KR100289141B1 - 펩타이드의 경구 투여를 위한 안정화된 조성물 - Google Patents

Abstract

소형 및 중형 크기의 펩타이드, 특히 바소프레신, 옥시토신, 그리고 이들 유사체의 경구 투여를 위한 고체 형태의 약학적 조성물은 상기 펩타이드, 장피복제, pH 2 내지 6에서, 바람직하게는 pH 약 5에서 완충 작용을 하는 완충제를 함유하는 약학적으로 허용 가능한 담체로 이루어진다.

상기 펩타이드의 1회 복용량의 제조 방법은 성분을 혼합하는 단계, 생성 혼합물을 2mm 이하로 구형체화하는 단계, 상기 구형체를 pH 5.0 이상의 장액에서는 용이하게 용해되지만, 매우 낮은 pH에서는 용해되지 않는 장 피복제로 피복하는 단계, 그리고 이 피복 구형체를 캡슐 내로 충진하거나 이들을 위에서 분해 가능한 정제로 제조하는 단계로 이루어 진다.

또한 상기 1회 복용량을 환자에게 경구 투여하는 방법도 기재되어 있다.

Description

[발명의 명칭]

펩타이드의 경구 투여를 위한 안정화된 조성물

[기술분야]

본 발명은 소형 및 중형 크기의 펩타이드, 특히 바소프레신, 옥시토신, 그리고 이들 유사체(analogue)의 경구 투여를 위한 고체 형태의 약학적 조성물에 관련된 것이다.

본 발명은 또한 소형 및 중형 크기의 펩타이드, 특히 바소프레신, 옥시토신, 그리고 이들 유사체의 상기 경구 투여를 위한 조성물의 1회 복용량의 제법에 관련된 것이다.

본 발명은 또한 상기 조성물을 환자에게 투여하는 방법에 관한 것이다.

[배경기술]

여러 질병의 치료를 위한 많은 의약품은 활성 성분으로서, 자연적으로 존재하는 펩타이드 또는 이들의 합성 유사체를 포함한다.

위장 계의 환경 내에서, 소형 및 중형 크기의 펩타이드, 특히 바소프레신, 옥시토신, 그리고 이들 유사체의 불안정성 때문에, 의약품으로서 또는 이와 유사한 목적으로 주어졌을 때, 이들의 흡수는 아직도 매우 불만족스럽다. 따라서, 펩타이드 및 이들 유사체의 경구적, 특히 입을 통한 경구 투여를 위한 보다 좋은 전달 방법이 바람직하다. 참조. 데이비스, 에스. :“펩타이드 및 단백질을 위한 전달 방법의 개발”(“Developing delivery systems for peptides and proteins”), 스크립 매가진 1992, 34-38(Scrip Magazine 1992, 34-38).

[발명의 목적]

본 발명의 목적은 소형 및 중형크기의 펩타이드, 특히 바소프레신, 옥시토신, 그리고 이들 유사체의 보다 좋은 흡수를 제공하는 공지 및 상기 종류의 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 소형 및 중형 크기의 펩타이드, 특히 바소프레신, 옥시토신, 그리고 이들 유사체의 경구투여용 상기 약학적 조성물의 1회 복용량와 제조 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물을 환자에게 투여하는 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 추가적 목적은 본 발명의 바람직한 실시예의 상세한 설명의 연구에 의해 명백해질 것이다.

[발명의 요약]

