CZ289282B6 - Peptid, jeho pouľití a farmaceutický prostředek - Google Patents

Peptid, jeho pouľití a farmaceutický prostředek Download PDF

Info

Publication number
CZ289282B6
CZ289282B6 CZ1998489A CZ48998A CZ289282B6 CZ 289282 B6 CZ289282 B6 CZ 289282B6 CZ 1998489 A CZ1998489 A CZ 1998489A CZ 48998 A CZ48998 A CZ 48998A CZ 289282 B6 CZ289282 B6 CZ 289282B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
phe
cys
trp
lys
tyr
Prior art date
Application number
CZ1998489A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ48998A3 (cs
Inventor
David H. Coy
John E. Taylor
Original Assignee
Biomeasure, Incorporated
The Administrators Of The Tulane Educational Fund
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biomeasure, Incorporated, The Administrators Of The Tulane Educational Fund filed Critical Biomeasure, Incorporated
Publication of CZ48998A3 publication Critical patent/CZ48998A3/cs
Publication of CZ289282B6 publication Critical patent/CZ289282B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/655—Somatostatins
    • C07K14/6555—Somatostatins at least 1 amino acid in D-form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/16—Somatostatin; related peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Jedn se o cyklick peptidy-analogy somatostatinu, v nich jsou N- koncov a C- koncov zbytky aminokyselinov²ch °et zc v z ny disulfidov²mi vazbami. D le jsou pops ny r zn aplikace peptidu, pou it peptidu pro v²robu l iva pro inhibov n uvoln n inzulinu v subjektu, farmaceutick² prost°edek a pou it peptidu pro v²robu diagnostick ho prost°edku pro zobrazen bun k.\

