CZ2003223A3

CZ2003223A3 - Azabicyklické sloučeniny, jejich příprava a použití jako léčiva, zejména jako antibakteriální činidla

Info

Publication number: CZ2003223A3
Application number: CZ2003223A
Authority: CZ
Inventors: Maxime Lampilas; Jozsef Aszodi; David Alan Rowlands; Claude Fromentin
Original assignee: Aventis Pharma Sa
Priority date: 2000-08-01
Filing date: 2001-07-24
Publication date: 2003-08-13
Also published as: DE60102702T2; FR2812635B1; HRP20030034A2; CZ294956B6; EA200300211A1; JP2004505088A; PT1307457E; ES2220793T3; TWI292401B; MEP17108A; SK287597B6; FR2812635A1; HUP0302943A3; SI1307457T1; EP1307457B1; JP2010138206A; OA12347A; KR100632906B1; PL234468B1; US20110021772A1

Description

Vynález se týká nových heterocyklických sloučenin, jejich přípravy a použití jako léčiva, zejména jako antibakteriální činidla.

Dosavadní stav techniky

V odborném časopisu J. Org. Chem., sv. 37, č. 5, 1972, str. 697 až 699 je konkrétně popsána příprava bicyklického derivátu molekulového vzorce Ci_OHigN₂O.

V odborném časopisu J. Org. Chem., sv. 45, č. 26, 1980, str. 5325 až 5326 je konkrétně popsána příprava bicyklických derivátů molekulových vzorců C₆HgNO2 a Ο₇ΗιιΝΟ₂.

V odborném časopisu Chemical Reviews, 1983, sv. 83, č. 5, str. 549 až 555 je konkrétně popsána příprava bicyklických derivátů molekulových vzorců Ci_OH₁₈N₂O a O7H i₂N₂O .

V odborném časopisu Angew. Chem. int., vyd. 2000, 39, č. 3, str. 625 až 628 je konkrétně popsána příprava sloučeniny s molekulovým vzorcem Ci₂Hi₂N₂O.

V těchto dokumentech nebylo popsáno žádné konkrétní použití těchto sloučenin v terapeutické oblasti.

• · • · · ·

01-0127-03-Ma ···· · · · ·· · • · ····· ·· · • · ·· ····· ········ ·· ··· · · ··

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I:

(I) r

kde:

Ri reprezentuje atom vodíku, COOH, CN, COOR, CONR6R7, (CH₂)_n'R5 nebo radikál,

R se zvolí z množiny tvořené alkylovým radikálem obsahujícím 1 až 6 atomů uhlíku, případně substituovaným pyridylovým nebo karbamoylovým radikálem, -CH2-alkenylovým radikálem obsahujícím celkem 3 až 9 atomů uhlíku, arylovým radikálem obsahujícím 6 až 10 atomů uhlíku nebo arylalkylovým radikálem obsahujícím 7 až 11 atomů uhlíku, přičemž kruh arylového nebo arylalkylového radikálu je případně substituován OH, NH2, NO₂, alkylovým radikálem obsahujícím 1 až 6 atomů uhlíku, alkoxyradikálem obsahujícím 1 až 6 atomů uhlíku nebo jedním nebo více atomy halogenu,

R₆ a R₇ jsou identické nebo rozdílné a zvolí se z množiny sestávající z atomu vodíku, alkylového

01-0127-03-Ma • · radikálu obsahujícího 1 až 6 atomů uhlíku, arylového radikálu obsahujícího 6 až 10 atomů uhlíku a arylalkylového radikálu obsahujícího 7 až 11 atomů uhlíku, případně substituovaných ureidoradikálem nebo alkylovým radikálem karbamoylovým radikálem, dimethylaminoradikálem a obsahujícím 1 až 6 atomů uhlíku substituovaným pyridylovým radikálem, n' je rovno 1 nebo 2 a R5 se zvolí z množiny tvořené COOH, CN, OH, NH₂, CO-NR₆R₇, COOR, OR, OCOH, OCOR, OCOOR, OCONHR, OCONH₂, NHR, NHCOH, NHCOR, NHSO₂R, NH-COOR, NH-CO-NHR nebo NHCONH₂, R, Re a R7 jsou definovány výše;

R₂ reprezentuje atom vodíku nebo (CH₂)_n-iR₅ skupinu, n'i je rovno 0, 1 nebo 2 a R₅ je definováno výše;

R₃ reprezentuje atom vodíku nebo alkylový radikál obsahující 1 až 6 atomů uhlíku;

A reprezentuje vazbu mezi dvěma uhlíkovými nosiči Ri a —,C(H)-r,

I I

II

R₂ nebo ' skupinu, kde R₄ reprezentuje atom vodíku nebo (CH₂)_n'iR₅ skupinu, n'i a R₅ jsou definovány výše, tečkovaná čára reprezentuje případnou vazbu s jedním nebo druhým uhlíkovým nosičem substituentů R₂ a R₂;

n je rovno 1 nebo 2;

X reprezentuje dvouvaznou -C(O)-B- skupinu navázanou na atom dusíku přes atom uhlíku,

01-0127-03-Ma

B reprezentuje dvouvaznou -O-(CH₂)_n- skupinu navázanou na karbonylovou skupinu přes atom kyslíku, -NR₈” (CH₂) n^- nebo -NR₈-O- skupinu navázanou na karbonylovou skupinu přes atom dusíku, n je rovno 0 nebo 1 a Rg se zvolí z množiny tvořené atomem vodíku, OH, R, OR, Y, OY, Yi, OYi, Y₂, 0Y₂, Y₃, OCH₂CH₂SO_mR, OSiR_aR_bR_c a

SiR_aR_bR_c radikálem, R_a, R_b a R_c jednotlivě znamenají lineární nebo větvený alkýlový radikál obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo arylový radikál obsahující 6 až 10 atomů uhlíku, R je definováno výše a m je rovno 0, 1 nebo 2;

Y se zvolí z množiny tvořené COH, COR, COOR, CONH₂, CONHR, CONHOH, CONHSO₂R, CH₂COOH, CH₂COOR, CH₂CONHOH, CH₂CONHCN, CH₂-tetrazolem, chráněným CH₂-tetrazolem, CH₂SO₃H, CH₂SO₂R, CH₂PO(OR)₂, CH₂PO (OR) (OH) , CH₂PO(R) (OH) a CH₂PO (OH) ₂ radikály,

Yi se zvolí z množiny tvořené SO₂R, SO2NHCOH, SO₂NHCOR, SO₂NHCOOR, SO₂NHCONHR, SO₂NHCONH₂ a SO₃H radikály,

Y₂ se zvolí z množiny tvořené PO(OH)₂, PO(OR)₂, PO(OH)(OR) a PO(OH)(R) radikály,

Y₃ se zvolí z množiny tvořené tetrazolovými radikály, tetrazolem substituovaným R radikálem, skvarátem, NH- nebo NR-tetrazolem, NH- nebo NR-tetrazolem substituovaným R radikálem, NHSO₂R a NRSO₂R, kde R je definováno výše;

01-0127-03-Ma • · přičemž je třeba chápat, že pokud je n rovno 1 a A — C(H)-R,

I i

II reprezentuje ’ skupinu, kde R4 znamená atom vodíku a buď X reprezentuje -C (0)-0-(CH₂) _n- skupinu, kde n znamená 0 nebo 1, nebo X reprezentuje -CO-NRg- (CH₂) _n skupinu, kde n znamená 1 a Rg znamená isopropylovou skupinu, nebo X reprezentuje -CO-NRg- (CH₂) _n„ skupinu, kde n znamená 0 a Rg znamená atom vodíku nebo fenylovou skupinu, potom nemohou všechny tři Ri, R₂ a R3 současně reprezentovat atom vodíku.

Předmětem vynálezu jsou rovněž soli těchto sloučenin, které lze získat za použití bází, organických nebo anorganických kyselin, společně s vnitřními solemi, ve kterých mohou určité sloučeniny za určitých podmínek existovat.

Asymetrické atomy uhlíku obsažené ve sloučeninách obecného vzorce I mohou mít nezávisle vzájemnou R, S nebo RS konfiguraci a předmětem vynálezu jsou tedy rovněž sloučeniny obecného vzorce I existující ve formě čistých enantiomerů nebo čistých diastereoisomerů nebo ve formě směsi enantiomerů, zejména racemátů nebo směsí diastereoisomerů .

Výsledkem potom je, že se mohou substituenty R_lz R₂ a R₄, brané jednotlivě, na jedné straně a X na druhé straně nacházet v cis a/nebo trans pozici ve vztahu ke kruhu, na

01-0127-03-Ma • · • · • · • · · · • · · · · · ···· ··· · · • · ····· ·· β ········ · · ··· kterém jsou navázány, a předmětem vynálezu jsou tedy sloučeniny obecného vzorce I existující ve formě cis isomerů, trans isomerů nebo jejich směsí.

Výrazem „alkylový radikál obsahující 1 až 6 atomů uhlíku se rozumí methylový radikál, ethylový radikál, propylový radikál, isopropylový radikál, a stejně tak lineární nebo větvený butylový radikál, pentylový radikál nebo hexylový radikál.

Výrazem ,,-CH₂-alkenylový radikál obsahující 3 až 9 atomů uhlíku se rozumí například allylový radikál nebo butenylový radikál a pentenylový radikál nebo hexenylový radikál.

Výrazem „arylový radikál obsahující 6 až 10 atomů uhlíku se rozumí fenylový radikál nebo naftylový radikál.

Výrazem „arylalkylový radikál obsahující 7 až 11 atomů uhlíku se rozumí benzylový radikál, fenethylový radikál nebo methylnaftylový radikál.

Výrazem „alkyloxyradikál obsahující 1 až 6 atomů uhlíku se rozumí zejména methoxyradikál, ethoxyradikál, propoxyradikál, isopropoxyradikál, a stejně tak butoxyradikál, isobutoxyradikál, sek.butoxyradikál nebo terc.butoxyradikál.

Výrazem „atom halogenu se rozumí atom fluoru, atom chloru, atom bromu nebo atom jodu.

Výrazem „radikál skvarát se rozumí radikál obecného vzorce:

01-0127-03-Ma

OH

Mezi solnými produkty kyselin obecného vzorce I lze mimo jiné zmínit ty soli, které jsou vytvořeny za použití anorganických kyselin, jakými jsou například kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina jodovodíková, kyselina sírová nebo kyselina fosforečná, nebo za použití organických kyselin, jakými jsou například kyselina mravenčí, kyselina octová, kyselina trifluoroctová, kyselina propionová, kyselina benzoová, kyselina maleinová, kyselina fumarová, kyselina sukcinová, kyselina vinná, kyselina citrónová, kyselina oxalová, kyselina glyoxylová, kyselina aspartová, kyselina alkansulfonová, jako například kyselina methansulfonová a kyselina ethansulfonová, kyselina arylsulfonová, jako například kyselina benzensulfonová a kyselina paratoluensulfonová.

Mezi solnými produkty bází obecného vzorce I lze mimo jiné zmínit ty, které jsou vytvořeny za použití anorganických bází, jakými jsou například hydroxid sodný, hydroxid draselný, hydroxid lithný, hydroxid vápenatý, hydroxid hořečnatý nebo hydroxid amonný, nebo za použití organických bází, jakými jsou například methylamin, propylamin, trimethylamin, diethylamin, triethylamin, N,N-dimethylethanolamin, tris(hydroxymethyl)aminomethan, ethanolamin, pyridin, pikolin, dicyklohexylamin, morfolin, benzylamin, prokain, lysin, arginin, histidin, N-methylglukamin, nebo rovněž fosfoniové solí, jako například alkylfosfonium, arylfosfonium, alkylarylfosfonium, alkenylarylfosfonium, nebo kvarterní amoniové solí, jako například tetra-n-butylamoniová sůl.

01-0127-03-Ma ·· · ·

Mezi sloučeninami obecného vzorce I představuji zvláště zajímavý předmět vynálezu ty, ve kterých je n rovno 1, a stejně tak ty, ve kterých A reprezentuje výše — C(H)-R, i i definovanou ' skupinu, a zejména ty, ve kterých R₄ reprezentuje atom vodíku.

Mezi sloučeninami obecného vzorce I představují zvláště zajímavý předmět vynálezu rovněž ty, ve kterých X reprezentuje -CO-B dvouvaznou skupinu, ve které B reprezentuje -NRg- (CH₂) _n ^- skupinu, jak je definována výše, a zejména ty, ve kterých R_g znamená Υχ nebo ΟΥχ skupinu, kde má Υχ výše definovaný význam.

Mezi sloučeninami obecného vzorce I představují zvláště zajímavý předmět vynálezu sloučeniny s následujícími názvy:

trans-Ί-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-Ί-oxo-N-(fenylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-Ί-oxo-N- (4-pyridinylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-Ί-oxo-N-(3-pyridinylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, • · « · « · • · · ·

01-0127-03-Ma trans-Ί-oxo-N-(2-amino-2-oxoethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo [3,2,1] oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, fenylmethyl-trans-Ί-oxo-6-(sulfooxy)-1, 6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát.

Dalším předmětem vynálezu je rovněž způsob umožňující přípravu sloučenin obecného vzorce I. Tento způsob je charakteristický tím, že zahrnuje: a) stupeň, během kterého se sloučenina obecného vzorce II uvede do reakce s karbonylačním činidlem, pokud je to vhodné v přítomnosti báze:

(II) kde:

R'i reprezentuje atom vodíku nebo CN, chráněný COOH,

COOR', (CH₂)n'R' 5/ CONRg, R? nebo chráněný ^nhr, radikál;

R₆ a R7 mají výše definované významy a R' a R'5 mají stejnou definici jako výše uvedené R a R₅, kde jsou případně přítomné reakční skupiny chráněny;

r'₂ reprezentuje atom vodíku nebo (CH₂)_n-iR^,5 skupinu, n'i a R'5 jsou definovány výše;

R₃ má výše definovaný význam;

• 9

9 9 «

01-0127-03-Ma ···· 9 9 9 9 9 · • · 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 · * · · · · · ·

99999999 9 9 9 9 9 9 9 9 9

A' reprezentuje vazbu mezi dvěma uhlíkovými nosiči R' i a — C(H)-rJ

R'_z nebo ’’ skupinu, R'₄ reprezentuje atom vodíku nebo (CH₂)_n'iR'5 skupinu, n'i a R'₅ mají výše definovaný význam, tečkovaná linie reprezentuje případnou vazbu s jedním nebo druhým uhlíkovým nosičem substituentů R'_x a R'₂;

n má výše definovaný význam;

HZ reprezentuje HO-(CH₂)_n~_ř HNR'g-(CH₂) _n~ nebo HNR'g-Oskupinu, n má výše definovaný význam a R' ₈reprezentuje atom vodíku, chráněnou OH skupinu, R',

OR' radikál, Y' radikál nebo OY' radikál, přičemž Y' se zvolí z COH skupiny, COR' skupiny, COOR' skupiny, CONH₂ skupiny, CONHR' skupiny, chráněné CONHOH skupiny, CONHSO₂R' skupiny, chráněné CH₂COOH skupiny, CH₂COOR' skupiny, chráněné CH₂CONHOH skupiny, CH₂CONHCN skupiny, CH₂-tetrazolové skupiny substituované R' , CH₂SO₂R' skupiny, CH₂PO(OR')₂ skupiny, chráněné CH₂SO₃skupiny, chráněné CH₂PO(OR')OH skupiny, chráněné CH₂PO(R')OH skupiny, chráněné CH₂PO(OH)₂ skupiny, Y'i radikál nebo OY'i radikál, kde se Y'i zvolí z SO₂R' skupiny, SO₂NHCOH skupiny, SO₂NHCOR' skupiny, SO₂NHCOOR' skupiny, SO₂NHCONH₂ skupiny, SO₂NHCONHR' skupiny a chráněné SO₃H skupiny, Y'₂ radikál nebo OY'₂radikál, kde Y'₂ reprezentuje chráněnou PO(OH)₂skupinu, chráněnou PO(OH)(OR') skupinu, chráněnou PO(OH) (R' ) skupinu nebo PO(OR')₂ skupinu, nebo Y'₃radikál, kde se Y'₃ zvolí z chráněné tetrazolové skupiny, tetrazolové skupiny substituované R' radikálem, NH nebo NR' chráněné tetrazolové skupiny,

NH nebo NR' tetrazolové skupiny substituované R' • · * ·

01-0127-03-Ma ·«·· * » * «· 4

Φ · ·»«·« ♦ Λ · *· • · «· ····· ««··>»· » · · · · ·· ·· radikálem, NHSO₂R' skupiny a NR'SO₂R' skupiny, přičemž R' je definováno výše;

za vzniku meziproduktu obecného vzorce III:

R'i, R' 2, R3, A' a n máji výše definované významy a buď Xi znamená atom vodíku a X₂ reprezentuje -Z-CO-X3 skupinu, kde X₃ reprezentuje zbytek karbonylačního činidla, nebo X₂ znamená -ZH skupinu a Xi reprezentuje CO-X₃ skupinu, kde X₃má výše definovaný význam;

b) stupeň, během kterého se získaný meziprodukt cyklizuje v přítomnosti báze; a

c) pokud je to vhodné, potom stupni a) předchází a/nebo za stupněm b) následuje jedna nebo více následujících reakcí volených ve vhodném pořadí:

- ochrana reakčních funkčních skupin;

- odstranění ochrany reakčních funkčních skupin;

- esterifikace;

- zmýdélnění;

- sulfatace;

- fosfatace;

- amidace;

- acylace;

- sulfonylace;

·· 49

01-0127-03-Ma • 9 9« • 9 t · • » • 9 9

9

9999 «·♦· «, «·1« ·· · ♦·· • · · * » <1 • * · 4 « · 9 · • · · 4 « ' * • * · 9 * 9 ·

9 9·· ·· *·

- alkylace;

- zavedení dvojné vazby;

- tvorba močovinové skupiny;

- zavedení tetrazolové skupiny;

- redukce karboxylových kyselin;

- dehydratace amidu na nitril;

- salifikace;

- iontová výměna;

- rezoluce nebo separace diastereoisomerů; a

- oxidace sulfidu na sulfoxid a/nebo sulfon.

Jako karbonylačni činidlo lze použit reagencni činidlo, jako například fosgen, difosgen, trífosgen, arylchlorformiát, fenylchlorformiét, nebo p-nitrofenylchlorformiát, aryi benzylchlorformiát, methylchlorformiát, allylehlorformiát, terč.butyldikarbonát

Laikylchlorformiát, alkylchlorformiát, alkenylchlorformiát, alkyldikarbonát, , karbonyldiimidazol jako například jako například jako například jako například jejich směsi.

Reakce se výhodně provádí v přítomnosti báze nebo směsi bází, které neutralizují vznikající kyseliny. Zejména lze použít amin, jako například triethylamin, diisopropylethylamin, pyridin nebo dimethylaminopyridin. Nicméně reakci lze rovněž provádět tak, že se jako báze použije výchozí produkt obecného vzorce II. To znamená, že se použije v přebytku. Příklad takového postupu je uveden v experimentální části přihlášky vynálezu.

Pokud je to vhodné, potom se použije produkt obecného vzorce II ve formě soli kyseliny, například ve formě hydrochloridu nebo trifluoracetátu.

01-0127-03-Ma • ···· ···· • · ·· ···· ········ ·· ··· ··

Jako bázi ve stupni b) lze rovněž použít aminy, a stejně tak hydridy, alkoholáty, amidy nebo karbonáty alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin.

Aminy lze například zvolit z výše uvedeného seznamu.

Jako hydrid lze zejména použít hydrid sodný nebo hydrid draselný.

Jako alkoholát alkalického kovu lze výhodně použít terc.butylát draselný.

Jako amid alkalického kovu lze zejména použít lithiumbis(trimethylsilyl)amid.

Jako karbonát lze zejména použít uhličitan nebo hydrogenuhličitan sodný nebo draselný.

Pokud je to vhodné, potom lze získat meziprodukt obecného vzorce III ve formě soli kyseliny připravené během karbonylační reakce, a zejména ve formě hydrochloridu, který se následně použije v této formě při cyklizační reakci.

Případně lze cyklizaci provádět bez izolace meziproduktu obecného vzorce III.

Reakce zmíněné ve stupni c) jsou obecně standardní reakce, které jsou odborníkům v daném oboru známy.

Reakčními funkčními skupinami, které je případně vhodné chránit, jsou funkční skupina karboxylové kyseliny, aminová funkční skupina, amidová funkční skupina, funkční hydroxyskupina a hydroxylaminová funkční skupina.

Ochrana kyselinové funkce se zejména provádí ve formě alkylesterů, allylesterů, benzylesterů, benzhydrylesterů nebo p-nitrobenzylesterů.

01-0127-03-Ma • ·

Odstranění ochranné skupiny se provádí zmýdelnatěním, kyselou hydrolýzou, hydrogenolýzou nebo rovněž štěpením za použití rozpustných sloučenin palladium 0.

Příklady ochrany a odstranění ochrany kyselinových funkčních skupin jsou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Ochrana aminu a amidů se provádí zejména ve formě benzylovaných derivátů, ve formě karbamátů, zejména allylkarbamátu, benzylkarbamátu, fenylkarbamátu nebo terč.butylkarbamátu, nebo rovněž ve formě silylovaných derivátů, jako například terč.butyldimethylsilylových derivátů, trimethylsilylových derivátů, trifenylsilylových derivátů nebo rovněž difenylterc.butylsilylových derivátů.

Odstranění ochrany se provádí v závislosti na povaze ochranné skupiny sodíkem nebo lithiem v kapalném amoniaku, hydrogenolýzou nebo za použití rozpustných sloučenin palladia 0, působením kyseliny nebo působením tetrabutylamoniumf luoridu .

Příklady budou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Ochrana hydroxylaminů se provádí zejména ve formě benzyletherů nebo allyletherů.

Štěpení etherů se provádí hydrogenolýzou nebo za použití rozpustných sloučenin palladium 0.

Ilustrativní příklady budou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Ochrana alkoholů se provádí standardním způsobem ve formě etherů, esterů nebo karbonátů. Etherem mohou být • · • · · · • · • · · ·

01-0127-03-Ma

alkylethery nebo alkoxyalkylethery, výhodně methylether nebo methoxyethoxymethylether, arylethery nebo výhodně arylalkylethery, například benzylether, nebo silylované ethery, například výše zmíněné silylované deriváty. Esterem může být libovolný štěpitelný ester, který je odborníkům v daném oboru znám, a výhodně je tímto esterem acetát, propionát nebo benzoát nebo p-nitrobenzoét. Karbonáty mohou být například methylkarbonáty, terc.butylkarbonáty, allylkarbonáty, benzylkarbonáty nebo p-nitrobenzylkarbonáty.

Odstranění ochranné skupiny se provádí prostředky odborníkům v daném oboru známými, zejména zmýdelnatěním, hydrogenolýzou, štěpením rozpustnými sloučeninami palladium 0, hydrolýzou v kyselinovém prostředí nebo v případě silylovaných derivátů rovněž působením tetrabutylamoniumfluoridu.

Příklady budou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Sulfatační reakce se provádí působením S0₃-aminových komplexů, jako například S0₃-pyridinového komplexu nebo SO₃-dimethylformamidového komplexu, v pyridinu, přičemž vytvořenou sůl, například pyridinovou sůl, lze potom zaměnit například solí dalšího aminu, kvarterní amoniovou solí nebo solí alkalického kovu. Příklady jsou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Fosfatační reakce se provádí například působením chlorfosfátu, například působením dimethylchlorfosfátu, dibenzylchlorfosfátu nebo difenylchlorfosfátu.

Při amidační reakci se jako výchozí produkt použije karboxylová kyselina, která se aktivuje například alkylchlorformiátem nebo EDCI a na kterou se působí

01-0127-03-Ma • · · · • * hydroxidem amonným nebo vhodným aminem nebo jejich kyselinovými solemi. Příklady jsou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Acylační a sulfonylační reakce se provádějí na hydroxymočovinách působením vhodného halogenidu nebo anhydridu karboxylových kyselin nebo halogenidu vhodné sulfonové kyseliny. Několik příkladů je uvedeno v experimentální části přihlášky vynálezu.

Alkylační reakce se provádí působením alkylhalogenidu nebo substituovaného alkylhalogenidu na hydroxylované deriváty, zejména působením volného nebo esterifikovaného karboxyradikálu. Příklady jsou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Případné konečné zavedení dvojné vazby, která se potom výhodně situuje mezi atomy uhlíku nesoucí R4 a Ri, se provádí působením halogenovaného derivátu selenu a následnou oxidací, které se provádí odborníkům v daném oboru známými metodami. Příklady budou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Tvorba močovinové skupiny, která souvisí se substituentem R₈, se výhodně provádí působením vhodného isokyanátu na volnou NH skupinu. Příklady budou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Zavedení tetrazolové skupiny se provádí působením halogenovaného derivátu, výhodně fluorovaného derivátu, chráněného tetrazolu. Odstranění ochrany lze provádět hydrogenolýzou.

Redukci kyselin na alkoholy lze provádět působením boranu nebo přes meziprodukt, kterým je směsový anhydrid,

01-0127-03-Ma • · působením alkalického borohydridu. Směsový anhydrid se připraví například za použití alkylchlorformiátu. Příklad je uveden v experimentální části přihlášky vynálezu.

Dehydrataci amidu na nitril lze provádět za karbonylačních a cyklizačních reakčních podmínek.

Oxidaci sulfidů na sulfoxidy a/nebo sulfony lze provádět pomocí perkyseliny, jako například kyseliny metachlorperbenzoové nebo kyseliny perftalové, nebo libovolného vhodného reakčního činidla, které je odborníkům v daném oboru známé.

Salifikace pomocí kyselin se případně provádí přidáním kyseliny v rozpustné fázi ke sloučenině. Salifikace bázemi se může týkat buď sloučenin obsahujících kyselinovou funkční skupinu, zejména funkční karboxyskupinu, nebo sloučenin obsahujících funkční sulfooxyskupinu nebo derivát kyseliny fosforečné nebo sloučenin obsahujících heterocyklus mající kyselinový charakter. V prvém případě se salifikace provádí přidáním vhodné báze, například některé z již zmiňovaných bází. Ve druhém případě se pyridiniová sůl získá přímo, během působení SC>3-pyridinové sloučeniny, a z této pyridiniové soli se získají další sloučeniny. V obou případech lze rovněž provádět iontovou výměnu na pryskyřici.

Příklady budou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Separaci enantiomerů a diastereoisomerů lze provádět za použití technik, které jsou odborníkům v dané oblasti známy, zejména za použití chromatografie.

• · · · • * • · · ·

01-0127-03-Ma • ·

Stejně jako výše popsanými způsoby lze samozřejmě sloučeniny obecného vzorce I získat způsoby, které používají jako výchozí produkt sloučeninu obecného vzorce II, kde R'i, A', R'₂, R₃ a HZ mají hodnoty, které vedou přímo (bez konverze) k hodnotám sloučenin, které je třeba připravit. Tam, kde je to vhodné, jsou substituenty s těmito hodnotami, které obsahují reakční funkční skupiny, jako například výše zmíněné, následně chráněny. Odstranění ochrany se provádí po cyklizačním stupni b) nebo v libovolném jiném vhodném momentu syntézy. Ochrana a zbavení ochrany se následně provádí výše popsaným způsobem.

Příklady jsou uvedeny v experimentální části přihlášky vynálezu.

Produkty obecného vzorce I mají velmi dobré antibiotické účinky na gram(+)bakterie, jakými jsou například staphylococci. Zvláště pozoruhodná je zejména jejich účinnost na gram(-)bakterie, a zejména na koliformní bakterie.

Tyto vlastnosti činí z uvedených produktů, a stejně tak z jejich solí kyselin a farmaceuticky přijatelných bází, produkty vhodné pro použití jako léčiva při léčbě na bakterie citlivých infekcí, zejména staphylococcia, jako například při léčbě stafylokokové sepse, maligní stafylokokové nákazy obličeje nebo pokožky, pyodermie, septických nebo hnisavých poranění, antraxu, flegmonů, erysipelu, akutní stafylokokové nákazy nebo stafylokokové nákazy předcházející nebo následující po chřipkovém onemocnění, bronchopneumonie a pulmonální supurace.

Tyto produkty lze rovněž použít jako léčiva při léčbě kolibacilóz a příbuzných infekcí, infekcí způsobených

01-0127-03-Ma bakterií proteus, infekcí klebsiela a salmonela a při léčbě dalších stavů způsobených gram(-)bakteriemi.

Předmětem vynálezu jsou tedy rovněž produkty obecného vzorce I, jak jsou definovány výše, a jejich farmaceuticky přijatelné kyseliny a báze jako léčiva, a zejména jako antibiotická léčiva.

Zvláště zajímavým předmětem vynálezu jsou produkty obecného vzorce I, jak jsou definovány výše, kde je n rovno 1, a stejně tak ty, ve kterých A reprezentuje — C(H)-(¾ »| '* skupinu, jak je definována výše, a zejména ty, kde R₄ znamená atom vodíku, jako léčiva.