본 발명의 상기 및 다른 목적은 상기 종류의 약학적 조성물, 즉 소형 및 중형 크기의 펩타이드, 특히 바소프레신, 옥시토신, 또는 바소프레신 또는 옥시토신의 유사체, 장 피복제, 및 pH 2 내지 6, 더욱 바람직하게는 4 내지 5.5, 가장 바람직하게는 약 pH 5에서 완충 작용을 하는 완충제를 함유하는 약학적으로 허용 가능한 담체로 이루어진 상기 조성물에 의해 제공된다. 펩타이드는 데스모프레신 (DDAVP(desmopressin)), 옥시토신, CAP(아토시반;atosiban), 및 카르베토신(carbetocin)으로부터 선택되는 것이 바람직하다. 특히 바람직한 것은 데스모프레신이다. 이들 펩타이드의 전체 서열은 발명의 상세한 설명 부분의 마지막 부분에 있는 표 1에 나타내었다. 본 발명에 따른 조성물 내로 합체 화에 의한 경구 투여의 경우 바람직한 또 다른 펩타이드 군에는 고나도트로핀 분비 호르몬유사체(gonadotropin-releasing hormone analogues) 가령, 고나도레린 및 트립토레린이 포함된다. 약학적으로 허용가능한 담체는, 탄수화물, 수식 탄수화물 및 이들 유도체, 폴리에틸렌 및/또는 폴리프로필렌글리콜 및 이들 유도체, 무기 부형제 또는 윤활제, 지방산 및 이들 에스테르, 염, 방부제 및 피복제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 둘 이상의 물질을 더 함유하는 것이 바람직하다. 적당한 약학적으로 허용가능한 담체는 정제 또는 캡슐 형태로 약 제형의 생산을 위한 매우 다양한 담체, 예를 들면 유럽 특허 제163723에 기재된 DDAVP함유 항이뇨 조성물의 담체로 구성된다. 다중 입자 시스템, 가령 연질 및 경질 젤라틴 캡슐로 투여하는 시스템이 매우 바람직하다. 펩타이드 및/또는 프로테아제 저해제를 함유하는 구형의 바람직한 입자 크기는 약 2mm이하이다.

본 발명의 바람직한 면을 따르면 장 피복은 소장에서 그 내용물이 방출되도록 설계된다. 정제 또는 캡술에 포함된 입자는 소장의 윗 부분에서 그 내용물을 서서히 방출하기 위하여 장 피복제로 피복되는 것이 특히 바람직하다. 십이지장 및 공장에서, 특히 십이지장과 공장 상부에서 펩타이드와 프로테아제 저해제의 서방이 매우 바람직하다. 장 피복 구형 체는 또한 위에서 쉽게 분해되거나, 또는 장 피복제를 쉽게 녹이지 못하는 매체에서 현탁 형태로 투여될 수 있는 정제 내에 포함될 수 있다. 펩타이드 및 프로테아제 저해제가 동일 형태의 장피복제를 가지는 별개의 구형 체에 포함되는 것 또한 가능하다.

장 피복제는 pH 약 5.0 또는 그 이상에서 장액에서 용해되는 것이 바람직하며, pH 약 5.5 또는 그 이상이 더욱 바람직하다. pH 약 6.5의 장액에서 쉽게 용해되지 않는 장 피복제는 그러나, 소장의 상부에서 본 발명에 따른 조성물 성분의 실질적 방출을 불가능하게 하며 따라서, 바람직하지 않다. 반면, 실질적으로 5.0보다 낮은 pH에서 위액에서 용해되는 피복제는 위에서 성분을 방출하기 때문에 덜 바람직하다. 본 발명에 따른 유용한 장 피복제는 폴리비닐아세테이트프탈레이트 및 폴리비닐아세테이트와 2염기성 또는 3염기성 카르복실산의 유사한 부분 에스테르, 그리고 알코올성 수산기를 가지는 유사한 고분자는 물론, 해리가 가능한 카르복실기를 가지는 고분자, 가령 하이드록시프로필메틸 셀루로오스 프탈레이트, 셀루로오스 아세테이트 프탈레이트, 셀루로오스 아세테이트 트리멜리테이트, 유사한 셀루로오스 유도체 및 기타 탄수화물 고분자를 포함한 고분자로 이루어진다. 장 피복은 이러한 고분자의 혼합물로부터 또한 유리하게 제조될 수도 있다.