Description

Peptid, jeho použití a farmaceutický prostředek
Oblast techniky
Protože přírodní somatostatin používaný pro léčení různých chorob (např. akromegalie) je dosti nestabilní, byly vyvinuty umělé analogy somatostatinu. Somatostatin vyvolává rozmanité účinky včetně modulace uvolňování různých hormonů či neurotransmiterů. Některé tyto účinky jsou vázány na přítomnost specifických receptorů somatostatinu. Snahou je vždy získat analog s co největší selektivitou pro specifický subtyp receptoru odpovědný za požadovanou biologickou odpověď, aby se snížily interakce vedoucí k vedlejším účinkům.
Dosavadní stav techniky
Přírodní somatostatin se skládá jak z izoformy o 14 aminokyselinách (somatostatin - 14), tak zizoformy o 18 aminokyselinách (somatostatin - 18). Heiman, et al., Neuroendocrinology, 45:429-436 (1987). Z důvodu krátkého poločasu rozpadu přírodního somatostatinu byly vyvinuty různé somatostatinové analogy, např. pro léčení akromegalie. Raynor, et al., Molecular Pharmacol. 43:838 (1993).
Bylo identifikováno a charakterizováno pět význačných receptorů somatostatinu. Hoyer, et. al., Naunyn - Schmiedeberg's Asch. Pharmacol., 350:441 (1994). Somatostatin vyvolává rozmanité účinky včetně modulace uvolňování hormonů, např. růstového hormonu, glukagonu, inzulínu, anylinu a též uvolňování neurotransmitérů.
Některé tyto efekty jsou spojeny s jeho vazbou na specifické receptory somatostatinu. Například inhibice růstového hormonu je přisuzována receptoru somatostatinu typu -2 („SSTR-2“) (Raynor, et al., Molecular Pharmacol. 43:838 (1993); Lloyd, et al., Am. J. Physiol. 268:G102 (1995)), zatímco inhibice inzulínu je přisuzována somatostatinovému receptoru typu -5 („SSTR5“) (Coy, et al. 197:366-371 (1993)).
Dává se přednost analogu, který je selektivní pro specifický subtyp receptoru somatostatinu odpovědný za požadovanou biologickou odpověď, čímž se sníží interakce jiných subtypů receptorů, které by mohly vést k nežádoucím vedlejším účinkům.
Podstata vynálezu
Vynález se týká peptidů vyjádřených následujícím sumárním vzorcem:
Ri \
Ai-Ar^-Ar-D-Trp-Lys-AT-Ar-Ag-Rj (I), /
Rz ve kterém
Ai je D- nebo L-izomer Cys;
A2 je Asn, Gin, Ala, kyselina 2-aminoheptanová, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin, nebo kyselina 2-aminomáselná, Phe, p-X-Phe nebo o-X-Phe, kde X je fluor, chlor, jod, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo F5-Phe, nebo je vynecháno;
-1CZ 289282 B6
A3 je Phe, p-X-Phe nebo o-X-Phe, kde X je fluor, chlor, jod, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichloro-Phe, Tyr-I, nebo F5-Phe;
A4 je His nebo Phe, p-X-Phe nebo o-X-Phe, kde X je fluor, chlor, jod, OH, OCH3, CH3 nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo Fs-Phe;
A7 je Thr, Ser, Ala, kyselina 2-aminoheptanová, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin, nebo kyselina 2-aminomáselná;
Ag je Phe, p-X-Phe nebo o-X-Phe, kde X je fluor, chlor, jod, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo Fs-Phe;
A9 je D- nebo L-izomer Cys;
přičemž každý Rt a R2 je, nezávisle, H, Ci_i2 alkyl, C7_20 fenylalkyl, Cn_2o naftylalkyl, Ci_i2 hydroxyalkyl, C7_2o hydroxyfenylalkyl, Cn-2o hydroxynaftylalkyl nebo COEt, kde Ei je Ci_i2 alkyl, C7_20 fenylalkyl, Cn_20 naftylalkyl, Ci_i2 hydroxyalkyl, C7_2o hydroxyfenylalkyl nebo Cn_20 hydroxynaftylalkyl a R3 je NH2 nebo NH-Y-CH2.Z, kde Y je Ci_i2 přímý či rozvětvený dvojvazný alkyl a Z je H, OH, CO2H nebo CONH2, a disulfidovými můstky vázané postranní řetězce zbytku A! a A9 za tvorby cyklického peptidů. V jednom vyjádřený obě skupiny A3 a Ag nezávisle jsou Phe, p-X-Phe (kde X je halogen, OH, OCH3, nebo NO2), o-X-Phe (kde X je halogen, OH, OCH3, CH3 nebo NO2), pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichloro-Phe, Tyr (I), nebo F-Phe, A4 je His, Phe, p-X-Phe (kde X5 je halogen, OH, OCH3, CH3 nebo NO2), pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichloro-Phe, Tyr (I) nebo Fs-Phe, A2 je Asn, Gin, Ala, H-amino-izobutanová kyselina, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin, alfa-aminomáselná kyselina, Phe, p-X-Phe (kde X je halogen, OH, OCH3, CH3 nebo NO2), o-X-Phe (kde X je halogen, OH, OCH3, CH3 nebo NO2), pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichloro-Phe, Tyr (I), Fs-Phe nebo je vynechán, a A7 je Thr, Ser, Ala, H-amino-izobutanová kyselina, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin nebo alfa-aminomáselná kyselina.
V následujícím vyjádření A9 je Cys, každá A3 a Ag nezávisle je Phe, každá p-X-Phe (kde X je halogen, OH, nebo CH3), Tyr (I) nebo Trp, A4 je His, Phe, p-X-Phe (kde X je halogen, OH nebo CH3), Tyr (I) nebo Trp, A2 je Asn, Gin neboje vynechán a A7 je Thr nebo Ser.
V posledním vyjádření A2 je Asn neboje vynechán, A3 je Phe, A4 je Phe, His, p-X-Phe (kde X je halogen, OH nebo CH3) a každý z Ri a R2 nezávisle H a R3 je NH2.
Níže jsou uvedeny příklady peptidů tohoto vynálezu, které lze vyjádřit výše uvedeným vzorcem:
H2-c[Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2 (Analog I),
HT-cfD-Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cysj-N^ (Analog II), fy-ctCys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cysl-NH^
H2-c[D-Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2, ^-cfCys-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-LysJ-NH^
H2-c[D-Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Lys]-NH2,
H2-c[Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2 (Analog IV),
H2-c[D-Lys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
-2CZ 289282 Β6
H2-c[Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2 (Analog III),
H2-c[D-Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Phe-His-H>-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Phe-Tyr(I)-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2 (Analog VIII),
H2-c[D-Cys-Phe-Tyr(I)-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Phe-Tyr(I)-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Phe-Tyr(I)-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