Ještě zajímavějším předmětem vynálezu jsou produkty obecného vzorce I, ve kterých X reprezentuje dvouvaznou -CO-B skupinu, kde B reprezentuje -NR₈- (CH₂) n^_ skupinu, jak je definováno výše, a zejména ty, kde R₈ reprezentuje Υχ nebo OYi skupinu, ve kterých má Υχ výše definovaný význam, jako léčiva.

Mezi sloučeninami obecného vzorce I představují hlavní předmět vynálezu jako léčiva sloučeniny s následujícími názvy:

trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-Ί-oxo-N-(fenylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl,

01-0127-03-Ma trans-Ί-οχο-Ν-(4-pyridinylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-Ί-oxo-N-(3-pyridinylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-Ί-oxo-N-(2-amino-2-oxoethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, fenylmethyl-trans-Ί-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát.

Předmětem vynálezu jsou rovněž farmaceutické kompozice obsahující alespoň jednu ze sloučenin podle vynálezu, jak jsou definovány výše, jako účinnou složku.

Tyto kompozice lze podávat bukálním, rektálním, parenterálním, a zejména intramuskulárním způsobem nebo lokálním způsobem ve formě topické aplikace na pokožku a sliznice.

Kompozice podle vynálezu mohou být pevné nebo kapalné a lze je nabízet ve farmaceutických formách, které se běžně využívají v humánní medicíně, například jako obyčejné nebo cukrem potažené tablety, želatinové kapsle, granule, čípky, injekční přípravky, masti, krémy a gely; a jsou připravovány obvyklými metodami. Účinnou složku(y) lze zabudovávat s excipienty, které se v takovýchto farmaceutických kompozicích obvykle používají a jakými jsou například mastek, arabská guma, laktóza, škrob, stearát hořečnatý, kakaové máslo, vodná nebo bezvodá vehikula, tuky živočišného nebo rostlinného původu, deriváty parafinu,

01-0127-03-Ma • · • · · · glykoly, různá smáčecí, dispergační nebo emulgační činidla a konzervační činidla.

Tyto kompozice mohou zejména existovat ve formě prášku, který je určen pro rozpuštění v čas potřeby ve vhodném vehikulu, například v apyrogenní sterilní vodě.

Podávaná dávka se mění v závislosti na léčeném onemocnění, stavu konkrétního pacienta, způsobu podání a konkrétním produktu. Může ji představovat například 0,250 g až 10 g na den při orálním podání člověku, pokud jde konkrétně o produkt popsaný v příkladu 1, nebo se rovněž může pohybovat mezi 0,25 g a 10 g na den v případě intramuskulárního nebo intravenózního podání.

Produkty obecného vzorce I lze rovněž použít jako dezinfekční činidla pro chirurgické nástroje.

Konečně jsou předmětem vynálezu produkty výše definovaného obecného vzorce III, a stejně tak jejich soli s kyselinami, a zejména jejich hydrochloridy, jako nové průmyslové produkty, a zejména jako meziprodukty nezbytné pro přípravu produktů obecného vzorce I.

Produkty obecného vzorce II jsou známé nebo je lze připravit postupy, známy. Odkazy na způsoby přípravy, část.

které jsou odborníkům v daném oboru relevantní literaturu, a stejně tak poskytuje následující experimentální

Následující příklady mají pouze ilustrativní charakter a nikterak neomezují rozsah vynálezu, který je jednoznačně vymezen přiloženými patentovými nároky.

01-0127-03-Ma • · · ·

Příklady provedení vynálezu

V příkladech jsou použity následující zkratky:

DEAD: diethylazodikarboxylát

TEA: triethylamin

DMAP: 4-dimethylaminopyridin

EDCI: 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid, hydrochlorid

THF: tetrahydrofuran

AIBN: 2,2 '-azobisisobutyronitril

M: molární molekulová hmotnost

MS: hmotnostní spektrometrie

El: elektronový ráz

SIMS: hmotnostní spektrometrie sekundárních iontů

FAB: bombardování rychlými atomy

Příklad 1

Difenylmethyl-cis-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-4-propanoát

3,16 g (10,6 mmol) Hydrochloridu kyseliny 3-oxo-l-(fenylmethyl)-4-piperidinpropanové (M = 297,7 g) (popsané v japonské patentové přihlášce J54098-772) se smísí se 100 ml ethanolu a ochladí na 10 °C. Během 15 min se pod proudem dusíku a při nastavení teploty mezi 8 °C a 13 °C přidá 1,84 g NaBH₄. Teplota se zvýší na pokojovou teplotu a reakční prostředí se v tomto kontaktu udržuje 1 h a 30 min. Přidá se dalších 380 mg NaBH₄ a reakční prostředí se nechá reagovat při pokojové teplotě přes noc.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, zbytek se vyjme v 50 ml vody a za použití kyseliny chlorovodíkové se

01-0127-03-Ma nastaví hodnota pH na 10 až 2. Reakční prostředí se opět odpaří za sníženého tlaku. Pevný zbytek (přibližně 10,8 g) se dvakrát promyje 100 ml ethanolu a následně se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 3,10 g hydrochloridu kyseliny 3-hydroxy-l-(fenylmethyl)-4-piperidinpropanové (M = 299,7 g), což odpovídá výtěžku 97 %.

3,10 g (10,3 mmol) Získané sloučeniny se naředí 100 ml ethanolu a následně přidá do 900 mg Pd/C při koncentraci 10 % předhydrogenované hmotnosti a ve 30 ml ethanolu.

Reakční prostředí se ponechá přes noc za normálního tlaku pod vodíkovou atmosférou, načež se katalyzátor odstraní filtrací a ethanol odpařováním za sníženého tlaku.

Získá se 1,90 g hydrochloridu kyseliny trans-3-hydroxy-4-piperidinpropanové (M = 209,6 g), tj. výtěžek 88 %.

1,79 g (8,54 mmol) Získané sloučeniny se smísí s 20 ml ethanolu a 20 ml vody.

Následně se přidává koncentrovaná soda až do dosažení pH hodnoty přibližně 8,5.

Potom se přidá 1 ml allylchlorformiátu a koncentrovaná soda se přidává tak, aby se udržela pH hodnota mezi 8 a 9.

Reakční směs se extrahuje ethylacetátem, potom se vodná fáze okyselí na pH hodnotu 2 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové a reextrahuje ethylacetátem. Po vysušení a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 1,69 g surového produktu, který se vyjme ve směsi

01-0127-03-Ma dichlormethanu a ethanolu, načež se rozpouštědlo odfiltruje a opět odpaří za sníženého tlaku.

Takto se získá 1,40 g kyseliny trans-3-hydroxy-l-[(2-propenyloxy)karbonyl]-4-piperidinpropanové (M = 257 g), tj. výtěžek 60 %.

3,24 g (12,6 mmol) Výše získané hydroxykyseliny a 6,4 g trifenylfosfinu se při 0 °C pod dusíkovou atmosférou rozpustí v 60 ml THF. Následně se přidá 2,5 ml DEAD a po 15 min se reakční směs odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá 12 g surového produktu. Reakční prostředí se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém postupným vymýváním směsí dichlormethanu a ethylacetátu 9:1, 8:2,

7:3, ve snaze separovat cis- a trans-laktony.

Takto se získá 2,72 g cis-laktonu ve směsi s redukovaným DEAD a fosfinoxidem.

Tento produkt se opět umístí do roztoku v 10 ml DME a přidá se 8 ml IN roztoku NaOH. Po 1 h kontaktu se reakční směs dvakrát extrahuje ethylacetátem, potom okyselí na hodnotu pH 2 ethylacetátem.

přidáním 2N Po vysušení roztoku HCI a reextrahuje a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 1,07 g hydroxykyseliny.

1,0 g Surové hydroxykyseliny se rozpustí ve směsi 5 ml dichlormethanu a 2 ml methanolu, následně ošetří přebytkem difenyldiazomethanu v dichlormethanu, dokud nevymizí výchozí produkt. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a produkt se purifikuje chromatografii za vzniku 1,39 g difenylmethyl-cis-3-hydroxy-l-[(2-propenyl-oxy)karbonyl]-4-piperidinpropanoátu (M = 423 g), tj. celkový výtěžek 26 %.

01-0127-03-Ma

1,2 g (2,83 mmol) Získaného produktu se následně rozpustí pod dusíkovou atmosférou ve 23 ml dichlormethanu. Potom se přidá 390 μΐ kyseliny octové a následně ještě 860 μΐ BusSnH a 70 mg Pd(PPh₃)₄.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá 3,82 g surového produktu, který se propláchne petroletherem. Získá se 1,27 g produktu, který se přefiltruje na oxidu křemičitém dichlormethanem, potom 95:5 směsí a následně 90:10 směsí dichlormethanu a methanolu. Takto se získá 0,87 g difenylmethyl-cis~3-hydroxy-4-piperidinpropanoátu (M = 339 g), tj. výtěžek 77 %.

400 mg (1,00 mmol) Získané sloučeniny se rozpustí v 25 ml dichlormethanu a přidá se 80 μΐ difosgenu (C1₃COCOC1), 336 μΐ TEA a 144 mg DMAP.

Reakční prostředí se nechá reagovat za pokojové teploty 5 h a 30 min, načež se naředí dichlormethanem, následně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, a roztokem sodného fosfátového pufru při pH 7, organická fáze se suší nad bezvodým síranem sodným, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku. Tímto způsobem se získá 380 mg surového produktu.

Purifikace se provádí chromatografií na oxidu křemičitém, kdy se jako eluční soustava použije 95:5 směs dichlormethanu a ethylacetátu s 0,1 % vody.

Tímto způsobem se získá 184 mg titulní sloučeniny (M = 365,43 g), tj. výtěžek 50 %.

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,60 až 1,88 (m) : NCH₂-CH₂-CH; 2,48 (m) : CH₂-CH₂-CO;

01-0127-03-Ma

2,78	(d) -	2,90 (m) - 3,33 až 3,47	(m) :	CH^-N-Clh; 4,50 (d)
CHO-	CH₂; 6,	89 (s): CO₂CH (C₆H₅) ₂; 7,33	(m) :	(ΟζΗβ)₂ ·
IR (	CHC1₃) :	1784, 1734, 1600, 1585,	1496	cm^-1.
MS (	kladný	elektrosprej) m/z: [M]⁺ =	365,

Příklad la

Kyselina cis-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-4-propanová

176 mg (0,482 mmol) Získaného produktu se rozpustí v 10 ml acetonu. Přidá se 90 mg Pd/C při koncentraci 10 % hmotn.

Reakční prostředí se nechá 3 h reagovat za normálního tlaku pod vodíkovou atmosférou. Přidá se 25 mg katalyzátoru a reakce se nechá probíhat 1 h a 15 min.

Katalyzátor se odfiltruje, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá 146 mg produktu.

Produkt se nechá pod vodíkovou atmosférou reagovat v 10 ml acetonu s 35 mg Pd/C při koncentraci 10 % hmotn. pod vodíkovou atmosférou a reakce se nechá probíhat 1 h.

Katalyzátor se následně odstraní filtrací a filtrát se odpaří za sníženého tlaku. Tímto způsobem se získá 137 mg surového produktu, který se krystalizuje ze směsi ethyletheru a petroletheru. Tímto způsobem se získá 75 mg požadovaného produktu (M = 199 g), tj. výtěžek 78 %.

··* ·

01-0127-03-Ma • * · <··· « ♦ ··· · ··· • · · · · ·

.............

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 250 MHz, chemické posuny plků v ppm a multiplicita:

1,30 až 1,63 (m) a 1,88 (m) : NCH2-CH2-CH; 2,25 (t) : CH₂-CH₂-CO; .3,06 (m) a 3,38 (m) : CH^-N-Cíh; 4,65 (d) : C-CHO-CH2; 12,08 (s) : mobilní H.

IR (Nujol) : 1785, 1717 cm^-1.

MS (FAB) m/z: [M + H]⁺ = 200; 159.

Příklad 2

Difenylmethyl-trans-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-4-acetát

Pod inertní atmosférou se smísí 94 mg (0,259 mmol) difenylmethyl-trans-3-hydroxy-4-piperidinacetátu, hydrochloridu (M = 361,87 g) (popsaného v Eur. J. Med. Chem Chim. Ther - 1982 - 17(6)531-5) a 7 ml dichlormethanu.

Reakční prostředí se ochladí za použití ledové lázně a vstříkne se 19 μΐ difosgenu. Reakční prostředí se míchá 25 min, potom se vstříkne 72 μΐ TEA. Reakční prostředí se míchá za pokojové teploty 30 min a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Reakční prostředí se následně vyjme v 7 ml toluenu.

Přidá se 36 μΐ TEA a následně 31 mg DMAP.

Reakční prostředí se ohřívá 15 min na 100 °C, načež se nechá ochladit na pokojovou teplotu a posléze propláchne ·· 4 4 4 4 • « « • · * · · • » · • · · • « *4 · a potom síranem

01-0127-03-Ma · ;· ;

• 4 * *

........

dvakrát 4 ml 10% roztoku kyseliny vinné ve vodě 4 ml vody nasycené chloridem sodným.

Reakční prostředí se suší nad bezvodým hořečnatým a odfiltruje, rozpouštědlo se potom odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 78 mg oleje, který se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém, pří použití 95:5 směsi dichlormethanu a ethylacetátu jako eluční soustavy.

Tímto způsobem se získá 35,7 mg očekávané sloučeniny (M = 351,405 g) ve formě bílých krystalů, tj. výtěžek 39 %.

Příklad 2a

Kyselina trans-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-4-octová

Pod inertní atmosférou se smísí 38,7 mg (0,110 mmol) produktu získaného v příkladu 2, a stejně tak 2 ml acetonu a 38 mg Pd/C katalyzátoru při koncentraci 10 % hmotn.

Reakční prostředí se umístí za normálního tlaku pod vodíkovou atmosférou.

Reakční prostředí se nechá reagovat 45 min, načež se katalyzátor odstraní filtrací a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 32,6 mg surového produktu.

·« «Μ«

01-0127-03-Ma

·« 9·

1 9 9

9 • 9 * «

9111 9·1ι

Rekrystalizace se provádí z ethyletheru, čímž se získá 14,2 mg bílých krystalů očekávané sloučeniny (C₈HioNO₄ M = 185,181 g), což je výtěžek 69 %.

Příklad 3

Difenylmethy1-cis-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-4-acetát

Smísí se 1,5 g (5,78 mmol) kyseliny trans-Ύ-[(1,1-dimethylethoxy)karbonyl]-3-hydroxy-4-piperidinoctové (popsané v Eur. J. Med. Chem - Chim. Ther - 1982

17(6)531-5), 7 ml dichlormethanu, 3,03 g trifenylfosfinu a ml tetrahydrofuranu.

Přidá se roztok 0,91 ml DEAD ve 2,5 ml tetrahydrofuranu. Reakční prostředí se nechá reagovat 3 h a 20 min, potom se přidá 8,7 ml IN roztoku sody a vše se 1 h a 15 min míchá. Po dvojité extrakci ethylacetátem se přidáním 2N roztoku kyseliny chlorovodíkové nastaví pH hodnota 2 a následuje trojnásobná extrakce ethylacetátem.

Organické fáze se sloučí a propláchnou vodou nasycenou chloridem sodným, potom se suší nad síranem horečnatým, přefiltrují a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 1,37 g bílých krystalů 1,1-dimethylethyl(3aa,7aa)hexahydro-2-oxofuro[2,3-c]pyridin-6 (2H) karboxylátu (C12H21NO5 - M = 259,304 g) , tj . výtěžek 91 %.

Společně se za inertní atmosféry smísí 1,37 g (5,28 mmol) získané sloučeniny a 32 ml dichlormethanu.

01-0127-03-Ma • r %

« ♦

t

Zavádí se přebytek roztoku difenyldiazomethanu v dichlormethanu, dokud výchozí produkt nevymizí.

Rozpouštědlo se následně odpaří za sníženého tlaku a tak se získá 2,81 g surového produktu, který se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití dichlormethanu a následně 95:5 směsi dichlormethanu a ethylacetátu jako eluční soustavy.

Získají se 2,00 g bílých krystalů difenylmethyl-cis-1-[(1,1-dimethylethoxy)karbonyl]-3-hydroxy-4-piperidinacetátu, (M = 425,528 g), tj. výtěžek 89 %.

Zavede se 0,6 g (1,41 mmol) získané sloučeniny a 1,93 ml roztoku chlorovodíku v methanolu při koncentraci 7,3 mol/1.

Reakční prostředí se míchá za pokojové teploty a po 15 min se přidá 1 ml dichlormethanu.

Po dalších 15 min se reakční prostředí odpaří za sníženého tlaku.

Rovněž se přidá dichlormethan, načež se reakční prostředí opět odpaří. Tato operace se několikrát opakuje.

Produkt se následně krystalizuje z ethyletheru.

Tímto způsobem se získá 0,44 g hydrochloridu difenylmethy1-cis-3-hydroxy-4-piperidinacetátu molekulového vzorce C20H23NO3 · HCl (M = 361,871 g) , t j . výtěžek 86 %.

Tato reakce rovněž vede ke vzniku různých množství (3aa, 7aa)hexahydrofuro[2,3-c]pyridin-2(3H)onlaktonu, hydrochloridu, (M = 177,6 g).

• · • · • · · ·

01-0127-03-Ma • · · · ··· ·· · • · ····· ·· · • · · · ····· ········ ·· ··· ·· ·*

Pod inertní atmosférou se smísí 0,28 g (0,77 mmol) získané sloučeniny C20H23NO3 HCI a 19 ml dichlormethanu.

Při 0 °C se přidá 60 μΐ difosgenu a zahájí se míchání.

Po 25 min se zavede 0,32 ml TEA. Následně se přidá 94 mg DMAP a reakční prostředí nechá ohřát na pokojovou teplotu.

Reakční prostředí se 4 h a 15 min míchá, načež se postupně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a posléze vodou nasycenou chloridem sodným.

Po vysušení nad bezvodým síranem hořečnatým se provede filtrace a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 0,265 g očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C21H21NO4 (M = 351,405 g) , t j . výtěžek 98 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,82 (m) : NCH₂-CH2_; 2,30 až 2,70 (m) : CO-CH₂-CH; 2,93 (d) až 2,99 (dt) a 3,45 (m) : CH2.-N-CH2; 4,60 (d) : CH-CHO-CH2; 6,87 (s) : CO₂CH(C₆H₅) ₂; 7,10 až 7,35 (m) : (C₆H5_)₂.

IR (CHCI3) : = 1786, 1734, 1600, 1587, 1496 cm^-1.

MS (SIMS) m/z: [M + Na]⁺ =

374 ⁺ .

• · · · · ·

01-0127-03-Ma

Příklad 3a

Kyselina cis-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-4-octová

Smísí se 55 mg (0,156 mmol) produktu získaného v příkladu 3, 3 ml ethylacetátu a 55 mg Pd/C katalyzátoru při koncentraci 10 % hmotn.

Reakční prostředí se nechá reagovat 1 h a 30 min, potom se katalyzátor odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 38 mg surového produktu, který se krystalizuje ze směsi pentanu a ethyletheru.

Tímto způsobem se izoluje 16 mg bílých krystalů očekávané sloučeniny (M = 185,181 g), tj. výtěžek 55 %.

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,63 až 1,86 (m) a 1,91 (m) : NCH₂-CH2_; 2,27 až

2,49 (m) a 2,54 (dd) : CO-CH^-CH; 2,98 (d) a 3,54 (d) :

CHjr-N—CH₂—CH₂; 3,04 (dt) a 3,41 (dd) : CH₂-N-CH2.-CH₂; 4,71 (d): CH-CHO-CH2.

IR (Nujol) : 1784, 1734, 1686 cm'¹.

MS (SIMS) m/z: [M + H]⁺ = 186⁺, 167⁺.

01-0127-03-Ma • · • · · ·

Příklad 3b

Methyl-cis-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-4-acetát mg (0,421 mmol) Sloučeniny získané v příkladu 3a se následně rozpustí v 1 ml dichlormethanu.

Po kapkách se přidává přebytek diazomethanu, dokud se neodstraní žluté zabarvení a potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

mg Získaného surového produktu se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém a eluuje 95:5 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Získá se 8,2 mg očekávané sloučeniny (M = 199,208 g), tj. výtěžek 10 %.

Příklad 4 cis-7-Oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-4-acetonitrii mg (0,38 mmol) (3aa,7aa)-Hexahydrofuro[2,3—c]pyridin-2(3H)onu, hydrochloridu (M=177,6 g) připraveného v příkladu 3 se rozpustí v 1 ml roztoku amoniaku při koncentraci 4,17 mol/1 v methanolu.

Reakční prostředí se míchá 5 h, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, potom se opět přidá 1 ml roztoku amoniaku v methanolu a reakce se nechá probíhat 18 h.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získá se 79 mg cis-3-hydroxy-4-piperidinacetamidu s molekulovým vzorcem C7H14O2N2 (M = 158 g) .

01-0127-03-Ma • 9 • ·

Roztok 9 ml dichlormethanu se za inertní atmosféry smísí s 75 mg výše získané sloučeniny.

Reakční prostředí se ochladí pomocí ledové lázně a zavede se 30 μΐ difosgenu.

Reakční	prostředí	se po dobu 40 min udržuje	při
teplotě 0 °C	až 5 °C,	potom se zavede 0,16 ml TEA	a po
5 min ještě 46 mg DMA.
Míchání	se provádí	4 h za pokojové teploty.
Reakční	prostředí	se dvakrát propláchne 2 ml	10%

vodného roztoku kyseliny vinné a potom 2 ml nasyceného vodného roztoku chloridu sodného.

Reakční prostředí se suší nad bezvodým síranem hořečnatým, odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 35 mg surového produktu, který se vyjme ve 30:70 směsi ethylacetátu a dichlormethanu. Nečistoty se odfiltrují a filtrát se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 23 mg očekávané sloučeniny (M = 166,18 g) ve formě oleje, tj. výtěžek přibližně 26 %.

IR (Nujol) : 2241, 1777 cm'¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 166, 137, 82, 55, 42.

• · · · • · • · · ·

01-0127-03-Ma • ·

Příklad 5

3-Benzoyl-l, 3-diazabicyklo[2,2,1]heptan-2-on

Za inertní atmosféry se smísí 1,01 g (5,43 mmol)

1,l-dimethylethyl-3-amino-l-pyrrolidinkarboxylátu (M = 186,25 g) (popsaného v patentové přihlášce WO 9801426) a 10 ml dichlormethanu, roztok se ochladí na 0 °C a následně se po kapkách přidá 0,76 ml TEA.

Míchání se provádí 15 min za udržování teploty na 0 °C a potom se přidá 0,63 ml benzoylchloridu.

Reakční prostředí se nechá ochladit na pokojovou teplotu, načež se naředí přidáním 10 ml dichlormethanu.

Reakční prostředí se následně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně se vysuší síranem hořečnatým, přefiltruje a dichlormethan se odpaří za sníženého tlaku.

Získá se 1,30 g 1,l-dimethylethyl-3-(benzoylamino)-1-pyrrolidinkarboxylátu (M = 292,36 g) ve formě žlutého oleje. Odpovídající výtěžek činí 82 %.

1,30 g (4,46 mmol) Této sloučeniny se smísí s 10 ml methanolu.

Roztok se ochladí na 0 °C a potom se postupně zavede 6,12 ml roztoku chlorovodíku při koncentraci 7,3 mol/1 v methanolu.

Potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

·· «· ·· ···· «· ···· • · · · ··· ·· ·

01-0127-03-Ma

Získá se 1,01 g N-(3-pyrrolidinyl)benzamidu, hydrochloridu (M = 226,707 g) ve formě hnědého oleje, tj . výtěžek se blíží 100 %.

Za inertní atmosféry se smísí 1,01 g (4,46 mmol) získané sloučeniny, a stejně tak 10 ml dichlormethanu.

Reakční prostředí se o<	chladí na 0	°C	a potom se po
kapkách přidá 1,36 ml TEA.
Míchání probíhá 15 min	a potom se	Po	kapkách přidá
1,44 ml difosgenu.
Reakční prostředí se 30	min udržuje	při	0 °C, načež se

nechá dosáhnout pokojové teploty.

Následně se reakční prostředí naředí dichlormethanem, promyje 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně vodou.

Následuje vysušení síranem hořečnatým, filtrace a zahuštění odpařením rozpouštědla za sníženého tlaku, čímž se získá 0,615 g surového produktu.

Surový produkt se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém eluováním s 90:10 směsí dichlormethanu a acetonu.

Touto cestou se získá 0,320 g chloridu kyseliny 3-(benzoylamino)-1-pyrrolidinkarboxylové, která se izoluje krystalizací. Výtěžek odpovídá 28 %.

Pod inertní atmosférou se následně rozpustí 0,585 g (2,31 mmol) získané sloučeniny v 18 ml tetrahydrofuranu.

01-0127-03-Ma

Roztok se ochladí na -78 °C a potom se do tetrahydrofuranu po kapkách přidá 2,55 ml 1 M roztoku lithiumbis(trimethylsilyl)amidu.

Získá se žlutý roztok, který se 20 min udržuje při teplotě -78 °C, potom se 1 h pokračuje v míchání a během této doby se nechá teplota vzrůst. Potom se při 0 °C přidá 350 μΐ kyseliny octové a následně 5 ml 10% roztoku kyseliny vinné ve vodě. Reakční prostředí se naředí ethylacetátem, potom promyje 10% roztokem kyseliny vinné a roztokem fosfátového pufru při pH = 7 a následně vodou.

Organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým, filtruje a zahustí odpařením rozpouštědla za sníženého tlaku.

Získá se 0,315 g surového produktu ve formě žluté pevné látky.

Tento surový produkt se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém eluováním 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Získá se 0,140 g očekávané sloučeniny C12H12N2O2 (M = 216,24 g) ve formě bílé pevné látky, tj . touto cestou se získá výtěžek 28 %.

IR (CHCI3) : 1801, 1775, 1675, 1620, 1603, 1582 cm^-1.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [M]⁺ = 216, 105, 77.

01-0127-03-Ma • · · ·

Příklad 6

Draselná sůl kyseliny trans-6-[(fenylmethoxy)karbonyl]-2-oxo-1,3-diazabicyklo[2,2,1]heptan-3-octové

Společně se smísí 1 g (3,12 mmol - M = 186,25 g) 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-(fenylmethyl)-trans-4-amino-l,2-pyrrolidindikarboxylátu (popsaného v J. Org. Chem., 1991, 56, str. 3009 až 3016), 10 ml tetrahydrofuranu, 560 μΐ allylbromacetátu a 660 μΐ TEA.

Reakční prostředí se nechá reagovat při 14 h míchání za pokojové teploty a potom 3 h při 50 °C.

Následuje naředění ethylacetátem a propláchnutí 10% roztokem kyseliny vinné a potom nasyceným vodným roztokem chloridu sodného.

Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým, přefiltruje a potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

1,21 g Takto získaného surového produktu se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití 80:20 směsi dichlormethanu a ethylacetátu jako eluční soustavy.

Tímto způsobem se získá 0,99 mg 1-(1,1-dimethylethyl)a 2-(fenylmethyl)-trans-4-[[[(2-propenyloxy)karbonyl]methyl]amino]-1,2-pyrrolidindikarboxylátu molekulového vzorce 0₁₂Η₃οΝ₂θ6 (M = 418 g) .

Pod dusíkovou atmosférou a při teplotě 0 °C se do 0,99 g (2,36 mmol) získané sloučeniny přidá 6 ml 4M roztoku chloridu sodného v ethylacetátu. Reakční prostředí se následně nechá reagovat 15 min za pokojové teploty.

01-0127-03-Ma

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získá se surový produkt, který se krystalizuje z ethyletheru za vzniku 0,95 g fenylmethyl-trans-4-[[[(2-propenyloxy)karbonyljmethyl]amino]-2-pyrrolidinkarboxylátu, dihydrochloridu s molekulovým vzorcem C17H23N2O4 · 2HC1 (M = 394 g) .

0,5 g Tohoto produktu se rozpustí ve 20 ml dichlormethanu a přidá se 1,3 ml 2N roztoku sody a 3 ml vody. Roztok se nechá usadit, načež následuje extrakce dichlormethanem, sušení nad bezvodým síranem hořečnatým, po které následuje filtrace a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 339 mg volného diaminu. Odpovídající výtěžek činí 83 %.

100 mg (0,314 mmol) Získaného diaminu se při 0 °C a pod dusíkovou atmosférou rozpustí v 5 ml acetonitrilu.

Přidá se 21 μΐ difosgenu. Po 15 min kontaktu se tento roztok pod dusíkovou atmosférou a během 4 h přidá do směsi obsahující 38 mg DMAP a 88 μΐ TEA v 10 ml acetonitrilu ohřátého na 70 °C.

