RU2498813C2 - Иммуномодуляторные соединения и лечение заболеваний, связанных со сверхпродукцией воспалительных цитокинов - Google Patents
Иммуномодуляторные соединения и лечение заболеваний, связанных со сверхпродукцией воспалительных цитокинов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2498813C2 RU2498813C2 RU2008139985/15A RU2008139985A RU2498813C2 RU 2498813 C2 RU2498813 C2 RU 2498813C2 RU 2008139985/15 A RU2008139985/15 A RU 2008139985/15A RU 2008139985 A RU2008139985 A RU 2008139985A RU 2498813 C2 RU2498813 C2 RU 2498813C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- integer
- cooh
- configuration
- amino
- alkanoyloxy
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 56
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims abstract description 19
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 title abstract description 40
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 title abstract description 40
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 title abstract description 12
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims abstract description 47
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 35
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 15
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 7
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 239000012453 solvate Substances 0.000 claims abstract description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 62
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 31
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 25
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 23
- -1 2-aminoethanoyloxy Chemical group 0.000 claims description 21
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 17
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 16
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 14
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 12
- FJKVIRFMBJTEIJ-UHFFFAOYSA-N 6,7-dihydroxyheptanoic acid Chemical compound OCC(O)CCCCC(O)=O FJKVIRFMBJTEIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 claims description 8
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 8
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims description 6
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 229920001577 copolymer Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 claims description 6
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000004442 acylamino group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000006620 amino-(C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 146
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 53
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 38
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 37
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 31
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 30
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 28
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 description 26
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 description 26
- 238000000034 method Methods 0.000 description 25
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 23
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 19
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 18
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 16
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 15
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 14
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 14
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 13
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 13
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 12
- 102000000743 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 12
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 12
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 10
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 10
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 10
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 9
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 9
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 9
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 8
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 8
- 230000004044 response Effects 0.000 description 8
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 7
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 7
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 7
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 7
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 7
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- HDFFVHSMHLDSLO-UHFFFAOYSA-M dibenzyl phosphate Chemical compound C=1C=CC=CC=1COP(=O)([O-])OCC1=CC=CC=C1 HDFFVHSMHLDSLO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 7
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 7
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 6
- KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-N 1H-tetrazole Chemical compound C=1N=NNN=1 KJUGUADJHNHALS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 6
- NZWOPGCLSHLLPA-UHFFFAOYSA-N methacholine Chemical compound C[N+](C)(C)CC(C)OC(C)=O NZWOPGCLSHLLPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229960002329 methacholine Drugs 0.000 description 6
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 6
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 5
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 5
- CUPNQHNWAJRLGP-SXOMAYOGSA-N [(3r)-1-oxo-1-[[(3s)-2-oxooxolan-3-yl]amino]tetradecan-3-yl] dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)O[C@H](CCCCCCCCCCC)CC(=O)N[C@H]1CCOC1=O CUPNQHNWAJRLGP-SXOMAYOGSA-N 0.000 description 5
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 5
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 5
- JVXJNLCFJOYNIB-FYZJSYNQSA-N (3r)-n-[(2r)-5-amino-1-(oxan-2-yloxy)pentan-2-yl]-3-phenylmethoxytetradecanamide Chemical compound C([C@@H](CCCN)NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OCC=1C=CC=CC=1)OC1CCCCO1 JVXJNLCFJOYNIB-FYZJSYNQSA-N 0.000 description 4
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 4
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 4
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 4
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 description 4
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- SHQMCQCSSSWXTN-QAFYHTLISA-N benzyl n-[(4r)-5-(oxan-2-yloxy)-4-[[(3r)-3-phenylmethoxytetradecanoyl]amino]pentyl]carbamate Chemical compound C([C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OCC=1C=CC=CC=1)COC1OCCCC1)CCNC(=O)OCC1=CC=CC=C1 SHQMCQCSSSWXTN-QAFYHTLISA-N 0.000 description 4
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 4
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 4
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 4
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 4
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 4
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 4
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 4
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 4
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 3
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 3
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 3
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 3
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 3
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 3
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 3
- 208000002200 Respiratory Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 208000037884 allergic airway inflammation Diseases 0.000 description 3
- KJCNTZHAEREHKD-UHFFFAOYSA-N benzyl 5-(oxiran-2-yl)pentanoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1COC(=O)CCCCC1CO1 KJCNTZHAEREHKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NFAWDMFMQIKANO-UHFFFAOYSA-N benzyl hept-6-enoate Chemical compound C=CCCCCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 NFAWDMFMQIKANO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 230000007689 endotoxicity Effects 0.000 description 3
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 3
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 201000007094 prostatitis Diseases 0.000 description 3
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 3
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 3
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 3
- JVEUTCWLEJSEDI-PXYINDEMSA-N (2s)-2,6-diamino-7-oxo-7-phenylmethoxyheptanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCC(N)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 JVEUTCWLEJSEDI-PXYINDEMSA-N 0.000 description 2
- IKRFTYQBIVDIMM-XMMPIXPASA-N (3r)-3-dodecanoyloxytetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCC[C@H](CC(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCC IKRFTYQBIVDIMM-XMMPIXPASA-N 0.000 description 2
- IGPABHSEKYCFIS-JWQCQUIFSA-N (3r)-n-[(2r)-5-amino-1-hydroxypentan-2-yl]-3-phenylmethoxytetradecanamide Chemical compound CCCCCCCCCCC[C@H](CC(=O)N[C@@H](CO)CCCN)OCC1=CC=CC=C1 IGPABHSEKYCFIS-JWQCQUIFSA-N 0.000 description 2
- FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-7-azabenzotriazole Chemical compound C1=CN=C2N(O)N=NC2=C1 FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BUDQDWGNQVEFAC-UHFFFAOYSA-N Dihydropyran Chemical compound C1COC=CC1 BUDQDWGNQVEFAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101100005713 Homo sapiens CD4 gene Proteins 0.000 description 2
- 101001055222 Homo sapiens Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 2
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 2
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 2
- 208000037883 airway inflammation Diseases 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000265 glucosuric effect Effects 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000013586 microbial product Substances 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 229920001992 poloxamer 407 Polymers 0.000 description 2
- 229940044476 poloxamer 407 Drugs 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 2
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FLYIRERUSAMCDQ-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-2-(2-methylphenyl)acetate Chemical compound CC1=CC=CC=C1C(N)C(O)=O FLYIRERUSAMCDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 3-chloroperbenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RXQDBVWDABAAHL-UHFFFAOYSA-N 6-(phenylmethoxycarbonylamino)hexanoic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCNC(=O)OCC1=CC=CC=C1 RXQDBVWDABAAHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 208000012657 Atopic disease Diseases 0.000 description 1
- 102100035687 Bile salt-activated lipase Human genes 0.000 description 1
- 206010015866 Extravasation Diseases 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001718 Immediate Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000010787 Interleukin-4 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038486 Interleukin-4 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 102100026236 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 102000002791 Interleukin-8B Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010018951 Interleukin-8B Receptors Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 239000012480 LAL reagent Substances 0.000 description 1
- 241000239218 Limulus Species 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283977 Oryctolagus Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010045240 Type I hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008649 adaptation response Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 230000009285 allergic inflammation Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000010216 atopic IgE responsiveness Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N benzyl bromide Chemical compound BrCC1=CC=CC=C1 AGEZXYOZHKGVCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GCFJYMSKDBZKLP-ROJLCIKYSA-N benzyl n-[(4r)-5-hydroxy-4-[[(3r)-3-phenylmethoxytetradecanoyl]amino]pentyl]carbamate Chemical compound C([C@H](CO)NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OCC=1C=CC=CC=1)CCNC(=O)OCC1=CC=CC=C1 GCFJYMSKDBZKLP-ROJLCIKYSA-N 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 208000029771 childhood onset asthma Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- FOTKYAAJKYLFFN-UHFFFAOYSA-N decane-1,10-diol Chemical compound OCCCCCCCCCCO FOTKYAAJKYLFFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N dodecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCO LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000002346 endotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000036251 extravasation Effects 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001571 immunoadjuvant effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 210000004043 pneumocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013630 prepared media Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- ZDYVRSLAEXCVBX-UHFFFAOYSA-N pyridinium p-toluenesulfonate Chemical compound C1=CC=[NH+]C=C1.CC1=CC=C(S([O-])(=O)=O)C=C1 ZDYVRSLAEXCVBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001698 pyrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 230000009959 type I hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
- A61K31/661—Phosphorus acids or esters thereof not having P—C bonds, e.g. fosfosal, dichlorvos, malathion or mevinphos
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
- A61K31/221—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin with compounds having an amino group, e.g. acetylcholine, acetylcarnitine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/66—Phosphorus compounds
- A61K31/661—Phosphorus acids or esters thereof not having P—C bonds, e.g. fosfosal, dichlorvos, malathion or mevinphos
- A61K31/6615—Compounds having two or more esterified phosphorus acid groups, e.g. inositol triphosphate, phytic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
- C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
- C07F9/09—Esters of phosphoric acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
- C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
- C07F9/09—Esters of phosphoric acids
- C07F9/091—Esters of phosphoric acids with hydroxyalkyl compounds with further substituents on alkyl
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Otolaryngology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине, а именно к применению, по меньшей мере одного иммуномодулирующего соединения общей формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или изомера для изготовления фармацевтической композиции для лечения заболевания или расстройства, выбранного из астмы, атопического дерматита, аллергического ринита, воспалительного заболевания кишечника, диабета или ревматоидного артрита у теплокровных животных, включая человека. Также предложено применение (5S,11R)-1-амино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол-12-дигидрофосфат (ОМ-294-ВА-МР(S,R)) или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или изомера для изготовления фармацевтической композиции. Группа изобретений обеспечивает лечение указанных заболеваний за счет модулирования баланса TH1/TH2 цитокинов путем снижения высвобождения ТН2-цитокинов и усиления продукции TH1-цитокинов. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 16 ил, 14 пр.
Description
Изобретение относится к применению соединений, обладающих иммуномодуляторной активностью для лечения заболеваний, связанных со сверхпродукцией воспалительных цитокинов, таких как заболевания, выбранные из группы, состоящей из астмы, атопического дерматита, аллергического ринита, простатита, воспалительного заболевания кишечника, диабета и ревматоидного артрита.
Недавно достигнут значительный прогресс в понимании механизма активации врожденной иммунной системы микробными сигналами. Также стало очевидно, что такая активация врожденной иммунной системы существенна для вызывания адаптивных иммунных ответов и для определения типа полученных адаптивных ответов. Вместе эти наблюдения вызвали значительное возрождение интереса к рациональным подходам в разработке иммунотерапии.
Два главных открытия оказались существенными для возросшего понимания активации врожденного иммунитета:
1) роль дендритных клеток (DC) в качестве антигенпрезентирующих клеток, отвечающих за индукцию первичных иммунных ответов;
2) открытие Toll-подобных рецепторов (TLR) и других «образраспознающих» рецепторов, которые определяют присутствие микробных структур, что приводит к стимуляции врожденной иммунной системы.
Sallusto и Lanzavecchia впервые сообщили о том, что незрелые DC можно получать из моноцитов человека в среде с добавлением GM-CSF и IL-4 (Sallusto F, Lanzavecchia A. J Exp Med 1994, 179:1109-18). Однако скоро стало понятно, что, кроме GM-CSF и IL-4, дополнительный фактор созревания необходим для получения зрелых DC, которые полностью функциональны в качестве антигенпрезентирующих клеток (APC). Зрелые DC способны управлять и инициировать адаптивный иммунный ответ.
Такие сигналы созревания можно получить при помощи микробных продуктов. Показано, что эти продукты действуют через TLR. Идентифицировано одиннадцать TLR, способных к распознаванию разных микробных продуктов или распознающих их. TLR4 представляет собой рецептор, который специфически распознает бактериальный липополисахарид (LPS), один из наиболее мощных известных стимуляторов врожденной иммунной системы.
В публикации международной заявки WO 2005007699 описано применение специфических участников связывания, в частности, молекул антител анти-IL-13 человека и, в особенности, молекул антител, которые нейтрализуют активность IL-13, в диагностике или лечении расстройств, связанных с IL-13, включая астму, атопический дерматит, аллергический ринит, фиброз, воспалительное заболевание кишечника и лимфому Ходжкина.
Однако по-прежнему необходимы исследования, чтобы узнать конкретную роль IL-13 в иммуномодуляции, и интерпретация результатов, связанных с исследованием пути IL-13/IL-4, все еще находится на стадии гипотез, как показано в следующих двух недавних публикациях.
В публикации «IL-4/IL-13 pathway genetics strongly influence serum IgE levels and childhood asthma», Michael Kabesch et al. (J. Allergy Clin. Immunol. Volume 117, Number 2), утверждается, что продукция IgE, отличительного признака астмы и атопического заболевания, может находиться под генетическим контролем, в который вовлечены гены пути IL-4 и IL-13. Вследствие того, что переключение IgE является фундаментальным для иммунитета и продолжительности жизни человека, существует тонкая регуляция IgE. Хотя путь IL-4/IL-13 может влиять на развитие астмы преимущественно посредством влияния на регуляцию IgE, данные результаты указывают на то, что, возможно, имеет место не только это.
В публикации «Control of allergic airway inflammation through immunomodulation», David B Corry and Farrah Kheradmand (J. Allergy Clin. Immunol. Volume 117, Number 2), описаны те основные открытия, связанные с клиническими испытаниями, которые изменили лечение астмы, и те, которые не изменили, и которые требуют дальнейшего изучения. Получены данные, что IL-4, цитокин, который необходим для IgE-ответов B-клеток, является существенным для ответов гиперчувствительности I типа, и что IL-4, таким образом, является одним из первых цитокинов, которые служат мишенью в клинических испытаниях для лечения астмы с использованием растворимой формы α-цепи (sIL-4Rα) рецептора IL-4, которая связывается с IL-4 и инактивирует его. IL-13 представляет собой другой цитокин, который обладает многими из эффектов, свойственных IL-4, но который не ингибируется посредством sIL-4α. Вывод состоит в том, что в будущих исследованиях для лечения астмы можно, таким образом, попытаться ингибировать одновременно как IL-4, так и IL-13.
Настоящее изобретение основано на демонстрации авторами настоящего изобретения того, что описанные далее молекулы являются эффективными агонистами TLR4 с надлежащим профилем безопасности, где молекулы способны индуцировать полное созревание функциональных DC моноцитарного происхождения, а также активировать другие типы клеток, экспрессирующих TLR4. DC, обработанные соединениями согласно изобретению, способны индуцировать первичной активации T-клеток и способствовать Th1-клеточным иммунным ответам.
Авторы настоящего изобретения также показали, что соединения согласно изобретению, способны заметно снижать секрецию IL-13 T-клетками CD4+, активированными поликлональными антителами анти-CD3 и анти-CD28.
Более того, при введении одного из соединений путем i.p. или i.n. в модели астмы на мышах, авторы настоящего изобретения показали предотвращение аллергических ответов, вызванных антигенной сенсибилизацией и последующей обработкой антигеном в форме аэрозоля. Измеренные иммунологические параметры позволяют предположить относительное снижение уровней Th2-ответов, которое может объяснить механизм, посредством которого соединения согласно изобретению действуют в этой модели астмы. Кроме того, авторы показали, что соединение по изобретению способно снижать частоту возникновения диабета у нетучных диабетических мышей.