펩타이드 및/또는 프로테아제 저해제는 바람직하게 완충제와, 탄수화물 및 수식 탄수화물, 이들 유도체; 폴리에틸렌 및/또는 폴리프로필렌 글리콜, 이들 유도체; 유기 및 무기 코아(core); 부형제 또는 윤활제; 지방산, 이들 에스테르 및 염; 방부제, 항산화제, 그리고 피복제로 이루어진 것으로부터 선택된 하나 또는 둘 이상의 물질을 함유하는 담체와 혼합된다. 완충제는 pH 약 2에서 6, 더욱 바람직하게는 약 4에서 5.5, 가장 바람직하게는 약 5에서, 이들 범위 내에서와 바람직하게는 약 pH 5에서 실질적 완충 용량을 발휘하기 위해서 완충작용을 할 수 있어야 한다. pH 약 2이하 또한 사용가능하지만, 장기 사용할 때 장벽의 손상 위험성 때문에 바람직하지 않다. 본 발명에 따른 바람직한 pH 범위는 한편은 안정화 효과를 극대화하는 것과, 또 한편은 저 pH에서의 손상 가능성에 대한 장벽의 보호 사이의 절충 범위이다. 본 발명에 따른 조성물은, 위의 산성 내용물이 통과하는 동안, 이 내용물이 Na⁺의 유입에 의해 중화되는 소장의 상부 부위에서 바람직한 방출을 위한 것이기 때문에, 완충 작용은 바람직한 범위를 초과하는 pH 즉, 바람직한 범위의 상한선 및 그 상한선을 초과하는 방향에서, pH의 증가를 저해 또는 지연시킨다. 완충제는 따라서 유문을 통하여 소장 내에서 비워지자마자, 위 내용물의 자연적 중화에 대한 방벽을 형성한다. 바람직한 완충제는 하이드로젠 및 디하이드로젠 포스페이트, 가령, 소듐 디하이드로젠 포스페이트 및 소듐 디하이드로젠 포스페이트와 디소듐 하이드로젠 포스페이트, 칼슘 테트라하이드로젠 포스페이트와의 혼합물, 시트릭산과 시트릭산 및 그의 모노소듐 염과의 혼합물, 프마릭산과 그의 모노소듐 염, 아디픽산과 그의 모노소듐 염, 타타릭산과 그의 소듐 염, 아스코르빅산과 그의 모노소듐 염, 글루타믹산, 아스파틱산, 베타인 하이드로클로라이드, 아미노산의 하이드로클로라이드, 가령, 아르지닌 모노하이드로클로라이드 및 글루타믹산 하이드로클로라이드, 그리고 사카릭산이다.

완충제는 본 발명에 따른 조성물의 적어도 10중량%가 되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직한 것은 적어도 25중량%, 가장 바람직한 것은 적어도 40중량%가 되는 것이다. 둘 또는 그이상의 완충 성분의 혼합물이 사용될 수 있다.

본 발명에 따르면, 또한 본 발명에 따른 조성물의 1회 복용량에 대한 제조 방법을 제공하며, 상기 방법은 다음 단계로 구성된다. :

-펩타이드와 pH 2-6, 더욱 바람직하게는 pH 4-5.5, 가장 바람직하게는 pH 약 5인 범위 내에서 완충 작용을 하는 완충제를 포함한 적당한 담체를 혼합하고,

-직경 약 2mm미만의 구 형성을 위해 이 혼합물을 구형화하고,

-pH 5.0 또는 그 이상의 장액에서는 쉽게 용해하지만, 매우 낮은 pH에서는 쉽게 용해되지 않는 장 피복제로 이 구형 체를 피복화하고,

-이 피복 구형 체를 캡슐 내로 충진시키거나 또는 이들을 정제, 상기 캡슐 또는 위에서 쉽게 분해되는 정제 내로 합체시킨다.

본 발명은 또한 소형 및 중형 크기의 펩타이드, 특히 바소프레신, 옥시토신, 그리고 이들 유사체의 1회 복용량을, 환자에게 상기 소형 및 중형 크기의 펩타이드의 약학적 유효량을 포함하는 정제 또는 캡슐을 본 발명에 따른 조성물 형태로 경구 투여하고, 상기 정제 또는 캡슐이 위에서 분해됨을 특징으로 하여 환자에게 투여하는 방법에 관한 것이다.

[발명의 상세한 설명]

본 발명을 보다 상세히 위액에서 DDAVP의 분해에 대한 예로서 기술한다.

