skupina, N,N-di-(Ci~C6)alkylkarbamoylová skupina nebo cyklický aminokarbonylová skupina, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo R² je N-mono-(Ci-C6)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina, N,N-di-(Ci-CĎ)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina, cyklický amino(C1-C6)alkoxykarbonylová skupina, ve které skupina cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo R² je formyloxy(Ci-C6)alkylkarbonylová skupina, karboxylová skupina nebo 2-aminothiazolylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně identické a jsou každá (C2-C6)alkanoylová skupina popřípadě substituovaná atomem halogenu nebo hydroxylovou skupinou; nebo R¹ a R² jsou každá karbamoylová skupina, N-mono-(Ci-C6)alkylkarbamoylová skupina, N,N-di-(Ci-C₆)alkylkarbamoylová skupina, cyklický aminokarbonylová skupina, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo R¹ a R² jsou každá N-mono(Ci-C6)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina, N,N-di-(Ci-C6)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina nebo cyklický amino(Ci-C6)alkoxykarbonylová skupina ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo R¹ a R² jsou každá formyloxy(C]-C6)alkylkarbonylová skupina, karboxylová skupina nebo 2-aminothiazolylová skupina.

Podle dalšího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsipeptidový derivát látky PF 1022 popsaný výše uvedeným obecným vzorcem I, kde (i) R¹ je atom vodíku a R² je karboxylová skupina nebo acetylová skupina popřípadě substituovaná atomem halogenu nebo hydroxylovou skupinou; nebo R² je karbamoylová skupina, N-methylkarbamoylová skupina, Ν,Ν-dimethylkarbamoylová skupina, morfolinokarbonylová skupina, N-mono-(Ci-C₆)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, N,N-di(Ci-Ce)alkylammoethoxykarbonylová skupina, morfolinoethoxykarbonylová skupina nebo formyloxymethoxykarbonylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně identické a každá jsou karboxylová skupina nebo acetylová skupina popřípadě substituovaná atomem halogenu nebo hydroxylovou skupinou; nebo R¹ a R² jsou každá karbamoylová skupina, N-methylkarbamoylová skupina, Ν,Ν-dimethylkarbamoylová skupina, morfolinokarbonylová skupina, N-mono-(Ci-C₆)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, N,N-di-(Ci-C₆)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, morfolinoethoxykarbonylová skupina nebo formyloxymethoxykarbonylová skupina.

-6CZ 295705 B6

Podle dalšího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje farmaceutický prostředek s anthelmintickými účinky, který obsahuje jako aktivní složku alespoň jeden cyklodepsipeptid obecného vzorce I nebo jeho adiční sůl s kyselinou.

Podle dalšího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsipeptidový derivát látky PF1022 popsaný výše uvedeným obecným vzorcem I, kterým je cyklo[MeLeu-LacMeLeu-((C2H₅)2NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac; cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu((C2H₅)₂NHCH₂CH₂O)PhLac]₂; nebo cyklo[MeLeu-<(CH₃OCH2CH2)2NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeuLac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac]; kde Me je skupina methyl, Lac je zbytek kyseliny D-mléčné vzorce CH₃-CH(O)-CO, MeLeu je zbytek N-methyl-L-leucinu vzorce (CH₃)₂-CH-CH₂-CH (-CO-)-N-(CH₃)- a PhLac je zbytek kyseliny D-fenylmléčné vzorce CgHs-CH^HÍ-O-j-CO-.

Podle dalšího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsinpeptidový derivát látky PF 1022 popsaný výše uvedeným obecným vzorcem I, kterým je cyklo[MeLeu(MorCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac], kde Mor je skupina morfolino a skupiny MeLeu a PhLac jsou definovány výše.

Podle dalšího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsipeptidový derivát látky PF 1022 popsaný výše uvedeným obecným vzorcem I, který je cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(furfuryloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]; nebo cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-pikolyloxy)PhLac]₂ kde skupiny MeLeu a PhLac jsou definovány výše.

Podle dalšího provedení předkládaného vynálezu se poskytuje nový cyklodepsipeptidový derivát látky PF 1022 popsaný výše uvedeným obecným vzorcem I, kteiým je cyklo[MeLeu-LacMeLeu-PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac] kde skupiny MeLeu a PhLac jsou definovány v nároku 9.

Konkrétními příklady cyklodepsipeptidu obecného vzorce I podle prvního hlediska tohoto vynálezu jsou sloučeniny vyráběné v příkladech 4 až 65 uvedených dále.

Mezi cyklodepsípeptidy obecného vzorce I jsou zvláště výhodné sloučeniny podle následujících příkladů.

Příklad 4. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NCCH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Příklad 5. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(BocNHCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Příklad 6. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-278)

Příklad 7. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((CH₃)₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-235)

Příklad 8. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((C₂H5)₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 102-236)

Příklad 9. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(Pr₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac) (kód sloučeniny PF 1022-270)

Příklad 10. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(Bu₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac) (kód sloučeniny PF 1022-271)

Příklad 11. Cyklo[MeLeu-((CH₃OCH₂CH₂)₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLacMeLeu-Lac) (kód sloučeniny PF1022-238)

Příklad 12. Cyklo[MeLeu-(MorCH2CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lacl(PF1022-239)

Příklad 13. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(PyrCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac) (kód sloučeniny PF 1022-284)

Příklad 14. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(pipCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac) (kód sloučeniny PF 1022-285)

Příklad 15. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((C₂H₅)₂NCH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac) (kód sloučeniny PF 1022-274)

Příklad 16. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((S)-pyrrolidinyl-2-methoxy)-PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac) (kód sloučeniny PF 1022-302

Příklad 17. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(4-imidazolyl-4-methoxy)-PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac] (PF1022-304)

Příklad 18. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(H₂NCSCH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Příklad 19. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-imidazolylmethoxy)PhLac-NíeLeu-Lac-MeLeuPhLac] (PF1022-305)

Příklad 20. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-thiazolylmethoxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac] (kód sloučeniny PF 1022-306)

Příklad 21. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-methyl-l,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLacMeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-309)

Příklad 22. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-izobutyl-l ,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLacMeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-310)

Příklad 23. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-(2,6-difluorfenyl)-l ,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF1022-311)

Příklad 24. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(furfuryloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-312)

Příklad 25. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(tetrahydrofurfuryloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac] (kód sloučeniny PF 1022-313)

-8CZ 295705 B6

Příklad 26. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-pikolyloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac) (kód sloučeniny PF 1022-314)

Příklad 27. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-pikolyl)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-315)

Příklad 28. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(4-pikolyl)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-316)

Příklad 29. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(6-chloro-3-pikolyloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac] (kód sloučeniny PF 1022-317)

Příklad 30. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-(lN-methyl-1,4,5,6-tetrahydropyrimidyl)methoxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-318)

Příklad 31. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-izopropyl-l,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLacMeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-341)

Příklad 32. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-cyklohexyl-l,2,4-oxadiazolyl)-methoxy)PhLacMeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-343)

Příklad 33. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NHCCH₂O)PhLac]₂

Příklad 34. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(BocNHCH₂CH₂O)PhLac]₂

Příklad 36. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((CH₃)₂NCH₂CH₂O)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF1022-262)

Příklad 37. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((C₂H₅)₂NHCH₂H₂O)PhLac]₂ (kód sloučeniny

PF1022-263)

Příklad 38. Cyklo[MeLeu-Lae-MeLeu-(MorCH₂H₂0)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF 1022-266)

Příklad 39. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-izobutyl-l,2,4-oxadiazolylniethoxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF1022-330)

Příklad 40. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-(2,6-difluorfenyl)-l,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF1022-331)

Příklad 41. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(tetrahydrofurfuryloxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF1022-333)

Příklad 42. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-pikolyloxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF 1022-334)

-9CZ 295705 B6

Příklad 43. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-izopropyl-l ,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLacl₂ (kód sloučeniny PF 1022-345)

Příklad 44. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-cyklohexyl-l ,2,4-oxadiazolyl)-methoxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF 1022-347)

Příklad 45. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-242)

Příklad 46. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac₂]₂ (kód sloučeniny PF 1022-247)

Příklad 47. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(CH₃CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] a cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(CH₃CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-(CH₃CO)PhLac] (kód sloučeniny PF1022-049 aPF1022-048).

Příklad 48. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(BrCH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Příklad 49. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HCOOCH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Příklad 5 0. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Příklad 51. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF1022-241)

Příklad 52. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(MorCO)PhLc-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF1022-244)

Příklad 53. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((CH₃)₂NCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac) (kód sloučeniny PF 1022-243)

Příklad 54. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((CH₃)₂NCH₂CH₂OCO)PhLac-MeLeu-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-245)

Příklad 55. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(MorCH₂CH₂OCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny PF 1022-246)

Příklad 56. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(BrCH₂CO)PhLac]₂

Příklad 57. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HCOOCH₂CO)PhLac]₂

Příklad 58. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCH₂CO)PhLac]₂

Příklad 59. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)PhLac]₂

Příklad 60. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((CH₃)₂NCO)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF 1022-248)

-10CZ 295705 B6

Příklad 61. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(MorCO)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF 1022-249)

Příklad 62. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(MorCH₂CH₂OCO)PhLac]2 (kód sloučeniny PF1022-251)

Příklad 63. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(í-Bu)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] a cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(/-Bu)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF1022-051 a PF1022-050)

Příklad 64. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(t-BuO)PhLac]₂(kód sloučeniny PF 1022-222)

Příklad 65. Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(ATH)PhLac]₂ (kód sloučeniny PF 1022-056).

[I] Dále budou vysvětleny způsoby výroby nových derivátů látky PF 1022 obecného vzorce I podle předkládaného vynálezu.

1. Způsob zahrnuj ící chemickou přeměnu látky PF 1022 E.

Známá látka PF 1022 E, totiž sloučenina obecného vzorce I, kde Ri je atom vodíku a R² je hydroxylová skupina, může být použita jako výchozí materiál v dále popisovaném způsobu syntézy sloučenin obecného vzorce (I), kde R¹ je atom vodíku a R² je kyano(Ci-C₆)alkoxylová skupina, thiokarbamoyl(Ci-C₆)alkoxylová skupina, amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina s ochrannou skupinou, N-mono(Ci-C₆)alkylamino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, N,N-di-((Ci-C₆)alkoxy(Ci-C₆)alkyl)amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina nebo cyklická amino(Cj-Cgjalkoxylová skupina, ve které je cyklická aminová skupina 5- nebo 6-členný kruh obsahující jeden nebo více atomů dusíku a dále popřípadě obsahující atom kyslíku nebo atom síry jako atomy tvořící cyklickou aminoskupinu nebo (Ci-C₆)alkoxylová skupina, která má jako substituent nasycený nebo nenasycený 5- nebo 6-členný heterocyklický kruh obsahující tři nebo méně heteroatomy (atomy dusíku, kyslíku nebo síry) jako atomy tvořící heterocyklický kruh a který může mít substituent (který je Ci-C₆ alkylová skupina nebo C₃-C₆ - cykloalkylová skupina nebo fenylová skupina popřípadě substituovaná atomem halogenu), nebo R² znamená ř-butoxylovou skupinu.

Látka PF 1022 E může být získána fermentačním způsobem z kultivačního média kmene produkujícího látku PF 1022 a sama o sobě má anthelmintické účinky proti červům parazitujícím na zvířatech. Pozornost byla věnována tomu, že možnost chemické modifikace látky PF 1022 E by mohla být rozšířena přítomností fenolitické hydroxylové skupiny v para-poloze jednoho ze dvou benzenových kruhů v molekule látky PF 1022 E. Autoři vynálezu proto syntetizovali nový derivát podle předkládaného vynálezu použitím různých způsobů chemické přeměny látky PF1022 E. Samotná látka PF 1022 E může být syntetizována z látky PF 1022 následujícím způsobem:

1-1. Syntéza látky PF1022 E z látky PV1022

Látka FP1022 E může být vyrobena buď fermentačním způsobem (viz první zveřejnění japonské patentové přihlášky Kokai Hei-6-184126), nebo syntetickými způsoby (viz PCT mezinárodní publikace WO 94/19334) jak bylo uvedeno výše. Látka PF1022 E může být také syntetizována z látky PF 1022 způsobem zahrnujícím čtyřstupňovou chemickou reakci. V posledně uvedené čtyřstupňové metodě chemické syntézy je možno připravit látku PF 1022 E způsobem zahrnujícím v prvním kroku nitraci hydroxylové skupiny v para-poloze benzenového kruhu látky PF 1022, v druhém kroku redukci nitroskupiny na aminoskupinu, ve třetím kroku diazotaci ami

-11 CZ 295705 B6 nové skupiny a ve čtvrtém kroku hydrolýzu diazoniové soli. Čtyři kroky syntézy uvedené výše se podrobně popisují dále.

[První krok]

Je dobře známo, že směs koncentrované kyseliny sírové (nebo oxidu sírového) s koncentrovanou kyselinou dusičnou nebo samotná dýmová kyselina dusičná a podobné prostředky se obecně používají jako účinná činidla pro nitraci atomu (atomů) vodíku přítomných na benzenovém kruhu, a reakce se uskutečňuje mechanismem elektrofílní substituce. Bylo však již zjištěno, že pokud se týče nitrace látky PF 1022, je nesnadné zavést nitroskupinu s vysokou selektivitou pouze do jednoho ze dvou benzenových kruhů látky PF 1022 a zvláště para-polohy benzenového kruhu, protože látka PF1022, má dva benzenové kruhy, které jsou vzájemně ekvivalentní.

Byla studována řada reagencií reakčních podmínek a podařilo se dosáhnout nitrace fenolické hydroxylové skupiny přítomné v para-poloze fenylové skupiny látky PF 1022 postupem zahrnujícím rozpuštění látky PF 1022 vanhydridu kyseliny octové a potom reakci se stechiometricky určeným množstvím dýmové kyseliny dusičné při nízké teplotě-30 až -10 °C.

[Druhý krok]

Obecně se redukce aromatické nitroskupiny provádí způsobem obsahujícím katalytickou redukci plynným vodíkem nebo borohydridem sodným v přítomnosti katalyzátoru jako je paladium, platina, Raneyův nikl apod. nebo způsobem zahrnujícím chemickou redukci kyselinou v kombinaci s kovem jako je železo, cín, zinek apod.

V případě redukce nitroderivátu látky PF 1022 získaného ve výše uvedeném prvním kroku bylo zjištěno, že dosažení cílové aminované sloučeniny s vysokým výtěžkem z uvedeného nitroderivátu látky PF 1022 je možno dosáhnout buď reakcí uvedeného nitroderivátu s plynným vodíkem za atmosférického tlaku v přítomnosti 5 až 10% paladia/uhlíku v alkoholovém rozpouštědle, nebo způsobem reakce nitroderivátu s cínem a koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou v inertním rozpouštědle jako je dioxan.

[Kroky tři a čtyři]

Aminovaná sloučenina získaná postupem podle kroku dvě potom reaguje s kyselinou dusitou stejným způsobem jako je tomu při diazotaci obvyklých aromatických aminosloučenin za vytvoření odpovídající diazoniové soli, kteráje relativně stabilní. Ve skutečnosti, pokud se aminosloučenina získaná ve druhém kroku ponechá reagovat s dusitanem sodným nebo nižším alkylesterem kyseliny dusité jako je amylnitril v kombinaci s vhodnou kyselinou jako je kyselina chlorovodíková, sírová, trifluoroctová apod., přidanou do reakčního systému, kyseliny dusitá se vytvoří in šitu a dále snadno reaguje s uvedenou aminosloučeninou za poskytnutí žádané diazoniové soli.

Ve čtvrtém kroku může být získaná sloučenina diazoniové soli hydrolyzována za vzniku látky PF1022 E.

1- 2. Syntézy různých derivátů PF 1022 z látky PF 1022 E (A) Jestliže se požije jako výchozí látka sloučeniny PF 1022 E, je možno snadno připravit určité sloučeniny obecného vzorce I, například sloučeninu vzorce I, kde R¹ je atom vodíku a R^{1 2} je

2- aminoethoxylová skupina nebo jí podobnou sloučeninu, kde atom (atomy) vodíku aminové skupiny v uvedené 2-aminoethoxylové skupině je nebo jsou nahrazeny alkylovou skupinou, postupem zahrnujícím tři kroky chemických přeměn, tedy způsobem obsahujícím jako první krok kyanomethylovou etherifikaci fenolické hydroxylové skupiny látky PF 1022 E, jako druhý krok redukci kyanomethylové skupiny na 2-aminoethylovou skupinu a jako třetí krok N,N-dialkylaci

- 12CZ 295705 B6

2-aminoskupiny uvedené 2-aminoethylové skupiny. Konkrétně je tento způsob popisován v následujícím odstavci.

[První krok]

Reakce kyanomethylové etherifikace fenolické hydroxylové skupiny PF 1022 E může být prováděna reakcí této látky s halogenovaným acetonitrilem, jako je chloracetonitril, bromacetonitril a jodacetonitril v inertním anorganickém rozpouštědle včetně etherů, jako je ethylether, izopropylether, tetrahydrofuran (THF), 1,4-dioxan apod., ketonů jak je aceton, 2-butanon apod., halogenovaných uhlovodíkových rozpouštědel jako je dichlormethan, chloroform apod., stejně jako Ν,Ν-dimethylformamid (DMF), dimethylsulfoxid (DMSO) apod., v přítomnosti takové báze, jako je t-butoxid draselný, hydrid sodný, uhličitan draselný, uhličitan sodný a aminy jako je triethylamin, l,8-diazabicyklo[5,4,0]-7-undecen apod., která působí jako látka vychytávající halogenovodík. Tento první krok může být s výhodou prováděn působením bromoacetonitrilu buď v přítomnosti hydridu sodného v tetrahydrofuranu, nebo v přítomnosti uhličitanu draselného v acetonu. Za těchto podmínek může reakce uspokojivě probíhat při teplotě místnosti a může poskytnout požadovaný kyanomethyletherový derivát ve vyšším výtěžku než v případě, když se reakce provádí za jiných reakčních podmínek.

[Druhý krok]

Kyanomethyletherový derivát získaný ve výše uvedeném prvním kroku může být potom snadno převeden na odpovídající 2-aminoethyletherový derivát katalytickou redukcí v přítomnosti katalyzátoru jako je paladium, oxid platiny apod. Jako reakčního rozpouštědla je vhodné použít nižšího alkoholu jako je methanol, ethanol apod., a reakce může probíhat hladce při teplotě místnosti a středním tlaku plynného vodíku za poskytnutí požadovaného 2-aminoethyletherového derivátu ve vysokém výtěžku.

[Třetí krok]

2-Aminoethyletherový derivát získaný v předchozím druhém kroku může potom být N,N-dialkylován v inertním organickém rozpouštědle způsobem (1) zahrnujícím působení alkylhalogenidu v přítomnosti báze působící jako odstraňovač halogenovodíku, nebo (2) způsobem zahrnujícím působení nižšího alkanalu za redukčních podmínek, jakými je buď katalytická redukce s katalyzátorem jako je paladium, oxid platiny při středním tlaku vodíku, nebo chemická redukce s použitím kyanborohydridu nebo borokyanidu sodného, na uvedený derivát. Uvedený derivát tak může být snadno převeden na požadovanou konečnou sloučeninu. Pokud se použije způsobu (1) výše, je relativně vhodné použití DMF nebo DMSO jako rozpouštědla a uhličitanu draselného jako báze. Pro dosažení vyššího výtěžku požadovaného produktu je lepší využít jako alkylhalogenidu alkyl bromidu nebo alkyl jodidu než alkyl chloridu. V případě uskutečnění způsobu (2) je jako reakční rozpouštědlo relativně vhodný nižší alkohol jako je methanol, ethanol apod. V některých případech se zdá, že alkylační reakce aminoskupiny aminoethyletherového derivátu je urychlována přídavkem malého množství kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, octová apod.

Substituent takového typu, který může být zaveden na místo fenolitické hydroxylové skupiny látky PF 1022 E zahrnuje obvykle přímý nebo větvený alkyl, alkeny a alkynyl, stejně jako tyto skupiny s řadou substituentů. Typickými příklady možných substituentů jsou například methyl, ethyl, H-propyl, izopropyl, ζι-butyl, izobutyl, seA-butyl, amyl, hexylalkyl, (2-propenyl)-2-hydroxyethyl, 2-methoxyethyl, benzyl apod. Podobně jako v případě výše uvedené dialkylové skupiny může být provedeno zavedení cyklické aminoskupiny, která obsahuje atom dusíku aminoskupiny jako atom tvořící kruh, tj. atom tvořící cyklickou aminoskupinu a který může být skupina morfolinová, pyrrolidinová nebo piperidinová apod.

(B) Syntéza sloučeniny obecného vzorce I, kde například R¹ je atom vodíku a R² je 3-aminopropoxylová skupina, může být provedena způsobem zahrnujícím kondenzaci látky PF 1022 E

-13 CZ 295705 B6 s l-halogen-3-aminopropanem s chráněnou aminoskupinou za vytvoření etherové vazby, takže se získá 3-aminopropyletherový derivát. Jako N-substituenty v 3-aminopropyletherovém derivátu mohou být také zavedeny substituenty podobné výše uvedeným substituentům vzhledem k výše uvedenému 2-aminoethyletherovému derivátu.

(C) Syntézy takových sloučenin obecného vzorce I, kde R¹ je atom vodíku a R² je heterocyklickým kruhem, substituovaná methoxylová skupina, mohou být prováděny způsobem zahrnujícím kondenzaci látky PF 1022 E se sloučeninou obsahující o vhodný halogenovaný heterocyklický kruh obecného vzorce IV

Hetero-CH₂X (IV), kde Hetero znamená heterocyklický kruh a X znamená Cl, Br, I nebo hydroxyl, za vytvoření etherové vazby stejným způsobem jako výše, čímž se vytvoří odpovídající derivát látky PF1022 E obsahující heterocyklický kruh.

Povaha výhodné výše uvedené skupiny X může záviset na povaze heterocyklického kruhu přítomného ve sloučenině IV. V případě kde velké X znamená halogen, může látka PF 1022 E obvykle reagovat s halogenovanou sloučeninou vzorce IV v přítomnosti báze vychytávající halogenovodík v inertním rozpouštědle. Jestliže X je chlor nebo brom, může být hladký průběh reakce podporován přídavkem kovového jodidu do reakční směsi. Jako rozpouštědla, které se zde používá, je možno jmenovat ethery jako je ethylether, izopropylether, tetrahydrofuran (THF), 1,4-dioxan apod.; ketony jako je aceton, 2-butanon apod.; halogenované rozpouštědlo jako je dichlormethan, chloroform apod.; stejně jako další rozpouštědla, jako je N,N-dimethylformamid (DMF), dimethylsulfoxid (DMSO) apod. Jako báze je možno použít Z-butoxid draselný, hydrid sodný, uhličitan draselný, uhličitan sodný, uhličitan česný apod.; organické báze jako je triethylamin, l,8-diazabicyklo[5.4.0]-7-undecen apod. Vhodná reakční teplota může záviset na povaze heterocyklického derivátu a na použitém rozpouštědlu a bázi. Ve většině případů je možno získat dobré výsledky prováděním reakce při teplotě místnosti až teplotě 90 °C.

V případě kde X znamená hydroxylovou skupinu ve sloučenině obecného vzorce IV může být produkt snadno získán tzv. „Mitsunobuovou“ reakcí mezi látkou PF 1022 E a sloučeninou IV. Konkrétně se reakce provádí uvedením látky PF 1022 E do styku s kondenzačním činidlem sestávajícím z derivátu diazodikarboxylové kyseliny jako je ethylester diazokarboxylové kyseliny, azodikarbonyldipiperidin apod. a trojmocné sloučeniny fosforu jako je trifenylfosfín, tributylfosfin apod. v inertním rozpouštědle. Jako rozpouštědla se používá typicky dostupných rozpouštědel jako THF apod.

Mimoto by mělo být uvedeno, že jestliže v části heterocyklického kruhu halogenidové sloučeniny obecného vzorce VI existuje atom aktivního vodíku, který by mohl inhibovat etherifíkační reakci, je nutné předchozí zavedení snadno odštěpitelné ochranné skupiny pro blokování atomu aktivního vodíku.

Jestliže je heterocyklickým kruhem halogenidové sloučeniny obecného vzorce IV skupina 2-imidazolylová nebo 2-thiazolylová, je možno použít alternativního způsobu. Tento alternativní způsob spočívá v reakci výše uvedeného kyanomethyletherového derivátu nejprve s O,O'-diethyldithiofosfátem ve vodném směsném rozpouštědle, například ve směsi voda - chloroform - toluen, za zahřívání pod zpětným chladičem, čímž se získá thiokarbamoylmethyletherový derivát. Tento thiokarbamoylmethyletherový derivát potom reaguje s diethylacetalem bromacetaldehydu v aromatickém uhlovodíkovém rozpouštědle jako je benzen, toluen, xylen apod. v přítomnosti kyselého katalyzátoru, jako je koncentrovaná kyselina sírová apod. při teplotě 70 až 100 °C za vzniku 2-thiazolylového derivátu. Podobným způsobem může reagovat uvedený thiokarbamoylmethyletherový derivát s methyljodidem, například v acetonu, a získaný produkt potom reaguje s dimethylacetalem aminoacetaldehydu v aromatickém uhlovodíkovém rozpouštědle jako

-14CZ 295705 B6 je benzen, toluen, xylen apod. v přítomnosti kyseliny chlorovodíkové při 70 až 100 °C za získání 2-imidazolylového derivátu.

(D) Sloučeninu obecného vzorce I, kde R¹ znamená atom vodíku a R² je skupina A-butoxylová, je možno připravit reakcí látky PF 1022 E s izobutanem v přítomnosti kyselého katalyzátoru, čímž se hydroxylová skupina látky PF 1022 O-í-butyluje za vzniku A-butyletherového derivátu.

