CZ292298B6

CZ292298B6 - Deriváty 11beta-benzaldoximestra-4,9-dienu, způsob jejich výroby a léčiva obsahující tyto deriváty

Info

Publication number: CZ292298B6
Application number: CZ19941970A
Authority: CZ
Inventors: Gerd Dr. Schubert; Günther Dr. Kaufmann; Lothar Dr. Sobeck; Michael Prof. Dr. Oettel; Walter Dr. Elger; Anatoli Dr. Kurischko
Original assignee: Schering Ag
Priority date: 1993-09-20
Filing date: 1994-08-15
Publication date: 2003-09-17
Also published as: SK95794A3; CA2130516C; JP2753562B2; EP0648778A3; FI943687A; NO942953L; NO942953D0; HUT68029A; JPH07149789A; HU223339B1; NO304989B1; PL305092A1; CA2130516A1; FI943687A0; EP0648778A2; CZ197094A3; FI113657B; SK280137B6; US5693628A; AU7035094A

Abstract

Jsou pops ny deriv ty 11.beta.-benzaldoximestra-4,9-dienu obecn ho vzorce I, kde symboly R.sup.1-3.n. a Z maj v²znam, uveden² v patentov²ch n roc ch, a jejich farmaceuticky p°ijateln soli, zp sob jejich v²roby a l ivo, kter obsahuje tyto deriv ty. Popsan deriv ty vykazuj siln antigestagenn · inky p°i mal glukokortikoidn aktivit .\

Description

Deriváty lip-benzaIdoximestra-4,9-dienu, způsob jejich výroby a léčiva obsahující tyto deriváty

Oblast techniky

Vynález se týká derivátů 11 P-benzaldoximestra-4,9-dienu, způsobu jejich výroby a léčiv, která obsahují tyto deriváty.

Dosavadní stav techniky

11β substituované fenylestratrieny jsou už známé. Příprava 1 ^-aryl-17a-propinylestra-4,9dienů je popsána například v patentovém spise EP 057 115, substituce 11β-(4-ίθΓπ^1ίεη>Ί)estra-4,9-dien-3-onů hydroxylaminy je popsána v patentovém spise DE 3 504 421. V uvedeném procesu se oximuje jak 11 β-formylfenylová skupina, tak také 3-ketoskupina. Mimo to vznikají C-3 syn- a anti-izomeiy. O účinku popsaných sloučenin není zatím nic známo.

Podobné sloučeniny jako v předloženém vynálezu jsou popsány v patentu DD 287 510, kde jsou uvedeny jako látky s antigestagenním účinkem. Na pozici 11 steroidu je buď fenylová skupina, dimethylaminofenolová skupina nebo 4-methoxyfenylová skupina. Tyto sloučeniny však nejsou se sloučeninami podle vzorce I předloženého vynálezu identické, neboť u sloučenin podle vzorce I jsou různé 4-oxyminomethylfenylové skupiny v pozici 11 steroidu (například 4-[hydroxyiminomethyl]fenyl, 4-[methyloxyiminomethyl]fenyl). Nedostatkem sloučenin podle uvedeného patentuje, že mají poměrně vysoký antiglukokortikoidní účinek a poměrně nízký antigestagenní účinek.

Podobné sloučeniny jsou také popsány v patentu EP 411 733, u nichž je na pozici 11 steroidu 4-formylfenylová skupina. Taková sloučenina není identická se sloučeninami podle předloženého vynálezu vzorce I, u nichž formylová skupina může být převedena na různé oxyiminomethylové skupiny. Popsané sloučeniny představují lepší zabraňování plodnosti, avšak v tomto patentu není uvedena žádná sloučenina se sníženou antiglukokortikoidní aktivitou.

Během ovulačního cyklu a těhotenství je vylučován zvaječníku a placenty ve velkých množstvích progesteron. Jeho regulační funkce asi není ve všech ohledech objasněna.

Jisté je, že progesteron spolu s estrogeny ovlivňuje změny děložní sliznice během menstruačního cyklu a těhotenství. Pod vlivem zvýšené hladiny progesteronu po ovulaci se děložní sliznice dostane do stavu, který dovolí zahnízdění embrya (blastocysty). Zachování tkání, ve kterých se rostoucí embryo rozšiřuje, rovněž závisí na progesteronu.

Během těhotenství dochází k dramatické změně svalových funkcí dělohy. Gravidní děložní sval reaguje značně oslabeně, nebo vůbec nereaguje na hormonální a mechanické dráždění, které by mimo těhotenství vyvolávalo křeče. Nemůže být pochyb, že přitom progesteron hraje klíčovou roli, ačkoliv v některých fázích těhotenství, například bezprostředně před porodem, existuje vysoká schopnost reakce při vysokých hladinách progesteronu v krvi.

Jiné typické procesy při těhotenství jsou rovněž výrazem velmi vysokých hladin progesteronu. Vývoj mléčných žláz a pevný závěr děložního hrdla až do blízkosti termínu porodu jsou toho příklady.

Progesteron se podílí na řízení ovulačních pochodů subtilním způsobem. Je známo, že progesteron ve vysokých dávkách má antiovulační vlastnosti. Tyto vyplývají z potlačení sekrece hypofyzámího gonadotropinu, která je předpokladem pro zrání folikulu a jeho ovulaci. Na druhé straně

-1 CZ 292298 B6 je známo, že relativně malá sekrece progesteronu zrajících folikulem hraje aktivní úlohu při přípravě a spuštění ovulace, zde hrají hypoíyzámí mechanismy (časově omezená, dokonce pozitivní zpětná vazba progesteronu na sekreci genadotropinu) poznatelně důležitou roli (Loutradie D., Human Reproduction 6, 1991, 1238 až 1240).

Méně dobře jsou analyzovány funkce progesteronu v samotném zrajícím folikulu a žlutém tělísku, o jejichž existenci není pochyb. Konečně se zde stimulují a brzdí účinky na endokrinní funkci folikulu a žlutého tělíska dají předpokládat.

Lze předpokládat také významnou úlohu progesteronu a receptorů progesteronu při patofyziologických procesech. Receptory progesteronu jsou dokázány v endometriosových shlucích a též v nádorech dělohy, mléčných žláz a centrálního nervového systému (meningeomy). Úloha receptorů progesteronu pro růstové poměry těchto patologicky relevantních tkání není nutně vázána na přítomnost hladin progesteronu v krvi. Je dokázáno, že látky, které jsou charakterizovány jako antagonisty progesteronu, RU 486 = Mifepriston (EP 0 057 115) a ZK 98299 = Onapriston (DE-OS 35 04 421) vyvolávají v těchto tkáních hluboko sahající změny funkcí i tehdy, když jsou v krvi přítomny zanedbatelně malé hladiny progesteronu. Zdá se možné, že přitom hrají důležitou úlohu změny transkripčních účinků progesteronem neobsazených receptorů progesteronu vyvolané antagonisty (Chwalisz, K. a kol., Endocrinology, 129, 317 a 322, 1991).

Účinky progesteronu v tkáních pohlavních orgánů a jiných tkání jsou důsledkem interakce s receptory progesteronu. V buňce se váže progesteron s vysokou afinitou na svůj receptor. Tím se vyvolávají změny bílkovin receptorů: změny konformace, dimerace dvou jednotek receptorů na jediný komplex, změna vazného místa DNA receptorů oddisociováním proteinu (HSP 90), vazba na prvky DNA odpovědné pro hormony. Konečně se reguluje transkripce jistých genů. (Gronemeyer, H a kol., J. Steroid. Biochem. Molec. Biol. 41 3-8,1992).

Účinek progesteronu nebo antagonistů progesteronu nezávisí jen na jejich koncentraci v krvi. Koncentrace receptorů v buňce je rovněž velmi regulována. Estrogeny stimulují syntézu receptorů progesteronu ve většině tkání. Progesteron brzdí syntézu receptorů estrogenu a oba svým vlastních receptorů. Snad jsou to tyto a jiné interaktivní vztahy mezi estrogeny a gestageny, které mohou objasnit, proč gestageny a antigestageny mohou ovlivňovat pochody závislé na estrogenu, aniž by se vázaly na receptor estrogenu. Tyto vztahy mají přirozeně velký význam pro terapeutické použití antigestagenů. Tyto látky se zdají vhodné pro cílený zásah do reprodukčních pochodů ženy, například po ovulaci, aby zabránily nidaci a v pozdním těhotenství zvýšily reakční schopnost dělohy pro prostaglandiny a oxytocin, nebo pro dosažení otevření a změknutí („dozrání“) hrdla.

Antigestageny brání ovulaci u různých druhů subhumánních primátů. Mechanismus tohoto účinku není jednoznačně objasněn. Vedle potlačení sekrece gonadotropinu se diskutují také vaječníkové mechanismy rušení para- a autokrinních funkcí progesteronu ve vaječníku.

Antigestageny mají schopnost modulovat nebo zeslabovat účinky estrogenu, ačkoliv samy převážně nemají na cytoplazmatické úrovně žádnou afinitu k receptorů estrogenu a ačkoliv mohou vyvolat růst koncentrace receptorů estrogenu. Od odpovídajících účinků lze očekávat v endometriosových shlucích a nádorových tkáních, které jsou vybaveny receptory progesteronu a estrogenu, příznivé ovlivnění nemocných stavů. Zvláštní výhody pro příznivé ovlivnění nemocných stavů, jak endometriosy by se pak mohly dosáhnouť kdyby k brzdicímu účinku antigestagenu v tkáni se přidalo potlačení ovulace. S potlačením ovulace by odpadla i část hormonální vaječníkové produkce, a tím i na tuto část připadajícího stimulujícího účinku na patologicky změněné tkáně. Bylo by žádoucí při existenci těžké endometriosy potlačit ovulaci do klidového stavu.

-2CZ 292298 B6

Rovněž pro antikoncepci se diskutuje postup, při kterém se potlačuje ovulace podáváním antigestagenu a následujícím podáváním gestagenu se indukuje sekretorická transformace endometria, takže ze dnů podávání antigestagenu a gestagenu a volných dnů vzniká asi 28denní cyklus s pravidelnými menstruačními krváceními (Baulieu, E.E., Advances in Contraception 7,

345-51, 1991).