Hr-cfCys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-CysJ-N^ (Analog V),
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
Hr-c [D-Cy s-Asn-Phe-T rp-D-T rp-Lys-Thr-Phe-Cy s]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H^ÍCys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-CysJ-NH^
H^-c[D-Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-T rp-D-T rp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-Tyr(I)-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-Tyr(I)-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-Tyr(I)-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2, fy-cfD-Cys-Asn-Phe-TyríIj-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cysj-NH^
H2-c[Cys-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2 (Analog VI),
H2-c[Cys-Phe-beta-naftylalanin-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2 (Analog VII),
H2-c[Cys-Phe-Cpa-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2 (Analog IX),
-3CZ 289282 B6
Hr-c[kyselina merkaptopropionová-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2 (Analog X),
H2-c[Cys-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe-D-Cys]-NH2 (Analog XI),
H2-c[Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Tyr-Cys]-NH2 (Analog XII),
H2-c[Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2 (Analog XIII).
S výjimkou N-konců aminokyseliny, všechny zde publikované zkratky aminokyselin (např. Ala nebo A?) znamenají strukturu -NH-CH-(R)-CO- kde R je postranní řetězec aminokyseliny (např. CH3 pro Ala). Pro N-konec aminokyseliny znamená zkratka =N-CH(CH2SH)-COjestliže se jedná o D- nebo L-izomer Cys nebo =C(-CH2-SH)-CO- jedná-li se o D- nebo L-izomer kyselina merkaptopropionová, kde R je postranní řetězec aminokyseliny.
Tyr(I) znamená jodovaný tyrosinový zbytek (např. 3-I-Tyr, 5-I-Tyr, 3,5-I-Tyr), kde jód může být ve formě radioaktivního izotopu, např. I1 ,1127 nebo I131. Alifatická aminokyselina je alfaaminokyselina s jedním nebo dvěma postranními řetězci, které jsou (nezávisle) hydrouhlíkaté, např. rovný nebo rozvětvený řetězec s 1 - 6 uhlíky.
Jedná se např. o tyto alifatické aminokyseliny: Ala, H-amino-izobutanová kyselina, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin nebo alfa-aminomáselná kyselina.
Aromatická aminokyselina je alfa-aminokyselina, jejíž postranní řetězec má neutrální (např. ne kyselý nebo zásaditý) aromatický substituente, např. substituovaný nebo nesubstituovaný fenyl, naftyl nebo aromatickou heterocyklickou skupinu (např. pyridyl nebo indolyl). Jedná se např. o tyto aromatické aminokyseliny: Phe, p-X-Phe (kde X je halogen (např. F, Cl nebo I), OH, OCH3, CH3 nebo NO2), o-X-Phe (kde X je halogen, OH, OCH3, CH3 nebo NO2), pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichloro-Phe, Tyr(I), F5-Phe. Kde aminokyselinový zbytek je opticky aktivní, blíže nespecifikovaný L-izomer.
Hydroxyalkyl, hydroxyfenylalkyl a hydroxynaftylalkyl, uvedené v obecném vzorci výše, mohou též obsahovat 1 - 4 hydroxy substituenty a COEi znamenají -C=O.Et.
Příkladem -C = O.Ei jsou p-hydroxyfenylpropionyl (např. -C = O.CH2 -CH2-C6H4-OH) a fenylpropionyl, ale i j iné.
Stanovením nebyly prokázány disulfidové můstky mezi thiolovou skupinou na postranním řetězci zbytku Ai (např. kyselina merkaptopropionová, D-kyselina merkaptopropionová, Cys nebo D-Cys) a thiolovou skupinou na postranním řetězci zbytku A9 (např. kyselina merkaptopropionová, D-kyselina merkaptopropionová, Cys nebo D-Cys). Zkoumaný peptid je zde též vyjádřen jiným vzorcem, např. H2-C[Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2, s dvěma disulfidicky vázanými zbytky (např. Cys) umístěnými v hranaté závorce následující ve vzorci po„C“.
Zkoumané peptidy mohou být použity k inhibici uvolňování inzulínu u savců (zvířat i lidí).
Peptidy jsou tedy užitečné při léčbě za takových fyziologických podmínek, při nichž je potřebná inhibice uvolňování inzulínu např. diabetes II typu. Ty ze zkoumaných peptidů obsahujících v molekule Tyr (I) zbytek, k rozpoznání buněk obsahujících somatostatinové receptory (např. SSTR-5). Takovéto peptidy mohou být použity buď in vivo k detekci buněk, jež mají somatostatinové receptory (např. nádorové buňky) nebo in vitro jako radioligand při stanovení vazeb receptorů somatostatinu.
Tyto zkoumané peptidy mohou být dodávány ve formě farmaceuticky přijatelných solí. Příklady takových solí (nikoli však vyčerpávající) představují soli tvořené s organickými kyselinami (např.
-4CZ 289282 B6 octová, mléčná, maleinová, citrónová, maleová, askorbová, šťavelová, benzoová, methansulfonová, toluensulfonová nebo kyselina pamoová („pamaoic acid“), s anorganickými kyselinami (např. kyselina chlorovodíková, kyselina sírová nebo kyselina fosforečná), s polymerickými kyselinami (např. kyselina trislová, karboxymethylcelulóza, polymléčná, polyglykolová) nebo kopolymery polylakto-glykolových kyselin.
Léčebné účinné množství zkoumaného peptidu a farmaceuticky přijatelný nosič (např. uhličitan hořečnatý, laktóza nebo fosfolipid, s nímž léčebná složka může tvořit micelu) spolu tvoří léčebnou směs (např. pilulky, tablety, kapsle nebo kapalina) pro podávání (např. orální, intravenózní, transdermální, pulmonámí, vaginální, subkutánní, nazální, iontoforetické nebo intratracheální) pacientům v případě potřeby peptidu.
Pilulky, tablety či kapsle mohou být potaženy substancí chránící směs před rozkladem žaludečními kyselinami nebo enzymy tenkého střeva v žaludku pacienta po dobu pasáže nenatrávené léčebné směsi do tenkého střeva. Léčebná směs může být dodávána též v biologicky odbouratelné nebo neodbouratelné formě podporující uvolnění přípravku pro subkutánní a intramuskulámí podávání. Viz např. US patenty 3 773 919 a 4 767 628 a PCR přihláška WO 94/00 148.
Lze též zajistit nepřetržité podávání léčebné směsi použitím implantovatelné nebo vnější pumpy (např. INSUSAID™ pump). Peptid by měl být podáván přednostně před spaním.