2. Způsob chemické přeměny látky PF 1022 H

Sloučeniny obecného vzorce I, kde jak skupina R¹ tak skupina R² jsou kyano(Ci-C₆)alkoxylová skupina, thiokarbamoyl(Ci-C₆)alkoxylová skupina, amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina se skupinou chránící aminovou skupinu, N-mono-(C]-C₆)alkylamino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, N,Ndi-(C_r-C₆)alkylamino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, N,N-di-((C₁-C₆)alkoxy(C₁-C₆)alkyl)amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina nebo cyklická amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, ve které je cyklickou aminoskupinou 5- nebo 6-členný kruh obsahující jeden nebo více atomů dusíku a dále popřípadě obsahující jako atomy tvořící cyklickou aminovou skupinu atom kyslíku nebo síry, mohou být připraveny ze sloučeniny obecného vzorce I, kde R¹ i R² jsou obě hydroxylové skupiny, tedy látky PF 1022 H.

Látka PF 1022 H dosud mohla být připravena pouze způsobem úplné syntézy (viz PCT mezinárodní přihláška WO 93/19053) nebo syntézou z látky PF1022 (viz PCT mezinárodní přihláška WO 93/19053 a WO 94/19334). Nyní však bylo zjištěno, že látka PF1022 H je obsažena v kultivačním médiu při fermentaci mikroorganismu produkujícího látku PF 1022 (viz japonská patentová přihláška No. Hei-8-208201). Chemická struktura látky PF1022 H odpovídá struktuře, která vznikne modifikací látky PF 1022 substitucí dvou benzenových kruhů hydroxylovými substituenty v polohách para. Je tedy možné syntetizovat různé deriváty z látky PF 1022 H jednoduchým použitím způsobů chemické modifikace, které byly výše popsány pro látku PF 1022 E (u které je vpara-poloze benzenového kruhu látky PF1022 substituována pouze jedna hydroxylová skupina). Je také možné použít v případě látky PF 1022 H jakýchkoli jiných chemických reakcí, použitelných na obvyklou fenolickou hydroxylovou skupinu. Typické chemické reakce tohoto druhu zahrnují acylaci (esterifikaci karboxylových kyselin), etherifikaci apod. Například reakcí látky PF 1022 H s izobutanem v přítomnosti kyselého katalyzátoru dojde k O-/-butylaci obou fenolických hydroxylových skupin látky PF1022 H za poskytnutí odpovídajících alkyletherových derivátů.

3. Způsob zahrnující vytvoření karboxylového derivátu reakcí na atomu (atomech) vodíku benzenového kruhu (kruhů) látky PF 1022

Sloučeniny obecného vzorce I kde buď jedna ze skupin R¹ nebo R², nebo obě skupiny R¹ a R² je nebo jsou (C₃-C₆)alkanoylová skupina popř. substituovaná atomem halogenu nebo hydroxylová skupina nebo N-mono-(Ci-C₆)alkylkarbamoylová skupina, N,N-di-(Ci-C₆)alkylkarbamoylová skupina nebo cyklická aminokarbonylová skupina, v níž je cyklická aminová skupina 5- nebo 6-členným kruhem obsahujícím jeden nebo více atomů dusíku a která dále popřípadě obsahuje jako atomy tvořící cyklickou aminovou skupinu atom kyslíku nebo atom síry, nebo N-mono(Ci-C₆)alkylamino(Ci-C₆)alkoxykarbonylová skupina, N,N-di-(Ci-C6)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina, nebo cyklická amino(Ci-C₆)alkoxykarbonylová skupina, ve které je cyklickou skupinou 5- nebo 6-členný kruh, obsahující jeden nebo více atomů dusíku a dále popřípadě obsahující jako atomy tvořící cyklickou aminovou skupinu atom kyslíku nebo síry, nebo formyloxy(Ci-C₆)alkylkarbonylová skupina, stejně jako sloučeniny obecného vzorce I, kde buď jedna ze skupiny R¹ nebo R², nebo obě skupiny R¹ a R² je nebo jsou karboxylová skupina, A-butylová skupina nebo 2-aminothiazolylová skupina, mohou být připraveny dvěma způsoby jako se popisují dále, tj. způsobem (1), využívajícím chemické konverze vychází látky PF1022 a způsobem (2), při kterém se provádí celková syntéza.

- 15 CZ 295705 B6

Způsob (1) provádění chemické přeměny látky PF 1022 zahrnuje čtyři způsoby (a) až (d), kde způsob (a) zahrnuje acylaci benzenových kruhů látky PF 1022, konkrétně acetylaci; způsob (b) zahrnuje chemickou přeměnu acetylového derivátu ze skupiny acylového derivátu získaného způsobem (a) na karboxylový derivát; způsob (c) zahrnuje syntézu derivátu látky PF 1022 z uvedeného karboxylového derivátu; a způsob (d) zahrnuje syntézu nových derivátů látky PF 1022 z nitroderivátu látky PF 1022.

Způsob (1) provádění chemické přeměny látky PF 1022 zahrnuje způsob (a) až (d), které se dále podrobně popisují.

Způsob (a) zahrnující acylaci benzenových kruhů látky PF 1022:

Pro acylaci obou dvou benzenových kruhů látky PF 1022 je možno použít řady elektrofílních substitučních reakcí, které jsou pro acylaci obvyklých aromatických sloučenin dobře známy. Použití těchto známých reakcí je možno syntetizovat různé typy derivátů látky PF1022.

Dosud je známa řada příkladů pro příklady navázání heteroatomu jako je kyslík, dusík a další na benzenové kruhy látky PF022. Nejsou však dosud známy takové deriváty, které by byly odvozeny vytvořením další nové vazby uhlík - uhlík na benzenovém kruhu (kruzích) látky PF 1022. Aby bylo možno uskutečnit přípravu těchto nových sloučenin s vazbou (vazbami) uhlík - uhlík na benzenovém kruhu (kruzích) látky PF1022, je možno použít jako velmi účinného prostředku Friedel-Craftsovy reakce. Na acylaci benzenového kruhu (kruhů) látky PF 1022 je možno použít obvyklého způsobu provádění Friedel-Craftsovy reakce. To znamená, že pro dosažení acylace látky PF 1022 je možno provádět reakci působením acylačního činidla, jako je chlorid karboxylové kyseliny, anhydrid karboxylové kyseliny apod. na látku PF1022 v inertním rozpouštědle jako je nitrobenzen, chlorid uhličitý, sirouhlík apod., v případě nutnosti v přítomnosti aktivačního činidla Lewisovy kyseliny, typicky chloridu hlinitého.

Když má být například do benzenového kruhu látky PF1022 zavedena acetylová skupina, je možno použít výše uvedené inertní rozpouštědla. Lepších výsledků však může být dosaženo prováděním reakce působením acetylchloridu ve funkci jak rozpouštědla, tak i acylačního činidla, na látku PF1022 v přítomnosti chloridu hlinitého. Tato acetylační reakce může vytvářet hlavně jak ortho-substituovaný derivát, tak i para-substituovaný derivát, přičemž tyto deriváty mohou být od sebe izolovány a čištěny chromatografícky. Pokud se jako chloridu karboxylové kyseliny použije pivaloylchlorid, neprobíhá acylační reakce, ale vytváří se takový derivát látky PF1022, ve kterém atom (atomy) vodíku benzenového kruhu (kruhů) látky PF 1022 byl (byly) nahrazeny t-butylovou skupinou.

Způsob (b), který zahrnuje chemickou přeměnu acetylového derivátu, jednoho z acylderivátů získaných způsobem (a), na odpovídající karboxylový derivát:

Acetylový derivát získaný výše uvedeným způsobem (a) může být podroben následujícím čtyřem reakčním krokům pro přípravu odpovídajícího karboxylového derivátu z této látky, důležitého pro přípravu dalších různých derivátů.

Z těchto čtyř reakčních kroků spočívá první krok v přípravě odpovídajícího bromacetylového derivátu reakcí uvedeného acetylového derivátu s bromačním činidlem, jako je N-bromsukcinimid, bromičnan pyridinia, brom apod. v inertním halogenovaném rozpouštědle jako je chlorid uhličitý, chloroform apod. Zvláště výhodným příkladem této reakce je reakce acetylového derivátu se stechiometrickým množství brómu v chloroformu v přítomnosti katalytického množství bromovodíku, kterou může být ve vysokém výtěžku získán požadovaný produkt. Druhý krok spočívá v přípravě odpovídajícího formyloxyacetylového derivátu reakcí uvedeného bromacetylového derivátu s mravenčanem sodným v kyselině mravenčí. Ve třetím kroku se uskutečňuje methanolýza formyloxyacetylového derivátu za poskytnutí deformovaného derivátu, tj. derivátu hydroxyacetylového. Čtvrtý krok, tj. krok konečný, představuje reakce hydroxyacetylového

-16CZ 295705 B6 derivátu s oxidačním činidlem jako je jodistan sodný, octan olovičitý, kyselina jodistá apod., s výhodou jodistan sodný, přičemž vzniká zamýšlený karboxýový derivát.

Mimoto může výše uvedený bromacetylový derivát reagovat s thiomočovinou v inertním rozpouštědle, s výhodou v etherovém rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran a dioxan v přítomnosti báze, jako je hydrogenuhličitan sodný, uhličitan sodný apod., takže se vytváří 2-aminothiazolový kruh; tímto způsobem může být připravena sloučenina, která má vpara-poloze (polohách) benzenového kruhu (kruhů) 2-aminothiazolový kruh (kruhy).

Způsob (c) zahrnující syntézu derivátů látky PF 1022 zodpovídajícího karboxylového derivátu:

Karboxylový derivát získaný výše uvedeným způsobem (b) může být podroben takové chemické přeměně, která se běžně používá v případě karboxylové skupiny, a tím je možno připravit nové deriváty látky PF 1022. Taková chemická přeměna může zahrnovat esterifíkaci, amidaci apod., kterou je možno provádět dobře známými způsoby.

Způsob (d) zahrnující syntézu derivátů látky PF 1022 znitroderivátu látky PF 1022:

Navíc k Friedel-Craftsově reakci, jak bylo uvedeno výše, je vhodné jako rekce vytvářející vazbu uhlík - uhlík používat pro zavedení karboxylové skupiny (skupin) na benzenovém kruhu (kruzích) látky PF 1022 používat Sandmeyerovy reakce.

Pro tento účel může být konkrétně látka PF1022 nejprve nitrována, potom následuje redukce nitroskupiny (skupin) nitračního produktu za vzniku odpovídajícího aminoderivátu. Tento aminoderivát se potom ponechá reagovat s kyselinou dusitou a tím se připraví odpovídající diazoniová sůl na jednom nebo dvou benzenových kruzích látky PF1022 (viz mezinárodní přihláška WO 93/19033). Reakcí diazoniové soli s kovovým kyanidem je nakonec možno připravit kyanovou sloučeninu, ve které je na benzenový kruh (kruhy) látky PF 1022 zavedena kyanová skupina (skupiny).

Takto připravená sloučenina, u které je na benzenovém kruhu (kruzích) látky PF 1022 přítomna kyanová skupin (skupiny), může reagovat za přímého použití jakéhokoliv běžného způsobu chemické přeměny použitelného na aromatické nitrilové sloučeniny. Je tedy možné účinně vyrábět karboxylový derivát z odpovídajícího kyanoderivátu látky PF1022.

Výhodou tohoto způsobu proti výše uvedenému způsobu využívajícímu Friedel-Craftsovy reakce je skutečnost, že dříve uvedený proces může zavádět kyanovou skupinu (skupiny) právě do poloh, ve kterých je nitroskupina (skupiny) navázána na benzenový kruh, a tím je možno zabránit spoluvytváření izomeru (izomerů), které může nastat u později jmenované Friedel-Craftsovy reakce.

Způsob (2) provádění celkové syntézy se popisuje dále.

Sloučeniny obecného vzorce I různých typů uvedených výše mohou být také získány způsobem úplné chemické syntézy, která vychází z derivátu kyseliny L-fenylmléčné, ve které byl (byly) nahrazeny atomy vodíku benzenového kruhu (kruhů) fenylové skupiny karboxylovou skupinou (skupinami).

Využitelný je například způsob, kdy se na výše uvedený derivát kyseliny L-fenylmléčné použije Friedel-Craftsova reakce podobně jako tomu bylo ve výše uvedeném způsobu. Je však spíše výhodné použít takového výchozího materiálu, který nesl funkční skupinu převeditelnou na karboxylovou skupinu právě v té poloze fenylové skupiny, u které se požaduje další vytváření karboxylové skupiny. Jako výchozího materiálu se například v případě, když se má jako cílový produkt syntetizovat72-substituovaný derivát látky PF 1022, využije komerčně dostupného />-aminoL-fenylalaninu nebo 71-nitro-L-fenylalaninu. Je tomu tak proto, že může být výhodně připraven /j-karboxyl-L-fenylalaninový derivát, aniž by se mohly vytvářet také další prostorové izomery

-17CZ 295705 B6 (izomer) a bez nutnosti dalšího zpracování připraveného p-karboxyl-L-fenylalaninového derivátu čištěním a izolací.

Jestliže se jako výchozího materiálu použije p-amino-L-fenylalaninu uvedeného výše, požaduje se reakce pouze jedné ze dvou aminových skupin této sloučeniny alaninu, a proto se nejprve musí ostatní aminoskupiny selektivně chránit vhodnou skupinou. Jednou zavedená ochranná skupina pak musí být v některém z dalších stupňů z produktu odstraněna. Naopak jestliže se jako výchozího materiálu použije p-nitro-L-fenylalaninu, je možné provádět takové postupy, při kterých se α-aminoskupina této alaninové sloučeniny převede na diazoniovou sůl obvyklým způsobem a potom se převede skupina diazoniové soli na hydroxylovou skupinu za poskytnutí kyseliny /j-nitro-L-fenylmléčné a potom se redukuje nitroskupina uvedené sloučeniny na aminoskupinu a nakonec se převede aminová skupina na skupinu karboxylovou. Tento způsob je pro provádění uvedeného postupu pravděpodobně nej výhodnější, protože je možno připravit požadovaný derivát kyseliny p-karboxy-L-fenylmléčné bez použití skupiny chránící aminovou skupinu.

Posledně uvedený způsob, který vychází zp-nitro-L-fenylalaninu je konkrétně vysvětlen dále. Na j?-nitro-L-fenylalanin se nejprve působí kovovým dusitanem nebo alkylnitritem ve vodném kyselém roztoku za vytvoření zmíněné diazoniové soli. Jako vodného kyselého roztoku je možné použít vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, kyseliny sírové, kyseliny octové apod. Výhodná je kyselina octová. Jako kovového dusitanu je možno použít dusitanu draselného, dusitanu sodného apod. Jako alkylnitritu je možno použít izoamylnitritu, butylnitritu apod. Zvláště výhodný je dusitan sodný. Z důvodů snadnějšího zacházení nebo zpracovávání se získaná kyselinapnitro-L-fenylmléčná esterifíkuje směsí chlorovodík - methanol, chlorovodík - ethanol, difenyldiazomethan apod. za vytvoření esteru kyseliny p-nitro-L-fenylmléčné. /(-Nitroskupina výsledného esterového produktu se potom dále přeměňuje na diazoniovou sůl stejným způsobem jako v již zmíněném Sandmeyersově způsobu. Na takto vytvořenou diazoniovou sůl se potom působí kovovým kyanidem za poskytnutí p-kyano-L-fenyllaktátu. Jako kovového kyanidu je možno použít kyanidu sodného, kyanidu draselného, kyanidu měďného apod. Pro dosažení vyšších výtěžků požadovaného produktu je výhodné použití kyanidu měďného. Dále může být kyanová skupina /r-kyano-L-fenyllaktátu přeměna na karboxylovou skupinu, ester karboxylové skupiny, amid karboxylové skupiny a další skupiny známými způsoby, které se používají pro obvyklé aromatické kyanoskupiny.

Použitím takto vytvořeného derivátu kyseliny L-fenylmléčné jako jednoho z výchozích materiálů se výhodně připravuje nový derivát PF 1022 podle předkládaného vynálezu způsobem úplné chemické syntézy.

(II) Dále se popisuje způsob přípravy derivátů látky PF 1022 obecného vzorce III podle předkládaného vynálezu.

1. Způsob zahrnující oxidativní rozklad (přeměnu fenylové skupiny na karbonylovou skupinu) částí benzenového kruhu látky PÍ 022 a následující tvorbu sloučeniny, ve které je původní benzenový kruh nahrazen kruhem heterocyklickým.

Sloučenina obecného vzorce III podle vynálezu může být vyrobena tak, že se nejprve připraví cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)Lac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] nebo cyklo[MeLeu-LacMeLeu-(HOCO)Lac-MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)Lac], které mají 24—členný kruh, odvozený náhradou jednoho nebo dvou zbytků kyseliny fenylmléčné látky PF1022 zbytkem nebo zbytky kyseliny jablečné a takto vyrobená sloučenina se použije jako výchozí materiál.

Výchozí sloučenina uvedená výše může být připravena dvěma různými způsoby, tj. prvním způsobem (1) zahrnujícím vytvoření 24-členného kruhu úplnou chemickou syntézou s použitím derivátu kyseliny jablečné s příslušně chráněnými skupinami (skupinou) jako výchozí materiál (viz mezinárodní přihláška WO 94/19334), poté odstraněním ochranné skupiny (skupin) za zís

-18CZ 295705 B6 kání požadované sloučeniny; a druhým způsobem (2) zahrnujícím použití látky PF 1022 jako výchozího materiálu a oxidační rozklad částí benzenového kruhu látky PF1022 oxidem rutheničelým.

Ve způsobu (2) uvedeném výše je výhodné použít takovou metodu, že se provádí vytváření oxidu rutheničelého „in sítu“ použitím vhodného pomocného oxidačního činidla v přítomnosti katalytického množství sloučeniny ruthenia jako je oxid rutheničitý, trioxid ruthenia apod.

Při tomto způsobuje také možno, že se na karboxylovou skupinu převádí jen jeden ze dvou benzenových kruhů látky PF 1022, pokud se omezí množství pomocného oxidačního činidla na stechiometrické množství. Jako příklady použitelných pomocných oxidačních činidel je možno uvést halogen kyslíkaté soli, jako je jodistan sodný, jodistan draselný, bromičnan draselný, chlornan sodný, chloristan draselný apod. stejně jako sloučeniny kyseliny perjodisté jako je hydrát kyseliny perjodisté a oxidy těžkých kovů, jako je manganistan draselný, dvojchroman draselný a oxidy organických bází, jako je N-methylmorfolin-N-oxid apod., peroxykyseliny, jako je kyselina TM-chlorperbenzoová, peroctová apod., nebo peroxidy, jako je vodný peroxid vodíku, t-butylhydroperoxid apod. Výhodné je použití hydrátu kyseliny jodisté nebo jodistanu sodného.

Deriváty mono- a dikarboxylové kyseliny získané oxidativním rozkladem látky PF 1022 jak se uvádí výše, mohou podléhat téměř všem chemickým reakcím na karboxylové skupině, pouze za toho předpokladu, že použití reakční podmínky nerozkládají základní kostru cyklodepsipeptidu. Typické příklady takových chemických reakcí mohou zahrnovat reakce pro syntézu halogenidu kyseliny nebo směsných anhydridů kyselin, reakce tvorby esterů s různými alkoholy, amidační reakce s různými aminy, reakce tvorby orthoesterů a reakce redukce na aldehydy a alkoholy, stejně jako reakce, při kterých se vytváří heterocyklické kruhy jak se popisuje dále reakcí s 1,2- a 1,3-diaminy, aminalkoholy, aminothioly apod. Takto vytvořené výsledné látky jsou schopny další konverze na další deriváty.

Sloučeniny mono- a dikarboxylové kyseliny získané výše uvedenými způsoby jsou cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)Lac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] nebo cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(HOCO)Lac-MeLeu-Lac-MeLeu-(Hoco)Lac], jestliže se těchto sloučenin použije jako výchozího materiálu, je možno také syntetizovat sloučeniny obecného vzorce III, které jsou mono- nebo bis-heterocyklické deriváty látky PF 1022, a ve kterých jeden nebo dva benzenové kruhy látky PF1022 byly nahrazeny heterocyklickým kruhem (kruhy), následujícími odlišnými způsoby.

Tyto dva způsoby zahrnují (1) jednostupňový proces s reakcí s 1,2-disubstituovaným diaminem, aminoalkoholem, aminoalkoholem nebo aminothiolem apod., který zahrnuje vytváření kruhu za odštěpení vody stejně jako (2) dvoustupňový způsob, který zahrnuje reakci s diaminem, aminoalkoholem nebo aminothiolem apod. a dehydrataci jak je uvedeno výše za poskytnutí odpovídajícího amidu, esteru, thioesteru apod. a následné působení na produkt s cílem dosáhnout vytvoření kruhu a tím i požadované sloučeniny.

Příklady prostředků pro dehydrataci použité v obou způsobech (1) a (2) výše zahrnují způsob použití dehydratačního činidla, kterým může například být sloučenina připravená pro toto použití z anhydridu kyseliny trifluormethansulfonové a trifenylfosfínu, známá z literatury (J. org. Chem., 52, 4137, 1987) nebo karbodimid jako je dicyklohexylkarbodiimid, nebo molekulární síta apod., stejně jako způsob používající varu výše uvedené sloučeniny mono- nebo dikarboxylové kyseliny pod zpětným chladičem v přítomnosti kyselého katalyzátoru jako je kyselina p-toluensulfonová apod. v přístroji jako je Dean-Starkův přístroj s použitím rozpouštědla jako benzen, toluen a xylen, schopného vytvářet azeotropní směs s vodou.

(ΙΠ) Způsob výroby derivátů látky PF 1022 obecného vzorce II podle vynálezu se popisuje dále.

(a) Sloučeninu obecného vzorce II, kde R³ je atom vodíku a R⁴ je morfolinová skupina připojená v polohách ortho-, meta- nebo para-fenylové skupiny uvedené v obecném vzorce (Π), je možno výhodně připravit způsobem, používajícím jako výchozího materiálu sloučeniny vzorce

-19CZ 295705 B6 cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(H₂N)PhLac-MeLac-Lac-MeLeu-PhLac], do které byla zavedena aminoskupina do polohy para jednoho z benzenových kruhů látky PF 1022, a která byla syntetizována výše popsaným způsobem.

Pro ilustraci uvedená sloučenina cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(H₂N)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac] může reagovat s di-(2-halogenethyl)etherem v inertním rozpouštědle v přítomnosti báze, přičemž může snadno dojít k cyklizaci na části aminové skupiny s přeměnou aminové skupiny na skupinu morfolinovou za získání morfolinového derivátu.

Jako di-(2-halogenethyl)ether je použitelný di-(2-chlorethyl)ether a di-(2-bromethyl)ether. Pro dosažení hladšího průběhu reakce je výhodná posledně jmenovaná sloučenina. Vyššího výtěžku vyráběného morfolinového derivátu v reakční směsi je možno dosáhnout přídavkem jodidu do reakční směs, jako je jodid sodný, jodid draselný, tetra-(M-butyl)amoniumjodid.

(b) Sloučenina obecného vzorce II, kde R³ je morfolinová skupina připojená v některé z poloh ortho, meta nebo para-fenylové skupiny uvedené ve vzorci II a R⁴ je morfolinová skupina připojená do polohy ortho- nebo meta-fenylové skupiny může být syntetizována způsobem, který zahrnuje působení nadbytku nitračního činidla, jako je směs koncentrované kyseliny sírové (nebo oxidu sírového) v koncentrovanou kyselinou dusičnou, samotná dýmavá kyselina dusičná apod. na látku PF 1022 za vzniku směsi prostorových izomerů dinitrosloučenin, kde jedna nitroskupina byla zavedena do každého ze dvou benzenových kruhů látky PF 1022, a následnou chemickou přeměnu vzniklo dinitrosloučeniny stejným způsobem jako tomu bylo u moncnitroderivátu, takže vznikne takový dimorfolinový derivát, ve kterém jedna morfolinová skupina je připojena na každý ze dvou benzenových kruhů látky PF 1022. Také při tomto způsobu je možno izolovat každý z vytvářených prostorových izomerů od druhých izomerů a provádět další čištění buď ves tupni meziproduktu nitrosloučeniny, nebo ve stupni morfolinových sloučenin získaných jako konečný produkt. V různých výše popisovaných způsobem může být dále ochrannou skupinou, používanou pro ochranu aminové skupiny přítomné ve výchozích materiálech a v meziproduktech, skupina chránící aminovou skupinu odstranitelná za podmínek kyselé hydrolýzy nebo za podmínek redukce, jako například benzyloxykarbonylová (Cbz) skupina, /-butoxykarbonylová (Boc) skupina p-methoxybenzyloxykarbonylová skupina, formylová skupina apod., stejně jako jakákoliv skupina schopná chránit aminovou skupinu, která se běžně používá v chemii peptidů a kterou je možno odstranit za neutrálních podmínek, jako například alyloxykarbonylová skupina apod. Výhodnými ochrannými skupinami aminoskupin jsou skupina /-butoxykarbonylová (Boc) a skupina benzyloxykarbonylová (Cbz). Zavedení skupiny Boc je možno dosáhnout použitím komerčně dostupného činidla, jako je činidlo DiBoc, Boc-ON apod. Zavedení skupiny Cbz je možno dosáhnout Cbz-chloridovým činidlem, N-Cbz-sukcinimidovým činidlem apod. V obou případech může být reakce pro chránění aminové skupiny provedena v inertním rozpouštědle jako je THF, 1,4-dioxan, DMF apod., a v přítomnosti anorganické nebo organické báze. Skupinu Boc jako aminoskupinu chránící skupinu je možno snadno odstranit působením kyseliny, jako je kyseliny chlorovodíková, trifluoroctová apod., a skupinu Cbz je možno snadno odstranit katalytickou hydrogancí.