Antigestageny mohou mít různé hormonální a antihormonální schopnosti. Zvlášť terapeuticky významné jsou přitom antiglukokortikoidní vlastnosti. Ty jsou nevýhodné pro terapeutické použití, při kterých v popředí terapie stojí blokování receptorů progesteronu, protože při terapeuticky nutných dávkách vyvolávají nežádoucí vedlejší účinky, které zabraňují aplikaci terapeuticky smysluplné dávky nebo mohou vést k přerušení léčby. Částečná nebo úplná redukce antiglukokortikoidních vlastností je důležitým předpokladem pro terapii antigestageny, zejména při těch indikacích, které vyžadují léčbu trvající týdny a měsíce.

Podstata vynálezu

Úkolem vynálezu je poskytnout deriváty 11 P-benzaldoximestra-4,9-dienu obecného vzorce I

a jejich farmaceuticky přijatelných solí, jakož i způsob jejich výroby. Dalším úkolem je poskytnuti léčiv, která obsahují derivát obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, a která by měla vysoký antigestagenní účinek a současně malý antiglukokortikoidní účinek.

Nevýhody a nedostatky známých derivátů 11 p-benzaldoximestra-4,9-dienu odstraňují a uvedené úkoly splňují deriváty 11 p-benzaldoximestra-4,9-dienu obecného vzorce I

kde R¹ je vodíkový atom nebo alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R² je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo skupina -CONHR⁴nebo -COOR⁴,

-3CZ 292298 B6 kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

R³ znamená vodíkový atom nebo alkylovou, arylovou, aralkylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -ÍCH₂)n-CH₂X, kde n = 0, 1 nebo 2, X představuje atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, skupinu kyan-, azido- nebo thiokyanato-, skupinu OR⁵ nebo SR⁵, kde R⁵ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupin vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu OR⁵, kde R⁵ má shora uvedený význam, skupinu -(CH₂)₀-CH=CH(CH₂)p-R⁶ kde o = 0, 1,2 nebo 3 a p = 0, 1 nebo 2, R⁶ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, hydroxylová skupina, alkoxylová nebo acyloxylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -(CH₂)_qCsCR⁷, kde q = 0, 1 nebo 2, R⁷ představuje atom vodíku, fluoru, chloru, bromu nebo jodu, alkylovou, arylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

Z představuje vodíkový atom nebo alkylovou, arylovou, aralkylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

Z dále znamená alkalický kov nebo kov alkalických zemin, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Výhodné deriváty podle vynálezu jsou ty, kde R¹ je methylová nebo ethylová skupina,

R² je vodíkový atom nebo alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo skupina -CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová nebo arylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

R³ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

R³ je skupina -(CH₂)_n-CH₂X, kde n = 0, 1 nebo 2, X představuje atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, skupinu kyanazido- nebo thiokyanato-, skupinu OR⁵ nebo SR⁵,

-4CZ 292298 B6 kde R⁵ je alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo acylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy, skupina OR⁵, kde R⁵ je vodíkový atom, alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupina -(CH₂)_O-CH=CH(CH₂)_P-R⁶ kde o = 0, 1,2 nebo 3 a p = 0, 1 nebo 2, R⁶ je vodíkový atom, alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, hydroxylová skupina, alkoxylová nebo acyloxylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupina -(CH₂)_qC=CR⁷, kde q = 0, 1 nebo 2, R⁷ představuje atom vodíku, fluoru, chloru, bromu nebo jodu, alkylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

Z představuje vodíkový atom nebo alkylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -CONHR⁴ nebo -COOR, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

Z dále znamená alkalický kov nebo kov alkalických zemin.

Ještě výhodnější jsou deriváty podle vynálezu, kde R² je alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo skupina -CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová nebo arylová skupina vždy s 1 až 6 uhlíkovými atomy, *

R³ je vodíkový atom nebo alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R³ je skupina -(CH₂)_n-CH₂X, kde n = 0, 1 nebo 2, X představuje atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, skupinu kyan-, azido-n nebo thiokyanato-, skupinu OR⁵ nebo SR⁵, kde R⁵ je alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo acylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy, skupina OR⁵, kde R⁵ je alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo acylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy, skupina-(CH₂)_O-CH=CH(CH₂)_P-R⁶, kde o = 0, 1,2 nebo 3 a p = 0, 1 nebo 2, R⁶ je alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy, alkoxylová nebo acyloxylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy, skupina -<CH₂)_qC CR⁷, kde q = 0, 1 nebo 2, R⁷ představuje alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo acylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

Z představuje alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, acylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, skupinu -CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová nebo arylová skupina vždy a 1 až 10 uhlíkovými atomy.

-5CZ 292298 B6

Přednost se dává derivátům obecného vzorce I, vybranými ze skupiny zahrnující:

β-[4—(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7p-hydroxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on,

P~[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-hydroxy-l 7a-ethoxymethylestra-4,9-dien-3-on, p-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-hydroxy-l 7a-n-propoxymethylestra-4,9-dien-3-on,

P-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-hydroxy-l 7a-iso-propoximethylestra-4,9-dien-3on, β-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7β-methoxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on, llβ-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17β-methoxy-17α-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on, β-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7β—hydroxy—17a-(hydroxyprop-l-inyl)estra-4,9-dien3-on, β-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7β-methoxy-l 7a-(3-hydroxyprop-l-inyl)estra-4,9dien-3-on, β-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7β-hydroxy-l 7a-Z-(3-hydroxypropenyl)estra-4,9dien-3-on,

P-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l7 β-methoxy-l 7a-Z-(3-hydroxypropenyl)estra-4,9dien-3-on,

17a-chlormethyl-l 1 β-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7β-hydroxyestra-4,9-dien-3-on,

17a-chlormethyl-l 1 β-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7β-methoxyestra-4,9-dien-3-on,

17a-kyanmethyl-l 1 β-[4-{hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-1^π^β5ύ·3-4,9-<1ί6η-3-οη₅

17a-kyanmethyl-l lβ-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17β-methoxyestra-4,9-dien-3-on,

17a-azidomethyl-l 1 β-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7β-methoxyestra-4,9-dien-3-on, β-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-methoxy-l 7a-methylthiomethylestra-4,9-dien-3on, β-[4-(methyloxyiminomethyl)fenyl]-l 7β-methoxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3on, β-[4-(acetoxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-methoxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on, β-[4-(methyloxyiminomethyl)fenyl]-l 7β-hydroxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3on, llβ-{4-[(ethoxykarbonyl)oxyiminomethyl]fenyl}-17β-methoxy-17α-methoxymethylestra4,9-dien-3-on, llβ-{4-[(ethylaminokarbonyl)oxyiminomethyl]fenyl}-17β-methoxy-17α-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on,

-6CZ 292298 B6

1Ί β-methoxy-l 7a-methoxymethyl-l 1 β-{ 4-[(fenylaminokarbonyl)oxyiminomethyl]fenyl} estra-4,9-dien-3-on a |3-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7p-ethoxy-l 7a-ethoxymethylestra-4,9-dien-3-on.

Vynález se dále týká způsobu výroby derivátů obecného vzorce I, kde Z znamená vodíkový atom, alkylovou skupinu, acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy, -CONHR⁴, -COOR⁴, alkalický kov nebo kov alkalických zemin, přičemž ostatní substituenty jsou jako v nároku 1, a jejich farmaceuticky přijatelných solí, při kterém se derivát obecného vzorce II

kde R¹ je vodíkový atom nebo alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R² je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo skupina -CONHR⁴nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

R³ znamená vodíkový atom nebo alkylovou, arylovou, aralkylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atom,y skupinu -(CH₂)_n-CH₂X, kde n = 0, 1 nebo 2, X představuje atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, skupinu kyanazido- nebo thiokyanato-, skupinu OR⁵ nebo SR⁵, kde R⁵ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu OR⁵, kde R⁵ má shora uvedený význam, skupinu -(CH₂)₀-CH=CH(CH₂)p-R⁶ kde o=l,2 nebo 3 a p = 0, 1 nebo 2, R⁶ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, hydroxylová skupina, alkoxylová nebo acyloxylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -(CH₂)_qC=CR⁷, kde q = 0, 1 nebo 2, R⁷ představuje atom vodíku, fluoru, chloru, bromu nebo jodu, alkylovou, arylovou, aralkylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy, nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce Ha

NH₂-O-Z (Ha), kde Z je vodíkový atom, nebo se sloučeninou obecného vzorce Ha, která se tvoří in šitu, za vzniku derivátu obecného vzorce I, kde Z je vodíkový atom, přičemž získaný derivát se případně podrobí esterifikaci nebo eterifikaci za vzniku derivátu obecného vzorce I, kde Z je alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo skupina -CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, nebo se získaný derivát obecného vzorce I převede na sůl, kde Z je alkalický kov nebo kov alkalických zemin.

Reakce derivátů obecného vzorce II a sloučeniny obecného vzorce Ila probíhá výhodně, když se nechají reagovat v ekvimolámích množstvích.

Při žádoucí esterifikaci, eterifikaci nebo tvorbě uretanů derivátů obecného vzorce Π, u nichž je skupina R² nebo Z hydroxyl, lze esterifikaci provádět o sobě známým způsobem pomocí acylač- nich prostředků, jako anhydridů nebo chloridů kyselin v přítomnosti bází, s výhodou pyridinu, eterifikaci methyljodidem v přítomnosti bází, s výhodou terč.butanolátu draselného, nebo tvorbu uretanů reakcí a alkyl nebo aiylizokyanáty v inertních rozpouštědlech, s výhodou toluenu, nebo reakcí karbonylchloridů v přítomnosti bází, s výhodou triethylaminu.

(srovnej například Nédélec, Bull. Soc. Chim. France 1970,2548).

Zavedení fenylové skupiny do polohy 11β za vzniku 69(10),5a-hydroxystruktury obecného vzorce IV se dosáhne Grignardovou reakcí katalyzovanou měďnou solí (Tetrahedron Letters, 1979, 2051) s p-brombenzaldehydketalem, s výhodu s p-brombenzaldehyddimethylketalem při teplotách mezi 0 až 30 °C.