Dávkování tohoto peptidu při léčení výše uvedených chorob a disbalancí se mění v závislosti na způsobu podávání, věku a tělesné hmotnosti pacienta a též podmínkách léčení. Přesné dávkování určí vždy ošetřující, případně veterinární lékař. Takovéto množství peptidu určené ošetřujícím či veterinárním lékařem je zde uváděno jako „léčebné účinné množství“.
Uvažujeme-li v rozsahu tohoto výzkumu, je peptid, vyjádřený výše uvedeným obecným vzorcem, vhodný jak při léčení chorob a disbalancí spojených s potřebou inhibice uvolňování inzulínu, např. diabetes II. typu, tak i pro detekci somatostatinových receptorů, např. radioimaginováním „radioimaging“.
Ostatní znaky a výhody tohoto vynálezu jsou zřejmé z podrobného popisu a patentových nároků.
Syntéza a použití analogů somatostatinu, které jsou předmětem tohoto výzkumu, jsou velmi dobře zvládnutelné odborníkům znalým v oboru na běžné úrovni. Není-li definováno jinak, všechny zde uvedené technické a vědecké termíny mají stejný význam jako je běžně užíván v oblasti oboru tohoto výzkumu. Zmíněné publikace, přihlášky patentů, patenty a jiná osvědčení jsou začleněny v odkazech.
Je samozřejmé, že odborník znalý v oblasti tohoto výzkumu může vycházet ze zde uvedených postupů a využít současného stavu výzkumu v plném rozsahu. Následující specifické příklady by měly být chápány pouze jako ilustrativní, žádným způsobem nelimitující možnosti dalšího výzkumu.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1. Syntéza analogů somatostatinu
Syntéza krátkých peptidů je dobře odzkoušena na příslušných pracovištích zabývajících se peptidy. Viz např. Stewart, et al., Solid Phase Peptide Synthesis (Pierce Chemical Co., 2d ed. 1984). Níže bude uvedena syntéza Analogu I. Ostatní výše uvedené zkoumané peptidy lze připravit obdobným způsobem odborníkem znalým v oboru.
-5CZ 289282 B6
1,1 g, 0,5 mmol benzylhydrylamin-polystyrenové piyskyřice (Advanced Chem Těch, lne., Lousville KY) ve formě chloridu bylo umístěno do reakční nádoby (advanced Chem Těch ACT 200 peptide synthesizer) naprogramované na dávkování následujících reagencií či rozpouštědel: (a) methylenchlorid; (b) 33% kys. trifluoroctová v methylenchloridu (2 krát po dobu 1 a 25 minut každý); (c) methylenchlorid; (d) ethanol; (e) methylenchlorid; a (f) 10% triethylamin chloroformu.
Neutralizovaná pryskyřice byla míchána po dobu 1 h s Bo-S-4-methylbenzyl-Cys a diizopropyl-karbodiimidem (oba 1,5 mmol) v methylenchloridu a vzniklá aminokyselinová pryskyřice byla cyklována na reaktoru (koloně) výše uvedeným promývacím programem dle kroků (a) až (f). Následující aminokyseliny (1,5 mmol) byly pak postupně párovány stejným způsobem: BocPhe, Boc-O-benzyl-Thr, Boc-N-benzyloxykarbonyl-Lys, Boc-D-Trp, Boc-Phe, Boc-Phe, a Boc-S-methylbenzyl-Cys. Po promytí a usušení byla takto připravená pryskyřice zvážena a usušena (1,6 g).
Pryskyřice (1,6 g; 0,5 mmol) byla pak smíchána sanisolem (5 ml), dithiothreitolem (100 mg) a anhydridem kyseliny fluorovodíkové (35 ml) při 0 °C a směs byla míchána po dobu 45 minut. Přebytek kyseliny fluorovodíkové byl rychle odpařen v proudu suchého dusíku a volný peptid byl vysrážen a promyt etherem. Surový peptid byl pak rozpuštěn v 500 ml 90% kyseliny octové, ke které byl přidán koncentrovaný roztok I2/MeOH až do stabilního hnědého zbarvení. Přebytek I2 byl odstraněn přidáním kyseliny askorbové a roztok byl odpařen na malý objem, který byl nanesen na kolonu (2,5 x 90 cm) s náplní SEPHADEX™ G-25, který byl eluován 50% Α,-ΟΗ.
Funkce obsahující hlavní složku byly detekovány UV absorpcí a chromatografií na tenké vrstvě, byly sbírány, odpařeny na malý objem a naneseny na kolonu (1,5 x 70 cm) VYDAC™ oktadecylsilan křemíku (10- 15 Tm). Tato kolona byla eluována lineárním gradientem od 80 % A a 20 % B do 40 % A a 60 % B, kde A je 0,1% kys. trifluoroctová (TFA) ve vodě a B je 79,9% acetonitril, 20% vody a 0,1 % TFA. Frakce byly detekovány chromatografií na tenké vrstvě (tle) a analytickou vysokovýkonnou kapalinovou chromatografií (hplc) a jímány odděleně za účelem dosažení maximální čistoty. Opakovanou lyofilizací z vodného roztoku bylo získáno 95 mg produktu ve formě bílého chmýřovitého prášku.
U takto získaného homogenního produktu byla provedena analýza aminokyselin kyselého hydrolyzátu a směsi cyklického oktapeptidu fixovaného na matrici pomocí techniky MALDIMS (matriční laserová desorpční hmotová spektrometrie).
(mol. hmotnost vypočtená, 1077, mol. hmotnost nalezená 1080).
Dalším příkladem je syntéza analogu V.
0,7 g, 0,25 mmol benzylhydrylamin polystyrénové piyskyřice (Advanced Chem Těch, lne.) ve formě hydrochloridu bylo umístěno do reakční nádoby fy Advanced Chem Těch ACT 200 peptide synthesizer, programované na dávkování následujících reagencií/rozpouštědla: (a) methylenchlorid, (b) 33% kys. trifluoroctová v methylenchloridu (2 krát po dobu 1 a 25 min. každá); (c) methylenchloridu, (d) ethanol, (e) methylenchlorid, (f) 10% triethylamin v chloroformu.
Neutralizovaná pryskyřice byla míchána s Boc-S-methylfenyl-Cys a diizopropylkarbodiimidem (1,5 mmol oba) v methylenchloridu po dobu 1 h a vzniklá aminokyselinová pryskyřice byla pak cyklována postupně kroky (a) až (g) dle výše uvedeného promývacího programu. Následující aminokyseliny (1,5 mmol) byly postupně párovány stejným způsobem jako výše. Boc-Phe, BocO-benzyl Thr, Boc-N-benzyloxykarbonyl-Lys, Boc-D-Trp, Boc-Phe, Boc-Phe, Boc-Asn a Boc-S-methyl-benzyl-Cys. Po promytí a usušení bylo získáno 1,2 g pryskyřice.
-6CZ 289282 B6
Peptidová pryskyřice byla podrobena HF štěpení a I2 cyklizaci stejným způsobem jako je uvedeno výše. Výtěžek výše uvedené purifikace na koloně byl 21 mg cyklického nonapeptidu, který byl dále homogenizován na hplc a tle. Dále byla provedena analýza aminokyselin kyselého hydrolyzátu a vzorku směsi cyklického nonapeptidu fixovaného na nosiči technikou MALDI MS.
(mol. hmotnost vypočtená 1192; mol. hmotnost nalezená 1192).
Syntéza analogů somatostatinu jodovaných na tyrosinovém zbytku (např. chloramin-T metodou) je velmi dobře dokumentována a snadno proveditelná odborníkem s běžnými znalostmi v oboru. Viz např. Czemíck, et al., J. Biol. Chem. 258:5525 (1993) a EP 389 180 Bl.
