CZ285810B6 - Stabilní kompozice pro orální podávání peptidů a způsob výroby jednotkové dávky této kompozice - Google Patents

Abstract

Pevná farmaceutická kompozice pro orální podávání peptidů o malé a střední velikosti, zvláště vasopresinu, oxytocinu, a jejich analogů, obsahující uvedené peptidy, enterický povlak, a farmaceuticky přijatelné nosiče obsahující tlumící činidlo s tlumením od 2 do 6 pH výhodně okolo pH 5. Způsob výroby jednotkové dávky, uvedených peptidů obsahujících směs přísad, formování výsledné směsi do kuliček menších než 2 mm, povlékání kuliček enterickým povlakem, který je dobře rozpustný v žaludeční šťávě o pH 5,0 nebo vyšším, ale né výrazně nižším pH, plnění potažených kuliček do kapslí, nebo jejich začlenění do tablet, které se rozpadají v žaludku. Také je popsána metoda pro orální podávání pacientům této jednotkové dávky.ŕ

Description

Dosavadní stav techniky

Řada léčiv, určená pro léčení různých chorob, obsahuje jako účinnou látku přirozeně se vyskytující peptidy nebo jejich syntetické analogy.

Pokud se používá peptidů o malé a střední velikosti, jako jsou vasopressin, oxytocin a jejich analogy, jako léčiv nebo k podobným účelům, bývá jejich absorpce velmi neuspokojivá v důsledku nestálosti těchto peptidů v prostředí gastrointestinálního traktu. Jsou proto žádoucí lepší dodávkové systémy pro neparenterální, zvláště pro orální podávání peptidů ajejich analogů, viz Davies, S.: Developing delivery systems for peptides and proteins, Scrip Magazíne 1992, 34-38.

Úkolem vynálezu je proto vyvinout farmaceutické kompozice známého typu na bázi výše uvedených látek, které by umožňovaly zlepšení absorpce vasopressinu, oxytocinu ajejich analogů.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je pevná farmaceutická kompozice pro orální podávání polypeptidu, zvoleného ze souboru, zahrnujícího vasopressin, oxytocin ajejich analogy, jejíž podstata spočívá vtom, že obsahuje zmíněný polypeptid, farmaceuticky přijatelný nosič, obsahující pufr s tlumením pH od 2 do 6, a enterický povlak, snadno rozpustný v gastrické tekutině při pH 6,5 nebo při pH vyšším nebo nižším než 6,5, přednostně při pH 5,5, ale nesnadno rozpustný při pH nižším než 5,0, z polymeru, obsahujícího disociovatelné karboxylové skupiny.

Peptid se přednostně volí ze souboru, zahrnujícího DDAVP (desmopressin), oxytocin, CAP (atosiban) akarbetocin. Zvláště výhodný je DDAVP. Úplné sekvence těchto peptidů jsou popsány v tabulce 1, uvedené dále.

Je výhodné, když z farmaceutického hlediska přijatelný nosič dále obsahuje jedno nebo několik činidel, vybraných ze skupiny, obsahující sacharidy a modifikované sacharidy ajejich deriváty, polyethylen a/nebo polypropylenglykol ajejich deriváty, anorganická plniva nebo mazadla, mastné kyseliny ajejich estery a soli, konzervační apotahovací činidla. Vhodné, z farmaceutického hlediska přijatelné, nosiče zahrnují různé druhy nosičů pro přípravu farmaceutických prostředků v podobě tablet nebo tobolek, například nosič antidiuretické kompozice, obsahující DDAVP, který je popsán v evropském patentu č. 163 723. Zvláště výhodné jsou vícečásticové systémy, kterými jsou systémy pro podávání v měkkých a tvrdých želatinových tobolkách. Výhodná velikost sférických částic, které obsahují peptid, je menší než asi 2 mm.

Enterický povlak podle výhodného provedení tohoto vynálezu je navržen tak, aby došlo k uvolňování účinné látky v tenkém střevě.