-8CZ 292298 B6 (iv)

Zavedení skupiny -(CH₂)_nCH₂X se dosáhne o sobě známým způsobem přes spiroepoxid obecného vzorce V substitucí trimethylsulfonium jodidem a rerc.butanolátem draselným v dimethylsulfoxidu (Huebner a kol., J. pakt. Chem. 314, 667 (1972), Arzneim. Forsch, 30, 5 401 (1973))

a následujícím otevřením kruhu nukleofily, jako halogenidy a pseudohalogenidy, alkoholáty a merkaptidy (Ponsolf a kol., Z. Chem. 11,106 (1971)).

Přitom vznikající 17a-CH₂X sloučeniny obecného vzorce VI

se nechají rozštěpit kyselou hydrolýzou, s výhodou kyselinou p-toluensulfonovou v acetonu (Teutsch a kol., DE 2 801 416) na aldehydy obecného vzorce Π, kde R² je vodíkový atom, nebo po eterifíkaci volné hydroxylové skupiny alkylhalogenidy v přítomnosti terč, butanolátu draselné15 ho převést nejprve na 5α,17β diéter (Kasch a kol. DD 290 893), který se pak kyselou hydrolýzou,

-9CZ 292298 B6 s výhodou kyselinou p-toluensulfonovou v acetonu převede na aldehydy obecného vzorce Π, kde

R² je alkylová skupina, s výhodou methylová skupina.

Zavedení skupiny -(CH2)₀-CH=CH(CH₂)p-R⁶ se dosáhne reakcí ketonu IV s propin-l-ol-tetrahydropyranyléterem a /erc.butanolátem draselným v dimethylsulfoxidu na 17a-(3-hydroxy-lpropinyl)-17p-hydroxy-sloučeniny obecného vzorce VII

CCH₂OH (Vil) jež se nechají buď rozštěpit kyselou hydrolýzou ze shora uvedených podmínek na aldehydy obecného vzorce II, kde R² je vodíkový atom, nebo po tvorbě 5a,17[3-diéteru shora uvedeným postupem s následující kyselou hydrolýzou převést na aldehydy obecného vzorce Π, kde R² je alkylová skupina, ale také se mohou hydrogenovat o sobě známou reakcí na dezaktivovaných katalyzátorech, jako je 10% palladium na síranu bamatém v přítomnosti aminu na 17a-(3-hydroxypropenyl)-17[3-hydroxy-sloučeniny, které po kyselé hydrolýze rovněž přejdou na aldehydy obecného vzorce II.

Zavedení skupiny -(CFhjqOCR⁷ se dosáhne o sobě známým způsobem reakcí ketonu IV s acetylenem, propinem nebo vyššími homology v přítomnosti alkalických kovů, jako je lithium, sodík nebo draslík spolu s alkoholem nebo amoniakem, ale též s butyllithiem v éterech, jako je tetrahydrofuran. Kyselá hydrolýza těchto sloučenin vede k 17a-OR⁷ substituovaným aldehydům obecného vzorce II.

Případně se deriváty obecného vzorce I podle tohoto vynálezu převedou na kyselé adiční soli přídavkem farmaceuticky přijatelné kyseliny. Běžné fyziologicky snesitelné anorganické kyseliny jsou například kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná, kyselina oxalová, kyselina malonová, kyselina fumarová, kyselina mléčná, kyselina vinná, kyselina jablečná, kyselina citrónová, kyselina salicylová, kyselina adipová a kyselina benzoová. Další použitelné kyseliny jsou popsány například v Forschritte der Arzneimittelfurschung, sv. 10, str. 224 až 225, Birkhaeuser Verlag, Basel und Stuttgart, 1966 a Joumal of Pharmaceutical Sciences, sv. 66, strany 1 až 5 (1977).

Kyselé adiční soli se získají zpravidla o sobě známým způsobem smícháním volné báze nebo jejích roztoků s odpovídající kyselinou nebo jejími roztoky v organickém rozpouštědle, například nižším alkoholu, jako je methanol, ethanol, n-propanol, 2-propanol, nebo nižším ketonu, jako je aceton, methylethylketon nebo methylizobutylketon, nebo v éteru, jako je diethyléter, tetrahydrofuran nebo dioxan. Pro lepší tvorbu krystalů se mohou použít i směsi jmenovaných rozpouštědel. Mimo to se mohou připravit fyziologicky snesitelné vodné roztoky kyselých adičních solí derivátů obecného vzorce I ve vodném roztoku kyseliny.

Kyselé adiční soli sloučenin obecného vzorce I se mohou o sobě známým způsobem, například pomocí alkálií nebo iontoměničů, převést na volné báze. Z volné báze se dají získat další soli reakcí s anorganickými nebo organickými kyselinami, zvláště takovými, které jsou vhodné k tvorbě terapeuticky použitelných solí. Tyto, jakož i další soli sloučeniny, jako například pikrát,

-10CZ 292298 B6 mohou sloužit k čištění volné báze, při kterém se volná báze převede na sůl, ta se oddělí a ze soli se opět uvolní báze.

Předmětem tohoto vynálezu jsou také léčiva k orálnímu, rektálnímu, podkožnímu, intravenóznímu nebo intramuskulámímu podávání, které vede obvyklých nosičů a ředidel obsahují jeden derivát obecného vzorce I nebo jeho kyselou adiční sůl jako účinnou látku.

Léčiva podle tohoto vynálezu se dají připravit známými technikami pomocí obvyklých pevných nebo kapalných nosičů a ředidel a obyčejně používaných farmaceutických pomocných látek tak, aby odpovídaly žádanému způsobu aplikace s vhodným dávkováním. Dává se přednost úpravě, která je vhodná k orální aplikaci. Takové úpravy jsou například tablety, filmové tablety, dražé, kapsle, pilulky, prášek, roztoky nebo suspenze nebo depotní formy.

Samozřejmě v úvahu připadají i parenterální úpravy, jako injekční roztoky. Dále se zmiňují čípky jako možná úprava.

Vhodné tablety lze získat například smícháním účinné látky se známými pomocnými látkami, například inertními ředidly, jako je dextróza, cukr, sorbit, mannit, polyvinylpyrrolidon, rozpukávajícími látkami, jako je kukuřičný škrob nebo kyselina alginová, vaznými prostředky, jako jsou škroby nebo želatina, mazivy, jako je stearát hořečnatý nebo klouzek, anebo prostředky k dosažení účinku depotu, jako jsou karboxylpolymethylen, karboxymethylcelulóza, acetátftalát celulózy nebo polyvinylacetát. Tablety se mohou skládat i z mnoha vrstev.

Odpovídajícím způsobem lze získat dražé potažením jader získaných analogicky tabletám pomocí prostředků obvykle používaných k potahování dražé, například polyvinylpyrrolidonu, šelaku, arabské gumy, klouzku, oxidu titaničitého nebo cukru. Přitom se i schránky dražé mohou skládat z mnoha vrstev, přičemž lze použít pomocné látky uvedené shora u tablet.

Roztoky nebo suspenze s účinnou látkou podle tohoto vynálezu mohou navíc obsahovat látky zlepšující chuť, jako sacharin, cyklamát nebo cukr, jakož i například aromatické látky, jako vanilin nebo pomerančový extrakt. Mimoto mohou obsahovat pomocná suspendující činidla, jako je sodná sůl karboxylmethylcelulózy nebo konzervační látky, jako p-hydroxybenzoáty. Kapsle obsahující účinnou látku lze připravit například tak, že se účinná látka smíchá s inertním nosičem, jako je mléčný cukr nebo sorbit, a vloží do želatinových kapslí.

Vhodné čípky je možno připravit například smícháním s inertním nosičem, jako jsou neutrální tuky nebo polyethylenglykol, případně jejich deriváty.

β-substituované benzaldoximestra-4,9-dieny podle tohoto vynálezu jsou sloučeniny santigestagenním účinkem, které při stejné aktivitě jako RU 486 (Mifopriston) nebo receptor progesteronu (srovnej tabulku 1) případně silnějším účinku in vivo (srovnej obr. 1 a tabulku 2) mají ve srovnání s RU 486 znatelně sníženou antiglukokortikoidní aktivitu, dokázanou sníženou tvorbu glukokortikoidních receptorů (srovnej tabulku 1), jakož i řádově desetinásobně menší potlačení indukce enzymu v buněčných liniích (srovnej obr. 2 a 3).

Popis obrázků

Na obr. 1 je znázorněn vliv podávání antigestagenů na kolísání hmotnosti dělohy u morčat během ovulačního cyklu.

Vysoké dávky RU 486 (6 mg/den) snižují hmotnosti dělohy ošetřovaných zvířat. Nízké dávky této látky vedou naproti tomu k malému zvýšení hmotnosti dělohy. Všechna zkoušená dávkování J 867 (1,3 případně 6 mg/den) naproti tomu potlačují významně hmotnosti dělohy.

-11 CZ 292298 B6

Na obr. 2 je porovnán antiglukokortikoidní účinek J 867 s účinkem RU 486. Obr. 2 znázorňuje inhibici indukce TAT v buněčných liniích lidského tumoru mléčných žláz ZR75/AGP-763 při indukci ΙΟ’⁷ M Dexamethasonem.

Dexamethason indukuje v této buněčné linii gen chloramfenikoltransferázy (CAT). Tato indukce je potlačena antiglukokortikoidními látkami. J 867 potlačuje překvapivě v širokém rozmezí koncentrací CAT méně silně než RU 486 (Mifepriston).

Na obr. 3 je rovněž porovnán antiglukokortikoidní účinek J 867 s účinkem RU 486. Obr. 3 znázorňuje inhibici indukce TAT v buněčných liniích krysího hepatomu H4-IIe při indukci ΙΟ'⁸ M Dexamethasonem.

V buněčných liniích krysího hepatomu stimuluje Dexamethason enzym tyrosinaminotransferázu (TAT). Tento účinek je potlačen antiglukokortikoidními aktivitami. J 867 účinkuje zde zřetelně slaběji antiglukokortikoidně než RU 486.

Tabulka 1

Tvorba receptorů vybranými, v příkladech 1 až 5 uvedenými sloučeninami

Sloučenina podle příkladu č. 100%	Relativní molámí vazná afinita (RVA %)
progesteronu progesteron	Receptory glukokortikoidní dexamethason	estrogenu estradiol
J(J8674)	302	78	pod 0,1
2	136	82	pod 0,1
3	236	73	pod 0,1
4	294	66	pod 0,1
5	90	32	pod 0,1
pro srovnání RU 486
(Mifepriston)	506	685
ZK 98299 (Onapriston)	22	39

Vybrané antigestageny podle toho vynálezu (J 687) vedou u morčat v cyklu vzhledem k statisticky významným snížením hmotnosti dělohy při dávkách, při kterých RU 486 vzhledem ke kontrole hmotnosti dělohy zvyšuje.