Настоящее изобретение относится к способу лечения теплокровных животных, включая человека, страдающих заболеванием или расстройством, связанным со сверхпродукцией воспалительных цитокинов, где способ включает введение пациенту, нуждающемуся в нем, соответствующего количества фармацевтической композиции, содержащей, по меньшей мере, одно иммуномодуляторное соединение следующей общей формулы (I):
где
- m и n независимо друг от друга представляют собой целое число от 1 до 4,
- X и Y каждый обозначает группу или в нейтральном или заряженном состоянии, выбранную из следующих групп:
* карбоксил -COOH,
* дигидроксифосфорилокси -O-P(O)(OH)2,
* гидроксисульфонилокси -O-SO2(OH),
* амино -NH2,
* гидроксил -OH,
* [амино(C1-C10)алкил]аминокарбонил -CONH(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10,
* [дикарбокси(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5,
* {карбокси[амино(C1-C5)алкил]}аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5,
* амино(C1-C15)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 15,
* дигидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-CHOH-CH2OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10,
* гидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10,
* карбокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10,
* оксо(C1-C5)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-CHO, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5,
* [карбокси(C1-C10)алканоил]амино(C1-C15)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH-CO-(CH2)n2-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, и n2 представляет собой целое число от 1 до 15,
- R1 и R2 каждый обозначает ацильную группу, полученную из насыщенной или ненасыщенной карбоновой кислоты с прямой или разветвленной цепью, содержащей от 2 до 18 атомов углерода, которая является незамещенной или имеет от одного до трех заместителей, выбранных из гидроксила, дигидроксифосфорилокси, алкила из 2-18 атомов углерода, алкокси из 2-18 атомов углерода, ацилокси из 2-18 атомов углерода в ацильной группе, амино, ациламино,
- C*1 и C*2 независимо друг от друга являются асимметрическими атомами углерода в конфигурации R, S, или в рацемической форме RS,
или его фармацевтически приемлемая соль, сольват или изомер, не обязательно, в конъюгации или смеси с инертным нетоксичным фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
Изобретение более конкретно относится к способу, как определено выше, где:
* X выбран из следующих групп:
* карбоксил -COOH,
* дигидроксифосфорилокси -O-P(O)(OH)2,
* гидроксисульфонилокси -O-SO2(OH),
* амино -NH2,
* [амино(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CONH(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10,
* [дикарбокси(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5,
* {карбокси[амино(C1-C5)алкил]}аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)- (CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5,
* амино(C1-C15)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 15,
* и Y выбран из следующих групп:
* дигидроксифосфорилокси -O-P(O)(OH)2,
* гидроксисульфонилокси -O-SO2(OH),
* амино -NH2,
* гидроксил -OH,
* амино(C1-C15)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 15,
* дигидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-CHOH-CH2OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10,
* гидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10,
* карбокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10,
* оксо(C1-C5)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-CHO, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5,
* [карбокси(C1-C10)алканоил]амино(C1-C15)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH-CO-(CH2)n2-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, и n2 представляет собой целое число от 1 до 15.
Изобретение более конкретно относится к способу, как определено выше, где:
* X выбран из следующих групп:
* карбоксил -COOH,
* дигидроксифосфорилокси -O-P(O)(OH)2,
* гидроксисульфонилокси -O-SO2(OH),
* амино -NH2,
* [амино(C1-C6)алкил]аминокарбонил -CONH(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 6,
* [дикарбокси(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5,
* {карбокси[амино(C1-C5)алкил]}аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5,
* амино(C2-C12)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 2 до 12,
* и Y выбран из следующих групп:
* дигидроксифосфорилокси -O-P(O)(OH)2,
* гидроксисульфонилокси -O-SO2(OH),
* амино -NH2,
* гидроксил -OH,
* амино(C2-C12)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 2 до 12,
* дигидрокси(C3-C7)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-CHOH-CH2OH, где n1 представляет собой целое число от 3 до 7,
* гидрокси(C2-C6)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-OH, где n1 представляет собой целое число от 2 до 6,
* карбокси(C3-C6)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 3 до 6,
* оксо(C2-C5)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-CHO, где n1 представляет собой целое число от 2 до 5,
* [карбокси(C3-C6)алканоил]амино(C2-C12)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH-CO-(CH2)n2-COOH, где n1 представляет собой целое число от 3 до 6, и n2 представляет собой целое число от 2 до 12.
Изобретение более конкретно относится к способу, как определено выше, где:
* X выбран из следующих групп:
* -СООН,
* -O-P(O)(OH)2,
* -O-SO2(OH)
* -NH2,
* -CO-NH-(CH2)3-NH2 или -CONH-(CH2)6-NH2,
* -CO-NH-CH(COOH)-CH2-COOH,
* -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)4-NH2,
* -O-CO-(CH2)5-NH2,
* и Y выбран из следующих групп:
* -O-P(O)(OH)2,
* -O-SO2(OH)
* -NH2,
* -OH,
* -O-CO-CH2-NH2 (2-аминоэтаноилокси), -O-CO-(CH2)2-NH2 (3-аминопропаноилокси), -O-CO-(CH2)5-NH2 (6-аминогексаноилокси) или -O-CO-(CH2)11-NH2 (12-аминододеканоилокси),
* -O-CO-(CH2)4-CHOH-CH2OH (6,7-дигидроксигептаноилокси),
* -O-CO-(CH2)5-OH (6-гидроксигексаноилокси),
* -O-CO-(CH2)2-COOH (3-карбоксипропаноилокси)
* -O-CO-(CH2)4-CHO (6-оксогексаноилокси),
* -O-CO-(CH2)5-NH-CO-(CH2)2-COOH (3-карбоксипропаноиламиногексаноилокси).
Изобретение более конкретно относится к способу, как определено выше, где R1 и R2 выбраны из:
-СО-СН2-С*Н[О-СО-(СН2)10-СН3]-(СН2)10-СН3, (3(C12O)C14),
-СО-СН2-С*НОН-(СН2)10-СН3, (3(НО)С14),
-СО-СН3, (С2),
-СО-СН2-NH-СО-С*Н[O-СО-(СН2)8-СН3]-(СН2)5-СН3, [2(C10O)C8]NC2),
-CO-C*H[О-CO-(CH2)4-CH3]-(CH2)5-CH3, (2(C6O)C8),
-CO-(CH2)16-CH3, (C18),
-СО-СН2-С*Н[О-СН2-С6Н5]-(СН2)10-СН3, (3(BnO)C14),
-СО-СН2-С*Н[O-Р(O)(ОН)2]-(СН2)10-СН3, (3[(ОН)2-Р(O)О]С14),
C* в упомянутых выше формулах соответствует асимметрическому атому углерода в конфигурации R, S, или в рацемической форме RS.
Изобретение более конкретно относится к способу, как определено выше, где:
- R1 выбран из:
-СО-СН2-С**1Н[O-СО-(СН2)10-СН3]-(СН2)10-СН3, (3(C12O)C14),
-CO-CH2-C**1HOH-(CH2)10-CH3, (3(HO)C14),
-СО-СН3, (С2),
-CO-CH2-NH-CO-C**1H[O-CO-(CH2)8-CH3]-(CH2)5-CH3, ([2(C10O)C8]NC2),
-CO-C**1H[О-CO-(CH2)4-CH3]-(CH2)5-CH3, (2(C6O)C8),
-CO-(CH2)16-CH3, (C18),
- R2 выбран из:
-СО-СН2-С**2Н[O-СО-(СН2)10-СН3]-СН2)10-СН3, (3(C12O)С14),
-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, (3(HO)C14),
-СО-СН2-С**2Н[O-СН2-С6Н5]-(СН2)10-СН3, (3(BnO)C14),
-CO-CH2-C**2H[O-P(O)(OH)2]-(CH2)10-CH3, (3[(OH)2-P(O)O]C14).
C**1 и C**2 в упомянутых выше формулах соответствуют асимметрическим атомам углерода в конфигурации R, S, или в рацемической форме RS.
Изобретение также относится к способу, как определено выше, где вводимое соединение обладает общей формулой (II):
где X, Y, R1, R2 и m являются такими, как определено выше, C*1 находится в конфигурации R, S, или представляет собой рацемат RS, и C*2 находится в конфигурации R.
Изобретение более конкретно относится к способу, как определено выше, где вводимое соединение выбрано из таких формул (II), где:
- X=-O-P(O)(OH)2, Y=-O-P(O)(OH)2, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=2, C*1 находится в конфигурации S, C*2 находится в конфигурации R, C**1 и C**2 находятся в конфигурации R, т.е. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1,10-бис-дигидрофосфат (OM-294-DP (S,R)),
- X = -O-P(O)(OH)2, Y = -O-CO-(CH2)4-CHOH-CH2OH, R1 = -CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2 = -CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m = 2, C*1 находится в конфигурации S, и C*2 находится в конфигурации R, C**1 и C**2 находятся в конфигурации R, т.е. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6,7-дигидроксигептаноат) (OM-197-MP-HD (S,R)),
- X = -COOH, Y = -O-CO-(CH2)4-CHOH-CH2OH, R1 = -CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2 = -CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m = 1, C*1 находится в конфигурации S, и C*2 находится в конфигурации R, C**1 и C**2 находятся в конфигурации R, т.е. N-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоил]-L-аспарагиновая кислота, α-N-{(4R)-5-гидрокси-4-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]пентил}амид-5-O-(6,7-дигидроксигептаноат) (OM-197-MC-HD (S,R)),
- X = -O-P(O)(OH)2, Y = -O-CO-(CH2)5-NH2, R1 = -CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2 = -CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m = 2, C*1 находится в конфигурации S, и C*2 находится в конфигурации R, C**1 и C**2 находятся в конфигурации R, т.е. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6-аминогексаноат) (OM-197-MP-AC (S,R)),
- X = -NH2, Y = -O-P(O)(OH)2, R1 = -CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2 = -CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m = 4, C*1 находится в конфигурации S, и C*2 находится в конфигурации R, C**1 и C**2 находятся в конфигурации R, т.е. (5S,11R)-1-амино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол-12-дигидрофосфат (OM-294-BA-MP (S,R)).
Изобретение также относится к способу, как определено выше, лечения теплокровных животных, включая человека, страдающих заболеванием или расстройством, связанным со сверхпродукцией воспалительных цитокинов или маркеров воспалительного заболевания активированными T-лимфоцитами, моноцитами или антигенпрезентирующими клетками организма, где воспалительные цитокины или маркеры воспалительного заболевания относятся к группе, состоящей из IL-1β, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-9, IL-13, IFN-γ, TNF-α и MCP-1.
Изобретение более конкретно относится к способу, как определено выше, где заболевание выбрано из группы, состоящей из астмы, диабета, атопического дерматита, аллергического ринита, простатита, воспалительного заболевания кишечника и ревматоидного артрита.
Изобретение также более конкретно относится к способу, как определено выше, который заключается во введении терапевтически эффективного количества любого соединения формулы (I) по изобретению, как определено выше, в фармацевтически приемлемом носителе, эксципиенте или композиции, посредством мукозального или парентерального способа введения.
Изобретение также более конкретно относится к способу, как определено выше, который заключается во введении терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) по изобретению, как определено выше, предпочтительно посредством перитонеального, подкожного, перорального, интраназального, подъязычного или аэрозольного способов введения.
Изобретение более конкретно относится к устойчивым к действию желудочного сока фармацевтическим композициям, содержащим терапевтически эффективное количество соединения формулы (I), как определено выше, в сочетании с устойчивым к действию желудочного сока носителем, таким как поверхностно-активные вещества из гидрофильных полоксамеров, таких как полоксамер 407 (лутрол F-127). Коллоидные носители, такие как полимерные наночастицы или микрочастицы, также подходят в качестве композиций для пероральной доставки соединения формулы (I), в которых применяют кишечнорастворимые полимеры, такие как полимеры метакрилата.
В более общепринятом способе применение устойчивых к действию желудочного сока таблеток или капсул, полученных с использованием кишечнорастворимого покрытия, может также являться альтернативой при пероральном способе введения.
Изобретение также более конкретно относится к способу, как определено выше, где необходимые дозировки для человека иммуномодуляторных молекул формулы (I) по изобретению, как определено выше, варьируют от 0,01 до 50 мг/м2.
Изобретение также относится к применению, по меньшей мере, одного соединения формулы (I), как определено выше, для получения лекарственного средства для профилактики или лечения заболевания или расстройства, такого как астма, диабет, атопический дерматит, аллергический ринит, простатит, воспалительное заболевание кишечника и ревматоидный артрит, связанного со сверхпродукцией воспалительных цитокинов или маркеров воспалительного заболевания.
Изобретение также относится к соединениям формулы (I), как определено выше, и лекарственному средству, содержащему указанные соединения в сочетании с физиологически приемлемым носителем.
Соединения формулы (I) по настоящему изобретению, как определено выше, можно получать согласно способу, описанному в WO 00/00462 и WO 01/46127 в связи с получением и применением соединений формулы (I) при лечении форм рака или в качестве иммуноадъювантов.
Изобретение далее подробно описано в следующем описании синтеза соединений OM-294-DP (S,R), OM-197-MP-HD (S,R), OM-197-MC-HD (S,R), OM-197-MP-AC (S,R) и OM-294-BA-MP (S,R), и их биологических свойств.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕР 1
(3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6-аминогексаноат) (= OM-197-MP-AC (S,R)) (схема 1)
1. (2R)-5-(бензилоксикарбониламино)-2-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]-1-(2-тетрагидропиранилокси)пентан (C-1)
К раствору (2R)-5-(бензилоксикарбониламино)-2-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]пентан-1-ола (PCT WO 00146127A1) (2,5 г; 4,39 ммоль) в безводном CH2Cl2 (83 мл) при комнатной температуре и в атмосфере аргона добавляли последовательно 3,4-дигидро-2H-пиран (DHP) (1,4 мл, 15,38 ммоль), затем пиридиний-p-толуолсульфонат (PPTS) (441 мг, 1,75 ммоль). Раствор перемешивали в течение 18 час при комнатной температуре, затем разводили при помощи CH2Cl2 (100 мл), промывали 5% водным NaHCO3, затем H2O. Органическую фазу сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Очисткой флэш-хроматографией на силикагеле (AcOEt/петролейный эфир 4/1) получали соединение C-1 (2,86 г; 100%) в виде белого кристаллического твердого вещества. (Rf = 0,66 в AcOEt/петролейный эфир 4/1; УФ и фосфомолибдат.)
C39H60N2O6. IS/MS: m/z 653,5 ([M+H]+), 675,5 ([M+Na]+). Температура плавления = 84-86°C
2. (2R)-5-амино-2-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]-1-(2-тетрагидропиранилокси)пентан (C-2)
Раствор соединения C-1 (2,5 г; 4,4 ммоль) в EtOH (150 мл), содержащий триэтиламин (4 мл), гидрогенизировали в присутствии 10% Pd на C при комнатной температуре и при атмосферном давлении водорода в течение 3,5 час. Катализатор затем удаляли фильтрованием, промывали этанолом, и фильтрат концентрировали и сушили в условиях высокого вакуума с получением чистого амина C-2 (2,15 г; 96%) в виде аморфного белого твердого вещества. C31H54N2O4. IS/MS: m/z 519,5 ([M+H]+).
3. (S)-α-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-γ-бутиролактон (C-3)
К раствору (R)-3-додеканоилокситетрадекановой кислоты [Bull. Chem. Soc. Jpn 60 (1987), 2205-2214] (2,16 г; 5,1 ммоль) в безводном THF (28 мл) при -15°C и в атмосфере аргона добавляли последовательно N-метилморфолин (0,56 мл; 5,1 ммоль; 1 экв.) и изобутилхлорформиат (657 мкл; 5,1 ммоль; 1 экв.). После 1 час при перемешивании при -15°C добавляли L-гомосеринлактонгидробромид (916 мг; 5,1 ммоль; 1 экв.) в виде раствора в 0,72 М водного NaHCO3 (14 мл, 2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 час при комнатной температуре. Смесь разводили Et2O (130 мл), органическую фазу отделяли и промывали H2O, затем сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Очисткой путем кристаллизации (минимальный объем CH2Cl2 и избыток пентана при 0°C) получали соединение C-3 (2,17 г; 85%) в виде белого твердого вещества. C30H55NO5. IS/MS: m/z 510,5 ([M+H]+), 532,5 ([M+Na]+). Температура плавления = 79-80°C.
4. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]-10-(2-тетрагидропиранил)оксидекан-1-ол (C-4)
К раствору соединения C-2 (638 мг, 1,23 ммоль, 1,3 экв.) в безводном CH2Cl2 (1,5 мл) при 20-21°C добавляли соединение C-3 (483 мг, 0,95 ммоль). Раствор перемешивали в течение 3 суток при 20-21°C; растворитель выпаривали при пониженном давлении. Очисткой флэш-хроматографией на силикагеле (CH2Cl2/ацетон от 5/1 до 1/1) получали спирт C-4 (829 мг, 85%) в виде белого твердого вещества. C61H109N3O9. IS/MS: m/z 1029,0 ([M+H]+), 1051,0 ([M+Na]+). Температура плавления = 81-82°C.
5. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]-10-(2-тетрагидропиранил)оксидекан-1-ол-дибензилфосфат (C-5)
К раствору спирта C-4 (120 мг; 0,12 ммоль) и 1H-тетразола (25 мг; 0,35 ммоль; 3 экв.) в безводном THF (5 мл) при комнатной температуре и в атмосфере аргона добавляли N,N-дибензилдиэтилфосфорамидит (85%, 95 мкл; 0,27 ммоль; 2,3 экв.). После 45 мин при перемешивании реакционную смесь охлаждали до -40°C, затем добавляли раствор mCPBA (57-86%; 75 мг; 0,43 ммоль; 3,7 экв.) в CH2Cl2 (3 мл). После 45 мин при -40°C смесь нагревали, и добавляли насыщенный раствор Na2S2O3 (3 мл), и смесь перемешивали в течение 10 мин. Раствор разводили эфиром, органическую фазу отделяли и промывали насыщенным Na2S2O3 (5x), затем насыщенным NaHCO3 (2x). Органическую фазу сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Очисткой флэш-хроматографией на силикагеле (CH2Cl2/ацетон 4/1, затем 2/1) получали дибензилфосфат C-5 (126 мг; 84%) в виде аморфного твердого вещества.
6. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дибензилфосфат (C-6)
К 1% раствору HCl в метаноле (25 мл) при 0°C добавляли раствор соединения C-5 (700 мг, 0,54 ммоль) в CH2Cl2 (2,5 мл). После 45 мин при перемешивании при 0°C реакционную смесь нейтрализовали 5% водным NaHCO3, разводили при помощи CH2Cl2, затем отделяли органическую фазу. Водную фазу экстрагировали при помощи CH2Cl2 (3x), затем органические фазы объединяли, сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением спирта C-6 (640 мг; 98%).
7. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дибензилфосфат-10-6-бензилоксикарбониламиногексаноат (C-7)
К полученному выше раствору соединения C-6 (640 мг, 0,53 ммоль) и 6-(бензилоксикарбониламино)гексановой кислоты (423 мг, 1,60 ммоль) в безводном CH2Cl2 (25 мл) при 0°C и в атмосфере аргона добавляли последовательно коммерчески доступный 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидгидрохлорид (306 мг, 1,60 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (20 мг, 160 мкмоль). Реакционную смесь затем перемешивали в течение 30 минут при 0°C и затем в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную среду затем промывали водой и раствором 1 Н HCl с последующим разделением слоев. Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и выпаривали. Проведением очистки флэш-хроматографией на силикагеле (элюент CH2Cl2/ацетон 4/1, затем 2/1), получали продукт реакции сочетания C-7 (537 мг; 71%). 13C-ЯМР (62,89 МГц, CDCl3), δ м.д.: 173,18, 171,16, 170,38, 169,60, 156,30, 138,23, 136,50, 135,38, 135,28, 128,42, 128,26, 128,17, 127,79, 127,74, 127,44, 76,48, 71,15, 70,84, 69,47, 69,39, 69,31, 66,25, 65,62, 64,37, 49,78, 47,76, 41,41, 41,34, 40,57, 38,97, 34,22, 34,16, 33,96, 33,57, 32,95, 31,70, 29,15, 28,95, 28,32, 25,87, 25,46, 25,02, 28,80, 24,18, 22,49, 13,94.
8. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6-аминогексаноат) (C-8) (= OM-197-MP-AC (S,R))
Раствор соединения C-7 (500 мг, 0,35 ммоль) в смеси CH2Cl2/этанол 5/2 (70 мл), содержащей уксусную кислоту (10 мл), гидрогенизировали в присутствии Pd на углероде, содержащем 10% Pd, при комнатной температуре и при атмосферном давлении водорода в течение 12-24 часов. Катализатор удаляли фильтрованием. Фильтрат выпаривали до сухого состояния и осадок затем сушили отсасыванием вакуумным насосом с получением C-8 (368 мг, количественный выход). ES/MS: отношение m/z 1047,9 [M+H]+; 1069,8.
ПРИМЕР 2
(3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6,7-дигидроксигептаноат) (= OM-197-MP-HD (S,R)) (схема 2)
1. Бензил-6-гептеноат (C-9)
К раствору 6-гептеновой кислоты (4,71 г, 36,75 ммоль) в AcOEt (80 мл) при 0°C последовательно добавляли триэтиламин (15,3 мл, 110,24 ммоль), бензилбромид (13,1 мл, 110,24 ммоль) и Bu4NI (6,79 г, 18,37 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 час и концентрировали в вакууме. Осадок отбирали в AcOEt, органическую фазу промывали насыщенным водным NaHCO3 и H2O. Органическую фазу сушили над MgSO4 и растворитель удаляли в вакууме. Флэш-хроматографией осадка на силикагеле (н-гептан/EtOAc, 9:1) получили соединение C-9 (6,00 г; 75%) в виде бесцветного масла. 13C-ЯМР (62,89 МГц, CDCl3): 24,42, 28,34, 33,37, 34,13, 66,08, 114,73, 128,19, 128,55, 136,16, 138,37, 173,43.
2. Бензил-6,7-эпоксигептаноат (C-10)
К раствору m-CPBA (2,76 г, 12,29 ммоль) в CH2Cl2 (50 мл) при 0°C медленно добавляли раствор C-9 (1,79 г, 8,19 ммоль) в CH2Cl2 (20 мл). Раствор перемешивали при 0°C в течение 2 час, затем при комнатной температуре в течение 18 час. Раствор разводили с помощью CH2Cl2, и органическую фазу промывали насыщенным водным раствором Na2S2O3 (5x). Органическую фазу сушили над MgSO4 и растворитель удаляли в вакууме. Флэш-хроматографией осадка на силикагеле (н-гептан/EtOAc, 5:1) получили соединение C-10 (1,54 г; 80%) в виде бесцветного масла. 13C-ЯМР (62,89 МГц, CDCl3): 24,60, 25,39, 32,00, 34,02, 46,86, 51,91, 66,04, 128,11, 128,46, 136,01, 173,17.
3. Бензил-6,7-изопропилиденгептаноат (C-11)
К раствору C-10 (1,54 г, 6,59 ммоль) в ацетоне (50 мл) при комнатной температуре добавляли серную кислоту (0,42 мл, 7,9 ммоль). Раствор перемешивали в течение 3 час, разводили диэтиловым эфиром, и органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NaHCO3, органическую фазу сушили над MgSO4 и растворитель удаляли в вакууме с получением C-11 (1,73 г) в виде бледно-желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
4. 6,7-изопропилиденгептановая кислота (C-12)
Раствор соединения C-11 (1,53 г) в EtOAc (20 мл), содержащий Et3N (3,65 мл, 26,16 ммоль), гидрогенизировали в присутствии Pd на углероде, содержащем 10% Pd, при комнатной температуре и при атмосферном давлении водорода в течение 3 час. Катализатор удаляли фильтрованием и фильтрат выпаривали до сухого состояния. Флэш-хроматографией осадка на силикагеле (CH2Cl2/MeOH, 5:1) получили соединение C-12 (0,63 г; 54% с 2 стадий) в виде бесцветного масла.
5. (3S, 9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дибензилфосфат-10-(6,7-изопропилиденгептаноат) (C-13)
К раствору полученного выше соединения C-6 (248 мг, 0,21 ммоль) и соединения 6,7-изопропилиденгептановой кислоты (C-12) (92 мг, 0,45 ммоль) в безводном CH2Cl2 (5 мл) при 0°C и в атмосфере аргона добавляли последовательно коммерчески доступные 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидгидрохлорид (91 мг, 0,47 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (каталитический). Реакционную смесь затем перемешивали в течение 30 минут при 0°C и затем в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную среду затем промывали водой и раствором 1 Н HCl с последующим разделением слоев. Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и выпаривали. Проведением очистки флэш-хроматографией на силикагеле (CH2Cl2/MeOH, 99:1) получали продукт реакции сочетания C-13 (240 мг; 83%). ES/MS: m/z 1390 [M+H]+; 1411 [M+Na]+.
6. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6,7-дигидроксигептаноат) (C-14) (= OM-197-MP-HD (S,R))
Раствор соединения C-13 (180 мг, 0,13 ммоль) в смеси CH2Cl2/этанол 5/2 (21 мл), содержащей уксусную кислоту (3 мл), гидрогенизировали в присутствии Pd на углероде, содержащем 10% Pd, при комнатной температуре и при атмосферном давлении водорода в течение 12-36 часов. Катализатор удаляли фильтрованием. Фильтрат выпаривали до сухого состояния и осадок затем сушили отсасыванием вакуумным насосом с получением C-14 (139 мг, количественный выход). ES/MS: m/z 1079 [M+H]+; 1101 [M+Na]+.
ПРИМЕР 3
(3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1,10-бис-дигидрофосфат (= OM-294-DP (S,R)) (схема 3)
1. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол (C-15)
К раствору (2R)-5-амино-2-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]пентан-1-ола (PCT WO 00146127A1) (8 г, 18,4 ммоль) в безводном CH2Cl2 (60 мл) при 25°C добавляли соединение C-3 (9 г, 17,5 ммоль) в безводном CH2Cl2 (28 мл). Раствор перемешивали в течение 3 суток при 20-21°C. Суспензию разводили при помощи CH2Cl2 (66 мл) и нагревали до 30°C с получением прозрачного раствора. Ацетонитрил (320 мл) медленно добавляли к раствору. Раствор охлаждали до 20°C и перемешивали в течение 2 час. Осадок фильтровали, промывали ацетонитрилом и сушили под действием вакуума, получая C-15 (13,7 г, 83%) в виде белого твердого вещества. Температура плавления = 103°C.
2. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1,10-бис-дибензилфосфат (C-16)
К раствору C-15 (1,02 г; 1,08 ммоль) и 1H-тетразола (454 мг; 6,48 ммоль; 6 экв.) в безводном THF (46 мл) при комнатной температуре и в атмосфере аргона добавляли N,N-дибензилдиэтилфосфорамидит (85%, 1,50 мл; 4,97 ммоль; 4,6 экв.). После 30 мин при перемешивании реакционную смесь охлаждали до -20°C, затем добавляли раствор mCPBA (57-86%; 1,32 г; 7,67 ммоль; 7,4 экв.) в CH2Cl2 (30 мл). После 45 мин при -20°C раствор нагревали до 0°C и добавляли насыщенный раствор Na2S2O3 (25 мл), и смесь перемешивали в течение 10 мин. Раствор разводили эфиром, органическую фазу отделяли и промывали насыщенным Na2S2O3 (5x), затем насыщенным NaHCO3 (2x). Органическую фазу сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Очисткой флэш-хроматографией на силикагеле (CH2Cl2/ацетон 4/1, затем 3/1) получали C-16 (1,38 г; 87%) в виде бесцветного масла.
3. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1,10-бис-дигидрофосфат (C-17) (= OM-294-DP (S,R))
Раствор соединения C-16 (2,7 г, 1,84 ммоль) в изопропаноле (150 мл) гидрогенизировали над 10% Pd на C (320 мг) при комнатной температуре и при атмосферном давлении водорода в течение 3 часов. Катализатор удаляли фильтрованием через миллипоровую мембрану. Фильтрат концентрировали и сушили в условиях высокого вакуума с получением C-17 (1,8 г; 98%) в виде аморфного твердого вещества.
ПРИМЕР 4
N-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-L-аспарагиновая кислота, α-N-{(4R)-5-гидрокси-4-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]пентил}амид-5-O-(6,7-дигидроксигептаноат) (=OM-197-MC-HD (S,R)) (схема 4)
1. N-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-L-аспарагиновая кислота, α-N-{(4R)-5-гидрокси-4-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]пентил}амид-β-бензиловый эфир, 5-O-(6,7-изопропилиденгептаноат) (C-18)
К раствору соединения N-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-L-аспарагиновой кислоты, α-N-{(4R)-5-гидрокси-4-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]пентил}амид-β-бензилового эфира (PCT WO 00146127A1) (1,14 г, 1,09 ммоль) и соединения 6,7-изопропилиденгептановой кислоты (C-12) (487 мг, 2,48 ммоль) в безводном CH2Cl2 (30 мл) при 0°C и в атмосфере аргона добавляли последовательно коммерчески доступные 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидгидрохлорид (485 мг, 2,53 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (43 мг, 0,35 ммоль). Реакционную смесь затем перемешивали в течение 30 минут при 0°C и затем в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную среду затем промывали водой и раствором 1 Н HCl с последующим разделением слоев. Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и выпаривали. Проведением очистки флэш-хроматографией на силикагеле (CH2Cl2/ацетон, 9:1) получали продукт реакции сочетания C-18 (1,20 г; 76%) в виде белого твердого вещества. ES/MS: m/z 1255 [M+Na]+.
2. N-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-L-аспарагиновая кислота, α-N-{(4R)-5-гидрокси-4-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]пентил}амид-5-O-(6,7-дигидроксигептаноат) (C-19) (= OM-197-MC-HD (S,R))
Раствор соединения C-18 (1,20 г, 0,97 ммоль) в смеси CH2Cl2/этанол 2/1 (50 мл), содержащей уксусную кислоту (5 мл), гидрогенизировали в присутствии Pd на углероде, содержащем 10% Pd, при комнатной температуре и при атмосферном давлении водорода в течение 12-36 часов. Катализатор удаляли фильтрованием. Фильтрат выпаривали до сухого состояния и осадок затем сушили отсасыванием вакуумным насосом с получением C-19 (1 г, количественный выход). ES/MS: m/z 1012 [M+H]+; 1034 [M+Na]+.
ПРИМЕР 5
(5S,11R)-1-амино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол-12-дигидрофосфат (= OM-294-BA-MP (S,R)) (схема 5)
1. Nα-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоил]-Nε-бензилоксикарбонил-L-лизин (C-20)
К раствору (R)-3-додеканоилокситетрадекановой кислоты P-109 [Bull. Chem. Soc. Jpn 60 (1987), 2205-2214] (153 мг; 0,36 ммоль) в безводном THF (4 мл) при -15°C и в атмосфере аргона добавляли последовательно N-метилморфолин (40 мкл; 0,36 ммоль; 1 экв.) и изобутилхлорформиат (47 мкл; 0,36 ммоль; 1экв.). После 30 мин при перемешивании при -15°C добавляли раствор коммерчески доступного H-L-лизина(Z)-OH (100 мг; 0,36 ммоль; 1 экв.) в CH3CN/H2O (3,5/1 (4,5 мл), содержащей Et3N (0,16 мл)). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 час при комнатной температуре. Органический растворитель затем выпаривали, и водный слой охлаждали до 0°C, подкисляли 10% водным раствором лимонной кислоты до pH=3 и экстрагировали посредством AcOEt (3x). Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и выпаривали. Проведением очистки флэш-хроматографией на силикагеле (элюент петролейный эфир/AcOEt 1/1, содержащий 0,25% уксусной кислоты) с последующим выпариванием толуола получали C-20 (172 мг; 70%) в виде белого кристаллического твердого вещества. MS: (IS+) m/z 690,0 [M+H]+, 707,0 [M+NH4]+, 712,0 [M+Na]+, 727,5 [M+K]+. 13C-ЯМР (62,89 МГц, CDCl3), δ м.д.: 174,90, 173,73, 170,66, 156,98, 136,53, 128,57, 128,17, 128,05, 71,27, 66,79, 52,24, 41,32, 40,47, 34,59, 34,24, 31,99, 31,45, 29,72, 29,43, 29,25, 25,29, 25,07, 22,76, 22,27, 14,19.