-1 CZ 285810 B6

Částice, které jsou obsažené v tabletách nebo kapslích, jsou s výhodou potaženy enterickým povlakem pro zpožděné uvolňování jejich obsahu ve vrchní části tenkého střeva. Zvláště výhodné je zpožděné uvolňování peptidů v dvanáctníku a lačníku, zvláště v dvanáctníku a hořejším lačníku. Entericky potažené kuličky mohou být také obsaženy v tabletě, která se ochotně rozpadá v žaludku, nebo se mohou podávat v suspendované formě v médiu, které snadno nerozpouští enterický povlak.

Je výhodné, aby byl enterický povlak rozpustný v žaludeční šťávě při pH asi 5,0 a vyšším, zejména při pH asi 5,5 a vyšším. Enterický povlak, který není snadno rozpustný v takové tekutině o pH asi 6,5, nepřipustí podstatné uvolnění složek kompozice podle tohoto vynálezu ve vrchní části tenkého střeva a proto nebude zvláště výhodný. Na druhé straně povlaky, které se rozpouštějí v žaludečních tekutinách při pH značně nižším než 5,0, jsou také méně výhodné, poněvadž připustí uvolňování složek v žaludku. Užitečné enterické povlaky podle tohoto vynálezu obsahují polymer, mající disociovatelné karboxylové skupiny, jako jsou deriváty celulózy, zahrnující ftalát hydroxypropylmethylcelulózy, ftalát-acetát celulózy, trimellitát-acetát celulózy a podobné deriváty celulózy a jiné sacharidové polymery, jakož i polyvinylacetát-ftalát a podobné parciální estery dvojsytných nebo trojsytných karboxylových kyselin s polyvinylacetátem a podobnými polymery, nesoucími alkoholové hydroxyskupiny. Enterický povlak může být také výhodně připraven ze směsi takových polymerů.

Peptid je s výhodou smísen s nosičem, obsahujícím pufrovací činidlo a jedno nebo několik činidel, vybraných ze skupiny, obsahující sacharidy a modifikované sacharidy a jejich deriváty, polyethylen a/nebo polypropylenglykol a jeho deriváty, organická a anorganická jádra, plniva nebo lubrikační materiály, mastné kyseliny, jejich estery a soli, stabilizátory, antioxidanty a povlakotvomá činidla. Pufrovací činidlo by mělo být schopné tlumit pH od 2 do 6, s výhodou od 4 do 5,5, nejvýhodněji okolo pH 5, to jest mělo by uplatňovat podstatnou tlumicí kapacitu v tomto rozmezí a výhodně v okolí pH 5. Hodnoty pH nižší než asi 2 může být také použito, ale není to výhodné, protože se riskuje poškození střevní stěny při dlouhodobém užívání. Výhodné rozmezí pH podle tohoto vynálezu je kompromisem mezi, na jedné straně, maximalizací stabilizačního účinku a, na druhé straně, ochranou střevní stěny proti potenciálnímu poškození nízkou hodnotou pH. Protože kompozice podle tohoto vynálezu je určena pro výhodné uvolňování ve vrchní části tenkého střeva, kde během její cesty je kyselý obsah žaludku neutralizován přílivem Na+, je tlumením pH inhibován nebo zpožděn vzrůst hodnoty pH nad přednostní rozmezí, tj. ve směru k homí hodnotě přednostního rozmezí a nad tuto homí hodnotu.

Pufrovací činidlo takto tvoří bariéru pro přirozenou neutralizaci obsahu žaludku při jeho vyprazdňování do tenkého střeva přes vrátník. Výhodnými pufrovacími činidly jsou hydrogen- a dihydrogenfosfát, jako je dihydrogenfosfát sodný, a směs dihydrogenfosfátu sodného s hydrogenfosfátem disodným, tetrahydrogenfosfát vápenatý, kyselina citrónová a směs kyseliny citrónové a její monosodné soli, kyselina fumarová a její monosodná sůl, kyselina adipová a její monosodná sůl, kyselina vinná a její sodná sůl, kyselina askorbová a její monosodná sůl, kyselina glutamová, kyselina asparagová, betainhydrochlorid, hydrochloridy aminokyselin, jako je monohydrochlorid argininu a hydrochlorid glutamové kyseliny, a kyselina glukarová. Kompozice podle vynálezu výhodně obsahuje alespoň 10 % hmotnostních, s výhodou alespoň 25 % hmotnostních, nejvýhodněji alespoň 40 % hmotnostních pufrovacího činidla. Může být použito i směsi dvou nebo více pufrovacích složek.