Použitelné skupiny chránící karboxylové skupiny, používané u výchozích materiálů a meziproduktů, jsou takové skupiny chránící karboxylovou skupinu, které je možno odstranit za podmínek kyselé hydrolýzy nebo redukčních podmínek, například skupina /-butylová, difenylmethylová, benzylová, p-methoxybenzylová nebo tritylová apod., stejně jako jakékoliv ochranné skupiny, které je možno odstranit za neutrálních podmínek, jako například skupina allylová. Ochrannou skupinu karboxylové skupiny, kterou je možno odstraňovat za podmínek kyselé hydrolýzy je možno odštěpit působením kyseliny trifluoroctové, methansulfonové, trifluormethansulfonové apod. V tomto místě je nejvýhodnější působení kyseliny trifluoroctové. Jestliže se použije skupiny chránící karboxylovou skupinu, která je odstranitelná za redukční podmínek, je tuto skupinu možno odstranit působením katalytické redukce v přítomnosti paladia. Karboxylovou ochrannou skupinu odstranitelnou za neutrálních podmínek, jako je skupina allylová, je možno odstranit reakcí s 2-ethylhexonoátem draselným v přítomnosti palladia jako katalyzátoru.

-20CZ 295705 B6

Nové cyklodepsipeptidové deriváty látky PF 1022 podle předkládaného vynálezu vyráběné výše uvedenými způsoby jsou schopny vytvářet adiční soli a farmaceuticky přijatelnými anorganickými kyselinami jako je kyselina chlorovodíková, sírová a fosforečná, nebo s farmaceuticky přijatelnými organickými kyselinami, jako je kyselina octová, propionová, citrónová a methansulfonová. Dále je možno použít deriváty P1022 podle předkládaného vynálezu nebo jejich soli začleněné do anthelmintických prostředků, které se vyrábějí míšením pevného nebo kapalného nosiče, který je farmaceuticky přijatelný, s uvedenými deriváty.

Podle dalšího hlediska předkládaného vynálezu se tedy poskytuje vermicidní nebo athelmintický prostředek obsahující jako aktivní složku alespoň jeden z nových cyklodepsipeptidových derivátů látky PF1022 výše uvedeného obecného vzorce I a jejich soli.

Nové cyklodepsipeptidové deriváty obecného vzorce I nebo jejich soli nebo prostředky obsahující výše uvedené sloučeniny podle vynálezu mohou být živočichům podávány orálně nebo parenterálně. Dávka aktivní složky může být vhodně stanovena předběžnými tesy v závislosti na povaze parazita, který má být vypuzen, povaze hostitelského živočicha, ve kterém parazité žijí a na dalších faktorech. Například v tom případě, kdy je třeba orálním podáváním aktivní složky vypudit hlístice žijící v kuřatech, je možno jako obecné vodítko uvést, že nové sloučeniny podle předkládaného vynálezu obecného vzorce I mohou být orálně podávány v dávce alespoň 0,05 mg/kg, s výhodou 0,2 až 3 mg/kg, pro dosažení účinné eliminace parazita.

Sloučenina obecného vzorce I podle předkládaného vynálezu může být přítomna ve vermicidním nebo anthelmintickém prostředku stejným způsobem jako je tomu v případě prostředku s látkou PF1022 popsaném v prvním zveřejnění japonské patentové přihlášky Kokai Hei-3-35796 nebo zveřejněné evropské patentové přihlášce EP 0 382 173-A2.

Jako hostitelská zvířata, kterým je možno podávat jako anthelmintické prostředky nové cyklodepsipeptidové deriváty látky PF1022 podle předkládaného vynálezu, mohou být jako příklad uvedena chovná zvířata, drůbež, experimentální zvířata i společenská zvířata, jako jsou vepři, hovězí dobytek, králíci, ovce, kozy, domácí drůbež, krocani, myši, bílé krysy,morčata, opice, psi, kočky, koně, malí ptáci apod. Příklady parazitů žijících na těchto hostitelských zvířatech zahrnují parazity hovězího dobytka, jako jsou zkroucení žaludeční červi, žaludeční červi náležející do rodu Qstertagia, malí vlasoví červi, nematody náležející do rodu Cooperia, uzlinoví červi náležející do rodu Oesophagostomum, amphisomy, střevní tasemnice (Moniezia benedeni), plicní motolice a jaterní motolice; parazity vepřů, jako jsou hlístice, tenkohlavec bičíkový a uzlinoví červi; parazité psů, jako jsou hlístice, měchovci, tenkohlavci a srdeční červi; parazité koček, jako jsou hlístice a Spirometra mansoni; a parazité kuřat, jako jsou hlístice, vlasoví červi a červi „cedal worms“. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou účinné také pro odstranění parazitů, jako jsou hlístice, roupi, měchovci (Ancyclostoma duedenale, Ancylostoma ceylamcum, Necator americanus), orientální vlasoví červi, strungyloidózní červi a tenkohlavci, z těla člověka.

Nové cyklodepsipeptidové deriváty látky PF 1022 podle předkládaného vynálezu jsou použitelné pro léčení a prevenci parazitárních infekcí. Pro účely léčení mohou být sloučeniny podávány orálně a parenterálně. Pro orální podávání jsou k dispozici různé způsoby podávání včetně způsobu, při kterém se kapalný prostředek obsahující sloučeninu podává pomocí žaludečního katétru, způsobu, při kterém se sloučenina mísí s potravou nebo pitnou vodou a výsledná směs se podává nebo způsobu, při kterém se sloučenina podává ve formě jakéhokoli vhodného prostředku pro normální orální podávání jako jsou tablety, kapsle, kuličky, sousta, prášky, měkké kapsle apod.

Při parenterálním podávání mohou být sloučeniny podle vynálezu podávány injekcemi, například subkutánně, intramuskulámě, intravenózně, intraperitoneálně apod. ve formě ve vodě nerozpustného prostředku, obsahujícího podzemnicový olej, sojový olej apod. nebo ve formě ve vodě rozpustného prostředku obsahujícího glycerol, polyethylenglykol apod. V těchto parenterálních pro

-21 CZ 295705 B6 středcích může být sloučenina podle vynálezu obecně obsažena v množství 0,1 až 10 % hmotnostních vztaženo na prostředek jako celek.

Pro účely preventivního ošetření parazitárních infekcí je obvyklou praxí podávání sloučeniny podle předkládaného vynálezu ústy ve formě směsi sloučeniny s potravou. V případě preventivního podávání není perioda podávání nijak omezena. Ve většině případů je však dostačující podávání sloučeniny podle předkládaného vynálezu po dobu přibližně dvou měsíců v případě léčení brojlerových kuřat a po dobu přibližně dvou měsíců v případě léčení vepřů. Koncentrace podávané sloučeniny může být alespoň 1 ppm a s výhodou až do 5 až 10 ppm sloučeniny v potravě, do které je sloučenina přimíšena. Podávání se s výhodou uskutečňuje trvale.

Co se týče bezpečnosti nových cyklodepsipeptidových derivátů látky PF 1022 podle předkládaného vynálezu ukázaly některé testy, že prostředky mají nízkou toxicitu do té míře, že myši, které dostávaly typický derivát podle tohoto vynálezu v dávce 300 mg/kg nevykázaly žádnou abnormalitu, ale normální přírůstek tělesné hmotnosti. Výsledky testů na zvířatech pro vyhodnocení anthelmintického účinku nových cyklodepsipeptidových derivátů látky PF 1022 podle předkládaného vynálezu ukázaly, že sloučeniny podle tohoto vynálezu mají silně anthelmintické účinky, stejné nebo vyšší než účinky známých derivátů látky PF1022, které jsou již známy z literatury a patentů. Navíc je třeba upozornit, že nové deriváty PF 1022 podle předkládaného vynálezu mohou být účinně syntetizovány z látky PF1022 a jejích homologů, které se vyrábějí fermentací, jako výchozích sloučenin.

Anthelmintický účinek cyklodepsipeptidů podle předkládaného vynálezu bude ilustrován příklady testů.

Příklady provedení vynálezu

Příklad testu 1

Test anthelmintického účinku na parazity ovcí „in vivo“

Ovci, která byla infikována nematodou Haemonchus contortus, byly orálně podávány testované sloučeniny ve formě želatinových kapslí, přičemž jejich dávka (mg) byla přesně vypočtena na základě tělesné hmotnosti (kg) testovaných ovcí. Před a po podání testované sloučeniny byl kvantitativně počítán počet vajíček, která byla vylučována spolu s výkaly testovanými ovcemi. Tím byla vyhodnocena míra anthelmintického účinku testované sloučeniny. Výsledky testů jsou ukázány v tabulce 1 níže, kde jsou testované sloučeniny označeny kódovým číslem každé testované látky. V tabulce 1 je ukázána dávka testované sloučeniny, u které nemohl být pozorován další vliv na vylučování vajíček, tj. dávka každého nového cyklodepsipeptidového derivátu podle předkládaného vynálezu, při které může být parazit úplně vypuzen. Z výše uvedených testů je vidět, že nové deriváty PF 1022 podle vynálezu mají velmi vysoký anthelmintický účinek, který je 2,5 až 25 x vyšší než účinek látky PF 1022 a 2 až 5 x vyšší než u látky podobné látce PF 1022, kterou je cyklo[MeLeu-(Mor)PhLac-MeLeu-Lac], popisovaný v zveřejněné PCT přihlášce WO 93/19035.

-22CZ 295705 B6

Tabulka 1

Testovaná látka (Příklad č.)	Podávaná dávka (mg/kg)
Látka PF 1022 (referenční sloučenina A)	0,25
Cyklo [MeLeu-(Mor)PhLac-MeLeu-Lac] (referenční sloučenina B)	0,05
Látka PF1022-235 (Příklad 7)	0,1
Látka PF 1022-23 6 (Příklad 8)	0,01
Látka PF 1022-23 7 (Příklad 11)	0,01
Látka PF 1022-239 (Příklad 12)	0,025
Látka PF 1022-263 (Příklad 37)	0,01
Látka PF1022-285 (Příklad 14)	0,1
Látka PF 1022-3 04 (Příklad 17)	0,05
Látka PF 1022-312 (Příklad 24)	0,05
Látka PF 1022-242 (Příklad 45)	0,01
Látka PF 1022-222 (Příklad 68)	0,05

Příklad testu 2

Test anthelmického účinku proti Nippostronglylus brasiliensis „in vivo“

Jako testovací zvířata byli použiti samci krys kmene Wister, kteří byli uměle infikováni parazitem Nippostrongylus brasilliensis. Podávaná dávka (mg) každé testované sloučeniny byla přesně vypočtena podle tělesné hmotnosti (kg) každé krysy. Každá testovaná sloučenina byla použita ve formě roztoku v dimethylsulfoxidu nebo methanolu. Roztok byl zředěn Ringerovým roztokem a orálně podán testovaným krysám. Deset dnů po podání byly krysy usmrceny a byl zjišťován počet dospělých parazitů, kteří zbyli v tenkém střevě krys. Byla vypočtena účinnost ve srovnání s počtem dospělých parazitů v kontrolní skupině testovaných krys (infikované ale neléčené), která se udává v tabulce 2 níže.

Nové deriváty PF 1022 podle vynálezu vykázaly přibližně 2 až 10 X vyšší anthelmintický účinek, než tomu je u látky PF 1022 (referenční sloučenina A).

Tabulka 2

Testovaná sloučenina (příklad č.)	Dávka (mg/kg)	Účinnost (%)
Látka PF 1022 (referenční sloučenina A)	10	80,2
Látka PF1022-270	5	99,7
(příklad 9)	2	94,2
Látka PF1022-271 (příklad 10)	5	100

Příklady výroby nových derivátů látky PF 1022 obecných vzorců I, II nebo III podle předkládaného vynálezu jsou nyní ilustrovány v následujících příkladech 4 až 72. V příkladech se používají zkratky, jejichž význam se uvádí dále:

Boc: t-butoxykarbonylová skupina

Cbz: benzyloxykarbonylová skupina

Mor: morfolinová skupina

Pyr: pyrrolidinová skupina navázaná na své 1-N-poloze

Pip: piperidinová skupina navázaná ve své 1-N-poloze

BHT: benzothiazolylová skupina navázaná ve své 2-poloze

ATH: aminoethiazolylová skupina navázaná ve své 4-poloze

BIM: benzimidazolylová skupina navázaná ve své 2-poloze

Me: methylová skupina

-23CZ 295705 B6

Pr: n-propylová skupina

Bu: M-butylová skupina

Lac: zbytek kyseliny D-mléčné vzorce

CH₃-CH

PhLac: zbytek kyseliny D-fenylmléčné vzorce

(R)Lac: zbytek kyseliny D-mléčné, jehož methylová skupina byla substituována skupinou -R (R)PhLac: zbytek kyseliny D-fenylmléčné, jehož fenylová skupina byla substituována skupinou -R v poloze parafenylové skupiny (o-R)PhLac: zbytek kyseliny D-fenylmléčné, jehož benzenový kruh byl substituován v poloze ortho-benzenového kruhu skupinou -R

MeLue: N-methyl-L-leucinový zbytek vzorce /NtCHa)(CH₃) 2~CH--CH₂ —CH ^co—

THF: tetrahydrofuran

DMF: N,N-dimethylformamid

DMSO: dimethylsulfoxid

DEAD: diethylazodikarboxylát

TFA: kyselina trifluoroctová

DiBocReagens: di-t-butyldikarbonát

HOBt: 1-N-hydroxybenztriazol

BOP-C1: chlorid kyseliny bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosfínové.

Příklad 1 popisovaný níže je příkladem výroby nitroderivátu látky P1022 její nitrací; příklad 2 uvedený níže je příkladem výroby odpovídajícího aminového derivátu redukcí nitroskupiny uvedeného nitroderivátu; a příklad 3 je příkladem syntézy látky PF 1022 E chemickou přeměnou aminoskupiny uvedeného aminového derivátu.

Příklad 1

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLau-(O₂N)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Látka PF1022 (50 g) byla rozpuštěna v anhydridu kyseliny octové (250 ml), a výsledný roztok byl udržován při teplotě nižší než 10 °C za chlazení ledem, přičemž k uvedenému roztoku byl po kapkách přidávána dýmavá kyselina dusičná (25 ml). Po dokončení reakce byla výsledná směs míchána 3 h. Získaný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (2,5 1), promyt vodou, vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou (postupně vždy 2,5 1), a byl sušen nad

-24CZ 295705 B6 bezvodým síranem sodným a dále odpařen za sníženého tlaku po odstranění rozpouštědla. Výsledný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí ethylacetát - hexan = 1:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (18,6 g; výtěžek 35,5 %) jako bílého prášku.

NMR (CDC1₃): δ = 0,78-1,00 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu)), 1,10-1,86 (18H, m, p-CH₃(Lac), 3-CH₂, y-CH(MeLeu)), 2,70-3,25 (16H, m, N-Me, p-CH₂ ((O₂N)PhLac, PhLac)), 4,45-5,75 (8H, m, a-CH), 7,15-7,25 (5H, m, aromatický(PhLac)), 7,45, 8,15 (vždy 2H, vždy d, J=8Hz, aromatický ((O₂N)PhLac)).

Příklad 2

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(H₂N)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(O₂N)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu PhLac] (18,6 g) jak byl získán v příkladu 1 byl rozpuštěn v methanolu (190 ml), a k výslednému roztoku byla přidána 10% směs paladium/uhlík (1,9 g). Výsledná směs byla při teplotě místnosti za atmosférického tlaku katalyticky redukována. Po odfiltrování katalyzátoru z výsledného reakčního roztoku byl zfíltrovaný reakční roztok odpařen pro odstranění rozpouštědla a získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí ethylacetát - hexan = 2:1, v/v), pro získání v názvu uvedené sloučeniny (71 g; výtěžek 39,4 %) jako bílého prášku.

Příklad 3

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac], tedy látka PF1022E

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(H₂N)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (7,1 g) jak byl získán v příkladu 2, byl rozpuštěn v TFA (70 ml), a k výslednému roztoku byl přidán dusitan sodný (0,76 g). Výsledná směs byla ponechána reagovat 1 hodinu při teplotě 60 až 65 °C. Získaný zbytek byl rozpuštěn ve směsi 1,4-dioxanu (140 ml) a vody (28 ml), a k výslednému roztoku byl přidán hydrogenuhličitan sodný (6,18 g). Výsledná směs byla zředěna ethylacetátem (500 ml), a dvakrát promyta vodou (vždy 500 ml), a za sníženého tlaku bylo odpařeno rozpouštědlo. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí ethylacetát - hexan = 4:3, v/v) a potom krystalizován z ethylacetátu za získání v názvu uvedené sloučeniny (2,1 g; 30%) jako krystalického bílého prášku.

Takto získaná látka PF1022 E byla analyzována a bylo zjištěno, že je z hlediska [a]_D, NMR a hmotnostních spekter úplně identická s látkou PF1022 získanou fermentací.

Příklad 4

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NCCH₂O) PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (tedy látka PF 1022 E) (482 mg) získaná v příkladu 3 byla rozpuštěna v THF (10 ml) a k výslednému roztoku byl přidán bromacetonitril (0,12 ml) a hydrid sodný (100 mg) (ve formě 55% disperze v minerálním oleji) za chlazení ledem. Získaná směs byla ohřátá na teplotu místnosti a reakce byla ponechána probíhat při teplotě místnosti 1 hodinu. Výsledný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (50 ml), dvakrát promyt vodou (vždy 50 ml) a rozpouštědlo bylo z roztoku odpařeno za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform - ethylacetát = 1:2, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (477 mg; výtěžek 94,4 %) jako bílého prášku.

NMR(CDC1₃): δ 0,82-1,05 (24H, m, δ -CH₃(MeLeu)), 1,26-1,71 (18H, m, β -CH₃(Lac), β-ΟΗ₂, γ -CH(MeLeu)), 2,73-3,20 (16H, m, N-Me, β -CH₂((NCCH₂O)PhLac, PhLac)), 3,90-5,70 (8H,

-25 CZ 295705 B6 m, a -CH), 4,70 (2H, s, NCCH₂O), 6,86-6,94 (2H, m, aromatický ((NCCH₂O)PhLac)), 7,20-7,30 (7H, m, aromatický ((NCCH₂O)PhLac, PhLac)) MS(FD): 1059 (M+l)

Příklad 5

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(BocNHCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NCCH₂O)PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac] (461 mg) jak byl získán v příkladu 4 byl rozpuštěn v ethanolu (1,5 ml) a k výslednému roztoku byla přidána konío centrovaná kyselina chlorovodíková (0,2 ml) a 10% směs paladium/uhlík (50 mg). Získaná směs byla podrobena katalytické redukci vodíkem za středního tlaku (310 kPa) při teplotě místnosti. Po odfiltrování katalyzátoru z reakčního roztoku byl filtrát zakoncentrován za sníženého tlaku dosucha za poskytnutí zbytku obsahujícího sloučeninu uvedenou v názvu příkladu 6 níže, ale ve formě surového hydrochloridu.

Zbytek byl rozpuštěn ve směsi dioxanu (10 ml) a vody (10 ml), a k získanému roztoku byl přidán triethylamin (0,25 ml) a reagencie DiBoc (240 mg). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2,5 h. Po odpaření dioxanu z reakčního roztoku za sníženého tlaku byla ke zbytku přidána 5% vodná kyselina citrónová a poté byly odděleny vodná a organická vrstva. Organická 20 vrstva (roztok) získaná tímto krokem, byla zakoncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-ethyl acetát = 2:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (296 mg; 58,2 %) jako bílého prášku.

NMR(CDC1₃): δ = 0,83-1,05 (33H, m, δ -CH₃ (MeLeu), Boc),

1,35-2,01 (18H, m, β -CH₃ (Lac), β -CH₂, γ -CH(MeLeu))

2,74-3,15 (20H, m, N-Me, β-CH, ((BocNHCH₂CH₂O)PhLac, PhLac)

BocNHCH₂CH₂O), 3,50-5,75 (8H, m, a -CH),

6,86-6,94 (2H, m, aromatický ((BocNHCH₂CH₂O)PhLac)),

7,20-7,30 (7H, m, aromatický ((BocNHCH₂CH₂O)PhLac, PhLac))

Příklad 6

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-278)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(BocNHCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (296 mg) získaný v příkladu 5 byl rozpuštěn v methylenchloridu (3 ml), a k výslednému roztoku byla pomalu přidávána TFA (0,5 ml) za chlazení ledem. Směs byla opět ochlazena ledem a potom kní byla přidána TFA (0,2 ml) a směs byla dále míchána při teplotě místnosti 45 min. Takto získaný reakční roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku a ke zbytku byl přidán nasycený vodný 40 roztok hydrogenuhličitanu sodného a ethylacetát a byly odděleny vodná a organická vrstva.

Organická vrstva (roztok) získaná v tomto kroku byla zakoncentrována dosucha za sníženého tlaku za získání v názvu uvedené sloučeniny jako bílého prášku v kvantitativním výtěžku.

Příklad 7

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu((CH₃)₂NCH₂CH₂CH₂O) PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-235)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeuLac-MeLeu-PhLac]hydrochlorid (283 mg) byl rozpuštěn v ethanolu (6 ml), a k výslednému roztoku byl přidán 37% vodný roztok formaldehydu (0,43 ml) a 10% paladium/uhlík (65 mg). Získaná směs byla podrobena katalytické redukci vodíkem za atmosférického tlaku při teplotě místnosti po dobu 8 h. Po odfiltrování katalyzátoru z reakčního roztoku byl filtrát zakoncentrován za sníženého šlaku dosucha. Zbytek byl

-26CZ 295705 B6 čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-methanol = 20:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (192 mg; 68,5 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -71,0° (c = 0,13, MeOH)

NMR (DDC1₃): δ = 0,80-1,05 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu)),

1.25- 1,80 (18H, m, β -CH₃(Lac), β -CH₂, γ -CH(MeLeu)),

2,41 (6H, s, N(CH₃)₂, 2,73-3,20 (20H, m, N-CH₃(MeLeu), β -CH₂(((CH₃)NCH₂CH₂O)PhLac, PhLac), (CH₃)NCH₂CH₂O),

4,08-5,75 (8H, m, a -CH), 6,84, 7,14 (vždy 2H, vždy d, vždy J=8Hz), aromatický ((CH₃)NCH₂CH₂OPhLac), 7,26 (5H, s aromatický(PhLac)) MS(SIMS): 1036 (M+l)

Příklad 8

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu((C₂H₅)₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF1022-236)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac) hydrochlorid (425 mg) získaný v příkladu 6 byl rozpuštěn v ethanolu (5 ml), a k výslednému roztoku byl přidán 90% vodný roztok acetaldehydu (39 ml) a 10% paladium/uhlík (60 mg). Získaná směs byla podrobena katalytické redukci vodíkem za atmosférického tlaku při teplotě místnosti po dobu 8 h. Potom byl katalyzátor z reakčního roztoku odfiltrován a filtrát byl zakoncentrován dosucha za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroformmethanol 20:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (289 mg; 66,7 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -54,8° (c=0,21, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,80-1,07 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu)),

1.25- 1,81 (18H, m, β -CH₃ (Lac), β -CH₂, γ -CH(MeLeu)),

1,38 (6H, t, J=7Hz, N(CH₂CH₃)₂,

2,61-3,15 (24H, m, N-CH₃(MeLeu), β -CH₂(((C₂H₅)₂NCH₂CH₂O)PhLac, PhLac)),

4,00-5,67 (8H, m,a-CH),

6,79-6,83, 7,11-7,14 (vždy 2H, vždy m, aromatický(((C₂H₅)₂NCH₂CH₂O)PhLac)),

7.24- 7,25 (5H, m, aromatický (PhLac)) MS(SIMS): 1064 (M+l), 1065 (M+2)

Příklad 9

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(Pr₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-270)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (tedy látka PF1022-278) (500 mg) získaný v příkladu 6 byl rozpuštěn v DMF (5 ml), a k výslednému roztoku byl přidán uhličitan draselný (112 mg) a 1-jodpropan (86 μΐ). Výsledná směs byla při teplotě místnosti míchaná přes noc. K výslednému reakčnímu roztoku byl přidán ethylacetát a voda a oddělená organická vrstva (roztok) byla sušena nad síranem hořečnatým. Z organické vrstvy bylo odpařeno rozpouštědlo. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (160 mg; 54 %).

[a]_D = -81,9° (c = 0,21, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ 0,80-1,05 (30H, m, δ -CH₃ (MeLeu), CH₃ (propyl)),

1.25- 1,80 (22, m, β -CH₂ (Lac), β -CH₂ (MeLeu), y-CH(MeLeu), CH₂CH₃(propyl)),

2,48 (4H, t, CH₂N(propyl)),

2,75-2,83, 3,00-3,15 (20H, m, N-Me(MeLeu),

-27CZ 295705 B6 p-CH₂(PhLac), OCH₂CH₂N),

3,90-5,67 (8H, m, α-CH (MeLeu, Lac, PhLac),

6,79-6,82 (2H, m, aromatický), 7,12-7,29 (7H, aromatický)

MS(SIMS): 1092 (M+l)

Příklad 10

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(Bu₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-271)

Cyklo [MeLeu-Lac-MeLeu]-(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac] (tedy látka PF 1022-278) (1,08 g) byl rozpuštěn v DMF (10 ml), a k získanému roztoku byl přidán uhličitan draselný (296 mg) a 1-jodobutan (270 μΐ). Výsledná směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti. K reakčnímu roztoku byl přidán ethylacetát a vodu a získaná organická vrstva byla sušena nad síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo z roztoku odpařeno a zbytek byl čištěn chromatografii na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (529 mg; 44 %).

