CZ232998A3 - Použití Ribavirinu pro modulaci exprese lymfokinů, ošetření nevirových nemocí, nevirových podílů nemocí a použití analogů Ribavirinu - Google Patents
Použití Ribavirinu pro modulaci exprese lymfokinů, ošetření nevirových nemocí, nevirových podílů nemocí a použití analogů Ribavirinu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ232998A3 CZ232998A3 CZ982329A CZ232998A CZ232998A3 CZ 232998 A3 CZ232998 A3 CZ 232998A3 CZ 982329 A CZ982329 A CZ 982329A CZ 232998 A CZ232998 A CZ 232998A CZ 232998 A3 CZ232998 A3 CZ 232998A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- ribavirin
- cells
- pma
- icn
- activated
- Prior art date
Links
- IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N Ribavirin Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 IWUCXVSUMQZMFG-AFCXAGJDSA-N 0.000 title claims description 77
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title description 13
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 title description 8
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 title description 8
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 title description 4
- HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N ribavirin Natural products O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1N=CN=C1 HZCAHMRRMINHDJ-DBRKOABJSA-N 0.000 claims description 55
- 229960000329 ribavirin Drugs 0.000 claims description 55
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 22
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 claims description 13
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 claims description 13
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 13
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 6
- 244000000013 helminth Species 0.000 claims description 3
- 108010034145 Helminth Proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims 5
- UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N cytokinin Natural products C1=NC=2C(NCC=C(CO)C)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000004062 cytokinin Substances 0.000 claims 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 claims 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 abstract description 43
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 abstract description 17
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 abstract description 10
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 50
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 50
- PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N Cocarcinogen A1 Natural products CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC1C(C)C2(O)C3C=C(C)C(=O)C3(O)CC(CO)=CC2C2C1(OC(C)=O)C2(C)C PHEDXBVPIONUQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 49
- PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N phorbol 13-acetate 12-myristate Chemical compound C([C@]1(O)C(=O)C(C)=C[C@H]1[C@@]1(O)[C@H](C)[C@H]2OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)C(CO)=C[C@H]1[C@H]1[C@]2(OC(C)=O)C1(C)C PHEDXBVPIONUQT-RGYGYFBISA-N 0.000 description 49
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 41
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 30
- 108040006852 interleukin-4 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 29
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 26
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 26
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 19
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 15
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 14
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 12
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 11
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 11
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 11
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 11
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 9
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 8
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 8
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 7
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 7
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 7
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 7
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- -1 coatings Substances 0.000 description 6
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 5
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 5
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000010787 Interleukin-4 Receptors Human genes 0.000 description 4
- 108010038486 Interleukin-4 Receptors Proteins 0.000 description 4
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 4
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 4
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 4
- PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N ionomycin Chemical compound O1[C@H](C[C@H](O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)/C=C/C[C@@H](C)C[C@@H](C)C(/O)=C/C(=O)[C@@H](C)C[C@@H](C)C[C@@H](CCC(O)=O)C)CC[C@@]1(C)[C@@H]1O[C@](C)([C@@H](C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N 0.000 description 4
- PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N ionomycin Natural products O1C(CC(O)C(C)C(O)C(C)C=CCC(C)CC(C)C(O)=CC(=O)C(C)CC(C)CC(CCC(O)=O)C)CCC1(C)C1OC(C)(C(C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 4
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 4
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 3
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 3
- 210000000662 T-lymphocyte subset Anatomy 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 3
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010185 immunofluorescence analysis Methods 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 229940100050 virazole Drugs 0.000 description 3
- HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N zidovudine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-XLPZGREQSA-N 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 2
- 208000012657 Atopic disease Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 2
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 2
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 2
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 2
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 2
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 208000009388 Job Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 2
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 2
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 125000002837 carbocyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 2
- 206010051040 hyper-IgE syndrome Diseases 0.000 description 2
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 description 2
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 2
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- 229960002555 zidovudine Drugs 0.000 description 2
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YRSNDNVRKGEOHF-SOOFDHNKSA-N (3r,4s,5r)-5-(hydroxymethyl)thiolane-2,3,4-triol Chemical compound OC[C@H]1SC(O)[C@H](O)[C@@H]1O YRSNDNVRKGEOHF-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- XKNLIQRSVKDLAN-CPDSJTNBSA-N 1-[(2r,3r,5s)-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-1,2,4-triazole-3-carboxamide Chemical compound N1=C(C(=O)N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)C[C@@H](CO)O1 XKNLIQRSVKDLAN-CPDSJTNBSA-N 0.000 description 1
- ZBNZAJFNDPPMDT-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazole-5-carboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CNC=N1 ZBNZAJFNDPPMDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UVUKUZHIFNKNIL-UAKXSSHOSA-N 2-bromo-1-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]imidazole-4-carboxamide Chemical compound BrC1=NC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UVUKUZHIFNKNIL-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- ISEWZMIZSXBSTC-MWKIOEHESA-N 5-amino-1-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]pyrazole-4-carboxamide Chemical compound NC1=C(C(=O)N)C=NN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ISEWZMIZSXBSTC-MWKIOEHESA-N 0.000 description 1
- 208000030767 Autoimmune encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 229910014033 C-OH Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010041397 CD4 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 101100334009 Caenorhabditis elegans rib-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229910014570 C—OH Inorganic materials 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 1
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 241000222732 Leishmania major Species 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- BXDZOYLPNAIDOC-UHFFFAOYSA-N N-[5-[(5-tert-butyl-1,3-oxazol-2-yl)methylsulfanyl]-1,3-thiazol-2-yl]-1-[2-[2-[2-[2-[2-[[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1,3-dioxoisoindol-4-yl]amino]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethylamino]-2-oxoethyl]piperidine-4-carboxamide Chemical compound CC(C)(C)c1cnc(CSc2cnc(NC(=O)C3CCN(CC(=O)NCCOCCOCCOCCNc4cccc5C(=O)N(C6CCC(=O)NC6=O)C(=O)c45)CC3)s2)o1 BXDZOYLPNAIDOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 description 1
- 238000009004 PCR Kit Methods 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 208000007542 Paresis Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XESARGFCSKSFID-UHFFFAOYSA-N Pyrazofurin Natural products OC1=C(C(=O)N)NN=C1C1C(O)C(O)C(CO)O1 XESARGFCSKSFID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 206010038910 Retinitis Diseases 0.000 description 1
- 108020001027 Ribosomal DNA Proteins 0.000 description 1
- 101100054666 Streptomyces halstedii sch3 gene Proteins 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N Thiazole Chemical compound C1=CSC=N1 FZWLAAWBMGSTSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000008430 aponin Substances 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N beta-D-ribose Chemical group OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N brefeldin A Chemical compound O[C@@H]1\C=C\C(=O)O[C@@H](C)CCC\C=C\[C@@H]2C[C@H](O)C[C@H]21 KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N 0.000 description 1
- JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N brefeldin-A Natural products CC1CCCC=CC2(C)CC(O)CC2(C)C(O)C=CC(=O)O1 JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000012829 chemotherapy agent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N hydrogen thiocyanate Natural products SC#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000002134 immunopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002650 immunosuppressive therapy Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000005645 nematicide Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- XESARGFCSKSFID-FLLFQEBCSA-N pirazofurin Chemical compound OC1=C(C(=O)N)NN=C1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 XESARGFCSKSFID-FLLFQEBCSA-N 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 208000028529 primary immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 229910052714 tellurium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 1
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
- A61K31/52—Purines, e.g. adenine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
- A61P33/10—Anthelmintics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/052—Imidazole radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/056—Triazole or tetrazole radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/24—Heterocyclic radicals containing oxygen or sulfur as ring hetero atom
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
(54) Název přihlášky vynálezu:
Použití Ribavirinu pro modulaci exprese lymfokinů, ošetření nevirových nemocí, nevirových podílů nemocí a použití analogů Ribavirinu (57) Anotace:
Ribavlrin je podáván pacientovi s intenzitou dávek v rozmezí, které je účinné pro modulaci exprese lymfokinů v aktivovaných T buňkách. Detailněji, Ribavirin je použit pro potlačení Th2 zprostředkované reakce T bunék a podporu Thi zprostředkované reakce T buněk. Jeden nebo více analogů Ribarinu jsou v jeho jednom aspektu podávány pacientovi s intenzitou dávkování, která je účinná pro modulaci exprese lymfokinů v aktivovaných T buňkách. Analogy Ribavirinu mohou být použity pro potlačení nebo zvýšení Th 1 nebo th2 zprostředkovaných reakcí T buněk.
• ·
POUŽITÍ RIBAVIRINU® PRO MODULACI EXPRESE LYMFOKINÚ, OŠETŘENÍ NEVIROVÝCH NEMOCÍ, NEVIROVÝCH PODÍLŮ NEMOCÍ A POUŽITÍ ANALOGŮ RIBAVIRINU®
Oblast techniky
Vynález zahrnuje oblast výzkumu imunologie.