Tato kombinace vlastností dovoluje očekávat od antigestagenů podle tohoto vynálezu převažující potlačení progesteronu při současné redukci antiglukokortikoidní aktivity. Tato výhoda je zvláště relevantní s ohledem na indikace, které vzhledem k trvání léčby vyžadují zvláště dobrou snášenlivost. V cykluje určována hmotnost dělohy převážně cirkulujícími estrogeny. Snížené hmotnosti dělohy jsou výrazem potlačení této funkce estrogenu. Nalezené snížení hmotnosti dělohy v cyklu morčat, lepší než u RU 486, je důkazem (nepřímých) antiestrogenních vlastností derivátů podle tohoto vynálezu. Od odpovídajících účinků lze očekávat zvlášť příznivé ovlivnění patologicky změněných tkání, ve kterých se projevují estrogenní impulzy k růstu (endometriosové shluky, myomy, nádory mléčných žláz a genitálií, benigní hypertrofie prostaty).

-12CZ 292298 B6

Tabulka 2

Účinek RU 486 a J 867 (příklad 1)) na časný potrat u krys po subkutánní aplikaci v 5. až 7. dni gravidity (aplikace 0,2 ml/zvíře/den v benzylbenzoátu/ricinový olej [1:4 objemově]).

Skupina sloučenina	Dávka ml/zvíře/ den	Úplné potlačení gravidity +	ED 50 ++ ml/zvíře/den
N*/N	%
Vehikulum	—	0/13	0	/
RU486	3,0	5/5	100
	1,0	2/5	40	1,3
	0,3	0/5	0
J486	3,0	5/5	100
	1,0	5/5	100	0,6
	0,3	0/5	0
	0,1	0/5	0

+ prázdné dělohy

N počet oplodněných samic N* počet negravidních samic ++ grafické stanovení

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

434 mg 1 l[3-(4-formylfenyl)-173-methoxy-17a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-onu se rozpustilo při pokojové teplotě v 8 ml pyridinu a nechalo se reagovat s 65 mg hydroxylamin hydrochloridu. Míchalo se při 25 °C. Po 2 hodinách se přidalo dalších 5 mg hydroxylamin hydrochloridu a roztok se po 15 minutách zředil vodou 10% kyselinou solnou. Extrahovalo se chloroformem, organická fáze se promyla zředěnou kyselinou solnou a vodou, vysušila nad síranem sodným a uhličitanem draselným a rozpouštědlo se odpařilo za sníženého tlaku. Získalo se 420 mg surového produktu. Po přední acetonu vypadly krystaly, které se odsály a rekrystalovaly z izopropanolu/methylenchloridu.

Získalo se 305 mg 11β—(4—hydroxyiminomethyl)feny 1)-17β-methoxy-l 7a-methoxymethy 1estra-4,9-dien-3-onu.

Teplota tání 118 °C, za rozkladu.

do = 197° (chloroform).

IR-spektrum v chloroformu (cm⁴): 3575, 3300 (OH); 1705 (C=NOH); 1649 (C=C-C=C-C=O); 1599 (fenyl).

UV-spektrum v MeOH:

Xmax = 264 nm, ε = 20366,

Xmax = 299 nm, ε = 20228.

’Η-NMR-spektrum (δ ppm vCDC1₃): 0,533 (s, 1H, H-18); 3,252 (s, 3H. 17p-OCHj); 3,393 (s,3H, Ha-CHíOCHj); 3,441 až 3,598 (m, 2H, ABX-systém, -CHzOCHj); 4,381 (d, 1H, J=6,9 Hz, H-lla); 5,788 (s, 1H, H-4); 7,187 až 7,487 (m, 4H, AA BB -soustava protonů aromátů); 8,05 (s, 1H, OH); 8,097 (s, 1H, CH=NOH).

MS m/e: 449,25509. C₂₉H₃₅NO₄ M⁺

-13CZ 292298 B6

Příprava výchozích sloučenin:

Stupeň A g 4-brombenzaldehydu a 30 ml triethylesteru kyseliny o-mravenčí se míchalo v 60 ml methanolu s 0,8 ml thionylchloridu při pokojové teplotě 5 hodin. Pak se přidalo dalších 0,2 ml thionylchloridu a po 30 minutách se směs vlila do vodného roztoku kyselého uhličitanu. Extrahovalo se chloroformem, promylo se vodným roztokem kyselého uhličitanu a vodou, sušilo nad síranem sodným a koncentrovalo se za sníženého tlaku. 68 g brombenzaldehyddimethylketalu se získalo jako bezbarvý olej.

K 2,3 g hořčíku v 20 ml bezvodého THF se přidalo pod argonem jako ochrannou atmosférou 0,2 dibrommethanu a po zahájení reakce se přikapalo 21,96 g 4-brombenzaldehyddimethylketalu v 70 ml bezvodého THF tak, aby se nepřekročila teplota 40 °C. Po ukončení přidávání se míchalo 2 hodiny při 30 °C, nakonec se ochladilo na -10 °C a spojilo s 511 mg CuCl. Dále se míchalo 15 minut při -30 °C a pak se přidal po kapkách roztok 3,3-dimethoxy-5a,10a-epoxyestr-9(l 1)en-17-onu v 30 ml bezvodého THF. Nechalo se ohřát na pokojovou teplotu a Grignardův roztok se rozložil vodným roztokem chloridu amonného. Produkt se izoloval extrakcí ethylacetátem, organická fáze se promyla za neutrální reakce a sušila se nad síranem sodným. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získalo 19,7 g surového produktu.

Chromatografie na 300 g silikagelu a 20 g oxidu hlinitého s gradienty toluen/ethylacetát dala 7,38 g 3,3-dimethoxy-l 1 (3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-5a-hydroxyestr-9(l 1 )-en-l7-onu jako žluté pěny.

Stupeň B

7,38 g 3,3-dimethoxy-l l|3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]5a-hydroxyestr-9-en-17-onu se rozpustilo v 85 ml dimethylsulfoxidu a pod argonem jako ochrannou atmosférou se přidalo po kapkách 10,38 g trimethylsulfoniumjodidu a po částech 7,64 g rerc.butanolátu draselného. Po 1,5 hodině se ochladilo na 0 až 5 °C a směs se rozložila vodným roztokem chloridu amonného. Produkt, vypadávající jako lepivá hmota, se izoloval extrakcí methylenchloridem, promyl se za neutrální reakce a sušil nad síranem sodným. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získal jako hnědá pryskyřice.

Výtěžek 8,63 g 3,3-dimethoxy-l l[3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]17|3-spiro-r,2'-oxiranestr-9en-5a-olu.

Stupeň C

8,63 g 3,3-dimethoxy-l 1β-[4—(dimethoxymethyl)fenyl]-17p-spiro-l',2'-oxiranestr-9-en-5aolu se rozpustilo v 20 ml methanolu. Přidalo se 20 ml 3N roztoku methylátu sodného a zahřívalo se 2 až 3 hodiny pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo se odpařilo za sníženého tlaku, zbytek rozpustil v methylenchloridu, promyl se za neutrální reakce, sušil nad síranem sodným a odpařil za sníženého tlaku.

Získalo se 8,74 g surového produktu jako hnědá pěna. Chromatografie na 260 g silikagelu a 90 g oxidu hlinitého s gradienty toluen/ethylacetát dala 1,92 g 3,3-dimethoxy-l lp-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-l 7a-dimethoxymethylestr-9-en-5a, 17 β—diolu.

-14CZ 292298 B6

Stupeň D

K 1,92 g 3,3-dimethoxy-l lp-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-17a-dimethoxymethylestr-9-en5a,17|3-diolu ve 120 ml toluenu pod inertním plynem se přidalo 8,65 g Zerc.butanolátu draselného. Suspenze se míchala 5 minut a přidalo se po kapkách 6,35 ml methyljodidu v 6 ml toluenu tak, aby se nepřekročila teplota 40 °C. Po 1 hodině se přidalo 20 ml vody a 20 ml ethylacetátu, fáze se oddělila a vodná fáze se ještě extrahovala ethylacetátem. Organická fáze se promyla za neutrální reakce a sušila se nad síranem sodným. K odpaření rozpouštědla došlo za sníženého tlaku.

Získalo se 1,55 g 3,3-dimethoxy-ll|3-[4-(3,3-dimethoxymethyl)fenyl]-17a-dimethoxymethylestr-9-en-5a,17[3-dimethyléteru jako žluté pěny.

Stupeň E

1,55 g 3,3-dimethoxy-l 1 p-[4-(3,3-dimethoxymethyl)fenyl]-l7a-dimethoxymethylestr-9-en5a,17|3-dimethyléteru se rozpustilo v 12,6 ml acetonu a smíchalo se 1,3 ml vody. Pod inertním plynem se přidalo 158 mg 4-toluensulfonové kyseliny. Míchalo se 40 minut při pokojové teplotě a břečka krystalů se odsála, promyla acetonem a rekrystalizovala z methylenchloridu/acetonu.

Výtěžek: 0,55 g bezbarvých krystalů.

Nové rekrystalizování z methylenchloridu/acetonu dalo 440 mg 11 P-(4-formylfeny 1)-17β-methoxy-17a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-onu.

Teplota tání 233 až 240 °C.

a_D= 189° (chloroform).

IR-spektrum v chloroformu (cm'¹): 1710 (CHO); 1660 (C=C-C=C-C=O); 1610 (fenyl).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 262 nm, ε = 10775,

Xmax = 299 nm, ε = 13999.

'H-NMR-spektrum (δ ppm v CDC1₃): 0,4 (s, 3H, H-18); 3,25 (s, 3H, Πβ-ΟΟΗ,); 3,38 (s, 3H, 17a-CH₂OCH3); 4,40 (d, 1H, J = 7,2 Hz, H-l la); 5,78 (s, 1Z, H-4); 7,28 až 7,93 (m, 4H AA', BB-soustava protonů aromátů); 9,95 (s, 1H, CHHO).