Po přidání celého objemu se reakční směs opět 1 h ohřívá, načež se ochladí, naředí ethylacetátem a postupně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Po sušení nad bezvodým síranem sodným, filtraci a odpaření rozpouštědel za sníženého tlaku se získá 58 mg surového produktu. Tento produkt se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 8:2 směsí dichlormethanu a ethylacetátu za vzniku 19 mg 2-propenyl-trans-6-[(fenylmethoxy)karbonyl]-2-oxo-l,3-diazabicyklo[2,2,1]heptan-301-0127-03-Ma

-acetátu molekulového vzorce Ci₈H₂₀N₂O5 (M = 344,57 g) , tj . výtěžek 17 %.

mg (0,069 mmol) Získané sloučeniny se následně rozpustí ve 250 μΐ dichlormethanu. 3 mg Pd(PPh₃)₄ Se zavedou pod dusíkovou atmosférou, načež se přidá 150 μΐ 0,5M roztoku ethyl-2-hexanoátu draselného v ethylacetátu. Po několika minutách se vytvoří sraženina, která se odstředí a dvakrát propláchne 500 μΐ ethylacetátu.

Tímto způsobem se získá 24 mg očekávané sloučeniny C₁₅Hi₅KN₂O₅ (M = 342 g) , což je kvantitativní výtěžek.

NMR protonové spektrum

V DMSO při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,83 (ddd) a	2,56	: N-CH2-CHN-CH2; 2,50 a 2,7 9	(d) :
N-CH2-CHN-CH2; 3,23	(d)	a 3,41	(d): =C-N-CH₂-C=O;	3, 62
(ddd): O=C-CHN-CH₂;	4,	13 (s):	N-CH₂-CHN-CH₂; 5,16	(s)
=C-O-CH₂-C₆H₅; 7,38 1	!m) :	C₆H₅-CH₂.
MS (pozitivní elektrosprej) m/z:	[2MK + H]⁺ = 723,

[2MK + Na] ⁺ = 707, [MK + K]⁺ = 381, [MK + Na] ⁺ = 365; [MK + H]⁺ = 343.

Příklad 7

Methyl-trans-3-benžoy1-2-oxo-1,3-diazabicyklo[2,2,1]heptan-6-karboxylát

Pod dusíkovou atmosférou se smísí 0,471 g (1,93 mmol) 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-methyl-trans-4-amino-l,2-pyrrolidindikarboxylátu (popsaného v J. Org. Chem. 1991,

01-0127-03-Ma • · «· ·· a · · · • · · ··· · » • · ····· · · • ♦ « · ··· · • · · · · · ···· ··♦· ·· ··· ·»

56, str. 3009 až 3016) a 3,5 ml bezvodého dichlormethanu za účelem rozpuštění.

Roztok se ochladí na 0 °C, načež se po kapkách přidá 269 μΐ TEA.

Reakční prostředí se míchá 15 min za současného udržování teploty na 0 °C a následně se po kapkách přidá 224 μΐ benzoylchloridu.

Potom se reakční prostředí nechá během 1 h ohřát na 20 °C.

Reakční prostředí se naředí 30 ml dichlormethanu, následně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a následně vodou.

Reakční prostředí se suší nad síranem hořečnatým, přefiltruje a zahustí odpařením dichlormethanu za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 0,6 g žlutého oleje, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití 99:1 směsi dichlormethanu a methanolu jako eluční soustavy.

Tímto způsobem se získá 0,499 g 1-(1,1-dimethylethyl)a 2-methyl-trans-A-(benzoylamino)-1,2-pyrrolidindikarboxylátu molekulového vzorce C18H24N2O5 (M = 348 g) , tj . výtěžek 7 4 % .

Pod dusíkovou atmosférou se 0,400 g (1,15 mmol) získané sloučeniny smísí se 3 ml ethylacetátu, ve snaze tuto sloučeninu rozpustit, načež se roztok ochladí na teplotu 0 °C a přidá se 2,89 ml roztoku 4 mol/1 HCI v ethylacetátu.

• ·

01-0127-03-Ma • · · · · ·

Po uplynutí 15 min se 1 h pokračuje v míchání při pokojové teplotě.

Rozpouštědlo se následně odstraní odpařováním za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 0,350 g methyl-tians-i-(benzoylamino)-2-pyrrolidinkarboxylátu, hydrochloridu molekulového vzorce C13H15N2O3 HCI (M = 284,744 g) ve formě béžové pevné látky.

0,327 g (1,15 mmol) Získané sloučeniny, umístěné pod dusíkovou atmosférou, se smísí se 4 ml dichlormethanu.

Suspenze se potom ochladí na 0 °C, načež se přidá 352 μΐ TEA. Reakční prostředí se míchá 15 min při 0 °C a potom se přidá 138 μΐ difosgenu. V míchání se pokračuje 5 min při 0 °C a potom se reakční směs nechá ochladit na pokojovou teplotu. Reakce se opět nechá probíhat 30 min.

Reakční prostředí se následně naředí dichlormethanem a propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně vodou a suší nad bezvodým síranem hořečnatým.

Po filtraci se rozpouštědlo odstraní odpařováním za sníženého tlaku. Tímto způsobem se získá 0,360 g surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 95:5 směsí dichlormethanu a acetonu.

Tímto způsobem se získá 93,7 mg methyl-trans-4-(benzoylamino)-1-(chlorkarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylátu, hydrochloridu C14H14N2O4 · HCI (M = 310,74 g) , t j .

%.

výtěžek

01-0127-03-Ma • · • · · · · · • · · • · · • · ♦ · · • · * · ·

93,7 mg (0,301 mmol) Získané sloučeniny se pod dusíkovou atmosférou smísí se 3 ml tetrahydrofuranu. Teplota roztoku se sníží na -78 °C, načež se po kapkách přidá 332 μΐ lithiumbis(trimethylsilyl)amidu v 1M roztoku v tetrahydrofuranu a reakční prostředí se dalších 5 min udržuje při -78 °C.

Reakční prostředí se míchá 30 min za pokojové teploty.

Roztok se následně ochladí na 0 °C a přidá se 55 μΐ kyseliny octové, 20 ml ethylacetátu a 3 ml fosfátového pufru při pH = 7,0. Roztok se nechá usadit, následně propláchne vodou, vysuší nad bezvodým síranem hořečnatým, přefiltruje a zahustí odpařováním. Tímto způsobem se získá 7 6 mg pěny, která se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 97:3 směsí dichiormethanu a acetonu.

Tímto způsobem se získá 5 mg čisté očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem Ci₄Hi₄N₂O₄ · HCI (M = 274,279 g), tj. výtěžek 6 %.

IR (CHC1₃) : 1805, 1779, 1743, 1669, 1603, 1589, 1486 cm'¹. MS (El) m/z: [M]⁺ = 274, 215, 169, 105, 77.

Příklad 7a

Fenylmethyl-trans-3-benzoy1-2-oxo-1,3-diazabicyklo[2,2,l]-heptan-6-karboxylát

Postup se provádí podobným způsobem, jaký byl naznačen v příkladu 7, přičemž se vychází z 0,92 g 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-fenylmethyl-trans~4-amino-l,2-pyrrolidindikarboxylátu (popsaného v J. Org. Chem. 1991,

01-0127-03-Ma

...............

56, str. 3009 až 3016) za vzniku očekávané sloučeniny při celkovém výtěžku ze 4 stupňů 5,4 %.

Příklad 8

Fenylmethyl-trans-2-oxo-3-(fenylsulfonyl)-1,3-diazabicyklo[2,2,1]heptan-6-karboxylát

Pod dusíkovou atmosférou se smísí 2,97 g (9,26 mmol) 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-(fenylmethyl)-trans-4-amino-l, 2-pyrrolidindikarboxylátu (popsaného v J. Org. Chem. 1991, 56, str. 3009 až 3016) molekulového vzorce C17H24N2O4 (M = 320,392 g) a přidá se 25 ml dichlormethanu. Reakční prostředí se ochladí na 5 °C a přidá se 1,3 ml TEA. Míchání se provádí 10 min a potom se přidá 1,63 g benzensulf ony lehlo ridu .

Reakční prostředí se nechá 15 min míchat při 5 °C, potom se teplota reakčního prostředí nechá vzrůst na 20 °C a při této teplotě se udržuje 45 min.

Reakční prostředí se naředí dichlormethanem, následně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, fosfátovým pufrem při pH = 7,0 a následně nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Reakční prostředí se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 4,5 g surového produktu, který se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

01-0127-03-Ma • · » * · · · · • · · · · · · · • · · · · · · • * · · · · ·

........ ....... ··

Tímto způsobem se získá 4,06 g 1-(1,1-dimethylethyl)a 2-(fenylmethyl)-trans-4-[(fenylsulfonyl)amino]-1,2-pyrrolidindikarboxylátu molekulového vzorce C23H28N2O6S (M = 460,552 g), což odpovídá výtěžku 95 %.

3,83 g (8,31 mmol) Získaného sulfonamidu se smísí s 10 ml bezvodého methanolu.

Roztok se ochladí na 0 °C a při této teplotě se přidá 8,2 ml roztoku 10 mol/1 kyseliny chlorovodíkové v methanolu.

Roztok se 5 min míchá při 0 °C, načež se teplota nechá vzrůst na pokojovou teplotu.

Po 30 min se methanol odpaří za sníženého tlaku, reakční prostředí se několikrát vyjme v methanolu a následně v dichlormethanu. Hydrochlorid se potom krystalizuje z ethyletheru.

Tímto způsobem se získá 3,2 g fenylmethyl-trans-4-[(fenylsulfonyl)amino]-2-pyrrolidinkarboxylátu, hydrochloridu s molekulovým vzorcem C18H20N2O4S · HCl (M = 396,896 g), což odpovídá výtěžku 96 %.

Pod inertní atmosférou se 2,78 g (7 mmol) získaného hydrochloridu smísí s 28 ml dichlormethanu.

Reakční prostředí se potom ochladí přibližně na 0 °C až 5 °C, načež se přidá 2,15 ml TEA.

V míchání se pokračuje 15 min při teplotě pohybující se v rozmezí 0 °C až 5 °C a potom se přidá 0,46 ml difosgenu.

01-0127-03-Ma • ·

Reakční prostředí se udržuje při této teplotě 4 min, potom a se přidá 10% vodný roztok kyseliny vinné, reakční prostředí se naředí dichlormethanem, dekantuje, propláchne nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, suší nad bezvodým síranem hořečnatým a zahustí za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 3,1 g žlutého oleje, který se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 9:1 směsí dichlormethanu a ethylacetátu .

Izoluje se 1,82 g fenylmethyl-trans-1-(chlorkarbonyl)-4-[(fenylsulfonyl)amino]-2-pyrrolidinkarboxylátu s molekulovým vzorcem Ci9H₁₉ClN₂O₅S (M = 422,89 g) , což odpovídá výtěžku 61 %.

Pod inertní atmosférou se smísí 1,81 g (4,28 mmol) získaného karbamoylchloridu s 31 ml tetrahydrofuranu.

Získaný roztok se ochladí na -70 °C a potom se při této teplotě během 10 min přidá 4,7 ml 1M roztoku lithiumbis(trimethylsilyl)amidu v tetrahydrofuranu.

Reakční prostředí se míchá 45 min při -70 °C a potom se teplota nechá vzrůst na přibližně 0 °C. Reakční prostředí se udržuje při této teplotě 2 h a 30 min.

Potom se přidá 295 μΐ kyseliny octové.

Reakční prostředí se naředí dichlormethanem, potom se propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, roztokem fosfátového pufru při pH = 7 a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného.

Následuje sušení nad bezvodým síranem hořečnatým a zahuštění do sucha za sníženého tlaku.

• « » · « · • «

01-0127-03-Ma

Surový produkt se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití 95:5 směsi dichlormethanu a ethylacetátu jako eluční soustavy.

Tímto způsobem se získá 244 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce Ci₉H₁₈N₂O₅S (M = 386, 429 g) , což odpovídá výtěžku 14 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 400 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

2,15 (m) : O=C-CH-CH₂; 2,85 (d) a 3,08 (d) : O=C-N-CH₂;

3,62 (m) : O=C-CH-N-CH₂; 4,94 (s): O₂S-N-CH-CH₂; 5,16:

CO₂CH₂C₆H5; 7,34 (m) : C₆H₅; 7,57 (m) až 7,68 (m) a 8,03 (m) :

SO₂C₆H₅.

IR (CHCI3) : 1780, 1743, 1586, 1499 cm'¹.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [2M + Na]⁺ = 795;

[M + Na + CH₃CN]⁺ = 450; [M + Na]⁺ - 409; [M + H]⁺ = 387.

Příklad 9

Fenylmethyl-trans-3-benzoy1-4-methyl-2-oxo-l,3-diazabicyklo[2,2,1]heptan-6-karboxylát

Pod inertní atmosférou se smísí 18,69 g (58,52 mmol)

1-(1,1-dimethylethyl)

2-(fenylmethyl)-4-oxo-l,2-pyrrolidindikarboxylátu (popsaného v Chem. Pharm. Bull.

43(8)1302-1306 (1995)) molekulového vzorce

C₁₇H₂₁NO₅ (M = 319,361 g) a 500 ml bezvodého ethyletheru.

·· « « • ·

01-0127-03-Ma ·♦ ·· ** • · » · · # » · · • · ··«·· ·· • · * 4 · 9 9 9 9 * · · · ····

...............

Do získaného roztoku se přidá suspenze 10 g CeCl3 v 50 ml bezvodého ethyletheru.

Suspenze se míchá 30 min při 20 °C a potom ochladí na -60 °C.

Potom se přidá 20 ml 3M roztoku MeMgBr v ethyletheru.

Reakční prostředí se nechá reagovat 1 h při -60 °C a potom se teplota nechá během 30 min vzrůst na 0 °C. Neutralizace se provádí 10% vodným roztokem NH₄C1, načež následuje extrakce dichlormethanem a filtrace, organická fáze se propláchne vodou, suší nad bezvodým síranem hořečnatým a zahustí do sucha za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 19,33 g oleje, který se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu a terč.butylmethyletheru.

Tímto způsobem se získá 7,21 g 1-(1,1-dimethylethyl)a 2-(fenylmethyl)-cis-4-hydroxy-4-methyl-l,2-pyrrolidindikarboxylátu s molekulovým vzorcem C18H25NO5 (M = 335,404 g) , tj. výtěžek 36 %, a rovněž 2,5 g alkoholového epimeru.

Pod inertní atmosférou se smísí 3,17 g (9,45 mmol) získané sloučeniny a 70 ml dichlormethanu. Reakční prostředí se ochladí na 5 °C a po kapkách se přidá 2,3 ml TEA a následně 1,28 ml methansulfonylchloridu.

Reakční prostředí se míchá 45 min při 5 °C.

Následuje propláchnutí 10% vodným roztokem kyseliny vinné, potom roztokem fosfátového pufru při pH 7 a na závěr vodou.

• t ·· «« • · « · · «

01-0127-03-Ma

Organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a zahustí do sucha za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 3,9 g oleje, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Izoluje se 2,75 g 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-(fenylmethyl)-cis-4-methyl-4-[(methylsulfonyl)oxy]-1,2-pyrrolidindikarboxylátu molekulového vzorce C19H27NO7S (M = 413,494 g) , což odpovídá výtěžku 70 %.

Připraví se roztok 2,54 g (6,14 mmol) získaného mesylátu ve 40 ml dimethylformamidu.

Potom se při 20 °C přidá 519 mg (7,98 mmol) NaN₃, reakční prostředí se ohřeje na 50 °C a při této teplotě se udržuje 2 h. Po ochlazení se nalije do 250 ml vody a extrahuje 250 ml dichlormethanu. Organická fáze se propláchne vodou, potom suší nad bezvodým síranem hořečnatým a odpaří do sucha za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 2,4 g surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém, kdy se jako eluční soustava použije 95:5 směs dichlormethanu a ethylacetátu.

Izoluje se 1,66 g 1-(1,1-dímethylethyl) - a 2-(fenylmethyl)-trans-4-azído-4-methyl-l,2-pyrrolidindikarboxylátu molekulového vzorce C₁₈H₂₄N₄O₄ (M = 360,42 g) (titr přibližně 30 % hmotn.), což odpovídá výtěžku přibližně 25 %.

1,85 g Získaného azidu (tj . přibližně 1,7 mmol) se rozpustí v 18 ml toluenu.

• 4 ·· • * · « ·· ··«·

01-0127-03-Ma

• « «

• · ·

Potom se při 20 °C přidá 1,38 ml BusSnH a 84 mg AIBN.

Reakční prostředí se ohřeje na 75 °C a při této teplotě se udržuje po dobu 2 h.

Po odpaření toluenu následuje opětovné rozpuštění v ethylacetátu. Nasycený vodný roztok fluoridu draselného se míchá 30 min za pokojové teploty.

Reakční prostředí se odfiltruje přes filtr Clarcel, nechá usadit a organická fáze se vysuší nad bezvodým síranem hořečnatým.

Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získají 3 g oleje, který se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 9:1 směsí dichlormethanu a methanolu.

Izoluje se 560 mg 1- (1,1-dimethylethyl)- a 2-(fenylmethyl)-trans-4-amino-4-methyl-1,2-pyrrolidindikarboxylátu s molekulovým vzorcem C18H26N2O4 (M = 334,419 g) . Výtěžek je tedy kvantitativní.

Pod inertní atmosférou se smísí 578 mg (1,72 mmol) získaného aminu se 30 ml dichlormethanu.

Reakční prostředí se ochladí na 5 °C a po kapkách se přidá 290 μΐ TEA a potom se po kapkách přidá 240 μΐ benzoylchloridu.

V míchání při 5 °C se pokračuje 30 min.

Reakční prostředí se naředí dichlormethanem, propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, nasyceným vodným roztokem uhličitanu sodného a potom vodou, organická • · • · · · • ·

01-0127-03-Ma fáze se vysuš! nad bezvodým síranem horečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 950 mg oleje, který se purifikuje chromatografií za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se izoluje 732 mg 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-(fenylmethyl)-trans-4-(benzoylamino)-4-methyl-1,2-pyrrolidindikarboxylátu molekulového vzorce C25H30N2O5 (M = 438,528 g), což odpovídá výtěžku 97 %.

636 mg (1,45 mmol) Získaného amidu se rozpustí v 1,9 ml ethylacetátu, načež následuje ochlazení na přibližně 0 °C až 5 °C pomocí ledové lázně a potom se přidá 3,2 ml roztoku chlorovodíku při koncentraci 4,6 mol/1 v ethylacetátu.

Teplota se nechá vzrůst na 20 °C a rozpouštědlo se následně po 1 h odpaří za sníženého tlaku.

Hydrochlorid se potom krystalizuje z ethyletheru.

Tímto způsobem se získá 570 mg hydrochloridu fenylmethyl-trans-4-(benzoylamino)-4-methyl-2-pyrrolidinkarboxylátu molekulového vzorce C₂₀H22N₂O3 · HCl (M = 37 4,87 g) ve formě bílého prášku. Výtěžek je tedy kvantitativní.

Pod inertní atmosférou se rozpustí 100 mg (0,267 mmol) získaného hydrochloridu v 1,5 ml dichlormethanu.

Reakční prostředí se ochladí na přibližně 0 °C až 5 °C a potom se přidá 90 μΐ TEA.

Reakční prostředí se míchá 15 min při 5 °C a potom se přidá 20 μΐ difosgenu.

01-0127-03-Ma

V míchání se pokračuje 30 min při 5 °C.

Potom se reakční prostředí ošetří 10% vodným roztokem kyseliny vinné, extrahuje dichlormethanem, organická fáze se propláchne nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 130 mg oleje, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 9:1 směsí dichlormethanu a ethylacetátu .

Potom se izoluje 72 mg fenylmethyl-trans-4-(benzoylamino)-1-(chlorkarbonyl)-4-methyl-2-pyrrolidinkarboxylátu molekulového vzorce C21H21N2O4CI (M = 400,865 g) , což odpovídá výtěžku 67 %.

373 mg (0,930 mmol) Získané sloučeniny se rozpustí v 9 ml tetrahydrofuranu.

Roztok se potom ochladí na -70 °C a během 5 min se přidá 1 ml 1M roztoku lithiumbis(trimethylsilyl)amidu v tetrahydrofuranu.

Reakční prostředí se během 45 min nechá ohřát na 0 °C a potom se přidá 69 μΐ kyseliny octové.

Reakční prostředí se následně naředí dichlormethanem, propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, potom roztokem fosfátového pufru při pH = 7,0 a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného.

Organická fáze se vysuší nad bezvodým síranem hořečnatým, zahustí do sucha za sníženého tlaku, čímž se získá 330 mg surového produktu, který se purifikuje • ·

01-0127-03-Ma ···· ··· «· • · ····· · · · chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 98:2 směsí dichlormethanu a ethylacetátu obsahující 0,1 % obj. TEA.

Tímto způsobem se získá 123 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce C₂₁H₂₀N₂O₄ (M = 364,404 g) , což odpovídá výtěžku 36 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,76 (s):	ch₃;	2,11 (dd) a 2,	73 (ddd): N-CH-CH₂; 2,93
(dt) a 3,00	(d) :	N-CH₂; 3,96	(ddd); N-CH-CH₂; 5,21:
CO₂CH₂C₆H₅; 7,36	(m)	: CH₂C₆H₅; 7,4 3	(t) a 7,57 (tt) a 7,72

(d) : COC₆H₅.

IR(CHC1₃) : 1776, 1745, 1682, 1601, 1580, 1498 cm’¹.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [2M + Na]⁺ = 751;

[2M + H]⁺ = 729; [M + Na]⁺ = 387; [M + H]⁺ = 365.

Příklad 10

1-Propenyltrifenylfosfoniová sůl fenylmethyl-trans-2-oxo-3-(sulfooxy)-1,3-diazabicyklo[2,2,1]heptan-6-karboxylátu

Pod inertní atmosférou se rozpustí 15 g (46,71 mmol) 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-(fenylmethyl)-cis-4-hydroxy-l,2-pyrrolidindikarboxylátu (komerční produkt) molekulového vzorce C₁₇H₂3NO₅ (M = 321,377 g) v 225 ml bezvodého dichlormethanu.

« ·

01-0127-03-Ma • · · « · · • · ····· · · • · · · · · ·

.................

Do roztoku se přidá 5,42 ml 2,6-lutidinu. Následuje ochlazení na -7 0 °C a potom se během 5 min zavede 8,25 ml anhydridu kyseliny trifluormethansulfonové.

Reakční	prostředí	se míchá 10 min při -70 °C a potom
se při -70 °C	zavede 4,	43 g O-allylhydroxylaminu.
Reakční	směs se	potom nechá 27 h stát za	pokoj ové
teploty.
Reakční	směs se	naředí dichlormethanem,	potom se
propláchne 10% vodným	roztokem kyseliny vinné,	nasyceným

vodným roztokem NaHCCb a vodou.

Organická fáze se suší nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 23 g surového oleje, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém a postupně vymývá 95:5, 90:10 a následně 80:20 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Izoluje se 7,18 g 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-(fenylmethyl)-trans-4-[(2-propenyloxy)amino]-1,2-pyrrolidindikarboxylátu molekulového vzorce C20H28N2O5 (M = 376,456 g) , což odpovídá výtěžku 40 %.

3,25 g (8,63 mmol) Získané sloučeniny se rozpustí ve 3,5 ml ethylacetátu.

Reakční prostředí se ochladí na přibližně 0 °C až -5 °C a potom se přidá 19 ml a 4,6 mol/1 roztoku chlorovodíku v ethylacetátu.

Reakční prostředí se nechá 40 při teplotě přibližně 0 °C až 5 °C.

min reagovat za míchání

01-0127-03-Ma • ·

.................

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, načež následuje několikanásobné vyjmutí v diethyletheru za současné extrakce kapalného supernatantu.

Tímto způsobem se získá 2,54 g hydrochloridu ve formě bílé sraženiny, která se za míchání rozpustí v 55 ml dichlormethanu. Přidá se 7,3 ml 2N sody. Po dekantaci se organická fáze suší nad bezvodým síranem sodným.

Dichlormethan se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 2,12 g fenylmethyl-trans-4- [ (2-propenyloxy) amino] -2-pyr.rolidinkarboxylátu molekulového vzorce C15H20N2O3 (M - 276,337 g) ve formě oleje, tj . výtěžek 89 %.

Pod inertní atmosférou se rozpustí 4,14 g (15 mmol) získané sloučeniny v 1,5 1 acetonitrilu.

Reakční prostředí se ochladí na přibližně 0 °C až 5 °C a přidá se 1,14 ml difosgenu. Míchání se provádí 15 min za současného udržování teploty v rozmezí 0 °C až 5 °C, potom se postupně přidá 4,6 ml TEA a 1,83 g DMAP v 80 ml acetonitrilu.

Teplota se nechá vzrůst na pokojovou teplotu a reakční prostředí se nechá reagovat 26 h, načež se polovina rozpouštědla odpaří za sníženého tlaku.

Potom se na reakční prostředí působí 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně se prostředí extrahuje dichlormethanem. Organická fáze se propláchne nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

• » · · · · • · · · ·

01-0127-03-Ma • » • · · ·

Tímto způsobem se získá 43 g surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu obsahující 0,1 % TEA.

Tímto způsobem se získá 312 mg fenylmethyl-trans-2-oxo-3-(2-propenyloxy)-1,3-díazabicyklo[2,2,1]heptan-6-karboxylátu molekulového vzorce C16H18N2O4 (M = 302,33 g) , což odpovídá výtěžku 7 %.

Pod inertní (0,232 mmol) získané Následně se zavede

Pd(P(Ph)₃)4atmosférou se rozpustí 70,2 mg sloučeniny ve 2,3 ml dichlormethanu. 26,5 μΐ kyseliny octové a 134 mg

Reakční prostředí se nechá 40 min reagovat za pokojové teploty, potom teplota sníží na -20 °C a přidá se 2,96 ml roztoku S0₃-pyridinového komplexu při koncentraci 0,314 mol/1. Reakční prostředí se nechá 2 h a 30 min reagovat, načež se přidá dichlormethan a odpařování se provádí za sníženého tlaku, načež následuje vyjmutí ve 40 ml dichlormethanu a propláchnutí 5 ml vody. Organická fáze se separuje a suší nad bezvodým síranem sodným a na závěr se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 280 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém postupným vymýváním 80:20 směsí dichlormethanu a acetonu obsahující 0,1 % TEA a potom 50:50 směsí dichlormethanu a acetonu obsahující 0,1 % TEA.

Izoluje se 34,0 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C34H33N2O7SP (M = 644,689 g) ve formě žlutého oleje, tj. výtěžek 23 % .

• ·

01-0127-03-Ma • ·

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 400 MHz, chemické posuny píku v ppm a multiplicita:

2,00	(m) a 2,48	(m) : CH2.-CH-C=O; 2,72	(d) a 3,12	(s) :
CH-CH2-N;	3,75 (m) :	CH₂-CH-C=O₂; 4,71 (s)	CH-CH₂-N;	5,18
[AB] CH₂-	C₆H₅; 7,35 (m	) : CH₂-C₆H5_ a 2,2 9 (m) :	CH₃-CH=CH;	6, 62

a 7,21 CH₃-CH=CH; 7,60 až 7,85 P(C₆H₅)₃.

MS (negativní a pozitivní elektrosprej) m/z:

[Maniont] = 341;

[Mkationt]⁺ = 303.

Příklad 11

1-Propenyltrifenylfosfoniová sůl methyl-trans-2-oxo-3-(sulfooxy)-1,3-diazabicyklo[2,2,1]heptan-6-karboxylátu

Postup se provádí stejně jako v příkladu 10, ale vychází z 207 mg 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-methyl-cis-4-hydroxy-1,2-pyrrolidindikarboxylátu.

Tímto způsobem se získá 12 mg požadovaného produktu obecného vzorce C7H10N2O7S (M = 266,231 g) .

MS (negativní a pozitivní elektrosprej) m/z:

[Maniont] = 265; [Mkationt]⁺ = 303.

• · • · • ·

01-0127-03-Ma • ·

Příklad 12a

Difenylmethyl-trans-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-3-karboxylát

Pod inertní atmosférou se smísí 8 ml dichlormethanu a 347 mg (1 mmol) difenylmethyl-cis-5-hydroxy-3-piperidinkarboxylátu, hydrochloridu (popsaného v Acta Chem. Scand. Ser. B 35(4) str. 289 až 294).

Reakční prostředí se ochladí na 0 °C a potom se přidá 346 μΐ TEA a 72 μΐ difosgenu.

Reakční prostředí se nechá 15 min reagovat za současného udržování teploty na 0 °C, potom se odpaří rozpouštědlo za sníženého tlaku, reakční prostředí se vyjme ve 25 ml bezvodého toluenu a filtrací zbaví TEA, hydrochloridu.

Do filtrátu se přidá 553 μΐ TEA a vše se vaří 4 h pod zpětným chladičem.

Reakční prostředí se následně naředí ethylacetátem a propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, potom nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a organická fáze suší nad bezvodým síranem hořečnatým.

Za sníženého tlaku se provede odpaření a izoluje se 339 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 70:30 směsí toluenu a ethylacetátu.

Izoluje se 146 mg očekávané sloučeniny (M = 337,378 g), což odpovídá výtěžku 43 %.