Dosavadní stav techniky
Lymfokiny představují skupinu polypeptidů náležící do řady cytokinů, t.j. molekul, které jsou podobné molekulám hormonů a mohou ovlivňovat řadu buněčných funkcí a aktivovat spojení mezi různými buňkami. Nedávný výzkum pomohl objasnit roli lymfokinů v imunitních reakcích. Produkce lymfokinů prostřednictvím stimulátoru CD4+ (a také v CD8+) T buněk často spadá do jednoho ze dvou fenotypů, Th1 a Th2, v jak v myším tak i lidském systému (Romagnani, 1991, Immunol Today 12: 256-257, Mosmann, 1989, Annu Rev Immunol 7: 145-173). Th1 buňky produkují interleukin 2 (IL-2), faktor zvýšení odumírání tkáně (TNFa) a interferon gama (IFNx), tyto jsou především odpovědné za imunitu zprostředkovanou buňkami, takovou jako opožděný typ přecitlivělosti. Th2 buňky produkují interleukiny (ILinterleukin), IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-10 a IL-13 a především se podílejí na zabezpečení optimální podpory humorální imunitní reakce, takové jako IgE a lgG4 přesun isotopiekých protilátek (Mosmann, 1989, Annu Rev Immunol, 7: 145-173).
Silně polarizované Th1 a Th2 reakce nehrají různé role pouze v imunitních reakcích, ale mohou podporovat různé imunopatologické reakce. Th1-typ reakcí představuje diskutovanou specifickou autoimunitu orgánů, takovou jako experimentální autoimunní retinitida prostřední vrstvy oční koule (Dubey a spol., 1991, DEur cytokine network2: 147-152), experimentální autoimunní encefalitida (EAE) (Beraud a spol., 1991, Cell Immunol 133: 379389) a insulindependentní cukrovka (Hahn a spol., 1987, Eur J Immunol 18: 2037-2042), v kontaktní dermatitidě (Kapsenberg a spol., Immunol Today 12: 392 - 395) a při některých chronických zánětlivých onemocněních. Oproti tomu Th2-typ reakcí je zodpovědný za náchylnost k alergickým atopickým chorobám (proti běžným alergenům vnějšího okolí), takovým jako alergické astma (Walker a spol, 1992, Am Rev Resp Dis 148 : 109-115) a atopická dermatitida (van der Heijden a spol., 1991, J Invest Derm 97: 389-394), které jsou domněle znovu vyvolanými infekcemi protozou zůstávající v tkáních, takovými jako např. vyvolaná helminty (Finkelman a spol, 1991, Immunoparasitol Today 12 (Imunitní parasitologie dnes): A62-66) a Leishmania major (Caceres-Dittmar a spol., 1993, Clin Exp Immunol 91: 500 • · • fefe fe
až 505), které jsou přednostně vyvolané při jistých primárních deficitech imunity, takových jako hyper-lgE syndrom (Del Přete a spol, 1989, J. Clin Invest 84: 1830 - 1835) a OmennÓs syndrom (Schandene a spol., 1993, Eur J Immunol 23: 56-60) a jsou spojovány se sníženým hyper-lgE syndromem (Del Přete a spol., 1989, J Clin Invest 84: 1830 - 1835) a OmennÓs syndromem (Schandene a spol., 1993, Eur J Immunol 23: 56 - 60( a se snížením schopnosti potlačit HIV replikaci (Backer a spol, 1995, Proč Soc Nat Acad Sci USA (Akademie věd USA) 92: 11135- 11139).
Je tedy jasné, že modulace profilů lymfokinů výše uvedených stavů nemocí bude terapeuticky výhodná. Podpora Th1 reakce bude nejpravděpodobněji vést ke změně Th2 fenotypů a naopak. Monoklonální protilátky (mAb) k lymfokinům, lymfokiny samotné a jiná činidla, taková jako antioxidační činidla založená na thiolu (Jeannin a spol., 1995, J Exp Med 182: 1785 1792) se projevily jako měnící patogenezi určitých chorob potlačením cytokinových typů podporujících chorobu, jak Th1 neboTh2. Např. intacelulární infekce způsobené prvoky jsou omezeny pomocí IFN%, ale znovu vyvolány působením IL-4, zatímco infekce vyvolané nematocidy jsou kontrolovány pomocí IL-4 a znovu vyvolávané IFN% (Heinzel a spol., 1989, J. Exp Med 162: 59 - 72, Else a spol., 1994, J Exp Med 179: 347 - 351). Insulin dependentní cukrovka u NOD myší a EAE u myší a krys může být zlepšena ošetřením pomocí IL-4 nebo anti- IFN% mAb ještě před plným rozvinutím choroby (Rapoport a spol., 1993, J. Exp Med 178: 87 - 99, racke a spol., 1994, J Exp Med 180: 1961 - 1966, Campbell a spol., 1991, J. Clin Invest 87. 739 - 742). Dodatečně, autoimunní vštěp oproti hostitelské chorobě (GVHD), který je charakterizován syndromem podobným lupus erythematodes, je spojován s Th2 produkcí lymfokinů a je tlumen prostřednictvím IL-4 protilátky (Umland a spol., 1992, Clin Immunol Immunopathol 63: 66 - 73). Na druhé straně Th1 cytokiny jsou produkovány při akutním GVHD, ve kterém dárcovské CD8+ T buňky se vyvíjí do CTL a narušují hostitelský imunní systém. Ošetření s anti-IFN% nebo anti-TNFa mAb zlepšuje chorobu a ošetření s anti-IL-2 mAb mění akutní GVHD na autoimunní GVHD (Via a Finkelman, 1993, Int Immunol 5: 565 - 572). Klinické zkoušky vlastností a rekombinantu IL-2 při ošetření HIV infikovaných pacientů bylo ve vývoji od roku 1983 (Volberding a spol, 1987, AIDS Res Hum Retroviruses, 3: 115 - 124). Souvislost zde přichází ze skutečnosti, že vývoj AIDS byl označen jako spojovaný se zvýšením typu produkce lymfokinů (Clerici a Shearer, 1994, Immunol Today 15: 575 - 581). Během doby progrese choroby vzniká u infikovaného jednotlivce snížená exprese Th1 lymfokinů, takových jako IL-2 (Maggi a spol., 1987, Eur J Immunol 17: 1685 - 1690, Gruters a spol., 1990, Eur J Immunol 20: 1039 - 1044, Clerici a spol., 1993, J Clin Invest 91: 759 - 765), průvodní jevy a zvýšená produkce Th2 lymfokinů, takových jako IL-4 a IL-10 (Clerici a spol., 1994, J Clin Invest. 768-775, Hoffman a spol., 1985, Virology 147. 326 - 335). T-buňky z asymptomatického nebo dlouho trvajícího ošetření s IL-2 zvýšily jejich anti-HIV účinky,
I ·· ·· ·· • · · · · · • · · · · · • · · ··· · · zatímco vliv IL-4 nebo IL-10 snížil jejich schopnost potlačit HIV replikaci a produkovat IL-2 (Barker a spol., 1995, Proč Soc Nat Acad Sci USA 92: 11135 - 11139).
Tyto běžná imuno modulační terapeutika (mAbs a rekombinant cytokinů) však nejsou neomezená. Např. při vleklém ošetření monoklonální protilátkou vyvíjí hostitelská fauna protilátky proti monoklonálním protilátkám, tímto omezují jejich plnou použitelnost. Byly vyvinuty „humanizované“ monoklonální protilátky, které zjevně snižují riziko vyvolané imunitní reakce na tyto mAbs. Avšak, tyto látky se stále ještě vyvíjí a nové mAbs v dodatku ponechávají značné proteiny a proto mohou nastat potíže při dosažení jejich cílových lokalizací. Terapeutika založená na cytokinech jsou také limitována. Např. IL-2 ošetření autoimunní GVHD vede u myší ke vzniku akutní GVHD.
Ribavirin® (1-b-D-ribofuranosyl-1,2,4-triazoI-3-karboxamid) je syntetický nukleosid schopný zamezit replikaci RNA a DNA virů (Huffman a spol., 1973, Antimicrok. Agents Chemother 3 (Antimikrobiální činidla chemoterapie) : 235, Sidwell a spol., 1972, Science 177: 705). Máme ověřené poznatky z dalších pozorování, ve kterých autoři podotýkají, že Ribavirin®, v dodatku k jeho protivirovým účinkům má vliv na jisté umunitní reakce (přehled Jalley a Suchil, 1984, Clinical Applications of Ribavirin® (Klinické aplikace Ribavirinu®): str. 93 - 96). Máme také ověřeny poznatky z jiných pozorování, že Ribavirin® ovlivňuje proliferaci mitogen- a antigen aktivovaných T a B lymfocytů. (Tam a spol., 1995 (údaje nejsou uvedeny), Peavy a spol., 1980, Infection and Immunity 29 (Infekce a imunita): 583 - 589) a dále, pokud je kombinovaný s cyklosporinem, Ribavirin® projevuje účinky na dlouhodobé přežívání aloimplantátu, Jolley a spol., (1988, Transplantation Proč 20 (transplantace Proč). 703 - 706).