MS m/e: 434,24771. C₂₈H₃₄O₄ M⁺

Příklad 2

217 mg ll[3-(4-formylfenyl)-17(3-methoxy-17a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-onu se rozpustilo při pokojové teplotě ve 4 ml pyridinu a nechalo se reagovat s 40 mg hydroxylamin hydrochloridu. Po 1 hodině se přidalo dalších 5,2 mg hydroxylamin hydrochloridu. Přidalo se po 10 ml vody a ethylacetátu, fáze se oddělily a vodná fáze se ještě extrahovala. Organická fáze se promyla 10 ml zředěné kyseliny solné a destilovanou vodou do neutrální reakce. Sušilo a odpařovalo se za sníženého tlaku. Získalo se 241 mg surového produktu jako pryskyřice. Preparativní sloupcová chromatografie na silikagelu 60 PF₂₅₄₊₃₆6 elucí směsi toluen/aceton 4:1 dala 188 mg produktu jako pěny.

Rekrystalizace zaceton/hexanu dala ll[3-[4-(niethoxyiminomethyl)fenyl]-17[3-methoxy-17amethoxymethylestra-4,9-dien-3-on jako bezbarvé lupínky.

- 15CZ 292298 B6

Teplota tání 83 až 89 °C.

a_D = 197° (chloroform).

IR-spektrum v chloroformu (cm'¹): 1700 (C=NOCH₃); 1649 (C=C-C=C-C=O); 1590 (aromát).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 275 nm, ε = 23098,

Xmax = 300 nm, ε = 22872.

’Η-NMR-spektrum (δ ppm v CDC1₃): 0,529 (s, 3H, H-18); 3,247 (s, 3H, Hp-OCHj); 3,408 (s, 3H, 17a-CH₂OCH₃); 3,39 až 3,598 (m, 2H, ABX-systém, 17a-CH2OCH₃); 4,381 (d, 1H, J=7,5 Hz, H-lla); 5,73 (s, 1H, H-4); 7,173, 7,201, 7,463, 7,491 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ'-soustava protonů aromátů); 8,023 (s, 1H, CHfenyl).

MS m/e 463,26950. C₂9H₃₇NO₄ M'

Příklad 3

180 mg 1 lfl-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17[3-methoxy-17a-methoxymethylestra-4,9-dien-3onu se acetylovalo v 5 ml acetanhydridu/pyridinu (1:1) během 12 hodin. Po přidání vody se extrahovalo třikrát ethylacetátem. Ethylacetátová vrstva se promyla zředěnou kyselinou solnou a vodou, vysušila nad síranem sodným a koncentrace se za sníženého tlaku. Získalo se 172 mg surového produktu, který se čistil sloupcovou chromatografií na silikagelu PF_254+366 elucí směsí toluen/aceton 4:1.

Získalo se 115 mg 1 lp-[4-(acetyliminmethyl)fenyl]-17|3-methoxy-17a-methoxymethylestra-

4,9-dien-3-onu.

Čištěný produkt krystalizoval z ethylacetátu.

Teplota tání 115 až 120 °C, ethylacetát.

a_D = 218° (chloroform).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 271 nm, ε = 28157,

Xmax = 297 nm, ε = 26369.

'H NMR-spektrum (δ ppm vCDC1₃): 0,511 (s, 3H, H-18); 2,227 (s, 3H, OCOCHj); 3,247 (s,3H, 17|3-OCH₃); 3,408 (s, 3H, Πα-ΟΗζΟΟΗ,); 3,386, 3,431, 3,544, 3,580 (m, 2H, -CHzOCH₃); 4,399 (dm 1H, J = 7,2 Hz, H-lla); 5,785 (s, 1H, H-4); 7,242, 7,266, 7,618, 7,647 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ'-soustava protonů aromátů): 8,315 (s, 1H, CH=NOAc).

MS m/e: 446,26971. C₃₀H₃₇NO₅ M*.

Příklad 4

K 210 mg 11 p-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7β-methoxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9dien-3-onu v 5 ml pyridinu se přidalo po kapkách 0,3 ml ethylesteru kyseliny chloromravenčí za chlazení vodou. Vzniká bílá sraženina. Po 30 minutách se přidala voda, vznikl roztok, pak vypadla bílá sraženina, která se odsála a promyla vodou. Výtěžek po sušení 133 mg. Vodná vrstva se ještě extrahovala chloroformem, promyla zředěnou kyselinou solnou a vodou, vysušila nad síranem sodným a koncentrovala se za sníženého tlaku. Výtěžek 66 mg. Obě pevné látky se spojily a čistily preparativní sloupcovou chromatografií na silikagelu 60 PF₂₅₄₊₃₆6 elucí směsí toluen/aceton 4:1.

-16CZ 292298 B6

Získalo se 150 mg 1 lfl-^-IXethoxykarbonyljoxyiminomethyljfenylj-np-methoxy-Uamethoxymethylestra-^O-dien-S-onu, který se rekrystalizoval z aceton/hexanu.

Teplota tání 137 až 148 °C, za rozkladu. a_D = 204° (chloroform).

UV-spektrum v MEOH: Xmax = 270 nm, ε = 27094,

Zmax = 297 nm, ε = 25604.

'H-NMR-spektrum (δ ppm v CDC1₃): 0,507 (s, 3H, H-18); 1,383 (t, 3H, J=7,0 Hz, OCHzCH,); 3,246 (s, 3H, Πβ-ΟΟΗ,); 3,410 (s, 3H, 17a-CH₂CHj); 3,39 až 3,56 (m, 2H, -CHzOCHj), 4,35 (d, 1H, J=7,0 Hz, H-ll a); 5,784 (s, 1H, H-4); 7,23, 7,26, 7,61, 7,64 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ'-soustava protonů aromátů), 8,303 (s, 1H, CH=NR).

MS m/e: 431,24701. C_2gH₃₃NO₃ M⁺-C₂H₅OCOOH

Příklad 5

244 mg 1 ip_(4-formylfenyl)-17P-methoxy-17a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-onu se smíchalo při pokojové teplotě ve 4 ml pyridinu s 32,2 mg hydroxylamin hydrochloridu. Po 1 hodině se přidalo dalších 6,9 mg hydroxylamin hydrochloridu. Pak se přidalo po 10 ml vody a ethylacetátu, fáze se oddělily a vodná fáze se ještě extrahovala. Organická fáze se promyje 10 ml zředěné kyseliny sodné a destilovanou vodou do neutrální reakce. Sušilo a odpařovalo se za sníženého tlaku.

Získalo se 183 mg surového produktu jako žluté pryskyřice. Preparativní sloupcová chromatografíe na silikagelu 60 PF₂₅₄₊₃66 elucí směsí toluen/aceton 4:1 dala 87,7 mg 17a-chlormethyl11 [3-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l7|3-hydroxyestra-4,9-dien-3-onu jako pěny.

a_D = 185° (chloroform).

UV-spektrum v MeOH: Zmax = 264 nm, ε = 20797,

Zmax = 299 nm, ε = 2039.

’Η-NMR-spektrum (δ ppm v CDC1₃): 0,607 (s, 3H, H-18); 3,628, 3,664, 3,824, 3,861 (m, 2H, ABX-systém, Πα-ΟΗ,ΟΙ); 4,428 (d, 1H, J=6,9Hz, H-lla); 5,807 (s, 1H, H-4); 7,185, 7,212, 7,482, 7,509 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ'-soustava protonů aromátů), 8,05 (s, 1H, OH); 8,104 (s, 1H, CHfenyl).

MS m/e: 439,19070. C₂₆H₃₀ClNO₃ M⁺

Příprava výchozí sloučeniny:

Stupeň F

K 4,12 g 3,3-dimethoxy-l 1 |3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-l 7β-spiro-l ',2'oxiranestr-9-en-5aolu (připraven podle příkladu 1, stupeň B) v 84 ml dimethylformamidu se pomalu přidalo po kapkách při 0 °C 16,6 ml koncentrované kyseliny solné, přičemž vznikala vločkovitá sraženina. Hodnota pH se nastavila vodným roztokem kyselého uhličitanu na 6, sraženina se odsála a vysušila.

Surový výtěžek 3,38 g okrově zbarvených krystalů, které se čistily sloupcovou chromatografíí na 90 g silikagelu 60 s gradienty toluen/ethylacetát.

- 17CZ 292298 B6

Výtěžek: 1,16 g 17a-chlormethyl-l 1 |3-(4-formylfeny 1)-1 7^hydroxyestra-4,9-dien-3-onu jako krystaly.

Teplota tání 205 až 208 °C, aceton/hexan.

oto = 161° (chloroform).

IR-spektrum v chloroformu (cm’¹): 3600 (OH); 1695 (CHO); 1650 (C=C-C=C-C=O); 1590 (fenyl).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 262 nm, ε = 19993,

Xmax = 297 nm, ε = 22755.

’Η-NMR-spektrum (δ ppm v CDC1₃): 0,583 (s, 3H, H-18); 330 (s, 1H, OH); 3,63 až 3,85 (m, 2H, ABX-systém, na-CHjCl); 4,45 (d, 1H, J=7,0 Hz, H-lla); 5,809 (s, 1H, H-4), 7,355, 7,382, 7,799, 7,826 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ'-soustava protonů aromátů); 9,977 (s, 1H, CHO).

MS m/e: 424,18280. C₂₆H₂₉C1O₃ M⁺

Příklad 6

136 mg 11 p-(4-formylfenyl)-l 7(3-hydroxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-onu se rozpustilo při pokojové teplotě v 2,2 ml pyridinu a nechalo se reagovat s 65 mg hydroxylaminhydrochloridu. Míchalo se při 25 °C. Po 1,5 hodině se přidaly další 4 mg hydroxylaminhydrochloridu a roztok se po 15 minutách zředil vodou a 10% kyselinou solnou. Extrahovalo se chloroformem, organická fáze se promyla zředěnou kyselinou solnou a vodou, vysušila nad síranem sodným a uhličitanem draselným a rozpouštědlo se odpařilo za sníženého tlaku.

Získalo se 146 mg surového produktu, ten se čistil sloupcovou chromatografií na silikagelu 60 PF_254+366 elucí směsí toluen/aceton 4:1.

Získalo se 110 mg 1 l[3-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17p-hydroxy-17a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-onu.