[a]_D = -81,8° (c = 0,17, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,74-1,05 (30H, m, δ -CH₃(MeLeu), CH₃(butyl)),

1.24- 1,74 (26H, m, β -CH₃ (Lac), δ -CH₂ (MeLeu), y-CH(MeLeu), CH₂CH₂CH,CH₃(butvn),

2,49 (4H, t, CH₂N(butyl)), 2,73-3,16 (20H, m, N-Me(MeLeu), β -CH₂(PhLac), OCH₂CH₂N),

4,00-5,65 (8H, m, a -CH(MeLeu, Lac, PhLac),

6,70-6,80 (2H, m, aromatický), 7,12-7,29 (7H, m, aromatický)

MS(FAB): 1120 (M+l)

Příklad 11

Příprava cyklo[MeLeu-((CH₃OCH₂CH₂)₂NCH₂CH₂O) PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLacMeLeu-Lac] (kód sloučeniny č. PF1022-238)

Cyklo[MeLeu-(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac-MeLeu-Lac] hydrochlorid (406 mg) byl rozpuštěn v DMF (6 ml), a k získanému roztoku byl přidán 2-bromethylmethylether (158 μΐ), jodid sodný (86 mg) a uhličitan draselný (212 mg). Reakce byla prováděna 3 hodiny při teplotě 80 °C. Výsledný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (50 ml), dvakrát promyt vodou (vždy 50 ml). Rozpouštědlo bylo v roztoku odpařeno za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografii na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-ethylacetát = 2:1, v/v) za získání v názvu uvedené sloučeniny (132 mg; 30,6 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -81,8° (c = 0,11, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ = 0,82-1,05 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu)),

1,23-1,81 (18H, m, β -CH₃(Lac), β -CH₂, γ-CH(MeLeu)),

2,74-3,18 (34H, m, N-CH₃(MeLeu), β-CH₂((CH₃OCH₂CH₂)₂NCH₂CH₂O)PhLac, PhLac)),

3,77-5,70 (8H, m, a -CH),

6,82, 7,16 (vždy 2H, vždy d, vždy J=8H, aromatický (((CH₃OCH₂CH₂)₂NCH₂CH₂O)PhLac),

7.25- 7,29 (5H, m, aromatický (PhLac))

MS(FD): 1125 (M+2)

Příklad 12

Příprava cyklo[MeLeu-(MorCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac] (kód sloučeniny č. PF1022-239)

-28CZ 295705 B6

Cyklo[MeLeu-(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac] hydrochlorid (227 mg) byl rozpuštěn v DMF (1 ml) a k získanému roztoku byl přidán 2-bromethylether (32 μΐ), jodid sodný (24 mg) a uhličitan draselný (59 mg). Reakce byla prováděna 6 h při teplotě 80 °C. Získaný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (20 ml) a dvakrát promyt vodou (vždy 20 ml). Rozpouštědlo bylo z roztoku za sníženého tlaku odpařeno. Zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-methanol = 50:1, v/v) za získání v názvu uvedené sloučeniny (95 mg; 41 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -70,6° (c = 0,95, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,75-1,05 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu)),

1,25-1,81 (18H, m, β -CH₃(Lac), β -CH₂, γ-CH(MeLeu)), 2,56-3,75 (28H, m, N-CH₃(MeLeu), β -CH₂(MorCH₂CH₂O)PhLacPhLac), 4,05-5,67 (8H, m, a-CH),

6,83, 7,13 (vždy 2H, vždy d, vždy J=8Hz, aromatický ((MorCHCH₂O) PhLac)),

7,26 (5H, s, aromatický(PhLac))

MS(SIMS): 1078 (M+l)

Příklad 13

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(PyrCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-284)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (tedy sloučenina PF 1022-278) (150 mg) byl rozpuštěn v DMF (15 ml) a k výslednému roztoku byl přidán uhličitan draselný (41 mg), jodid sodný (49 mg) a 1,4-dibrombutan (19,4 μΐ). Výsledná směs byla míchána 5,5 h při 50 °C. K získanému reakčnímu roztoku byl přidán ethylacetát a voda a potom byla oddělena vodná a organická vrstva. Takto získaná organická vrstva byla sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (55 mg; 39 %).

[a]_D = -85,0° (c = 0,2, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,80-1,04 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu)),

1,35-1,89 (22H, m, β -CH₃ (Lac), β -CH₂(MeLeu), γ -CH(MeLeu), pyrrolidin-H),

2,64-3,15 (24H, m, N-Me(MeLeu), β -CH₂(PhLac), pyrrolidin-H, OCH₂CH₂N),

4,00-5,70 (8H, m, α -CH(MeLeu, Lac, PhLac),

6,80-6,86 (2H, m, aromatický), 7,12-7,32 (7H, m, aromatický)

MS(FAB): 1062 (M+l)

Příklad 14

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(PipCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-285)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (látka

PF 1022-278) (296 mg) byl rozpuštěn v DMF (3 ml) a k výslednému roztoku byl přidán uhličitan draselný (66 mg), jodid sodný (79 mg) a 1,5-dibrompentan (35,5 μΐ). Výsledná směs byla míchána 5,5 h při 50 °C. K získanému roztoku byl přidán ethylacetát a voda. Získaná organická vrstva byla sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (162 mg; 74 %).

[a]_D = -79,5° (c = 0,22, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,80-1,05 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu)),

-29CZ 295705 B6

1,35-1,81 (24H, m, β -CH₃(Lac), β -CH₂(MeLeu), γ -CH(MeLeu), piperidin-H), 2,48-3,15 (24H, m, N-Me(MeLeu), β -CH₂(PhLac), OCH₂CH₂N. piperidin-H),

4,07-5,67 (8H, m, a -CH(MeLeu, Lac, PhLac),

6,80-6,86 (2H, m, aromatický), 7,12-7,32 (7H, m, aromatický)

MS(FAB): 1076 (M+l)

Příklad 15

Příprava cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu ((C₂H₅)2NCH2CH2CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-274) (1) Syntéza 3-benzyloxykarbonylamino-l-propanolu

3-Amino-l-propanol (5,0 g) byl rozpuštěn ve směsi dioxanu (50 ml) a vody (50 ml) a výslednému roztoku byl přidán za chlazení ledem hydrogenuhličitan sodný (4,3 mg) a benzyloxychlorid (15,6 ml). Výsledná směs byla při stejné teplotě míchána 1,5 h. K takto získanému roztoku byl přidán ethylacetát a voda a organická vrstva byla sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (8,5 g; 62 %);

NMR (CDC1₃): δ = 1,70 (2H, m), 2,55 (1H, t), 3,36 (2H, q), 3,68 (2H, q), 5,11 (2H, s), 7,32-7,37 (5H, m) (2) Syntéza 3-benzyloxykarbonylamino-l-propanol t-butyldimethylsilyletheru

3-Benzyloxykarbonylamino-l-propanol (8,1 g) byl rozpuštěn v methylenchloridu (200 ml) a k výslednému roztoku byl přidán triethylamin (4,1 g) a L-butyldimethylsilylchlorid (7,1 g). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 1 den. K reakčnímu roztoku byl přidán ethylacetát a voda a oddělena organická vrstva byla sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (10,1 g; 82 %).

NMR (CDCh): δ = 0,12 (6H, s), 0,96 (9H, s), 1,79 (2H, m), 3,39 (2H, q), 3,78 (2H, t), 5,16 (2, s), 7,38-7,42 (2H, m) (3) Syntéza N-ethyl-3-benzyloxykarbonylamino-l-propanol-/-butyldimethylsilyletheru

3-Benzyloxykarbonylamino-l-propanol-t-butyldimethylsilylether (10,1 g) byl rozpuštěn v THF (250 ml) a k výslednému roztoku byl přidán za chlazení ledem ethyljodid (5,1 ml) a 60% hydrid sodný (suspenze v minerálním oleji) (2,0 g). Výsledná směs byla míchána za chlazení na ledu po dobu 30 min a potom 15 h při teplotě místnosti. K takto získanému roztoku byl přidán ethylacetát a voda. Oddělená organická vrstva byla promyta vodou a potom sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (8,5 g; 80 %).

NMR(CDC1₃): δ = 0,03 (6H, s), 0,8 (9H, s), 1,12 (3H, t), 1,74 (2H, q), 3,39 (4H, q), 3,61 (2H, t), 5,12 (2H, s), 7,29-7,39 (5H, m) (4) Syntéza N-ethyl 3-benzyloxykarbonylamino-l-propanolu

N-ethyl-3-benzyloxykarbonylamino-l-propanol-t-butyldimethylsilylether (8,5 g) byl rozpuštěn v THF (120 ml) a k výslednému roztoku byl přidán za chlazení ledem roztok IN tetrabutylamoniumfluoridu v THF (48 ml). Výsledná směs byla míchána 1 h při teplotě místnosti. K získané reakční směsi byl přidán ethylacetát a voda a získaná organická vrstva byla promyta vodou a potom sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (4,0 g; 71 %).

-30CZ 295705 B6

NMR (CDC1₃): δ = 1,13 (3H, t), 1,74-1,78 (3H, m), 3,27 (2H, q), 3,43 (2H, t), 3,57 (2H, bs), 5,15 (2H, s), 7,27-7,39 (5H, m) (5) Syntéza N-ethyl-3-benzyloxykarbonylamino-l-tosyloxypropanu

N-ethyl-3-benzyloxykarbonylamino-l-propan (4,0 g) byl rozpuštěn v methylenchloridu (20 ml) a k výslednému roztoku byl přidán pyridin (1,8 ml) a tosylchlorid (3,9 g). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2 dny. K získanému roztoku byl přidán ethylacetát a voda a organická vrstva byla promyta vodným roztokem hydrogensíranu draselného a sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (4,4 g; 69 %).

NMR (CDC1₃): δ = 1,08 (3H, t), 1,90 (3H, s), 2,44 (3H, s), 3,19-3,30 (4H, m), 4,05 (2H, bs), 5,15 (2H, s), 7,15-7,34 (7H, m), 7,76 (2H, m) (6) Syntéza N-ethyl-3-benzyloxykarbonylamino-l-jodpropanu

N-ethyl-3-benzyloxykarbonylamino-l-tosyloxypropan (1,02 g) byl rozpuštěn v acetonu (20 ml) a k výslednému roztoku byl přidán jodid sodný (0,80 g). Výsledná směs byla míchána při teplotě 45 °C 2 h. K získanému reakčnímu roztoku byl přidán ethylacetát a voda a oddělená organická vrstva byla promyta vodou a potom sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (0,69 g; 76 %).

NMR(CDC1₃): δ = 1,33 (3H, t), 2,10 (3H, bs), 3,14 (2H, m), 3,33 (4H, t), 5,12 (2H, s), 7,28-7,40 (7H, m), 7,76 (2H, m) (7) syntéza cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((C₂H₅)N(Cbz) CH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac]

Látka PF 1022 E (412 mg) byla rozpuštěna ve směsi DMF (5,5 ml) a acetonu (16 ml) a k výslednému roztoku byl přidán N-ethyl-3-benzyloxykarbonylamino-l-jodpropan (530 mg) získaný v předchozím postupu (6) stejně jako uhličitan česný (400 mg) a jodid sodný (56 mg). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 7 dnů. K získanému reakčnímu roztoku byl přidán ethylacetát a voda. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (401 g; 77 %).

NMR (CDC1₃): δ = 0,82-1,04 (27H, m, δ -CH₃ (MeLeu), CH₃CH₂N),

1,31-1,81 (18H, m, β -CH₂, γ-CH(MeLeu), CH₃(Lac)),

2,03 (2H, m, NCH₂CILCH₂O), 2,71-3,15 (16H, m, NMe(MeLeu), β -CH₂(PhLac)), 3,32 (2H, m, CH₃CH₂NEt),

3,43 (2H, t, NCH₂CH.CHoO), 3,91 (2H, m, NCTLCH_?CH₂O).

4,44-5,68 (10H, m, CH₂(Cbz), a -CH),

6,76-6,80 (2H, m, aromatický((C₂H₅)N(Cbz)CH₂CH₂CH₂O)PhLac)),

7,06-7,38 (12H, m, aromatický(PhLac, (C₂H₅)N(Cbz)CH₂CH₂CH₂O) PhLac)) MS(FAB): 1184 (M+l) (8) Syntéza cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((C₂H₅)₂NCH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-274)

Cyklo [MeLeu-Lac-MeLeu-((C₂H₅)N(Cbz)CH₂CH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac) (401 mg) získaný ve výše popsaném kroku (7) byl rozpuštěn v ethanolu (6 ml), a k výslednému roztoku byl přidán 10% Pd/uhlík (51 mg). Získaná směs byla míchána v atmosféře vodíku 17 h při teplotě místnosti. Po oddělení katalyzátoru z reakčního roztoku filtrací bylo z roztoku odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl rozpuštěn v ethanolu (5 ml). K výslednému roztoku byl přidán 10% Pd/uhlík (38 mg). Získaná směs byla ochlazena ledem, byl přidán acetaldehyd (5 ml), výsledná směs byla opět míchána v atmosféře vodíku při teplotě přes noc. Katalyzátor byl odstraněn

-31 CZ 295705 B6 z reakčního roztoku filtrací a rozpouštědlo bylo odpařeno. Zbytek byl čištěn chromatografíi na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (240 mg; 73 %).

[a]_D = -84,9° (c = 0,11, MeOH),

NMR(CDC1₃): δ = 0,75-1,08 (,30H, m, δ -CH₃(MeLeu), CH₃CH,N).

1,31-1,77 (18H, m, β -CH₂, γ-CH(MeLeu), CH₃(Lac)),

1,92 (2H, m, NCH₂CH₂CH,O). 2,49-3,15 (22H, m, NMe(MeLeu), β -CH₂(PhLac, (C₂H₅)₂NCH₂CH₂CH₂O)PhLac),

CHjCHjN, NCH₂CH₂CH₂O),

3,98 (2H, m, NCH₂CH₂CH2O), 4,44-5,68 (8H, m, a -CH), 6,78-6,84 (2H, m, aromatický ((C₂H₅)₂NCH₂CH₂CH₂O)PhLac)) 7,10-7,31 (7H, m, aromatický(PhLac,(C₂H₅)₂N(Cbz)CH₂CH₂CH₂O) PhLac)) MS(FAB): 1079 (M+l)

Příklad 16 Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((S)-pyrrolidinyl-2-methoxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-302) (1) Syntéza N-Boc-(S)-pyrrolidin-2-methanolu (S)-Pyrrolidin-2-methanol (0,99 ml) byl rozpuštěn v H₂0 (10 ml), a k výslednému roztoku byl přidán triethylamin (4,20 ml) a reagencie DiBoc (2,40 g). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 16 h. K výslednému reakčnímu roztoku byl po zakoncentrování přidán ethylacetát. Získaná směs byla promyta 5% vodným roztokem kyseliny citrónové, sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a potom zakoncentrována pro odstranění rozpouštědla. Zbytek byl čištěn chromatografíi na koloně silikagelu za získání vnázvu uvedené sloučeniny (1,625 g; 80,8 %).

(2) Syntéza cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(N-Boc-(S)-pyrrolidinyl-2-methoxy)PhLac-MeLeuLac-MeLeu-PhLac]

N-Boc-(S)-pyrrolidin-2-methanol (522 mg) získaný ve výše popsaném krou (1) byl rozpouštěn v THF (5 ml), a k výslednému roztoku byl přidán DEAD (16 ml) a trifenylfosfin (271 mg). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 30 min. Potom byla do směsi přidána látka PF1022 E (500 mg) a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Potom byl přidán opět DEAD (0,16 ml) a trifenylfosfin (271 mg) a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 10 dnů. Získaný reakční roztok byl zakoncentrován a ke zbytku byl přidán ethylacetát a voda. Oddělená organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem hořečnatým a potom zakoncentrována pro odstranění rozpouštědla. Zbytek byl čištěn chromatografíi na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (386 mg; 64,8 %).

(3) Syntéza cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((S)-pyrrolidinyl-2-methoxy)-PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac]

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(N-Boc-(S)-pyrrolidinyl-2-methoxy)-PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac] (386 mg) získaný ve výše popsaném kroku (2) byl rozpuštěn v methylenchloridu (4 ml), a k výslednému roztoku byla přidána TFA (0,4 ml) za chlazení ledem. Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 3 h. Takto získaný reakční roztok byl zkoncentrován a ke zbytku byl přidán ethylacetát a voda. Získaná organická vrstva byla promyta vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom sušena nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo z roztoku odstraněno odpařením a zbytek byl čištěn chromatografíi na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (182 mg; 51 %).

[a]_D = -80,0° (c = 0,11, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,80-1,05 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu)),

1,36-2,01 (22H, m, β -CH₃(Lac), β -CH₂(MeLeu),

-32CZ 295705 B6 γ -CH(MeLeu), pyrrolidinyl-H),

2,75-3,15 (19H, m, N-Me(MeLeu), β -CH₂(PhLac), pyrrolidinyl-H), 3,65-3,71, 3,97, 4,44, 5,09, 5,31-5,67 (11H, m, a -CH(MeLeu, Lac, PhLac), OCH₂, NH),

6,81-6,85 (2H, m, aromatický, 7,12-7,27 (7H, m, aromatický)

MS(FAB): 1048 (M+l)

Příklad 17

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(imidazolyl-4-methoxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (látka PF1022-304) (1) Syntéza N-Boc-4-(hydroxymethyl)-imidazolu

4-(Hydroxymethyl)-imidazolhydrochlorid (955 mg) byl rozpuštěn ve směsi 1,4-dioxanu (10 ml) a vody (10 ml), a k výslednému roztoku byl přidán triethylamin (3,1 ml) a reagencie DiBoc (1,86 g). Výsledná směs byla míchána 4 h při teplotě místnosti. Po odstranění rozpouštědla z výsledného reakčního roztoku odpařením byl ke zbytku přidán ethylacetát a 5% kyselina octová. Získaná organická vrstva byla dehydratována bezvodým síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (560 mg; 39,8 %).

(2) Syntéza cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(N-Boc-imidazolyl-4-methoxy)PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac]

Látka PF 1022 E (200 mg) byla rozpuštěna v THF (2 ml), a k výslednému roztoku byl přidán DEAD (65 μΐ), trifenylfosfin (108 mg) a N-Boc-4-(hydroxymethyl)imidazol (205 mg). Získaná směs byla míchána 2 h při teplotě místnosti. Po zakoncentrování reakčního roztoku byl ke koncentrátu přidán ethylacetátu a nerozpustný vytvořený materiál byl odstraněn filtrací. Filtrát byl promyt vodou a dehydratován bezvodým síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (100 mg; 46,3 %).

(3) Syntéza cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(imidazolyl-4-methoxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac]

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(N-Boc-imidazolyl-4-methoxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac] (110 mg) získaný v kroku (2) výše byl rozpuštěn v methylenchloridu (1 ml), a k výslednému roztoku byla přidána TFA (0,1 ml) za chlazení ledem. Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 1,5 h pro uskutečnění eliminace skupiny chránící aminovou skupinu. Potom byl získán reakční roztok zakoncentrován a ke zbytku byl přidán ethylacetát a vodný nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného. Získaná organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny z tohoto příkladu 17 (61,4 mg; 61,2%).

[a]_D = -80,0° (c = 0,17, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ = 0,82-1,05 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu)),

1,26-1,78 (18H, m, β -CH₂(Lac), β -CH₂(MeLeu), γ -CH(MeLeu)),

2,72-3,16 (16H, m, N-Me(MeLeu), β -CH₂(PhLac),

5,03 (2H, s, OCH₂),

4,48, 5,06, 5,34-5,70, (8H, m, a -H(MeLeu, Lac, PhLac),

6,88-6,94 (2H, m, aromatický), 7,10-7,27 (7H, m, aromatický)

MS (FAB): 1045 (M+l)

-33CZ 295705 B6

Příklad 18 Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(H₂NSCCH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NCCH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (2,07 g) získaný v příkladu 4 a O,O'-dieťhyldithiofosfát (3,0 ml) byly rozpuštěny ve směsi vody (0,35 ml), chloroformu (2 ml) a toluenu (2 ml), a směs byla potom zahřívána 30 min pod zpětným chladičem. Získaný reakční roztok byl ponechán ochladit při teplotě místnosti a potom byl zředěn ethylacetátem (100 ml), promyt vodou (50 ml) a potom vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Promytý roztok byl sušen nad bezvodým síranem sodným. Z roztoku bylo za sníženého tlaku odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-ethylacetát = 5:1 ~ 1:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (1,67 g) jako bílého prášku.

Příklad 19

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-imidazolylmethoxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (látka

PF1022-305)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(H₂NSCCH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (403 mg) získaný v příkladu 18 výše byl rozpuštěn v acetonu (20 ml), a k výslednému roztoku byl přidán methyljodid (0,25 ml), a výsledná směs byla míchána při 30 °C 2 dny. Výsledná reakční směs byla zakoncentrována a zbytek byl rozpouštěn v benzenu (4 ml). K výslednému roztoku byl přidán dimethylacetal aminoacetaldehydu (40 μΐ), a získaná směs byla míchána při 80 °C 90 min. Potom byla přidána 6N kyselina chlorovodíková (4 ml) a reakční roztok byl míchán 1 h při 100 °C. Výsledná reakční směs byla ponechána ochladit na teplotu místnosti, byla zředěna ethylacetátem (50 ml), promyta směsí 2N NaOH (10 ml) a vodného nasyceného roztoku uhličitanu sodného (30 ml) a potom vodným nasycen roztokem chloridu sodného (30 ml) a dále sušena nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (s gradientovou eluci směsí chloroform-methanol = 100:1 ~ 30:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (231 mg) jako bílého prášku.

[a]_D = -94,2° (c = 0,12, MeOH)

Ή-NMR (CDC1₃): δ = 0,71-1,06 (27H, m), 1,18-1,82 (15H, m),

2,7-3,22 (16H, m), 4,46 (1H, m), 5,0-5,72 (9H, m),

6,85-6,94 (2H, m), 7,07 (2H, s), 7,1-7,34 (7H, m), 10,2 (1H, bs)

MS (FAB): 1045 (M+l)

Příklad 20 Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-thiazolylmethoxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny No. PF1022-306)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(H₂NCSCH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (280 mg) získaný v příkladu 18 byl rozpuštěn v toluenu (1,5 ml), a k získanému roztoku byl přidán diethylacetal bromacetaldehydu (0,5 ml) a koncentrovaná kyselina sírová (2 kapky). Výsledná směs byla míchána 30 min při 90 °C. Získaný reakční roztok byl ponechán ochladit na teplotu místnosti, potom byl zředěn ethylacetátem (30 ml), promyt vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (20 ml), a dále sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-ethylacetát = 4:1 ~ 2:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (86,9 mg), jako bílého prášku.

[a]_D = -101,7 (c = 0,11, MeOH)

Ή-NMR (CDCIj): δ = 0,74-1,08 (27H, m), 1,18-1,86 (15H, m),

2,7-3,22 (16H, m), 4,47 (1H, m), 5,02-5,72 (9H, m),

-34CZ 295705 B6

6,88-6,98 (2H, m), 7,14-7,34 (7H, m), 7,37 (IH, d, J=3,2 Hz),

7,80 (IH, d, J=3,2Hz)

MS(FAB): 1062 (M+l)

Příklad 21

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-methyl-l,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF1022-309)

Látka PF 1022 E (300 mg) byla rozpouštěna v acetonu 9 ml), a k výslednému roztoku byl přidán uhličitan draselný (21 mg), jodid sodný (232 mg) a 3-chlormethan-5-methyl-l,2,4-oxadiazol (268 mg). Výsledný roztok byl míchán při teplotě 40 °C 8 h. Po odpaření rozpouštědla z reakčního roztoku byl ke zbytku přidán ethylacetát a voda. Oddělená organická vrstva byla sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (260 mg; 79 %).

[a]_D = -89,6° (c = 0,28, MeOH)

NMR (CDClj): δ = 0,83-1,04 (24H, m, δ -CH₃ (MeLeu))

1,26-1,76 (18H, m, β -CH₃ (Lac), β -CH₂ (MeLeu), γ -CH(MeLeu)),

2,67 (3H, s, 5-Me(oxazolyl)), 2,72-3,13 (16H, m, N-Me(MeLeu), β -CH₂ (PhLac)), 4,50-5,67 (8H, m, a -CH (MeLeu, Lac, PhLac)),

6,93-6,95 (2H, m, aromatický), 7,16-7,26 (7H, m, aromatický) MS (FAB): 1061 (M+l)

Příklad 22

Cyklo [MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-izobutyl-1,2,4—oxadiazoly)methoxy)-PhLac-MeLeu-LacMeLue-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-310)

Látka PF 1022 E (509 mg) byla rozpuštěna ve směsi DMF (4 ml) a acetonu (13 ml), a k výslednému roztoku byl přidán 3-chlormethyl-5-izobutyl-l,2,4-oxadiazol (512 mg) a uhličitan česný (522 mg) a získaná směs byla míchána 5 dnů při teplotě místnosti. K získané směsi byl přidán ethylacetát a voda. Organická vrstva byla oddělena a promyta vodou a sušena nad síranem hořečnatým. Z roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (465 mg; 81 %).

[a]_D = -88,2° (c = 0,11, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ 0,82-1,04 (30H, m, δ -CH₃(MeLeu), a -CH₃(Lac),

CH(CH₃)CH₂CH₃ (izobutyl)),

1,35-1,90 (20H, m, β -CH₂, γ -CH(MeLeu), CH₃(Lac), CH(CH₃)CH,CH₃ (izobutyl)),

2,63-3,15 (18H, m, NMe(MeLeu), β -CH₂(PhLac,3-(5-izobutyl-l,2,4-oxadiazolylmethoxy)PhLac),

4,40-5,67 (8H, m, a-CH),

6,90-6,96 (2H, m, aromatický(3-(5-izobutyl-l,2,4-oxadiazolylmethoxy)-PhLac),

7,14-7,28 (7H, m, aromatický(PhLac, 3-(5-izobutyl-l,2,4-oxadiazolylmethoxy)PhLac) MS(FAB): 1103 (M+l)

Příklad 23

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-(2,6-difluorfenyl)-l,2,4—oxadiazolyl)methoxy)PhLacMeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-311)

Směs látky PF1022 E (250 mg), uhličitanu draselného (108 mg), jodidu sodného (47,0 mg), 3-(5-(2,6-difluorfenyl)-l,2,4-oxadiazolyl)methylchloridu (210 mg) a acetonu (5 ml) byla míchána při teplotě místnosti 2 dny. Získaný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (50 ml),

-35CZ 295705 B6 promyt vodou (30 ml) obsahující 2N kyselinu chlorovodíkovou (1 ml) a potom vodným nasyceným roztokem chloridu sodného (30 ml) a dále sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl zakoncentrován na sníženého tlaku a získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-ethylacetát = 8:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (270 mg) jako bílého prášku.