Dodatečně máme pozoruhodně pokročilý předběžný výzkum díky demonstrace, že Ribavirin® alespoň zčásti moduluje typ cytokinů imunitní reakce podporou Th1 reakce a potlačením Th2 reakce. Z pohledu do minulosti, tento objev není v rozporu s předběžným výzkumem. Za prvé, Ribavirin® je znám pro svoje útlumové účinky na obě funkční humorální imunitní reakce (Peavy a spol., 1981, J Immunol 126. 861 - 864, Powers a spol., 1982, Antimicrob Agents Chemother (Antimikrobiální chemoterapeutická činidla) 22:108 - 114) a IgE-zprostředkovanou modulaci vylučování žírných buněk (Marquardt a spol., 1987, J Pharmacol Exp Therapeutics (Časopis farmakologických experimentálních terapeutik) 240: 145 - 149, (obě Th2 lymfokin zprostředkované jevy)). Za druhé, Ribavirin® antagonizuje protivirové účinky azidothymidinu (AZT) na okrajové krevní lymfocyty u HIV pacientů (Vogt a spol., 1987, Science (Věda) 235: 1376 - 1379). Tento objev je pozoruhodný, protože AZT snižuje IL-2 receptory (II-2R), ale ne IL2 expresi (Viora camponeschi, 1995, Cell Immunol (Imunologie buněk) 163: 289 - 295). Je proto možné, aby Ribavirin® antagonizoval AZT modulací IL-2 exprese a zvýšením snížených úrovní IL-2R. Za třetí, ošetření Ribavirinem® imuno-oslabených pacientů pro chronické GVHD (Th2 - zprostředkovaná porucha) vede k dramatickému rozkladu nemoci, výsledek, který nenastává s běžnými imunosupresívními terapiemi, takovými jako cyklosporin a glukokortikoidy • · ··· · (Cassano, 1991, Bone Marrow Transplantation (Transplantace kostní dřeně) 7: 247 - 248). Konečně, ošetření Ribavirinem® (jeden rok) pacientů pro hepatitidu C (HCV) odhaluje méně nakupenin lymfocytů a mnohem menší poškození jater než kontrolou Placebem (Dusheiko a spol., 1994, Hepatology 20: 206A). Tento výzkum může odrážet skutečnost, že ačkoliv převládající imunitní reakce na hepatitidu C je zprostředkovaná Th1 lymfokiny, T buňky Th0/Th2 fenotypu mohou být infikovány HCV (Zigneco a spol., 1994, datum neuvedeno) a tato infekce může způsobit další destrukci hepatocytů zprostředkovanou protilátkou.
Podstata vynálezu
V souhlasu s jedním aspektem předloženého vynálezu je nukleosid Ribavirin®® podáván pacientovi s intenzitou dávek, která je efektivní pro modulaci exprese lymfokinů v aktivovaných T buňkách. Vysvětleno podrobněji, Ribavirin®® je použit pro potlačení Th2 zprostředkované reakce T buněk a podporu Th1 zprostředkované reakce T buněk.
Ribavirin® je použit podle vynálezu pro léčbu nevyrovnaností exprese lymfokinů místo podávání Ribavirinu®®, který je velmi dobře znám pro jeho antivirové účinky. Tyto nevyváženosti mohou být shledány jako průvodní jevy alergických atopických nemocí, takových jako alegiské astma a atopická dermatitida, infekce z helmintů a leischmaniózy a různých prvotních a druhotných deficitů imunity, které mohou nebo nemusí být spojeny s virovou infekcí.
V souladu s dalším aspektem předloženého vynálezu je jeden nebo více analogů Ribavirinu® podáváno pacinetovi s intenzitou dávek, která je efektivní pro modulaci exprese lymfokinů v aktivovaných T buňkách. Analog(y) Ribavirinu® mohou být použity pro potlačení nebo zvýšení Th1 nebo Th2 zprostředkovaných reakcích T buněk.
Ve svém výhodném celku je Ribavirin® podáván pacientovi ústně s intenzitou dávek, která dosahuje úrovně krevního séra mající průměrné hodnoty 0,25 až 12,5 mg/mí a nejvýhodněji průměrně 2,5 mg/ml. U běžných jednotlivců je tato optimální úroveň séra vymezena přibližně
4,5 mg/kg/den hmotnosti těla, která může být podávána s intenzitou dávek od 200 až 1200 mg. Výhodná dávkování jsou rozdělena do několika menších dávek, které jsou následně podávány během celého dne.
Ribavirin® byl na trhu již několik let, a proto je mnoho způsobů dávkování a forem podávání známo a všechny vhodné intenzity dávek a způsoby podávání mohou být použity. Např. Ribavirin dotečně k ústnímu podávání může být podáván intravenózně, intramuskulárně, intraperitoneálně, místně a podobně, všechny způsoby, které jsou známé, mohou být použity. Farmaceutické formulace obsahující Ribavirin® mohou také obsahovat jeden nebo více farmceuticky akceptovatelných nosičů, které mohou zahrnovat masťové základy, takové jako stabilizátory (podporující dlouhodobé skladování), emulgační prostředky, pojivá, wl O|5.5 A»- e zahušťovadla, soli, ochranná činidla, rozpouštědla, disperzní prostředky, nánosy, antibakteriální a protiplísňová činidla, isotonická a absorpční útlumová činidla a podobné. Použití takových prostředků nebo činidel pro farmaceutické aktivní substance je dobře známé ze současného stavu techniky. Kromě prostředků nebo činidel, které jsou s Ribarinem® neslučitelné, je uvažováno jakékoliv použití těchto prostředků a činidel v terapeutických prostředcích a přípravách. Přídavné aktivní příměsi mohou být také inkorporovány do uváděných prostředků a příprav.
Ribavirin®, dodatečně k terapeutickému použití Ribavirinu® uvažovanému podle vynálezu, může být také použit jako laboratorní nástroj pro studium absorpce, distribuce, absorpce buněk a působení.
Bylo také shledáno, že několik analogů Virazolu (dříve známých a neznámých), které byly dříve zamítnuty pro jejich minimální účinky, také projevují výrazné cytokinické účinky. Náš výzkum ukazuje, že existuje několik tříd analogů Virazolu majících tyto účinky, příklady jsou uvedeny následně v textu pod označením „Analogy Ribavirinu®“. Tyto příklady jsou zaměřeny na charakteristiku pozicí, ve kterých Virazol může být modifikován pro získání aktivních prostředků, tento objev nebude tedy limitován znázorněnými specifickými modifikacemi. Je také zvažováno, že tyto modifikace mohou být aplikovány se standardní D formou Virazolu, stejně jako se L formou Virazolu.
Přehled obrázků na výkresech
Tabulka 1 ukazuje klidové a PMA/jonomycinem aktivované úrovně lymfokinů, IL-2, IL-4. TNFa IFN% (pg/ml) v 48 a 72 hodinách, měřeno v extracelulárních supernatantech, a experesi buněčného povrchu IL-2 (IL-2R) a IL-4 (IL-4R) receptorů (průměrná intensita fluorescence kanálků) z lidských T buněk.
Obrázek 1 ukazuje grafické znázornění vlivu Ribavirinu® a interferonu a na extracelulární expresi IL-2, IL-4, TNFa a IFN% v PMA/jonomycinem aktivovaných T lymfocytech. Výsledky jsou vyjádřeny jako procenta zvýšení exprese lymfokinů následně po ošetření pouze PMA/jonomycinem.
Obrázek 2 je grafickým znázorněním vlivu 2, 10 nebo 50 mM Ribavirinu® za přítomnosti 2000 U/ml interferonu a (levá část) a vlivu 500, 1000 nebo 2000 U/ml interferonu a (pravá část) za přítomnosti 10 mM Ribavirinu® na extracelulární expresi IL-2 (A a C) a IL-4 (B a D) v PMA/jonomycinem aktivovaných T lymfocytech.
Obrázek 3 je grafickým znázorněním vlivu Ribavirinu® a interferonu a na IL-2, IL-4 a IFN% mRNA expresi v PMA/jonomycinem aktivovaných T lymfocytech.