01-0127-03-Ma	• · · · ·· ···· • · · · · · · • · · · · · · • · · * · 59	• · · · · • · • · · • · · • · · ·
NMR protonové spektrum
V CDC1₃ při 250 MHz,	chemické posuny píku v	ppm a
multiplicita:
2,15 (ddd) a 2,73	(dq) : N-CH₂-CHO-CH₂;	2,92	(tt) :
O2C-CH-; 3,00 (d) a 3,45	(d) : N-CH₂-CHO; 3,48	(dd)	a 4,07
(dd) : N-CH₂-CH-CO₂; 4,79	(dt) : N-CH₂-CHO;	6, 90	(s) :

COs-CH-(C₆H₅)₂; 7,33 (m) : (C₆H₅)₂.

IR(CHC1₃) : 1792, 1734, 1600, 1585, 1497 cm^-1.

MS (El) m/z: [M]⁺=337, 292, 183, 167.

Přiklad 12b

Kyselina trans-Ί-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-3-karboxylová

Smísí se 320 mg sloučeniny získané v příkladu 12a, 17 ml acetonu a 70 mg Pd/C katalyzátoru při koncentraci 20 % hmotn.

Za normálního tlaku a pod vodíkovou atmosférou se provádí míchání.

Po uplynutí 2 h a 30 min se přidá 70 mg katalyzátoru a vše se nechá reagovat 1 h a 30 min, načež se reakční prostředí přefiltruje.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, a tak se získá 350 mg surového produktu, který se krystalizuje z pentanu.

01-0127-03-Ma

Provede se filtrace, čímž se izoluje 158 mg požadovaného produktu molekulového vzorce C₇H₉NO₄(M = 171,154 g) ve formě šedé pevné látky. Odpovídající výtěžek je 89 %.

NMR protonové spektrum

V DMSO při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

2,10 (ddd) a 2,43 (dm): N-CH₂-CHO-CH₂; 2,83 (tt)

O₂C-CH-; 3,13 (d) a 3,27 (dm): N-CH₂-CHO; 3,40 (dd) a 3,72 (d) : N-CH₂-CH-CO₂H; 4,81 (m) : N-CH₂-CHO; 12,54 (br s): CO₂H.

IR (Nujol) : 1782, 1692 cm'¹.

MS (El) m/z: [M] ⁺ = 177, 155, 127, 82, 70.

Příklad 12c (4-Nitrofenyl)methyl-trans-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-3-karboxylát

Pod inertní atmosférou se smísí 30 mg (0,175 mmol) kyseliny získané v příkladu 12b a 0,5 ml dichlormethanu. Potom se přidá 26,8 mg 4-nitrobenzylového alkoholu, 2,2 mg DMAP a 37 mg EDCI.

Reakční prostředí se nechá za míchání a za pokojové teploty reagovat 2 h.

Organická fáze se následně naředí dichlormethanem, propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a roztokem fosfátového pufru při pH 7.

toto ···· · · · · · · « · · * · · · • · · · · · · · ·

01-0127-03-Ma • ·

Po vysušení organické fáze nad bezvodým síranem sodným a po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 57 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené směsí 85:15 toluenu a ethylacetátu.

Produkt se následně krystalizuje ze směsi ethyletheru a pentanu za vzniku 34 mg bílých krystalů požadované sloučeniny (M = 306,277 g). Odpovídající výtěžek činí 63,5 %.

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

2,14 (ddd) a 2,84 (dm): N-CH₂-CHO-CH₂; 2,90 (tt) O2C-CH-; 3,10 a 3,49 (dm): N-CH₂-CHO; 3,43 (dd) a 4,14 (bd) : N-CH2-CH-CO2; 5,27 [AB] : CO₂-CH₂-C₆H₅; 7,56 a 8,24 [ΑΑ'ΒΒ']: C-C₆H₅-NO₂.

IR (CHCI3) : 1799, 1789, 1741, 1609, 1526, 1495 cm’¹.

MS (El) m/z: [M]⁺: 306, 170, 136, 126, 106, 82.

Příklad 13

6-(Fenylmethyl)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

Stupeň A:

30,7 ml TEA Se přidá při přibližně 0 °C až 5 °C do roztoku 20,71 g 3-aminopyridinu ve 200 ml methylenchloridu, načež se během 15 min po kapkách přidá 25,5 ml

01-0127-03-Ma ·· ·· · · · · ·· » · · · · · · • · · ···· · ··· · ··· · • ·· · · · · o • ···· ·· ··· ·· ·· benzoylchloridu a reakční prostředí se nechá ohřát zpět na pokojovou teplotu. Po 1 h míchání se reakční prostředí propláchne vodou, následně nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, načež se organická fáze vysuší nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Tímto způsobem se získá 42,29 g očekávaného krystalického produktu (M = 198,226 g).

Stupeň B:

4,3 ml Koncentrované kyseliny chlorovodíkové a 500 mg rhodia na hliníku při koncentraci 5 % hmotn. se přidá do roztoku 10 g produktu získaného ve stupni A ve 200 ml methanolu. Reakční prostředí se umístí pod vodíkovou atmosférou při tlaku 6 MPa až 11 MPa na dobu 15 h.

Reakční směs se přefiltruje, propláchne methanolem, načež se filtrát zahustí za sníženého tlaku. Získá se hydrochlorid očekávaného produktu ve směsi s 10 % hydrochloridu výchozího produktu.

Produkt se vyjme v 250 ml methylenchloridu a přidá se 1,1 ekviv. IN roztoku sody. Po 15 min míchání se methylenchlorid dekantuje, organická fáze se propláchne vodou, vysuší a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 92:8:3 směsí methylenchloridu, methanolu a triethylaminu.

Tímto způsobem se získá 7,4 g očekávaného krystalického produktu, tj. výtěžek 72 %.

01-0127-03-Ma

Stupeň C:

N- (Fenylmethyl) -3-piperidinainin g Produktu získaného způsobem popsaným ve stupni B se rozpustí v 600 ml 1, 2-dimethoxyethanu. V průběhu 30 min se do roztoku přidá 14,8 g hydridu hlinitolithného. Reakční prostředí se 16 h ohřívá za míchání a pod inertním plynem na 75 °C až 80 °C, načež se ochladí na 0 °C a během 45 min se přidá 11 ml vody, aniž by teplota vzrostla nad 12 °C. Reakční prostředí se míchá 10 min, přefiltruje a sraženina se propláchne methylenchloridem. Filtrát se zahustí za sníženého tlaku. Získá se 17,8 g očekávaného produktu ve formě oleje, který se předestiluje za sníženého tlaku (teplota varu: 114 °C až 121 °C/80 Pa) . Tímto způsobem se izoluje 16 g očekávaného produktu, tj. výtěžek 86 %.

Stupeň D:

6-(Fenylmethyl)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

1,06 g Produktu získaného ve stupni C se rozpustí ve 28 cm³ toluenu, následně ochladí na 0 °C a pod inertním plynem se přidá 337 μΐ difosgenu. Potom se teplota nechá vzrůst a 2 h se udržuje na 20 °C. Reakční prostředí se zahustí za sníženého tlaku, načež se zbytek chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém postupným vymýváním 95:5 směsí methylenchloridu a acetonu, následně 80:20 směsí a na závěr 92:8:3 směsí methylenchloridu, methanolu a triethylaminu a získá se 362 mg očekávaného produktu C13H16N2O (M = 216,85 g) , tj . výtěžek 30 ®·

01-0127-03-Ma

CPV/Hmotnostní spektrometrie (El) m/z: [M]⁺ = 216, 125, 91.

IR (CHC1₃) : 1718 , 14 98 cm'¹.

Příklad 14

6-Benzoyl-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

Stupeň A:

Kyselina 3-(benzylamino)-1-píperidinkarboxylová g Produktu získaného ve stupni B příkladu 13 se rozpustí v 1,25 1 bezvodého toluenu pod dusíkovou atmosférou, načež se přidá 3,4 ml TEA a během 3 min se při teplotě 0 °C až 5 °C zavede 1,47 ml difosgenu. Po 20 min při 0 °C až 5 °C se reakční prostředí ohřeje na 20 °C a při této teplotě se za míchání udržuje po dobu 75 min, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 8:2 směsí methylenchloridu a acetonu, čímž se získá 3,44 g očekávaného produktu (výtěžek 52,6 %) .

Stupeň B:

6-Benzoyl-l,6-diazabicyklo[3,2,l]oktan-7-on

Pod dusíkovou atmosférou se zavede 48 mg hydridu sodného v 50% olejové disperzi a 20 ml THF. Reakční °C až 5 °C a najednou ve stupni A.

01-0127-03-Ma prostředí se ochladí na přibližně se přidá 266 mg produktu získaného

Teplota se nechá vzrůst na pokojovou teplotu a přidá se 60 μΐ kyseliny octové a 10 ml fosfátového pufru při pH 7.

Potom se přidá malé množství ethylacetátu, načež se reakční prostředí dekantuje a reextrahuje ethylacetátem. Organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a potom se rozpouštědla odpaří za sníženého tlaku.

Surový produkt se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené dichlormethanem obsahujícím 2 % acetonu.

Tímto způsobem se získá 143 mg požadovaného produktu CL3H12N2O2 (M = 228,25 g) . Odpovídající výtěžek činí 62 %.

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,20 až 2,15 (m) a 2,42 (m): NCH-CH₂-CH₂-; 2,80 (d) až 2,93 (d) ; 3,11 (m) ; 3,28 až 3,58 (m) : CH₂-N; 4,54 (m) : CH-N; 7,43 (m) ; 7,55 (m) ; 7,69 (m) : C₆H₅.

IR (CHCI3) : 1758, 1672, 1605, 1586, 1492 cm’¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 230, 125, 105, 77.

♦ ř ·«»*

4 444*

01-0127-03-Ma

44

4 « * 9 · ’

4 4 4 · 4 *

4 4 4 « * 4 ·4

44444*44 4« 444

Příklad 15

Kyselina 7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-6-octová

Stupeň A:

5-[(1,1-Dimethylethyl)dimethylsilyl]-1,6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-7-on

843 mg Lithia se umístí pod dusíkovou atmosférou a 320 ml amoniaku se kondenzuje při -70 °C. V průběhu 10 min se při -70 °C přidá 7,56 g (34,8 mmol) produktu získaného v příkladu 13 ve 160 ml tetrahydrofuranu. Míchání se provádí 5 min, potom se pod proudem dusíku destiluje amoniak za pomalého ohřívání na 20 °C a do získané suspenze se pozvolna přidá 7,9 g (1,1-dimethylethyl)dimethylsilylchlorídu v 10 cm³ tetrahydrofuranu při 20 °C a vše se následujících 10 min míchá. Přidá se 160 cm³ ethylacetátu a následně 60 cm³ a 10% vodného roztoku kyseliny vinné. Provede se dekantace, po které následuje reextrakce ethylacetátem, organická fáze se propláchne vodou, vysuší nad sulfátem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získaný olej se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém s 10 % vody, kdy se jako eluční soustava použije nejprve methylenchlorid a následně 8:2 směs methylenchloridu a acetonu a získá se 3,04 g očekávaného produktu (výtěžek: 36,2 %) .

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

99 ·* ···* >· ··»·

4*44 4 4 ·· · « · « « · 4 · · 4 4

4 · · · · 4 · * * f · 44 4 · · · 4

Λ»»· ···· ·· ··» ·<· ·«

01-0127-03-Ma

0,21 (s) a 0,40 (s): SiCH₃; 0,97 (s) : SitBu; 1,5 až

1,8 (m) a 2,07 (m) : N-CH-CH₂-CH₂; 2,85 (d) a 3,32 (m) :

-CH-CH₂-N; 2,93 (dt) a 3,32 (m) : -CH₂-CH₂-N; 3,65 (m) : CH-N.

IR (CHC1₃) : 1710, 8 42 cm’¹.

MS (El) M/z: [M]⁺: 240, 225, 183, 100, 83, 57.

Stupeň B:

Fenylmethyl-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-6-acetát

1,44 g (5,99 mmol) Produktu získaného ve stupni A se rozpustí pod dusíkovou atmosférou v 14,4 ml tetrahydrofuranu, načež se přidá 941 μΐ fenylmethylbromacetátu a následně po kapkách 6 ml 1M roztoku tetra-n-butylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu. Reakční prostředí se míchá 10 min při 20 °C, načež se naředí 15 ml ethylacetátu a přidá se 5 ml vodného roztoku fosfátového pufru při pH = 7. Reakční prostředí se dekantuje a reextrahuje ethylacetátem, organická fáze se propláchne vodou, suší nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Olejový zbytek se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém s 10 % vody za použití eluční soustavy tvořené 8:2 směsí methylenchloridu a acetonu. Získá se 140 mg očekávaného produktu. Odpovídající výtěžek činí 9 %.

IR (CHCI3) : 1746, 1720 cm’¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 274, 183, 155, 139, 91, 83.

01-0127-03-Ma

Stupeň C:

Kyselina 7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-6-octová

137 mg Produktu získaného ve stupni B se rozpustí v 1,5 ml ethylacetátu a potom se přidá do roztoku 14 mg palladia na uhlíku při koncentraci 10 % a umístí pod vodíkovou atmosférou. Po 15 min se přidá dalších 15 mg palladia na uhlíku a reakční prostředí se 15 min míchá. Katalyzátor se odfiltruje, zbytek se propláchne ethylacetátem a následně acetonem a methanolem a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Celkem se získá 68 mg surového produktu, který se krystalizuje z etheru. Tímto způsobem se získá 58 mg očekávaného produktu molekulového vzorce Ci₅Hi₈N₂O3 (M = 274,321 g) . Odpovídající výtěžek činí 63 %.

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 400 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,48 (m) , 1,63 (m) , 1,73 (m) a 1,86 (m) : N-CH-CH₂-CH₂; 2,85 až 3,00 (m) , 3,14 (dm) a 3,64 (m) : CH₂-N-CH₂ a CH-N; 3,78 a 4,14 [AB] : CON-CH₂-CO.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 184, 139, 125, 111, 97, 83.

• · · · • · · ·

01-0127-03-Ma • ·

Příklad 16

7-Oxo-N-fenyl-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-6-karboxamid

Pod inertním plynem se smísí 1 ml tetrahydrofuranu a 99 mg (0,41 mmol) sloučeniny získané ve stupni A příkladu 15.

Postupně se přidá 50 μΐ fenylisokyanátu a potom 450 μΐ 1M roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v THF.

Reakční prostředí se nechá reagovat 10 min, načež se naředí ethylacetátem a propláchne vodou. Reakční prostředí se dekantuje a organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Tímto způsobem se získá 140 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití 90:10 směsi dichlormethanu a ethylacetátu jako eluční soustavy.

Tímto způsobem se izoluje 21 mg titulní sloučeniny s molekulovým vzorcem C13H15N3O (M = 245,283 g) , což odpovídá výtěžku 20 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 250 MHz, chemické posuny plků v ppm a multiplicita:

1,78 (m) , 2,02 (m) a 2,17 (m) : N-CH-CH₂-CH₂; 2,88 (d) , 3,13 (dt) a 3,42 (m) : CH₂-N-CH₂; 4,49 (m) : CH-N; 7,11 (t); 7,34 (t) a 7,54 (d) : CgHs; 10,05: NH.

IR (CHCI3) : 3302, 3266, 1734, 1700, 1602, 1553, 1501 cm^-1.

MS (El) m/z: [M]⁺: 245, 153, 126, 119, 98, 92.

• · • · · ·

01-0127-03-Ma

Přiklad 17a

6- [1- (Fenylmethyl) -lfí-tetrazol-5-yl] -1, 6-diazabicyklo[ 3,2,1]oktan-7-on

480 mg (2 mmol) Sloučeniny získané ve stupni A příkladu 15 se umístí pod inertní plyn.

Potom se přidá roztok 712 mg 5-fluor-1-(fenylmethyl)-ΙΗ-tetrazolu v 1,5 ml tetrahydrofuranu a následně 2 ml 1M roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v THF. Reakční prostředí se nechá reagovat 1 min.

Reakční prostředí se následně naředí ethylacetátem, propláchne vodou a dekantuje, organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 1,06 g olejového produktu, který se chromatografíčky purifikuje na oxidu křemičitém 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se získá 143 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce C14H16N6O (M = 284,324 g) ve formě amorfního bílého produktu. Odpovídající výtěžek činí 25 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,80 (m) , 2,04 (m) a 2,67 (m) : N-CH-CHg-CHz; 2,83 (d) , 2,85 (dm), 3,10 (dd) a 3,44 (dd) : CHz-N-CH^; 3,99 (m) : CH-N; 5,63 a 5,88 [AB] : CgHs-CH^; 7,18 (m) a 7,32 (m) C₆H₅.

01-0127-03-Ma

Příklad 17b

6-(lH-Tetrazol-5-yl)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

Smísí se 120 mg produktu získaného v příkladu 17a a 2,4 ml 90:10 směsi methanolu a ethylacetátu, načež se přidá 2,4 ml THF až do dosažení úplného rozpuštění.

Potom se přidá 24 mg palladiového katalyzátoru na uhlíku při koncentraci 10 % a reakční prostředí se míchá pod vodíkovou atmosférou. Po 3 h reakce se katalyzátor odfiltruje, zbytek se propláchne směsí tetrahydrofuranu a methanolu a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Produkt se následně krystalizuje z ethyletheru.

Tímto způsobem se získá 72 mg titulní sloučeniny molekulového vzorce C7H₁₀N₆O (M = 194,198 g) ve formě bílého krystalického produktu. Odpovídající výtěžek činí 88 %.

NMR protonové spektrum

V DMSO při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,63 (m) , 1,89 (m) a 2,07 (m) : N-CH-CH2.-CH2.; 3,14 až

3,20 (m) a 3,43 (m) : CH₂-N-CH₂; 4,51 (m) : CH-N.

IR (Nuj ol) : 1744, 1594 cm“¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 194, 165, 124, 111, 98, 83, 68, 56, 41.

• · · · • · • · · ·

01-0127-03-Ma

Příklad 18

6-Acetyl-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

140 mg (0,582 mmol) Sloučeniny získané ve stupni A příkladu 15 se rozpustí v 1,4 ml THF.

Přidá se 55 μΐ anhydridu kyseliny octové a následně 0,58 ml 1M roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v THF.

Reakční prostředí se následně naředí ethylacetátem, propláchne vodou a dekantuje, organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 116 mg surového oleje, který se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém 80:20 směsí dichlormethanu a acetonu.

Tímto způsobem se získá 18 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C₈Hi2N₂O₂ (M = 168,196 g) , což odpovídá výtěžku 18 %.

NMR protonové spektrum

V DMSO při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,65 až 2,20 (m) : N-CH-CH₂-CH₂; 2,54 (s) : CH₃CO-N;

2,83 (d), 3,33 (dm), 3,10 (m) a 3,45 (dd): CH₂-N-CH₂;

4,55 (m): 0=C-N-CH.

IR (CHCI3) : 1758, 1696 cm'¹.·

MS (El) m/z: [M]⁺ = 168, 140, 126, 98, 43.

01-0127-03-Ma

Příklad 19a

6-(Fenylmethoxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

44,02 g (0,22 mol) 1,l-Dimethylethyl-3-oxo-l-piperidinkarboxylátu (C10H17NO3, M = 199,251 g) (popsaného v J. Med. Chem. 1986, 29, str. 224 až 229) se rozpustí v 440 ml ethanolu.

Potom se přidá 38,79 g O-benzylhydroxylaminu, hydrochloridu. Do suspenze se potom po kapkách zavede 54 ml pyridinu.

Reakční prostředí se nechá reagovat za míchání při přibližně 25 °C 4 h, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku. Reakční prostředí se vyjme směsí dichlormethanu a ethylacetátu, přefiltruje a propláchne dichlormethanem a následně směsí dichlormethanu a ethylacetátu. Filtrát se potom zahustí do sucha za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 69,8 g světle žlutého oleje, který se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém. Jako eluční soustava se použije 80:20 směs cyklohexanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se izoluje 57,21 g 1,l-dimethylethyl-3-[(fenylmethoxy)imino]-1-piperidinkarboxylátu s molekulovým vzorcem C17H24N2O3 (M = 304,39 g) ve formě velmi bledě žlutého oleje. Odpovídající výtěžek činí 85 %.

24,82 g (0,0815 mmol) Získaného oximu se pod dusíkem rozpustí ve 163 ml ethanolu ochlazeného na -10 °C. Potom se přidá 25 ml boran-pyridinového komplexu a následně po kapkách, během 1 h a 15 min, 204 ml 2N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Roztok se míchá 1 h a 15 min při -5 °C,

01-0127-03-Ma

.............

potom se ošetří 100 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a následně 35 g uhličitanu sodného, které se přidají v malých částech. Hodnota pH se potom pohybuje v rozmezí 7 až 8.

Reakční prostředí se extrahuje ethylacetátem.

Organické fáze se sloučí, vysuší nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Tímto způsobem se získá 39,0 g bezbarvé olejové kapaliny, která se vyjme ve 400 ml ethylacetátu.

Roztok se propláchne 0,05N roztokem kyseliny chlorovodíkové, načež se organické fáze sloučí a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Izoluje se 35,5 g olejové bezbarvé kapaliny, která se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 95:5 směsí dichlormethanu a ethylacetátu a následně 80:20 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se izoluje 17,89 g 1,l-dimethylethyl-3-[(fenylmethoxy)amino]-1-piperidinkarboxylátu molekulového vzorce Ο₁₇Η₂6Ν₂θ3 (M = 306,41 g) ve formě bezbarvého oleje. Odpovídající výtěžek činí 72 %.

6,72 g (21,9 mmol) Získaného piperidinu se rozpustí ve 22 ml ethylacetátu ochlazeného na -10 °C. Během 30 min se po kapkách přidá 28 ml 4,0 mol/1 roztoku bezvodé kyseliny chlorovodíkové v ethylacetátu.

Po 1 h při 0 °C se přidá 40 ml ethyletheru, dihydrochloridová sraženina se odfiltruje a propláchne ethyletherem.

01-0127-03-Ma

...............

Tímto způsobem se získá 3,87 g bílé pevné látky.

Dalších 1,80 g požadovaného produktu se získá krystalizaci filtrátu.

Získaný produkt se vyjme v 60 ml IN roztoku sody a ve 120 ml ethylacetátu. Po dekantaci se vodná fáze nasytí chloridem sodným a následně dvakrát extrahuje ethylacetátem. Organické fáze se sloučí a suší nad bezvodým síranem hořečnatým, načež se zahustí do sucha za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 3,67 g N-(fenylmethoxy)-3-piperidinaminu s molekulovým vzorcem C12H18N2O (M = 206,29 g), což odpovídá výtěžku 81 %.

518 mg (2,5 mmol) Získané sloučeniny se rozpustí v 5 ml bezvodého dichlormethanu a potom se přidá 0,5 ml TEA.

Získaná bělavá suspenze se ochladí na -65 °C a potom se během 15 min přidá 12,5 ml 0,10 mol/1 roztoku difosgenu v dichlormethanu.

Po 45 min se bezbarvý roztok naředí 15 ml dichlormethanu a ošetří 15 ml vody.

Prostředí se nechá usadit a potom se vodná fáze extrahuje 20 ml dichlormethanu.

Sloučené organické fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a potom zahustí do sucha za sníženého tlaku. Tímto způsobem se získá bledě žlutý olej, který se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí ethylacetátu a následně 80:20 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

01-0127-03-Ma • · · ·

...............

Tímto způsobem se izoluje 196 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce Ci₃Hi₆N₂O₂, (M = 232,28 g) ve formě bezbarvého oleje. Odpovídající výtěžek činí 34 %.

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,59 (m) a 1,93 až 2,18 (m) : N-CH-CH₂-CH₂; 2,73 (dt), 2,94 (dt) , 3,17 (dt) a 3,40 (dd) : CH₂-N-CH₂; 3,29 (t) : N-CH; 4,89 (d) : N-O-CHz-(C₆H₅) ; 7,38: CgHs·

IR (CHCI3) : 1747, 1498 cm'¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 232, 91.

Přiklad 19b

6-(Acetyloxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on mg (0,41 mmol) Sloučeniny získané v příkladu 19a se rozpustí v 5 ml methanolu, vmíchá se 8 mg palladia na uhlíku při koncentraci 10 % hmotn., načež se suspenze umístí při 25 °C a normálním tlaku na 1 h pod vodíkovou atmosféru a po uplynutí této doby se katalyzátor odfiltruj e.

Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 70 mg bílých krystalů.

Krystaly se vyjmou ve 2 ml bezvodého dichlormethanu. Roztok se pod dusíkem ochladí na -10 °C. Potom se přidá 70 μΐ pyridinu a následně 40 μΐ anhydridu kyseliny octové a míchání se provádí 20 min. Reakční prostředí se zahustí za

01-0127-03-Ma • ·

A 4 · · · · ·

A A A 4 · A A · · · sníženého tlaku a získá se 75 mg bílých krystalů, které se purifikují na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 80:20 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Izoluje se 49 mg očekávané sloučeniny (M = 184,20 g) ve formě bílé pevné látky. Odpovídající výtěžek činí 65 %.

NMR protonové spektrum

V CDCÍ3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,60 až 2,2: N-CH-CH₂~CH₂; 2,24 (s): CH₃; 2,95 (d) a

3,54 (dm): N-CH₂-CH; 3,07 (dt) a 3,54 (br dd) : N-CH₂-CH₂;

3,94 (bt) : O=C-N-CH.

IR (CHC1₃) : 17 98 , 17 64 cm¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 184, 142, 125, 43.

Příklad 19c

6-(Benzoyloxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

Postup se provádí podobným způsobem jako v příkladu 19b, ale vychází se z 205 mg sloučeniny připravené v příkladu 19a a 200 mg anhydridu kyseliny benzoové.

Tímto způsobem se získá 64 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce Ci₃H₁₄N₂O₃ (M = 246,27 g) , tj . výtěžek 30 %.

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

01-0127-03-Ma • · · « ··· ·· · • · ····· · · ·

1,64 až 1,95 (m) a 2,10 až 2,35 (m) : CH-CH₂-CH₂;

3,02 (d) a 3,65 (dm): N-CH₂-CH; 3,13 (dt) a 3,55 (br dd) :

N-CH₂-CH₂; 4,09 (bt): OC-N-CH; 7,49 (m) : 7,65 (tt) ;

8,12 (m) : C₆H₅.

-w·*

IR (CHC1₃) : 1774, 1756, 1602, 1585, 1495 cm’¹.

MS (El) m/z: [M] ⁺ = 246, 105, 77.

Příklad 19d

6-(1-Oxopropoxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

Postup se provádí podobným způsobem jako v příkladu 19c, ale vychází ze 163 mg sloučeniny připravené v příkladu 19a a 70 μΐ propionylchloridu.

Tímto způsobem se získá 17 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce C9H14N2O3 (M = 198,23 g) , t j. výtěžek 12 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,25 (t) : O=C-CH₂-CHj_; 1,65 (m) , 1,78 (m) a 2,10 (m) :

N-CH-CH2-CH2; 2,52 (m) O=C-CH2-CH₃; 2,94 (d) a 3,55 (br d) :

N-CH2-CH; 3,07 (dt) a 3,48 (dd) : N-CH2_-CH₂; 3,93 (m) :

N-CH₂-CH.

IR (CHCI3) : 17 92, 17 63 cm'¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 198, 170, 142, 125, 97, 57.

01-0127-03-Ma

Přiklad 19e

6-[[(4-Methylfenyl)sulfony1]oxy]-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

Postup se provádí podobným způsobem jako v příkladu 19d, ale vychází ze 139 mg sloučeniny připravené v příkladu 19a a 126 mg tosylchloridu.

Tímto způsobem se získá 77 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce C13H16N2O4S (M = 296, 35 g) , t j . výtěžek 44 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,55 a 2,99 (m) : N-CH-CHz-CH^; 2,45 (s): CH₃; 2,89 (d) , 3,00 (dt), 3,29 (dt) a 3,39 (dd): CH2.-N-CH2.; 4,04 (m) :

N-CH; 7,35 a 7,91 [ΑΑ'ΒΒ'] CH₃-C₆H4-SO₂ IR (CHCI3) : 1775, 1599, 1495, 1383, 1193, 1180 cm'¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 296, 155, 141, 125, 91.

Příklad 19f

6-[(Methylsulfony1)oxy]-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

Postup se provádí podobným způsobem jako v příkladu 19e, ale vychází z 211 mg sloučeniny připravené ve stupni 19a a 80 μΐ mesylchloridu.

φ * * φ

01-0127-03-Ma • φ

Tímto způsobem se molekulového vzorce výtěžek 25 %.

získá 50 mg očekávané sloučeniny C₁₇H₁₂N₂O₄S (M = 220,25 g) , tj .

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,56 a 2,38 (m) : N-CH-CH^-CPb; 3,00 (d) , 3,12 (dt) a

3,49 (M) : N- (CH₂ ) ₂; 3,26 (s) : CH₃; 4,12 (m) : N-CH.

IR (CHCI3) : 1775, 1381, 1187 cm’¹.

MS (El) m/z: [M] ⁺ = 220, 141, 125, 97, 79.

Příklad 19g

6-[[(4-Nitrofenyl)sulfony1]oxy]-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

Postup se provádí podobným způsobem jako v příkladu 19f, ale vychází z 270 mg sloučeniny připravené v příkladu 19a a 283 mg 4-nítrobenzensulfonylchloridu.