Příklad 2. Stanovení vazeb receptorů somatostatinu
a) Stanovení vazeb lidského SSTR-2: CHO-K1 (vaječníky, čínský křeček) buňky byly získány od Američan Type Cultare Collection (ATCC) (Rockville, MD) (ATCC No. CCL61) a byly transfekovány s lidskou SSTR-2 cDNA, metodou popsanou v Yamada, et al., Proč. Nati. Acad. Sci. USA, 89:251-255 (1992), též dostupné u ATCC (ATCC No. 79046), použitím standardních technik známých z molekulární biologie. Viz např. Patel, et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 198:605 (1994). Surové membrány byly připraveny homogenizací lidským SSTR2 transfekovaným s CHO-Κι buňkami v 20 ml ledově chladném 50 nM Tris-HCl (pufr A) na POLYTRON™ homogenizátoru (Brinkmann Instrumente, Westbury, NY) při nastavení 6, po dobu 15 s.
Přidávaný pufr byl doplněn do konečného objemu 40 ml a homogenát byl odstředěn na odstředivce SORVAL™ SS-34 rotor (Du Pont, Newtoron, CT) při 39 000 g po dobu 10 min. při 0až4°C.
Supematant byl odstraněn. Sediment (pelety) byl znova smíchán s ledově chladným pufrem A, zředěn a odstředěn stejným způsobem.
Takto získaný sediment byl resuspendován v lOmM Tris HC1 a uchováván v mrazáku pro stanovení vazby receptorů somatostatinu.
Jednotlivé podíly z membránové preparace byly inkubovány 90 min. při 25 °C s 0,5 nM [l25I—Tyr] MK-678 (2 000 Ci/mmol; c[N-methyl-Ala-Tyr (Il25)-D-Trp-Lys-Val-Phe]) v 50 mM HPES (pH 7,4) obsahujícím různé koncentrace testovaného peptidu (např. 10’11 až 10“6 M), 10 mg/ml hovězího sérového albuminu (frakce V, Sigma chemical Co., St. Louis MO), MgCl2 (5 mM), Trasylol (200 KlCl/ml), bacitracin (0,02 mg/ml) a fenylmethyl-sulfonyl fluorid (0,02 mg/ml). Vždy do konečného objemu 0,3 ml. Inkubace byly ukončeny rychlou vakuovou filtrací přes GF/C filtry (předem promyté 0,3 % polyethyleniminem po dobu 30 minut) za použití filtrační trubice (Brandel, Gaithusburg, MD).
Každá trubice i filtr byly pak promyty třikrát 5 ml alikvotního množství ledově chladného pufru A.
Specifická vazba byla definována jako rozdíl všech vazeb [T125I/Tzr]MK-678 a vazeb stanovených v přítomnosti 200 nM somatostatinu-14.
Dále byly stanovovány tyto testované peptidy: somatostatin-14, somatostatin-28, Analog I, Analog II, Analog III, Analog IV a Analog V.
Struktury Analogů I - V jsou uvedeny výše. Hodnoty Kj u testovaných peptidů byly vypočteny dle následujícího vzorce:
-7CZ 289282 B6
Kc = IC5o/[l + (LC/LEC)], kde IC50 je koncentrace testovaného peptidu potřebného k inhibici 50 procent specificky vázaného radioligandu [125I-Tyr]MK-678; LC je koncentrace radioligandu (0,05 nM) a LEC je rovnovážná disociační konstanta radioligandu (0,155 nM).
Hodnoty Kj vypočtené pro testované peptidy jsou uvedeny ve sloupci pod hlavičkou „SSTR-“ v tabulce I.
b) Stanovení vazeb lidského SSTR-5:
CHO-K1 buňky byly transfekovány s lidskou SSTR-5 c DNA metodou popsanou vYamada, et al., Biochem Bioptys. Res. Commun., 195-844 (1993) použitím standardních technik známých z molekulární biologie. Viz např. Patel, et al., Biochem. Bioptys. Res. Comm. 198:605 (1994). Surové membrány byly připraveny homogenizací SSTR-5 transfekovaného s CHO-K1 křeččími buňkami v 20 ml ledově chladné 50 mM Tris-HCl na POLYTRON™ homogenizátoru (nastavení 6, 15 sekund). Pufr byl doplněn do konečného objemu 40 ml a homogenát byl odstředěn na přístroji SORVAL™ SS-34 rotor při 39 000 g po dobu 10 min. při 0 až 4 °C.
Vzniklý supematant byl odstraněn. Získaný sediment byl resuspendován v ledově chladném pufru, zředěn a odstředěn stejným způsobem jako výše.
Finální sediment byl resuspendován v 10 mM Tris HC1 a uchováván v mrazáku pro stanovení vazeb receptorů somatostatinu.
Jednotlivé podíly z membránové preparace byly inkubovány po dobu 30 minut při 30 °C s 0,05 nM [ 25I-TyrH] somatostatin-14 (2 000 Ci/mmol; Amersham Corp., Aclinghton Heights, IC) v 50 mM HEPES (pH 7,4) obsahujícím různé koncentrace testovaného peptidu (např. 10’1 až ÍO^M), lOmg/ml hovězího sérového albuminu (frakce V), MgCl2 (5mM), Trasylol (200 KlCl/ml), bacitracin (0,02 mg/ml) a fenylmethylsulfonyl fluorid (0,02 mg/ml). Konečné objemy jednotlivých stanovení byly 0,3 ml.
Inkubace byly ukončeny rychlou filtrací přes GF/C filtry (předem promyté v 0,3% polyethyleniminu po dobu 30 min.) s použitím Brandelovy filtrační aparatury. Každá trubice i filtr byly potom 3 krát promyty 5ml podíly ledově chladného pufru.
Specifická vazba byla definována jako rozdíl všech vazeb [I25I-Tyrn] somatostatin-14 a vazeb stanovených v přítomnosti 1 000 nM ligandu BIM-23052(H2-D-Phe-Phe-Phe-D-Trp-LysThr-Phe-Thr-NH2) pro receptor somatostatinu typ-5.
Hodnoty Ki testovaných peptidů byly vypočteny podle následujícího vzorce: IC5O/[1 + (LC/LEC)], kde IC5o je koncentrace testovaného peptidu potřebná k inhibici 50 % specifických vazeb na radioligandu [125I-Tyrn] somatostatin-14, LC je koncentrace radioligandu (0,05 nM) a LEC je rovnovážná disociační konstanta radioligandu (0,16 nM).
Vypočtené hodnoty K; testovaných peptidů jsou uvedeny ve sloupci pod hlavičkou „SSTR-5“ v tabulce 1.
V tabulce I jsou též uvedeny poměry K, pro lidský SSTR-2 a K, pro lidský SSTR-5. Zkoumané peptidy (např. Analogy I - V) mají tyto poměry neočekávaně vyšší než 1 a tudíž jsou selektivnější pro SSTR-5 než pro SSTR-2.
-8CZ 289282 B6
Tabulka 1
SLOŽKA SSTR-2 SSTR-5 SSTR-2/SSTR-5
Somatostatin-14 0,187 0,883 0,212
Somatostatin-28 0,242 0,383 0,632
Analog I 15,1 0,376 40,2
Analog Π 13,0 2,63 4,94
Analog ΠΙ 14,7 1,21 12,1
Analog IV 19,3 0,928 20,8
Analog V 129 2,43 53,1
Analog VI 6,19 0,34 18,2
Analog VII 8,07 4,145 1,94
Analog VIII 4,78 0,27 17,7
Analog IX 6,205 4,77 1,30
Analog X 15,0 0,744 20,1
Analog XI 34,83 28,04 1,24
Analog ΧΠ 59,20 5,78 10,2
Analog ΧΙΠ 32,32 2,01 16,1
Samozřejmě, že tento detailní popis vynálezu je pouze ilustrativní, nikoli limitující rozsah dalšího výzkumu, který je definován v přiložených patentových nárocích. Ostatní aspekty, výhody a modifikace vyplývají též z nároků.