2. (5S,11R)-1-бензилоксикарбониламино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол (C-21)
К раствору C-20 (150 мг; 0,22 ммоль) и (2R)-5-амино-2-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]пентан-1-ола WZ-10b (PCT WO 00146127A1) (95 мг; 0,22 ммоль; 1,0 экв.) в безводном CH2Cl2 (3 мл) при 0°C добавляли коммерчески доступный HOAt (1-гидрокси-7-азабензотриазол) (36 мг, 0,26 ммоль, 1,2 экв.) и коммерчески доступный N,N'-диизопропилкарбодиимид (41 мкл, 0,22 ммоль, 1,2 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при 0°C и затем в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь последовательно промывали водой, 1 Н раствором HCl и насыщенным раствором NaHCO3 с последующим разделением слоев. Органический слой сушили над MgSO4, фильтровали и выпаривали. Проведением очистки флэш-хроматографией на силикагеле (элюент CH2Cl2/ацетон 3/1) получали C-21 (165 мг; 68%) в виде белого кристаллического твердого вещества. MS: (IS+) m/z 1105,8 [M+H]+, 1128,0 [M+Na]+, 13C-ЯМР (62,89 МГц, CDCl3), δ м.д.: 173,56, 172,20, 171,87, 170,23, 156,82, 138,32, 136,69, 128,53, 128,47, 128,09, 128,00, 127,91, 127,82, 76,77, 71,48, 71,15, 66,59, 64,77, 53,1, 51,39, 41,71, 41,63, 40,46, 39,45, 34,57, 34,51, 34,12, 31,97, 29,70, 29,51, 29,41, 29,25, 28,69, 25,38, 25,29, 25,19, 25,09, 22,74, 22,50, 14,18.
3. (5S,11R)-1-бензилоксикарбониламино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-бензилокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол-12-дибензилфосфат (C-22)
К раствору C-21 (150 мг; 0,14 ммоль) и 1H-тетразола (29 мг; 0,41 ммоль; 3 экв.) в безводном THF (8 мл) при комнатной температуре и в атмосфере аргона добавляли N,N-дибензилдиэтилфосфорамидит (85%, 110 мкл; 0,31 ммоль; 2,3 экв.). После 30 мин при перемешивании реакционную смесь охлаждали до -20°C, затем добавляли раствор mCPBA (57-86%; 87 г; 0,50 ммоль; 3,7 экв.) в CH2Cl2 (6 мл). После 45 мин при -20°C раствор нагревали до 0°C и добавляли насыщенный раствор Na2S2O3 (5 мл), смесь перемешивали в течение 10 мин. Раствор разводили эфиром, органическую фазу отделяли и промывали насыщенным Na2S2O3 (5x), затем насыщенным NaHCO3 (2x). Органическую фазу сушили над MgSO4, фильтровали и концентрировали. Очисткой флэш-хроматографией на силикагеле (CH2Cl2/ацетон 4/1, затем 2/1) получали C-22 (149 мг; 81%) в виде аморфного твердого вещества. MS: (IS+) m/z 1366,0 [M+H]+, 1383,5 [M+NH4]+, 1388,5 [M+Na]+, 1088,0 [M-(BnO)2OPOH)+H]+, 13C-ЯМР (62,89 МГц, CDCl3), δ м.д.: 173,51, 171,77, 171,27, 169,95, 156,67, 138,32, 136,69, 135,66 (d), 135,55 (d), 128,69, 128,51, 128,43, 128,03, 127,77, 127,69, 76,49, 71,28, 71,20, 69,66 (d), 69,58 (d), 68,72 (d), 66,51, 52,82, 48,62 (d), 41,76, 41,46, 40,46, 39,01, 34,54, 34,06, 31,96, 29,68, 29,49, 29,39, 29,22, 27,95, 25,29, 25,18, 25,05, 22,73, 22,45, 14,17.
4. (5S,11R)-1-амино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол-12-дигидроофосфат (C-23) (= OM-294-BA-MP (S,R))
Раствор соединения C-22 (130 мг, 0,095 ммоль) в смеси CH2Cl2/этанол 3/1 (20 мл), содержащей уксусную кислоту (3 мл), гидрогенизировали в присутствии Pd на углероде, содержащем 10% Pd, при комнатной температуре и при атмосферном давлении водорода в течение 36 часов. Катализатор удаляли фильтрованием. Фильтрат выпаривали до сухого состояния и осадок затем сушили отсасыванием вакуумным насосом с получением C-23 (84 мг, 91%). MS: (IS+) m/z 962,0 [M+H]+, 984,0 [M+Na]+.
Биологическая активность соединений согласно изобретению
ПРИМЕР 6
Регуляторный эффект in vitro OM-197-MP-AC и OM-294-DP на индуцированные LPS воспалительные (IL-12 и TNF-α) и противовоспалительные (IL-10) цитокины на клетках DC мышей
Протокол
Клетки костного мозга выделяли и культивировали как описано ниже.
Бедренные и большеберцовые кости от двух самцов C57BL/7 в возрасте 6 недель (Charles River Laboratories, Франция) выделяли, очищали от мышц и сухожилий, и дезинфицировали 70% этанолом. Оба конца каждой кости отрезали, и костный мозг вымывали посредством HBSS (Gibco BRL) с использованием шприца с иглой 26 калибра. Полученную суспензию клеток центрифугировали в течение 5 мин при 500 g и промывали в HBSS. Клетки ресуспендировали из расчета 3×105 клеток/мл в RPMI-1640 (Gibco BRL) с добавлением 2 мМ L-глутамина (Sigma), 100 Ед/мл пенициллина (Sigma), 100 мкг/мл стрептомицина (Sigma), 50 мкМ β-меркаптоэтанола (Sigma), 10% инактивированной нагреванием FCS (Sigma) и 15 нг/мл мышиного rGM-CSF (R&D).
Для получения дендритных клеток (DC) костномозгового (BM) происхождения BM-лейкоциты культивировали в 100-мм бактериологических чашках Петри (Falcon 1029) в течение 8 суток при 37°C в 5% CO2. На 0 сутки 10 мл суспензии клеток высевали на чашку. На 3 сутки другие 10 мл свежеприготовленной среды добавляли к каждой чашке, и на 6 сутки 9 мл верхней части среды тщательно удаляли с каждой чашки и заменяли 10 мл свежей среды.
Неприкрепившиеся клетки из 8-суточных культур BM-клеток собирали, центрифугировали в течение 5 мин при 500 g и ресуспендировали из расчета 1,25×106 клеток/мл в обогащенной RPMI, содержащей 10 нг/мл GM-CSF. Клетки затем высевали в 24-луночные планшеты для культивирования тканей (1×106 клеток/лунка) и инкубировали в течение 1 час 30 мин при 37°C в 5% CO2 в отсутствии или присутствии OM-294-DP или OM-197-MP-AC (0,01-100 мкг/мл/200 мкл/лунка). Затем добавляли LPS (E. coli 026:B6, Sigma) из расчета 1 мкг/мл и далее планшеты инкубировали. После инкубации 20 час супернатанты собирали для анализа на цитокины.
Концентрации IL-12p70, IL-10 и TNF-α в супернатантах культур DC измеряли с помощью ELISA с использованием соответствующих пар Ab OptEIA от BD Pharmingen. Хемилюминесцентный субстрат для пероксидазы Supersignal ELISA Pico (BD Pharmingen) использовали для детекции с помощью люминометрии (многоканальный анализатор Wallac 1420 Victor-2). Анализы осуществляли согласно инструкциям производителя.
Результаты
a) Эффект OM-197-MP-AC и OM-294-DP на индуцированную с помощью LPS продукцию IL-12 и IL-10.
Результаты по индуцированной посредством LPS продукции IL-12 и IL-10 представлены на фиг.1.
b) Эффект OM-197-MP-AC и OM-294-DP на индуцированную посредством LPS продукцию TNF-α.
Результаты по индуцированной посредством LPS продукции TNF-α представлены на фиг.2.
Заключение
Вышеупомянутые результаты ясно показывают, что как OM-197-MP-AC, так и OM-294-DP снижают индуцированную посредством LPS продукцию воспалительных цитокинов (IL-12 и TNF-α), и, в разительном противоречии, повышают продукцию анти-воспалительного цитокина IL-10, позволяя предположить, что соединения по изобретению могут действовать в качестве терапевтических противовоспалительных средств.
ПРИМЕР 7
Непосредственные эффекты ряда из четырех триацилированных производных на T-клетки CD4+ человека
Протокол
Ряд из четырех соединений по настоящему изобретению (OM-197-MP-AC, OM-197-MC-HD, OM-294-BA-MP, OM-197-MP-HD) непосредственно тестировали, как суммировано ниже:
Наивные T-клетки CD4+ выделяли магнитным способом из крови здорового донора (лейкоцитарная пленка). Клетки стимулировали в присутствии или в отсутствии возрастающих доз триацильных производных (0,02, 0,2, 2 и 20 мкг/мл) с использованием адсорбированного на планшете анти-CD3 (5 мкг/мл) и растворимого анти-CD28 (1 мкг/мл). Спустя 6 суток уровни цитокинов (IFN-γ и IL-13) тестировали в супернатантах культур с использованием ELISA.
Результаты
Результаты по продукции цитокинов представлены на фиг.3. Пролиферацию T-клеток также тестировали, но соединения по изобретению не оказывали на нее влияния.
Заключение
Продукция IL-13 (белые гистограммы) T-клетками CD4+ понижалась в присутствии OM-197-MP-AC, OM-197-MC-HD, OM-294-BA-MP, OM-197-MP-HD, в то время как продукция IFN-γ (серые гистограммы) и пролиферация T-клеток оставались без изменений. Это означает сдвиг в сторону Th1-ответа в присутствии четырех триацилированных тестированных молекул.
ПРИМЕР 8
Эффект OM-197-MP-AC на модели астмы
Так как в предыдущем примере показано, что триацилированные тестированные молекулы снижали продукцию цитокина, вероятно, принимающего участие в патологии астмы (т.е. IL-13), авторы настоящего изобретения поставили здесь цель исследовать in vivo эффекты члена ряда (OM-197-MP-AC) в модуляции TH2-дифференцировки наивных T-хелперных клеток и последующем развитии аллергической астмы.
В настоящем исследовании авторы настоящего изобретения сначала изучали (часть a) эффект данного OM-197-MP-AC в ходе фазы сенсибилизации при развитии индуцированной посредством LACK аллергической астмы, и затем эффект молекулы тестировали терапевтически (часть b).
Часть a) «Профилактическое» лечение астмы
Протокол
Мыши и индукция аллергической астмы:
Самок мышей Balb/c ByJ в возрасте 6 недель приобретали в Centre d'Elevage Janvier (CERJ, Le Genest-St-lsle, Франция). Всех мышей подвергали на 0 и 7 сутки сенсибилизации путем 2 инъекций i.p. 10 мкг белка LACK, осажденного в 2 мг квасцов (PerBio Science France SAS, Brebieres, Франция).
Животных разделяли на группы, как указано далее:
- сенсибилизированные LACK и аллергизированные солевым раствором мыши (4 мыши);
- сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (8 мышей);
- обработанные OM-197-MP-AC, сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (8 мышей).
Мышей из третьей группы обрабатывали внутрибрюшинно OM-197-MP-AC из расчета 1 мг/кг (20 мкг на мышь). Мышей обрабатывали на -1, 1, 2, 3, 6, 8, 9, 10 и 11 сутки.
С 16 сутки по 21 сутки мышей групп B и C подвергали ежедневной 20 минутной аэрозольной аллергизации раствором LACK (0,15%), в то время как мыши из группы с солевым раствором получали в качестве контроля солевой раствор.
Гиперчувствительность дыхательных путей (AHR)
AHR измеряли у всех мышей на первые сутки после последней аллергизации антигеном посредством плетизмографии всего организма (Emka) в ответ на возрастающие концентрации (6-25 мг/мл) вдыхаемого метахолина (ацетилметилхолин, Sigma). AHR выражали в виде усовершенствованного показателя паузы (Penh, см. фиг.4), безразмерного параметра, полностью соответствующего вычисленной величине эластичности и сопротивления дыхательных путей, которая коррелирует с измерением сопротивления дыхательных путей, импеданса и внутриплеврального давления.
Реагенты
- Рекомбинантный белок LACK продуцировали в E. coli и очищали, как описано в Mougneau et al., 1995.
- OM-197-MP-AC, партия DL040906 в концентрации 0,98 мг/мл, получали от OM PHARMA.
- mAb анти-IgE EM-95 любезно предоставлены DNAX (Palo Alto, CA, США).
- Метахолин (ацетилметилхолин) приобретали у Sigma (Saint Quentin Fallavier, Франция).
- Наборы бус для CBA (Flex set) приобретали у BD Biosciences.
Титры антител:
У всех мышей забирали кровь путем сердечной пункции на первые сутки после последней обработки аэрозолем. Суммарный IgE количественно определяли с помощью ELISA с использованием крысиных mAb EM-95 анти-IgE в качестве адсорбированных антител и крысиных mAb анти-IgE, конъюгированных с биотином, в качестве вторичных антител, как описано (Julia et al., 2002).
Анализ клеток из бронхоальвеолярного смыва (BAL) (процентная доля эозинофилов)
У индивидуальных мышей забирали кровь и вставляли канюлю в трахею. Легкие промывали 3 раза 1 мл нагретого PBS. Клетки промывали PBS, ресуспендировали в 300 мкл и определяли их количество с использованием камеры Burker-Turk. Для дифференцированных определений количества клеток из BAL получали препараты цитоцентрифугированием и окрашивали по Wright/Giemsa. Соответствующие количества нейтрофилов, эозинофилов и других мононуклеарных клеток определяли исследованием с помощью микроскопа. Здесь представлена только процентная доля эозинофилов (фиг.5).
Анализ содержания цитокина в легких
Для исследования содержания цитокина в легких обработанных и необработанных животных получали белковые экстракты из легких сенсибилизированных LACK и аллергизированных PBS мышей wt (группа «контроль»), сенсибилизированных и аллергизированных LACK мышей wt (группа «астма»), обработанных OM-197-MP-AC мышей wt (группа «OM-197»). Содержания IL-4, IL-5, IL-13 анализировали множественным анализом с использованием FACSArray.
Результаты
Измерение гиперчувствительности дыхательных путей (AHR):
Обработанных или необработанных сенсибилизированных LACK мышей (см. выше) затем подвергали аллергизации LACK в форме аэрозоля ежедневно в течение пяти последовательных суток. На первые сутки после последнего воздействия аэрозоля AHR измеряли плетизмографией всего организма в ответ на возрастающие концентрации метахолина в виде аэрозоля.