Obrázek 4 je grafickým znázorněním vlivu Ribvirinu® a interferonu a na expresi buněčného povrchu IL-2 a IL-4 receptorů v PMA/jonomycinem aktivovaných T lymfocytech. Výsledky jsou ·· ta · ·· • ta· · · · · · • · · · · ·· ·· ·· vyjádřeny jako procenta zvýšení exprese receptorů lymfokinů následně po ošetření pouze PMA/jonomycinem.
Obrázek 5 je grafickým znázorněním exprese intracelulární IL-2 exprese v klidových (A a E) nebo aktivovaných CD4+ (horní část) nebo CD8+ (dolní panel) T buňkách ošetřených pouze PMA/jonomycinem (B a F) nebo za přítomnosti 10 mM Ribavirinu® (C a G) nebo 5000 U/ml interferonu a (D a H). Údaje z jednoho experimentu jsou ukázány a vyjádřeny jako procenta buněk projevujících dvojí pozitivní zbarvování pokud se jedná o IL-2 a GD4 nebo CD8.
Obrázek 6 je grafickým znázorněním pozorovaných Robavirin® analogů.
Obrázek 7 je souborem grafů znázorňujících výsledky různých koncentrací Ribavirin® analogů na IL-2, TNF a, IFN χ, IL-4 a IL-5.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Typy buněk a purifikace T buněk
Okrajové krevní mononukleární buňky (PBMC) byly isolovány ze žlutočervené vrchní vrstvy použitím Ficoll-Hypaque centrifugace s hustotním gradientem z 60 ml krve od zdravých dárců. T-buňky byly následně purifikovány z PBMC použitím Lymphokwik isolačního činidla lymphocytů specifického pro T-buňky (LK-25T, One Lambda, Canora Park CA). Průměrný výnos 40 až 60 x 106 T-buněk byl následně podroben inkubaci přes noc při teplotě 37 °C v 20 až 30 ml RPMI-AP5 (PRMI-1640 médium (ICN, Costa Mesa, CA) obsahující 20 mM HEPES útlumového roztoku, pH 7,4, 5 % autologní plazma, 1 % L-glutaminu, 1 % penicilin/streptomycin a 0,05 % 2-merkaptoethanol) pro odstranění jakýkoliv nečistot ulpěných na buňkách. T-buňky byly ve všech zkouškách promyty RPMI-AP5 a následně umístěny do mikrotitračních desek (plátů) s 96 otvory (komůrkami) s koncentrací buněk 1 x 106 buněk/ml.
Příklad 2
Aktivace T-buněk a léčka Ribavirinem®
T-buňky byly aktivovány dodáním 500 mg jonomycinu a 10 mg forbol-12-myristát-13-acetátu (PMA) (Calbiochem, La Jolla, CA) a podrobeny inkubaci po dobu 48 až 72 hodin při teplotě 37 °C. T-buňky aktivované PMA/jonomycinem byly ošetřeny 0,5 až 50 mM Ribavirinu® nebo 250 až 10.000 U/ml kontrolního antivirového interferonu a (Accurate, Westbury, NY) ihned po aktivaci a znovu ošetřeny po 24 hodinách. T-buňky z každého plátu byly použity pro
Ί • ·· ·· ·· • · · · · • · · • · · · • · · ·· ···· · ·· ·· • · · · · • · · ·· • · ··♦ · · imunofluorescenční analýzu a supernaíanty použité pro extracelulární měření cytokinů. Následně po aktivaci bylo 900 ml buněčného supernatantu z každého mikroplátu přeneseno na jinou mikrodesku pro analýzu produkce cytokinů pocházejících z buněk. Buňky byly následně použity v imunofluorescenční analýze, kterou byly zjištěny úrovně intracelulárních cytokinů a exprese receptorů cytokinů.
Příklad 3
Analýza extracelulárních cytokinů
Koncentrace lidských cytokinů pocházejících z buněk byly určeny v buněčných supernatantech z každého mikroplátu. Aktivací vyvolané změny úrovní interleukinů-2 (IL-2) byly určeny použitím obchodně dostupného prostředku ELISA kit (R & D systems Quantikine kit, Minneapolis, MN) nebo biologickou zkouškou použitím IL-2 odvozených typů buněk, CTLL-2 /ATCC, Rockville, MD). Aktivací vyvolané změny úrovní intrleukinů-4 (IL-4), faktoru zvýšení odumírání tkáně (TNFa) interleukinů-8 (IL-8) (R & D systems (Quantikine kit, Minneapolis, MN) a interferonu χ (IFN χ) (Endogen (Cambridge, MA) byly určeny použitím ELISA kitů. Všechny výsledky získané použitím ELISA byly vyjádřeny v pg/ml a použitím CTLL-2 biologického testu v počtech za minutu vyjadřujících celulární inkorporaci 3H-thymidinu závislou na IL-2 (ICN, Costa Mesa, CA) podle CTLL-2 buněk.
Příklad 4
Studia přímé imunofluorescence (Receptory cytokinů)
Buňky, pro účely přímého zabarvování povrchových buněčných antigenů protilátkami konjugovanými fluorescencí, byly dvakrát promyty isotonickým rozpouštědlem solného roztoku, pH 7,4 (Becton Dickinson, Mansfield, Ma), resuspendovány v 50 ml isotonického rozpouštědla solného roztoku a rozděleny do dvou vzorků. Jedna část vzorku byla zabarvena buď s PE-anti CD25/FITC-anti CD4 nebo s PE-krysí anti myši IgG + anti-CDw124/FITC-anti CD4 mAb a nespecifikovaná fluorescence byla vyhodnocena zabarvením druhé části s PE/FITCoznačenou kontrolní monoklonální protilátkou upravenou jako isotyp. Všechny monoklonální protilátky označené fluorescencí byly získány od Bectom Dickinson (San Jose, CA) až na antiCDw124, který byla získána od Pharmingen, San Diego, Ca. Inkubace byly provedeny při teplotě 4 °C v temnotě po dobu 45 minut použitím saturačních mAb koncentrací. Nezaregistrovaný štítek byl odstraněn omytím v PBS dříve než byla provedena analýza s FACScan průtokovým cytometrem (Becton Dickinson).
Hustota antigenů byla přímo určena v protékajících živých CD4+T buňkách a vyjádřena jako střední hodnota fluorescence (MCF). Povrchová exprese specifických antigenů (CDw124, CD25) byla představena jako střední hodnota změny (MCS) získaná odečtením MCF FITCnebo PE- označených upravených na isotyp (lgG1) kontolních mAb-zabarvených buněk od MCF FITC- nebo PE-označených antigen-specifikovaných mAb zabarvených buněk. Alternativně, povrchová exprese CD4+-podmnožiny buněk zabarvených s CD28 mAb byla určena odečtením MCF CD28+ CD4+ od MCF CD28' CD4' buněk..
Životaschopnost kontrolních neošetřených buněk a buněk ošetřených Ribavirinem® a interferonem α byla určena v každé dávce všech oligonukleosidů od četných dárců zabarvením vitálním barvivém, propidium-jodidem (5 mg/ml konečná koncenrace). Procentický podíl živých buněk, které vylučují propidium-jodid, byl určen průtokovou cytometrií a byl > 90 % (rozmezí 90 až 99 %) u ošetření se všemi použitými koncentracemi.
Příklad 5
Analýza imunofluorescence iníracelulární exprese cytokinů
Pro analýzu intracelulární exprese IL-2 v CD4+ a CD8+ T buněčných podmnožin byly T buňky nejdříve ošetřeny poslední 4 hodiny ze 48 až 72 hodin aktivace s 10 mg Brefeldin A (Gibco BRL, Gaithersburg, MD) pro minimalizaci sekrece nově syntetizovaných IL-2 do extracelulárního prostředí. Následně po aktivaci, 900 ml buněčného supernatantu z každého mikroplátu bylo přemístěno na jinou mikrodesku pro analýzu produkce cytokinů odvozených z buněk. Před přímým zabervením (30 min., 4 °C, v temnotě) s FITC konjugovanými protilátkami buněčných antigenů povrchu, CD4 a CD8, buňky byly promyty dvakrát isotonickým ředidlem solného roztoku, pH 7,4 a resuspendovány v 100 až 150 ml zabarvovacího útlumového roztoku (fosfátový tlumený roztok, pH 7,4 obsahující 1 % fetálního telecího séra (FCS) (Hyclone, Logn, UT) a 0,1 % azidu sodného) a rozděleny na dva vzorky. Obarvené buňky byly promyty v 1 ml zabarveného tlumivého rozotku a peletky buněk byly resuspendovány v 100 ml ustalovacího roztoku (4 % paraformaldehyd v PBS), následovalo odsávání supernatantu. Ustálené buňky byly ponechány 20 minut při teplotě 4 °C, následně promyty v 1 ml zabarveného tlumivého roztoku a peletky buněk byly resuspendovány s promícháním v 50 ml rozpustného tlumivého roztoku (0,1 % aponin (ICN, Costa Mesa, CA) v PBS). Pórovité buňky byly obarveny PE-označenou IL-2 protilátkou při teplotě 4 °C po dobu 30 minut v temnotě a následně promyty v 1 ml tlumivého roztoku upravujícího propustnost, resuspendovány v 250 ml zabarvujícího tlumivého roztoku, následovala FACS analýza.