Claims (25)

1. Peptid obecného vzorce I
Ri \
A|—A2—A3—A4—D—Trp—Lys—A7—As—A9—R3 (I), /
R2 ve kterém
Ai je D- nebo L-izomer Cys;
A2 je Asn, Gin, Ala, kyselina 2-aminoheptanová, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin, nebo kyselina 2-aminomáselná, Phe, p-X-Phe nebo o-X-Phe, kde X je fluor, chlor, jod, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo F5-Phe, nebo je vynecháno;
A3 je Phe, p-X-Phe nebo o-X-Phe, kde X je fluor, chlor, jod, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo Fs-Phe;
A4 je His nebo Phe, p-X-Phe nebo o-X-Phe, kde X je fluor, chlor, jod, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo F5-Phe,;
-9CZ 289282 B6
A7 je Thr, Ser, Ala, kyselina 2-aminoheptanová, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin, nebo kyselina 2-aminomáselná;
Ag je Phe, p-X-Phe nebo o-X-Phe, kde X je fluor, chlor, jod, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, pyridyl-A, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo Fs-Phe;
A9 je D- nebo L-izomer Cys;
přičemž každý Ri a R2 je, nezávisle, H, Ci_i2 alkyl, C7_2o fenylalkyl, Cn_2o naftylalkyl, Ci_i2 hydroxyalkyl, C7_2o hydroxyfenylalkyl, Cn_2o hydroxynaftylalkyl nebo COEi, kde Ei je Ci_i2 alkyl, C7_2o fenylalkyl, Cu_2o naftylalkyl, Ci_i2 hydroxyalkyl, C7-2o hydroxyfenylalkyl nebo Cn_2o hydroxynaftylalkyl a R3 je NH2 nebo NH-Y-CH2.Z, kde Y je Ci_j2 přímý či rozvětvený dvojvazný alkyl a Z je H, OH, CO2H nebo CONH2, a disulfidovými můstky vázané postranní řetězce zbytku Ai a A9 za tvorby cyklického peptidu.
2. Peptid podle nároku 1, obecného vzorce I, kde každá A3 a Ag, nezávisle, je Phe, p-X-Phe, kde X je halogen, OH, OCH3, CH3 nebo NO2, o-X-Phe, kde Y je halogen, OH, OCH3, CH3 nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo Fs-Phe, a A4 je His, Phe, p-X-Phe, kde X je halogen, OH, OCH3, CH3 nebo NO2, o-X-Phe kde X je halogen, OH, OCH3, CH3 nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo Fs-Phe.
3. Peptid podle nároku 2, obecného vzorce I, kde A2 je vynechána a A7 je Thr, Ser, Ala, kyselina 2-aminoizomáselná, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin, nebo kyselina 2-aminomáselná.
4. Peptid podle nároku 3, obecného vzorce I, kde A9 je Cys.
5. Peptid podle nároku 4, obecného vzorce I, kde každá A3 a Ag, nezávisle, je Phe, p-X-Phe, kde X je halogen, OH, nebo CH3, Tyr-I, nebo Trp, a A4 je His, Phe, p-X-Phe, kde X je halogen, OH, nebo CH3, Tyr-I, nebo Trp.
6. Peptid podle nároku 5, obecného vzorce I, kde A7 je Thr nebo Ser.
7. Peptid podle nároku 6, obecného vzorce I, kde A3 je Phe, A4 je Phe, p-X-Phe, kde X je halogen, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, His, Tyr-I, nebo Trp, a Ag je Phe nebo p-X-Phe, kde X je halogen, OH, OCH3, CH3, nebo NO2.
8. Peptid podle nároku 6, obecného vzorce I, kde A3 je Phe, A4 je Phe, Tyr, Tyr-I, nebo Trp, a Agje Phe.
9. Peptid podle nároku 8, obecného vzorce I, kde každý Ri a R2, nezávisle, je H, a R3 je NH2.
10. Peptid podle nároku 9 vzorce:
H2-c[Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2~c[Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2, nebo
H2-c[Cys-Phe-Tyr(I)-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2.
-10CZ 289282 B6
11. Peptid podle nároku 7 vzorce:
H2-c[Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Phe-His-I>-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Phe-Tyr-I-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Phe-Tyr-I-D-T rp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2 nebo
H2-c[D-Cys-Phe-Tyr-I-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2.
12. Peptid podle nároku 2, obecného vzorce I, kde A2 je Asn, Gin, Ala, kyselina 2-aminoizomáselná, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin, kyselina 2-aminomáselná, Phe, p-X-Phe, kde X je halogen, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, o-X-Phe, kde X je halogen, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, pyridyl-Ala, Trp, beta-naftylalanin, 2,4-dichlor-Phe, Tyr-I, nebo Fr-Phe, a A7 je Thr, Ser, Ala, kyselina 2-aminoizomáselná, Val, Leu, izoleucin, norleucin, norvalin, nebo kyselina 2-aminomáselná.
13. Peptid podle nároku 12, obecného vzorce I, kde A9 je Cys.
14. Peptid podle nároku 13, obecného vzorce I, kde každá A3, A4 a Ag, nezávisle, je Phe, p-XPhe, kde X je halogen, OH, nebo CH3, Tyr-I, nebo Trp, a A4 je His, Phe, p-X-Phe, kde X je halogen, OH, nebo CH3, Tyr-I nebo Trp.
15. Peptid podle nároku 14, obecného vzorce I, kde A2 je Asn nebo Gin, a A7 je Thr nebo Ser.
16. Peptid podle nároku 15, obecného vzorce I, kde A3 je Phe, Α» je Phe, p-X-Phe, kde X je halogen, OH, OCH3, CH3, nebo NO2, His, Tyr-I, nebo Trp, a Ag je Phe nebo p-X-Phe, kde X je halogen, OH, OCH3, CH3, nebo NO2.
17. Peptid podle nároku 16, obecného vzorce I, kde A3 je Phe, A4 je Phe, Tyr, Tyr-I, nebo Trp, a Ag je Phe.
18. Peptid podle nároku 17, obecného vzorce I, kde A2 je Asn, každé Ri a R2, nezávisle, je H, aR3jeNH2.
19. Peptid podle nároku 18 vzorce:
H2-C[Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2.
-11CZ 289282 B6
20. Peptid podle nároku 16 vzorce:
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c [Cy s-Asn-Phe-T rp-D-T rp-Ly s-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[D-Cys-Asn-Phe-Trp-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2.
H2-c[Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[I>-Cys-Asn-Phe-His-D-Trp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-Tyr(I)-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[I>-Cys-Asn-Phe-Tyr(I}-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys]-NH2,
H2-c[Cys-Asn-Phe-Tyr(I)-D-T rp-Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2, nebo
H2-^D““Cys-Asn-Phe-Tyr(I)-D-Trp---Lys-Ser-Phe-Cys]-NH2.
21. Použití peptidů podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro inhibování uvolnění inzulínu v subjektu.
22. Použití peptidů podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro léčení cukrovky typu II v subjektu.
23. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství peptidů podle kteréhokoliv z nároků 1 až 21 a farmaceuticky přijatelný nosič.
24. Použití peptidů podle kteréhokoliv z nároků 1 až 21 pro výrobu diagnostického prostředku pro zobrazení buněk in vivo, kde uvedené buňky obsahují somatostatinové receptory.
25. Použití peptidů podle kteréhokoliv z nároků 1 až 21 pro výrobu diagnostického prostředku pro zobrazení buněk in vitro, kde uvedené buňky obsahují somatostatinové receptory.
CZ1998489A 1995-09-29 1996-09-04 Peptid, jeho pouľití a farmaceutický prostředek CZ289282B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US463395P 1995-09-29 1995-09-29
US08/578,037 US5708135A (en) 1995-09-29 1995-12-26 Cyclic peptide analogs of somatostatin