Teplota tání 104 °C, za rozkladu (izopropanol).

ocd = 195° (chloroform).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 263 nm, ε = 21170,

Xmax = 299 nm, ε = 20188.

‘H-NMR-spektrum (δ ppm vCDC1₃): 0,517 (s, 1H, H-18); 3,418 (s, 3H, 17a-CH₂OCH₃); 3,206, 3,237, 3,552, 3,582 (m, 2H, ABX-systém, -CHjOCHO; 4,384 (d, 1H, J=7,2 Hz, H-lla); 5,784 (s, 1H, H-4); 7,179, 7,206, 4,456, 7,483 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ'-soustava protonů aromátů); 7,9 (s, 1H, OH); 8,088 (s, 1H, CH=NOH).

MS m/e: 435,24289. C₂₇H₃₃NO₄ M⁺

Příprava výchozí sloučeniny:

Stupeň G

860 mg 3,3-dimethoxy-l 1 |3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-l 7a-dimethoxymethylestr-9-en5a,17|3-diolu (připraven podle příkladu 1, stupeň C) se rozpustilo v 80 ml acetonu. Po přidání 7,7 ml vody a 430 mg 4-toluensulfonové kyseliny se zahřívalo po dobu 1,5 hodiny pod zpětným chladičem a směs se odpařila za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustil v methylenchloridu, přidáním 8,0 ml amoniaku přivedl na pH 8 a fáze se oddělily. Organická fáze se promyla za

-18CZ 292298 B6 neutrální reakce a sušila se nad síranem sodným. K odpaření rozpouštědla došlo zas sníženého tlaku.

Získal se 11 p-(4-formylfeny 1)-17β-l7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on jako surový produkt. Ten se rekrystalizoval z ethylacetátu.

Teplota tání 195 až 205 °C, ethylacetát.

a_D = 209° (chloroform).

IR-spektrum v chloroformu (cm'¹): 3590 (OH), 1710 (CHO); 1660 (C=C-C=C-C=O); 1605 (aromát).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 263 nm, ε = 20683,

Zmax = 298 nm, ε = 20749.

’Η-NMR-spektrum (δ ppm vCDC1₃): 0,509 (s, 3H, H-18), 2,666 (s, IH, OH); 3,196, 3,226, 3,550, 3,580 (m, 2H, ABX-systém, -CHjOCHj); 3,417 (s, 3H, -OCH,); 3,446 (d, IH, J=6,9 Hz, H-lla); 5,797 (s, IH, H-4); 7,360, 7,386, 7,786, 7,813 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ -soustava protonů aromátů); 9,970 (s, IH, CHO).

MS m/e: 420,23300. C₂₇H₃₂O₄ M⁺

Příklad 7

480 mg 17a-ethoxymethyl-lip-(4-formylfenyl)-17p-methoxyestra-4,9-dien-3-onu se rozpustilo při pokojové teplotě v 6 ml pyridinu a nechalo se reagovat se 74 mg hydroxylaminhydrochloridu. Míchalo se při 25 °C. Po 30 minutách se přidalo dalších 8,5 mg hydroxylaminhydrochloridu a roztok se po 15 minutách zředil vodou a 1 M vodnou kyselinou solnou. Extrahovalo se methylenchloridem, organická fáze se promyla zředěnou kyselinou solnou a vodou, vysušila nad síranem sodným a uhličitanem draselným a rozpouštědlo se odpařilo za sníženého tlaku.

Získalo se 410 mg surového produktu a po preparativní sloupcové chromatografii na silikagelu 60 PR₂54+₃66 230 mg 17a-ethoxymethyl-lip-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17p-methoxyestra—4,9-dien-3-onu jako žluté pěny.

a_D = 200° (chloroform).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 264 nm, ε = 20366,

Ámax = 299 nm, ε = 20228.

’Η-NMR-spektrum (δ ppm vCDC1₃): 0,533 (s, 3H, H-18); 1,267 (t, 3H, J=6,9 Hz, 17a-CH₂OCH₂CH3); 3,252 (s, 3H, 17β-ΟΟΗ₃); 3,393 (s, 3H, 17a-CH₂OCH₃); 3,423 až 3,623 (m, 2H, ABX-systém, 17a-CH2OCH₂CH₃); 4,355 (d, IH, J = 7,2 Hz, H-lla); 5,783 (s, IH, H-4); 7,191, 7,219, 7,460, 7,488 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ-soustava protonů aromátů); 8,097 (s, IH, CH=NOH).

MS m/e: 463,27069. C₂₉H₃₇O4 M⁺

Příprava výchozí sloučeniny:

-19CZ 292298 B6

Stupeň H

5,33 g, 3,3-dimethoxy-l l[3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-17|3-spiro-r,2' oxiranestr-9-en-5aolu (připraven podle příkladu 1, stupeň B) se rozpustilo v 5 ml ethanolu. Přidalo se 25 ml 1,5 N roztoku ethylátu sodného a zahřívalo se 1 hodinu pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo se odpařilo za sníženého tlaku, zbytek se rozpustil v methylenchloridu, promyl se do neutrální reakce, roztok se sušil nad síranem sodným a odpařil za sníženého tlaku.

Získalo se 5,85 g surového produktu jako hnědá pěna. Chromatografie na silikagelu s gradienty toluen/ethylacetát dala 1,14 g 3,3-dimethoxy-l l|3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-17a-ethoxymethylestr-9-en,5a, 17 β-diolu.

Stupeň I

K 1,14 g 3,3-dimethoxy-l l[3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-17a-ethoxymethylestr-9-en-5a,17β—diolu v 70 ml toluenu pod argonem jako inertním plynem se přidalo 5,14 g /erc.butanolátu draselného. Po 15 minutách se přidala po kapkách směs 3,8 ml methyljodidu ve 4 ml toluenu. Po 2 hodinách se přidáním 20 ml vody a 20 ml ethylacetátu reakce přerušila. Organická fáze se promyla dvakrát vodou a sušila se nad síranem sodným. K odpaření rozpouštědla došlo za sníženého tlaku.

Surový výtěžek 1,14 g 3,3-dimethoxy-l 1β—[4—(3,3-dimethoxymethyl)fenyl]-l7a-ethoxymethyl-17|3-methoxyestr-9-en-5a-olu.

Stupeň J

K 1,14 g 3,3-dimethoxy-l lp-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-17a-ethoxymethyl-173-methoxyestr-9-en-5a-olu v 10 ml acetonu se pod inertním plynem přidalo 1 ml vody a 116 mg 4-toluensulfonové kyseliny. Po 30 minutách se zředilo vodou, extrahovalo dvakrát ethylacetátem, organický roztok se promyl a sušil nad síranem sodným. Po odpaření rozpouštědla zbylo 900 mg 17a-ethoxymethyl-l 1β-(4-formylfenyl)-17[3-methoxyestra-4,9-dien-3-olu jako žlutá pěna. Chromatografie na silikagelu s gradienty toluen/ethylacetát dala 480 mg žlutých krystalů.

Příklad 8

244 mg 1 l|3-(4-formylfenyl)-17[3-hydroxy-17a-(3-hydroxyprop-l-inyl)estra-4,9-dien-3-onu se rozpustilo při pokojové teplotě ve 4,5 ml pyridinu a nechalo se reagovat s 35,5 mg hydroxylaminhydrochloridu. Po 30 minutách se přidalo dalších 4,8 mg hydroxylaminhydrochloridu a roztok se po 15 minutách zředil vodou, převedl do ethylacetátu a protřepal s 1M vodnou kyselinou solnou.

Organická fáze se promyla vodou, vysušila nad síranem sodným a uhličitanem draselným a rozpouštědlo se odpařilo za sníženého tlaku. Získalo se 216 g surového produktu a po preparativní sloupcové chromatografií na silikagelu 60 PF254+366 eluční směsí toluen/aceton (4:1) 192 mg 1 lp-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17p-hydroxy-17a-(3-hydroxyprop-l-inyl)estra-

4,9-dien-3-onu jako bezbarvá pěna.

Teplota tání 171 až 179 °C (éter).

a_D = 82° (dioxan).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 264 nm, ε = 21495,

-20CZ 292298 B6

Xmax = 299 nm, ε = 20236.

MS m/e: 445,22369. C_2gH₃]NO₄ M⁺

Příprava vý chozí sloučeniny:

Stupeň K

K 3 ml prop-l-inyl-3-hydroxytetrahydropyranyléteru v 27 ml bezvodého THF se přidalo po kapkách při -5 °C 12 ml 15% n-butyllithia v hexanu. Po 15 minutách se k tomuto roztoku přidal po kapkách roztok 1,2 g 3,3-dimethoxy-l l[3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-17[3-spiro-r,2'oxiranestr-9-en-5a-olu (připraven podle příkladu 1, stupeň B) v 16 ml bezvodého THF. Míchalo se 30 minut při pokojové teplotě a reakční roztok se vlil do 150 ml ledové vody a extrahoval ethylacetátem. Organická fáze se promyla za neutrální reakce a sušila se nad síranem sodným a odpařila za sníženého tlaku.

Získalo se 4,23 g hnědého oleje, který se čistil chromatografii na silikagelu s gradienty toluen/ethylacetát.

Získalo se 422 mg 3,3-dimethoxy-l l|3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-17a-(3—tetrahydropyranyloxy-pro-l-inyl)estr-9-en-5a,17p-diolujako pěna.

Stupeň L

540 mg 3,3-dimethoxy-l 1 [3-[4-(dimethoxymethyl)fenyl]-l7a-(3-tetrahydropyranyloxy-propl-inyl)estr-9-en-5a-,17|3-diolu ve 40 ml acetonu se míchalo se 100 mg 4-toluensulfonové kyseliny 2 hodiny při pokojové teplotě. Pak se zahustilo na 10 ml, přidal se vodný roztok kyselého uhličitanu sodného a extrahovalo se ethylacetátem. Organická fáze se promyla do neutrální reakce, sušila se nad síranem sodným a koncentrovala se za sníženého tlaku.

Získalo se 330 mg surového produktu a po čištění sloupcovou chromatografii na silikagelu 60 PF₂5₄+366 310 mg 1 ip-(4-formylfenyl)-17p-hydroxy-17a-(3-hydroxyprop-l-inyl)estra-

4,9-dien-3-onu.

Rekrystalizace z acetonu dala bílé krystaly.