• · > 99 99
9 · 9 « • · · · · • · 999 9 « • 9 9 « » ·· ··
Příklad 6
Analýzy mRNA cytokinů
Celková RNA byla oddělena z klidových T buněk a buněk ošetřených Ribavírinem® a interferonem a a neošetřených aktivovaných T buněk použitím obchodních variant guanidium thiocyanát/fenol extrakčních technik (Trizol činidlo (GIBCO/BRL)). RNA byla promyta 70 % ethanolem a konečně resuspendována v 10 μΙ DEPC upravené vody.
cDNA reakce syntézy byla provedena pomocí instrukcí výrobců (Promega, Madion, WI). 1pg celkové RNA byl rychle zahřán na teplotu 65 °C po dobu 10 minut a ochlazen ledem před sloučením s 2 μΙ lOXtlumivého roztoku zpětné transkripce (100 mM Tris-HCl (pH 8,8), 500 mM KCI, 1 % Triton X-100), 5 mM MgCI, 2 μΙ 10 mM dNTPs (1 mM každé dNTP), 0,5 μΙ Rnase útlumového prostředku, 1 μΙ oligo (dT)15 priméru (0,5 pg/pg RNA) a 0,65 μΙ AMV zpětné transkriptázy (H. C.). Reakce byla inkubována při teplotě 42 °C po dobu 1 hodiny, dále při teplotě 95 °C po dobu 10 minut a 5 minut na ledě.
PCR reakce byla provedena použitím GeneAmp PCR kitu (Perkin-Elmer Cetus, Foster City, Ca). RT reakční směs (3 μΙ) byla v nové zlumavce sloučena s 5 μ110 X PCR tlumivého roztoku (500 mM KCI, 100 mM Tris-HCl, pH 8,3, 15 mM MgCI2 a 0,01 % (w/v) želatiny), 1 μΙ 10 mM dNTP a 1 U taq DNA polymerátu. Použité priméry byly následující: interleukin-2, interleukin-4, interferon-g (lidský) priméry (Stratagene, La Jolla, CA) a PHE7 ribozomální gen. Podmínky zesílení byly 45 sekund při teplotě 94 °C, 1 min při teplotě 57 °C a 2 minuty při teplotě 72 °C pro 35 cyklů, následovalo 8 minut při teplotě 72 °C. PCR produkty byly analyzovány v 2 % gelu agarózy obsahujícím ethidiumbromid. Podle elektroforézy byly produkty PCR přemístěny na Hybond N+ membránu (Amersham, Arlington Heights, IL) v 20 X SSC přes noc a zbaveny pohyblivosti použitím 0,4 m NaOH. Skvrny byly hybridizovány s 32Ρ-χΑΤΡ označenými oligonukleotidovými sondami v Rapid-hyb tlumivém roztoku (Amersham) po dobu 1 hodiny při teplotě 42 °C. Každá cytokinová směs primérů byla použita jako sonda značená radioaktivním izotopem (podle instrukcí). Ekvivalentní dávka byla testována prostřednictvím hybridizace sondou vyvinutou z pHE7 testovacího priméru. Promyté kapky byly následně analyzovány použitím Phosphorlmageru.
9« ·· • · · · • · · • 9 · • · 9
9999
• 9 9 9 • 9 9 · ·
9 9 • * 9 ·
Příklad 7
Vliv Ribavirinu® na úrovně extracelulárních cyíokinů v aktivovaných T buňkách
Ošetření PMA/jonomycinem (48 až 72 hodin) lidských T buněk látkově zvýšilo úroveň všech analyzovaných cytokinu, tj. IL-2, IL-4, TNFa, IFN% (tabulka 2). První číslo v každé buňce ukazuje aritmetický průměr a čísla v kulatých závorkách znázorňují relevantní rozmezí, N = 4. V předložené zkoušce znázorněné na obrázku 1 dodání Robavirinu® s intenzitou dávkování 0,5 až 50 mM zvyšuje aktivované úrovně Th1 cytokinů, IL-2 a TNFa maximálně v 5 mM (30 %) a 20 mM (36 %), jednotlivě. Oproti tomu interferon-a tlumil IL-2 a TNFa expresi způsobem závislým na dávkování (rozmezí 250 až 10.000 U/ml, maximální útlum 33 % a 38 %, jednotlivě) v porovnání s úrovněmi v neošetřených aktivovaných T buňkách. Dodatečně, Ribavirin® zprostředkoval souhlasný pokles v aktivovaných úrovních Th2 cytokinu, IL-4 (mezní útlum 74 % v 2 mM), zatímco interferon-a maximálně snížil extracelulární IL-4 kolem 26 % (10.000 U/ml). Použití kombinací Ribavirinu® a interferonu a, obrázek 2 ukazuje, že konstantní množství 2000 U/ml interferonu a potlačilo přírůstek Ribavirinu® závislý na dávkování aktivovaných IL-2 úrovní (A) a zvrátil útlum aktivovaných IL-4 úrovní ( C). Podobně, konstantní množství 10 mM Ribavirinu® zvrátilo útlum zprostředkovaný interferonem a závislý na intenzitě dávkování aktivovaných IL-2 úrovní (B) a potlačil zvýšení aktivovaných IL-4 úrovní (D).
Příklad 8
Vliv Ribavirinu® na úroveň cytokinů mRNA v aktivovaných T buňkách
Tyto protichůdné vlivy Ribavirinu® a interferonu-a na aktivované úrovně extracelulárních cytokinů byly také pozorovány v úrovni transkripce. Obrázek 3 znázorňuje, že ošetření PMA/jonomycinem lidských T-buněk látkově zvyšuje IL-2, IL-4 a !FN% mRNA úrovní. Ošetření Ribavirinem® (2,5 a 10 mM), následně po aktivaci T buněk, zvýšilo IL-2, snížilo IL-4 a nemělo žádný vliv na IFN% mRNA. Oproti tomu interferon a v 100, 2000 a 5000 U/ml snížil IL-2, zvýšil IL-4 a snížil IFN% mRNA. Jednotlivé vlivy Ribavirinu® a interferonu a závislé na intenzitě dávkování na IL-2, TNFa a IL-4 mRNA exprese se tedy shodovaly s analýzami ELISA: Tyto data ukazují, že Ribavirin® podporuje syntézu Th1 cytokinů, IL-2 a TNFa a potlačuje expresi Th2 cytokinů, IL-4 v aktivovaných lidských T buňkách.
• ·
Příklad 9
Vliv Ribavirinu® na úrovně receptorů IL-2 a IL-4 v aktivovaných T buňkách
Použitím FACS analýzy jsme porovnali vlivy Ribavirinu® a interferonu a na expresi IL-2 (CD25) a IL-4 (CDw124) expresi receptorů v aktivovaných T buňkách. Ošetření PMA/jonomycinem zvyšuje CD25 a CDw124 expresi z klidových úrovní 50,16 ± 0,45 a 62,31 ± 1,46 na aktivované úrovně 162,48 ± 2,89 a 87,53 ± 3,98, jednotlivě (n = 4). Podle tří předložených experimentů obrázek 4 ukazuje, že Rivabirin® (1 až 50 mM) má malý vliv na aktivované úrovně IL-2 a IL-4 receptorů, zatímco interferon a s intenzitou dávkování 250 až 10.000 U/ml snižuje IL-2 expresi receptorů a zvyšuje IL-4 expresi receptorů způsobem závislým na dávkování v porovnání s úrovněmi receptorů v kontrolních aktivovaných T buňkách. Tyto údaje tedy ukazují, že vliv Ribavirinu® na syntézu cytokinů působí nezávisle na expresi receptorů cytokinu. Oproti tomu, vliv ošetření interferonem a na IL-2 a IL-4 receptory koreluje s pozorováním jejich vlivu na aktivované IL-2 a IL-4 exprese.