Как ожидалось, у сенсибилизированных LACK и аллергизированных солевым раствором мышей не развивалась AHR при воздействии метахолина, в то время как у необработанных сенсибилизированных и аллергизированных LACK мышей развивалась тяжелая AHR, что отражено в высоких величинах Penh (фиг.4). В резком контрасте с этим, у сенсибилизированных и аллергизированных LACK мышей, которых обрабатывали OM-197-MP-AC, не развивалась AHR.
Заключение
Гиперчувствительность дыхательных путей при воздействии на мышей антигеном в виде аэрозоля, измеренная в присутствии метахолина, оказалась пониженной до уровней контроля (солевой раствор) при обработке OM-197-MP-AC.
Характеристика процентной доли эозинофилов в бронхоальвеолярных смывах (BAL):
Результаты представлены на фиг.5.
Сенсибилизированные LACK мыши, которые получали солевой раствор в виде аэрозоля, не содержали эозинофилов в BAL, в то время как сенсибилизированные LACK мыши, которых подвергали аллергизации LACK в виде аэрозоля, содержали. Кроме того, обработанные OM-197-MP-AC мыши содержали в 3 раза меньше эозинофилов, чем необработанные контрольные мыши (фиг.5).
Заключение
Обработки OM-197-MP-AC значительно снижают количество эозинофилов в BAL.
Измерение иммуноглобулинов (Ig) в сыворотках:
Результаты для IgE представлены на фиг.6:
Титры суммарного IgE (фиг.6) значительно снижались, если мышей обрабатывали соединением OM-197-MP-AC.
Заключение
Таким образом, в сыворотках мышей, обработанных OM-197-MP-AC, содержалось в 2 раза меньше суммарного IgE по сравнению с сыворотками, необработанных сенсибилизированных аллергизированных мышей (т.е. «астматических животных»).
Измерение цитокинов в легких
Для дальнейшего исследования эффектов профилактической обработки OM-197-MP-AC на аллергическое воспаление дыхательных путей, белки экстрагировали из легких как обработанных, так и необработанных мышей WT, и цитокины, о которых известно, что они играют важную роль при астме (IL-4, IL-5 и IL-13), количественно определяли множественным анализом с использованием наборов бус для CBA и FACSarray. Данные нормировали на суммарное количество белков и выражали в виде пг цитокина на мг легочного белка.
В то время как количества IL-4, IL-13 и IL-5 находились ниже предела детекции в легких сенсибилизированных LACK и аллергизированных PBS мышей (см. «контроль» на фиг.7), количества этих цитокинов значительно повышались при аллергизации LACK (см. «астма» на фиг.7). В отличие от этого, в легких сенсибилизированных и аллергизированных LACK мышей, которых обрабатывали OM-197-MP-AC, содержалось в 5 раз меньше IL-4 (p=0,0003,), в 5 раз меньше IL-5 (p=0,0003) и в 3,5 раза меньше IL-13 (p=0,003), чем у необработанных мышей (см. «OM-197» на фиг.7).
Кроме IL-4, IL-5 и IL-13 другие цитокины количественно определяли множественным анализом с использованием набора бус для CBA и FACSarray. Основные результаты представлены ниже. Также обнаружено, что количество IFN-γ повышается в легких сенсибилизированных и аллергизированных LACK мышей по сравнению с сенсибилизированными LACK и аллергизированными PBS мышами. В легких обработанных OM-197-MP-AC мышей содержалось в 2 раза меньше IFN-γ, чем у необработанных мышей. KC представляет собой функциональный гомологичный хемокин IL-8 или CXCL8 человека и связывается с CXCR2, который экспрессируется как на нейтрофилах, так и на эозинофилах. Действительно, KC может обеспечить мобилизацию гранулоцитов в воспаленных тканях. В то время как KC присутствовал в очень низком количестве в легких сенсибилизированных LACK и аллергизированных PBS мышей, его количество сильно повышалось при аллергизации LACK в виде аэрозоля. Количество продуцируемого в легких KC наполовину снижалось при лечении OM-197-MP-AC.
Провоспалительный цитокин, IL-6, обнаружен в легких сенсибилизированных LACK и аллергизированных PBS мышей, и незначительно повышался при воздействии LACK в виде аэрозоля. В легких обработанных OM-197-MP-AC мышей содержалось в 1,5 раза меньше IL-6, чем у необработанных мышей. Обнаружено, что хемокин MCP-1 экспрессируется в легких сенсибилизированных и аллергизированных PBS мышей, и его количество незначительно повышено при аллергизации. В легких мышей, которых обрабатывали OM-197-MP-AC, содержалось в 1,8 раза меньше MCP-1, чем у необработанных животных.
Количества TNF-α в легких обработанных и необработанных мышей различались незначительно.
IL-9 не детектировали ни в одном из образцов.
Взятые вместе, эти данные ясно указывают на то, что профилактическая обработка OM-197-MP-AC вызывает не только сильное снижение цитокинов TH2, которые играют существенную роль в вызывании аллергического воспаления дыхательных путей и AHR, но также снижение других цитокинов и хемокинов, которые принимают участие в воспалении легких и в мобилизации воспалительных эффекторных клеток, таких как эозинофилы.
Общее заключение к примеру 8a
В этом исследовании ясно показана защитная роль одной из молекул по изобретению, OM-197-MP-AC, в развитии аллергической астмы. Лечение OM-197-MP-AC, которое начали непосредственно перед фазой сенсибилизации, ингибировало развитие AHR и значительно снижало количество эозинофилов в BAL. Кроме того, количества суммарного IgE снижались в сыворотках мышей, которых обрабатывали OM-197-MP-AC.
Эти данные также говорят о том, что лечение OM-197-MP-AC преимущественно нарушает продукцию цитокинов, принимающих участие в развитии астмы, и секрецию других воспалительных цитокинов. Один из возможных механизмов может состоять в том, что OM-197-MP-AC может индуцировать специфический иммуносупрессивный ответ, который может контролировать развитие TH2 и последующее воспаление дыхательных путей.
Часть b) «Терапевтическое» лечение астмы
Протокол
Основные отличия по сравнению с предыдущей (частью a) протокола
- Мышей обрабатывали OM-197-MP-AC i.p. только на 15, 17 и 19 сутки (т.е., по меньшей мере, 1 неделю после второй сенсибилизации) в дозировке 1 мг/кг (20 мкг на мышь).
- Легочные цитокины, измеряемые множественным анализом с использованием FACSArray, представляли собой IL-4, IL-5, IL-13, IFN-γ и IL-10.
Результаты
Суммарное количество клеток и эозинофилов в BAL
Спустя двое суток после последнего воздействия аэрозоля, мышей забивали и клетки выделяли из BAL. Как ожидалось, у необработанных сенсибилизированных LACK мышей произошел значительный приток клеток в BAL при аллергизации посредством LACK (20-кратный избыток клеток по сравнению с аллергизированными PBS мышами) (фиг.8). Очень интересно то, что мобилизация клеток в BAL снижалась на 90% при терапевтических введениях OM-197-MP-AC (p < 0,01) (фигура 9), со снижением количества эозинофилов в 40-45 раз по сравнению с необработанными мышами.
Заключение
OM-197-MP-AC, вводимый терапевтически три раза, способен значительно снижать экстравазацию легочных клеток и количество эозинофилов в BAL.
Измерения легочных цитокинов
Так как количество эозинофилов в дыхательных путях значительно понижалось при терапевтическом лечении OM-197-MP-AC, авторы настоящего изобретения решили проанализировать содержание IL-4, IL-5, IL-13, IL-10 и IFN-γ в легких (фиг.10). Действительно, при сравнении с легкими необработанных мышей, количества TH2-цитокинов (IL-4, IL-5 и IL-13) значительно понижались в легких обработанных мышей. Уровни IL-4 понижались на 90%, количества IL-13 на 85% и количества IL-5 на 70% при лечении OM-197-MP-AC (от p<0,00005 до 0,005).
Заключение
Очевидно, что OM-197-MP-AC при терапевтическом введении три раза, способен снижать уровень TH2-цитокинов. Это происходит не вследствие сдвига в сторону Th1-цитокинов, так как уровни IFN-γ оставались низкими (от 1,5 до 3 пг/мл) для всех мышей и понижались у обработанных мышей. Количества IL-10, который является как TH2-, так и иммуносупрессорным цитокином, оказались низкими, и незначительно повышались при лечении.
Измерение уровней IgE
Для того чтобы дополнительно охарактеризовать иммунный статус мышей после терапевтического лечения OM-197-MP-AC, авторы настоящего изобретения анализировали специфичный в отношении LACK IgE в сыворотках у обработанных мышей и у необработанных мышей с помощью ELISA. В то время как уровни специфичного в отношении LACK IgE повышались в 7 раз при воздействии LACK в виде аэрозоля, в сыворотках обработанных OM-197-MP-AC мышей содержалось в 2 раза меньше (p<0,05) специфичного в отношении LACK IgE по сравнению с необработанными аллергизированными LACK мышами.
Заключение
Очевидно, что OM-197-MP-AC при терапевтическом введении снижал уровни специфичного в отношении LACK IgE в сыворотке.
Общее заключение к примеру 8b
Авторы настоящего изобретения в данной работе показали, что продукт по изобретению, OM-197-MP-AC, при терапевтическом введении отчетливо снижает количество эозинофилов, а также уровень TH2-цитокинов, таких как IL-4, IL-5 и IL-13, и также уровень специфичного в отношении аллергена IgE.
Общее заключение к примеру 8
Очевидно, что OM-197-MP-AC оказался активным как профилактически, так и терапевтически in vivo в модели астмы, как следует из его эффектов на многие связанные с астмой показатели.
ПРИМЕР 9
Эффект OM-197-MP-AC при других способах введения в модели астмы на мышах
Представленные в примере 8 результаты говорят о том, что OM-197-MP-AC эффективен в профилактике аллергических ответов в модели астмы на мышах с использованием LACK при введении путем i.p. Таким образом, на этой модели исследовали другие способы введения, более совместимые с применением у человека (интраназальный, внутрижелудочный, подкожный).
Протокол
43 самки мышей BALB/c ByJ в возрасте 6 недель приобретали в Centre d'Elevage Janvier (CERJ, Le Genest-St-lsle, Франция). Всех мышей подвергали сенсибилизации на 1 и 8 сутки (Julia et al., 2002) путем 2 инъекций i.p. 10 мкг белка LACK, осажденного в 2 мг квасцов (PerBio Science France SAS, Brebieres, Франция).
OM-197-MP-AC вводили с 0 суток по 12 сутки, как описано ниже. Всех мышей подвергали аллергизации с 16 суток по 20 сутки или раствором LACK (0,15%), или PBS, как указано ниже.
Экспериментальные группы представляли собой следующее:
-Группа A: необработанные, сенсибилизированные LACK и аллергизированные PBS мыши (3 мыши);
-Группа B: необработанные, сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (7 мышей);
-Группа C: обработанные OM-197-MP-AC i.p., сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (5 мышей);
-Группа D: обработанные OM-197-MP-AC i.g., сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (7 мышей);
-Группа E: обработанные OM-197-MP-AC s.c., сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (7 мышей);
-Группа F: обработанные OM-197-MP-AC i.n., сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (7 мышей);
-Группа G: обработанные OM-197-MP-AC в виде аэрозоля, сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (7 мышей).
Мышей групп C, D, E и G обрабатывали на 0, 2, 3, 4, 7, 9, 10, 11 сутки, в то время как мышей группы F (интраназальный способ) обрабатывали только на 0, 4, 7 и 11 сутки.
Мышей групп C и E обрабатывали i.p. и s.c., соответственно, OM-197-MP-AC из расчета 1 мг/кг (20 мкг на мышь).
Мышей группы D обрабатывали внутрижелудочно OM-197-MP-AC из расчета 50 мг/кг (1 мг на мышь).
Мышей группы F обрабатывали i.n. 20 мкг OM-197-MP-AC в объеме 20 мкл (OM-197-MP-AC из расчета 2 мг/мл, 10 мкл/ноздря).
Мышей группы G обрабатывали аэрозолями раствора OM-197-MP-AC из расчета 0,2% (2 мг/мл) в течение 10 минут.
Реагенты
- Рекомбинантный белок LACK получали в E. coli и очищали, как описано (Mougneau et al., 1995).
- OM-197-MP-AC, партия № 050323, в концентрации 2,2 мг/мл, и партия № 050322, в концентрации 2,17 мг/мл, приобретали от OM PHARMA, и использовали для перорального и всех остальных способов введения, соответственно.
- Анти-IgE (R35-118), конъюгированный с биотином, приобретали от BD Biosciences (Le Pont de Claix, Франция). mAb анти-IgE EM-95 любезно предоставлены DNAX (Palo Alto, CA, США).
- Интраназальное лечение осуществляли после легкой анестезии мышей с использованием изофлурана (Aerrane, Baxter).
Титры антител
У всех мышей забирали кровь путем сердечной пункции на 2 сутки после последней обработки аэрозолем. Суммарный IgE количественно определяли с помощью ELISA с использованием крысиных mAb EM-95 анти-IgE в качестве адсорбированных антител и крысиных mAb анти-IgE, конъюгированных с биотином, в качестве вторичных антител, как описано в другом месте (Julia et al., 2002).
Анализ клеток из бронхоальвеолярного смыва (BAL)
У индивидуальных мышей забирали кровь и вставляли канюлю в трахею. Легкие промывали 3 раза 1 мл нагретого PBS. Клетки промывали PBS, ресуспендировали в 300 мкл и определяли их количество с использованием камеры Burker-Turk. Для дифференцированных определений количества клеток из BAL получали препараты цитоцентрифугированием и окрашивали по Wright/Giemsa.
Результаты
a) Соответствующие количества нейтрофилов, эозинофилов, лимфоцитов и других мононуклеарных клеток определяли микроскопическим исследованием, и они представлены на фиг.11 для каждого тестированного способа введения.
Как ранее сообщали авторы настоящего изобретения в примере 8, мыши, обработанные i.p. OM-197-MP-AC, обладали как пониженными процентными долями, так и пониженными количествами эозинофилов в BAL. Однако содержание клеток в BAL у мышей, обработанных s.c. и i.g. OM-197-MP-AC, не отличалось от содержания у необработанных мышей. В отличие от этого, как доли (не представлены), так и количества (фиг.11) эозинофилов понижались на половину в BAL у мышей, которые получали i.n. OM-197-MP-AC. Кроме того, мыши, обработанные OM-197-MP-AC в виде аэрозоля, проявляли ту же тенденцию, как и обработанные i.n. животные.
Заключение
По меньшей мере, OM-197-MP-AC оказался значительно эффективным как при введении i.p., так и при интраназальном введении для существенного снижения в данной модели количества эозинофилов в бронхоальвеолярных смывах у мышей, сенсибилизированных аллергеном.
b) Затем уровни IgE в плазме измеряли, как описано в разделе способы.
В согласии с ранее представленными данными авторов настоящего изобретения (пример 8) обнаружено, что мыши, которых обрабатывали i.p. OM-197-MP-AC, обладали пониженными количествами суммарного IgE (фиг.12). Кроме того, мыши, которые получали i.n. инъекции OM-197-MP-AC, также обладали пониженными титрами суммарного IgE в сыворотке. В отличие от этого, мыши, обработанные i.g., s.c. или аэрозолем, обладали сходными количествами суммарного IgE в сыворотке по сравнению с необработанными мышами.
Заключение
OM-197-MP-AC при способе введения или i.p. или интраназально значительно снижал суммарные уровни IgE в данной модели астмы.