Příklady provedení vynálezu

Vynález bude dále popsán podrobněji se zřetelem na degradaci DDAVP v žaludeční tekutině. Pokud není uvedeno jinak, rozumí se pod procentními údaji údaje hmotnostní.

-2CZ 285810 B6

Příklad 1

Lidské gastrointestinální tekutiny byly získány od zdravých dobrovolníků mužského pohlaví. Odběr byl prováděn na lačno po 8 hodinách bez potravy.

Byla jim zavedena trubička intranasálně po lokální anestezii xylokainem, a posléze byla odebrána žaludeční tekutina.

Potom bylo podáno dobrovolníkům jedno standardní jídlo 1 hodinu před odběrem tekutin z dvanáctníku a distálního lačníku a další příští ráno před odběrem distální střevní tekutiny.

Po odstředění žaludečních a střevních tekutin byly tyto tekutiny ochlazeny, a 1 ml této tekutiny byl uskladněn při teplotě 20 °C.

Degradační metoda

Peptid, nebo analog peptidu (10 μΐ 10 mM peptidu v 0,9 % vodném NaCl) byl přidán do 190 μΐ nezředěné žaludeční tekutiny o teplotě 37 °C. Bylo odebráno 25 μΐ vzorku a smíseno se 100 μΐ acetonu, a reakce byla ukončena.

Po odstředění, které trvalo 10 minut, bylo 10,000 g 10 μΐ kapaliny nad sedlinou analyzováno chromatografií HPLC z reverzní fáze.

Určení degradace peptidu

Analýza byla uskutečněna pomocí analyzéru Varian 5000 HPLC, který byl opatřen UVdetektorem (220 nm).

Kolona Bondapak TM Cl8 (3,9 x 300 mm), eluent MeOH/0,025 MH4AC (izokritické podmínky), průtoková rychlost 1 ml/min.

Protein a určení pH

Protein: Proteinová zkouška Bio - Rad.

pH: Orion model SA720., pH - papír Měrek (Darmstadt), rozmezí 4,0-7,0.

Výsledek

Pro DDAVP byla nalezena degradace (od okolo 50 % po 35 min) v obou žaludeční i střevní šťávě pro pH 6,5.

Když pH bylo upraveno na pH 4,0 DDAVP byl v podstatě stálý. Při nepřítomnosti pH pufru pro proteolytický DDAVP bylo nalezeno zpomalení v dvanáctemíkové nebo lačníkové střevní tekutině.

Příklad 2

Pokus s krysami

Krysy mužského pohlaví SPD s hmotností okolo 300 g byly anesteziovány 15 mg/kg thiobutabarbitálem sodným (Inactin™, Byk Gulden, Germany).

-3CZ 285810 B6

Po otevření břišní dutiny byl potom vystřižen, proužek tenkého střeva okolo 3 mm dlouhý a byl připraven v tenkém střevě okolo 15 mm distálně od vrátníku.

Skrze tento výstřižek byla vložena želatinová kapsle do tenkého střeva, která obsahovala 0,10 ml peptidového roztoku, který obsahuje 2,0 mg peptidu na ml vodného citrátového tlumicího roztoku (pH okolo 2,5, připravený smíšením 22,3 ml 1 M kyseliny citrónové, 2,7 ml 2,0 M fosfátu sodného a 25 ml vody)

Byl odstartován časový zápis a střevní šev a břišní dutina byla uzavřena. Krevní vzorek byl vytažen v předem daných intervalech z cévky v krční tepně.

Obsah peptidů byl určen pomocí RIA.

Výsledek, který je ukázán na obrázku 1, poukazuje na stabilizační účinnost kompozice podle vynálezu oproti shodnému prostředku, ale bez tlumiče (obrázek 2), který byl připraven rozpuštěním odpovídajícího množství DDAVP v 0,9 % solného roztoku.

Výsledky pro 5 krys, které byly použity pro každý z pokusů, jsou ukázány v oddělených křivkách.