Příklad 10
Vliv Ribavirinu® na intracelulární IL-2 úrovně v CD4 a CD8+ podmnožinách aktivovaných T buněk
Testovali jsme, zda vliv Ribavirinu® na IL-2 expresi byl specifický k CD4' nebo CD8+ T buňkám. Intracelulární IL-2 exprese v ustálených a propustných aktivovaných T buňkách byla určena dvoubarevnou průtokovou cytometrií použitím fluorescenčně označených protilátek na CD4 nebo CD8 a na IL-2. Obrázek 5 znázorňuje, že pň ošetření Ribavirinem® v 10 mM roste procentický podíl CD4+ T buněk vyjadřujících IL-2 z 82 % na 91 % a procentický podíl CD8+ vyjadřující IL-2 se zvyšuje z 81 % na 91 %. Oproti tomu procentický podíl GD4+ buněk vyjadřující IL-2 a CD8+ buněk vyjadřující IL-2 při ošetření interferonem a (5.000 U/ml) byl 81% a 71 % jednotlivě. Tyto data ukazují, že Ribavirin® má vliv na intracelulární IL-2 expresi, který nerozlišuje mezi CD4+ nebo CD8+ T buněčnými podmnožinami Oproti tomu ošetření interferonem a má malý vliv na CD4+ T buňky a stejnoměrně snižuje IL-2 expresi v CD8+ T buněčné podmnožině.
• ·
4« ·· 4 ·· • 4 · « ·· · · • · « · · · • · 4 4 · · ·
-4 O ··· 4 4 4
I £. «· · ·4· ·· 4 »4
Příklad 11
Analogy Ribavirinu®
Existuje několik tříd analogů Ribavirinu®, které jsou uvažovány jako klinicky efektivní při modulaci Th1 nebo Th2 zprostředkovaných reakcích T buněk. Tyto zahrnují molekuly spadající do genetického vzorce obrázku 6, ve kterém X je O, S, CH2, CHOH nebo N-CO-R^; A, B a C jsou nezávisle N, P, CH, C-OH, C-CH3, C-alkyl, C-alkenyl, C-CH2, -CN, C-halogen, C-CN, CCOQCHa, C-NH2, C-SNH2i C-SO2-NH2i C-CONH2, C-CS-NH2i C-C(NH)NH2i CPO2-NH2 nebo Cheterocyklický kruhový systém; D je S, Se, Te, PH, NH nebo NR12; R4 je H, (CH2)p(OH), halogen, CN, (CH2)pONH2, (CH2)pNH2l CH3, CH2SPH nebo (CH2)-heteroeyklický kruh; R2 je H, OH, OCH3, SH, SCH3, halogen, CN, NH2i ONH2i NHCH3, (CH2)OH, (CH2)pNH2, CH3 nebo COOMe; R3, R4i R5i R6i R7 a R8 jsou nezávisle H, OH, OCH3, SH, SCH3, halogen, CN, NH2, ONH2, NHCH3, (CH2)OH, (CH2)pNH2, CH3, COOMe nebo fenyl; R9 je H, halogen, NH2, CH3, CONH, CSNH2, COOMe, SNH2, SO2NH2, PO2NH2, (CH2)p, (CH2)p-heterocyklický kruhový systém nebo (CH2)p-glukóza; R10 je H, halogen, NH2, CH3, CONH, CSNH2, COOMe, SNH2i SO2NH2, PO2NH2i (CH2)p, (CH2)p-heterocyklický kruhový systém, (CH2)p-glukóza, O-CH3, 0CH2CH3 nebo amino kyselina; Y je O, S, NH-HCI, NOH, N0CH3 nebo NOCH2PH; R10 & Y v kombinaci jsou heterocyklické kruhové systémy takové jako thiazol, imidazol, atd.; Rn je CH3(CH2)pNH2, (CH2)p-heterocyklický systém, (CH2)p-amino kyselina nebo (CH2)p-eukr (glukóza, atd.); p je celé číslo od O do 8; a výše uvedené zahrnují jak L typ tak i D typ nukleosidů.
Tyto molekuly mohou být vyrobeny podle jednoho nebo více z následujících typických schémat.
1. Syntéza ICN1369 (pyrazomycin): Metodologie syntézy této sloučeniny je popsána v následujících citovaných dokumentech; (a) J. Farkas, Z. Flegelova a F. Sorm, Tetrahedron Letts., 22, 2279(1972); (b) S. De Bernardo a M. Weigele, J. Org. Chem. (Časopis organické chemie), 41, 287(1976); ( c) J. G. Buchanan, A. Stobie a R. H. Wightrnan, J. Chem Soc Chem. Commun, 916(1980); N. Karagiri, K. Takashirna, T. Haneda a T. Kato, J. Chem. Soc. Perkin Trans., 553(1984).
2. Syntéza ICN3438 (1-3-D-xylofuranosyl-1,2,4-triazol-3-barboxamid); Syntéza této sloučeniny byla provedena podle následující procedury popsané v J. T. Witkowski, M. Fuertes, P. D. Cook a R. K. Robins, J. Carbohydr. Nucleosides (Karbohydrátové nukleosidy), Nukleosidy 2(1), 1(1975)).
3. Syntéza ICN3844 (1-(5-O-sulfamoyl-3-D-ribofuranosyl)-1,2,4-triazol-3-karboxamin): Sloučenina byla připravena podle procedury popsané v G. D. Kini, Β. M. Henry, R. K.
• ·
9«
| • 9 | 9 99 | 99 | • 9 | |||
| • | « 9 | 99 9 | 9 | • 9 | 9 | • |
| • | • | |||||
| • | • · | 9 9 | 9 | 9 999 | • | 9 |
| • | 9 • 999 | 9 9 999 99 | 9 | 9 «9 | 9 «9 | • |
Robins, S. B. Larson, J. J. Marr, R. L. Berens, C. J. Bacchi, H. C. Nathan a 3. S. Keíthly, J. Med. Chem., 33,44(1990)).
4. Syntéza ICN4625 (1-(3-deoxy-p-D-erythropentofuranosyl)-1,2,4-triazol-3-karboxamid): Sloučenina byla připravena použitím následující metody syntézy:
5. Syntéza ICN5531 (5-amino-1-p-D-ribofuranosylpyrazol-4-karboxamid): Tato sloučenina byla připravena podle metodologie syntézy uvedené v Β. K. Bhattacharya, R. K. Robins a G. R. Revankar, J. Heterocyclic Chem. (Časopis heterocyklické chemie), 21, 795(1990).
6. Syntéza ICN5676 (1-3-D-arabinofuranosyl-1,2,44riazol-3-karboxamid): Syntéza této sloučeniny byla provedena podle následující procedury popsané vJ. T. Witkowski, M. Fuefles, P. D. Cook a R. K. Robins, J. Carbohydr. Nucleosides (Karbohydrétové nukleosidy), nukleosidy 2(1), 1(1975)).
7. Syntéza ICN5839 (Ι-β-D-erythrofuranosyl-l ,2,4-karboxamid): Tato sloučenina byla připravena podle následujícího schématu syntézy:
·· ···· ·· ··
8. Syntéza ICN6242 (2-bromo-1-p-D-ribofuranosylimidazol-4-karboxamid): Tato sloučenina byla připravena podle následující znázorněné metody:
Rcf;P. C. Srivastava, Q. A. Ivanovics, R. J. Rousieau and R. K. Robins,
J. Org. Chem., 40, 2920 (1975) ’
Ac^O/Py
V
1. NBA/THF
2. NaOMe/MeOH
9. Syntéza ICN11808 (1-p-D-ribofuranosyl-pyrazol-3,4-dikarboxamid): Syntéza této sloučeniny byla popsána v Y. S. Sanghvi, Β. K. Bhattacharya, G. D. Kini, S. S. Matsumoto, S. B. Larson, W. J. Jolley, R. K. Robins a G. R. Revankar, J. Med. Chem, 33, 336(1990) a v souladu s tím byla pňpravena uvedená sloučenina.
10. Syntéza ICN12204 (2-(p-D-ribofuranosyl)imidazol-5-karboxamid): Syntéza této sloučeniny byla provedena podle následující procedury uvedené v J. Igoleo, Τ. H. Dinh, A. Keib a C. Perreur, Chimie Therapeutique (Chemoterapeutika), 207(1972).
Pro karbocyklické deriváty 4'-thiocukrů a 4'-azacukrú analogů Ribavirinu® mohly být následující cukry kondenzovány vhodnými heterocyklickými sloučeninami a odvozeny podle popisu výše uvedeného schéma a poznámek.
4'-thiocukr
Karbocyklický cukr
1. Karbocyklické cukry mohou být připraveny podle následující procedury uvedené v literatuře: M. Yoshikawa, Y. Yoshikawa, Y. Inoue, S. Yamaguchi a N. Murakami, Tetrahedron, 50, 9961(1994); L. Agrofoglio, E. Suhas, A. Parese, R. Condom, S. R. Challand, R. A. Earl a R. Guedj, Tetrahedron, 50,10611(1994).
2. 4-azacukr byl připraven podle procedury uvedené v literatuře: E. J. Reist, D. E. Gueffroy a L. Goodman, J. Am. Chem. Soc., 87, 677(1965).
3. 4-thio-D-ribofuranóza byla připravena podle následující procedury uvedené v literatuře: M. Hobek a R. L. Whistler v „Methods in Carbohydrate Chemistry, (Metody v karbohydrátové chemii)“, odd 1,292(1962).