[실시예 1]

사람 위장 액을 식사 후 8시간이 지난 정상 남자 지원자로부터 수득하였다. 크실로캐인으로 부분 마취 후, 튜브를 비강 내로 도입하여 위액을 수집하였다. 그후 십이지장과 공장 말단의 액을 채취하기 1 시간 전에 표준식 한 끼를 제공하고, 말단 회장 액의 채취 전 그 다음 날 아침에 또 다른 한 끼를 제공하였다. 원심 분리 후, 위와 장액을 1ml로 분주하여 냉동시킨 후 -20℃에서 보관하였다.

[분해 방법]

펩타이드 또는 펩타이드 유사체(0.9% 수용 NaCl내의 10mM 펩타이드 10㎕)를 37℃에서 비 희석액 190㎕에 가하였다. 25㎕씩 시간 간격을 두고 뽑아낸 후, 100㎕아세톤과 혼합하여 반응을 중단시켰다. 10,000g에서 10분 원심 분리 후, 10㎕의 상등 액을 역상 고속 액체 크로마토그라피로 분석하였다.

[펩타이드 분해의 정량]

분석은 UV-검출기(220nm) 부착 베리안 5000고속 액체크로마토그라피로 실시하였다. 칼럼 본다팩 티엠 C18(3.9 × 300mm), 용출액 메탄올/0.025M 암모늄 아세테이트(NH₄Ac)(아이소크래틱 조건), 용출 속도 1ml/분.

[단백질 정량 및 pH의 결정]

단백질: 바이오-래드 단백질 정량법.

pH: 오리온 모델 SA720; pH-페이퍼 머크사(다름스타트), 범위 4.0-7.0.

[결과]

DDAVP는 pH 6.5에서 위액과 장액 모두에 의해 분해됨이 확인되었다(35분 후 약 50%). pH가 4.0으로 조정되었을 때, DDAVP는 매우 안정한 것으로 보였다. pH조정이 없었을 때, DDAVP 단백질 분해는 회장 액에서 보다 공장 또는 십이지장액에서 더 느림이 확인되었다.

[실시예 2]

[래트에서의 실험]

약 300g의 체중을 갖는 SPD 수컷 래트를 티오부타바비탈 소듐(인액틴^TM, Byk Gulden, 독일) 15mg/kg으로 마취시켰다. 복강을 연 후, 길이 약 3mm의 절단을 유문으로부터 약 15mm 떨어진 소장에서 실시하였다. 이 절단을 통하여 수용 시트릭 완충용액(pH 약 2.5, 1M 시트릭산 22.3ml, 2.0M 소듐포스페이트 2.7ml, 물 25m1을 혼합하여 제조된다). ml당 2.0mg의 펩타이드를 포함하는 펩타이드 용액 0.1ml을 포함하는 젤라틴 캡슐을 소장 내로 삽입시켰다. 시간 기록을 시작하고, 장을 봉합한 후, 복강을 닫았다. 혈액 시료는 경동맥 내에서 카테터로부터 예정된 시간에 채취하였다. 펩타이드 용량 결정은 RIA로 하였다. 제1도에 나타난 결과는 본 발명에 따른 조성물의 0.9%생리 식염수 내의 동일 량의 DDAVP를 녹여 제조된 해당 비 완충제제(제2도)에 대한 안정 효과를 보여주고 있다. 각 실험에 사용된 4마리 래트에 대한 결과를 개개의 곡선에 나타내었다.

[실시예 3]

선택된 DDAVP양과 pH-완충제(칼슘 테트라하이드로젠 포스페이트 25중량% 및 디소듐 하이드로젠 포스페이트 3중량%)를 포함한 본 발명에 따른 정제를 EP-A-O 163 723에 기재된 방법을 약간 변형(아프로티닌의 첨가)시켜 제조할 수 있다. 이들 정제는 조절 약물 전달을 위한 고분자에 기술된 유용한 장 피복제로 분무 피복이 가능하다(Agyilirah, G.A. 및 Banker, G.S. , Tarcha, P.J., Ed., CRC Press, Boca Raton 1991, p. 39-66).