[cc]_D = -88,4° (c = 0,11, MeOH) ‘H-NMRÍCDCh): δ = 0,75-1,1 (27H, m), 1,2-1,82 (15H, m),

2,7-3,22 (16H, m), 4,48 (1H, m), 5,06-5,74 (9H, m), 6,95-7,38 (11H, m), 7,59 (1H, tt, J=5,9, 8,2Hz) MS(FAB): 11,59 (M+l)

Příklad 24

Cyldo[MeLeu-Lac-MeLeu-(furfuryloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF1022-312)

Látka PF1022 E (306 mg) byla rozpuštěna v THF (6 ml), a k výslednému roztoku byl přidán za chlazení ledem, trifenylfosfín (83,2 mg), DEAD (0,049 ml) a furfurylalkohol (0,027 ml). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2,5 h. Opět za chlazení ledem byly k výslednému reakčnímu roztoku přidány ve výše uvedených množstvích trifenylfosfín, DEAD a furfurylalkohol, a směs byla dále míchána při teplotě místnosti 2 h. Potom byl k takto získané reakční směsi přidán izopropylether a ethylacetát a takto vytvořený nerozpustný oxid trifenylfosfinu byl odfiltrován. Z roztoku bylo za sníženého tlaku odpařeno rozpouštědlo. Zbytek byl čištěn preparativní chromatografií s reverzní fází ODS, za získání v názvu uvedené sloučenina (168 mg; 50,6 %) jako bílého prášku.

[cc]d = -92,6° (c = 0,11, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,80-1,05 (m, 27H, (27H, m, δ -CH₃(Leu), β -CH₃ (Lac)), 1,39 (3H, m, β -CH3 (Lac)),

1,47-1,76 (12H, m, β -CH₂, γ-CH(Leu)), 2,73-3,02 (12H, m, NMe),

3,055-3,15 (4H, m, β -CH₂(PhLac), 4,47-5,68 (8H, m, a -CH),

4,97 (2H, s, OCH₂ (furfuryl)),

6,40 (2H, m, C=CH-CH=CH-O(furfuryl)),

6,89, 7,15 (vždy 2H, vždy d, vždy J=0,77, aromatický (furfuryloxy PhLac)), 7,27 (5H, m, aromatický (PhLac))

7,44 (1H, d, J=0,14, C=CH-CH=CH-O)

MS(FAB): 105 (M+l)

Příklad 25

Cyklo [MeLeu-Lac-MeLeu-(tetrahydrofurfuryloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-313)

Látka PF 1022 E (202 mg) byla rozpuštěna v THF (4 ml), a k výslednému roztoku byl přidán za chlazení ledem, trifenylfosfín (164 mg) DEAD (0,097 ml) a tetrahydrofurfurylalkohol (0,12 ml). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 94 h a potom při 50 °C 23 h. K výslednému reakčnímu roztoku byl přidán izopropylether a ethylacetát a vytvořený nerozpustný oxid trifenylfosfinu byl z roztoku odstraněn filtrací. Rozpouštědlo bylo z roztoku odstraněno za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn preparativní chromatografíí s reverzní fází ODS, za získání v názvu uvedené sloučeniny (110 mg; 45,6 %) jako bílého prášku.

[cc]_D = -96,0° (c = 0,10, MeOH),

NMR (CDClj): δ = 0,80-1,04 (m, 27H, (27H, m, δ -CH₃(Leu), β -CH₃ (Lac)), 1,39 (3H, m, β-αι₃^)),

-36CZ 295705 B6

1,26-2,14 (14H, m, CHOCH₂CH₂CH,(tetrahvdrofurfuryl), β -CH₂, γ -CH(Leu)), 2,73-2,82 (12H, m, NMe),

3,01^4,33 (11H, m, β -CH₂ (PhLac, tetrahydrofurfuryloxyPhLac), OCH₂, CHOCH₂CHCH; (tetrahydrofurfuryl)),

4,47-5,68 (8H, m, a -CH), 6,83, 7,12 (vždy 2H, vždy d, vždy J=0,77, aromatický (tetrahydrofurfuryloxy PhLac)),

7,27 (5H, m, aromatický(PhLac))

MS(FAB): 1049 (M+l)

Příklad 26

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-pikolyloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-314)

Látka PF 1022 E (200 mg) byla rozpuštěna v acetonu (4 ml), a k výslednému roztoku byl přidán uhličitan česný (169 ml), roztok 2-pikolylchloridu (532 mg) v dimethylformamidu (9 ml) a jodid sodný (30 mg). Výsledná směs byla vařena 5 h pod zpětným chladičem a potom dále míchána při teplotě místnosti 15,5 h. K výslednému reakčnímu roztoku byl přidán ethylacetát a získaná směs byla promyta vodou, 5% vodným roztokem hydrogensíranu draselného a 7% vodným roztokem chloridu sodného (postupně vždy 20 ml) a sušena nad bezvodým síranem sodným. Po odstranění rozpouštědla u usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku, byl zbytek čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí w-hexan-ethylacetát = 3:2 ~ 2:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (167 mg; 76,5 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -87,2° (c = 0,11, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,80-1,04 (27H, m, δ -CH₃(Leu), β -CH₃(Lac)),

1,38 (3H, m, β -CH₃(Lac)), 1,47-1,76 (12H, m, β -CH₂, γ -CH(Leu)),

2,72-3,01 (12H, m, NMe), 3,05-3,16 (4H, m, β -CH₂(PhLac)), 4,45-5,67 (8H, m, a -CH), 5,17 (2H, s, OCH₂(2-pikolyloxy)),

6,91, 7,16 (vždy 2H, vždy d, vždy F=0,84, aromaticky ((2-píkolyloxy)PhLac)).

7,25 (6H, m, aromatický (PhLac, 2—pikolyl)),

7,51 (1H, d, J=0,76, aromatický (2—pikolyl)),

7,70 (1H, t, J=0,76, aromatický (2—pikolyl)),

8,60 (d, 1H, J=0,46, aromatický (2—pikolyl))

MS(FAB): 1056 (M+l)

Příklad 27

Cyklo [MeLeu-Lac-MeLeu-(3-pikolyloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-315)

Ke směsi methylenchloridu (30 ml) a vodného nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (30 ml), byl přidán hydrochlorid 3-pikolylchloridu (1,0 g) a byly odděleny vodná a organická vrstva. Vytvořená organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným a potom koncentrována za sníženého tlaku. K výslednému zbytku byla přidána látka PF 1022 E (501 mg), uhličitan česný (676 mg), jodid sodný (77,5 mg), aceton (8 ml) a DMF (4 ml). Výsledná směs byla míchána při 70 °C 18 h a potom při 90 °C 4,5 h. Získaný reakční roztok byl ponechán ochladit na teplotu místnosti a potom byl zředěn ethylacetátem (50 ml), promyt vodou (40 ml), 0,lN kyselinou chlorovodíkovou (40 ml) a nasyceným roztokem chloridu sodného (postupně vždy 40 ml), a dále sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí w-hexanethylacetát -1 : 1 ~ ethylacetát), za získání v názvu uvedené sloučeniny (137 mg).

[a]_D = -84,9° (c = 0,12, MeOH) ^]H-NMR(CDC13): δ = 0,72-1,08 (27H, m), 1,2-1,86 (15H, m),

-37CZ 295705 B6

2,7-3,22 (16H, m), 4,48 (1H, m), 5,0-5,73 (9H, m),

6,86-6,94 (2H, m), 7,14-7,36 (10H, m), 7,76 (1H, d, J=7,6 Hz),

8,59 (1H, d, J = 3,7 Hz, 8,68 (1H, s),

MS(FAB): 1056 (M+l)

Příklad 28

Cyklo [MeLeu-Lac-MeLeu-(4-pikolyloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-316)

Ke směsi methylenchloridu (30 ml) a nasycenému roztoku hydrogenuhličitanu sodného (30 ml), byl přidán 4-pikolylchlorid hydrochlorid (775 g) a byly odděleny vodná a organická vrstva. Takto získaná organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným a potom koncentrována za sníženého tlaku. K výslednému zbytku byla přidána látka P1022 E (251 mg), uhličitan česný (220 mg), jodid sodný (38,1 mg) aceton (15 ml) a DMF (5 ml). Výsledná směs byla míchána při 80 °C 8,5 h a potom při teplotě místnosti přes noc. Získaný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (50 ml), promyt vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml), 0,2N kyselinou chlorovodíkovou (40 ml) a vodným nasyceným roztokem chloridu sodného (40 ml), vždy postupně po sobě, a sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn a chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí «-hexan-ethylacetát - 2 : 1 ~ ethylacetát), za získání v názvu uvedené sloučeniny (70,4 mg) jako bílého prášku.

[a]_D = -84,4° (c = 0,11, MeOH)

Ή-NMR (CDClj): δ = 0,76-1,06 (27H, m), 1,2-1,82 (15H, m),

2,72-3,22 (16H, m), 4,48 (1H, m), 5,02-5,72 (9H, m),

6,84-6,93 (2H, m), 7,12-7,35 (7H, m), 7,35 (2H, d, J=5,4Hz),

8,62 (2H, d, J=5,4 Hz) MS(FAB): 1056 (M)

Příklad 29

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLue-(6-chloro-3-pikolyloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č PF 1022-317)

Látka PF1022 E (178 mg) byla rozpuštěna ve směsi DMF (1,5 ml) a acetonu (5 ml), a k výslednému roztoku byl přidán 2-chloro-4-chlormethylpyridin (97 mg) a uhličitan česný (194 mg). Výsledná směs byla míchána pod zpětným chladičem 4 h. K získanému reakčnímu roztoku byl přidán ethylacetát a voda a takto oddělená organická vrstva byla promyta vodou a sušena nad síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením, a zbytek byl čištěn chromatografíí na silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (162 mg; 76 %).

[a]_D = -91,1° (c = 0,09, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,72-1,07 (27H, m, δ -CH₃(MeLeu), β -CH₃(Lac)),

1,23-1,81 (15H, β -CH₂, γ -CH(MeLeu), β -CH₃ (Lac)),

2,48-3,17 (16H, m, NMe(MeLeu), OCH₂(pikolyl), β -CH₂(PhLac, (6-chloro-3-pikolyloxy)PhLac),

4,45-5,69 (8H, m, a-CH),

6,78-6,84 (2H, m, aromatický ((6-chloro-3-pikolvloxy)PhLac))

7,10-7,31 (7H, m, aromatický (PhLac, (6-chloro-3-pikolvloxy)PhLac),

8,38 (1H, m, H-2(pikolyl), 8,40 (2H, dd, H-4,5(pikolyl))

Příklad 30

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-(l-N-methyl-l,4,5,6-tetrahydropyrimidyl)methoxy)PhLacMeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-318)

-38 CZ 295705 B6

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(H₂NCSCH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (403 mg) byl rozpuštěn v acetonu (20 ml), a k výslednému roztoku byl přidán methyljodid (0,25 ml). Výsledná směs byla míchána při 30 °C po dobu 24 h a potom při 40 °C 1 den. Získaný reakční roztok byl zakoncentrován a zbytek byl rozpuštěn v benzenu (8 ml), a k tomuto roztoku byl přidán N-methyl-l,3-propandiamin (41 μΐ) a 10% methanolový roztok chlorovodíku (0,15 ml). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 1 den. Potom byl přidán ethanol (5 ml) a směs byla dále míchána 1 h při 80 °C. Vytvořený reakční roztok byl ponechán ochladit na teplotu místnosti, potom byl zředěn ethylacetátem (50 ml), postupně promyt vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a vodným nasyceným roztokem chloridu sodného (30 ml), potom byl sušen nad bezvodým síranem sodným a usušen roztok byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu s eluci směsí chloroform-methanol = 30:1 ~ 10:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (133 mg).

[a]_D = -72,1° (c = 0,01, MeOH)

Ή-NMR (CDC1₃): δ = 0,7-2,0 (46H, m), 2,76-3,60 (23H, m),

4,47 (1H, m), 5,0-5,72 (9H, m), 7,10-7,36 (9H, m)

MS(FAB): 1075 (M+l)

Příklad 31

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-izopropyl-l,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF1022-341)

Látka PF 1022 E (300 mg) byla rozpuštěna v acetonu (6 ml), a k výslednému roztoku byl přidán uhličitan draselný (215 mg), jodid sodný (233 mg) a 3-chlormethyl-5-izopropyl-l,2,4-oxadiazol (250 mg). Výsledná směs byla míchána při 40 °C 30 h. Po odstranění rozpouštědla z výsledného reakčního roztoku odpařením byl ke zbytku přidán ethylacetát a voda. Takto oddělená organická vrstva byla sušena nad síranem sodným. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením, a zbytek byl čištěn chromatografíí na silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (241 mg; 71 %).

[oc]_D = -88,8° (c = 0,12, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ = 0,83-1,04 (24H, m, δ -CH₃(MeLeu)),

1,43 (6H, d, J=7,0, CH₃(izopropyl)),

1,36-1,76 (18H, m, β -CH₃(Lac), β -CH₂(MeLeuz), γ -CH(MeLeu)),

2,72-3,31 (16H, m, N-Me(MeLeu), β -CH₂(PhLac)),

3,26 (1H m, CH(izopropyl)),

4,50-5,67 (8H, m, a -CH(MeLeu,Lac,PhLac), 5,12 (2H, s, OCH₂),

6,93-6,96 (2H, m, aromatický), 7,15-7,29 (7H, m, aromatický) MS(FAB): 1089 (M+l)

Příklad 32

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-cyklohexyl-l,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLac-MeLeu-LacMeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-343)

Látka PF 1022 E (300 mg) byla rozpuštěna v acetonu (6 ml), a k výslednému roztoku byl přidán uhličitan draselný (214 mg), jodid sodný (233mg) a 3-chlormethyl-5-cyklohexyl-l,2,4-oxadiazol (312 mg). Výsledná směs byla míchána při 40 °C 20 h. Po odstranění rozpouštědla z reakčního roztoku odpařením a byl ke zbytku přidán ethylacetát a voda. Takto oddělená organická vrstva byla sušena nad síranem sodným. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením, a zbytek byl čištěn chromatografíí na silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (260 mg; 74 %).

[a]_D = -81,0° (c = 0,11, MeOH),

NMR (CDCI3): δ = 0,83-1,05 (24H, m, δ -CH₃(MeLeu)),

-39CZ 295705 B6

1,26-2,13 (28H, m, p-CH₃(Lac), β -CH₂(MeLeu), γ-CH(MeLeu), (CH₂)₅(cyklohexyl)), 2,72-3,15 (17H, m, N-Me(MeLeu), β -CH₂(PhLac), CH(cyklohexyl)),

4,50-5,67 (8H, m, a -CH(MeLeu, Lac, PhLac), 5,12 (2H, s, OCH₂),

6,93-6,96 (2H, m, aromatický), 7,15-7,29 (7H, m, aromatický) MS(FAB): 1129 (M+l)

Příklad 33

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NCCH₂)PhLac]₂

Směs látky PF 1022 H (201 mg), uhličitanu draselného (144 mg), bromacetonitrilu (0,15 ml) a acetonu (5 ml) byla míchána při teplotě místnosti 2,5 h. Takto získaný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (25 ml), promyt vodou (10 ml) obsahující 2N kyselinu chlorovodíkovou (2 ml), a dále sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku, a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-ethylacetát = 4:1 ~ 1:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (210 mg) jako bílého prášku

Ή-NMR (CD₃OD): δ = 0,78-1,06 (27H, m), 1,1-1,9 (15H, m),

2,78-3,22 (16H, m), 4,94 (IH, m), 5,13-5,83 (7H, m),

6,95-7,04 (4H, m), 7,25-7,35 (4H, m).

Příklad 34

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(BocNHCH₂CH₂O)PhLac]₂

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NCCH₂O)PhLac]₂ (9,5 g) získaný v příkladu 33 byl rozpuštěn v ethanolu (100 ml), a k roztoku byl přidán 10% Pd/uhlík (1,0 g) a koncentrovaná kyselina chlorovodíková (1,5 ml). Výsledná směs byla podrobena redukci vodíkem za středního tlaku v Parrově redukční nádobě po dobu 15 h (vytváření aminové skupiny redukcí kyanoskupiny). Po odstranění katalyzátoru z reakčního roztoku filtrací bylo rozpuštěno odpařeno. Výsledný zbytek byl rozpuštěn v směsi dioxanu (200 ml) a vody (200 ml). K výslednému roztoku byla přidána reagencie DiBoc (di-Z-butyldikarboxylát) (15 g) a triethylamin (6 ml). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 15 h. K takto vytvořené reakční směsi byl přidán ethylacetát a voda. Takto oddělená organická vrstva byla promyta vodou a sušena nad síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením, a zbytek byl čištěn chromatografíí na silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (3,67 g; 34 %).

NMR(CDC1₃): δ = 0,79-1,04 (27H, δ -CH₃(MeLeu), β -CH₃(Lac)), 1,31-1,77 (33H, m, β -CH₂, γ -CH(MeLeu), β -CH₃(Lac), BOcNH),

2,73-3,08 (16H, m, NMe(MeLue), β -CH₂ ((BocNHCH₂CH₂O)PhLac)), 3,51 (2H, m, NHCH₂CH,O). 3,97 (2H, t, NHCH,CH₂O).

4,44-5,68 (8H, m, a -CH), 6,78-6,84 (4H, m, aromatický), 7,10-7,31 (4H, m, aromatický)

Příklad 35

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NCCH₂O)PhLac]₂

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NCCH₂O)PhLac]₂ (2,02 g) získaný v příkladu 33 byl rozpuštěn v ethanolu (50 ml), a k roztoku byla přidána koncentrovaná kyselina chlorovodíková (0,5 ml) a 10% Pd/uhlík (204 mg). Výsledná směs byla podrobena katalytické redukci v Parrově redukční nádobě (při tlaku 310 kPa) přes noc. Katalyzátor byl odstraněn za získaného reakčního roztoku filtrací a k filtrátu byla přidán chloroform (100 ml) a vodný nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (50 ml), a potom bylo provedeno oddělení vodné a organické vrstvy. Vodná vrstva byla

-40CZ 295705 B6 znovu extrahována chloroformem (50 ml). Organické vrstvy získané ze dvou extrakčních kroků byly spojeny a sušeny nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován dosucha za sníženého tlaku.

Surový produkt volné aminosloučeniny získaný v předcházejícím kroku (2,21 g) byl rozpuštěn v methylenchloridu (50 ml), a k roztoku byl přidán za chlazení ledem triethylamin (0,8 ml) a benzyloxykarbonylchlorid (0,7 ml): Výsledná směs byla míchána za chlazení ledem 2,5 h. Získaný reakční roztok byl zředěn chloroformem (50 ml), promyt 10% roztokem chloridu sodného a byl sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí ethylacetát-hexan = 1:2 ~ 2:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (693 mg) jako bílého prášku.

‘H-NMR (CD3OD): δ = 0,75-1,05 (27H, m), 1,38 (3H, t, J=7,0 Hz),

1,3-2,0 (12H, m), 2,81, 2,87, 2,90, 2,99 (vždy 3H, vždy s), 2,9-3,2 (4H, m), 3,49 (4H, t, J=5,5 Hz), 3,99 (4H, t, J=5,5 Hz), 4,75 (1H, dd, J=4,6, 10,8 Hz), 5,07 (4H, s), 5,1-5,8 (7H, m), 6,87 (4H, d, J=8,3Hz), 7,19 (4H, d, J=8,3 Hz), 7,2-7,4 (10H, m) MS(SIMS): 1335 (M+l)

Příklad 36

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((CH₃)2NCH2CH₂O)PhLac]2 (kód sloučeniny č. PF 1022-262)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(CbzNHCH₂CH₂O)PhLac]₂ (300 mg) získaný v příkladu 35 byl rozpuštěn v ethanolu (5 ml), a k roztoku byla přidána IN kyselina chlorovodíková (0,66 ml) a 10% Pd/uhlík (30 mg). Výsledná směs byla míchána v atmosféře vodku při atmosférickém tlaku při teplotě místnosti 2 h. Po přidání vodného 37% roztoku formaldehydu (0,71 ml) k výslednému reakčnímu roztoku byl roztok ponechán stát přes noc a potom byl opět přidán vodný 37% roztok formaldehydu (3,6 ml). Výsledná směs byla přes noc míchána při teplotě místnosti. Ze získaného reakčního roztoku byl odstraněn katalyzátor filtrací a rozpouštědlo bylo z roztoku odstraněno odpařením. K výslednému zbytku byl přidán ethylacetát a vodný nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného a byly odděleny vodná a organická vrstva. Vytvořená organická vrstva byla oddělena dehydratována bezvodým síranem hořečnatým. Z usušeného roztoku bylo odpařeno rozpouštědlo a zbytek byl čištěn chromatografíí na silikagelu za získání v názvu uvedené sloučeniny (118 mg; 48 %).

[a]_D = -83,3° (c = 0,21, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ = 0,80-1,05 (24H, m, δ -CH₃(MeLeu)),

1,26-2,02 (30H, m, β -CH₃(Lac), β -CH₂(MeLeu), γ -CH(MeLeu), (CH₃)₂N), 2,74-3,06 (20H, m, N-Me(MeLeu), β -CH₂(PhLac), OCH₂CH₂N), 4,50, 5,04-5,65 (8H, m, a -H(MeLeu, Lac, PhLac),

6,78-6,90 (2H, m, aromatický), 7,16-7,18 (7H, m, aromatický) MS(SIMS): 1123 (M+l)

Příklad 37

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((C₂H5)₂NHCH₂CH₂O)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-263)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(CbzNHCH₂CH₂O)PhLac]₂ (312,1 mg) a 10% Pd/uhlík (33,7 mg) byly smí seny s ethanolem (5 ml) obsahujícím 2N kyselinu chlorovodíkovou (0,3 ml) a směs byla míchána v atmosféře vodíku 5 h. K výslednému reakčnímu roztoku byl přidáván po kapkách za chlazení ledem 90% vodný acetaldehyd (6 ml). Výsledná směs byla míchána přes noc za stejných redukčních podmínek jako výše a teplota byla pomalu zvyšována až na teplotu místnosti. Ze získaného reakčního roztoku byl odstraněn filtrací katalyzátor a získaný filtrát byl koncentrován

-41 CZ 295705 B6 za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn preparativní TLC (vyvíjení směsi chloroform-methanol = 20:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (204 mg) jako bílého prášku.

[a]_D = -88,0° (c = 0,22, MeOH) ’H-NMR(CDC1₃): δ = 0,78-1,10 (39H, m,), 1,2-1,84 (15H, m),

2,64 (8H, q, J=7,3 Hz), 2,7-3,14 (20H, m), 4,01 (4H, t, J=6,2 Hz),

4,47 (1H, m), 5,08 (1H, q, J=7,0Hz), 5,17 (1H, dd, J=5,4, 9,7Hz),

5,28-5,68 (5H, m), 6,81 (4H, d, J=8,5 Hz), 7,13 (4H, d, J=8,5 Hz), MS(SIMS): 1179 (M+l)

Příklad 38

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(MorCH₂CH2O)PhLac]2 (kód sloučeniny č. PF 1022-266)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(CbzNHCH2CH₂O)PhLac]2 (290 mg) byl smísen s ethanolem (5 ml) obsahujícím 2N kyselinu chlorovodíkovou (0,3 ml), a směs byla míchána v atmosféře vodíku v přítomnosti 10% Pd-uhlík (30 mg), 2,5 h. Z reakčního roztoku byl odstraněn katalyzátor filtrací a získaný filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku. Ke zbytku byl přidán uhličitan draselný (180 mg), jodid sodný (40 mg) a bis-trimethylether (0,07 ml). Výsledná směs byla rozpuštěna v DMF (5 ml), a byla míchána při 80 °C 5 h. Potom byl výsledný reakční roztok ponechán ochladit na teplotu místnosti a byla přidána voda (30 ml). Takto získaná směs byla dvakrát extrahována chloroformem (nejprve 50 ml a potom 20 ml chloroformu) a získané extrakty byly spojeny a sušeny nad bezvodým síranem sodným. Takto vysušený roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-methanol = 20:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (181 mg) jako bílého prášku.

[a]_D = -84,3° (c = 0,19, MeOH)

Ή-NMR (CDC1₃): δ = 0,70-1,10 (27H, m), 1,2-2,0 (15H, m),

2,57 (8H, t, J=4,5Hz), 2,7-3,15 (20H, m), 3,73 (8H, T, J=4,5 Hz), 4,07 (4H, t, J=5,6 Hz), 4,47 (1H, m), 5,07 (1H, q, J=7,0Hz),

5,18 (1H, dd, J=5,5, 10,0Hz), 5,30-5,66 (5H, m),

6,81 (4H, d, J=8,4Hz), 7,14 (4H, d, J=8,4 Hz)

MS(SIMS): 1207 (M+l)

Příklad 39

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-izobutyl-l ,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF1022-330)

Látka PF1022 H (500 mg) byla rozpuštěna v směsi acetonu (10 ml) a DMF (1 ml), a k roztoku byl přidán uhličitan draselný (352 mg), 3-chlormethyl-5-izobutyl-l,2,4-oxadiazol (442mg) a jodid sodný (382 mg). Výsledná směs byla ponechána reagovat při teplotě místnosti 24 h a potom při 50 °C 31 h. K výslednému reakčnímu roztoku byl přidán ethylacetát (50 ml) a voda (50 ml) a byly odděleny vodná a organická vrstva. Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku, a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform ethylacetát = 2:1 ~ 1:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (467 mg; 72,8 %) jako bílého prášku [a]_D = -78,1° (c = 0,11, MeOH)

NMR (CDCI3): δ = 0,80-1,05 (33H, m, δ -CH₃(MeLeu), β -CH₃(Lac),

ΟΗ(ΟΗ₃)ΟΗ₂ΟΗ3 (izobutyl)),

1,36-1,41 (9H, m, β -CH₃(Lac), CH(CH₃)CH₂CH₃ (izobutyl)),

1,49-2,01 (16H, m, β -CH₂, γ -CH(MeLeu), CH(CH₃)CH₂CH₃ (izobutyl)),

2,63-3,03 (12H, m, NMe), 4,45-5,62 (8H, m, a -CH),

5,13 (4H, s, OCH₂),

6,93, 7,16 (vždy 2H, vždy d, vždy J=0,77, aromatický),

-42CZ 295705 B6

6,94, 7,17 (vždy 2H, vždy d, vždy J=0,67, aromatický)

MS (FAB): 1257 (M+l)

Příklad 40

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-(2,6-difluorofenyl)-l,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-331)

Směs látky PF1022 H (251 mg), uhličitan draselný (171 mg), jodid sodný (103 mg), 3-(5-(2,6-difluorfenyl)-l,2,4oxadiazolyl)methylchlorid (358 mg) a aceton (6 ml) byla míchána při teplotě místnosti 64 h. Získaný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (50 ml), promyt vodou (30 ml) obsahující 2N kyselinu chlorovodíkovou (1 ml) a potom nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (30 ml), a potom byl sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku, a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (chloroform-ethylacetát = 10:1 ~ 1:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (311 mg).