ПРИМЕР 10
Повышение эффекта OM-197-MP-AC в виде композиции при пероральном способе введения в модели астмы на мышах
Результаты, представленные в примере 9, говорят о том, что OM-197-MP-AC является неэффективным в профилактике аллергических ответов в модели астмы на мышах с использованием LACK, если его вводить пероральным способом не в виде композиции. Таким образом, на данной модели провели анализ композиции с целью повышения активности OM-197-MP-AC при пероральном введении. Таким образом, в данном исследовании авторы настоящего изобретения изучили, способно ли триацилированное соединение OM-197-MP-AC OM PHARMA защищать мышей от аллергического воспаления дыхательных путей при введении в виде устойчивой к желудочно-кишечному содержимому композиции (OM-197-MP-AC с лутролом® F127, также известным как полоксамер 407).
Протокол
Композицию OM-197-MP-AC/лутрол® F127 получали смешиванием 12,875 мл раствора OM-197-MP-AC в концентрации 4,35 мг/мл и 5,6 мл лутрола F127 в концентрации 50 мг/мл. Вводимый объем составлял 330 мкл.
Реагенты и оборудование
- Солевой раствор использовали в качестве контрольного аэрозоля.
- Рекомбинантный белок LACK получали в E. coli и очищали на аффинной колонке Ni-NTA.
- Гидроксид алюминия (квасцы) приобретали от Pierce.
- Использовали центрифугу Cytospin 4 (Thermo-Shandon, Cheschire, Великобритания), предметные стекла приобретали от Thermo-Shandon, и красители по Wright and Giemsa от Sigma.
- Аэрозоли получали с использованием ультразвукового распылителя Ultramed (Medicalia, Forenze, Италия).
- Наборы бус с IL-4 для CBA приобретали от BD Biosciences.
- Проточный цитофлуориметр FACSarray приобретали от BD Biosciences.
Животные
Самок мышей BALB/c ByJ в возрасте 6 недель приобретали от Centre d'Elevage Janvier, Франция, и содержали в специфических условиях в отсутствии патогенов в помещении для содержания животных. Их кормили стандартной диетой, полученной от Safe (Augy, Франция).
Протокол
В этом эксперименте использовали 15 мышей BAL/c (включая мышей для контрольных групп A и B, представленных также в примерах 8 и 9).
A: необработанные, сенсибилизированные LACK и аллергизированные солевым раствором мыши (3 мыши);
B: необработанные, сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (6 мышей).
Профилактическое лечение
F: (перорально) обработанные OM-197-MP-AC, сенсибилизированные и аллергизированные LACK мыши (6 мышей).
Мышей группы F обрабатывали перорально на 0, 2, 3, 4, 7, 9, 10, 11 и 12 сутки из расчета 1 мг OM-197-MP-AC в виде композиции.
На 1 сутки и 8 сутки мышей сенсибилизировали i.p. при помощи LACK/квасцы. С 16 суток по 20 сутки во всех группах, за исключением группы A, мышей подвергали аллергизации аэрозолями раствора LACK (0,15%). Группа A вместо этого получала солевой раствор (NaCl 0,9%) в течение 40 минут.
На 22 сутки всех мышей забивали. Для всех животных собирали BAL и легкие без перибронхиальных лимфатических узлов.
Определяли количество клеток BAL, и содержание клеток анализировали после микроскопического исследования препаратов, полученных цитоцентрифугированием, после окрашивания по Wright/Giemsa. Кроме того, легкие в каждой группе собирали и замораживали в жидком азоте для дальнейшего анализа на содержание цитокинов. Для исследования содержания цитокинов белковые экстракты получали из легких сенсибилизированных LACK и аллергизированных PBS мышей (группа A), сенсибилизированных и аллергизированных LACK мышей (группа B), и обработанных OM-197-MP-AC в виде композиции мышей wt (группа F). Количество IL-4 анализировали множественным анализом с использованием FACSArray.
Результаты
Соответствующие количества нейтрофилов, эозинофилов, лимфоцитов и других мононуклеарных клеток определяли микроскопическим исследованием, и они представлены на фиг.13.
В отличие от результатов, представленных в примере 8 (и на фигуре 11), где приведены количества клеток BAL мышей, которых обрабатывали i.g. OM-197-MP-AC (не в виде композиции), если OM-197-MP-AC содержится в композиции с лутролом, то количество нейтрофилов, эозинофилов (p<0,05), лимфоцитов и других мононуклеарных клеток понижается наполовину в BAL у мышей, которые получали OM-197-MP-AC в виде композиции (см. фиг.13).
Более того, анализировали количества IL-4 в легких обработанных и необработанных мышей. В то время как содержание в легких IL-4 оказалось от очень низкого до недетектируемого у аллергизированных PBS животных, количества IL-4 повышались в 20 раз у аллергизированных LACK необработанных контрольных мышей. При пероральном лечении OM-197-MP-AC в виде композиции (см. фиг.14) количества IL-4 в легких снижались на 75% (p<0,01).
Заключение
При вхождении в состав соответствующей композиции пероральное введение OM-197-MP-AC способно значительно снижать в данной модели количество эозинофилов в бронхоальвеолярных смывах мышей, сенсибилизированных антигеном. Это снижение коррелирует со снижением количества IL-4.
ПРИМЕР 11
Эффект OM-197-MP-AC на нетучных диабетических (NOD) мышах
До этого момента авторы настоящего изобретения приводили примеры эффективности in vivo OM-197-MP-AC только на модели астмы на мышах. В этом примере авторы настоящего изобретения приводят некоторые доказательства того, что OM-197-MP-AC также активен при другой воспалительной патологии - диабете.
Протокол
Авторы настоящего изобретения ранее сообщали, что OM-197-MP-AC и другие триацилированные молекулы снижают воспаление дыхательных путей у астматических животных.
В данном исследовании авторы настоящего изобретения исследовали, способен ли OM-197-MP-AC вызывать защиту в другой модели воспалительного заболевания мышей: модели диабета NOD (нетучные диабетические мыши).
Группу из 10 самок мышей NOD в возрасте 6 недель обрабатывали в течение 10 недель или 0,01, 0,1, или 1 мг/кг OM-197-MP-AC. Группу из 6 самок мышей NOD, которая получала 200 мкл PBS i.p. 3 раза в неделю, использовали в качестве контроля.
В данной серии экспериментов лечение продолжали до тех пор, пока мыши не достигли возраста 16 недель. Это является моментом времени, когда у контрольных животных начинает развиваться выраженный диабет.
Результаты в терминах частоты возникновения диабета сравнивали с результатами, полученными на контрольных животных. Диабет тестировали один раз в неделю глюкозурическим тестом с использованием тестовых полосок (Glukotest®, Roche, Франция), два раза в неделю при выявлении диабета. Диабет подтверждали анализом на гликемию (>3 мг/мл) тестовыми полосками (Glucotrend®).
Частоту возникновения диабета в разных экспериментальных группах наносили на график (см. фиг.15) с использованием способа Kaplan-Meier, т.е. непараметрического кумулятивного графика выживаемости. Статистическое сравнение между кривыми осуществляли с использованием логрангового (Mantel-Cox) критерия, который давал соответствующие величины χ2. OM-197-MP-AC в дозировке 1 мг/кг оказался значительно активным (p=0,0321), и в дозировке 0,1 мг/кг соединение по изобретению обладало положительным трендом (p=0,0543).
В другом эксперименте с использованием дозировки OM-197-MP-AC 0,3 мг/кг, результаты, полученные на 27 неделе, показывают значимую величину p=0,0362. На 27 неделе у 82% животных обнаружили диабет в контрольной группе, и заболевание выявили только у 27% в обработанной OM-197-MP-AC группе (0,3 мг/кг).
ПРИМЕР 13
Токсикология: эндотоксичность LAL
Эндотоксичность сначала определяли для OM-197-MP-AC и для OM-294-DP с помощью хромогенного теста с лизатом амебоцитов Limulus (хромогенный - LAL Bio-Whittaker, набор № 50-65OU).
Протокол
Этот тест основан на активации липополисахаридом (LPS) или продуктами сравнимой структуры ферментативного каскада, который присутствует в LAL. Эту ферментативную активацию выявляют с помощью отщепления протеазой хромогена, связанного с пептидом. Ферментативную реакцию проводят при 37°C, и образование хромогена с течением времени измеряют при 405 нм. Регистрируют время, необходимое для достижения 0,2 единицы D.O., и эндотоксическую активность вычисляют по отношению к стандартному LPS (стандартная кривая). Результаты выражают в МЕ (эндотоксиновая единица) по отношению к стандартизованному препарату LPS из E. coli (1 МЕ соответствует 0,08 нг эквивалента LPS).
Результаты
В хромогенном анализе LAL как OM-197-MP-AC, так и OM-294-DP обладали очень слабой активностью в отношении Limulus, или активность отсутствовала.
Заключение
OM-197-MP-AC и OM-294-DP обладают очень слабой эндотоксичностью (по меньшей мере, в 106 раз меньше) по сравнению с LPS.
ПРИМЕР 14
Токсикология: пирогенность у кролика
В заключение OM-197-MP-AC и OM-294-DP тестировали на потенциальную пирогенность у кролика.
Протокол
По 3 белых кролика New Zealand на группу инъецировали i.v. или OM-197-MP-AC или OM-294-DP в разных дозах (согласно European Pharmacopoeia 2001, Method 2.6.8).
Продукты: OM-197-MP-AC из расчета 0,0009, 0,009, 0,09, 0,9 мг/кг, и OM-294-DP из расчета 0,001, 0,01, 0,1, и 1 мг/кг.
Животные: Регистрируемый показатель: повышение температуры.
Результаты: Оба соединения признаны непирогенными in vivo, так как порог пирогенности не был достигнут для OM-197-MP-AC при самой высокой тестированной дозе (0,9 мг/кг), и порог пирогенности для OM-294-DP оказался достигнут только между 0,01 и 0,1 мг/кг.
ССЫЛКИ
Byl, В., Libin, M., Bauer, J., Martin, O. R., De Wit, D., Davies, G,, Goldman, M., and Willems, F. (2003). OM197-MP-AC induces the maturation of human dendritic cells and promotes a primary Т cell response, Int Immunopharmacol 3, 417-425.
Julia, V., Hessel, E. M., Malherbe, L, Glaichenhaus, N., O'Garra, A., and Coffman, R. L. (2002). A restricted subset of dendritic cells captures airborne antigens and remains able to activate specific Т cells long after antigen exposure. Immunity 16, 271-283.
Mougneau, E., Altare, F., Wakil, A. E., Zheng, S., Copolla, Т., Wang, Z.-E., Waldmann, R., Locksley, R., and Glaichenhaus, N. (1995). Expression cloning of a Leishmania major protective Т cell antigen. Science 268, 563-566.
Veran, J., Mohty, M., Gaugler, В., Chiavaroli, C., and Olive, D. (2004). OM-197-MP-AC adjuvant properties: the in vitro maturation of normal and leukemic dendritic cells in a serum-free culture model. Immunobioiogy 209, 67-77.
ПОДПИСИ К ЧЕРТЕЖАМ
Фиг.1: Секреция IL-12 (левые панели) и IL-10 (правые панели) мышиными DC, стимулированная с помощью только LPS (1 мкг/мл), или сначала в течение 90 минут указанными концентрациями (в мкг/мл) OM-197-MP-AC (A) или 294-DP (B), и затем LPS (1 мкг/мл) в течение дополнительных 20 часов. Супернатанты собирали из культур DC и анализировали с помощью ELISA в присутствии IL-12 и IL-10.
Фиг.2: Секреция TNF-α мышиными DC, стимулированная с помощью только LPS (1 мкг/мл), или сначала в течение 90 минут указанными концентрациями (в мкг/мл) 294-DP (294) или OM-197-MP-AC (197), и затем LPS (1 мкг/мл) в течение дополнительных 20 часов. Супернатанты собирали из культур DC и анализировали с помощью ELISA в присутствии TNF-α.
Фиг.3: Эффект повышения доз для четырех тестированных соединений (OM-197-MP-AC, n=5; OM-197-MC-HD, n=5; OM-294-BA-MP, n=7; OM-197-MP-HD, n=3) на продукцию IFN-γ и IL-13 T-клетками CD4+ человека после поликлональной активации. Результаты представлены в виде среднего значения (+p25/p75) для n независимых экспериментов и представляют собой процентную долю (%) пролиферации или продукции цитокинов обработанными клетками по сравнению с необработанными клетками (принятыми за 100%, смотри пунктирную линию). Статистический анализ осуществляли с использованием непараметрического непарного t-критерия Mann-Whitney (2-стороннего).
Фиг.4: AHR посредством плетизмографии всего организма (Emka) в ответ на возрастающие концентрации (6-25 мг/мл) вдыхаемого метахолина на первые сутки после последней аллергизации антигеном. Животных обрабатывали, как описано в разделе протоколы. Результаты (среднее значение «величины усовершенствованного показателя паузы» + SEM) представлены для аллергизированных солевым раствором животных (в качестве группы отрицательного контроля, n=4), необработанных аллергизированных LACK животных (в качестве группы положительного контроля, n=8), и обработанных OM-197-MP-AC аллергизированных LACK мышей (n=8).
Фиг.5: Процентная доля эозинофилов в бронхоальвеолярных смывах, анализированных микроскопическим исследованием препаратов, полученных цитоцентрифугированием, окрашенных по Wright/Giemsa. Исследованные группы являются такими же, как группы, использованные на фигуре 4. Пунктирная линия указывает на всем протяжении графика на величину, полученную для необработанных астматических животных.
Фиг.6: Всех мышей обрабатывали, как описано в разделе протоколы, и у них забирали кровь сердечной пункцией на первые сутки после последней обработки аэрозолем. Суммарный IgE количественно определяли с помощью ELISA с использованием крысиных mAb EM-95 анти-IgE в качестве адсорбированных антител и крысиных mAb анти-IgE, конъюгированных с биотином, в качестве вторых антител, как описано (Julia et al., 2002). Каждая точка соответствует отдельному животному. Исследованные группы являются такими же, как группы, использованные на фигурах 4 и 5.
Фиг.7: Белковые экстракты (400 мкл) получали из левого легкого сенсибилизированных LACK и аллергизированных PBS мышей wt (контроль), сенсибилизированных и аллергизированных LACK мышей wt (астма), обработанных OM-197-MP-AC мышей wt (OM-197). Содержание IL-4, IL-5 и IL-13 анализировали множественным анализом с использованием FACSArray. Результаты представлены в пг/мл. Пунктирные линии указывают на протяжении графика на величины, полученные для необработанных астматических животных.
Фиг.8: Мышей терапевтически обрабатывали три раза, как описано в разделе способы, смывы получали у индивидуальных мышей, промываемых через канюлю, вставленную в трахею. Легкие промывали 3 раза 1 мл нагретого PBS. Клетки промывали PBS, ресуспендировали в 300 мкл и определяли их количество с использованием камеры Burker-Turk. Для дифференцированных определений количества клеток из BAL получали препараты цитоцентрифугированием и окрашивали по Wright/Giemsa. Тестированные группы представляли собой сенсибилизированных LACK и аллергизированных PBS мышей wt (контроль), сенсибилизированных и аллергизированных LACK мышей wt (астма) и обработанных OM-197-MP-AC мышей wt (OM-197). Суммарное количество клеток в BAL определяли микроскопическим исследованием препаратов, полученных цитоцентрифугированием, окрашенных по Wright/Giemsa. Пунктирная линия указывает на всем протяжении графика на величину, полученную для необработанных астматических животных.
Фиг.9: Процентная доля эозинофилов в BAL, анализированных микроскопическим исследованием препаратов, полученных цитоцентрифугированием, окрашенных по Wright/Giemsa. Мышей терапевтически обрабатывали три раза, как описано в разделе способы, клетки из BAL собирали, как описано на фигуре 8. (Терапевтические) исследованные группы являются такими же, как группы, использованные на фигуре 8. Пунктирная линия указывает на всем протяжении графика на величину, полученную для необработанных астматических животных.