Tímto způsobem se získá 205,5 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce C₁₂Hi3N₃O6S (M = 327,32 g) , tj . výtěžek 54 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

·· ···«

01-0127-03-Ma • « · · ««··«*· ·< · · · » « · ti · ·

1,64 (dt), 1,84 (m) , 1,99 (m) , 2,31 (dm): NCH-CH2.-CH2;

2,94 (d), 3,30 (dt), 3,04 (dt) , 3,40 (br dd) : N(CřU.)₂; 4,14: O--C-N-CH; 8,25 a 8,41 [ΑΑ'ΒΒ']: NO₂-C₆H4.SO₂.

IR (CHCI3) : 1776, 1610, 1590, 1538, 1393, 1191 cm'¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 327, 186, 141, 125, 111.

Přiklad 20

6-[[(4-Methylfenyl)sulfonyl]amino]-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on g (25,1 mmol) 1,l-Dimethylethyl-3-oxo-l-piperidinkarboxylátu (popsaného v J. Med. Chem. 1986, 29, str. 224 až 229) (C10H17N03, M = 199,251 g) se rozpustí v 50 ml dichlormethanu.

Potom se do roztoku přidá 4,67 g tosylhydrazinu a vše se nechá reagovat 2 h za míchání, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 9,56 g 1,l-dimethylethyl-3-[2-[(4-methylfenyl)sulfonyl]hydrazono]-1-piperidinkarboxylátu molekulového vzorce Ci₇H₂₅N3O₄S (M = 367,47 g) , což odpovídá kvantitativnímu výtěžku.

Pod inertním plynem se smísí 4,5 g (12,2 mmol) získané sloučeniny, 90 ml 50:50 směsi methanolu a tetrahydrofuranu a pár zrnek bromkresolové zeleně.

Potom se přidá 1,62 g NaBH₃CN, načež se reakční prostředí ochladí na 0 °C až 5 °C a zavede se roztok 0,7 mol/1 plynného chlorovodíku v methanolu takovým

01-0127-03-Ma ·» »*r· ·« ·· ···* « c » * » * > 5» · » · ····· · · * • * * » · · e < * t « ·· ···«·

9999 9999 99 999 91 99 způsobem, aby zůstala pH hodnota prostředí zachována v rozmezí 3,8 až 5,4.

Reakční prostředí se nechá 2 h a 30 min reagovat za míchání.

Dvě třetiny rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku, načež se přidá 200 ml dichlormethanu a prostředí se propláchne nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného.

Tímto způsobem se získá 4,48 g 1,l-dimethylethyl-3-[2-[(4-methylfenyl)sulfonyl]hydrazino]-1-piperidinkarboxylátu molekulového vzorce C17H27N3O4S (M = 369,486 g) .

Odpovídající výtěžek činí 99 %.

Pod inertním plynem se při 0 °C smísí 4,48 g získané sloučeniny a 9 ml ethylacetátu.

Přidá se 30 ml 4 mol/l roztoku plynného chlorovodíku v ethylacetátu, míchání se provádí 15 min, načež následuje filtrace a hydrochlorid se propláchne ethylacetátem. Sušení se provádí za sníženého tlaku a získá se 3,48 g 2-(3-piperidinyl)hydrazidu, dihydrochloridu kyseliny 4-methylbenzensulf onové s molekulovým vzorcem C₁₂Hi9N₃O₂S 2HC1 (M = 342,289 g). Odpovídající výtěžek činí 84 %.

3,48 g Získané sloučeniny se následně rozpustí v 5 ml demineralizované vody. Za bouřlivého míchání se přidá 10,2 ml 2N vodného roztoku sody.

01-0127-03-Ma

Po 1 min až 2 min kontaktu se vytvoří sraženina. Míchání se následně provádí 10 min, potom se sraženina odfiltruje a propláchne vodou a následně ethylacetátem.

Získaná pevná látka se suší za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 2,21 g 2-(3-piperidinyl)hydrazidu kyseliny 4-methylbenzensulfonové s molekulovým vzorcem C12H19N3O2S (M = 269,328 g) . Odpovídající výtěžek činí 81 %.

Pod inertním plynem se smísí 500 mg (1,85 mmol) získaného aminu a 20 ml tetrahydrofuranu.

Do získané suspenze se při teplotě 0 °C až 5 °C přidá 112 μΐ difosgenu, následně 517 μΐ TEA a 23 mg DMAP.

Reakční prostředí se nechá reagovat za míchání a teplota se nechá vzrůst na 20 °C.

Reakční prostředí se naředí ethylacetátem a potom propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně demineralizovanou vodou.

Organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 769 mg surového produktu, který se rozpustí v 7 ml dichlormethanu a 517 μΐ TEA. Reakční prostředí se nechá reagovat přes noc za míchání.

Reakční prostředí se naředí dichlormethanem, propláchne vodou, suší nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

01-0127-03-Ma • · • · • ·

Získaná pěna (395 mg) se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 80:20 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Izoluje se 44 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C13H17N3O2S (M = 295, 362 g) . Odpovídající výtěžek činí 8 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,55 až 1,80 (m) a 2,18 (m) : N-CH-CH2-CH2/ 2,42 (s) :

CH₃; 2,88 (d) a 2,93 (m) ; N-CH2-CH; 3,18 až 3,32 (m) :

N-CIH2-CH2; 4,08 (m) : N-CH-CH₂; 6,98 (bs): NH.

IR (CHCI3) : 3264, 1737, 1599, 1490 cm’¹.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [M + Na]⁺ = 318, [M + H] ⁺ = 296.

Příklad 21

6-[(4-Methylfenyl)sulfonyl]-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-on

305 mg (1,52 -piperidinkarboxylátu str. 4334 až 4343) (M = 200,282 g) se dichlormethanu.

mmol) 1,l-Dimethylethyl-3-amino-l(popsaného v J. Med. Chem. 1992, 35, s molekulovým vzorcem C10H20N2O2 rozpustí ve 3 ml bezvodého

212 μΐ TEA a roztok se ochladí na 5 °C, mg tosylchloridu. Reakční prostředí se

Potom se přidá načež se přidá 278

01-0127-03-Ma • ·

míchá 2 h, během kterých probíhá reakce, a teplota se nechá opět vzrůst na 20 °C.

Reakční prostředí se následně naředí dichlormethanem a nejprve propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně roztokem fosfátového pufru při pH = 7.

Organická fáze se separuje a suší nad bezvodým síranem hořečnatým, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku. Takto získaný olej se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 9:1 směsí dichiormethanu a ethylacetátu.

Izoluje se 440 mg 1,l-dimethylethyl-3-[[(4-methylfenyl)sulfonyl]amino]-1-piperidinkarboxylátu (popsaného v J. Med. Chem. 1992, 35, str. 4334 až 4343) molekulového vzorce C17H26N2O4S (M = 354,472 g) . Odpovídající výtěžek činí 82 %.

Směs 425 mg získané sloučeniny a 2,1 ml 50:50 směsi kyseliny trifluoroctové a dichiormethanu se ochladí na 0°C až 5 °C.

Reakční prostředí se nechá míchat 30 min při 5 °C.

Rozpouštědlo se následně odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá 403 mg 4-methyl-N- (3-piperidinyl)-benzensulfonamidu, trifluoracetátu molekulového vzorce

C₁₄Hi₉F₃N₂O₄S (M = 368,377 g) .

228 mg Získané sloučeniny se umístí v suspenzi do 2 ml methanoíu. Reakční prostředí se ošetří přebytkem pryskyřice DOWEX 21K 20-50 Mesh aktivované sodou.

Po filtraci se pryskyřice propláchne methanolem a potom se filtrát odpaří za sníženého tlaku.

01-0127-03-Ma

Tímto způsobem se izoluje 123 mg 4-methyl-N- (3-piperidinyl)benzensulfonamidu molekulového vzorce C₁₂H₁₈N₂O₂S (M = 254,353 g) .

118 mg Získaného aminu se pod inertním plynem rozpustí v 1,2 ml dichlormethanu.

Potom se postupně zavede 98 μΐ ΤΕΆ a 28 μΐ difosgenu. Reakční prostředí se nechá reagovat 30 min za míchání při 0 °C až 5 °C. Reakční prostředí se naředí dichlormethanem. Organická fáze se propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně vodou. Po sušení nad bezvodým síranem sodným se provede filtrace a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku. Surový produkt se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití 95:5 směsi dichlormethanu a acetonu jako eluční soustavy.

Tímto způsobem se získá 112 mg chloridu kyseliny 3—[[(4-methylfenyl)sulfony1]amino]-1-piperidinkarboxylové s molekulovým vzorcem Ci3H₁₇ClN₂O3S (M = 316,308 g) . Odpovídající výtěžek činí 76 %.

Pod inertní atmosférou se smísí 10 mg hydridu sodného (55% až 65% suspenze v oleji) a 2 ml bezvodého tetrahydrofuranu.

Potom se přidá 71 mg získaného produktu.

Reakční prostředí se 15 min míchá za pokojové teploty, potom se přidá 12 μΐ kyseliny octové a 2 ml roztoku fosfátového pufru při pH = 7.

Míchání se provádí 5 min, potom se přidá 5 ml ethylacetátu, reakční prostředí se nechá usadit a následně reextrahuje ethylacetátem. Organická fáze se potom separuje

01-0127-03-Ma • · ·· · · ···· ·· • · · · ··· ·· • · ····· ·· • · · · · ···· a suší nad síranem hořečnatým, přefiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 65 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 95:5 směsí dichlormethanu a acetonu.

Tímto způsobem se izoluje 40 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem CiaHis^OsS (M = 280,348 g) . Odpovídající výtěžek činí 64 %.

NMP protonové spektrum

V CDC1₃ při 250 MHz, chemické posuny plků v ppm a multiplicita (přítomnost dvou konfomerů 90/10):

1,46 (m) , 1,76 (m) a 2,08 (dm): NCH-CH27CH2,; 2,44 (s) a 2,45 (s) : CH₃; 2,82 (d) a 2,98 (m) a 3,28 až 3,50 (m) :

-N-(CH2.)₂; 4,55 (m) a 4,65(m): CO-N-CH; 7,33 a 7,78, 7,35 a 8,02 [ΑΑ'ΒΒ'] CH₃-C₆H₄~SO₂.

IR (CHC1₃) : 1758, 1598, 1995, 1367, 1169 cm¹.

MS (El) m/z: [M]⁺: 280, 216, 155, 125, 97, 91.

Příklad 22

6-Oxa-l-azabicyklo[3,2,l]okt-3-en-7-on

Pod inertním plynem se smísí 5 ml dichlormethanu a 68 mg 1,2,3,6-tetrahydropyridin-3-olu, hydrochloridu (M = 135,5 g) (popsaného v Chem. Pharm. Bull.

(10)3617-3623(1982)) .

01-0127-03-Ma • ·

Přidá se 33 ml difosgenu a mícháni se provádí 5 min při 0°C. Potom se přidá 140 μΐ TEA a 61 mg DMAP.

Reakční prostředí se nechá reagovat za pokojové teploty 2 h, načež se naředí dichlormethanem a propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a potom vodou. Po dekantaci se organická fáze suší nad bezvodým síranem horečnatým. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Tímto způsobem se získá 5 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené nejprve dichlormethanem a následně 95:5 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se izolují 3 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C6H7NO2 (M = 125 g). Odpovídající výtěžek činí 5 %.

Příklad 23

Fenylmethyl-trans-3-benzoy1-2-oxo-4-oxa-1,3-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-karboxylát

Pod inertním plynem se smísí 5,50 g (13,7 mmol) 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-(fenylmethyl)-cis-4-[(methylsulfonyl)oxy]-1,2-pyrrolidindikarboxylátu (popsaného v J. Org. Chem. 1991, 56, str. 3009 až 3016) s molekulovým vzorcem C18H25NO7S (M = 399,466 g) a 110 ml dimethylformamidu, načež se přidá 2,58 g M-hydroxyftalimidu a následně 1,52 g hydrogenuhličitanu draselného.

Reakční prostředí se za míchání ohřeje na 100 °C a při této teplotě udržuje 4 h.

01-0127-03-Ma

.............

Reakční prostředí se ochladí na 20 °C, přidá se 220 ml vody a ledu a potom se prostředí extrahuje isopropyletherem.

Následuje sušení nad bezvodým síranem hořečnatým a potom odpařování do sucha za sníženého tlaku.

Zbytek se chromatografíčky purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se izoluje 3,06 g 1-(1,1-dimethylethyl) - a 2-(fenylmethyl)trans-4-[(1,3-dihydro-l,3-dioxo-2H-isoindol-2-yl)oxy]-1,2-pyrrolidindikarboxylátu s molekulovým vzorcem C25H26N2O7 (M = 466,494 g) . Odpovídající výtěžek činí 47 %.

3,24 g (6,94 mmol) Získaného ftalimidu se rozpustí ve 33 ml dichlormethanu.

Přidá se 372 μΐ hydrátu hydrazinu.

Reakční prostředí se opět míchá 2 h a 30 min při 20 °C.

Vytvořená sraženina se odfiltruje, propláchne dichlormethanem a rozpouštědlo se následně odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 2,91 g surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10, následně 80:20 a na závěr 50:50 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se celkem izoluje 942 mg 1-(1,1-dimethylethyl ) - a 2-(fenylmethyl)-trans-4-(aminooxy)-1,201-0127-03-Ma • · • · • · · ·

-pyrrolidindikarboxylátu s molekulovým vzorcem C₁₇H₂₄N₂O₅(M = 336,39 g). Odpovídající výtěžek činí 40 %.

Pod inertním plynem se smísí 853 mg získané sloučeniny (2,53 mmol) a 8,5 ml bezvodého dichlormethanu.

Reakční prostředí se ochladí na přibližně 0 °C až 5 °C a potom se přidá 706 μΐ TEA a 588 μΐ benzoylchloridu.

Reakční prostředí se míchá 10 min při 0 °C až 5 °C, načež se nechá ohřát na 20 °C a reagovat dalších 30 min.

Organická fáze se propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a potom vodou, dekantuje a organická fáze se suší nad bezvodým síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 1,38 g produktu, který se smísí s 25 ml dichlormethanu. Reakční prostředí se ochladí na přibližně 10 °C až 15 °C a přidá se 123 μΐ hydrátu hydrazinu.

Reakční prostředí se nechá reagovat za míchání při 20 °C 2 h a 30 min.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 1,13 g surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 80:20 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se izoluje 948 mg 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-(fenylmethyl)-trans-4-[(benzoylamino)oxy]-1,2-pyrrolidindikarboxylátu s molekulovým vzorcem C₂4H₂₈N₂O₆(M = 440,50 g).

• · • · • ·

01-0127-03-Ma

Celkový výtěžek tedy činí 85 %.

948 mg Získané sloučeniny se rozpustí ve 2 ml ethylacetátu.

Reakční prostředí se ochladí na 0 °C až 5 °C, potom se najednou přidá 4,7 ml přibližně 4,6M roztoku plynného chlorovodíku v ethylacetátu.

Po 1 h se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku a produkt třikrát vyjme v ethyletheru.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Tímto způsobem se získá 842 mg fenylmethyl-trans-4-[(benzoylamino)oxy]-2-pyrrolidinkarboxylátu, hydrochloridu ve formě křehké bílé pěny s molekulovým vzorcem C₁₉H₂₀N₂O₄-HCl (M = 376,84 g) .

Výtěžek je kvantitativní.

mg (0,125 mmol) Získaného hydrochloridu se pod inertním plynem rozpustí v 0,5 ml dichlormethanu. Přidá se 25,2 μΐ pyridinu a potom se reakční prostředí ochladí na 0 °C až 5 °C a přidá se 9,5 μΐ difosgenu.

Teplota se nechá vzrůst na 20 °C, reakční prostředí se naředí dichlormethanem a potom propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně vodou.

Organická fáze se dekantuje a vysuší nad bezvodým síranem sodným, rozpouštědlo se následně odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 43,8 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za • · • · • · · ·

01-0127-03-Ma • · · · ··· · · • · ····· ·· • · · · · ···· • · ·· ····

............. ·· použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Izoluje se 34,9 mg fenylmethyl-trans-4-[(benzoylamino)oxy]-1-(chlorkarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylátu s molekulovým vzorcem C₂₀H₁₉ClN₂O₅ (M = 402,83 g) .

Odpovídající výtěžek činí 69 %.

mg (0,032 mmol) Získané sloučeniny se rozpustí v 4 ml toluenu.

Přidá se 9 μΐ TEA a 7,8 mg DMAP.

Reakční prostředí se přes noc ohřívá na 100 °C.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a potom se zbytek purifikuje chromatografii, kdy se jako eluční činidlo použije dichlormethan.

Tímto způsobem se izoluje 4,3 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C₂oH₁₈N₂0₅ (M = 336,37 g) . Odpovídající výtěžek činí 40 %.

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 300 MHz, chemické posuny plků v ppm a multiplicita:

1,97 (ddd) a 2,85 (ddd) ; N-O-CH-CH^-CH; 3,80 (dd) a 4,14 (dd) : N-O-CH-CH^-N; 4,75 (dd) : N-CH-CH₂; 4,93 (t): N-O-CH-CH2; 5,04 a 5,31 [AB] : O-CH2-C₆H₅; 7,77 a 7,25 až 7,50 (m) : CH₂-C₆H5_ a OC-CgH^.

IR (CHCI3) : 1735, 1612, 1575, 1496 cm'

01-0127-03-Ma • ·

Přiklad 24

3- Benzoyl-l,3-diazabicyklo[2,2,2]oktan-2-on

Pod dusíkovou atmosférou se rozpustí 2,4 g (10 mmol) N- (4-piperidinyl)benzamidu, hydrochloridu (popsaného v J. Med. Chem. IN. 17 (1974), str. 736 až 739) s molekulovým vzorcem Ci₂Hi₆N₂O ve 30 ml dichlormethanu.

Reakční prostředí se ochladí na 0 °C a přidá se 2,8 ml TEA a 0,66 ml difosgenu.

Po několika minutách se reakční prostředí naředí dichlormethanem, potom se propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně vodou. Organická fáze se dekantuje, suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se získá 1,62 g chloridu kyseliny

4- (benzoylamino)-1-piperidinkarboxylové s molekulovým vzorcem Ci₃Hi₅C1N₂O₅ (M = 266,5 g) . Odpovídající výtěžek činí 61 % .

1,21 g (48 mmol) Získané sloučeniny se pod dusíkovou atmosférou rozpustí v 37 ml tetrahydrofuranu.

Roztok se ochladí na -78 °C, načež se po kapkách přidá 5 ml 1M roztoku lithiumbis(trimethylsilyl)amidu v tetrahydrofuranu.

Reakční prostředí se 15 min udržuje při teplotě -78 °C, načež se teplota nechá vzrůst na pokojovou teplotu a reakce se nechá probíhat další 1 h.

01-0127-03-Ma • · · · 4 4* 4 4 · • 4 * 4 * * * * * 4 • 4444 4444 · • · · · * 4 4 4 4

.................

Roztok se ochladí na 0 °C a přidá se 720 μΐ kyseliny octové. Vytvoří se sraženina. Po naředění ethylacetátem následuje propláchnutí 10% vodným roztokem kyseliny vinné a roztokem fosfátového pufru při pH = 7,0.

Organická fáze se dekantuje a suší nad bezvodým síranem horečnatým. Provede se filtrace, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku. Surový produkt se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlorethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se získá 0,214 g očekávané sloučeniny a molekulovým vzorcem Ci8Hi4N₂O₂ (M = 230 g) , která se krystalizuje z ethyletheru.

Odpovídající výtěžek činí 20 %.

NMR protonové spektrum

V DMSO při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,71 až 2,02 (m) : (CH^h-CHN; 3,14 (t) : N-(CH₂)₂; 4,84 (m) : (CH₂)₂-CHN; 7,39 až 7,65 (m) : C₆Hs_.

IR (CHCI3) : 1735, 1682, 1618, 1602, 1582, 1488 cm'¹.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [2M + Na]⁺ = 483;

[M + Na + CH₃CN]⁺ = 294; [M + Na]⁺

253.

01-0127-03-Ma • · • * · ·

Příklad 25

Difenylmethyl-trans-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3, 2,1]oktan-2-karboxylát

Pod inertní atmosférou se smísí 15 ml dichlormethanu a 197 mg (0,633 mmol) difenylmethyl-trans-5-hydroxy-2-piperidinkarboxylátu (popsaného v Rec. Trav. Chim. (1959), 78, str. 648 až 658) s molekulovým vzorcem C19H21NO3.

Reakční prostředí se ochladí na 0 °C a potom se postupně přidá 42 μΐ difosgenu, 177 μΐ TEA a následně 77 mg DMAP.

Reakční prostředí se nechá reagovat 4 h za pokojové teploty.

Následuje propláchnutí 10% vodným roztokem kyseliny vinné a následně nasyceným vodným roztokem chloridu sodného.

Organické fáze se sloučí a suší nad bezvodým síranem hořečnatým, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a tímto způsobem se získá 195 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití elučního činidla tvořeného dichlormethanem obsahujícím 0,1 % vody.

Izoluje se olej, který se krystalizuje ze směsi pentanu a ethyletheru.

Tímto způsobem se izoluje 108 mg očekávané sloučeniny ve formě bílých krystalů odpovídajících molekulovému vzorci C₂oH₁₉N0₄ (M = 337,338 g) .

Odpovídající výtěžek činí 51 %.

01-0127-03-Ma

AAAA »· ·« Αφ • A φ A A * φ « φ « • · ····· ·« · • » · Φ φ A Φ φ 4 · • · ·· · 4 Φ φ Φ gg ···· ···· «· ··· ,, ..

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 400 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,86 (m) a 2,03 (m) : N-CH-CH₂-CH2_-CO; 2,27 (m) : N-CH-CH2.-CH₂-CO; 3,07 (d) a 3,29 (m) : N-CH^-CHO; 4,31 (dd) : N-CH-CH₂; 4,73 (m) : N-CHz-CHO; 6,93 (s) : CO₂-CH-(C₆H₅) ₂; 7,27 až 7,41 (m) : CH(C₆H5.) ₂.

IR (CHCI3) : 1788, 1736, 1496 cm'^{* 1}.

MS (SIMS) m/z: [M + Na] ⁺ = 360; [M + Li] ⁺ = 344;

[M] ⁺ = 337, 167.

Příklad 26a (4-Nitrofenyl)methyl-trans-Ί-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát

Pod inertní atmosférou se smísí 66 ml dichlormethanu a g (3,56 mmol) (4-nitrofenyl)methyl-trans-5-hydroxy-2-piperidinkarboxylátu molekulového vzorce Ci₃Hi6N₂C>5 (M = 280,282 g) .

Reakční prostředí se ochladl na 0 °C a přidá se 0,24 ml difosgenu. Reakční prostředí se nechá reagovat za míchání 10 min při 0 °C, načež se nechá ohřát zpět na pokojovou teplotu. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Zbytek se rozpustí v 66 ml toluenu a přidá se 0,99 ml

TEA.

»»t »

01-0127-03-Ma • » · · « 9 • · · · · · _{v 9} • · · · · « « • · · · · · · • · »r· ·· ··

Baňka se ponoří do olejové lázně při 110 °C a ponechá se zde 15 min. Potom se nechá ochladit na pokojovou teplotu.

Reakční prostředí se propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a potom nasyceným vodným roztokem chloridu sodného.

Organická fáze se suší nad bezvodým síranem horečnatým a potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 0,885 g surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 85:15 směsí toluenu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se izoluje 0,184 g očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C14H14N2O6 (M = 306,276 g) ve formě žlutého oleje.

Odpovídající výtěžek činí 17 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 400 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,92 (m) a 2,07 (m) : N-CH-CH2-CH2.-CO; 2,22 (m) a 2,30 (m) : N-CH-CH27CH2-CO; 3,17 (d) a 3,35 (dm): N-CH27CHO;

4,28 (dd) : N-CH-CH₂; 4,79 (m) : N-CH₂-CHO; 5,33 [AB]

CO₂-CH2yC₆H₄NO2; 7,56 a 8,25 [ΑΑ'ΒΒ’]: ΟΗ₂-Ο₆Η^-ΝΟ₂.

IR (CHCI3) : 1791, 1745, 1609, 1526, 1495 cm’¹.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 306, 262, 136, 126, 82, 55.

01-0127-03-Ma • » • · · ·

ΦΦ *·«· 19 • · > · » » * ·· * • · · · · · Φ 9 9 · • · « · · » Φ ·

ΦΦΦ 9999 99 «ΦΦ · I

Příklad 26b

Kyselina trans-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1,]oktan-2-karboxylová

Smísí se 140 mg (0,457 mmol) esteru získaného v příkladu 26a, 7 ml acetonu a 28 mg Pd/C katalyzátoru při koncentraci 20 % hmotn.

Reakční prostředí se následně nechá reagovat 25 min za míchání, ve vodíkové atmosféře a za normálního tlaku.

Katalyzátor se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 137 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C₇H₉NO₄ (M = 171,152 g) ve formě oleje smíšeného s 1 mol p-toluidinu.

Odpovídající výtěžek činí 97 %.

NMR protonové spektrum

V DMSO při 400 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,84 (m) a 1,95 až 2,05 (m) : N-CH-CH2.-CH27CO; 3,13 (d) a 3,24 (dd) : N-CH^-CHO; 4,02 (dd) : N-CH-CH₂; 4,81 (dm):

N-CH2-CHO.

01-0127-03-Ma • · »···· · 1 » • · · · « a · · · » * · * « · * · · t

.............. ..

Příklad 26c

Methyl-trans-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát

17,25 mg (0,1 mmol) Kyseliny získané v příkladu 26b se rozpustí ve 3 ml dichlormethanu.

Reakční prostředí se ošetří přebytem diazomethanu v roztoku dichlormethanu a potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 30 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí toluenu a ethylacetátu.

Izoluje se 6,7 mg očekávané sloučeniny (M = 485,187 g).

Odpovídající výtěžek činí 36 %.

Příklad 27 (4-Nitrofenyl)methyl-cís-7-oxo-6-oxa-l-azabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát

0,802 g (2,034 mmol) (4-Nitrofenyl)methyl-cis-5-hydroxy-2-piperidinkarboxylátu, trifluoracetátu (popsaného v Rec. Trav. Chim. (1959), 78, str. 648 až 658) s molekulovým vzorcem C13H16N2O5, CF3CO2H (M = 394,303 g) se pod dusíkovou atmosférou zavede do 40 ml dichlormethanu a následně ochladí na 0 °C. Přidá se 0,135 ml difosgenu. Reakční prostředí se míchá 15 min při 0 °C, potom se

01-0127-03-Ma ·· ·Φ • 9 9 9 « r

9 * « «·· · · · · φ « íoo teplota nechá vzrůst na pokojovou teplotu a v míchání se pokračuje dalších 35 min.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tento produkt se rozpustí v 40 ml toluenu a 1,1 ml triethylaminu. Reakční směs se v průběhu 35 min ohřeje na 100 °C a následně nechá ochladit zpět na pokojovou teplotu.

Reakční prostředí se propláchne vodou a potom roztokem fosfátového pufru při pH = 7 .

Tímto způsobem se získá 0,56 g surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 95:5 směsí dichlormethanu a acetonu.

Tímto způsobem se izoluje 110 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem Ci₄Hi₄N₂O₆ (M = 306,275 g) ve formě olej e.

Odpovídající výtěžek činí 17 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 pří 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,80 až 1,94 a 2,10 až 2,45: N-CH-CH₂-CH₂-CO; 3,07 (d) , 3,04 (dm) a 3,86 (dd): CH-N-CH₂; 4,80 (t):

O=C-O-CH; 5,28 a 5,43 [AB] : O=C-O-CH₂-C₆H₅; 7,61 a 8,24 ·· ·*··

[ΑΑ'ΒΒ'] C₆H₄NO₂.

• · • · · · • ·

01-0127-03-Ma

101

IR (CHC1₃) : 1801, 1794, 1745, 1704, 1609, 1525, 1498 cm'¹. MS (El) m/z: [M]⁺ = 306, 262, 136, 126, 83, 55.

Příklad 28a

1-Propenyltrifenylfosfoniová sůl fenylmethyl-trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylátu

Stupeň A:

Fenylmethy1-cis-5-hydroxy-1-(trifluoracetyl-2-piperidinkarboxylát

Pod inertní atmosférou se rozpustí 6,19 g (22,77 mmol) hydrochloridu fenylmethyl-5-hydroxy-2-piperidinkarboxylátu molekulového vzorce C13H18CINO3 (M = 271,746 g) (popsaného v Rec. Trav. Chim. (1959), 78, str. 648 až 658) v 80 ml bezvodého dichlormethanu.

Reakční prostředí se ochladí na 5 °C a potom se přidá 9,5 ml TEA a po kapkách 6,46 ml anhydridu kyseliny trifluoroctové.

Reakční prostředí se nechá reagovat za míchání při 5 °C 1 h, načež se naředí dichlormethanem, postupně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, vodným roztokem fosfátového pufru při pH = 7 a vodným roztokem chloridu sodného.

se dekantuje a suší nad bezvodým Potom se rozpouštědlo odpaří za

Organická fáze síranem hořečnatým.

sníženého tlaku.