[a]_D = -84,4° (c = 0,11, MeOH)

Ή-NMR (CDCls): δ = 0,70-1,08 (27H, m), 1,2-1,84 (15H, m),

2,7-3,2 (16H, m), 4,48 (1H, m), 5,02-5,72 (11H, m), 6,86-7,36 (12H, m), 7,58 (2H, 11, J=5,9, 8,2Hz) MS(FAB): 1369 (M+l)

Příklad 41

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(tetrahydrofurfuryloxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-333)

Látka PF1022 H (150 mg) byla rozpuštěna v THF (3 ml), a k roztoku byl přidán za chlazení ledem tetrahydrofurfurylalkohol (0,15 ml), trifenylfosfin (281 mg) a DEAD (0,17 ml). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 3,5 h a potom při 50 °C 3 h a nakonec při teplotě místnosti 16 h. Výsledný reakční roztok byl koncentrován za sníženého tlaku pro odstranění rozpouštědla. Ke zbytku byl přidán izopropylether pro vysrážení trifenylfosfínoxidu. Vysrážený materiál byl odstraněn filtrací a získaný filtrát byl za sníženého tlaku koncentrován pro odstranění rozpouštědla. Takto získaný zbytek byl čištěn kapalinovou chromatografíí s reverzní fází s použitím ODS za získání v názvu uvedené sloučeniny (62 mg; 35 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -91,6° (c = 0,11, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ = 0,80-1,46 (27H, m, δ -CH₃(Leu), β -CH₃(Lac)), 1,35-1,46 (3H, m, β -CH₃(Lac)),

1,49-2,11 (16H, m, tetrahydrofurfuryl-4-CH₂, β -CH₂, y-CH(Leu)), 2,73-3,02 (12H, m, NMe),

3,04-3,08 (4H, m, β -CH₂ (tetrahydrofurfuryloxy)PhLac)),

3,79-4,32 (14H, m, tetrahydrofurfuryl-2,3,5-CH₂, OCH?CH (tetrahydrofurfuryl)), 4,67-5,65 (8H, m,a-CH),

6.83, 7,12 (vždy 2H, vždy d, vždy J=0,77, aromatický (tetrahydrofurfuryloxyPhLac),

6.84, 7,13 (vždy 2H, vždy d, vždy J=0,67, aromatický tetrahydrofurfuryloxyPhLac)) MS(FAB): 1149(M+1)

Příklad 42

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-pikolyloxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-334)

Látka PF 1022 H (300 mg) byla rozpuštěna v acetonu (6 ml), a k roztoku byl přidán roztok 2-pikolylchloridu (787 mg) vDMF (12 ml), uhličitan česný (500 mg) a jodid sodný (87 mg). Výsledná směs byla vařena pod zpětným chladičem 2 h a potom míchána při teplotě místnosti 17 h. Výsledný reakční roztok byl promyt po přídavku ethylacetátu (50 ml) 10% chloridu sodné

-43CZ 295705 B6 ho a potom 5 % vodným roztokem siřičitanu sodného (vždy 50 m) a dále sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-ethylacetát. = 5:1 ~ ethylacetát), za získání v názvu uvedené sloučeniny (175 mg; 50 %) j ako bílého prášku.

[a]_D = -82,6° (c = 0,12, MeOH),

NMR (CDCls): δ 0,80-0,96 (24H, m, δ = CH₃(Leu)),

1,02 (3H, t, J = 1,4, β -CH₃(Lac)), 1,38 (3H, m, β -CH₃(Lac)),

1,50-1,83 (12H, m, β -CH₂, γ -CH(Leu)), 2,73-3,01 (12H, m, NMe),

3,02-3,09 (4H, m, β-ΟΗ₂(Ρ1Λ3θ)), 4,45-5,65 (8H, m, a -CH),

5,17 (4H, s, OCH₂(2-pikolyloxy)),

6,91, 7,15 (vždy 4H, vždy d, vždy J=0,73, aromatický ((2-pikolyloxy)-PhLac),

7,21-7,27 (2H, m, aromatický (2-pikolyl)),

7,47-7,52 (2H, m, aromatický (2-pikolyl)),

7,68-7,77 (2H, m, aromatický (2-pikolyl)),

8,59-8,61 (2H, m, aromatický (2-pikolyl))

MS(FAB): 1163 (M+l)

Příklad 43

Cyklo[NeLeu-Lac-MeLe-(3-(5-izopropyl-l ,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF 102-345)

Látka PF 1022 H (400 mg) byla rozpuštěn v acetonu (8 ml), a k roztoku byl přidán uhličitan draselný (563 mg), jodid sodný (611 mg) a 3-chlormethyl-5-izopropyl-l,2,4-oxadiazol (655 mg). Výsledná směs byla míchána při 40 °C 48 h. Rozpouštědlo bylo z reakčního roztoku odstraněno odpařením a ke zbytku byl přidán ethylacetát a voda. Organická vrstva byla sušena nad síranem sodným. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením. Zbytek byl čištěn chromatografíí na silikagelu a potom následovala preparativní kapalinová chromatografíe s použití reverzní fáze ODS, za získání v názvu uvedené sloučeniny (137 mg; 27,3 %).

[a]_D = -88,6° (c = 0,1, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ = 0,81-1,04 (24H, m, a -CH₃(MeLeu)),

1,43 (12H, d, J=7,0, CH₃ (izopropyl)),

1,35-1,75 (18H, m, β-ΟΗ₃^ο), (3-CH₂(MeLeu), y-CH(MeLeu)),

2,72-3,08 (16H, m, N-Me(MeLeu), β-ΟΗ₂(Ρ1ύ^)),

3,26 (2H, m, CH(izopropyl)),

4,50, 5,02-5,70 (8H, m, a-H(MeLeu, Lac,PhLac)),

5,11 (4H, s, OCH₂), 6,91-6,96 (2H, m, aromatický),

7,15-7,19 (7H, m, aromatický)

MS(FAB): 1229 (M+l)

Příklad 44

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(3-(5-cyklohexyl-l ,2,4-oxadiazolyl)methoxy)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-347)

Látka PF 1022 H (400 mg) byla rozpuštěna ve směsi acetonu (8 ml) a DMF (4 ml), a k výslednému roztoku byl přidán uhličitan draselný (563 mg), jodid sodný (611 mg) a 3-chlormethyl-5cyklohexyl-l,2,4-oxadiazol (818 mg). Výsledná směs byla míchána při 40 °C 48 h, a z reakčního roztoku bylo odpařením odstraněno rozpouštědlo. K získanému zbytku byl přidán ethylacetát a voda a oddělená organická fáze byla sušena nad síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením. Zbytek byl čištěn chromatografíí na silikagelu, následovanou preparativní kapalinovou chromatografíí s reverzní fází s použitím ODS, za získání v názvu uvedené sloučeniny (135 mg; 25 %).

-44CZ 295705 B6 [a]_D = -62,7° (c = 0,21, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ 0,91-1,15 (24H, m, a-CH₃(MeLeu)),

1,30-2,25 (38H, m, p-CH₃(Lac), p-CH₂(MeLeu), γ-CH(MeLeu), (CH₂)₅(cyklohexyl)), 2,50-3,25 (18H, m, N-Me(MeLeu), p-CH₂(PhLac), CH(cyklohexyl)),

4,20,4,50, 5,35-5,75 (8H, m, a-CH(MeLeu, Lac,PhLac)),

5,12 (4H, s, OCH₂), 6,95-7,05 (2H, m, aromatický),

7,23-7,27 (7H, m, aromatický)

MS(FAB): 1309 (M+l)

Příklad 45

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu(NH₂CO)PhLac] (kód sloučeniny č. PF1022-242) (1) Syntéza H-L-(O₂N)PhLacOH

L-p-Nitrofenylalaninmonohydrát (15,2 g) byl rozpuštěn ve směsi vody (230 ml), 1,4-dionu (230 ml) a kyseliny octové. (230 ml). K výslednému roztoku byl přidán vodný roztok dusitanu sodného (458 g), čtyřikrát vždy v intervalu 30 min při teplotě nižší než 10 °C a výsledná směs byla ponechána reagovat při teplotě nižší než 10 °C 30 min. Po odpaření 1,4-dioxanu bylo z reakčního roztoku odpařené rozpouštědlo za sníženého tlaku, pH takto získaného zbytu bylo nastaveno na hodnotu pH 1,0 přídavkem IN kyseliny chlorovodíkové za chlazení ledem. Zbytek byl potom extrahován ethylacetátem (500 ml). Získaný extrakt byl promyt 20% vodným roztokem chloridu sodného (500 ml), a sušen nad bezvodým síranem hořečnatým a zakoncentrován za sníženého tlaku pro odstranění rozpouštědla.

Získaný zbytek byl rozpuštěn v 90% vodném methanolu (150 ml), a pH výsledného roztoku bylo nastaveno na pH 12 přídavkem 2N vodného roztoku hydroxidu sodného za chlazení ledem a roztok byl míchán při teplotě místnosti 1 h. pH výsledného reakčního roztoku bylo nastaveno na hodnotu pH 7,0 přídavkem IN kyseliny chlorovodíkové za chlazení ledem a rozpouštědlo bylo z uvedeného roztoku odpařeno za sníženého tlaku. Takto získaný zbytek byl rozpuštěn ve vodě (300 ml), a pH roztoku bylo nastaveno na pH 2,0 přídavkem IN kyseliny chlorovodíkové za chlazení ledem a potom byl roztok extrahován ethylacetátem (450 ml). Získaný extrakt byl promyt 10% vodným roztokem chloridu sodného (450 ml), potom sušen nad bezvodým síranem hořečnatým a koncentrován za sníženého tlaku pro odstranění rozpouštědla. Tím byla získána v názvu uvedená sloučenina ve formě surového produktu (10,7 g), jako žlutý olej. Ten byl použít v následujícím reakčním kroku bez čištění.

NMR (CD₃OD): 2,99-3,31 (2H, m, β-ΟΗ₂), 4,39 (1H, m, a-CH), 7,84 (4H, dd, >17,4, 9,0, aromatický) (2) Syntéza H-L-(O₂N)PhLac-Ome

H-L-(O₂N)PhLac-OH (10,7 g) byl rozpouštěn v methanolu (215 ml), a k roztoku byl přidán thionylchlorid (7,4 ml) za chlazení ledem .Výsledná směs byla ponechána reagovat při teplotě místnosti 45 min. pH reakčního roztoku bylo nastaveno na pH 7,0 přídavkem 2N vodného roztoku hydroxidu sodného k roztoku za chlazení ledem. Rozpouštědlo bylo z roztoku odpařeno za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (450 ml), roztok byl promyt dvakrát vodou (vždy 450 ml) a sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku, a zbytek byl čištěn chromatografii na silikagelu (eluce směsí toluen-ethylacetát = 6:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (9,59 g; výtěžek 64,2 %, vztaženo na77-nitrofenylalanin) ve formě bílých krystalů.

[a]_D = 6,79° (c 0,22, MeOH),

NMR (CDC1₃): δ 2,97 (1H, d, J=0,5, OH),

-45 CZ 295705 B6

3,16 (2H, ddd, >0,4, 0,7, 1,4, 4,9, p-CH₂), 3,80 (3H, s, COOMe),

4,49 (1H, d t, >0,5,0,7, a-CH),

7,77 (4H, dd, >0,8, 20,4, aromatický) (3) Syntéza H-L-(H₂N)PhLac-Ome

H-L-(O₂N)PhLac-Ome (9,59 g) byl rozpuštěn v methanolu (192 ml) v atmosféře dusíku a k výslednému roztoku byl přidán 10 % Pd/uhlík (960 mg) a kyselina octová (0,2 ml). Výsledná směs byla redukována vodíkem za sníženého tlaku po dobu 5 h. Katalyzátor byl z reakčního roztoku odstraněn filtrací a potom byl získaný filtrát koncentrován za sníženého tlaku pro odstranění rozpouštědla za získání v názvu uvedené sloučenina ve formě surového produktu (8,37 g) jako bílých krystalů. Tyto byly použity přímo v dalším reakčním kroku bez jakéhokoli čištění.

NMR(CDC1₃): δ = 2,93 (2H, ddd, >0,6, 0,7,1,4, 3,9, p-CH₂),

3,27 (2Z, b s, NH₂, 3,74 (3H, s, COOMe),

4,37 (1H, dd, >0,4, 0,6, a-CH),

6,79 (4H, dd, >0,8, 10,0 aromatický) (4) Syntéza of H-L-(NC)PhLac-Ome

H-L-(H₂N)PhLac-OMe (8,30 g) byl rozpuštěn v IN kyselině chlorovodíkové (83 ml), a k roztoku byl po kapkách přidán vodný roztok dusitanu sodného (3,42 g) za chlazení ledem. Výsledná směs byla ponechána reagovat 30 min pro převedení aminosloučeniny na odpovídající diazoniovou sůl. pH výsledného reakčního roztoku bylo nastaveno na hodnotu pH 6,5 přídavkem 10% vodného uhličitanu draselného. Vedle byla připravena suspenze chloridu měďného (8,86 g) ve vodě (35 ml), a k suspenzi byl po kapkách přidáván vodný roztok kyanidu draselného (11,36 g) za chlazení ledem a takto získaná směs byla míchána 3 h. K výslednému vodnému roztoku kyanidu měďného byl přidán vodný roztok (při pH 6,5) diazoniové soli vytvořené výše a také ethylacetát (83 ml). Výsledná směs byla ponechána reagovat při teplotě místnosti 2 h.

Takto získaný reakční roztok byl filtrován pro odstranění nerozpustného materiálu, a pro oddělení organické a vodné vrstvy byl přidán ethylacetát (200 ml). Organická vrstva byla promyta vodou (400 ml) a sušena nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku, a zbytek byl čištěn chromatografii na koloně silikagelu (eluce směsí toluen-ethylacetát = 3:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (4,53g; 50,0 %) jako žlutého oleje.

NMR (CDCI3): δ = 2,91 (1H, d, >0,5, OH),

3,10 (2H, ddd, >0,4, 0,7, 1,4, 5,0, p-CH₂), 3,79 (3H, s, COOMe),

4.47 (1H, d t, >0,7, 0,5, a-CH),

7.47 (4H, dd, >0,8, 6,6 aromatický) (5) Syntéza of H-L-(NH₂CO)PhLac-Ome

H-L-(NC)PhLac-OMe (4,25 g) byl rozpouštěn v methanolu (42,5 ml), a k roztoku byl přidán 30% vodný roztok peroxidu vodíku (7,05 ml) a triethylamin (4,33 ml) za chlazení ledem. Výsledná směs byla míchána za chlazení ledem. 2 h. Potom byly přidány další dvě dávky (vždy 4,7 ml) 30% vodného roztoku peroxidu vodíku v intervalu 3 h, a reakce byla ponechána probíhat 18 h. pH výsledného reakčního roztoku bylo nastaveno na hodnotu pH 6,9 přídavkem IN kyseliny chlorovodíkové a rozpouštědlo bylo ze směsi odstraněno odpařením za sníženého tlaku. V názvu uvedená sloučenina byla získána jako surový produkt ve formě bílých krystalů. Byla použita v dalším reakčním kroku bez jakéhokoli čištění.

NMR (CDCI3): δ = 3,04 (2H, ddd, >0,5, 0,8,1,4,4,3, p-CH₂),

3,69 (3H, s, COOMe), 4,40 (1H, dd, >0,5, 0,8, a-CH),

7,56 (4H, dd, >0,8,12,4, aromatický)

-46CZ 295705 B6 (6) Syntéza H-L-(NH₂CO)PhLac-OH

H-L-(NH₂CO)PhLac-OMe (4,63 g) byl rozpuštěn v směsi acetonu (39 ml) a vody (46 ml), a k výslednému roztoku byl přidán IN vodný roztok hydroxidu sodného (31 ml) za chlazení ledem. Reakce byla ponechána probíhat za chlazení ledem 15 h. Výsledný reakční roztok byl upraven IN kyselinou chlorovodíkovou na pH 7 a rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku. Byla získána v názvu uvedená sloučenina ve formě surového produktu jako bílé krystaly. Ta byla použita v dalším reakčním kroku bez čištění.

(7) Syntéza H-L-(NH₂CO)PhLac-OBn

H-L-(N-H₂CO)PhLac-OH (4,34 g) byl rozpuštěn v DMSO (90 ml), a k roztoku byl přidán benzylbromid (4,9 ml) a uhličitan draselný (8,6 g). Reakce byla ponechána probíhat při 40 °C 3 h. Potom byl přidán benzylbromid (2,5 ml) a uhličitan draselný (4,3 g) a reakce dále probíhala při 40 °C 1 h.

Po přídavku ethylacetátu (400 ml) k takto získané reakční směsi, byl roztok promyt vodou (400 ml) a sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo z roztoku odstraněno odpařením za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroformmethanol = 20:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (6,26 g; 99 % výtěžek vztaženo na H-L-(NC)PhLac-OMe) jako bílé krystaly.

[a]_D = -19,l°(c = 0,21,MeOH)

NMR(CD₃OD): δ = 3,04 (2H, ddd, >0,5, 0,7, 1,4, 2, p-CH₂),

4,44 (1H, dd, >0,6, 0,8, a-CH), 5,11 (2H, s, COOCH_Z Ph),

7,25-7,33 (7H, m, aromatický), 7,74 (2H, d, >0,8, aromatický) (8) Syntéza Boc-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn

H-(NH₂CO)PhLac-OBn (490 mg) byl rozpuštěn v THF (12,3 ml), a k roztoku byl přidán Boc-MeLeu-OH (442 mg) a trifenylfosfín (515 mg). Potom byl po kapkách přidán k výsledné směsi DEAD (0,31 ml) a reakce byla ponechána probíhat při teplotě místnosti 1 h. Rozpouštědlo bylo odstraněno ze získaného reakčního roztoku odpařením za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (50 ml). Získaný roztok byl postupně promyt vodou, 5% vodným roztokem hydrogensíranu draselného, 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20% vodným roztokem chloridu sodného (vždy 50 ml) a potom sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařením za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-ethylacetát = 5:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (594 mg; 68,8 %) ve formě bílých krystalů.

NMR(CD₃OD): δ = 0,89 (6H, m, δ = CH₃(MeLeu)),

1,41, 1,48 (9H, 2s, Boc), 1,48-1,57 (2H, m, β-<2Η2 (MeLeu)),

2,59 (3H, s, NMe(MeLeu)), 3,19-3,26 (2H, m, p-CH₂(PhLac)), 4,08-4,18 (1H, m, a-CH(MeLeu)), 5,11 (2H, m, COOCH₂Ph).

5,34 (1H, m, a-CH(PhLac)), 7,25-7,36 (7H, m, aromatický),

7,79 (2H, d, >0,7, aromatický (9) Syntéza H-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn

Boc-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn (535 mg) byl rozpuštěn v chladné kyseliny trifluoroctové (5,35 ml), a získaný roztok byl míchán za chlazení ledem 3 h. Rozpouštědlo bylo z reakčního roztoku odstraněno odpařením za sníženého tlaku. Zbytkové množství kyseliny trifluoroctové bylo potom odstraněno azeotropní destilací s toluenem. Takto získaný zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (50 ml). Získaný roztok byl postupně promyt 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20% vodným roztokem chloridu sodného (vždy 50 ml) a sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého

-47CZ 295705 B6 tlaku, za získání v názvu uvedené sloučeniny ve formě surového produktu (387 mg; 89,8 %) ve formě oleje. Ten byl použit v dalším reakčním kroku bez čištění.

NMR(CD₃OD): δ 0,74 (6H, s X 2, 6H, δ -CH₃(MeLeu)),

1,33 (2H, m, p-CH₂(MeLeu)), 2,14 (3H, s, NMe), 3,12-3,20 (2H, m, p-CH₂(PhLac)),

3,30-3,67 (1H, m, 1H, α-CH (MeLeu)),

5,16 (2H, s, COOCHjPh), 5,37 (1H, dd, J=0,4, 1,0, a-CH(PhLac)), 7,29-7,35 (7H, m, aromatický), 7,82 (2H, d, J=0,8, aromatický) (10) Syntéza Boc-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn

Boc-MeLeu-Lac-OH (2,64 g) byl rozpuštěn v methylenchloridu (53 ml), a k roztoku byl přidán Η-MeLeu (NH₂CO)PhLac-OBn (3,42 g). DO výsledné směsi byl přidán za chlazení ledem diizopropylethylamin (3,6 ml) a chlorid kyseliny N,N-bis(2-oxo-3-oxazolydinyl)fosfínové (BOP-C1) (2,65 g).Takto získaná směs reagovala za chlazení ledem 24 h. Rozpouštědlo bylo z reakčního roztoku odstraněno odpařením a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (200 ml). Získaný roztok byl postupně promyt 5% vodným roztokem hydrogensíranu draselného (200 ml) a 20% vodným roztokem chloridu sodného (200 ml), a rozpouštědlo bylo odpařeno z roztoku za sníženého tlaku. Takto získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroformmethanol = 30:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (55,18g; 89 1%) jako bílého prášku.

[a]_D = -28,7° (c = 0,21, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ = 0,83-0,93 (12H, m, ó-CH₃(MeLeu)),

0,87-1,47 (12H, m, Boc, P-CH₃(Lac)),

1,60-1,77 (4H, m, p-CH₂(MeLeu)),

2,82, 2,85 (vždy 3H, vždy s, NMe),

3,20 (d, 2H, J=0,6 P-CH₂(PhLac)),

430-5,37 (m, 6H, a-CH(MeLeu, Lac, PhLac), COOCH₂Ph), 7,18-7,38 (7H, m, aromatický), 7,72 (2H, d, J=0,8, aromatický) (11) Syntéza H-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn

Boc-MeLeu-Lac-MeLue-(NH₂CO)PhLac-OBn (3,1 g) byl rozpuštěn v methylenchloridu (15,5 ml), a k roztoku byla přidána ledová kyselina trifluoroctová (9,3 ml). Reakce probíhala při teplotě místnosti 30 min. Rozpouštědlo a kyselina trifluoroctová (THF) byly odpařeny z reakčního roztoku za sníženého tlaku, a TFA zbylá v roztoku byla odstraněna azeotropní destilací s toluenem. Takto získaný zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (200 ml), a roztok byl promyt postupně 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20% vodným roztokem chloridu sodného (vždy 200 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku, za získání v názvu uvedené sloučeniny ve formě surového produktu (2,62g; 97,9 %) ve formě oleje. Ten byl použit v dalším reakčním kroku bez čištění.

(12) Syntéza Boc-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-LacMeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn Boc-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-OH (1,07 g) a H-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn (1,06 g) byly rozpuštěny v methylenchloridu (20 ml), a k roztoku byl přidán za chlazení ledem diiazopropylethylamin (0,6 ml) a BOP-C1 (0,52 g). Reakce byla ponechána probíhat za chlazení ledem 2 h. Rozpouštědlo bylo ze získaného reakčního roztoku odstraněno za sníženého tlaku, a zbytek byl rozpouštěn v ethylacetátu (100 ml). Získaný roztok byl promyt 20% vodným roztokem chloridu sodného (100 ml) a sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku a získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na silikagelu (eluce směsí chloroform-methanol = 40:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (1,68 g; 82,2 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -39,5° (c = 0,11, MeOH),

NMR (CDCIj): δ 0,78-0,97 (24H, m, ó-CH₃ (MeLeu)),

-48CZ 295705 B6

1,43 (9H, s, 9H, Boc), 1,14-1,73 (8H, m, p-CH₂(MeLeu)),

2,68, 2,79, 2,83, 2,88 (vždy s, vždy 3H, NMe),

2.76- 3,74 (4H, m, p-CH₂(PhLac)),

4.76- 5,60 (10H, m, α-CH (MeLeu, LacPhLac), COOCH₂Ph),

7,21-7,76 (14H, m aromatický) (13) Syntéza H-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn Boc-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)-PhLac-OBn (1,6 g) byl rozpuštěn v methylenchloridu (8,0 ml), a k roztoku byla přidána za chlazení ledem kyselina trifluoroctová (4,8 ml). Reakce byla přidána při teplotě místnosti 30 min. Rozpouštědlo a TFA byly odpařeny z reakčního roztoku za sníženého tlaku. Zbylá TFA v reakčním roztoku byla dále odstraněna azeotropní destilací s toluenem. Získaný zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (150 ml), a roztok byl postupně promyt 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20 % vodným roztokem chloridu sodného (vždy 150 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku, za získání v názvu uvedené sloučeniny jako surového produktu (1,59 g; 100 %) ve formě oleje. Ten byl použit bez čištění v dalším reakčním kroku.

NMR(CDC1₃): δ = 0,80-0,98 (24H, m, δ = CH₃ (MeLeu)),

1,34-1,53 (6H, s, CH₃(Lac)), 1,14-2,05 (8H, m, 3-CH₂(MeLeu)),

2,41, 2,73, 2,87, 2,95 (vždy 4H, vždy s, NMe),

2,61-3,34 (4H, m, p-CH₂(PhLac)),

5,05-5,47 (10H, m, a-CH(MeLeu, Lac, PhLac), COOCH₂Ph),

7,22-7,38 (12H, m, aromatický), 7,73 (2H, d, J=0,8, aromatický) (14) Syntéza H-MeLeuLac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac-MeLue-(NH₂CO)PhLac-OH

H-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn (1,46 g) byl rozpuštěn v methanolu (30 ml), a k roztoku byl přidán 10% Pd-aktivovaný uhlík (146 mg) a kyselina octová (0,1 ml) v atmosféře dusíku. Výsledná směs byla za atmosférického tlaku podrobena redukci po dobu 1 h. Katalyzátor byl z roztoku odstraněn filtrací a roztok byl pak koncentrován za sníženého tlaku pro odstranění rozpouštědla za získání v názvu uvedené sloučeniny (1,25 g; 93,0 %) ve formě oleje. Ten byl použit v dalším reakčním kroku bez čištění.