Фиг.10: Для анализа содержания цитокинов в легких, легкие собирали, и левые легкие использовали для получения белковых экстрактов. Для каждого левого легкого получали 400 мкл. Цитокины измеряли множественным анализом с использованием FACSArray, и результаты представлены в пг/мл. (Терапевтические) исследованные группы являются такими же, как группы, использованные на фигурах 8 и 9. Пунктирные линии указывают на всем протяжении графиков на величины, полученные для необработанных астматических животных.
Фиг.11: Количество эозинофилов, нейтрофилов и лимфоцитов в BAL из мышей. Клетки получали и промывали, как описано в разделе протоколы. Для дифференцированных определений количества клеток из BAL получали препараты цитоцентрифугированием и окрашивали по Wright/Giemsa. По меньшей мере, 400 клеток подсчитывали для каждого предметного стекла, и количества эозинофилов, нейтрофилов и лимфоцитов определяли микроскопическим исследованием. Пунктирная линия указывает на всем протяжении графика на величину, полученную для необработанных астматических животных.
Фиг.12: Измерение аллерген-специфичного IgE в сыворотках мышей, у которых забирали кровь сердечной пункцией спустя двое суток после последней обработки аэрозолем, и получали сыворотки. LACK-специфичный IgE измеряли с помощью ELISA. Представлены результаты (нг/мл) для индивидуальных мышей, среднее значение для каждой группы представлено в виде столбика. * = P<0,05. Пунктирная линия указывает на всем протяжении графика на величину, полученную для необработанных астматических животных.
Фиг.13: Количество эозинофилов, нейтрофилов и лимфоцитов в BAL из мышей. Клетки получали и промывали, как описано в разделе протоколы. Для дифференцированных определений количества клеток из BAL получали препараты цитоцентрифугированием и окрашивали по Wright/Giemsa. По меньшей мере, 400 клеток подсчитывали для каждого предметного стекла, и количества эозинофилов, нейтрофилов и лимфоцитов и других клеток (макрофагов, дендритных клеток и пневмоцитов) определяли микроскопическим исследованием. 3 тестированные группы описаны в разделе протоколы примера 10. Пунктирная линия указывает на всем протяжении графика на величину, полученную для необработанных астматических животных.
Фиг.14: Для анализа содержания цитокинов в легких, легкие собирали и левые легкие использовали для получения белковых экстрактов. Для каждого левого легкого получали 400 мкл. IL-4 измеряли посредством FACSArray, и результаты представлены в пг/мл. 3 тестированные группы описаны в разделе протоколы примера 10. Пунктирная линия указывает на всем протяжении графика на величину, полученную для необработанных астматических животных.
Фиг.15: Частота возникновения диабета у мышей NOD. Мышей обрабатывали i.p. или PBS (6 животных), или 3 указанными дозами OM-197-MP-AC (3 группы из 10 животных). Диабет тестировали один раз в неделю глюкозурическим тестом (Glukotest), и два раза в неделю при выявлении диабета. Диабет подтверждали анализом на гликемию (>3 мг/мл) тестовыми полосками (Glucotrend®). Частоту возникновения диабета в разных экспериментальных группах наносили на график (смотри фигуру 15) с использованием способа Kaplan-Meier, т.е. непараметрического кумулятивного графика выживаемости. Статистическое сравнение между кривыми осуществляли с использованием логрангового (Mantel-Cox) критерия, который давал соответствующие величины χ2: OM-197-MP-AC 1 мг/кг p=0,321; 0,1 мг/кг = 0,0543.
Claims (11)
1. Применение по меньшей мере, одного иммуномодулирующего соединения общей формулы (I)
где m представляют собой целое число от 1 до 4,
n представляют собой число от 2 до 4,
X и Y каждый обозначает группу или в нейтральном, или заряженном состоянии, выбранную из следующих групп:
карбоксил -COOH, дигидроксифосфорилокси -O-P(O)(OH)2, амино -NH2, гидроксил -OH, [амино(C1-C10)алкил]аминокарбонил -CONH(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, [дикарбокси(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)nl-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, {карбокси[амино(C1-C5)алкил]}аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, амино(C1-15)алканоилокси-О-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 15, дигидрокси (C1-C10) алканоилокси -O-CO-(СН2)n1-CHOH-CH2OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, гидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, карбокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, [карбокси(C1-C10)алканоил]амино(C1-C15)алканоилокси,
R1 и R2 каждый обозначает ацильную группу, полученную из насыщенной или ненасыщенной карбоновой кислоты с прямой или разветвленной цепью, содержащей от 2 до 18 атомов углерода, которая является незамещенной или имеет от одного до трех заместителей, выбранных из гидроксила, алкила из 10-18 атомов углерода, алкокси из 7-18 атомов углерода, ацилокси из 6-18 атомов углерода в ацильной группе, ациламино;
С*1 и С*2 независимо друг от друга являются асимметрическими атомами углерода в конфигурации R, S, или в рацемической форме RS,
или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или изомера для изготовления фармацевтической композиции для лечения заболевания или расстройства выбранного из астмы, атопического дерматита, аллергического ринита, воспалительного заболевания кишечника, диабета или ревматоидного артрита у теплокровных животных, включая человека.
где m представляют собой целое число от 1 до 4,
n представляют собой число от 2 до 4,
X и Y каждый обозначает группу или в нейтральном, или заряженном состоянии, выбранную из следующих групп:
карбоксил -COOH, дигидроксифосфорилокси -O-P(O)(OH)2, амино -NH2, гидроксил -OH, [амино(C1-C10)алкил]аминокарбонил -CONH(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, [дикарбокси(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)nl-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, {карбокси[амино(C1-C5)алкил]}аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, амино(C1-15)алканоилокси-О-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 15, дигидрокси (C1-C10) алканоилокси -O-CO-(СН2)n1-CHOH-CH2OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, гидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, карбокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, [карбокси(C1-C10)алканоил]амино(C1-C15)алканоилокси,
R1 и R2 каждый обозначает ацильную группу, полученную из насыщенной или ненасыщенной карбоновой кислоты с прямой или разветвленной цепью, содержащей от 2 до 18 атомов углерода, которая является незамещенной или имеет от одного до трех заместителей, выбранных из гидроксила, алкила из 10-18 атомов углерода, алкокси из 7-18 атомов углерода, ацилокси из 6-18 атомов углерода в ацильной группе, ациламино;
С*1 и С*2 независимо друг от друга являются асимметрическими атомами углерода в конфигурации R, S, или в рацемической форме RS,
или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или изомера для изготовления фармацевтической композиции для лечения заболевания или расстройства выбранного из астмы, атопического дерматита, аллергического ринита, воспалительного заболевания кишечника, диабета или ревматоидного артрита у теплокровных животных, включая человека.
2. Применение по п.1, где
X выбран из следующих групп:
карбоксил -COOH, дигидроксифосфорилокси -O-Р(O)(OH)2, амино -NH2, [амино(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CONH(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, [дикарбокси(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, {карбокси[амино(C1-C5)алкил]}аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, амино(C1-C5)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 15,
и Y выбран из следующих групп: дигидроксифосфорилокси -O-Р(O)(OH)2, гидроксил -OH, амино (C1-C15)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 15, дигидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(СН2)n1-CHOH-CH2OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, гидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, карбокси (C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, [карбокси(C1-C10)алканоил]амино(C1-C15)алканоилокси.
X выбран из следующих групп:
карбоксил -COOH, дигидроксифосфорилокси -O-Р(O)(OH)2, амино -NH2, [амино(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CONH(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, [дикарбокси(C1-C5)алкил]аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, {карбокси[амино(C1-C5)алкил]}аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, амино(C1-C5)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 15,
и Y выбран из следующих групп: дигидроксифосфорилокси -O-Р(O)(OH)2, гидроксил -OH, амино (C1-C15)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 15, дигидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(СН2)n1-CHOH-CH2OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, гидрокси(C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-OH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, карбокси (C1-C10)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 10, [карбокси(C1-C10)алканоил]амино(C1-C15)алканоилокси.
3. Применение по п.1 или 2, где
X выбран из следующих групп: карбоксил -COOH, дигидроксифосфорилокси -O-P(O)(OH)2, амино -NH2, [амино(C1-C6)алкил]аминокарбонил -CONH(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 6, [дикарбокси(C1-C5)алкил] аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, {карбокси[амино(C1-C5)алкил]}аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, амино(C2-C12)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 2 до 12,
и Y выбран из следующих групп: дигидроксифосфорилокси -O-Р(O)(OH)2, гидроксил -OH, амино(C2-C12)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 2 до 12, дигидрокси(C3-C7)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-CHOH-CH2OH, где n1 представляет собой целое число от 3 до 7, гидрокси(C2-C6)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-OH, где n1 представляет собой целое число от 2 до 6, карбокси(C3-C6)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 3 до 6, [карбокси(C2-C6)алканоил] амино (C2-C12)алканоилокси.
X выбран из следующих групп: карбоксил -COOH, дигидроксифосфорилокси -O-P(O)(OH)2, амино -NH2, [амино(C1-C6)алкил]аминокарбонил -CONH(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 6, [дикарбокси(C1-C5)алкил] аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, {карбокси[амино(C1-C5)алкил]}аминокарбонил -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 1 до 5, амино(C2-C12)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 2 до 12,
и Y выбран из следующих групп: дигидроксифосфорилокси -O-Р(O)(OH)2, гидроксил -OH, амино(C2-C12)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-NH2, где n1 представляет собой целое число от 2 до 12, дигидрокси(C3-C7)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-CHOH-CH2OH, где n1 представляет собой целое число от 3 до 7, гидрокси(C2-C6)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-OH, где n1 представляет собой целое число от 2 до 6, карбокси(C3-C6)алканоилокси -O-CO-(CH2)n1-COOH, где n1 представляет собой целое число от 3 до 6, [карбокси(C2-C6)алканоил] амино (C2-C12)алканоилокси.
4. Применение по п.1, где
X выбран из следующих групп: -COOH, -O-P(O)(OH)2, -NH2, -CO-NH-(CH2)3-NH2 или -CONH-(CH2)6-NH2, -CO-NH-CH(COOH) -СН2-СООН, -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)4-NH2, -O-CO-(CH2)5-NH2,
и Y выбран из следующих групп: -O-Р(O)(OH)2, -ОН, -O-CO-CH2-NH2 (2-аминоэтаноилокси), -O-CO-(CH2)2-NH2(3-аминопропаноилокси), -O-CO-(CH2)5-NH2(6-аминогексаноилокси) или -O-CO-(CH2)11-NH2 (12-аминододеканоилокси), -O-CO-(CH2)4-CHOH-CH2OH (6,7-дигидроксигептаноилокси), -O-CO-(CH2)5-OH (6-гидроксигексаноилокси), -O-CO-(CH2)2-COOH (3-карбоксипропаноилокси), -O-CO-(CH2)5-NH-CO-(СН2)2-COOH (3-карбоксипропаноиламиногекса-ноилокси).
X выбран из следующих групп: -COOH, -O-P(O)(OH)2, -NH2, -CO-NH-(CH2)3-NH2 или -CONH-(CH2)6-NH2, -CO-NH-CH(COOH) -СН2-СООН, -CO-NH-CH(COOH)-(CH2)4-NH2, -O-CO-(CH2)5-NH2,
и Y выбран из следующих групп: -O-Р(O)(OH)2, -ОН, -O-CO-CH2-NH2 (2-аминоэтаноилокси), -O-CO-(CH2)2-NH2(3-аминопропаноилокси), -O-CO-(CH2)5-NH2(6-аминогексаноилокси) или -O-CO-(CH2)11-NH2 (12-аминододеканоилокси), -O-CO-(CH2)4-CHOH-CH2OH (6,7-дигидроксигептаноилокси), -O-CO-(CH2)5-OH (6-гидроксигексаноилокси), -O-CO-(CH2)2-COOH (3-карбоксипропаноилокси), -O-CO-(CH2)5-NH-CO-(СН2)2-COOH (3-карбоксипропаноиламиногекса-ноилокси).
5. Применение по п.1, где R1 и R2 выбраны из:
-CO-CH2-С*Н[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, (3C12O)C14), -CO-CH2-С*HOH-(CH2)10-CH3, (3(HO)C14), -CO-CH3, (C2), -CO-CH2-NH-CO-C*H[O-CO-(CH2)8-CH3]-(CH2)5-CH3, ([2(C10O)C8]NC2), -CO-С*H [O-CO-(CH2)4-CH3]-(CH2)5-CH3, (2(C6O)C8), -CO-(CH2)16-CH3, (C18), -CO-CH2-С*H[O-CH2-C6H5]-(CH2)10-CH3, (3(BnO)C14),
С* в указанных выше формулах соответствует асимметрическому атому углерода в конфигурации R, S, или в рацемической форме RS.
-CO-CH2-С*Н[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, (3C12O)C14), -CO-CH2-С*HOH-(CH2)10-CH3, (3(HO)C14), -CO-CH3, (C2), -CO-CH2-NH-CO-C*H[O-CO-(CH2)8-CH3]-(CH2)5-CH3, ([2(C10O)C8]NC2), -CO-С*H [O-CO-(CH2)4-CH3]-(CH2)5-CH3, (2(C6O)C8), -CO-(CH2)16-CH3, (C18), -CO-CH2-С*H[O-CH2-C6H5]-(CH2)10-CH3, (3(BnO)C14),
С* в указанных выше формулах соответствует асимметрическому атому углерода в конфигурации R, S, или в рацемической форме RS.
6. Применение по п.1, где:
R1 выбран из:
-CO-CH2-С**1Н[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, (3(C12O)C14), -CO-CH2-С**1HOH-(CH2)10-CH3, (3(HO)C14), -CO-CH3, (C2), -CO-CH2-NH-CO-C**1H[O-CO-(СН2)8-СН3]-(СН2)5-CH3, ([2(C10O)C8]NC2), -СО-С**1H[O-CO-(СН2)4-CH3]-(CH2)5-CH3, (2(C6O)С8), -CO-(CH3)16-CH3, (С18),
R2 выбран из:
-CO-CH2-С**2H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-СН3, (3(C12O)С14), -CO-CH2-С**2HOH-(CH2)10-СН3, (3(HO)C14), -CO-СН2-C**2Н[O-CH2-С6Н5]-(CH2)10-CH3, (3(BnO)С14),
C**1 и C**2 в указанных выше формулах соответствуют асимметрическим атомам углерода в конфигурации R, S, или в рацемической форме RS.
R1 выбран из:
-CO-CH2-С**1Н[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, (3(C12O)C14), -CO-CH2-С**1HOH-(CH2)10-CH3, (3(HO)C14), -CO-CH3, (C2), -CO-CH2-NH-CO-C**1H[O-CO-(СН2)8-СН3]-(СН2)5-CH3, ([2(C10O)C8]NC2), -СО-С**1H[O-CO-(СН2)4-CH3]-(CH2)5-CH3, (2(C6O)С8), -CO-(CH3)16-CH3, (С18),
R2 выбран из:
-CO-CH2-С**2H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-СН3, (3(C12O)С14), -CO-CH2-С**2HOH-(CH2)10-СН3, (3(HO)C14), -CO-СН2-C**2Н[O-CH2-С6Н5]-(CH2)10-CH3, (3(BnO)С14),
C**1 и C**2 в указанных выше формулах соответствуют асимметрическим атомам углерода в конфигурации R, S, или в рацемической форме RS.