Dokumentace efektivnosti účinků analogů Robavirinu® pň modulaci Th1 a Th2 cytokinu je ukázána na obrázku 7 a v následující tabulce. Analýzy uvedené na tomto místě obsahují krátký seznam 35 testovaných analogů Ribavirinu® a všechny zkoušky byly provedeny třikrát. Všeobecně je zřejmé, že testované sloučeniny spadají do tří hlavních kategorií: (1) sloučeniny takové jako ICN1369 a ICN3844, které potlačují IFNx, IL-2, IL-4, IL-S a TNFa; (2) sloučeniny takové jakoRibavirin®, které zvyšují IL-2 a TNFa a potlačují ILA a IL-5; a (3) sloučeniny takové • * • · ·· ·· jako ICN6242, ICN3839 a ICN3531, které zvyšují IL-2 a IFN% a potlačují IL-4 a IL-5. Takové aktivní látky uvedené výše budou možným přínosem pro určení, ve které modulaci cytokinů bude vyvolána vhodná imunitní reakce.
Tabulka 2
Koncentrace buněk na jeden otvor = 2 χ 106 x 24 = 48 χ 106 v 48 ml (celkový objem každého otvoru = 2000 μΙ)
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
| A | PMA ICN | PMA ICN | PMA ICN 10 μΜ 1369 | PMA ICN 5 μΜ1369 | PMA ICN 2μΜ 1369 | |
| B | PMA ICN 10 μΜ 3438 | PMA ICN 5 μΜ 3438 | PMA ICN 2 μΜ 3438 | PMA ICN 10 μΜ 3844 | PMA ICN 5 μΜ 3844 | PMA ICN 2 μΜ 3844 |
| C | PMA ICN 10μΜ 4625 | PMA ICN 5 μΜ 4625 | PMA ICN 2μΜ 4625 | PMA ICN 10 μΜ 5531 | PMA ICN 5 μΜ 5531 | PMA ICN 2 μΜ 5531 |
| D | PMA ICN 10 μΜ 5676 | PMA ICN 5 μΜ 5676 | PMA ICN 2 μΜ 5676 | PMA ICN 10 μΜ 5839 | PMA ICN 5 μΜ 5839 | PMA ICN 2 μΜ 5839 |
Koncentrace na jeden otvor = 2 χ 106 x 24 = 48 x 106 ve 48 ml (Celkový objem v každém otvoru = 2000 μΙ)
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
| A | PMA | PMA | PMA | PMA | PMA | PMA |
| ICN | ICN | ICN | ICN | ICN | ICN | |
| 10 μΜ 6242 | 5 μΜ 6242 | 2 μΜ 6242 | 10μΜ11808 | 5 μΜ 11808 | 2μΜ 11808 | |
| A | PMA | PMA | PMA | PMA | PMA | PMA |
| ICN | ICN | ICN | ICN | ICN | ICN | |
| 10μΜ12204 | 5μΜ12204 | 2μΜ12204 | 10 μΜ RIB | 5 μηι RIB | 2 μΜ RIB |
Ribavirin® a analogy Ribavirinu® se ukázaly jako účinné pň modifikaci exprese lymfokinů v aktivovaných T buňkách. Specifické celky a aplikace byly přímo uvedeny, ale odborníkům
zkušeným v oboru bude jasná možnost dalších mnoha modifikací, aniž by se odchýlili od konceptu vynálezu. Vynález proto není zamýšlen jako limitní, mimo smysl pňložených nároků.
-1 «·«« φ
♦ φ · φφφ
V φ φ
PATENTOVÉ NÁEOEY
Claims (9)
1. způsob inverzně modulovaných odpovědí Th1 a Th2 lymfocytů vyznačující se tím, že se přidá Ribavirin k lymfocytům v koncentraci, která zvyšuje Th1 reakci a potlačuje Th2 reakci.
2. Způsob podle nároku 1 vyznačující se tím, že Th2 reakce byla předtím zvýšena pomocí antigenů.
3. Způsob podle nároku 1 vyznačující se tím, že Th2 reakce byla předtím zvýšena pomocí hlístu.
4. Způsob podle nároku 1 vyznačující se tím, že Th2 reakce byla předtím zvýšena pomocí protilátky.
5. Způsob inhibování virusu pomocí růstu viru v prostředí mající iymfocyty, vyznačující se tím, že jsou produkovány Th1 a Th2 odpovědi cytokininu a je přidán Ribavirin k tomuto prostředí v koncentraci která zvyšuje Th1 reakci a potlačuje Th2 reakci.
6. Způsob podle nároku 5 vyznačující se tím, že virus obsahuje Heptitis C.
7. Způsob podle nároku 7 vyznačující se tím, že virus je lidským virusem deficity imunity.
8. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7 vyznačující se tím, že je přidáno množství Ribavirinu poskytující koncentraci od 0,25 do 12,5/UM v mediu, které podporuje Iymfocyty.
9. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7 vyznačující se tím, že dále zahrnuje přidání interferonu alfa k lymfocytům.
Ύ\/ ZlTR -^8 • Φ · ·· ·· Μ » · · · · · »«·* • · · · · · · · • · · · · · · · · · * • · · · · · · ·· ·· ·· · 9 9 9 9 9 9 οοοοι 0005 0002 0001 005 052 05 _ 02 01 5 2 1
3·
Γ3
X) η
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/590,449 US5767097A (en) | 1996-01-23 | 1996-01-23 | Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by ribavirin in activated T-lymphocytes |
| US3609497P | 1997-01-17 | 1997-01-17 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ232998A3 true CZ232998A3 (cs) | 1999-04-14 |
| CZ293584B6 CZ293584B6 (cs) | 2004-06-16 |
Family
ID=26712784
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19982329A CZ293584B6 (cs) | 1996-01-23 | 1997-01-21 | Prostředek pro modulaci exprese lymfokinů |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0879056B1 (cs) |
| KR (1) | KR100298158B1 (cs) |
| CN (1) | CN1190198C (cs) |
| AT (1) | ATE216886T1 (cs) |
| BR (1) | BR9707154A (cs) |
| CA (1) | CA2246162C (cs) |
| CZ (1) | CZ293584B6 (cs) |
| DE (1) | DE69712316T2 (cs) |
| DK (1) | DK0879056T3 (cs) |
| ES (1) | ES2172764T3 (cs) |
| HU (1) | HU220105B (cs) |
| IL (1) | IL125088A0 (cs) |
| NO (1) | NO983372L (cs) |
| NZ (1) | NZ330784A (cs) |
| PL (1) | PL187439B1 (cs) |
| PT (1) | PT879056E (cs) |
| RU (1) | RU2186569C2 (cs) |
| SI (1) | SI9720013A (cs) |
| SK (1) | SK283342B6 (cs) |
| UA (1) | UA46815C2 (cs) |
| WO (1) | WO1997026883A1 (cs) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1254911A1 (en) * | 1996-10-16 | 2002-11-06 | ICN Pharmaceuticals, Inc. | Monocyclic L-nucleosides, analogs and uses thereof |
| HUP9904665A3 (en) | 1996-10-25 | 2000-11-28 | Minnesota Mining And Mfg Co Sa | Immune response modifier compounds for treatment of th2 mediated and related diseases |
| CA2357735A1 (en) * | 1999-01-29 | 2000-08-03 | Icn Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of immune response by ribavirin |
| US6455508B1 (en) * | 2000-02-15 | 2002-09-24 | Kanda S. Ramasamy | Methods for treating diseases with tirazole and pyrrolo-pyrimidine ribofuranosyl nucleosides |
| US7638496B2 (en) | 2000-02-15 | 2009-12-29 | Valeant Pharmaceuticals North America | Nucleoside analogs with carboxamidine modified monocyclic base |
| US6680059B2 (en) | 2000-08-29 | 2004-01-20 | Tripep Ab | Vaccines containing ribavirin and methods of use thereof |
| US7022830B2 (en) | 2000-08-17 | 2006-04-04 | Tripep Ab | Hepatitis C virus codon optimized non-structural NS3/4A fusion gene |
| WO2002014362A2 (en) * | 2000-08-17 | 2002-02-21 | Tripep Ab | A hepatitis c virus non-structural ns3/4a fusion gene |
| RU2286172C2 (ru) | 2000-08-17 | 2006-10-27 | Трипеп Аб | Вакцины, содержащие рибавирин, и способы их использования |
| WO2003024481A2 (en) | 2001-09-14 | 2003-03-27 | Cytos Biotechnology Ag | Packaging of immunostimulatory substances into virus-like particles: method of preparation and use |
| RU2005133093A (ru) * | 2003-03-28 | 2006-07-27 | Фармассет, Инк. (Us) | Соединения для лечения флавивирусных инфекций |
| US20050182252A1 (en) | 2004-02-13 | 2005-08-18 | Reddy K. R. | Novel 2'-C-methyl nucleoside derivatives |
| EP1973608A1 (en) | 2005-12-14 | 2008-10-01 | Cytos Biotechnology AG | Immunostimulatory nucleic acid packaged particles for the treatment of hypersensitivity |
| EP2051728A4 (en) * | 2006-03-09 | 2010-03-31 | Om Pharma | IMMUNOMODULATORY COMPOUNDS AND TREATMENT OF ILLNESSES DUE TO OVERPRODUCTION OF INFLAMMATORY CYTOKINS |