NMR(CDC1₃): δ = 0,86-1,02 (27H, m, p-CH₃(Lac), δ-CH, (MeLeu),

1,29-1,72 (11H, m, p-CH₃(Lac), |3-CH₂(MeLeu)),

2,40-2,52 (3H, NMe), 2,77-3,21 (13H, m, NMe, p-CH₂(PhLac)),

5,02-5,51 (8H, m, a-CH(MeLeu, LacPhLac)),

7,21-7,78 (9H, m, aromatický) (15) Syntéza cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-LacMeLeu-(NH₂CO)-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-242)

H-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OH (1,24 g) byl rozpuštěn v THF (174 ml), a k roztoku byl přidán 1-hydroxy-benztriazol (0,83 g) a N-methylmorfolin (0,54 ml) za míchání. K výsledné směsi byla přidána směs chloridu lithného (0,52 g), chloridu sodného (0,72 g), chloridu draselného (0,92 g), chloridu česného (2,07 g), l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodimid hydrochloridu (2,35 g), THF (1120 ml) a DMF (320 ml). Takto získaná směs byla pro uskutečnění reakce míchána při teplotě místnosti 18 h.

Rozpouštědlo bylo ze získaného reakčního roztoku odstraněné odpařením za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (120 ml). Získaný roztok byl promyt postupně 5% vodným roztokem hydrogensíranu sodného, 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 5% vodným roztokem chloridu sodného (vždy 120 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo z usušeného roztoku odstraněno za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn

-49CZ 295705 B6 chromatografií na koloně silikagelu (eluce ethylacetátem), za získání v názvu uvedené sloučeniny (0,77 g; 63,3 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -78,4° (c = 0,14, MeOH)

NMR (CDClj): δ = 0,69-1,04 (27H, m, β-ΟΗ₃ (Lac), 8-CH₃(MeLeu)),

1,23-1,41 (3H, m, CH₃(Lac)), 1,44-1,84 (8H, m, β-ΟΗ^Μείευ)),

2,62-3,08 (12H, m, NMe), 3,10-3,23 (4H, m, β-ΟΗ₂(ΡΜΧ)),

4,45-5,79 (8H, m, a-CH(MeLeu,Lac,PhLac)),

7,25-7,34 (7H, m, aromatický), 7,79 (2H, d, J=0,8, aromatický)

Příklad 46

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. F1022-247) (1) Syntéza Boc-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OH

Boc-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn (1,8 g) byl rozpuštěn v methanolu (36 ml), a k roztoku byl přidán 10% Pd-aktivovaný uhlík (1,18 g) a kyselina octová (0,lml) v atmosféře dusíku. Výsledná směs byla podrobena redukci vodíkem za atmosférického tlaku 2,5 h. Katalyzátor byl z výsledného reakčního roztoku odstraněn filtrací a reakční směs byla koncentrována za sníženého tlaku, pro odstranění rozpouštědla za získání v názvu uvedené sloučeniny ve formě surového produktu (1,52 g; 99,1 %) ve formě oleje.

Ten byl použit v dalším reakčním kroku bez čištění.

(2) Syntéza Boc-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-MeLeu Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLacOBn

Boc-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OH (1,56 g) a MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn (1,53 g) byly rozpuštěny v methylenchloridu (31 ml) a k roztoku byl přidán za chlazení ledem diizopropylethylamin (0,85 ml) a BOP-C1 (0,96 g). Reakce byla prováděna ve vzniklé směsi 6 h za chlazení ledem.

Rozpouštědlo bylo z výsledného roztoku odstraněno odpařením za sníženého tlaku, a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (200 ml). Získaný roztok byl postupně promyt 5% vodným roztokem hydrogensíranu draselného a 7 % vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20% vodným roztokem chloridu sodného (vždy 200 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku.

Takto získaný zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu (eluce směsí chloroformmethanol = 30:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (1,92 g; 63,1 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -37,9° (c = 0,10, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,70-0,85 (24H, m, β-ΟΗ₃(ΤΗϋ), 6-CH₃(MeLeu)),

1,18-1,86 (,11H, m, β-ΟΗ₃(Τηο), β-ΟΗ^ΜεΤευ)),

2,68-3,15 (16H, m, NMe, β-ΟΗ₂(ΡΜΧ)),

5,03-5,32 (10H, m, cc-CH(MeLeu, Lac, PhLac), COOCH₂),

7,13-7,70 (13H, m, aromatický) (3) Syntéza H-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-MeLeuLac-MeLeu-(NH₂CO)-PhLacOBn

Boc-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu(NH₂CO) PhLac-OBn (1,8 g) byl rozpuštěn v methylenchloridu (9 ml), a k roztoku byla přidána ledová TFA (5,4 ml). Výsledná směs byla ponechána reagovat při teplotě místnosti 1 h. Získaný reakční roztok byl zahřát tak, že rozpouštědlo a kyselina trifluoroctová byly odpařeny za sníženého tlaku. Zbytková kyselina trifluoroctová byla odstraněna azeotropní destilací s toluenem. Získaný zbytek byl rozpouštěn

-50CZ 295705 B6 v ethylacetátu (200 ml) a získaný roztok byl postupně promyt 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20% vodným roztokem chloridu sodného (vždy 200 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku, za získání v názvu uvedené sloučeniny ve formě surového produktu (1,64 g; 99 %) ve formě oleje. Ten byl použit v dalším reakčním kroku bez čištění.

(4) Syntéza H-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-MeLeuLac-MeLeu-(NH₂CO)PhLacOBn

H-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-OBn (1,63 g) byl rozpuštěn v methanolu (33 ml), a k roztoku byl přidán v atmosféře dusíku 10% Pd-aktivovaný uhlík (163 mg) a kyselina octová (0,2 ml). Výsledná směs byla podrobena redukci vodíkem za atmosférického tlaku po dobu 2,5 h. Z výsledného roztoku byl odstraněn katalyzátor filtrací a rozpouštědlo bylo z roztoku odstraněno za sníženého tlaku, za získání v názvu uvedené sloučeniny jako surového produktu (1,44 g; 95,9%) ve formě oleje. Ten byl použit bez dalšího čištění v dalším reakčním kroku.

(5) Syntéza cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-247) H-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-(NH₂CO) PhLac-OH (44 g) byl rozpuštěn v THF (202 ml), a k roztoku byla přidána směs 1-hydroxybenztriazolu (0,92 g) a N-methylmorfolinu (0,6 ml). Výsledná směs byla míchána. K uvedené směsi byla potom přidána směs chloridu lithného (0,58 g), chloridu sodného (0,80 g), chloridu draselného (1,02 g), chloridu česného (2,30 g), l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethyl-karbodiimid hydrochloridu (2,62 g), THF (1,31 ml) a DMF (375 ml).h.

Výsledný reakční roztok byl koncentrován za sníženého tlaku pro odstranění rozpouštědla z reakčního roztoku. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (150 ml), a získaný roztok byl postupně promyt 5% vodným roztokem hydrogensíranu sodného, 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20% vodným roztokem chloridu sodného (vždy 150 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku. Takto získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-methanol = 10:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (0,93 g; 65,4 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -75,4° (c = 0,11, MeOH)

NMR(CDC1₃): = 0,56-1,04 (27H, m, β-CH, Lac), 8-CH₃(MeLeu)),

1,41 (3H, m, β-ΟΗ₃(ί_&ΰ)), 1,25-1,80 (8H, m, β-ΟΗ₂(Μβίευ)),

2,79, 2,82, 2,86, 3,07 (12H, vždy s, NMe),

3,12-3,27 (4H, m, β-ΟΗ₂(ΡΜ^)),

4,45-5,71 (8H, m, a-CH(MeLeu,Lac,PhLac)),

5,91, 6,31 (vždy 1H, vždy bs, CONH₂)),

7,30-7,81 (8H, m, aromatický)

Příklad 47

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(CH₃CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] a cyklo[MeLeu-LacMeLeu(CH₃CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-CH₃CO) PhLac] (kód sloučeniny č. PF1022-049 a kód sloučeniny č. PF 1022-048)

Do ledového acetylchloridu (3,5 ml) byl přidán chlorid hlinitý (5,02 g) v atmosféře dusíku a k výslednému roztoku byl potom po kapkách přidáván za důkladného míchání roztok látky PF 1022 (2,0 g) v acetylchloridu (5 ml). Výsledná směs byla zahřívána pod zpětným chladičem 30 min. Získaný reakční roztok byl chlazen na teplotu místnosti a pevný materiál vysrážený v roztoku byl rozpouštěn v ethylacetátu (10 ml). Získaná úplná směs byla dále zředěna ethylacetátem (100 ml), postupně promyta studenou vodou (80 ml) obsahující koncentrovanou kyseli

-51 CZ 295705 B6 nu chlorovodíkovou (2 ml), vodou (80 ml), vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml, dvakrát) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (50 ml) a byla sušena nad bezvodým síranem sodným. Vysušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu (eluce směsí ethylacetát-hexan = 1:1) a potom preparativní HPLC s reverzní fází s použitím ODS (eluce 75 % ~ 70 % vodným acetonitrilem obsahujícím 0,05% TFA). Obě v názvu uvedené sloučeniny (PF 1022-049: 200 mg; a PF1022-048: 190 mg) byly získány jako bílý prášek. Dále bylo získáno 808 mg látky PF1022.

Látka PR1022-048

Ή-NMR (CDClj): δ = 0,7-1,08 (27H, m), 1,18-1,82 (15H, m),

2,56-3,28 (19H, m), 4,46 (1H, m), 5,0-5,76 (7H, m),

7,16-7,46 (7H, m), 7,8-7,92 (2H, m)

Látka PF 1022-049 *H-NMR (CDC1₃): δ 0,7-1,1 (27H, m), 1,16-2,02 (15H, m),

2,56-3,28 (22H, m), 4,47 (1H, m), 5,0-5,72 (7H, m),

7,2-7,75 (4H, m), 7,3-7,95 (4H, m)

Příklad 48

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(BrCH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(CH₃CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (101 mg), získaný v příkladu 47 výše, byl rozpuštěn v chloroformu (10 ml), a k roztoku byl po kapkách přidán 1,56 M roztok bromu v chloroformu (0,07 ml) a 48% kyselina bromovodíková (1 kapka). Výsledná směs byla míchána při 25 °C 3,5 h. Získaný reakční roztok byl zakoncentrován a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně silikagelu (eluce směsí ethylacetát - hexan = 1:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (88,1 mg).

’Η-NMR (CDC1₃): δ 0,7-1,1 (27H, m), 1,2-1,8 (15H, m),

2,68-3,30 (16H, m), 4,40 (2H, s), 4,46 (1H, ml, 5,0-5,74 (7H, m), 7,14-7,44 (7H, m), 7,84-7,97 (2H, m)

Příklad 49

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HCOOCH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(BrCH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (88,1 mg) byl rozpuštěn v acetonu (8 ml), a k roztoku byl přidán pufrovaný roztok 0,7 M kyseliny mravenčí - mravenčan sodný (pH 4,2) (2 ml). Výsledná směs byla míchána při 60 °C 90 min. Reakční roztok byl ponechán ochladit na teplotu místnosti a potom byl zředěn ethylacetátem (50 ml), a potom následovalo praní postupně 10% roztokem hydrogensíranu draselného (30 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a vodným nasyceným roztokem chloridu sodného (30 ml) a sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku, za získání v názvu uvedené sloučeniny (82,5 mg). Ta byla použita bez čištění v dalším reakčním kroku.

’H-NMR(CDC1₃): δ 0,7-1,06 (27H, m), 1,2-1,8 (15H, m),

2,68-3,30 (16H, m), 4,46 (1H, m), 5,40 (2H, s), 5,0-5,72 (7H, m), 7,16-7,44 (7H, m), 7,75-7,90 (2H, m), 8,28 (1H, s)

Příklad 50

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac]

-52CZ 295705 B6

Cyklo[MeLeu-Lad-MeLeu-(HCOOCH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (82,5 mg) byl rozpuštěn v methanolu (9,5 ml) a k roztoku byla přidána 2N HC1 (0,5 ml). Výsledná směs byla míchána při pokojové teplotě přes noc. Výsledný reakční roztok byl koncentrován za sníženého tlaku, za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny (83,1 mg). Ta byla použita bez čištění v dalším reakčním kroku.

Ή-NMR (CDC1₃): δ = 0,7-1,06 (27H, m), 1,15-1,8 (15H, m),

2,65-3,30 (16H, m), 4,46 (1H, m), 4,84 (2H, s), 5,0-5,74 (7H, m), 7,1-7,45 (7H, m), 7,75-7,90 (2H, m),

Příklad 51

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF1022-241)

Cyklo [MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCH₂CO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] byl rozpuštěn v THF (5 ml) a k roztoku byl přidán jodistan sodný (174 mg) a voda (1 kapka). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 7 h. Získaný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (50 ml), a promyt vodným 10% roztokem chloridu sodného (30 ml) obsahujícím 2N kyseliny chlorovodíkovou (2 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem sodným. Vysušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíi na koloně silikagelu (eluce směsí chloroformmethanol = 50:1 ~ 50:2), za získání v názvu uvedené sloučeniny (71,1 mg) jako bílého prášku.

’Η-NMR (CDCI3): δ = 0,7-11 (27H, m), 1,17-1,82 (15H, m),

2,68-3,32 (16H, m), 4,48 (1H, m), 5,0-5,73 (7H, m),

7,12-7,40 (7H, m), 7,95-8,07 (2H, m)

MS(SIMS): 993 (M+l)

Příklad 52

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(MorCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLacl (kód sloučeniny č. PF1022-244)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac) (121 mg) byl rozpuštěn v methylenchloridu (4 ml) v atmosféře dusíku a k výslednému roztoku byl přidán triethylamin (40 μΐ) a ethylchlorkarbonát (13 μΐ) při -15 °C. Výsledná směs byla míchána 10 min, a potom byl přidán morfolin (12 μΐ). Teplota získané směsi byla pomalu zvyšována až na teplotu místnosti a směs byla míchána dalších 30 min. Potom byl přidán 10 % vodný roztok hydrogensíranu draselného (10 ml) a směs byla extrahována chloroformem (15 ml). Zbylá vodná fáze byla opět extrahována chloroformem (10 ml). Organické vrstvy (chloroformové extrakty) byly spojeny a sušeny nad bezvodým síranem sodným. Organický roztok byl koncentrován za sníženého tlaku, a zbytek byl čištěn chromatografíi na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform - methanol = 80 : 1 ~ 20 : 1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (75,8 mg) jako bílého prášku.

[a]_D = -83,2° (c = 0,03, MeOH) ’Η-NMR (CDCI3) δ = 0,73-1,06 (27H, m), 1,10-1,85 (15H, m),

2,65-3,24 (16H, m), 3,27—4,0 (8H, bs), 4,47 (1H, m),

5,0-5,72 (7H, m), 7,16-7,40 (9H, m)

MS(SIMS): 1062 (M+l)

Příklad 53

Cyklo [MeLeu-Lac-NeLeu-((CH₃)₂NCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-243)

-53CZ 295705 B6

Cyklo[MeLeu—Lac—MeLeu—(HOCO)PhLac—MeLeu—Lac—MeLeu—PhLac] (tedy látka PF1022— 241) (150 mg), získaný v příkladu 53, byl rozpuštěn v THF (3 ml), a k roztoku byl za chlazení ledem přidán DCC (46,7 mg), HOBt (26,5 mg), triethylamin (0,046 ml) a dimethylamin hydrochlorid (14,8 mg). Výsledná směs byla míchána pro uskutečnění reakce 2 h. Potom byl opět přidán DCC, HOBt, triethylamin a dimethylaminhydrochlorid ve stejných množstvích jako výše. Získaná směs byla ponechána reagovat další 3,5 h a potom byl znovu přidán DCC, HOBt, triethylamin a dimethylaminhydrochlorid ve stejných množstvích jako výše. Reakce dále pokračovala ještě 15 h.

Získaný reakční roztok byl filtrován pro odstranění nerozpustných materiálů. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku pro odstranění rozpouštědla. Získaný zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (20 ml) a roztok byl postupně promyt 5% vodným roztokem hydrogensíranu draselného, 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20% roztokem chloridu sodného (vždy 20 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku, a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce ethylacetátem), za získání v názvu uvedené sloučeniny (117 mg, 76,6 %) jako bílého prášku.

[oc]_D = -87,4° (c = 0,10, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ = 0,80-1,05 (27H, m, 5-CH₃(MeLeu), p-CH₃(Lac)),

1.25- 1,42 (3H, m, 6-CH₃(Lac)),

1.48- 1,68 (12H, m, Ó-CH₂, y-CH(MeLeu)),

2,73-3,19 (22H, m, NMe(MeLeu),

Me₂NCO, p-CH₂(PhLac, (CH₃)₂NCO)PhLac),

4.48- 5,68 (8H, m, a-CH), 7,24-7,39 (9H, m, aromatický)

MS(SIMS): 1020 (M+l)

Příklad 54

Cyklo[MeLeu-LacMeLeu-((CH₃)₂NCH₂CH₂CH₂OCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF1022-245)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (tedy látka PF1022241) (183 mg) byl rozpuštěn v THF (3,7 ml), a k roztoku byl za chlazení ledem přidán DCC (57 mg), HOBt (33 mg), triethylamin (0,031 ml) a dimethylaminoethanol (0,022 ml). Výsledná směs byla míchána pro uskutečnění reakce 4 h. Potom byl opět přidán do reakční směsi DCC (19 mg), HOBt (12mg), triethylamin (0,013 ml) a dimethylaminoethanol (0,01 ml) a směs byla míchána dalších 18 h. Potom byl k reakční směsi znovu přidán DCC, HOBt, triethylamin a dimethylaminoethanol ve stejných množstvích jako výše. Výsledná směs byla míchána pro uskutečnění rekce ještě 15 h.

Získaný reakční roztok byl filtrován pro odstranění nerozpustných látek a získaný filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku pro odstranění rozpouštědla. Zbytek byl rozpouštěn v ethylacetátu (20 ml), a roztok byl postupně promyt 5% vodným roztokem hydrogensíranu draselného, 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20% vodným roztokem chloridu sodného (vždy 20 ml) a byl sušen bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněné z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform - methanol = 15 : 1) za získání v názvu uvedené sloučeniny (131 mg; 66,9%) jako bílého prášku.

[a]_D = -89,3° (c = 0,10, MeOH)

NMR (CDC1₃): δ 0,80-1,05 (27H, m, 8-CH₃(MeLeu), p-CH₃(Lac)),

1.25- 1,41 (3H, m, p-CH₃(Lac)),

1,42-1,75 (12H, m, β-CH,, y-CH(MeLeu)),

2,34 (6H, s, NMe₂((CH₃)₂NCH₂CH₂CH₂OCO))

-54CZ 295705 B6

2,69-2,83 (12H, m, NMe (MeLeu)),

3,01-3,20 (6H, m, 3-CH₂(PhLac,(CH₃)₂NCH₂CH₂OCO)PhLac), CH₂((CH₃)₂NCH₂CH₂OCO)),

4,41 (2H, t, = 0,5, CH₂((CH₃)₂NCH₂CH₂OCO)),

4,47-5,68 (8H, m, a-CH(Lac)),

7,25-7,34 (7H, m, PhLac, (CH₃)₂NCH₂CH₂OCO)PhLac),

7,97 (2H, m, (CH₃)₂NCH₂CH₂OCO)PhLac)

Ms(FAB): 1064 (M+l)

Příklad 55

Cyklo [MeLeu-Lac-MeLeu-(MorCH₂CH₂OCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF 1022-246)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (tedy látka PF 1022241) (207,5 mg) byl rozpuštěn vTHF (4 ml), a k roztoku byl za chlazení ledem přidán DCC (62 mg), HOBt (35 mg), triethylamin (0,034 ml) a morfolinethanol (0,029 ml). Výsledná směs byla míchána pro uskutečnění reakce 16 h. Potom byl k reakční směsi dále přidán DCC (21 mg), HOBt (14 mg), triethylamin (0,008 ml) a morfolinethanol (0,007 ml) a směs byla míchána dalších 18 h.

Získaný reakční roztok byl filtrován pro odstranění nerozpustných materiálů a vzniklý filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku pro odstranění rozpouštědla. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (20 ml) a získaný roztok byl postupně promyt 5% vodným roztokem hydrogensíranu draselného, 7% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a 20% vodným roztokem chloridu sodného (vždy 20 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform-methanol = 30 : 1), pro získání v názvu uvedené sloučeniny (15 mg; 49,8 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -105° (c = 0,11, MeOH)

NMR(CDC1₃): δ 0,80-1,06 (27H, m, 5-CH₃(MeLeu), p-CH₃(Lac)),

1,38-1,43 (3H, m, p-CH₃(Lac)).

1,53-1,91 (12H, m, β-ΟΗ₂, y-CH(MeLeu)), 2,59 (4H, t, >0,4, Mor),

2,76-2,85 (12H, m, NMe(MeLeu)),

3,03-3,38 (6H, m, β-ΟΗ₂(ΡΜ4ΐο, (CH₃)₂NCH₂CH₂OCO)PhLac),

CHďMorCI-LCHoOCO)), 3,73 (4H, m, >0,4, Mor),

5,09-5,71 (8H, m, a-CH(Lac)), 7,28 (5H, m, aromatický(PhLac),

7,34, 7,99 (vždy 2H, vždy m, ÍMorCH>CH₂QCO)PhLac),

MS(FAB): 1106 (M+l)

Příklad 56

Cyklo[MeLeu-Lac-NeLeu-(BrCH₂CO)PhLac]₂

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(CH₃CO)PhLac]₂ (1,10 g) byl rozpuštěn v chloroformu (100 ml), a k roztoku byl přidán 1,56 m roztok bromu v chloroformu (1,5 ml) a 48% kyselina bromovodiková (1 kapka). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 40 min. Získaný reakční roztok byl promyt nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (75 ml), a promývací vodný roztok byl extrahován chloroformem (50 ml). Takto získané organické vrstvy byly spojeny, sušeny nad bezvodým síranem sodným a koncentrovány za sníženého tlaku za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny (0,96 g).

Příklad 57

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HCOOCH₂CO)PhLac]₂

-55CZ 295705 B6

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(BrCH₂CO)PhLac]₂ (0,96 g) byl rozpuštěn v acetonu (80 ml), a k roztoku byl přidán pufrovaný roztok 0,7N kyselina mravenčí - mravenčan sodný (pH 4,2) (20 ml). Výsledná směs byla míchána při 60 °C 75 min. Aceton byl z reakční směsi odpařen za sníženého tlaku. Ke zbytku byl přidán 10% vodný roztok chloridu sodného (50 ml) a 2N kyselina chlorovodíková (2 ml). Výsledná směs byla dvakrát extrahována chloroformem (vždy 60 ml). Organické vrstvy (chloroformové extrakty) byly spojeny a sušeny nad bezvodým síranem sodným. Usušený organický roztok byl koncentrován za sníženého tlaku za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny (0,90 g).

Příklad 58

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCH₂CO)PhLac]₂

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HCOOCH₂CO)PhLac]₂ (0,90 g) byl rozpuštěn v methanolu (95 ml), a k roztoku byla potom přidána 2N vodná HC1 (5 ml). Výsledná směs byla míchána při 30 °C 2 h. Výsledný reakční roztok byl koncentrován za sníženého tlaku za získání v názvu uvedené sloučeniny (0,90 g).

Příklad 59

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLue-(HOCO)PhLac]₂

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCH₂CO)PhLac₂ (0,90 g) byl rozpuštěn v THF (90 ml), a k roztoku byl přidán jodistan sodný (4,15 g) a voda (10 ml). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Ze získaného reakčního roztoku byl odpařen THF a ke zbytku byl přidán 10% vodný roztok chloridu sodného (100 ml) obsahující 2N HC1 (5 ml). Takto získaná směs byla dvakrát extrahována chloroformem (100 ml, 50 ml). Organické vrstvy (chloroformové extrakty) byly sušeny nad bezvodým síranem sodným. Rozpouštědlo bylo odstraněno z usušeného roztoku odpařením za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform - methanol = 50:1 ~ 50:3), za získání v názvu uvedené sloučeniny (855 mg) jako bílého prášku.

Ή-NMR (CD₃OD, za přídavku KSCN): δ = 0,86 (6h, d, >6,7 Hz), 0,89 (12H, d, >6,7 Hz), 0,94 (6H, d, J=6,7 Hz), 1,18-1,42 (4H, m), 1,46 (6h, d, >6,7 Hz), 1,57 (4H, dd, >7,0, 8,2), 1,81 (4H, dd, >6,7, 7,9), 2,92 (6H, s), 5,06 (6H, s), 3,16 (2H, dd, >9,0, 14,1), 3,27 (2H, dd, >5,3,14,1), 5,32-5,45 (6H, m), 5,62 (2H, dd, >5,3, 9,0), 7,48 (4H, d, >8,2 Hz), 8,00 (4H, d, >8,2 Hz)

MS(SIMS): 1060 (M+Na), 1037 (M+l)

Příklad 60

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((CH₃)₂NCO)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-248

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)PhLac]₂ (50,2 mg), HOBt (42,0 mg), dimethylaminhydrochlorid (36,2 mg) a triethylamin (0,1 ml) byly rozpuštěny v THF (3 ml), a k roztoku byl přidán DCC (53,7 mg). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Získaná reakční směs byla zfíltrována pro odstranění nerozpustného materiálu. Získaný reakční roztok byl zředěn ethylacetátem (20 ml) a potom byl postupně promyt 10% roztokem hydrogensíranu draselného (10 ml) a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného (10 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform - methanol = 50:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (52,8 mg) jako bílého prášku.