[실시예 4]

본 발명에 따른 장 피복 입자 제제를 함유한 경 젤라틴 캡슐은 다음 방법으로 수득이 가능하다. EP-A2-O 366 722(실시예 3)에 따라 제조된 고체 코아 입자(100g)을 20.0mg DDAVP 아세테이트 함유 수용액 760m1로 피복시키고, 이들 피복 입자를 스페로나이저 플루이드-베드 코우터(Spheronizer fluid-bed coater)에서 10중량%의 폴리비닐아세테이트 프탈레이트(PVAP; TD-17, Colorcon Inc., West Point, PA), 0,7%의 글리세릴 트리아세테이트 및 1%의 스테아릭산을 함유한 메탄올-메틸렌클로라이드 1:1피복 용액으로 분무 피복시킨 후 건조시킨다. 경 젤라틴 캡슐은 이들 장 피복 입자로 충진된다(250mg/캡슐).

[표 1]

Claims (7)

1. 바소프레신; 옥시토신; 또는 바소프레신 또는 옥시토신의 유사체로 이루어진 군에서 선택되는 펩타이드; pH 약 6.5 이하 pH 약 5.0 이상의 장액 내에서 쉽게 용해되며, 하이드록시프로필메틸 셀루로오스 프탈레이트, 셀루로오스 아세테이트 프탈레이트, 셀루로오스 아세테이트 트리멜리테이트, 유사한 셀루로오스 유도체; 및 기타 탄수화물 고분자를 포함한 셀루로오스 유도체들; 비닐아세테이트의 프탈레이트 및 폴리비닐아세테이트와 2염기성 또는 3염기성 카르복실산의 유사한 부분 에스테르; 및 알코올성 수산기를 가지는 유사한 고분자 또는 이들 고분자의 혼합물;로 이루어진 군에서 선택되는 장피복제; 및 pH 2 내지 6까지의 범위에서 완충 작용을 하는 완충제를 포함하는 제약학적으로 수용가능한 캐리어를 포함하는 소형 및 중형의 펩타이드의 경구투여를 위한 고체 형태의 약학적 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 펩타이드는 데스모프레신 (DDAVP(desmopressin)), 옥시토신, CAP(아토시반; atosiban) 및 카르베토신(carbetocin)(carbetocin)으로 부터 이루어진 군에서 선택되는 조성물.
3. 제2항에 있어서, 상기 펩타이드는 데스모프레신(DDAVP(desmopressin))인 조성물.
4. 제1항에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 담체는, 탄수화물, 수식 탄수화물 및 이들의 유도체; 폴리에틸렌 및/또는 폴리프로필렌글리콜 및 이들의 유도체; 무기 부형제 또는 윤활제; 지방산 및 이들의 에스테르 및 염; 및 방부제 및 피복제;로 이루어진 군에서 선택된 하나 또는 둘 이상의 물질을 더욱 포함하는 조성물.
5. 제1항에 있어서, 소장의 상부 부위에서 그 내용물의 방출을 위하여 장 피복제를 포함하는 조성물.
6. 펩타이드와 PH 2-6, 더욱 바람직하게는 pH 4-5.5, 가장 바람직하게는 pH 약 5인 범위 내에서 완충 작용을 하는 완충제를 포함한 적당한 담체를 혼합하는 단계; 직경 약 2mm 이하의 구 형성을 위해 상기 혼합물을 구형화하는 단계; pH 5.0 또는 그 이상의 장액에서는 쉽게 용해하지만, 상당히 낮은 pH에서는 쉽게 용해되지 않는 장 피복제로 상기 구형체를 피복화하는 단계; 상기 피복 구형체를 캡슐 내로 충진시키거나 또는 이들을 정제로 제조하는 단계, 상기 캡슐 또는 정제는 위에서 쉽게 분해되는 것임;을 포함하는, 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 1회 복용량의 제조 방법.
7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 형태로 상기 소형 및 중형 크기의 펩타이드의 약학적 유효량을 포함하는 정제 또는 캡슐-여기서 정제 또는 캡슐은 위에서 쉽게 분해됨-을 인간을 제외한 동물에게 경구 투여하는 바소프레신, 옥시토신, 및 이들의 유사체의 1회 복용량을 인간을 제외한 동물에 투여하는 방법.