• · • · · ·

01-0127-03-Ma

102

Tímto způsobem se získá 10 g červeného oleje, který se rozpustí ve 100 ml methanoíu. Reakční prostředí se ochladí na přibližně 10 °C a pozvolna se přidá 6,8 g (78 mmol) hydrogenuhličitanu sodného v roztoku ve 100 ml vody při maximální teplotě 20 °C.

Reakční prostředí se nechá reagovat za míchání při 20 °C 30 min a extrahuje dichlormethanem.

Organická fáze se dekantuje, propláchne nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a suší nad bezvodým síranem hořečnatým.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a tímto způsobem se izoluje 7,6 g oranžového oleje, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 95:5 směsí dichiormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se izoluje 6 g očekávané sloučeniny molekulového vzorce C15H16F3NO4 (M = 331,294 g) . Odpovídající výtěžek činí 68 %.

Stupeň B:

Fenylmethyl-trans-5-[(2-propenyloxy)amino]-1-(trifluoracetyl)-2-piperidinkarboxylát

1,74 g (5,26 mmol) Získaného alkoholu se zavede do 29 ml acetonitrilu. Reakční prostředí se ochladí na -40 °C a při této teplotě se přidá nejprve 0,61 ml 2,6-lutidínu (C5H3N (CH₃) ₂) a následně 0,91 ml anhydridu kyseliny trifluormethansulfonové.

• · · · · « · ·

01-0127-03-Ma

103

Reakční prostředí se nechá reagovat za míchání 30 min při -40 °C. Potom, stále při -40 °C, se během 1 min přidá 0,7 ml (10,52 mmol) O-allylhydroxylaminu.

Reakční prostředí se nechá ohřát na 0 °C, načež se přidá 0,61 ml 2,6-lutidinu a prostředí se nechá reagovat přes noc (15 h) přibližně při 5 °C a následně další 2 h při 20 °C.

Reakční prostředí se následně naředí dichlormethanem, propláchne vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, potom 10% roztokem kyseliny vinné a na závěr nasyceným vodným roztokem chloridu sodného.

Organická fáze se dekantuje, suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Takto se získá 2,1 g žlutého oleje, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí toluenu a ethylacetátu.

Izoluje se 1,23 g očekávané sloučeniny molekulového vzorce C18H21F3N2O4 (M = 386,374 g) .

Odpovídající výtěžek činí 61 %.

Stupeň C:

Fenylmethyl-trans-5-[(2-propenyloxy)amino]-2-piperidinkarboxylát

Pod inertní atmosférou se rozpustí 1,41 g (3,65 mmol) získané sloučeniny ve 25 ml bezvodého methanolu.

01-0127-03-Ma • ·

104

Reakční prostředí se ochladí na 0 °C až 5 °C a potom se provedou ve 45 min intervalech tři přidání 145 mg NaBH₄.

Reakční prostředí se potom okyselí na pH = 2 přidáním IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, předem ochlazeného na 5 °C.

Extrakce se provádí ethylacetátem.

Vodná fáze se ochladí na 5 °C, přidá se 100 ml ethylacetátu a následuje ošetření nasyceným roztokem uhličitanu sodného až do získání pH hodnoty 8,5 až 9.

Amin se potom extrahuje ethylacetátem. Organická fáze se propláchne nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, potom se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a zahustí odpařením rozpouštědla za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 0,628 g očekávaného produktu molekulového vzorce Ci₆H₂2N2C>3 (M = 290,364 g) .

Odpovídající výtěžek činí 59 %.

Stupeň D:

Fenylmethyl-trans-7-οχο-β-(2-propenyloxy)-1,6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-2-karboxylát

Pod inertní atmosférou se rozpustí 103 mg (0,35 mmol) získaného aminu ve 35 ml bezvodého dichlormethanu.

Roztok se ochladí na přibližně 0 °C až 5 °C a při této teplotě se po kapkách přidá 0,1 ml TEA a následně 21 μΐ difosgenu.

c · • · ·

01-0127-03-Ma

105

Reakční prostředí se nechá reagovat za míchání 15 min při 0 °C až 5 °C, potom se teplota nechá vzrůst na 20 °C a přidá se 42 mg DMAP. Míchání pokračuje při 20 °C přibližně 5 h.

Reakční prostředí se naředí dichlormethanem, propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné a potom vodou.

Organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a zahustí odpařením rozpouštědla za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 70 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografii na 5 g oxidu křemičitého za použití eluční soustavy tvořené 98:2 směsí dichlormethanu a methanolu.

Izoluje se 48 mg očekávaného produktu molekulového vzorce C17H20N2O4 (M = 316,36 g) .

Odpovídající výtěžek činí 43 %.

IR (CHCI3) : 1750, 1642, 1600, 1496 cm¹.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [M + Na + CH3CN]⁺ = 380;

[M + Na] ⁺ = '339; [M + H] ⁺ = 317.

Stupeň E:

1-Propenyltrifenylfosfoniová sůl fenylmethyl-trans-Ί-oxo-6~ -(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylátu

Pod inertní atmosférou se rozpustí 202 mg (0,638 mmol) sloučeniny získané ve stupni D v 5,5 ml bezvodého dichlormethanu.

01-0127-03-Ma

106

Do získaného roztoku se při 20 °C přidá 73 μΐ kyseliny octové a potom 369 mg Pd (P (C₆H₅) ₃) ₄.

Po 30 min míchání za pokojové teploty se vytvořená N-hydroxymočovina ošetří 5,5 ml pyridinu a 358 mg SC>3-pyridinového komplexu.

Reakční prostředí se nechá reagovat za míchání 18 h při 20 °C a potom se reakční prostředí zahustí odpařením rozpouštědla za sníženého tlaku.

Reakční prostředí se vyjme s 50 ml dichlormethanu a propláchne vodou. Organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a dichlormethan se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 650 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 60:40 směsí dichlormethanu a acetonu obsahující 0,1 % obj. TEA.

Tímto způsobem se izoluje 280 mg fosfoniové soli očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C35H35N2O7PS (M = 646,705 g).

Odpovídající výtěžek činí 68 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

2,05 (m) , 2,22 (dm) a 2,33 (m) : N-CH-CH2-CH2/ 2,95 (d) a 3,30 (dt) : O=C-N-CH₁; 4,10 (m) a 4,32 (m) : O=CN-CH a

O=C-N-CH₂-CH; 5,12 (s): COO-CH2.-C₆H₅; 7,36: CgHs. a 2,30 (m) :

CH₃-CH=CH; 6,65 a 7,20 CH₃-CH=CH; 7,65 až 7,85 P(C₆H₅)₃·

01-0127-03-Ma

107

IR (CHC1₃) : 1746, 1638, 1605, 1587, 1495 cm’¹.

MS (negativní a pozitivní elektrosprej) m/z:

[Maniont]” = 355;

[Mkationt]⁺ = 303.

Příklad 28b

Sodná sůl fenylmethyl-trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-2-karboxylátu

236 mg (0,364 mmol) Fosfoniové soli získané ve stupni E příkladu 28a se rozpustí v 0,8 ml tetrahydrofuranu a 4 kapkách vody.

Získaný roztok se vede přes kolonu DOWEX 50WX8 pryskyřice v Na⁺ formě a eluuje vodou.

Po lyofilizaci se získá 127 mg očekávané sodné soli s molekulovým vzorcem C^His^CbSNa (M = 378,339 g) .

Odpovídající výtěžek činí 92 %.

NMR protonové spektrum

V DMSO při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,65 až 2,02: N-CH-CH^-CH^; 2,91 (d) a 3,04 (dt) :

O=C-N-CH2_>; 4,00 až 4,05: O=C-N-CH a O=C-N-CH₂-CH; 5,20 [AB] : COO-CH^-CgHs; 7,39 (m) : C₆H₅.

IR (Nujol) : 1744, 14 95 cm'¹.

MS (negativní elektrosprej) m/z: [M] = 355.

• ·

01-0127-03-Ma

108

Přiklad 28c

Fenylmethyl-trans-7-oxo-6-[(fenylsulfonyl)oxy]-1, 6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-2-karboxylát mg (0,152 mmol) Derivátu získaného ve stupni D příkladu 28a se rozpustí v 1,2 ml dichlormethanu.

Při 20 °C se přidá 26 μΐ kyseliny octové a potom 88 mg Pd(PPh₃)₄ a reakce se nechá probíhat 2 h při 20 °C za míchání.

Reakční prostředí se naředí přidáním toluenu a rozpouštědla se odpaří za sníženého tlaku.

Do získaného surového produktu se přidá 1,5 ml dichlormethanu, 25 μΐ pyridinu a 24 μΐ benzensulfonylchloridu.

Reakční prostředí se nechá reagovat při 20 °C za míchání lha potom se přidá 12,5 μΐ pyridinu a 10 μΐ benzensulfonylehloridu.

Reakční prostředí se míchá 15 min při 20 °C a ředí dichlormethanem.

Reakční prostředí se potom postupně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, roztokem fosfátového pufru při pH = 7 a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného.

Vodná fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získá se 180 mg žlutého oleje, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 95:5 směsí dichlormethanu/methyletheru a terč.butyletheru.

01-0127-03-Ma

109

Tímto způsobem se izoluje 20 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C20H20N2O6S (M = 416, 456 g) . Odpovídající výtěžek činí 31 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny plků v ppm a multiplicita:

1,83 (m) a 2,00 až 2,25 (m) : N-CH-CH^-CH^; 3,02 (d) a 3,16 (dm): O=C-N-CH^; 4,04 (m) a 4,11 (dd) : O=C-N-CH a

O=C-N-CH₂-CH; 5,21 (s): COO-CH2_-C₆H5; 7,34 (m) : C₆H₅;

7,56 (m) , 7,70 (m) a 8,03 (m) : O₂S-C₆H5_?

IR (CHCI3) : 1780, 1738, 1600, 1585, 1498, 1386, 1193 cm^-1.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [2M + Na] ⁺ = 855;

[M + Na + CH₃CH]⁺ = 480; [M+Na]⁺ = 439; [MH]⁺ = 417.

Příklad 28d

Fenylmethyl-trans-7-oxo-6-[(2-thienylsulfonyl)oxy]-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát

Vychází se ze 100 mg (0,316 mmol) sloučeniny získané ve stupni D příkladu 28a a způsob se provádí podobným způsobem, jako v bezprostředně předcházejícím příkladu s tou výjimkou, že se namísto benzensulfonylchloridu použije 2-thienylsulfonylchlorid.

Tímto způsobem se izoluje 8 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem Ci₈H₁₈N₂O₆S2 (M = 422, 481 g) . Odpovídající výtěžek činí 30 %.

• · · · • · · · · · • ·

01-0127-03-Ma

110

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píku v ppm a multiplicita:

1,84 (m) a 2,10 až 2,25: N-CH-CH_2~CH₂; 3,02 (d) a 3,24 (dt) : OC-N-CÍU; 4,06 (m) : O=C-N-CH₂-CH; 4,14 (dd) :

O=C-N-CH; 5,22 (s): COO-CH2-C₆H₅; 7,17 (dd) : SO₃-C-S-CH=CH;

7,35 (br s) : C₆H^; 7,80 (dd) : SO₃-C=CH; 7,87 (m) SO3-C-S-CH.

IR (CHCI3) : 1780, 1739, 1600, 1503, 1495 cm’¹.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [M + Na + CH₃CN]⁺ = 867; [2M + Na] ⁺ = 445, 339, 298, 91.

Příklad 28e

Fenylmethyl-trans-6-(2-hydroxy-2-oxoethoxy)-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát

Stupeň A:

Fenylmethyl-trans-Ί-oxo-6-[2-OXO-2-(2-propenyloxy)ethoxy]1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát

Pod inertní atmosférou se rozpustí 48 mg (0,15 mmol) sloučeniny získané ve stupni D příkladu 28a v 1,5 ml bezvodého dichlormethanu.

Při 20 °C se přidá 18 μΐ kyseliny octové a následně 88 mg Pd (P (C₆H₅) ₃) 4 a prostředí se míchá 1 h při 20 °C.

• ·

01-0127-03-Ma ··· · · · · · • · ····· · · • · · · · · · «.w····· · · · · · ··

111

Reakční prostředí se odfiltruje přes oxid křemičitý a eluuje za použití eluční soustavy tvořené 7:3 směsí dichlormethanu/terc.butyletheru a methyletheru.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získá se 7 0 mg hydroxymočoviny, která se vyjme ve 2 ml dichlormethanu a potom se přidá 85 μΐ TEA a 64 μΐ allylbromacetátu.

Reakční prostředí se míchá při 20 °C 3 h a 30 min.

Reakční prostředí se postupně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, vodným roztokem fosfátového pufru při pH = 7 a vodou.

Organická fáze se suší a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 60 mg surového produktu, který se chromatograficky purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu/ terč. butyletheru a methyletheru obsahující 0,1 % TEA.

Izoluje se 22 mg sloučeniny molekulového vzorce C19H22N2O6, (M = 374,396 g) . Odpovídající výtěžek činí 39 %.

Stupeň B:

Fenylmethyl-trans-Q-(2-hydroxy-2-oxoethoxy)-7-oxo-l,6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-2-karboxylát mg (0,0587 mmol) Získané sloučeniny se rozpustí pod inertní atmosférou v 1 ml bezvodého dichlormethanu.

• · • · · · • · • · · ·

01-0127-03-Ma

112

Přidá se 10 μΐ kyseliny octové a 34 mg Pd (P (C₆H₅) 3) ₄ a reakce se nechá probíhat za míchání při 20 °C po dobu 30 min.

Reakční prostředí se zahustí a vyjme v toluenu, čímž se vyloučí kyselina octová.

Tímto způsobem se získá 49 mg surového produktu, do kterého se přidají 2 ml fosfátového pufru při pH 7 a který se následně dvakrát propláchne 1 ml dichlormethanu.

Rozpouštědlo se odpaří a získá se 46 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené nejprve 90:10 směsí dichlormethanu/terc.butyletheru a methyletheru a následně 60:40 směsí dichlormethanu a ethanolu.

Tímto způsobem se získá 4,5 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C3₇H₃7N₂O6P (M = 636, 691 g) . Odpovídající výtěžek činí 12 %.

Příklad 29a (4-Nitrofenyl)methyl-trans-6-benzoyl-7-oxo-1,6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-2-karboxylát

Stupeň A:

1-(1,1-Dimethylethyl)- a 2-[ (4-nitrofenyl)methyl]cis-5- (methylsulfonyl)oxy-1,2-piperidindikarboxylát

Pod inertní atmosférou se rozpustí 11,25 g (29,5 mmol) 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-[(4-nitrofenyl)methyl]cis-501-0127-03-Ma « · ·· ···· ·· ··· • · · * · · • · ···· · · · • · · · · · _ · ·· · · · ·· ··

113

-hydroxy-1,2-piperidindikarboxylátu (popsaného v Rec. Trav. Chim. (1959), 78, str. 648 až 658) s molekulovým vzorcem

C18H24N2O7 (M = 380,398 g) ve 112 ml dichlormethanu.

Reakční prostředí se ochladí na 0 °C až 5 °C a potom se postupně zavede 5 ml TEA a potom 2,44 ml methansulfonylchloridu.

Teplota se nechá za míchání vzrůst na 20 °C a prostředí se nechá reagovat 1 h. Reakční prostředí se potom naředí dichlormethanem, dvakrát propláchne vodou, vysuší nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 16 g surového oleje, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené dichlormethanem obsahujícím 2 % ethylacetátu.

Izoluje se 9,14 g očekávaného produktu molekulového vzorce C19H26N2O9S (M = 458,491 g) . Odpovídající výtěžek činí 67 %.

Stupeň B:

1-(1,1-Dimethylethyl)- a 2-[(4-nitrofenyl)methyl]trans-5-azido-1,2-piperidindikarboxylát

Pod inertní atmosférou se rozpustí 11,1 g (24,2 mmol) získaného mesylátu ve 111 ml dimethylformamidu.

Potom se přidá 1,73 g nitridu sodného NaN₃.

Reakční prostředí se ohřeje za míchání na 80 °C a při této teplotě udržuje 18 h. Potom se nechá ochladit na 20 °C » · · · · • · • · · · • ·

01-0127-03-Ma

114 a dimethylformamid se odpaří za sníženého tlaku, dokud se nedosáhne malého objemu, který se naředí ethylacetátem a propláchne 2N roztokem sody a následně vodou. Reakční prostředí se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a potom se rozpouštědla odpaří za sníženého tlaku.

Získaný surový olej se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené dichlormethanem obsahujícím 2 % ethylacetátu.

Tímto způsobem se získá 7,34 g očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C18H23N5O6 (M = 405,413 g) ve formě žlutého oleje, který se krystalizuje.

Odpovídající výtěžek činí 75 %.

Stupeň C:

1-(1,1-Dimethylethyl)- a 2-[ (4-nitrofenyl)methyljtrans-5-amino-1,2-piperidindikarboxylát

7,34 g (18,1 mmol) Získaného azidu se zavede do 150 ml tetrahydrofuranu a 30 ml vody.

Přidá se 7,2 g trifenylfosfinu a reakce se nechá probíhat přes noc za míchání při 20 °C.

Rozpouštědlo se potom odpaří za sníženého tlaku a provedou se dvě extrakce ethylacetátem.

Tímto způsobem se získá suchý extrakt, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené dichlormethanem obsahujícím 5 % methanoíu.

01-0127-03-Ma • fc

115

Izoluje se 5,62 g očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem Ci8H₂5N₃O₆ (M = 379, 416 g) . Odpovídající výtěžek činí 82 %.

Stupeň D:

1-(1,1-Dimethylethyl)- a 2-[(4-nitrofenyl)methyl]trans-5-(benzoylamino)-1,2-piperidindikarboxylát

700 mg (1,84 mmol) Získaného aminu se rozpustí v 8 ml dichlormethanu.

Reakční 257 μΐ TEA a prostředí se ochladí na 0 °C, potom 214 μΐ benzoylchloridu.

potom se zavede

Teplota se zvýší na 20 °C.

Po 40 min reakce se reakční prostředí naředí dichlormethanem, propláchne nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a potom vodou.

Následuje sušení nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 867 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C25H29N3O-7 (M = 483,525 g). Odpovídající výtěžek činí 97 %.

• ·

01-0127-03-Ma « · * · · · * ·· « · ···«« · · • ···· ···· • · « « ♦ · ·

116 .....*.........

Stupeň E:

(4-Nitrofenyl)methyl-trans-5-(benzoylamino)-2-piperidinkarboxylát, hydrochlorid

Smísí se 861 mg (8 mmol) získaného amidu, 9 ml methanolu a 2,3 ml roztoku plynného chlorovodíku při koncentraci 8 mol/l v methanolu.

Teplota se nechá ustálit na 20 °C a reakce se nechá probíhat 3 h. Potom se přidá 1,15 ml roztoku chlorovodíku v methanolu.

Reakční prostředí se míchá 20 min při 20 °C a potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Provedou se dvě extrakce dichlormethanem a potom dvě extrakce ethyletherem.

Produkt krystalizuje z ethyletheru.

Tímto způsobem se získá 715 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce C20H22CIN3O5 (M = 419, 967 g) .

Odpovídající výtěžek činí 96 %.

Stupeň F:

(4-Nitrofenyl)methyl-trans-5-(benzoylamino)-1-(chlorkarbonyl)-2-piperidinkarboxylát

Smísí se 1,08 g (2,58 mmol) získaného hydrochloridu a 11 ml dichlormethanu.

• · I • * « · · , • r

01-0127-03-Ma

117

Získaná suspenze se ochladí na přibližně 0 °C až 5 °C a přidá se 791 μΐ TEA a potom se do získaného roztoku přidá 161 μΐ difosgenu.

Reakční prostředí se míchá 5 min při 0 °C až 5 °C, načež se nechá ohřát na 20 °C a reakce se nechá probíhat za míchání dalších 30 min.

Surový produkt se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené dichlormethanem obsahujícím 5 % acetonu.

Izoluje se 969 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce C21H20CIN3O6 (M = 445,862 g) .

Odpovídající výtěžek činí 84 %.

Stupeň G:

(4-Nitrofenyl)methyl-trans-6-benzoy1-7-oxo-1,6-diazabicyklo[3,2, 1]oktan-2-karboxylát

Pod inertním plynem se smísí 928 mg (2,08 mmol) získané sloučeniny a 27 ml tetrahydrofuranu.

Získaný roztok se za míchání ochladí na -78 °C a potom se zavede 2,1 ml 1M roztoku lithiumbis(trimethylsilyl)amidu v tetrahydrofuranu.

to * ·· ·» ♦··· a · * · » · » ·· · « · « to · ♦ » · · · • ·· to · ···· · « · *« · · · · · •«««•••to »· ·«· ·· ··

01-0127-03-Ma

118

Reakční prostředí se udržuje 10 min za míchání na -78 °C a potom se přidá 130 μΐ kyseliny octové, načež se prostředí míchá a teplota se nechá vzrůst na 15 °C.

Reakční prostředí se naředí ethylacetátem a následně postupně propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, roztokem fosfátového pufru při pH = 7 a vodou.

Následuje sušení nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 1,6 g suchého extraktu, který se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 98:2 směsí dichlormethanu a acetonu.

Produkt se potom krystalizuje z ethyletheru za vzniku 204 mg očekávané sloučeniny molekulového vzorce C₂iHi₉N₃O₆(M = 409,441 g).

Odpovídající výtěžek činí 24 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,98 (m) , 2,22 (m) a 2,40 (m) : N-CH-CH2.-CH2.; 3,08 (d) a 3,42 (dt) : 0=0-11-¾) 4,23 (dd) : O=C-N-CH; 4,53 (m) : O=C-N-CH₂-CH; 5,34 [AB] : COO-CH^-CsHs; 7,69 (m) , 8,25 (m) , 7,44 (in) a 7,5 6 (m) : (¾ a C₆H4NO₂.

IR (CHCI3): 1763, 1744, 1676, 1609, 1603, 1583, 1526,

92 cm^-1.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 409, 304, 273, 201, 105, 77.

• · *·*·

01-0127-03-Ma «· • » · « ·» « » · · · · *

119 » « ♦ · ·«««··#· · · *··

Příklad 29b

Kyselina trans-6-benzoyl-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylové

Smísí se 89 mg esteru získaného v příkladu 29a, 4 ml acetonu a 6 mg 10% Pd/C katalyzátoru.

Reakční prostředí se nechá 2 h a 45 min reagovat za míchání, při 20 °C a pod vodíkovou atmosférou, potom se katalyzátor odfiltruje a filtrát odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 88 mg pryskyřice, která krystalizuje z 0,5 ml ethyletheru.

Tímto způsobem se získá 54 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C₁₄Hi₄N₂O₄ (M = 274,278 g) . Odpovídající výtěžek činí 91 %.

NMR protonové spektrum

V CDC1₃ při 250 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,96 (m) , 2,10 (m) a 2,37 (m) : N-CH-CH27CH2,; 3,13 (d) a 3,41 (dm) : O=C-N-CH₂; 4,10 (br d) : O=C-N-CH; 4,52 (m) :

O=C-N-CH₂-CH; 7,44 (m) , 7,56 (tt) a 7,69 (dd) : C₆Hs_.

MS (El) m/z: M⁺ = 274, 229, 169, 105, 77.

·· *» • · · · • ·

01-0127-03-Ma φφ · • ΦΦ • t & · φ » * β ·

Φ·ΦΦ

120 • •ΦΦ φφφφ

Příklad 29c

Methyl-trans-6-benzoyl-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát ml Roztoku diazomethanu se při koncentraci 12,7 g/1 v dichlormethanu přidají za míchání do 28 mg (0,102 mmol) kyseliny získané v příkladu 29b.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 98:2 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

Tímto způsobem se izoluje 18,4 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem Ci5Hi₆N₂O₄ (M = 288,305 g) . Odpovídající výtěžek činí 63 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,90 až 2,42: N-CH-CH^-CH^; 3,12 (d) a 3,44 (dt) : O=C-N-CH^; 3,83 (s): CH₃; 4,17 (dl): O=C-N-CH; 4,54 (m) : O=C-N-CH₂-CH; 7,44 (t), 7,56 (t) a 7,69 (d): C₆H₅.

MS (El) m/z: [M]⁺ = 288, 229, 183, 155, 105, 77.

01-0127-03-Ma • · · · · · · ·· * • · · · · ···· · • · · · ····· ······· ·· ··· ·· ··

121

Příklad 29d trans-6-Benzoyl-7-oxo-N- (fenylmethyl)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid

Smísí se 30 mg (0,109 mmol) kyseliny trans-6-benzoyl-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylové získané v příkladu 29b, 0,5 ml dichlormethanu, 23 mg EDCI a 13 μΐ benzylaminu.

Reakční prostředí se nechá reagovat 30 min za míchání. Potom se naředí dichlormethanem, propláchne 10% vodným roztokem kyseliny vinné, dekantuje a organická fáze se suší nad bezvodým síranem sodným.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá surový produkt, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za ' použití eluční soustavy tvořené 98:2 směsí dichlormethanu a acetonu.

Tímto způsobem se získá 19,5 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C21H21N3O3 (M = 363,419 g) . Odpovídající výtěžek činí 49 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,97 (m) , 2,34 (m) a 2,59 (m) : N-CH-CH^-CH^; 2,90 (d) , 3,33 (m) , 3,99 (bd) a 4,50 (m) : O=C-N-CH, O=C-N-CH₂-CH, O=C-N-CH₂, CO-NH-CH₂-C₆H₅; 6,94 (br t) : NH; 7,24 až 7,58 (m) a 7,68 (m) : C6H5-CO a C₆H5_-CH₂.

IR (CHCI3) : 3411, 1763, 1680; 1603, 1583, 1519, 1498 cm^-1.

01-0127-03-Ma

122 • · ·· ····· ······· ·· ··· ·· ··

Příklad 29e

6-Benzoyl-N- [methyl(fenylmethyl)]-7-oxo-l, 6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid

Postup se provádí podobným způsobem jako v příkladu 29d, ale vychází z 50 mg (0,182 mmol) kyseliny získané v příkladu 29b a 45 μΐ N-methylbenzylaminu.

Tímto způsobem se izoluje 12 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C22H23N3O3 (M = 377,45 g) . Odpovídající výtěžek činí 17 %.

MS (El) m/z; [M]⁺ = 377, 272, 105.

Příklad 29f

6-Benzoyl-2-(hydroxymethyl)-1,6-diazabicyklo[3,2,l]oktan-7-on

Pod inertní atmosférou se rozpustí 100 mg (364 mmol) kyseliny trans-6-benzoyl-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylové získané v příkladu 29b ve 3 ml tetrahydrofuranu.

Reakční prostředí se ochladí na -10 °C a přidá se 40 μΐ methylmorfolinu a následně 38 μΐ ethylchlorformiátu.

Reakční prostředí se nechá 15 min reagovat při -10 °C, potom se teplota nechá vzrůst na 0 °C a přidá se 27 mg NaBH₄ a následně po kapkách 1,5 ml methanolu.

Reakční prostředí se nechá 2 h reagovat za míchání při 0 °C, načež se nechá ohřát zpět, na pokojovou teplotu.

• · • · · · • · · ·

01-0127-03-Ma • · · · · · · · · • · * ···· · • · · · · · ·

123 .................

Přidají se 3 ml vody a reakční prostředí se nechá reagovat za míchání 15 min, načež se přidá několik kapek chloridu amonného. Provede se extrakce ethylacetátem, po které následuje sušení nad bezvodým síranem hořečnatým, filtrace a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 85 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 98:2 směsí dichlormethanu a methanolu.

Tímto způsobem se izoluje 25 mg očekávané sloučeniny s molekulovým, vzorcem Ci₄Hi6N₂O₃ (M - 260,3 g) . Odpovídající výtěžek činí 26 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,61 (m,	1H) ,	2,00 (	m, 2	,H) , 2,30	(m,	1H) :
CH-CH₂-CH₂-CH; 2	,19, 3,23 (d) a	3,26	(dt) : N-Cřb;	3, 60	(m) :
N-CH-CH2-OH; 3, N-CH-CH₂-N.	70 (m)	a 3,77	(dd)	: CH-CH2.-O;	4,56	(m)
MS (SIMS) m/z:	[M + Na]⁺ = 283;	[M +	H]⁺ = 261,	[M]⁴ =	260,

229, 105.

Přiklad 30 (4-Nitrofenyl)methyl-trans-6-acetyl-7-oxo-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát g (2,63 mmol) Produktu připraveného ve stupni C příkladu 29 se rozpustí ve 12 ml dichlormethanu. Přidá se

01-0127-03-Ma • · · · ·· ···· ·· ··· • · · · ··· ·· • · · · · · · ·· · • ···· ···· • · · · · · · ·

124 .................

250 μΐ anhydridu kyseliny octové, reakční prostředí se nechá reagovat 10 min za míchání, načež se naředí dichlormethanem a propláchne nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného.