Teplota tání 225 až 231 °C. ao = 59° (chloroform).

UV-spektrum v MeOH: kmax = 302 nm, ε = 23608.

’Η-NMR-spektrum (δ ppm vCDC1₃): 0,496 (s, 3H, H-18); 4,375 (t, 2H, C-CfLOH); 4,497 (d, ÍH, >7,2, H-l la); 5,810 (s, ÍH, H-4); 7,353, 7,380, 7,797, 7,824 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ'-soustava protonů aromátů); 9,974 (s, ÍH, CHO).

MS m/e: 430,21460. C₂₈H₃₀O₄ M⁺

Příklad 9

190 mg 1 ip-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17p-methoxy-17a-methoxymethylestra-4,9dien-3-onu se suspendovala v 10 ml toluenu. Pak se přidalo postupně 0,5 ml fenylizokyanátu a 1 ml triethylaminu. Míchalo se 3 hodiny při pokojové teplotě a zahřívalo pod zpětným chladičem po 2 hodiny. Bílá sraženina se odsála a rozpouštědlo se koncentrovalo za sníženého tlaku. Získalo

-21 CZ 292298 B6 se 310 mg světle hnědé pevné látky, která se čistila preparativní sloupcovou chromatografii na silikagelu 60 PF_254+366 elucí směsí toluen/aceton 4:1.

Izolovalo se 65 mg ll|3-methoxy-17a-methoxymethyl-ll|3-{[(4—fenylaminokarbonyl)oxyiminomethyljfenyl }-estra-4,9-dien-3-onu.

Teplota tání 241 až 246 °C (aceton).

do = 178° (chloroform).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 238 nm, ε = 29444,

Xmax = 300 nm, ε = 29649.

’Η-NMR-spektrum (δ ppm vCDC1₃): 0,474 (s, 3H, H-18); 3,245 (t, 3H, 17p-OCH₃); 3,405 (s,3H, Ba-CHjOCHj); 3,406 až 3,545 (m, 2H, ABX-systém, 17a-CH2OCH₃); 4,413 (d, 1H, J=6,8 Hz, H-l la); 5,797 (s, 1H, H-4); 7,264 (m, 5H, aromát); 7,272, 7,293, 7,548, 7,575 (m, 4H, ΑΑΈΒ-soustava protonů aromátů); 8,0 (s, 1H, CH=N-).

MS m/e 431,24249. C₂₈H₃₃NO₃ M⁺ -C₆H₅CNO + H₂O.

Příklad 10

125 mg 17a-ethoxymethyl-l lp-(4-formylfenyl)-17p-hydroxyestra-4,9-dien-3-onu se rozpustilo při pokojové teplotě v 2 ml pyridinu a nechalo se reagovat s 20,2 mg hydroxylaminhydrochloridu. Po 50 minutách se zředil roztok a extrahoval ethylacetátem. Fáze se oddělily. Organická fáze se promyla zředěnou kyselinou solnou a vodou, vysušila nad síranem sodným a rozpouštědlo se odpařilo za sníženého tlaku.

Získalo se 127 mg surového produktu jako světležluté pěny, která po preparativní sloupcové chromatografii na silikagelu 60 PF₂s₄₊₃66 dala 62 mg 17a-ethoxymethyl-l lβ-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17β-hydroxyestra-4,9-dien-3-onu jako bezbarvou pěnu.

a_D = 226° (chloroform).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 265 nm, ε = 22696,

Xmax = 299 nm, ε - 21960.

’Η-NMR-spektrum (δ ppm vCDC1₃): 0,520 (s, 3H, H-18), 1,249 (t, 3H, J = 7,2 Hz, 17a-CH₂OCH₂CH3); 3,228 až 3,609 (m, 4H, 2X-CH₂); 4,381 (d, 1H, J=7,2 Hz, H-lla); 5,781 (s, 1H, H-4); 7,181, 7,209, 7,459, 7,486 (m, 4H, ΑΑ'ΒΒ'-soustava protonů aromátů); 8,098 (s, 1H, CH=N-OH).

MS m/e: 449,25540. C₂₈H₃₅NO₄ M⁺

Příprava výchozí sloučeniny:

Stupeň M

340 mg 3,3-dimethoxy-l 1 |3-[4-(dimethoxymethyI)fenyl]-17a-ethoxymethylestr-9-en-5a,17β—diolu (připraven podle příkladu 7, stupeň H) se rozpustilo ve 2,5 ml acetonu a míchalo s 0,25 ml vody a 35 mg 4-toluensulfonové kyseliny. Po 1 hodině se přidalo 10 ml vody a 10 ml ethylacetátu. Fáze se oddělily. Vodná fáze se ještě dvakrát extrahovala, organický roztok se promyl a sušil nad síranem sodným. Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku zbylo 300 mg nažloutlých krystalů.

-22CZ 292298 B6

Po preparativní sloupcovou chromatografií na silikagelu 60 PF254+366 s toluen/acetonem se získalo

200 mg nažloutlých krystalů 17a-ethoxymethyl-ll|3-(4-formylfenyl)-17|3-hydroxyestra-4,9dien-3-onu.

Teplota tání 144 až 150 °C (aceton/hexan).

a_D = 171° (chloroform).

UV-spektrum v MeOH: Xmax = 263 nm, ε = 17842,

Xmax = 299 nm, ε = 20083.

Ή-NMR-spektrum (δ ppm vCDC1₃): 0,512 (s, 3H, H-18), 1,249 (t, 3H, J=4,6 Hz, 17a-CH₂OCH₂CH₃); 3,221 až 3,613 (m, 4H, 2X-CH₂); 4,447 (d, 1H, J=6,9 Hz, H-llcc), 5,799 (s, 1H, H-4); 7,361, 7,388, 7,788, 7,815 (m, 4H, AA' ΒΒ'-soustava protonů aromátů); 9,972 (s, 1H, CHH=O).

Příklad 11

Měření vazné aktivity receptorů:

Vazná aktivita receptorů se stanovila kompetitivní vazbou specificky se vázajícího hormonu značkového ³H (značkovač) a testované sloučeniny na receptory ze zvířecích cílových orgánů v cytosolu. Přitom se mělo dosáhnout nasycení receptorů a reakční rovnováha. Byly zvoleny následující inkubační podmínky:

Receptor progesteronu: Dělohy v cytosolu králíků zbavených estrogenu, se uchovávaly při -30 °C, ústroj: TED (20 ml Tris/HCl, pH 7,4; 1 mM ethylenamintetraoctan, 2mM dithiothreitolu) s 250 mM sacharózy. Značkovač: ³H-ORG 2058, 5 nM. Srovnávací látka: Progesteron.

Glukokortikoidní receptor: Thymus v cytosolu adrenalektomované krysy. Brzlíky se uchovávaly při -30 °C, ústroj: TED. ³H-Dexamethason, 20 nM. Srovnávací látka: Dexamethason.

Receptor estrogenu: Dělohy v cytosolu nedospělých králíků se uchovávaly při -30 °C v ústroji TED s 250 mM sacharózy. Značkovač: ³H-ethinylestradiol, 3 nM.

Srovnávací látka: 17[3-estradiol.

Po 18 hodinové inkubaci při 0 až 4 °C následovalo oddělení vázaného a volného steroidu smícháním s aktivním uhlím/dextranem (1 % / 0,1 %), odstředění a měření vázané ³H-aktivity v matečném louhu.

Z měření koncentračních řád se zjistily IC50 pro testované látky a pro srovnávací látku a jako podíl obou hodnot (x 100 %) relativní molámí vazná aktivita.

Příklad 12

Potlačení časné gravidity u krys:

Krysí samice byly připuštěny v proestrusu. Při důkazu spermií v okolí vagíny příští den se tento den počítal jako den 1 (=dl) gravidity. Ošetření testovanou látkou nebo vehikulem následovalo mezi d5 a d7, autopsie následoval v d9. Sloučeniny se injikovaly subkutánně v 0,2 ml vehikula benzylbenzoátu/ricinový olej (1+4). Úplně potlačené gravidity v různých podmínkách jsou zřejmé z tabulky 1. U J 867 bylo zjištěno potlačení nidace třikrát převyšující účinek RU 486.

-23CZ 292298 B6

Příklad 13

Ošetření samic morčat antigestageny:

Ošetření dospělých samic morčat od 10 do 18 dne cyklu (autopsie). Aplikace uvedených dávek subkutánními osmotickými čerpadly (ALZET, typ 2ML1). Venikulum: 2,0 ml propylenglykol/24 hodin.

Příklad 14

Antiglukokortikoidní účinek J 867 v buněčných liniích lidského tumoru mléčných žláz ZR75/AGP-763.

Pokusy se prováděly v RPMI 1640, smíchaném s 10% fetálním ovčím sérem (FKS) v kultivační skříni s 95 % vzduchu a 5 % CO₂ při 37 °C. Pro pokusy se buňky rozsely do 60 mm Petriho misek. Médium v pěstovaných buňkách bylo zředěno médiem s 5 % FKS (ošetřeno dextranem pokrytým aktivním uhlím, DCC). K indukci CAT se přidalo ΙΟ’⁷ M Dexamethasonu v ethanolu. Sklizeň stimulovaných buněk následovala 16 hodin později přípravou extraktu buněk lyžujícím ústojem. Stanovení CAT se provádělo pomocí ELISA firmy Boehringen podle návodu pro kvantitativní stanovení CAT z přenesených buněk.