Příklad 3

Tablety podle vynálezu, obsahující vybrané množství DDAVP apH - tlumicí činidlo (25% hmotnostních kalcium tetrahydrogen fosfátu a 3 % hmotnostní disodného hydrogen fosfátu) mohou být připraveny nepatrnou úpravou (přídavek aprotininu) pomocí postupu, popsaného v EP-A-0 163 723.

Tyto tablety mohou být potažené povlakem, který je sprejovaný za použití enterického povlaku, jak je popsán Agyilirah, G. A. a Bankéř, G. S. v Polymerech pro řízené dodávky léčiva, Tarcha, P. J., Ed., CRS Press, Boča Raton 1991, p. 39-66.

Příklad 4

Tvrdé želatinové kapsle, obsahující částice enterického povlaku DDAVP formulace podle tohoto vynálezu mohou být obdrženy následujícím postupem.

Pevné jádro částic (100 g), připravené podle EP-A2-0 366 722 (příklad 3), je povlečeno 760 ml vodného roztoku, obsahujícího 20,0 mg DDAVP acetátu, a tyto povlečené částice jsou sprejově potaženy v Spheronizer^(R) fluidním loži, pokrytém methanol-methylen chloridem 1:1, povlakovým roztokem, obsahujícím (hmotnostně) 10 % ftalát polyvinylacetátu (PVAP., TD-17, Colorcon Inc.,West Point, PA), 0,7 glyceryl triacetátu a 1 % kyseliny stearové, a sušeny.

Tvrdé želatinové kapsle jsou plněny těmito částicemi s enterickým povlakem (250 mg/kapsle).

Tabulka 1

Peptid nebo jeho analog	Sekvence
CAP (atosiban) carbetocin DDAVP (desmopressin) oxytocin	Mpa-D-Tyr(Et)-Ile-Thr-Asn-Cys-Pro-Om-GlyNH2 Bua-Tyr(Me)-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-GlyNH2 Mpa-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-D-Arg-Gly-GlyNH2 Cys-Tyr-Ile-Asn-Cys-Pro-Leu-GlyNH2

Claims (6)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Pevná farmaceutická kompozice pro orální podávání polypeptidů, zvoleného ze souboru, zahrnujícího vasopressin, oxytocin a jejich analogy, vyznačující se tím, že obsahuje zmíněný polypeptid, farmaceuticky přijatelný nosič, obsahující pufr s tlumením pH od 2 do 6, a enterický povlak, snadno rozpustný v gastrické tekutině při pH 6,5 nebo při pH vyšším nebo nižším než 6,5, přednostně při pH 5,5, ale nesnadno rozpustný při pH nižším než 5,0, z polymeru, obsahujícího disociovatelné karboxylové skupiny.
2. 2. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že polypeptid je zvolen ze souboru, zahrnujícího DDAVP tj. desmopressin, oxytocin, CAP tj. atosiban a karbetocin.
3. 3. Kompozice podle nároku 2, vyznačující se tím, že polypeptidem je DDAVP.
4. 4. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že farmaceuticky přijatelný nosič dále obsahuje alespoň jedno činidlo, zvolené ze souboru, zahrnujícího sacharidy a modifikované sacharidy a jejich deriváty, polyethylen a/nebo polypropylenglykol a jejich deriváty, anorganická plniva nebo mazadla, mastné kyseliny a jejich estery a soli, konzervační činidla a povlakotvomá činidla.
5. 5. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje enterický povlak pro uvolnění jejího obsahu v horní části tenkého střeva.
6. 6. Kompozice podle některého z předchozích nároků, vyznačující se tím, že enterický povlak je zhotoven z látky, zvolené ze souboru, zahrnujícího deriváty celulózy, včetně ftalátu hydroxypropylmethylcelulózy, acetátftalátu celulózy a acetáttrimelitátu celulózy, ftaláty vinylacetátu a podobné parciální estery dvojsytných nebo trojsytných karboxylových kyselin s polyvinylacetátem a podobnými polymery, nesoucími alkoholické hydroxyskupiny a směsi takových polymerů.

   2 výkresy

   -5CZ 285810 B6 koncentrace (pmol/ml)

   DDAVP sorpce v tenkém střevě samce krysy citrátový tlumič, výchozí pH 2,5