Organická fáze se suší nad bezvodým síranem sodným, odpaří do sucha za sníženého tlaku, čímž se získá 1,2 g 1-(1,1-dimethylethyl)- a 2-[(4-nitrofenyl)methyl]-trans-5-(acetylamino)-1,2-piperidindikarboxylátu molekulového vzorce C20H27N3O7 (M = 421,453 g) .

Tento produkt se použije bez další purifikace ve stupních podobných stupňům E až G z příkladu 29, čímž se získá 14 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C₁₆Hi7N₃O₆ (M = 347,330 g) . Odpovídající výtěžek činí 17 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a

multiplicita:
1,87	(m) ,	2,00 až 2,30 (m) :	N-CH-CÍU-i	3H₂; 2,54 (s) :
N-CO-CH3.;	2,95	(d) a 3,21 (m) :	O=C-N-CH₂;	4,26 (br d) :
O=C-N-CH;	4,55	(m) : O=C-N-CH₂-CH;	5,34 [AB]	: CO2-CH2.-C6H4,·
7,57 a 8,	25 [AA¹	'BB']: C₆H4_>-NO₂.

MS (El) m/z: [M] ⁺ =

347, 304, 211, 169, 125, 43.

• · • · · ·

01-0127-03-Ma • · · · · · ·· · • · ····· ·· ·

125 • ·· · ···· •·· ·· ··· ·· ··

Příklad 31 (4-Nitrofenyl)methyl- a 2-propenyl-trans-7-oxo-l, 6-diazabicyklo [3, 2,1] oktan-2, 6-dikarboxylát

Pod dusíkovou atmosférou se rozpustí 1,24 g (3,278 mmol) produktu připraveného ve stupni C příkladu 29a v 8 ml dichlormethanu.

Roztok se ochladí na 0 °C, potom se přidá 0,45 ml TEA a následně po kapkách 0,35 ml allylchlorformiátu.

Reakční prostředí se udržuje 15 min při 0 °C, načež se nechá reagovat 1 h za míchání při pokojové teplotě.

Reakční prostředí se naředí 20 ml dichlormethanu, propláchne vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a dvakrát vodou.

Reakční prostředí suší nad bezvodým síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 1,5 g 1-(1,1-dimethylethyl)a 2-[(4-nitrofenyl)methyl]-trans-5-[[(2-propenyloxy)karbonyl]amino]-1,2-piperidindikarboxylátu s molekulovým vzorcem C22H28N3O8, (M = 462,486 g) .

Odpovídající výtěžek činí 99 %.

Tento produkt se použije ve stupních podobných stupňům E až G příkladu 29a a získá se 30,6 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C18H19N3O7 (M = 389,368 g) ve formě bílé pevné látky. Odpovídající výtěžek činí 40 %.

01-0127-03-Ma • ·

126

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,91 (m) , 2,00 až 2,29 (m) : N-CH-CHr-CH^; 2,98 (d) a

3,25 (br d) : OC-N-CÍU; 4,27 (t) O=C-N-CH; 4,37 (br s) :

O=C-N-CH₂-CH; 4,77 (brd): C00-CHr-CH=; 5,33 (s):

COO-CHr-C₆H₄; 5,29 až 5,46: CH27CH; 5,98 (m) : CH₂=CH; 7,96 a

8,2 9 [ΑΑ'ΒΒ']: C₆H£-NO₂.

IR (CHCI3): 1801, 1775, 1738, 1724; 1649; 1608, 1595,

1526 cm'¹.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [2M + Na] ⁺ = 801, [M + Na + CH₃CN]⁺ = 453, [M + Na] ⁺ = 412.

Příklad 31a

Fenylmethyl-trans-6-benzoyl-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát

200 mg Fenylmethyl-trans-5-(benzoylamino)-1-(chlorkarbonyl)-2-piperidinkarboxylátu s molekulovým vzorcem C₂₁H₂iC1N₂O₄ (M = 400,87 g) připraveného podobným způsobem jako ve stupních A až F příkladu 29a a 6 ml bezvodého tetrahydrofuran se smísí pod inertní atmosférou a ochladí na -78 °C.

Po kapkách se přidá 0,55 ml 1M roztoku lithiumbis(trimethylsilyl)amidu v tetrahydrofuranu.

Reakční prostředí se nechá 10 min reagovat za míchání při -78 °C a potom se přidá 25 μΐ kyseliny octové.

01-0127-03-Ma

127

Teplota se nechá vzrůst na pokojovou teplotu a potom se reakční prostředí nalije do 10 ml 10% vodného roztoku kyseliny vinné. Provede se extrakce ethylacetátem, po které následuje propláchnutí vodným roztokem fosfátového pufru při pH = 7 a následně vodou a sušení nad bezvodým síranem hořečnatým.

Reakční prostředí se uvede do sucha odpařováním rozpouštědla za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 158 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 98:2 směsí dichlormethanu a acetonu.

Tímto způsobem se izoluje 70 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C21H20N2O4 (M = 364,40 g) . Odpovídající výtěžek činí 39 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 400 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

2,15 (m) a 2,25 (m) : NCH-CH₂-CH2_-CH-CO₂; 1,94 (m) a

2,36 (m) : NCH-CH£-CH₂-CH-CO₂; 4,20 (d) : N-CH-CO₂; 4,50 (q) :

NCH-CH2-CH2-CH-CO2; 3,08 (d) a 3,40 (dt): N-CHgJ 5,25 [AB] :

CO₂-CH_2-C₆H₅; 7,38 (br s) : CH₂-C₆H5; 7,43 (br t) a 7,55 (br t) a 7,69 (br d) : CgH^-CO.

IR (CHCI3) : 1764, 1744, 1675, 1602, 1584, 1498 cm'¹.

MS (SIMS) m/z: [M + Na]⁺ = 387, [M + H]⁺ = 365, 259, 257,

229, 105, 91.

01-0127-03-Ma

128

Příklad 31b

Fenylmethyl-6-benzoyl-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]okt-2-en-2-karboxylát

Smísí se 46 mg (0,126 mmol) produktu získaného v příkladu 31a a 0,5 ml bezvodého tetrahydrofuranu.

Reakční prostředí se ochladí na -70 °C a přidá se 0,31 ml 1M lithiumbis(trimethylsilyl)amidu v tetrahydrofuranu .

Reakční prostředí se nechá 2 h reagovat při -70 °C, potom se nechá teplota zvýšit na -15 °C a při této teplotě se přidá 0,41 ml roztoku C6H₅-SeCl při koncentraci 0,7 mol/1 v THF.

Reakční prostředí se nechá 15 min reagovat za míchání při -15 °C, načež se během 15 min nechá ohřát zpět na pokojovou teplotu a nalije do směsi vody a ledu obsahující několik kapek nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného.

Reakční prostředí se propláchne vodou, vysuší a sníženého tlaku.

extrahuje ethylacetátem, rozpouštědlo se odpaří za

Zbytek se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 98:2 směsí dichlormethanu a acetonu a tímto způsobem se izoluje 15 mg fenylmethyl-6-benzoyl-7-oxo-2-(fenylselenyl)-1, 6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylátu s molekulovým vzorcem C₂7H₂₄N₂O₄Se (M = 519,46 g) . Odpovídající výtěžek činí 23 %.

Smísí se 15 mg (0,029 mmol) získané sloučeniny a

0,3 ml dichlormethanu.

• ·

01-0127-03-Ma • · • · · ·

129

Reakční prostředí se ochladí na 0 °C a přidá se 15 mg kyseliny meta-chlorperbenzoové v roztoku v 0,15 ml dichlormethanu .

Reakční prostředí se nechá 15 min reagovat za míchání při 0 °C, načež se nechá ohřát na pokojovou teplotu.

Reakční prostředí se nalije do přibližně 20 ml vody, extrahuje dichlormethanem a organická fáze se propláchne vodným roztokem fosfátového pufru při pH = 7. Následuje sušení nad bezvodým síranem hořečnatým, filtrace a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 15 mg surového produktu, který se purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 98:2 směsí dichlormethanu a acetonu.

Tímto způsobem se izoluje 5 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C₂iHi8N₂O₄ (M = 362,39 g) . Odpovídající výtěžek činí 48 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

2,66 (td) a 2,99 (tdd) : N-CH-CHz; 3,03 (d) a 3,77 (ddd) : N-CH₂; 4,76 (tt) : N-CH; 5,23 [AB] : CO₂-CH₂-C₆H₅; 7,02 (dt) : N-C=CH; 7,30 až 7,38 (m) : CH₂-C₆H₅; 7,42 (tm), 7,54 (tm) a 7,62 (dm): C₆H₅-CO.

• ·

01-0127-03-Ma

130

Příklad 31c

Kyselina 6-benzoyl-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]okt-2-en-2-karboxylová

Do míchaných 20 mg (0,055 mmol) produktu získaného v příkladu 31b se přidá 0,4 ml acetonu a 4 mg 10% Pd/C katalyzátoru.

Reakční prostředí se umístí pod vodíkovou atmosféru a 3 h nechá reagovat za bouřlivého míchání.

Katalyzátor se odfiltruje a propláchne acetonem a následně methanolem. Filtrát se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 14 mg očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C₁₄Hi₂N₂O₄ (M = 272,4 g) . Odpovídající výtěžek činí 93 %.

MS (El) m/z: [M]⁺: 272, 105.

Příklad 32a

2-Propenyl-trans-7-oxo-6-(2-fenylmethoxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát

Stupeň A:

2-Propenyl-cis-5-hydroxy-l-[(trifluoracetyl)-2-piperidinkarboxylát g (0,059 mol) 1-(1,1-Dimethylethyl)- a 2-(2-propenyl)-cis-5-hydroxy-l,2-piperidindikarboxylátu (popsaného v Rec. Trav. Chim. (1959), 78, str. 648 až 658)

01-0127-03-Ma • ·

131 s molekulovým vzorcem C14H23NO5 (M = 285,3431 g) se rozpustí v 17 ml ethylacetátu.

Při 0 °C se přidá roztok 51 ml chlorovodíku v ethylacetátu při koncentraci 150 g/1.

Reakční prostředí se nechá ohřát zpět na pokojovou teplotu a 1 h a 30 min nechá reagovat za míchání.

Ethylacetát se odpaří za sníženého tlaku, načež následuje vyjmutí v ethyletheru, který se opět odstraní za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 12 g bledě žluté pevné látky, která se smísí s 200 ml tetrahydrofuranu. Reakční prostředí se ochladí na 0 °C a potom se přidá 37,6 ml TEA.

Teplota se udržuje na 0 °C a potom se pozvolna přidá 16,8 ml anhydridu kyseliny trifluoroctové.

Teplota se nechá vzrůst na 20 °C a reakční prostředí se nechá 20 min reagovat za míchání.

Přidá se 20 ml vody.

Získaný roztok se 1 h míchá za pokojové teploty a potom se nalije do 300 ml vody. Roztok se extrahuje ethylacetátem, propláchne vodou, suší nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 15,7 g surového produktu, který se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 90:10 směsí dichlormethanu a ethylacetátu.

01-0127-03-Ma • · · ·

132

Tímto způsobem se získá 12,3 g očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C11H14F3NO4 (M = 281,23 g) ve formě žlutého oleje. Odpovídající výtěžek činí 73 %.

Stupeň B:

2-Propenyl-trans-5-[(fenylmethoxy)amino]-1-(trifluoracetyl)-2-piperidinkarboxylát

Smísí se 10,9 g (38,7 mmol) sloučeniny získané ve stupni A a 150 ml acetonitrilu.

Získaný bledě žlutý roztok se ochladí na -30 °C a potom se přidá 4,94 ml 2,6-lutidinu a 6,7 ml anhydridu kyseliny trifluormethansulfonové. Reakční prostředí se míchá 15 min a potom, stále při -30 °C, se přidá 9,57 g O-benzylhydroxylaminu.

Po přidání celého objemu se teplota nechá vzrůst na 0 °C a reakční prostředí se při této teplotě nechá reagovat 1 h. Potom se přidá 4,9 ml 2,6-lutidinu a vše se ponechá v kontaktu 3 dny při 0 °C.

Reakční směs se potom nalije do 500 ml vody a extrahuje ethylacetátem. Reakční prostředí se postupně propláchne vodou, vodným roztokem fosfátového pufru při pH = 7,0 a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a následně opět vodou.

Sušení se provádí nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 23 g surového produktu, který se rozpustí ve 150 ml dichlormethanu, načež následuje

01-0127-03-Ma • · propláchnutí 10% vodným roztokem kyseliny vinné a potom sušení nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se izoluje 16,1 g žlutého oleje, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém.

Tímto způsobem se získá 12,1 g očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C₁₈H₂₁F3N₂O4 (M = 386,37 g) v krystalické formě. Odpovídající výtěžek činí 72 %.

Stupeň C:

2-Propenyl-trans-5-[(fenylmethoxy)amino]-2-piperidinkarboxylát ml Methanolu se ochladí na -10 °C a potom se přidá 4,15 g (37,8 mmol) NaBH₄.

Za míchání se do této směsi během 30 min, po které se teplota udržuje na -10 °C, pozvolna přidá roztok 10,6 g (27,4 mmol) sloučeniny získané v předchozím stupni v 80 ml methanolu.

Teplota se nechá vzrůst na 0 °C a na této teplotě se udržuje 3 h.

Reakční směs se nalije do 450 ml ledu a vody a 150 ml ethylacetátu, načež následuje dekantace a propláchnutí vodou a potom se organická fáze suší nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 8,2 g žlutého oleje, který se rozpustí v 80 ml tetrahydrofuranu, a přidá se roztok 2,43 g kyseliny oxalové ve 25 ml THF. Oxalát, který krystalizuje, ·· ·« ·· * · · · · · • · · · · · · t « · • · ····· ·· ·

01-0127-03-Ma

134 • · · · · · · · · ······· ·· · · · ·· ·· se odfiltruje a propláchne malým množstvím THF, potom se suší za sníženého tlaku a rozpustí v nasyceném roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Provede se extrakce ethylacetátem, organická fáze se propláchne vodou, vysuší nad bezvodým síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 4,39 g očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem C16H22N2O3 (M = 290,36 g) ve formě oleje, který krystalizuje, jakmile teplota klesne pod 20 °C. Odpovídající výtěžek činí 55 %.

Stupeň D:

2-Propenyl-trans-Ί-oxo-6-(2-fenylmethoxy)-1,6-diazabicyklo [3, 2,1] oktan-2-karboxylát

3,2 g (11 mmol) Oleje získaného v předchozím stupni se rozpustí pod dusíkovou atmosférou v 500 ml acetonitrilu.

Získaný roztok se ochladí na 0 °C pomocí ledové lázně a přidá se 3,37 ml TEA, potom 0,796 ml difosgenu a 1,48 g DMAP.

Teplota se nechá vzrůst na 20 °C a prostředí se nechá reagovat 2 h za míchání.

Reakční směs se potom nalije do 200 ml 0,lN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, přidá se 400 ml vody, načež následuje extrakce dichlormethanem, propláchnutí vodou a sušení nad bezvodým síranem sodným.

Rozpouštědlo se potom odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá 3,1 g očekávané sloučeniny s molekulovým vzorcem • · • ·

01-0127-03-Ma • Λ

135 » · « · « « « · · <9 » · · · • * · · ♦ · · • · * · »

Ci₇H₂oN₂0₄ (M = 316,36 g) výtěžek činí 89 %.	ve	formě	krystalů. Odpovídající
NMR protonové spektrum
1,66 (m) a 2,00 až	2,16	(m) :	O=C-CH-CH2-CH_\|2; 2,94 (d)
a 3,07 (dt) : N-CH^; 3,31	(m) :	: N-CH₂-CH; 4,14 (dd): O=C-CH;
4,68 (dt): CH2-CH=CH₂; 4,	90 a	5,06	[AB] : CH2_-C₆H₅; 5,26 (dq)
a 5,34 (dq): CH₂-CH=CH₂;	5, 92	(m) :	CH₂-CH=CH₂; 7,37 až 7,42

(m) : CgHs..

IR (CHC1₃) : 1748, 1646, 1496 cm’¹.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [2M + Na] ⁺ = 655, [M + Na + CH₃CN]⁺ = 380, [M + Na] ⁺ = 339, [M + H] ⁺ = 317, 289, 91.

Příklad 32b

Kyselina trans-Ί-oxo-6-(fenylmethoxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylová a její cyklohexylaminová sůl

2,21 g (6,98 mmol) Sloučeniny získané v příkladu 32a se rozpustí pod dusíkovou atmosférou ve 44 ml dichlormethanu .

Přidá se 0,5M roztok ethylhexanoátu sodného v ethylacetátu .

Potom se najednou přidá 242 mg tetrakistrifenylfosfinpalladia a reakční prostředí se udržuje 1 h za míchání, načež následuje naředění 22 ml ethylacetátu a nalití do 75 ml nasyceného roztoku NaH₂PO₄.

01-0127-03-Ma ♦ · ·· ««»· »·· · » - « · <

* · ·»«·« « « 9 ···» · * « » 9 * · * ? ··*«

136 .................

Provede se extrakce ethylacetátem a organická fáze se suší nad bezvodým síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá 3,5 g of žlutého zbytku, který se rozpustí ve směsi 11 ml ethylacetátu a 0,8 ml cyklohexylaminu.

Krystalická cyklohexylaminová sůl se separuje filtrací a propláchne ethyletherem, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku. Tímto způsobem se celkem získá 2,51 g krystalické soli, která se rozpustí ve 25 ml nasyceného vodného roztoku NaH₂PO₄. Po extrakci ethylacetátem se organické fáze sloučí a vysuší nad bezvodým síranem sodným a potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se izoluje 1,82 g očekávané sloučeniny molekulového vzorce C₁₄H₁₆N₂O₄ (M = 276, 29 g) v krystalické formě. Odpovídající výtěžek činí 94 %.

NMR protonové spektrum

V CDCI3 při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,68 (m) a 2,20 až 2,22 (m) : CH-CH27CH27CH; 2,89 (d) a

3,11 (ddd) : N-CH2.; 3,34 (dd) N-CH₂-CH; 4,13 (br d) :

N-CH-C=O; 4,90 a 5,05 [AB] : CH2-O; 7,32 až 7,43: C₆H₅.

MS (SIMS) m/z: [M + Na] ⁺ = 299, [M + H] ⁺ = 277, 91.

01-0127-03-Ma

137 ·» »· • · t ···* • · * ·* 4 ·· « ···· ·· ··

Příklad 33a

Pyridiniová sůl trans-Ί-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu

Stupeň A:

trans-Ί-Oxo-6-(fenylmethoxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid

1,1 g (4 mmol) Sloučeniny získané v příkladu 32b se rozpustí ve 30 ml dichlormethanu.

Do tohoto roztoku se přidá 0,67 ml TEA.

Roztok se ochladí na 5 °C a poměrně rychle se přidá 0,57 ml isobutylchlorformiátu.

V míchání se pokračuje 20 min při 5 °C, načež se pozvolna za bouřlivého míchání přidají 3 ml koncentrovaného amoniaku.

V míchání se pokračuje 1 h při pokojové teplotě, reakční prostředí se naředí 30 ml vody, načež následuje extrakce dichlormethanem, propláchnutí vodou, sušení nad bezvodým síranem sodným a zahuštění za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 1,1 g očekávaného produktu molekulového vzorce C₁₄Hi7N₃O₃ (M = 275,31 g) . Výtěžek je kvantitativní.

• · 4» ·

01-0127-03-Ma • ·

138

Stupeň B:

trans-6-Hydroxy-7-oxo-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid

Smísí se 1,1 g sloučeniny získané ve stupni A, 30 ml methanolu a 300 mg 10% Pd/C.

Reakční prostředí se umístí pod vodíkovou atmosféru a potom se směs bouřlivě míchá 45 min.

Katalyzátor se potom odfiltruje, propláchne methanolem a následně směsí dichlormethanu a methanolu.

Filtrát se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 800 mg očekávaného produktu molekulového vzorce C7H11N3O3 (M = 185,15 g) ve formě bezbarvé pěny.

Stupeň C:

Pyridiniová sůl trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-1, 6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu

Pod dusíkovou atmosférou se smísí 800 mg získané sloučeniny a 20 ml bezvodého pyridinu.

Potom se přidá 1,91 g S0₃-pyridinového komplexu.

Směs se míchá 20 h za pokojové teploty.

Reakční prostředí se potom odfiltruje a rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

• ·

01-0127-03-Ma • »

139

Tímto způsobem se získá očekávaný produkt molekulového vzorce Ci₂Hi₆N₄O6S · C₅H₅N (M = 344,35 g) ve formě žlutého produktu.

Příklad 33b

Tetrabutylamoniová sůl trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-1, 6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu

Produkt získaný v předchozím kroku se zavede do 40 ml koncentrovaného vodného roztoku NaH₂PO₄, takže se získá pH hodnota 4.

Provede se extrakce ethylacetátem a do vodné fáze se potom přidá 1,01 g hydrogensíranu tetrabutylamonného.

Míchání se provádí 10 min za pokojové teploty, načež následuje extrakce 4x 300 ml ethylacetátu, sušení organické fáze nad bezvodým síranem sodným a zahuštění za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 1,530 g bezbarvé pěny, která se purifikuje chromatografii na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 50:48:2 směsí acetonu, dichlormethanu a TEA.

Tímto způsobem se získá 1,02 g očekávaného produktu s molekulovým vzorcem C₂₃H₄6N₄O₆S (M = 506,71 g) ve formě bezbarvé pěny. Celkový odpovídající výtěžek činí 50 %.

• ·

01-0127-03-Ma ···· ··* ·· ·

140

Příklad 33c

Sodná sůl trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-l,6-diazabicyklo[3,2,l]~ oktan-2-karboxamidu

Produkt získaný v příkladu 33b se rozpustí v 7 ml 1:1 směsi acetonu a vody a následně zavede do kolony 180 g DOWEX 50WX8 pryskyřice v Na⁺ formě a eluuje vodou. Po odpaření vody za sníženého tlaku produkt krystalizuje.

Tímto způsobem se získá 542 mg očekávané sloučeniny obecného vzorce C7Hi₀N3NaO₆S (M = 287,23 g) . Odpovídající výtěžek činí 94 %.

NMR protonové spektrum

V DMSO při 300 MHz, chemické posuny píků v ppm a multiplicita:

1,55	až 2,10	(3H) :	CH-	-CH₂-CH2_-CH; 2,	91	(d) a
3,02 (br N-CH-C=O;	d) : N-CH₂; 7,23 a 7,44:	3,38 NH₂.	(br	s) : N-CH₂-CH;	3,68	(d) :

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M] = 264.

Příklady 34 až 47

Následující karboxamidy se připraví postupem, který je podobný postupu použitému v příkladu 33, přičemž se vychází ze 110 mg kyseliny získané v příkladu 32b.

Jediným rozdílem je to, že se reakční činidlo použité ve stupni 1, tj . roztok amoniaku, nahradí roztokem odpovídajícího aminu.

01-0127-03-Ma • ·

141

Mění se tedy pouze R_x skupina definice obecného vzorce I.

Příklad 34

Vychází se ze 49 μΐ benzylaminu a získá se 64 mg sodné soli trans-Ί-oxo-N- (fenylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. celkový výtěžek 38 %.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [M + Na]⁺ = 400, [M + H] ⁺ = 378.

Příklad 35

Vychází se ze 43 μΐ 2-pyridinmethanaminu a získá se 37 mg sodné soli trans-Ί-oxo-N-(2-pyridinylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. celkový výtěžek 14 %.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [M + H]⁺ = 379.

Přiklad 36

Vychází se z 51,3 mg 3-pyridinethanaminu a získá se 42 mg sodné soli trans-Ί-oxo-N- [2-(3-pyridinyl)ethyl]-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. celkový výtěžek 20 %.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [Μ + H]⁺ =

393.

01-0127-03-Ma

142

Příklad 37

Vychází se z 51,3 mg 4-pyridinethanaminu a získá se 40 mg sodné soli trans-l-oxo-N- [2-(4-pyridinyl)ethyl]-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 20 %.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [M + Na]⁺ = 415, [M + H]⁺ = 393.

Příklad 38

Vychází se z 50,2 mg 2-pyridinethanaminu a získá se 45 mg sodné soli trans-7-oxo-M-[2-(2-pyridinyl)ethyl]-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 23 %.

MS (pozitivní elektrosprej) m/z: [M + H]⁺ = 393.

Příklad 39

Vychází se z 58,3 mg 3-aminobenzamidu a získá se 43 mg sodné soli trans-N- [3-(aminokarbonyl)fenyl]-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 22 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M] = 383.

Příklad 40

Vychází se z 58,3 mg získá se 65,3 mg sodné

4-dimethylaminobenzenaminu a soli trans-N-[4-(dimethyl01-0127-03-Ma

143 amino)fenyl]-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 40 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M]~ = 383.

Příklad 41

Vychází se z 58,3 mg 3-dimethylaminobenzenaminu a získá se 91 mg sodné soli trans-N- [3-(dimethylamino) fenyl]-7-OXO-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 54 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M] ” = 38 3.

Příklad 42

Vychází se ze 43 μΐ 4-pyridinmethanaminu a získá se 24,6 mg sodné soli trans-Ί-oxo-N- [(4-pyridinyl)methyl]-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 15 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M]~ = 355.

Příklad 43

Vychází se z 44 μΐ 3-pyridinmethanaminu a získá se 44,7 mg sodné soli trans-Ί-oxo-N-(3-pyridinylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 26 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M]= 355.

01-0127-03-Ma

144

Příklad 44

Vychází se z 84 mg (±) -a-aminobenzenpropanamidu a získá se 55 mg sodné soli trans-N- (l-amino-l-oxo-3-fenyl-2-propyl)-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 27 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M] ” = 411, 321.

Příklad 45

Vychází se z 46 mg 2-aminoacetamidu, hydrochloridu a 61 μΐ TEA a získá se 25 mg sodné soli trans-N- (2-amino-2-oxoethyl)-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 13 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M]' = 321, 249.

Příklad 46

Vychází se z 64 mg (3-aminofenyl)močoviny a získá se 43 mg sodné soli trans-N- [3-[(aminokarbonyl)amino]fenyl]-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 24 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M]' = 398, 153, 111.

Příklad 47

Vychází se z 63 mg (±)-α-aminobenzenacetamidu a získá se 64 mg sodné soli trans-N-(2-amino-2-oxo-l-fenylethyl)-701-0127-03-Ma ·· ·· 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 · · ► ·· • · ····· ·· • · · · · · ·

145 ...............

-οχο-β-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]-oktan-2-karboxamidu, tj. výtěžek 38 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M] = 397.

Příklady 48 až 51

Následující sloučeniny se připraví ze 110 mg sloučeniny získané ve stupni E příkladu 32, která se v každém případě esterifikuje vhodným alkoholem, ve snaze připravit finální produkt.

Potom se provádí podobný postup, jaký byl popsán ve stupních B až E příkladu 33.

Příklad 48

Vychází se z 31,5 mg 2-hydroxyacetamidu a získá se 54 mg sodné soli 2-amino-2-oxoethyl-trans-Ί-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylátu, tj. výtěžek 32 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M] = 322.

Příklad 49

Vychází se z 51,7 mg 4-pyridinethanolu a získá se 20 mg sodné soli 2-(4-pyridinyl)ethyl-trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylátu, tj. výtěžek 8,5 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [ M ] - 37 0.

01-0127-03-Ma

146

Příklad 50

Vychází se z 47,3 mg 2-pyridinethanolu a získá se 47 mg sodné soli 2-(2-pyridinyl)ethyl-trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylátu, tj. výtěžek 23,4 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [ M ] ”= 370.

Příklad 51

Vychází se z 57,7 mg 3-pyridinethanolu a získá se 50 mg sodné soli 2-(3-pyridinyl)ethyl-trans-Ί-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylátu, tj. výtěžek 26 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [ M ] ”= 37 0.

Farmakologická studie produktů podle vynálezu

In vitro aktivita, způsob ředění v kapalném prostředí

Připraví se řada zkumavek, do kterých se rozdělí stejné množství sterilního výživného prostředí. Do jednotlivých zkumavek se umístí zvyšující se množství produktu, který má být podroben studii, a následně se každá zkumavka naočkuje bakteriálním kmenem. Po 24h inkubaci v inkubátoru při 37 °C se pomocí transiluminace, která umožňuje hodnotit minimální inhibiční koncentrace (M.I.C.), hodnotí inhibice růstu, vyjádřeno v pg/ml.

Pro testy se použijí následující produkty podle vynálezu:

• · • · · ·

01-0127-03-Ma

147

Test A: Sodná sůl trans-N- (2-amino-2-oxoethyl)-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, jejíž příprava je popsána v příkladu 45.

Test B: Sodná sůl trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-l,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, jejíž příprava je popsána v příkladu 33c.

Test C: Sodná sůl trans-Ί-oxo-N- (3-pyridinylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, jejíž příprava je popsána v příkladu 43.

Test D: Sodná sůl trans-7-oxo-W-[(4-pyridinyl)methyl]-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, jejíž příprava je popsána v příkladu 42.

Test E: Sodná sůl trans-Ί-oxo-N- (fenylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamidu, jejíž příprava je popsána v příkladu 34.