| CA2655108C (en) | 2006-06-12 | 2019-05-07 | Cytos Biotechnology Ag | Processes for packaging oligonucleotides into virus-like particles of rna bacteriophages |
| US8071561B2 (en) | 2007-08-16 | 2011-12-06 | Chrontech Pharma Ab | Immunogen platform |
| CN104114568B (zh) | 2011-12-22 | 2017-09-01 | 艾丽奥斯生物制药有限公司 | 取代的核苷、核苷酸及其类似物 |
| USRE48171E1 (en) | 2012-03-21 | 2020-08-25 | Janssen Biopharma, Inc. | Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof |
| US9441007B2 (en) | 2012-03-21 | 2016-09-13 | Alios Biopharma, Inc. | Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof |
| PL2861611T3 (pl) | 2012-05-25 | 2017-08-31 | Janssen Sciences Ireland Uc | Nukleozydy uracylowe spirooksetanu |
| EA201590943A1 (ru) | 2012-12-21 | 2016-01-29 | Алиос Биофарма, Инк. | Замещенные нуклеозиды, нуклеотиды и их аналоги |
| CN113712989A (zh) | 2013-10-11 | 2021-11-30 | 艾丽奥斯生物制药有限公司 | 取代的核苷、核苷酸及其类似物 |
| MX2016014761A (es) | 2014-05-16 | 2017-05-25 | Amgen Inc | Ensayo para detectar poblaciones celulares linfocitos t colaboradores 1 (th1) y linfocitos t colaboradores (th2). |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2109528A1 (en) * | 1991-05-01 | 1992-11-02 | Gregory A. Prince | A method for treating infectious respiratory diseases |
-
1997
- 1997-01-21 DE DE69712316T patent/DE69712316T2/de not_active Revoked
- 1997-01-21 BR BR9707154A patent/BR9707154A/pt not_active Application Discontinuation
- 1997-01-21 KR KR1019980705645A patent/KR100298158B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 ES ES97904765T patent/ES2172764T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-01-21 DK DK97904765T patent/DK0879056T3/da active
- 1997-01-21 WO PCT/US1997/000600 patent/WO1997026883A1/en active IP Right Grant
- 1997-01-21 CA CA002246162A patent/CA2246162C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-01-21 IL IL12508897A patent/IL125088A0/xx unknown
- 1997-01-21 UA UA98073815A patent/UA46815C2/uk unknown
- 1997-01-21 RU RU98115594/14A patent/RU2186569C2/ru active
- 1997-01-21 EP EP97904765A patent/EP0879056B1/en not_active Revoked
- 1997-01-21 PT PT97904765T patent/PT879056E/pt unknown
- 1997-01-21 SK SK1004-98A patent/SK283342B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 CN CNB971917760A patent/CN1190198C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1997-01-21 PL PL97328003A patent/PL187439B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 SI SI9720013A patent/SI9720013A/sl not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 HU HU9900681A patent/HU220105B/hu not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 CZ CZ19982329A patent/CZ293584B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 AT AT97904765T patent/ATE216886T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-01-21 NZ NZ330784A patent/NZ330784A/xx unknown
-
1998
- 1998-07-22 NO NO983372A patent/NO983372L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU700642B2 (en) | 1999-01-14 |
| SI9720013A (sl) | 1999-06-30 |
| DE69712316D1 (en) | 2002-06-06 |
| WO1997026883A1 (en) | 1997-07-31 |
| EP0879056B1 (en) | 2002-05-02 |
| ES2172764T3 (es) | 2002-10-01 |
| DE69712316T2 (de) | 2003-01-02 |
| NO983372L (no) | 1998-09-21 |
| UA46815C2 (uk) | 2002-06-17 |
| HUP9900681A2 (hu) | 1999-07-28 |
| KR19990081930A (ko) | 1999-11-15 |
| ATE216886T1 (de) | 2002-05-15 |
| HU220105B (hu) | 2001-10-28 |
| CZ293584B6 (cs) | 2004-06-16 |
| PL328003A1 (en) | 1999-01-04 |
| SK283342B6 (sk) | 2003-06-03 |
| EP0879056A1 (en) | 1998-11-25 |
| RU2186569C2 (ru) | 2002-08-10 |
| NO983372D0 (no) | 1998-07-22 |
| HUP9900681A3 (en) | 1999-12-28 |
| DK0879056T3 (da) | 2002-08-19 |
| CN1209747A (zh) | 1999-03-03 |
| IL125088A0 (en) | 1999-01-26 |
| AU1747897A (en) | 1997-08-20 |
| BR9707154A (pt) | 1999-05-25 |
| PL187439B1 (pl) | 2004-07-30 |
| KR100298158B1 (ko) | 2001-09-06 |
| CN1190198C (zh) | 2005-02-23 |
| EP0879056A4 (en) | 1999-01-13 |
| SK100498A3 (en) | 2001-03-12 |
| CA2246162C (en) | 2000-04-04 |
| NZ330784A (en) | 1999-02-25 |
| PT879056E (pt) | 2002-10-31 |
| CA2246162A1 (en) | 1997-07-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ232998A3 (cs) | Použití Ribavirinu pro modulaci exprese lymfokinů, ošetření nevirových nemocí, nevirových podílů nemocí a použití analogů Ribavirinu | |
| US5767097A (en) | Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by ribavirin in activated T-lymphocytes | |
| US6150337A (en) | Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by Ribavirin in activated T-lymphocytes | |
| Anguille et al. | Interferon-α in acute myeloid leukemia: an old drug revisited | |
| Seko et al. | Expression of cytokine mRNAs in murine hearts with acute myocarditis caused by coxsackievirus b3 | |
| DeBruyne et al. | Gene transfer of virally encoded chemokine antagonists vMIP-II and MC148 prolongs cardiac allograft survival and inhibits donor-specific immunity | |
| SK11572002A3 (sk) | Nukleozidové analógy s bicyklickou bázou modifikovanou karboxamidínom | |
| Mattner et al. | Regulation of type 2 nitric oxide synthase by type 1 interferons in macrophages infected with Leishmania major | |
| Li et al. | Chemokines in cardiac fibrosis | |
| SE513429C2 (sv) | Preparat för aktivering av naturliga mördarceller, vilket preparat innehåller interferon alfa och biogena aminer | |
| He et al. | The potential role of CD16+ Vγ2Vδ2 T cell-mediated antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity in control of HIV type 1 disease | |
| JP3416147B2 (ja) | 活性化ｔリンパ球におけるリバビリン及びリバビリン類似体によるｔｈ１型／ｔｈ２型サイトカインの発現の調節 | |
| Davis | The antiviral prophylaxis of post-transplant lymphoproliferative disorder | |
| US20030212015A1 (en) | Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by ribavirin in activated T-lymphocytes | |
| Vieillard et al. | Transfer of human CD4+ T lymphocytes producing beta interferon in Hu-PBL-SCID mice controls human immunodeficiency virus infection | |
| JP2000500503A (ja) | 活性化ｔリンパ球におけるリバビリン及びリバビリン類似体によるｔｈ１型／ｔｈ２型サイトカインの発現の調節 | |
| Xu et al. | GM-CSF restores innate, but not adaptive, immune responses in glucocorticoid-immunosuppressed human blood in vitro | |
| AU700642C (en) | Modulation of TH1/TH2 cytokine expression by ribavirin and ribavirin analogs in activated T-lymphocytes | |
| EP1174141A2 (en) | Modulation of TH1/TH2 cytokine expression by ribavirin and ribavirin analogs in activated t-lymphocytes | |
| Dong et al. | Natural killer cell activating receptor NKG2D is involved in the immunosuppressive effects of mycophenolate mofetil and hepatitis B virus infection | |
| Turano et al. | The role of human autoantibodies against γ-interferon | |
| US12024558B2 (en) | Method of inhibiting HIV-1 viral rebound in a subject using interferon inhibitors and ART | |
| EP4309666A1 (en) | M-csf for use in the prophylaxis and/or treatment of viral infections in states of immunosuppression | |
| CN116529258A (zh) | 白介素-2-Fc融合蛋白和使用方法 | |
| TW201803567A (zh) | 新穎免疫賦活化劑 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20100121 |