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ48998A3 CZ48998A3 (cs) 1998-07-15
CZ289282B6 true CZ289282B6 (cs) 2001-12-12

Family

ID=26673267

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ1998489A CZ289282B6 (cs) 1995-09-29 1996-09-04 Peptid, jeho pouľití a farmaceutický prostředek

Country Status (23)

Country Link
US (2) US5708135A (cs)
EP (1) EP0859785B1 (cs)
JP (1) JP3983806B2 (cs)
KR (1) KR100430716B1 (cs)
CN (1) CN1154657C (cs)
AT (1) ATE201696T1 (cs)
AU (1) AU711423B2 (cs)
BR (1) BR9610725A (cs)
CA (1) CA2229544C (cs)
CZ (1) CZ289282B6 (cs)
DE (1) DE69613137T2 (cs)
DK (1) DK0859785T3 (cs)
ES (1) ES2158340T3 (cs)
GR (1) GR3036447T3 (cs)
HU (1) HU221979B1 (cs)
IL (2) IL123357A0 (cs)
NO (1) NO318369B1 (cs)
NZ (1) NZ316822A (cs)
PL (1) PL325959A1 (cs)
PT (1) PT859785E (cs)
SK (1) SK29298A3 (cs)
TW (1) TW514642B (cs)
WO (1) WO1997011962A1 (cs)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7238340B1 (en) * 1991-11-27 2007-07-03 Cis Bio International Monoamine, diamide, thiol-containing metal chelating agents
US5708135A (en) * 1995-09-29 1998-01-13 Biomeasure Incorporated Cyclic peptide analogs of somatostatin
US6262229B1 (en) 1996-12-04 2001-07-17 Biomeasure Incorporated Somatostatin antagonists
ATE330966T1 (de) * 1996-12-04 2006-07-15 Sod Conseils Rech Applic Somatostatin-antagonisten
ATE234113T1 (de) * 1997-05-01 2003-03-15 Cedars Sinai Medical Center Verfahren zur behandlung von hyperprolaktinämia und prolaktinomen
US5972893A (en) * 1997-05-06 1999-10-26 Cedars-Sinai Medical Center Method of treating hyperprolactinemia and prolactinomas
EP1332762A1 (en) * 1997-05-01 2003-08-06 Cedars-Sinai Medical Center Method of treating hyperprolactinemia and prolactinomas
EP0981363B1 (en) * 1997-05-13 2003-07-30 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques (S.C.R.A.S.) Somatostatin agonists for decreasing body weight
EP0981364B1 (en) * 1997-05-13 2006-03-01 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Method and compositions for treating hyperlipidemia
US6004928A (en) * 1997-05-13 1999-12-21 Biomeasure, Incorporated Method of treating hyperlipidemia
ES2216290T3 (es) * 1997-05-13 2004-10-16 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques S.A.S. Somatostatina y agonistas de la somatostatina para el tratamiento de insensibilidad a la insulina y de sindrome x.
US6465613B1 (en) 1998-11-19 2002-10-15 Tulane University Hydrophilic somatostatin analogs
US6903074B1 (en) 1999-06-04 2005-06-07 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. Neuromedin b and somatostatin receptor agonists
US6864234B1 (en) 1999-06-25 2005-03-08 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. Somatostatin agonists
US6358491B1 (en) 1999-08-27 2002-03-19 Berlex Laboratories, Inc. Somatostatin analogs
US6579967B1 (en) 1999-12-14 2003-06-17 The Salk Institute For Biological Studies Receptor-selective somatostatin analogs
US7019109B2 (en) * 2001-03-16 2006-03-28 The Salk Institute For Bilogical Studies SSTR1-selective analogs
PL369336A1 (en) 2001-09-21 2005-04-18 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Diagnostic or therapeutic somatostatin or bombesin analog conjugates and uses thereof
WO2003074551A2 (en) * 2002-03-01 2003-09-12 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Conjugates of therapeutic or cytotoxic agents and biologically active peptides
AU2003259172A1 (en) * 2002-07-24 2004-02-09 The Salk Institute For Biological Studies Receptor (sstr4)- selective somatostatin analogs
US20050118099A1 (en) * 2003-03-10 2005-06-02 Braslawsky Gary R. Thiol-mediated drug attachment to targeting peptides
CN100475271C (zh) 2003-08-20 2009-04-08 加利福尼亚大学董事会 具有抑制生长激素释放活性的促生长素抑制素类似物
US8691761B2 (en) 2006-10-16 2014-04-08 Jean E. F. Rivier Somatostatin receptor 2 antagonists
BRPI0717135B8 (pt) 2006-10-16 2021-05-25 Salk Inst Biological Studies antagonista peptídico cíclico de somastotatina e composição farmacêutica
CA2818833A1 (en) 2010-11-29 2012-06-07 Thomas Urs Thueer Medicated module with automatic reservoir engagement