8. Применение по п.1, где соединение выбрано из соединений формулы (II), где
X=-O-P(O)(OH)2, Y=-O-P(O)(OH)2, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=2, C*1 находится в конфигурации S, C*2 находится в конфигурации R, C**1 и C**2 находятся в конфигурации R, т.е. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-(1,10)-бис-дигидрофосфат (OM-294-DP(S,R)),
Х=-O-P(O)(OH)2, Y=-O-CO-(CH2)4-CHOH-CH2OH, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=2, С*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, С**1 и С**2 находятся в конфигурации R, т.е. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1, 10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6,7-дигидроксигептаноат) (OM-197-MP-HD(S,R)),
X=-COOH, Y=-O-CO-(CH2)4-CHOH-CH2OH, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=1, С*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, C**1 и С**2 находятся в конфигурации R, т.е. N-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоил]-L-аспарагиновая кислота, α-N-{(4R)-5-гидрокси-4-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]пентил}-амид-5-O-(6,7-дигидроксигептаноат) (OM-197-MC-HD(S,R)),
X=-O-Р(O)(OH)2, Y=-O-CO-(CH2)5-NH2, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-СН3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=2, С*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, С**1 и С**2 находятся в конфигурации R, т.е. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6-аминогексаноат) (OM-197-MP-AC(S,R)),
X=-NH2, Y=-O-P(O)(OH)2, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=4, C*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, С**1 и С**2 находятся в конфигурации R, т.е. (5S,11R)-1-амино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол-12-дигидрофосфат (ОМ-294-BA-MP (S,R)).
X=-O-P(O)(OH)2, Y=-O-P(O)(OH)2, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=2, C*1 находится в конфигурации S, C*2 находится в конфигурации R, C**1 и C**2 находятся в конфигурации R, т.е. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-(1,10)-бис-дигидрофосфат (OM-294-DP(S,R)),
Х=-O-P(O)(OH)2, Y=-O-CO-(CH2)4-CHOH-CH2OH, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=2, С*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, С**1 и С**2 находятся в конфигурации R, т.е. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1, 10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6,7-дигидроксигептаноат) (OM-197-MP-HD(S,R)),
X=-COOH, Y=-O-CO-(CH2)4-CHOH-CH2OH, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=1, С*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, C**1 и С**2 находятся в конфигурации R, т.е. N-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоил]-L-аспарагиновая кислота, α-N-{(4R)-5-гидрокси-4-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]пентил}-амид-5-O-(6,7-дигидроксигептаноат) (OM-197-MC-HD(S,R)),
X=-O-Р(O)(OH)2, Y=-O-CO-(CH2)5-NH2, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-СН3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=2, С*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, С**1 и С**2 находятся в конфигурации R, т.е. (3S,9R)-3-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-4-оксо-5-аза-9-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]декан-1,10-диол-1-дигидрофосфат-10-(6-аминогексаноат) (OM-197-MP-AC(S,R)),
X=-NH2, Y=-O-P(O)(OH)2, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=4, C*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, С**1 и С**2 находятся в конфигурации R, т.е. (5S,11R)-1-амино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол-12-дигидрофосфат (ОМ-294-BA-MP (S,R)).
9. Применение по п.1, где введение осуществляют мукозально или парентерально.
10. Применение по п.1, где введение осуществляют перитонеально, подкожно, орально, интраназально, подъязычно или посредством аэрозольного способа введения.
11. Применение фармацевтической композиции, включающей по меньшей мере одно иммуномодулирующее соединение следующей общей формулы (I):
где X=-NH2, Y=-O-P(O)(OH)2, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=4, C*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, С**1 и С**2 находятся в конфигурации R, или соединение представляет собой (5S,11R)-1-амино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол-12-дигидрофосфат (ОМ-294-ВА-МР(S,R)), или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или изомера необязательно в сочетании или в смеси с инертным нетоксичным фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем для изготовления фармацевтической композиции для лечения заболевания или расстройства, выбранного из астмы, атопического дерматита, аллергического ринита, воспалительного заболевания кишечника, диабета, или ревматоидного артрита у теплокровных животных, включая человека.
где X=-NH2, Y=-O-P(O)(OH)2, R1=-CO-CH2-C**1H[O-CO-(CH2)10-CH3]-(CH2)10-CH3, R2=-CO-CH2-C**2HOH-(CH2)10-CH3, m=4, C*1 находится в конфигурации S и С*2 находится в конфигурации R, С**1 и С**2 находятся в конфигурации R, или соединение представляет собой (5S,11R)-1-амино-5-[(R)-3-додеканоилокситетрадеканоиламино]-6-оксо-7-аза-11-[(R)-3-гидрокситетрадеканоиламино]додекан-12-ол-12-дигидрофосфат (ОМ-294-ВА-МР(S,R)), или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или изомера необязательно в сочетании или в смеси с инертным нетоксичным фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем для изготовления фармацевтической композиции для лечения заболевания или расстройства, выбранного из астмы, атопического дерматита, аллергического ринита, воспалительного заболевания кишечника, диабета, или ревматоидного артрита у теплокровных животных, включая человека.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
IBPCT/IB2006/050748 | 2006-03-09 | ||
IBPCT/IB2006/050748 | 2006-03-09 | ||
PCT/IB2007/000567 WO2007102081A2 (en) | 2006-03-09 | 2007-03-09 | Immunomodulatory compounds and treatment of diseases related to an overproduction of inflammatory cytokines |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2008139985A RU2008139985A (ru) | 2010-04-20 |
RU2498813C2 true RU2498813C2 (ru) | 2013-11-20 |
Family
ID=38475231
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2008139985/15A RU2498813C2 (ru) | 2006-03-09 | 2007-03-09 | Иммуномодуляторные соединения и лечение заболеваний, связанных со сверхпродукцией воспалительных цитокинов |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US7915240B2 (ru) |
EP (1) | EP2051728A4 (ru) |
JP (1) | JP5341526B2 (ru) |
KR (1) | KR20080105048A (ru) |
CN (1) | CN101511379A (ru) |
AU (1) | AU2007222135B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0708363A2 (ru) |
CA (1) | CA2645053A1 (ru) |
IL (1) | IL192837A (ru) |
MX (1) | MX2008011360A (ru) |
NO (1) | NO20084195L (ru) |
RU (1) | RU2498813C2 (ru) |
WO (1) | WO2007102081A2 (ru) |
ZA (1) | ZA200806266B (ru) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20080105048A (ko) | 2006-03-09 | 2008-12-03 | 옴 파르마 | 면역조절 화합물 및 염증성 사이토킨의 과생성에 관련된 질병의 치료 |
KR101108161B1 (ko) | 2009-12-24 | 2012-01-31 | 삼성모바일디스플레이주식회사 | 유기 발광 표시 장치 및 그 제조방법 |
US10065978B2 (en) * | 2015-11-24 | 2018-09-04 | University Of South Carolina | Cysteine-modifying substrate analogue inhibitors of ribose 5-phosphate isomerase for parasitic diseases, along with methods of their formation and use |
US10682359B2 (en) | 2017-03-31 | 2020-06-16 | University Of South Carolina | Inhibitors of glucose kinases, along with methods of their formation and use |
US11059842B2 (en) | 2019-04-29 | 2021-07-13 | University Of South Carolina | Monosaccharide amine and 3-nitro-2-phenyl-2H-chromene based inhibitors of glucose kinases |
US11555047B2 (en) | 2019-10-31 | 2023-01-17 | University Of South Carolina | One-step synthesis of phosphate-based inhibitors and applications thereof |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2186569C2 (ru) * | 1996-01-23 | 2002-08-10 | Ай-Си-Эн ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ | Модуляция экспрессии тн1/тн2 цитокинов рибавирином и аналогами рибавирина в активированных т-лимфоцитах |
RU2188828C2 (ru) * | 1996-10-16 | 2002-09-10 | Ай-Си-Эн Фармасьютикалз, Инк. | Моноциклические l-нуклеозиды, их аналоги и применения |
RU2190422C1 (ru) * | 2001-04-25 | 2002-10-10 | Кожемякин Леонид Андреевич | Аэрозоль для ингаляций фармацевтической композиции глутовент и способ лечения с его использованием |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4305662B2 (ja) * | 1996-09-30 | 2009-07-29 | 大塚製薬株式会社 | サイトカイン産生抑制剤及び接着抑制剤 |
DE69822494T2 (de) | 1997-08-04 | 2005-01-27 | Teijin Ltd. | Verfahren zur herstellung von aromatischen karbonaten |
IT1296985B1 (it) * | 1997-12-19 | 1999-08-03 | Zambon Spa | Derivati benzazinici inibitori della fosfodiesterasi 4 |
DE69915467T2 (de) * | 1998-05-22 | 2005-01-27 | Mitsubishi Pharma Corp. | Hydroxamsäurederivate und ihre medizinische anwendung |
RU2223262C2 (ru) * | 1998-06-30 | 2004-02-10 | Ом Фарма | Новые ацилированные псевдодипептиды, способ их получения и содержащие их фармацевтические композиции |
US6831069B2 (en) | 1999-08-27 | 2004-12-14 | Ribapharm Inc. | Pyrrolo[2,3-d]pyrimidine nucleoside analogs |
AU1581400A (en) * | 1999-12-22 | 2001-07-03 | Om Pharma | Acyl pseudopeptides bearing a functionalised auxiliary spacer |
AU2001234582A1 (en) * | 2000-01-25 | 2001-08-14 | Nuvelo, Inc. | Methods and materials relating to preadipocyte factor-1-like (pref-1-like) polypeptides and polynucleotides |
JP2001316260A (ja) * | 2000-02-29 | 2001-11-13 | Meiji Milk Prod Co Ltd | カバラクトン類を有効成分とするTNF−α産生抑制剤 |
DE20220947U1 (de) * | 2001-02-28 | 2004-09-30 | Ribapharm, Inc., Costa Mesa | Pyrrolo2,3-dpyrimidin-Nucleosidanaloga |
JP4902913B2 (ja) * | 2001-07-11 | 2012-03-21 | 森下仁丹株式会社 | TNF−α産生抑制剤 |
JP2004107220A (ja) * | 2002-09-13 | 2004-04-08 | Mitsubishi Pharma Corp | TNF−α産生抑制剤 |
JP2004256403A (ja) * | 2003-02-25 | 2004-09-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | TNF−α産生抑制剤 |
RU2328495C2 (ru) * | 2003-03-07 | 2008-07-10 | Кова Ко., Лтд. | Производное бензофурана |
KR20080105048A (ko) * | 2006-03-09 | 2008-12-03 | 옴 파르마 | 면역조절 화합물 및 염증성 사이토킨의 과생성에 관련된 질병의 치료 |
-
2007
- 2007-03-09 KR KR1020087020919A patent/KR20080105048A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-03-09 BR BRPI0708363-7A patent/BRPI0708363A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-03-09 CN CNA2007800075716A patent/CN101511379A/zh active Pending
- 2007-03-09 ZA ZA200806266A patent/ZA200806266B/xx unknown
- 2007-03-09 AU AU2007222135A patent/AU2007222135B2/en not_active Ceased
- 2007-03-09 RU RU2008139985/15A patent/RU2498813C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2007-03-09 CA CA002645053A patent/CA2645053A1/en not_active Abandoned
- 2007-03-09 WO PCT/IB2007/000567 patent/WO2007102081A2/en active Application Filing
- 2007-03-09 MX MX2008011360A patent/MX2008011360A/es active IP Right Grant
- 2007-03-09 EP EP07733936A patent/EP2051728A4/en not_active Withdrawn
- 2007-03-09 US US12/279,845 patent/US7915240B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2007-03-09 JP JP2008557846A patent/JP5341526B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-07-16 IL IL192837A patent/IL192837A/en not_active IP Right Cessation
- 2008-10-07 NO NO20084195A patent/NO20084195L/no not_active Application Discontinuation
-
2011
- 2011-03-28 US US13/073,737 patent/US8618080B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-11-27 US US14/092,589 patent/US20140086960A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2186569C2 (ru) * | 1996-01-23 | 2002-08-10 | Ай-Си-Эн ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ | Модуляция экспрессии тн1/тн2 цитокинов рибавирином и аналогами рибавирина в активированных т-лимфоцитах |
RU2188828C2 (ru) * | 1996-10-16 | 2002-09-10 | Ай-Си-Эн Фармасьютикалз, Инк. | Моноциклические l-нуклеозиды, их аналоги и применения |
RU2190422C1 (ru) * | 2001-04-25 | 2002-10-10 | Кожемякин Леонид Андреевич | Аэрозоль для ингаляций фармацевтической композиции глутовент и способ лечения с его использованием |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
BYL В. et al. OM197-MP-AC induces the maturation of human dendritic cells and promotes a primary T cell response // Int. Immunopharmacology. - 2003, vol 3, pp.417-425. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US7915240B2 (en) | 2011-03-29 |
EP2051728A2 (en) | 2009-04-29 |
US20140086960A1 (en) | 2014-03-27 |
BRPI0708363A2 (pt) | 2011-05-24 |
NO20084195L (no) | 2008-10-07 |
JP5341526B2 (ja) | 2013-11-13 |
EP2051728A4 (en) | 2010-03-31 |
MX2008011360A (es) | 2009-03-03 |
IL192837A (en) | 2013-12-31 |
WO2007102081A3 (en) | 2009-04-23 |
RU2008139985A (ru) | 2010-04-20 |
CA2645053A1 (en) | 2007-09-13 |
CN101511379A (zh) | 2009-08-19 |
ZA200806266B (en) | 2010-05-26 |
US20090054378A1 (en) | 2009-02-26 |
JP2009529523A (ja) | 2009-08-20 |
WO2007102081A2 (en) | 2007-09-13 |
AU2007222135A1 (en) | 2007-09-13 |
KR20080105048A (ko) | 2008-12-03 |
US20120178721A1 (en) | 2012-07-12 |
US8618080B2 (en) | 2013-12-31 |
AU2007222135B2 (en) | 2012-02-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6764396B2 (ja) | 二糖合成脂質化合物およびその使用 | |
RU2498813C2 (ru) | Иммуномодуляторные соединения и лечение заболеваний, связанных со сверхпродукцией воспалительных цитокинов | |
US20090117083A1 (en) | Immunomodulatory alkaloids | |
WO2021197396A1 (zh) | 氘代氧化苯砷化合物及其应用 | |
CA2750607C (en) | Composition comprising carbohydrate esters of mycolic acid derivatives_and process for the preparation thereof | |
US9518078B2 (en) | Disaccharide synthetic lipid compounds and uses thereof | |
JP7395198B2 (ja) | インターロイキン1βに関連する病態の治療のためのピリジン-スルホンアミド化合物 | |
WO2009135001A2 (en) | Methods and compositions for regulating th2 and th17 responses | |
AU2012202597A1 (en) | Immunomodulatory compounds and treatment of diseases related to an overproduction of inflammatory cytokines | |
RU2803242C2 (ru) | Соединения пиридинсульфонамида для лечения состояний, связанных с интерлейкином 1 бета | |
CN115073446B (zh) | 小檗碱型生物碱氧化吡嗪甲酸季铵盐及其制备药物的用途 | |
WO2024029528A1 (ja) | アレルギー性疾患の改善用医薬組成物 | |
US6495678B1 (en) | Immunosuppressant containing glucopyranose derivative as active ingredient | |
US20210393634A1 (en) | Prophylactic and/or therapeutic agent for inflammatory diseases which contains pyrrolopyrimidine compound as active ingredient | |
EP3997108A1 (en) | Methods of making and using lipooligosaccharide compositions and vaccines | |
Saggar | Effect of phosphorylcholine-based small molecule analogues of the immunomodulatory nematode product ES-62 on mast cell function | |
Sparwasser et al. | The oral administration of bacterial extracts prevents asthma via the recruitment of regulatory T cells to the airways | |
US20170349618A1 (en) | Disaccharide synthetic lipid compounds and uses thereof | |
MXPA97007111A (en) | Immunomodulating compositions of the bilis for the treatment of disturbances of the inm system |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140310 |