-56CZ 295705 B6 [a]_D = -85,7 (c = 0,10, MeOH) ‘H-NMR (CDCIj): δ = 0,76-1,08 (27H, m), 1,10-1,84 (15H, m),

2,72-3,26 (28H, m), 4,50 (1H, m), 5,03-5,70 (7H, m),

7,26-7,44 (8H, m)

MS(FD): 1091 (M+l)

Příklad 61

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(MorCO)PhLac₂] (kód sloučeniny č. PF 1022-249)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)PhLac]₂ (203 mg) byl rozpuštěn v methylenchloridu (10 ml) v atmosféře dusíku a k roztoku byl přidán triethylamin (0,14 ml) a ethylchlorkarbonát (0,05 ml) při -10 °C. Výsledná směs byla míchána při -10 °C 5 min. Potom byl k reakční směsi přidán morfolin (0,05 ml) při stejné teplotě, směs byla pomalu ohřívána na teplotu místnosti a míchána další 2 h.

K takto získané reakční směsi byl přidán 10% vodný roztok hydrogensíranu draselného (20 ml), a výsledná směs byla extrahována chloroformem (20 ml). Zbylá organická fáze byla opět extrahována chloroformem (20 ml), spojené chloroformové extrakty byly sušeny nad bezvodým síranem sodným a usušený organický roztok byl koncentrován za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform - ethylacetát = 4:1 ~ 1:1, a potom směsí chloroform - methanol = 50:1 ~ 20:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (120 mg) jako bílého prášku.

[oc]_D = -73,0° (c = 0,04, MeOH) •H-NMRÍCDClj): δ 0,74-1,04 (27H, m), 1,10-1,70 (15H, m),

2,70-3,23 (16H, m), 3,24-4,0 (16H, bs),

4,47 (1H, dd, J=5,l, 9,5Hz), 5,06 (1H, q, J=6,7Hz),

5,2-5,68 (6H,m), 7,18-7,37 (8H,m)

MS(FD): 1075 (M+l)

Příklad 62

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu(MorCH₂CH₂OCO)PhLac)₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-251)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(HOCO)PhLac]₂ (193 mg), HOBt, (541 mg) a morfolinethanol (0,06 ml) byly rozpuštěny v THF (5 ml), a k výslednému roztoku byl přidán DCC (118 mg). Získaná směs byla přes noc míchána při teplotě místnosti. Získaný reakční roztok byl filtrován pro odstranění nerozpustného materiálu a filtrát byl zředěn ethylacetátem (20 ml) a zředěný roztok byl postupně promyt 10% roztokem hydrogensíranu draselného (10 ml) a vodným nasyceným roztokem chloridu sodného (10 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform - methanol = 25:1), za získání v názvu uvedené sloučeniny (210 mg) jako bílého prášku.

[a]_D = -75,6° (c = 0,09, MeOH) ‘H-NMR (CDC1₃): δ = 0,70-1,08 (27H, m), 1,16-1,82 (15H, m),

2,56 (8H, t, J=4,5Hz), 2,65-3,28 (20H, m), 3,70 (8H, t, J=4,5 Hz),

4,44 (5H, m), 5,06 (1H, q, J=6,7Hz), 5,15-5,74 (6H, m),

7,32 (4H, d, J=8,2Hz), 7,96 (4H, d, J=8,2Hz)

MS(FD): 1263 (M+l)

Příklad 63

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(p-Z-Bu)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac] (kód sloučeniny č. PF102-051) a cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(p-/-Bu)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF1022-050)

-57CZ 295705 B6

K suspenzi látky PF 1022 (2,0 g) v pivaloylchloridu (10 ml) byl přidán v malých dávkách chlorid hlinitý (2,13 g) za chlazení ledem. Výsledná směs byla potom ohřívána až na 80 °C po dobu 1 h. Bezprostředně potom byl získaný reakční roztok ponechán ochladit na teplotu místnosti během 30 min. V roztoku vytvořený pevný materiál byl oddělen a rozpuštěn v ethylacetátu (4 ml). Výsledný roztok byl zředěn ethylacetátem (100 ml) a zředěný roztok byl postupně promyt studenou vodou (50 ml) obsahující koncentrovanou kyselinu chlorovodíkovou (2 ml), vodou (50 ml), vodným nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a vodným nasyceným roztokem chloridu sodného (50 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem sodným. Usušený roztok byl koncentrován za sníženého tlaku a výsledný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí ethylacetát - hexan = 1:5 ~ 1:1), za získání obou v názvu uvedených sloučenin, látky PF1022-050 (229 mg) a látky PF1022-051 (400 mg), jako bílých prášků. Dále byla získána látka PF1022 (460 mg).

Látka PF1022-050 ’H-NMR(CDC1₃): δ = 0,7-1,1 (27H, m), 1,15-1,90 (33H, m), 2,6-3,25 (16H, m), 4,47 (1H, m), 5,0-5,8 (7H, m), 7,0-7,35 (8H, m) MS(SJMS): 1060 (M+l)

Látka PF1022-051 'H-NMR (CDC1₃): δ = 0,7-1,1 (27H, m), 1,2-1,85 (24H, m), 2,64-3,20 (16H, m), 4,46 (1H, m),

5,0-5,75 (7H, m), 7,0-7,45 (9H, m)

MS(SIMS): 1005 (M+l)

Příklad 64

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(t-BuO)PhLac)₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-222)

Látka PF1022 H (3,59 g), byla rozpuštěna ve směsi methylenchloridu (36 ml) a ethylacetátu (1,8 ml), a k výslednému roztoku byl přidán izobuten (7 ml) a koncentrovaná kyselina sírová (0,6 ml) při -40 °C. Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 1 h v uzavřené reakční nádobě. Získaný reakční roztok byl opět ochlazen na-40 °C a reakční nádoba byla otevřena a byl do ní přidán znovu izobuten (7 ml). Reakční nádoba byla opět uzavřena a její obsah byl míchán při teplotě místnosti Mha potom opět ochlazen na -30 °C. Reakční nádoba byla otevřena. K získané reakční směsi byl přidán triethylamin (4 ml), a rozpouštědlo bylo odpařeno z roztoku za sníženého tlaku.

Takto získaný zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (250 ml) a získaný roztok byl postupně promyt 5% roztokem hydrogensíranu draselného a 20% vodným roztokem chloridu sodného a byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo z vysušeného roztoku odpařeno za sníženého tlaku. Zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform - ethylacetát = 2:1, v/v), za získání v názvu uvedené sloučeniny (1,43 g; 35,7 %) jako bílého prášku.

[a]_D = -113° (c = 0,1, MeOH)

Ή-NMR (CDC1₃): δ = 0,85-1,05 (27H, m), 1,32 (18H, s),

1,39 (3H, d, J=0,7), 1,41-1,93 (12H, m), 2,69-2,96 (12H, m),

3,08 (4H, m), 4,50-5,64 (8H, m), 7,02 (8H, d d)

MS(SIMS): 1093 (M+l)

Příklad 65

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(ATH)PhLac)₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-056)

Cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(CH₃CO)PhLac]₂ (kód sloučeniny č. PF 1022-48) (321 mg), který byl získán v příkladu 47, byí rozpuštěn v chloroformu (20 ml), a k roztoku byl přidán 1,56M

-58CZ 295705 B6 roztok (0,4 ml) bromu v chloroformu a 48% kyselina bromovodíková (1 kapka). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 2 h. Získaný reakční roztok byl zředěn chloroformem (30 ml) a promyt vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml). Vodná vrstva byla opět extrahována chloroformem (30 ml). Organické vrstvy (roztok v chloroformu) byly spojeny, sušeny nad bezvodým síranem sodným a zakoncentrovány za sníženého tlaku.

Výsledný zbytek byl rozpuštěn v THF (15 ml), a k roztoku byla přidána thiomočovina (96 mg), hydrogenuhličitan sodný (130 mg) a voda (1 ml). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti 1 h. Potom byl k získané směsi přidán ethylacetát (50 ml) a roztok byl promyt vodným nenasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a byl sušen nad bezvodým síranem sodným a koncentrován za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl čištěn chromatografíí na koloně silikagelu (eluce směsí chloroform - methanol = 50:1 ~ 50:2), za získání v názvu uvedené sloučeniny (216 mg) jako bílého prášku.

[a]_D = -86,2° (c = 0,11, MeOH).

'H-NMRÍCDCb) δ = 0,74-1,06 (27H, m), 1,20-1,84 (15H, m),

2,70-3,22 (16H, m), 4,48 (1H, m), 4,96 (4H, bs), 5,08 (1H, q, J=7,0Hz), 5,16-5,72 (6H, m), 5,71 (2H, s),

7,20-7,30 (4H, m), 7,64-7,76 (4H, m)

MS(elektrorozprašování): 1145 (M+l), 1167 (M+Na)

Průmyslová využitelnost

Nové cyklodepsipeptidové deriváty látky PF 1022, znázorněné obecnými vzorci I, II a III poskytované předkládaným vynálezem mají anthelmické účinky proti celé řadě hlístů nebo parazitů lidí a chovných zvířat i společenských zvířat. Jsou proto použitelné jako anthelmintické prostředky při prevenci i léčení parazitárních infekcí.

Claims (12)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Cyklodepsipeptidová sloučenina odvozená od látky PF 1022 obecného vzorce I

   -59CZ 295705 B6 kde (i) R¹ znamená atom vodíku a R² znamená kyano(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, thiokarbamoyKCj-Cejalkoxylovou skupinu, amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu se skupinou Z-butoxykarbonyl jako ochrannou skupinu aminoskupiny, N-mono(Ci-C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, N,N-di-(Ci-C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, N,N-di-((Ci-C6)alkoxy(Ci-C6)alkyl)-amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, nebo cyklický amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, kde skupina cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo je skupina R² (C3-C₆)alkoxylová skupina, která má na sobě jako substituent nasycený nebo nenasycený 5- než 6-členný heterocyklický kruh zvolený ze skupiny pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(Ci-C₆)alkyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný fenyl)-l,2,4-oxadiazol, 5-(C₃-C₆)cykloalkyl1,2,4-oxadiazol, halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný pyridin a N-alkyl-substituovaný nebo nesubstituovaný tetrahydropyrimidin, a kde tento heterocyklický kruh může dále popřípadě obsahovat jako substituent fenylovou skupinu nebo (Ci-C₆)alkylovou skupinou nebo (C₃C₆)cykloalkylovou skupinu nebo atom halogenu nebo skupinu fenyl substituovanou atomem halogenu zvoleným ze skupiny chlor, brom a fluor; nebo skupina R² je (C2-C6)alkanoylová skupina, popřípadě substituovaná substituentem zvoleným ze skupiny atom halogenu a hydroxylová skupina, nebo R² je karbamoylová skupina, N-mono-(Ci~C6)alkylkarbamoylová skupina nebo N,N-di-(Ci-C₆)alkylkarbamoylová skupina nebo cyklický aminokarbonylová skupina, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo R² je N-mono-(Ci-C6)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina, nebo N,N-di-(CiC6)alkylamino(Ci-C6)alkoxykarbonylová skupina nebo cyklický amino(Ci-C6)alkoxykarbonylová skupina, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo R² je formyloxy(Ci-C6)alkylkarbonylová skupina; nebo R² je karboxylová skupina nebo 2-aminothiazolylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou spolu identické a každá znamená kyano(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, thiokarbamoyl-(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu se skupinou Z-butoxykarbonyl jako ochrannou skupinou aminoskupiny, N-mono-(C]-C6)alkylamino(CiC6)alkoxylovou skupinu, N,N-di-(Ci~C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, N,N-di-((CiC6)alkoxy(Ci-C6)alkyl)amino(Ci-C6)alkoxyskupinou nebo cyklický amino(Ci-C6)alkoxylovou skupinu, kde skupina cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo skupina R¹ a R² každá znamená (Ci-C6)alkoxylovou skupinu, která má na sobě jako substituent navázaný nasycený nebo nenasycený 5- nebo 6-členný heterocyklický kruh zvolený ze skupiny pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(Ci-C₆)alkyl-l,2,4oxadiazol, 5-(halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný fenyl)-l,2,4-oxadiazol, 5-(C₃-Cé)cykloalkyl-l,2,4-oxadiazol, halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný pyridin a N-alkylsubstituovaný nebo nesubstituovaný tetrahydropyrimidin, a kde tento heterocyklický kruh může dále popřípadě obsahovat jako substituent fenylovou skupinu nebo (Ci-C₆)alkylovou skupinou nebo (C₃-C₆)cykloalkylovou skupinu nebo atom halogenu nebo skupinu fenyl substituovanou atomem halogenu zvoleným ze skupiny chlor, brom nebo fluor; nebo skupina R¹ a R² každá znamená (C2-C6)alkanoylovou skupinou, popřípadě substituovanou substituentem zvoleným ze skupiny atom halogenu nebo hydroxylová skupina, nebo skupina R¹ a R² každá znamená karbamoylovou skupinu, N-mono-(C1-C₆)alkylkarbamoylovou skupinou nebo N,N-di-(Ci-C₆)alkylkarbamoylovou skupinou nebo cyklický aminokarbonylovou skupinou, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo skupina R¹ a R² každá znamená N-mono-(Ci-C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxykarbonylovou skupinu, nebo N,N-di-(Ci-C6)alkylamino-(Ci-C6)alkoxykarbonylovou skupinu, nebo cyklický amino-(C]Cgjalkoxykarbonylovou skupinu, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, skupina pyrrolidino nebo skupina piperidino; nebo skupina R¹ a R² každá znamená formyloxy(Ci-C6)alkoxylkarbonylovou skupinu, nebo karboxylovou skupinu nebo 2-aminothiazolylovou skupinu a Me znamená methylovou skupinu.
2. 2. Cyklodepsipeptidový derivát podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R¹ znamená atom vodíku a R² je kyanomethoxylová skupina, thiokarbamoylmethoxylová skupina, 2-aminoethoxylová skupina a 2-(N-/-butyloxykarbonylamino)ethoxylová skupina, 2-(N-mono-(C]-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N-mono-(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(Cj-C₆)-60CZ 295705 B6 alkylamíno)ethoxylová nebo 3-(N,N-di-(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di(Ci-C₆)alkoxy(Ci-C6)alkyl)aminoethoxylová skupina, 2-morfolinoethoxylová skupina, 2-pyrrolidinoethoxylová skupina nebo 2-piperidinoethoxylová skupina; nebo R² je methoxylová skupina substituovaná heterocyklickým kruhem, kterým je pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(přímý nebo větvený Ci-C6)alkyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(popřípadě halogenem substituovaný)fenyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(C3-C6)cykloalkyl-l,2,4-oxadiazol, pyridin popřípadě substituovaný atomem halogenu nebo N-fCj-C^alkyltetrahydropyrimidm; nebo R² je acetylová skupina popřípadě substituovaná substituentem zvoleným ze skupiny atom halogenu a hydroxylová skupina; nebo R² je karbamoylová skupina, N-methylkarbamoylová skupina, N,Ndimethylkarbamoylová skupina, morfolinokarbonylová skupina, N-mono-(Ci-C6)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, N,N-di-(Ci-C₆)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, morfolinoethoxykarbonylová skupina, formyloxymethylkarbonylová skupina, karboxylová skupina, /-butylová skupina, 2-aminothiazolylová skupina nebo 2-aminothiazolylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně identické a každá jsou zvolená ze skupiny kyanomethoxylová skupina, thiokarbamoylmethoxylová skupina, 2-aminoethoxylová skupina, 2-(N-t-butyloxykarbonylamino)ethoxylová skupina, 2-(N-mono-(Ci-C6)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(Nmono-(Ci-C6)alkylanimo)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(C|”C6)-alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N,N-di(Ci-C6)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-((Ci-C6)-alkoxy-(Ci-C6)alkyl)aminoethoxylová skupina, 2-morfolinoethoxylová skupina, 2-pyrrolidinoethoxylová skupina, 2-piperidinoethoxylová skupina; nebo R¹ a R² jsou každá methoxylová skupina substituovaná heterocyklickým kruhem, kterým je pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(přímý nebo větvený Ci-C6)alkyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(popřípadě halogenem substituovaný)fenyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(C₃-C₆)cykloalkyl-l ,2,4—oxadiazol, pyridin popřípadě substituovaný atomem halogenu nebo N-((Ci-C₆)alkyltetrahydropyrimidin; nebo R¹ a R² znamenají každá acetylovou skupinu popřípadě substituovanou substituentem zvoleným ze skupiny atom halogenu a hydroxylová skupina; nebo R¹ a R² znamenají každá karbamoylovou skupinu, N-methylkarbamoylovou skupinu, Ν,Ν-dimethylkarbamoylovou skupinu, morfolinokarbonylovou skupinu, N-mono-(Ci-C₆)alkylaminoethoxykarbonylovou skupinu, N,N-di-(Ci-C₆)alkylaminoethoxykarbonylovou skupinu, morfolinoethoxykarbonylovou skupinu, formyloxymethylkarbonylovou skupinu, karboxylovou skupinu nebo 2-aminothiazolylovou skupinu.
3. 3. Cyklodepsipeptid podle nároku 1 obecného vzorce I, kde (i) R¹ je atom vodíku a R² je kyano(Ci~C6)alkoxylová skupina, thiokarbamoyl(Ci-C6)alkoxylová skupina, amino(Ci-C6)alkoxylová skupina, amino(Ci-C6)alkoxylová skupina s t-butoxykarbonylovou skupinou jako ochrannou skupinou aminoskupiny, N-mono-(Ci-C6)alkylamino-(Ci-C6)alkoxylová skupina, N,N-di-((Ci-C6)alkylamino(Ci-C6)alkoxylová skupina, N,N-di-((Ci-C6)alkoxy(Ci-C6)alkyl)amino(C]-C6)alkoxylová skupina nebo cyklický amino(C1-C6)alkoxylová skupina, kde skupina cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně identické a každá je zvolená ze skupiny kyano(Ci-C6)alkoxylová skupina, thiokarbamoyl(Ci-C₆)alkoxylová skupina, amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, amino(C|-C6)alkoxylová skupina s A-butoxykarbonylovou skupinou jako ochrannou skupinou aminoskupiny, N-mono-(Ci-C₆)alkylamino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, N,N-di((Ci-C₆)alkylamino(Ci-C₆)alkoxylová skupina nebo N,N-di-((Ci-C6)alkoxy(Ci-C₆)alkyl)amino(Ci-C₆)alkoxylová skupina, nebo R¹ a R² jsou každá cyklický amino-(Ci-C6)alkoxylová skupina, kde skupina cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino.
4. 4. Cyklodepsipeptid podle nároku 1 obecného vzorce I, kde (i) R¹ je atom vodíku, a R² je kyanomethoxylová skupina, thiokarbamoylmethoxylová skupina, 2-aminoethoxylová skupina, 2-(N-t-butyloxykarbonylamino)ethoxylová skupina, 2-(N-mono-(Ci-C6)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N-mono-(Ci-C6)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(Ci-C6)alkylamino)ethoxylová nebo S-ÍNN-di-ÍCi-Cgjalkylaminojpropoxylová skupina, 2-(N,N-di-(Ci-C6)alkoxy-(Ci-C6)alkyl)amino)ethoxylová skupina, 2-morfolinoethoxylová skupina, 2-pyrrolidinoethoxylová skupina nebo 2-piperidinoethoxylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně stejné a každá je zvolená ze skupiny kyanomethoxylová skupina, 2-aminoethoxylová skupina, 2-(N-/-butoxylkarbonylamino)ethoxylová skupina, 2-(N-mono-(C1-C₆)alkylamino)

   -61 CZ 295705 B6 ethoxylová nebo 3-(N-mono-(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di-(C!-C₆)alkylamino)ethoxylová nebo 3-(N,N-di-(Ci-C₆)alkylamino)propoxylová skupina, 2-(N,N-di(Cj-Crúalkoxy-fG-Cfijalkyljaminojethoxylová skupina, 2-morfolinoethoxylová skupina, 2pyrrolidinoethoxylová skupina nebo 2-piperidinoethoxylová skupina.
5. 5. Cyklodepsipeptid podle nároku 1 obecného vzorce I, kde (i) R¹ je atom vodíku, a R² je (Ci-C6)alkoxylová skupina, která má jako substituent takový nasycený nebo nenasycený 5- nebo 6-členný heterocyklický kruh, který je zvolený ze skupiny pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(Ci-C6)alkyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný fenyl)-l,2,4-oxadiazol, 5-(C3-C6)cykloalkyl-l,2,4-oxadiazol, halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný pyridin a N-alkylsubstituovaný nebo nesubstituovaný tetrahydropyrimidin, a kde tento heterocyklický kruh může popřípadě obsahovat jako substituent (C]-C6)alkylovou skupinu nebo (C3-C6)cykloalkylovou skupinu nebo atom halogenu nebo skupinu fenyl substituovanou atomem halogenu; nebo alternativně (ii) R¹ a R²jsou každá nezávisle (Ci-C6)alkoxylová skupina, která má jako substituent takový nasycený nebo nenasycený 5- nebo 6-členný heterocyklický kruh který je zvolený ze skupiny pyrrolidin, imidazol, thiazol, furan, tetrahydrofuran, 5-(Ci-C₆)alkyl-l,2,4-oxadiazol, 5-(halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný fenyl)-l,2,4oxadiazol, 5-(C₃-C₆)cykloalkyl-l,2,4-oxadiazol, halogensubstituovaný nebo nesubstituovaný tetrahydropyrimidin, a kde tento heterocyklický kruh může popřípadě obsahovat jako substituent (Ci-C₆)alkylovou skupinou nebo (C3-C₆)cykloalkylovou skupinu nebo atom halogenu nebo skupinu fenyl substituovanou atomem halogenu.
6. 6. Cyklodepsipeptid podle nároku 1 obecného vzorce I, kde (i) R¹ je atom vodíku a R² je (C2-C6)alkanoylová skupina popřípadě substituovaná atomem halogenu nebo hydroxylovou skupinou; nebo R² je karbamoylová skupina, N-mono-(Ci-C6)alkylkarbamoylová skupina, N,N-di-(Ci-C₆)alkylkarbamoylová skupina nebo cyklický aminokarbonylová skupina, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo R² je N-mono-(Ci-C6)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina, N,N-di-(Ci-C6)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina, cyklický amino(Ci-C6)alkoxykarbonylová skupina, ve které skupina cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo R² je formyloxy(Ci-C6)alkylkarbonylová skupina, karboxylová skupina nebo 2-aminothiazolylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně identické a jsou každá (C2-C6)alkanoylová skupina popřípadě substituovaná atomem halogenu nebo hydroxylovou skupinou; nebo R¹ a R² jsou každá karbamoylová skupina, N-mono-(Ci-C6)alkylkarbamoylová skupina, N,N-di-(Ci~C₆)alkylkarbamoylová skupina, cyklický aminokarbonylová skupina, ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo R¹ a R² jsou každá N-mono-(Ci-C₆)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina, N,N-di-(C]-C₆)alkylaminoalkoxykarbonylová skupina nebo cyklický amino(Ci-C₆)alkoxykarbonylová skupina ve které skupinou cyklický amino je skupina morfolino, pyrrolidino nebo piperidino; nebo R¹ a R² jsou každá formyloxy(Ci-C6)alkylkarbonylová skupina, karboxylová skupina nebo 2-aminothiazolylová skupina.
7. 7. Cyklodepsipeptid podle nároku 6 obecného vzorce I kde (i) R¹ je atom vodíku a R² je karboxylová skupina nebo acetylová skupina popřípadě substituovaná atomem halogenu nebo hydroxylovou skupinou; nebo R² je karbamoylová skupina, N-methylkarbamoylová skupina, Ν,Ν-dimethylkarbamoylová skupina, morfolinokarbonylová skupina, N-mono-(Ci-C6)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, N,N-di-(Ci-C6)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, morfolinoethoxykarbonylová skupina nebo formyloxymethoxykarbonylová skupina; nebo alternativně (ii) R¹ a R² jsou vzájemně identické a každá jsou karboxylová skupina nebo acetylová skupina popřípadě substituovaná atomem halogenu nebo hydroxylovou skupinou; nebo R¹ a R² jsou každá karbamoylová skupina, N-methylkarbamoylová skupina, Ν,Ν-dimethylkarbamoylová skupina, morfolinokarbonylová skupina, N-mono-(C1-C₆)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, N,N-di-(Ci-C6)alkylaminoethoxykarbonylová skupina, morfolinoethoxykarbonylová skupina nebo formyloxymethoxykarbonylová skupina.

   -62CZ 295705 B6
8. 8. Farmaceutický prostředek s anthelmintickými účinky, vyznačující se tím, že obsahuje jako aktivní složku alespoň jeden cyklodepsipeptid obecného vzorce I podle nároku 1 nebo jeho adiční sůl s kyselinou.
9. 9. Sloučenina podle nároků 2 nebo 3, kterou je cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((C₂H₅)₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac; cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-((C₂H₅)₂NHCH₂CH₂O)PhLac]₂; nebo cyklo[MeLeu-((CH₃OCH₂CH₂)₂NCH₂CH₂O)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeuPhLac-MeLeu-Lac]; kde Me je skupina methyl, Lac je zbytek kyseliny D-mléčné vzorce CH₃-CH(O)-CO, MeLeu je zbytek N-methyl-L-leucinu vzorce (CH₃)₂-CH-CH₂-CH(-CO-)N-(CH₃)- a PhLac je zbytek kyseliny D-fenylmléčné vzorce C₆H₅-CH₂-CH(-O-)-CO-.
10. 10. Sloučenina podle nároků 2, 3 nebo 4, kterou je cyklo[MeLeu-(MorCH₂CH₂O)PhLacMeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeu-Lac], kde Mor je skupina morfolino a skupiny MeLeu a PhLac jsou definovány v nároku 9.
11. 11. Sloučenina podle nároku 2 nebo 5, kterou je cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(furfuryloxy)PhLac-MeLeu-Lac-MeLeu-PhLacJ; nebo cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-(2-pikolyloxy)PhLac]₂, kde skupiny MeLeu a PhLac jsou definovány v nároku 9.
12. 12. Sloučenina podle nároku 2 nebo 7, kterou je cyklo[MeLeu-Lac-MeLeu-PhLac-MeLeuLac-MeLeu-(NH₂CO)PhLac], kde skupiny MeLeu a PhLac jsou definovány v nároku 9.