Příklad 15

Antiglukokortikoidní účinek J 867 v buňkách krysího hepatomu:

Kultury buněk se prováděly v DMEM za jinak stejných podmínek jako v příkladu 14. Buňky se rozsely do desek s 24 miskami. Látky k pěstovaným buňkám hepatomu se přidávaly v 0,2 % ethanolu (objemově) po 16 hodin. Po šetrné sklizni buněk a získání extraktu buněk ultrazvukem se stanovení TAT enzymu provádělo podle Diamondstona.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Deriváty 11 p-benzaldoximestra-4,9-dienu obecného vzorce I kde R¹ je vodíkový atom nebo alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

-24CZ 292298 B6

R² je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až

10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo skupina-CONHR⁴ nebo-COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

R³ znamená vodíkový atom nebo alkylovou, arylovou, aralkylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -(CH₂)_n-CH₂X, kde n = 0, 1 nebo 2, X představuje atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, skupinu kyanazido- nebo thiokyanato-, skupinu OR⁵ nebo SR⁵, kde R⁵ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupin a vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu OR⁵, kde R⁵ má shora uvedený význam, skupinu -(CH₂)_O-CH=CH(CH₂)_P-R⁶ kde o = 0, 1,2 nebo 3 a p = 0,1 nebo 2, R⁶ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, hydroxylová skupina, alkoxylová nebo acyloxylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -(CH₂)_qC=CR⁷, kde q = 0, 1 nebo 2, R⁷ představuje atom vodíku, fluoru, chloru, bromu nebo jodu, alkylovou, aiylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

Z představuje vodíkový atom nebo alkylovou, arylovou, aralkylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

Z dále znamená alkalický kov nebo kov alkalických zemin, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
2. Deriváty podle nároku 1 obecného vzorce I, kde R¹ je methylová nebo ethylová skupina.
3. Deriváty podle alespoň jednoho z nároků 1 a 2, obecného vzorce I, kde R² je vodíkový atom nebo alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo skupina-CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová nebo arylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy.
4. Deriváty podle nároku 3 obecného vzorce I, kde R² je alkylová skupina a s 1 až 6 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo skupina -CONHR⁴ nebo

-COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová nebo arylová skupina vždy s 1 až 6 uhlíkovými atomy.

-25CZ 292298 B6
5. Deriváty podle alespoň jednoho z nároků 1 až 4, obecného vzorce I, kde R³ je vodíkový atom.
6. Deriváty podle alespoň jednoho z nároků 1 až 5, obecného vzorce I, kde R³ je alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy.
7. Deriváty podle nároku 6 obecného vzorce I, kde R³ je alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy.
8. Deriváty podle nároku 6 obecného vzorce I, kde R³ je alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy.
9. Deriváty podle alespoň jednoho z nároků 1 až 4 obecného vzorce I, kde R³ je skupina -(CH₂)_n-CH₂X, kde n = 0, 1 nebo 2, X představuje atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, skupinu kyanazido- nebo thiokyanato-, skupinu OR⁵ nebo SR⁵, kde R⁵ je vodíkový atom nebo alkylová, ary lová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy.
10. Deriváty podle nároku 9 obecného vzorce I, kde R³ je skupina -(CH₂)_n-CH₂X, kde n = 0, 1 nebo 2, X představuje atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, skupinu kyan-, azido-nebo thiokyanato-, skupinu OR⁵ nebo SR⁵, kde R⁵ je alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo acylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy.
11. Deriváty podle alespoň jednoho z nároků 1 až 4, obecného vzorce I, kde R³ znamená skupinu OR, kde R⁵ je vodíkový atom, alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy.
12. Deriváty podle nároku 11 obecného vzorce I, kde R³ znamená skupinu OR⁵, kde R⁵ je alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo acylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy.
13. Deriváty podle alespoň jednoho z nároků 1 až 4, obecného vzorce I, kde R³ znamená skupinu (CH₂)o-CH=CH(CH₂)_p-R⁶, kde o = 0, 1, 2 nebo 3 a p = 0, 1 nebo 2, R⁶ je vodíkový atom, alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, hydroxylová skupina, alkoxylová nebo acyloxylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy.
14. Deriváty podle nároku 13 obecného vzorce I, kde R³ znamená skupinu (CH₂)₀-CH=CH(CH₂)_P-R⁶, kde o = 0, 1, 2 nebo 3 a p = 0, 1 nebo 2, R⁶ je alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy, alkoxylová nebo acyloxylová skupina vždy s 1 až 6 uhlíkovými atomy.
15. Deriváty podle alespoň jednoho z nároků 1 až 4 obecného vzorce I, kde R³ znamená skupinu -(CH₂)_qCsCR⁷,

-26CZ 292298 B6 kde q = 0, 1 nebo 2, R⁷ představuje atom vodíku, fluoru, chloru, bromu nebo jodu, alkylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy.
16. Deriváty podle nároku 15, obecného vzorce I, kde R³ znamená skupinu ~(CH₂)_qOCR⁷, kde q = 0, 1 nebo 2, R⁷ představuje alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo acylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy.
17. Deriváty podle alespoň jednoho z nároků 1 až 16 obecného vzorce I, kde Z představuje vodíkový atom nebo alkylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylovou skupinu s 1 až

10 uhlíkovými atomy, skupinu -CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy.
18. Deriváty podle nároku 17 obecného vzorce I, kde Z představuje alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, acylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, skupinu -CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová nebo arylová skupina vždy s 1 až 6 uhlíkovými atomy.
19. Deriváty podle alespoň jednoho z nároků 1 až 16, obecného vzorce I, kde Z představuje alkalický kov nebo kov alkalických zemin.
20. Deriváty podle nároku 1 vybrané ze skupiny zahrnující:

11 [3-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7[3-hydroxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on,

11 β—[4—(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17p-hydroxy-17a-ethoxymethylestra—4,9-dien-3-on,

11 p-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7|3-hydroxy-l 7a-n-propoxymethylestra-4,9-dien-3-on,

11 [3-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-hydroxy-l 7a-iso-propoximethylestras-4,9-dien-3on,

11 [3-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7[3-methoxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on,

11 P-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7[3-methoxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on, ll(3-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17[3-hydroxy-17a-(hydroxyprop-l-inyl)estra-4,9-dien3-on,

11 P-[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-methoxy-l 7a-(3-hydroxyprop-l-inyl)estra-4,9dien-3-on,

11 β—[4—(hydroxyiminomethyl)fenyl]-17|3-hydroxy-17a-Z-(3-hydroxypropenyl)estra-4,9dien-3-on,

11 P~[4-(hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-methoxy-l 7a-Z-(3-hydroxypropenyl)estra-4,9dien-3-on,

17a-chlormethyl-l 1 p-[4-hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7p-hydroxyestra-4,9-dien-3-on,

17a-chlormethyl-l^[4-hydroxyiminomethyl)fenyl]-17P-methoxyestra-4,9-dien-3-on,

17a-kyanmethyl-l 1 p-[4-hydroxy iminomethyl)fenyl]-l 7 p-hydroxyestra-4,9-dien-3-on,

-27CZ 292298 B6

17a-kyanmethyl-l 1 p-[4-hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7P-methoxyestra-4,9-dien-3-on,

17a-azidomethyl-lip-[4-hydroxyiminomethyl)fenyl]-17P-methoxyestra-4,9-dien-3-On,

11 [T-[4-{hydroxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-methoxy-l 7a-methylthiomethylestra-4,9-dien-3on, lip-[4-methyloxyiminomethyl)fenyl]-17p-methoxy-17a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on,

11 p-[4-acetoxyiminomethyl)fenyl]-l 7 β-methoxy-l 7a-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on,

11 β-[4-(methyloxyiminomethyl)fenyl]-17 β-hydroxy-17a-methoxymethylestra-4,9-dien-3on,

11 β-{ 4-[(ethoxykarbonyl)oxyiminomethyl]fenyl}-17 β-methoxy-17a-methoxymethylestra4,9-dien-3-on, llβ-{4-[(ethylaminokarbonyl)oxyiminomethyl]fenyl}-17β-methoxy-17α-methoxymethylestra-4,9-dien-3-on,

17β-methoxy-17a-methoxymethyl-l lβ-{4-[(fenylaminokarbonyl)oxyiminomethyl]fenyl}estra-4,9-dien-3-on,

11 β-[4-(hydroxyimmomethyl)fenyl]-l 7β-ethoxy-l 7a-ethoxymethylestra-4,9-dien-3-on.
21. Způsob výroby derivátů podle nároku 1 obecného vzorce I, kde Z znamená vodíkový atom, alkylovou skupinu, acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy, -CONHR⁴, -COOR⁴, alkalický kov nebo kov alkalických zemin, přičemž ostatní substituenty jsou jako v nároku 1, a jejich farmaceuticky přijatelných solí, vyznačující se tím, že derivát obecného vzorce II kde R¹ je vodíkový atom nebo alkylová skupina s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R² je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo skupina -CONHR⁴nebo-COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy,

-28CZ 292298 B6

R³ znamená vodíkový atom nebo alkylovou, arylovou, aralkylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -(CH₂)_n-CH₂X, kde n = 0, 1 nebo 2, X představuje atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu, skupinu kyanazido- nebo thiokyanato-, skupinu OR⁵ nebo SR⁵, kde R⁵ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu OR⁵, kde R⁵ má shora uvedený význam, skupinu -(CH₂)₀-CH=CH(CH₂)p-R⁶, kde o = 1, 2 nebo 3 a p = 0, 1 nebo 2, R⁶ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylaiylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, hydroxylová skupina, alkoxylová nebo acyloxylová skupina vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy, skupinu -(CH₂)_qCsCR⁷, kde q = 0, 1 nebo 2, R⁷ představuje atom vodíku, fluoru, chloru, bromu nebo jodu, alkylovou, arylovou, aralkylovou nebo alkylarylovou skupinu vždy s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo acylovou skupinu s 1 až 10 uhlíkovými atomy, se nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce Ila

NH₂-O-Z (Ila), kde Z je vodíkový atom, nebo se sloučeninou obecného vzorce Ila, která se tvoří za reakčních podmínek in šitu, z odpovídajícího derivátu za vzniku derivátu obecného vzorce I, kde Z je vodíkový atom, přičemž získaný derivát se případně podrobí esterifikaci nebo eterifikaci za vzniku derivátu obecného vzorce I, kde Z je alkylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, acylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy nebo skupina -CONHR⁴ nebo -COOR⁴, kde R⁴ je vodíkový atom nebo alkylová, arylová, aralkylová nebo alkylarylová skupina s 1 až 10 uhlíkovými atomy, nebo se získaný derivát obecného vzorce I převede na sůl, kde Z je alkalický kov nebo kov alkalické zeminy.
22. Způsob výroby derivátů obecného vzorce I, podle nároku 21, vyznačuj ící se tím, že se derivát obecného vzorce Π a sloučenina obecného vzorce Ila nechají reagovat v ekvimolámích množstvích.
23. Farmaceutické přípravky, vyznačující se tím, že obsahují alespoň jeden derivát podle nároku 1 až 20.