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2416048A1 (de) * 1974-04-03 1975-10-30 Hoechst Ag Neue peptide mit biologischer wirkung
US4133782A (en) * 1976-06-07 1979-01-09 The Salk Institute For Biological Studies Somatostatin analogs with dissociated biological activities
US4211693A (en) * 1977-09-20 1980-07-08 The Salk Institute For Biological Studies Peptides with para-substituted phenylalanine
US4225472A (en) * 1979-05-29 1980-09-30 American Home Products Corporation Truncated somatostatin analogs
FR2523125A1 (fr) * 1982-03-08 1983-09-16 Sanofi Sa Analogues de la somatostatine a activite biologique modifiee et medicaments en contenant
US4428942A (en) * 1982-05-17 1984-01-31 The Salk Institute For Biological Studies Analogs of somatostatin
GB8318552D0 (en) * 1983-07-08 1983-08-10 Sandoz Ltd Organic compounds
US4853371A (en) * 1986-06-17 1989-08-01 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Therapeutic somatostatin analogs
US4798821A (en) * 1987-03-02 1989-01-17 Merck & Co., Inc. Antihypertensive therapy for diabetics
AU639371B2 (en) * 1987-07-10 1993-07-22 Novartis Ag Method of treating breast cancer
ATE140237T1 (de) * 1989-12-08 1996-07-15 Univ Tulane Oktapeptidanaloge von somatostatin mit threonin in position 6
JPH03252783A (ja) * 1990-03-02 1991-11-12 Hitachi Ltd データ処理装置
JPH04227540A (ja) * 1990-04-04 1992-08-17 Hitachi Ltd 演算処理装置及びディジタル信号処理プロセッサ
EP0673387B1 (en) * 1992-12-11 1999-09-22 University Of Florida Materials and methods for control of pests
JP3904244B2 (ja) * 1993-09-17 2007-04-11 株式会社ルネサステクノロジ シングル・チップ・データ処理装置
US5708135A (en) * 1995-09-29 1998-01-13 Biomeasure Incorporated Cyclic peptide analogs of somatostatin
JP3767085B2 (ja) * 1996-09-04 2006-04-19 セイコーエプソン株式会社 情報処理回路及びマイクロコンピュータ

Also Published As

Publication number Publication date
KR20000004896A (ko) 2000-01-25
DK0859785T3 (da) 2001-08-27
CN1154657C (zh) 2004-06-23
JPH11512707A (ja) 1999-11-02
US6001801A (en) 1999-12-14
IL155693A0 (en) 2003-11-23
DE69613137D1 (de) 2001-07-05
DE69613137T2 (de) 2001-11-15
AU6914596A (en) 1997-04-17
NO981395D0 (no) 1998-03-27
KR100430716B1 (ko) 2004-09-08
HUP9802372A2 (hu) 1999-02-01
JP3983806B2 (ja) 2007-09-26
ATE201696T1 (de) 2001-06-15
HUP9802372A3 (en) 2000-03-28
BR9610725A (pt) 1999-07-13
WO1997011962A1 (en) 1997-04-03
EP0859785A1 (en) 1998-08-26
HU221979B1 (hu) 2003-03-28
CZ48998A3 (cs) 1998-07-15
TW514642B (en) 2002-12-21
IL123357A0 (en) 1998-09-24
EP0859785B1 (en) 2001-05-30
PL325959A1 (en) 1998-08-17
SK29298A3 (en) 1998-08-05
CN1197460A (zh) 1998-10-28
CA2229544C (en) 2007-11-20
AU711423B2 (en) 1999-10-14
NO318369B1 (no) 2005-03-14
US5708135A (en) 1998-01-13
PT859785E (pt) 2001-11-30
NZ316822A (en) 1999-10-28
ES2158340T3 (es) 2001-09-01
GR3036447T3 (en) 2001-11-30
EP0859785A4 (en) 1999-05-26
NO981395L (no) 1998-03-27
CA2229544A1 (en) 1997-04-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ289282B6 (cs) Peptid, jeho pouľití a farmaceutický prostředek
US8691761B2 (en) Somatostatin receptor 2 antagonists
EP2433963B1 (en) Receptor (SSTR2)-selective somatostatin antagonists
DE69737787T2 (de) Zyklische somatostatin-analoge mit einer hauptkette mit einer gespannten konformation
US5847066A (en) Analogs of growth hormone-releasing factor
CZ284341B6 (cs) Oktapeptidický analog somatostatinu
US5106834A (en) Linear free-sulfhydryl-containing oligopeptide derivatives as antihypertensive agents
US6579967B1 (en) Receptor-selective somatostatin analogs
KR100629013B1 (ko) Ｉｇｆ-ⅰ 및 -ⅱ를 억제하는 ｇｈ-ｒｈ의 길항 유사체
US5569741A (en) Cyclic octapeptide neuromedin B receptor antagonists
CZ20032281A3 (cs) Antagonisté somatostatinu
CZ289370B6 (cs) Peptid, jeho pouľití a farmaceutický prostředek
EP0606463B1 (en) Neuromedin b receptor antagonists
CA2637593A1 (en) Compounds analogous to growth hormone peptide secretagogues and preparations containing them
AU739557B2 (en) Cyclic peptide analogs of somatostatin
RU2177006C2 (ru) Циклические пептидные аналоги соматостатина

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20030904