Test F: Sodná sůl fenylmethyl-trans-7-οχο-β-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylátu, jejíž příprava je popsána v příkladu 28b.

Výsledky jsou shrnuty v následující tabulce.

01-0127-03-Ma

148

	M.I.C. měřeno v μρ/πιΐ
TEST	č.
Kmeny	Kód	A	B	C	D	E	F
S. aureus SG511	011 HT3	>160	>160	>80	>80	5	160
S. aureus Exp 54146	011UC4	>160	>160	>80	>80	5	160
S. Pyogenes A561	02A1UC1	160	>160	>80	>80	1,2	*
E. coli	250HT11	160	80	20	20	>80	*
E.coli DC2 (propustný)	250HT6	80	40	20	20	>80	*
E.coli (nadměrně propustný)	250IP5	20	10	5	2,5	20	*

* Neurčeno

Sloučeniny podle vynálezu tedy vykazuji antibakteriální účinnost.

Příklad farmaceutické kompozice

Připraví se farmaceutické kompozice určená pro injekci, která obsahuje:

Sloučenina z příkladu 33c - 500 mg a sterilní excipient, v množství potřebném pro doplnění do 5 cm³.

vodný toto ·· «V ·» < * • « · · · < ► « · · » · ·*··· «· ·

01-0127-03-Ma

149 • to ·· · · » · · «•««•••to toto to to to «· «·

Přiklad 52

Sodná sůl 3-methoxy-6-(sulfooxy)-l,6-diazabicyklo[3,2,l]-okt-3-en-7-onu

Stupeň A:

g (50 mmol) 1,l-dimethylethyl-3,5-dioxo-l-piperidinkarboxylátu se rozpustí v 10 ml methanolu a potom se přidá 6 g (54 mmol) O-allylhydroxylaminaminu, hydrochloridu.

Reakční prostředí se nechá 3 h míchat a potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Zbytek se vyjme ve vodě, načež následuje extrakce dichlormethanem. Organická fáze se propláchne vodou a potom vysuší nad bezvodým síranem sodným.

Po filtraci a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku se získá 10,6 g l,l-dimethylethyl-5-methoxy-3-[(2-propenyloxy)imino]-3,6-dihydro-l(2H)-pyridinkarboxylátu s molekulovým vzorcem C14H22N2O4 (M = 282,342 g) .

Odpovídající výtěžek činí 75 %.

Stupeň B:

10,6 g (37,6 mmol) Produktu získaného ve stupni A a 212 ml methanolu se umístí do baňky.

01-0127-03-Ma ·· ··♦<

• ·« 4 *4 «44» 4» 4* * • e « · · · * « « * • «441 44·« « * * 44 4 · · 4 ·

4444 44·4 ·« 444 4 *“ 44

Roztok se ochladí na -5 °C a přidá se 37,8 g kyanoborohydridu sodného a potom 58,2 ml etherátu fluoridu boritého.

Reakční prostředí se následně naředí dichlormethanem, vlije do směsi vody a 2N roztoku sody, extrahuje dichlormethanem a organická fáze se propláchne vodou, následně se suší nad bezvodým síranem sodným, přefiltruje a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Získaný produkt se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 10:90 směsí AcOEt a dichiormethanu.

Tímto způsobem se získá 5,5 g 1,l-dimethylethyi-5-methoxy-3-[(2-propenyloxy)amino]-3, 6-dihydro-l(2H) -pyridinkarboxylátu molekulového vzorce C14H24N2O2 (M = 284,36 g). Odpovídající výtěžek činí 51 %.

Stupeň C:

Do baňky se zavede 5,5 g (19,3 mmol) produktu získaného ve stupni B, 27,5 ml dichiormethanu a 4,2 ml anisolu.

Potom se přidá 27,5 ml kyseliny trifluoroctové.

TFA a Dichlormethan se odstraní za sníženého tlaku.

Zbytek se vyjme ve vodě a následně třikrát extrahuje AcOEt. Vodná fáze se alkalizuje přidáním hydroxidu amonného a potom opět extrahuje AcOEt.

01-0127-03-Ma

151

Organické fáze se propláchnou vodou, potom vysuší nad bezvodým síranem sodným, přefiltrují a potom odpařováním zbaví rozpouštědla za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 2,45 g 5-methoxy-N-(2-propenyloxy)-1,2,3,6-tetrahydro-3-pyridinaminu molekulového vzorce C9H16N2O2 (M = 184,24 g) .

Odpovídající výtěžek činí 69 %.

Stupeň D:

Pod inertní atmosférou se rozpustí 2,45 g (0,0133 mmol) produktu získaného ve stupni C v 826 ml acetonitrilu a roztok se ochladí na 0 °C. Přidá se 0,778 ml difosgenu.

Teplota se nechá opět vzrůst na pokojovou teplotu a potom se přidá 5,56 ml TEA.

Míchání se provádí přes noc za pokojové teploty a potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Zbytek se vyjme ve vodě, načež následuje extrakce AcOEt, organická fáze se propláchne vodou a potom vysuší nad bezvodým síranem sodným, načež následuje filtrace a potom odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku.

Zbytek se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 1:9 směsí AcOEt a dichlormethanu.

Tímto způsobem se získá 1,13 g 3-methoxy-6-(2-propenyloxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]okt-3-en-7-onu s mole01-0127-03-Ma * · · * ···· ··· · · · • · ····· ·· · • · ·· ·····

152 .................

kulovým vzorcem C1OH14N2O3 (M = 210,23 g) . Odpovídající výtěžek činí 40,3 %.

Stupeň E:

105 mg (0,5 mmol) Produktu získaného ve stupni D se rozpustí v baňce umístěné pod inertní atmosférou v 1,1 ml dichlormethanu a přidá se 57 μΐ kyseliny octové a potom 317 mg Pd [ P (C₆H₅) ₃] ₄ ·

Po 1 h trvající reakci se přidá 1,1 ml pyridinu a následně 238 mg S0₃-pyrídinového komplexu.

Míchání se provádí přes noc, načež se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku.

Zbytek se vyjme ve vodě, následuje extrakce dichlormethanem a propláchnutí vodou. Organická fáze se suší nad bezvodým síranem sodným, následuje filtrace a odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku.

Zbytek se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 50:50 směsí trichlormethanu a acetonitrilu.

Tímto způsobem se získá 148 mg 1-propenyltrifenylfosfoniové soli 3-methoxy-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]okt-3-en-7-onu molekulového vzorce C28H29N2O6PS. Odpovídající výtěžek činí 53 %.

01-0127-03-Ma

153

Stupeň F:

148 mg Produktu získaného ve stupni E se rozpustí ve vodě obsahující 10% THF.

Získaný roztok se vede přes kolonu DOWEX 50WX8 pryskyřice v Na⁺ formě, kdy se jako eluční soustava použije voda obsahující 10% THF.

Jímaný produkt se lyofilizuje, čímž se získá 51 mg tt 7 o v r a m ΓΉΐ-Ϊ^ΚΙ.-.ΓΉ^ΝΙ =i

V £j VX / A Λ XN (M = 272,21 g) .

Odpovídající výtěžek činí 70

NMR protonové spektrum

3,04 (d) a 3,25 (dd): C=CH-CH-CH₂-N; 3,41 (d) a

3,71 (dd) : N-CH₂-C=CH; 3,47 (s): CH₃-O; 4,20 (dd) :

C=CH-Cg-CH₂-N; 5,19 (br d) : OCH-CH-CH₂-N.

MS (záporný elektrospre j) m/z: [M] = 249, [M - CH₃]^- = 235.

Příklad 53

Sodná sůl 3-methoxy-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]okt-3-en-7-onu

Stupeň A:

1,03 g (5,2 mmol) 1,l-Dimethylethyl-3,6-dihydro-3-oxo-1(2Hj-pyridinkarboxylátu molekulového vzorce C10H15NO3 se rozpustí v 15 ml ethanolu. Přidá se 572 mg (5,2 mmol) O-allylhydroxylaminaminu a potom 1,3 ml pyridinu.

01-0127-03-Ma • · • · · ·

154

Reakční směs se nechá stát za míchání 15 min, potom se přidá 100 ml dichlormethanu, následuje propláchnutí 10% vodným roztokem kyseliny vinné a potom se organická fáze suší nad bezvodým síranem hořečnatým.

Provede se filtrace a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 1,36 g 1,l-dimethylethyl-3,6-dihydro-3- [ (2-propenyloxy) imino] -1 (2řř) -pyridinkarboxylátu s molekulovým vzorcem C13H20N9O3 (M = 252,32 g) . Odpovídající výtěžek je kvantitativní.

Stupeň B:

Zopakuje se postup naznačený ve stupni A příkladu 52, přičemž se vychází z 1,38 g produktu získaného ve stupni A, 15,1 g kyanoborohydridu sodného a 8,3 ml etherátu fluoridu boritého.

Tímto způsobem se po purifikaci získá 0, 99 g směsi, jejíž dvě třetiny tvoří 1,l-dimethylethyl-3-[(2-propenyloxy)amino]-1-piperidinkarboxylát a jednu třetinu tvoří 1,l-dimethylethyl-3,6-dihydro-3-[(2-propenyloxy)amino]-1(2H)-pyridinkarboxylát s molekulovým vzorcem C13H22N2O3 (M = 254,33 g) . Odpovídající výtěžek činí 71 %.

Stupeň C:

1,07 g (4,26 mmol) Směs získané ve stupni B se rozpustí ve 2 ml AcOEt. Reakční prostředí se ochladí na 0 °C a potom se přidá 5,8 ml 7,3M roztoku chlorovodíku v

01-0127-03-Ma » · ·· ·* ··· · • · · · · · · • · ····· · · ·

155

AcOEt. Reakční prostředí se nechá reagovat 2 h a 30 min při 0 °C.

Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku, potom se zbytek vyjme v etheru, sraženina se odfiltruje a suší za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 560 mg N- (2-propenyloxy)-1,2,3,6-tetrahydro-3-pyridinaminu, dihydrochloridu s molekulovým vzorcem C8H16CI2N2O (M = 227,14 g) .

Odpovídající výtěžek činí 57 %.

Stupeň D:

560 mg (2,46 mmol) Produktu získaného ve stupni C se rozpustí v 6 ml dichlormethanu a potom se přidá 2,5 ml 2N roztoku sody.

Reakční prostředí se dekantuje extrahuje AcOEt.

a vodná fáze se

Organické fáze se sloučí, potom suší nad síranem hořečnatým, načež následuje filtrace a rozpouštědla za sníženého tlaku.

bezvodým odpaření

Tímto způsobem se získá 278 mg N-(2-propenyloxy)-1,2,3,6-tetrahydro-3-pyridinaminu s molekulovým vzorcem C₈H₁₄N₂O (M = 154,21 g) .

Odpovídající výtěžek činí 73 %.

01-0127-03-Ma • · ···· · · · · · · • · ····· ·· · • ···· ···· ·

Stupeň E:

Pod argonovou	atmosférou	se rozpustí	270	mg
(1,75 mmol) produktu	získaného	ve stupni D ve	45	ml
acetonitrilu a potom	se přidá	760 μΐ TEA a	105	μΐ
difosgenu.
Reakční prostředí	se nechá reagovat 15 min při	0	°C,

potom se nechá ohřát zpět na pokojovou teplotu a reagovat další 2 h.

Přidá se 213 mg DMAP a potom se reakční prostředí nechá reagovat přes noc.

Přidá se AcOEt a následuje propláchnutí 10% vodným roztokem kyseliny vinné a vodou.

Organická fáze se suší nad bezvodým síranem hořečnatým a následuje filtrace a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Získaný surový produkt se purifikuje na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 95:5 směsí dichlormethanu a acetonu obsahující 0,1 % TEA.

Tímto způsobem se získá 36 mg 6-(2-propenyloxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]okt-3-en-7-onu s molekulovým vzorcem C₉Hi₂N₂O₂ (M = 180,21 g) .

Odpovídající výtěžek činí 11 %.

Stupeň F:

Provede se podobný postup jako v kroku E příkladu 52, přičemž se vychází z 51 mg (0,27 mmol) produktu získaného

01-0127-03-Ma • ·

157 ve stupni E, 33 μΐ kyseliny octové, 165 mg Pd [P (C₆H₅)₃]₄ a 132 mg SC>3-pyridinového komplexu.

Tímto způsobem se trifenylfosfoniové soli [3,2,1]okt-3-en-7-onu.

získá 29,6 mg 1-propenyl6-(sulfooxy)-1,6-diazabicykloTato sůl se vede přes kolonu DOWEX 50WX8 pryskyřice v Na⁺ formě a eluuje vodou obsahující 10% THF.

Jímaný produkt se lyofilizuje, čímž se získá 13 mg očekávané sodné soli s molekulovým vzorcem C6H7N₂O₅SNa (M = 242,19 g).

Odpovídající výtěžek činí 20 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M] ” = 219.

Příklad 54

Sodná sůl 6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-onu

Stupeň A:

Zopakuje se postup ze stupně A příkladu 53, přičemž se vychází z 12 g (0,061 mol) 1,l-dimethylethyl-3,6-dihydro-3-oxo-1 (277)-pyridinkarboxylátu s molekulovým vzorcem C₁₀H₁₅NO₃, 9,7 g O~benzylhydroxylaminu, hydrochloridu a 15 ml pyridinu.

Tímto způsobem se získá 19,4 g 1,l-dimethylethyl-3,6-dihydro-3-[(fenylmethoxy)imino]-1(2H)-pyridinkarboxylátu s molekulovým vzorcem Ci₇H₂₂N₂O₃ (M = 302,38 g) . Odpovídající výtěžek je kvantitativní.

• · « · • · · ·

01-0127-03-Ma • · • · · ·

158

Stupeň B:

Zopakuje se postup naznačený ve stupni B příkladu 53, přičemž se vychází ze 14,9 g (0,0496 mol) produktu získaného ve stupni A, 12 g kyanoborohydridu sodného a 30 ml etherátu fluoridu boritého.

Po purifikaci se tímto způsobem získá 8,2 g směsi tvořené ze dvou třetin l,l-dimethylethyl-3,6-dihydro-3-[(fenylmethoxy)amino]-1(2H)-pyridinkarboxylátem a z jedné třetiny 1,l-dimethylethyl-3-[(fenylmethoxy)amino]-1-piperidinkarboxylátem s molekulovým vzorcem C17H22N2O3 (M = 304,39 g). Odpovídající výtěžek činí 55 %.

Stupeň C:

Zopakuje se postup naznačený ve stupni C příkladu 53, přičemž se vychází z 9,3 g (0,0306 mol) směsi získané ve stupni B a 106 ml 7 mol/l roztoku chlorovodíku v AcOEt.

Tímto způsobem se získá 8,39 g směsi tvořené ze dvou třetin N- (fenylmethoxy)-1,2,3,6-tetrahydro-3-pyridinaminem, dihydrochloridem a z jedné třetiny N- (fenylmethoxy)-3-piperidinaminem, dihydrochloridem s molekulovým vzorcem C3.2H18CI2N2O (M = 277,20 g) . Odpovídající výtěžek činí 98 %.

Stupeň D:

Zopakuje se postup naznačený ve stupni D příkladu 53, přičemž se vychází z 8,30 g (0,0299 mol) směsi získané ve stupni C a 30 ml 2N roztoku sody.

01-0127-03-Ma

Tímto způsobem se získá 5,95 g směsi tvořené ze dvou třetin N-(fenylmethoxy)-1,2,3,6-tetrahydro-3-pyridinaminem a z jedné třetiny N- (fenylmethoxy)-3-piperidinaminem s molekulovým vzorcem Ci₂Hi₆N₂O (M = 204,27 g) .

Odpovídající výtěžek činí 98 %.

Stupeň E:

v, _ X TT Z-4 Ul CO

Li kjpa jvu j tr oc ρυουυρ ηαΔηαοχιιγ v ouuj^íix n» piiMduu u u , přičemž se vychází z 5,02 g (0,0246 mol) směsi získané ve stupni D, 2,43 ml difosgenu, 7,4 ml TEA a 3 g DMAP.

Do baňky opatřené magnetickým míchadlem se při 0 °C a pod argonovou atmosférou zavede 5,020 g (0,0246 mol) produktu získaného ve stupni D a 1,2 ml 1,2-dichlorethanu. Přidá se 2,43 g difosgenu.

Tímto způsobem se po purifikaci jímá 2,4 g 6-(fenylmethoxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]okt-3-en-7-onu s molekulovým vzorcem Ci₃Hi₄N₂O₂ (M = 230,27 g) . Odpovídající výtěžek činí 42 %.

Rovněž se jímá 512 mg 6-(fenylmethoxy)-1,6-diazabicyklo [3, 2, 1] oktan-7-onu s molekulovým vzorcem Οι₃Η!6Ν₂Ο₂(M = 232,27 g).

Odpovídající výtěžek činí 9 %.

01-0127-03-Ma

160

Stupeň F:

0,128 g (0,551 mmol) 6-(Fenylmethoxy)-1,6-diazabicyklo [3, 2, 1] oktan-7-onu získaného ve stupni E se rozpustí v 1 ml methanolu.

Přidá se 0,035 g Pd/C katalyzátoru a reakční prostředí se umístí za normálního tlaku pod vodíkovou atmosféru.

Na konci reakce se reakční prostředí přefiltruje, průpletchrne iLiethaiioleiii a rozpouštědlo se odpai tlaku.

Tímto způsobem se získá 76 mg 6-hydroxy-l,6-diazabicyklo [3,2,1 ] oktan-7-onu s molekulovým vzorcem C₆HioN₂0₂(M = 142,16 g) . Odpovídající výtěžek je kvantitativní.

Stupeň G:

Do baňky umístěné pod inertní atmosférou se zavede 75 mg (0,528 mmol) produktu získaného ve stupni F ve 2 ml pyridinu.

Přidá se 235 mg S0₃-pyridinového komplexu a směs se nechá reagovat 2 h.

Potom se přidá několik kapek vody a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku.

Tímto způsobem se získá 361 mg surového produktu, který se purifikuje chromatografií na oxidu křemičitém za použití eluční soustavy tvořené 6:4 směsí dichlormethanu a ethanolu obsahující 0,1 % hmotn. TEA.

01-0127-03-Ma

161

Tímto způsobem se jímá 32 mg purifikované triethylamoníové soli 6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-7-onu s molekulovým vzorcem C_UH₁₅N₃O5S (M = 301,32 g) . Odpovídající výtěžek činí 17 %.

Stupeň H:

mg Produktu získaného ve stupni G se rozpustí v 0,5 ml vody obsahující 10 % THF.

Získaný roztok se vede přes kolonu DOWEX 50WX8 pryskyřice ve formě Na⁺ a eluuje vodou obsahující 10 % THF.

Získaný produkt se lyofilizuje, čímž se získá 20 mg očekávané sodné soli s molekulovým vzorcem CgHgNzOsSNa (M = 221 g).

Odpovídající výtěžek činí 77 %.

MS (záporný elektrosprej) m/z: [M-H]” = 221.

• · · · * · ♦ · · ·

01-0127-03-Ma

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina obecného vzorce I nebo jedna z jejích solí s bází nebo kyselinou:

(I) r

kde:

Ri reprezentuje atom vodíku, COOH, CN, COOR, CONR6R7, ^NRe (CH₂)_n'R5 nebo ^hr, radikál,

R se zvolí z množiny tvořené alkylovým radikálem obsahujícím 1 až 6 atomů uhlíku, případně substituovaným pyridylovým nebo karbamoylovým radikálem, -CH2-alkenylovým radikálem obsahujícím maximálně 3 až 9 atomů uhlíku, arylovým radikálem obsahujícím 6 až 10 atomů uhlíku nebo arylalkylovým radikálem obsahujícím 7 až 11 atomů uhlíku, přičemž kruh arylového nebo arylalkylového radikálu je případně substituován OH, NH₂, NO₂, alkylovým radikálem obsahujícím 1 až 6 atomů uhlíku, alkoxyradikálem obsahujícím 1 až

01-0127-03-Ma

163

6 atomů uhlíku nebo jedním nebo více atomy halogenu,

R₆ a R₇ jsou identické nebo rozdílné a zvolí se z množiny sestávající z atomu vodíku, alkylového radikálu obsahujícího 1 až 6 atomů uhlíku, arylového radikálu obsahujícího 6 až 10 atomů uhlíku a arylalkylového radikálu obsahujícího 7 až 11 atomů uhlíku, případně substituovaných karbamoylovým radikálem, ureidoradikálem nebo dimethylaminoradikálem a alkylovým radikálem obsahujícím 1 až 6 atomů uhlíku substituovaným pyridylovým radikálem, n' je rovno 1 nebo 2 a R₅ se zvolí z množiny tvořené COOH, CN, OH, NH₂, CO-NR₆R₇, COOR, OR, OCOH, OCOR, OCOOR, OCONHR, OCONH₂, NHR, NHCOH, NHCOR, NHSO₂R, NH-COOR, NH-CO-NHR nebo NHCONH₂, R, R₆ a R₇ jsou definovány výše;

R₂ reprezentuje atom vodíku nebo (CH₂)_n'iR₅ skupinu, n i je rovno 0, 1 nebo 2 a R5 je definováno výše;

R₃ reprezentuje atom vodíku nebo alkylový radikál obsahující 1 až 6 atomů uhlíku;

A reprezentuje vazbu mezi dvěma uhlíkovými nosiči Ri a rz=rC(H)-R,

R₂ nebo ' skupinu, kde R₄ reprezentuje atom vodíku nebo (CH₂)_n'iR5 skupinu, n'1 a R₅ jsou definovány výše, tečkovaná čára reprezentuje případnou vazbu s jedním nebo druhým uhlíkovým nosičem substituentů Ri a R₂;

n je rovno 1 nebo 2;

01-0127-03-Ma

1β4

X reprezentuje dvouvaznou -C(O)-B- skupinu navázanou na atom dusíku přes atom uhlíku,

-0- (CH₂)n^_ skupinu skupinu přes atom

B reprezentuje dvouvaznou navázanou na karbonylovou kyslíku, -NRg-(CH₂) n^- nebo -NRg-O- skupinu navázanou na karbonylovou skupinu přes atom dusíku, n je rovno 0 nebo 1 a R₈ se zvolí z množiny tvořené atomem vodíku, OH, R, OR, Y, OY, Yi, 0Y_lř Y₂, 0Y₂, Y₃, OCH₂CH₂SO_mR, OSiR_aR_bR_c a

SiR_aR_bR_c radikálem, R_a, R_b a R_c jednotlivě znamenají lineární nebo větvený alkylový radikál obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo arylový radikál obsahující 6 až 10 atomů uhlíku, R je definováno výše a m je rovno 0, 1 nebo 2;

Y se zvolí z množiny tvořené COH, COR, COOR, CONH₂, CONHR, CONHOH, CONHSO₂R, CH₂COOH, CH₂COOR, CH₂CONHOH, CH₂CONHCN, CH₂-tetrazolem, chráněným CH₂-tetrazolem, CH₂SO₃H, CH₂SO₂R, CH₂PO(OR)₂, CH₂PO(OR)(OH), CH₂PO(R)(OH) a CH₂PO(OH)₂ radikály,

Yj se zvolí z množiny tvořené SO₂R, SO₂NHCOH, SO₂NHCOR, so₂nhcoor, so₂nhconhr, SO₂NHCONH₂ a SO₃H radikály,

Y₂ se zvolí z množiny tvořené PO(OH)₂, PO(OR)₂, PO(OH)(OR) a PO(OH)(R) radikály,

Y₃ se zvolí z množiny tvořené tetrazolovými radikály, tetrazolem substituovaným R radikálem, skvarátem, NH- nebo NR-tetrazolem, NH- nebo NR-tetrazolem substituovaným R radikálem, NHSO₂R a NRSO₂R, kde R je definováno výše;

01-0127-03-Ma chápat, že pokud je n rovno 1 a A

165 — C(H)-R, přičemž je třeba reprezentuj e vodíku a buď X reprezentuje -C (0)-0-(CH₂) _n skupinu, kde n znamená 0 nebo 1, nebo X reprezentuje -CO-NRg- (CH₂) _n skupinu, kde n znamená 1 a R₈ znamená isopropylovou skupinu, nebo X reprezentuje -CO-NR₈- (CH₂) _n- skupinu, kde n znamená 0 a R₈ znamená atom vodíku nebo fenylovou skupinu, potom nemohou všechny tři R_iz R₂ a R₃ současně reprezentovat atom vodíku.
2. Sloučenina podle nároku 1, vyznačující se tím, že n j e rovno 1. .

skupinu, kde R₄ znamená atom
3. Sloučenina podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že A reprezentuje — C(H)-R,

I j skupinu, jak je definována v nároku 1.
4. Sloučenina podle nároku 3, vyznačující se tím, že

R₄ reprezentuje atom vodíku.

01-0127-03-Ma

166
5. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že X reprezentuje dvouvaznou -CO-Bskupinu, ve které B reprezentuje -NR₈-(CH2)_n skupinu, jak je definována v nároku 1.
6. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5, vyznačující se tím, že Rg znamená Υχ skupinu nebo ΟΥχ skupinu, kde se Υχ zvolí z SO2R, SO2NHCOR, SO₂NHCOOR, cn.wurnHHD i rl π Vál v y z η 3.1Π ó β f i π o v 3 π y nároku 1.
7. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 mající následující názvy:

trans-Ί-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,l]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-7-oxo-W-(fenylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-l-oxo-N- (4-pyridinylmethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-Ί-oxo-N- (3-pyridinylmethyl)-6-(sulfooxy)-1, 6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl, trans-7-oxo-N- (2-amino-2-oxoethyl)-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo [3,2,1]oktan-2-karboxamid a jeho bazické soli, zejména sodná sůl,

01-0127-03-Ma

167 fenylmethyl-trans-7-oxo-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyklo[3,2,1]oktan-2-karboxylát.
8. Způsob přípravy sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, vyznačující se tím, že zahrnuje:

a) stupeň, během kterého se sloučenina obecného vzorce II uvede do reakce s karbonylačním činidlem, pokud je to vhodné v přítomnosti báze:

R'i reprezentuje atom vodíku nebo CN, chráněný COOH,

COOR', (CH₂)n'R'5ř CONR₆, R₇ nebo chráněný '^xnhr₇ radikál;

n', R₆ a R₇ mají významy definované v nároku 1 a R' a R'₅ mají stejnou definici jako výše uvedené R a R₅ definované v nároku 1, kde jsou případně přítomné reakční skupiny chráněny;

r'₂ reprezentuje atom vodíku nebo (CH₂)_n'iR'5 skupinu, kde n'i je definován stejně jako v nároku 1 a R'₅ je definován výše;

R₃ má význam definovaný v nároku 1;

01-0127-03-Ma ··· · · * · · • · ·♦··· ·· • · · » · · · · • · · · · · • ···« ·· *·· ··

168

A' reprezentuje vazbu mezi dvěma uhlíkovými nosiči R' i a — 0(Η)-rJ

I j

R'2 nebo ’ skupinu, R' ₄ reprezentuje atom vodíku nebo (CH₂)_n-iR'₅ skupinu, n'i a R'₅ mají výše definovaný význam, tečkovaná linie reprezentuje případnou vazbu s jedním nebo druhým uhlíkovým nosičem substituentů R' i a R' ₂;

n má význam definovaný v nároku 1;

HZ reprezentuje HO-(CH₂) _n---, HNR'₈-(CH₂) _n ^_ nebo HNR' ₈-0skupinu, kde n má výše definovaný význam a R'₈reprezentuje atom vodíku, chráněnou OH skupinu, R', OR' radikál, Y' radikál nebo OY' radikál, přičemž Y' se zvolí z COH skupiny, COR' skupiny, COOR' skupiny, CONH₂ skupiny, CONHR' skupiny, chráněné CONHOH skupiny, CONHSO₂R' skupiny, chráněné CH₂COOH skupiny, CH₂COOR' skupiny, chráněné CH₂CONHOH skupiny, CH₂CONHCN skupiny, CH₂-tetrazolové skupiny substituované R' , CH₂SO₂R' skupiny, CH₂PO(OR')₂ skupiny, chráněné CH₂SO3 skupiny, chráněné CH₂PO(OR')OH skupiny, chráněné CH₂PO(R')OH skupiny, chráněné CH₂PO(OH)₂ skupiny, Y'i radikál nebo OY'i radikál, kde se Y'i zvolí z SO₂R' skupiny, SO₂NHCOH skupiny, SO₂NHCOR' skupiny, SO₂NHCOOR' skupiny, SO₂NHCONH₂ skupiny, SO₂NHCONHR' skupiny a chráněné SO₃H skupiny, Y'₂ radikál nebo OY'₂radikál, kde Y'₂ reprezentuje chráněnou PO(OH)₂ skupinu, chráněnou PO(OH)(OR') skupinu, chráněnou

PO(OH)(R') skupinu nebo PO(OR')₂ skupinu, nebo Y'₃radikál, kde se Y'₃ zvolí z chráněné tetrazolové skupiny, tetrazolové skupiny substituované R' radikálem, NH nebo NR' chráněné tetrazolové skupiny, NH nebo NR' tetrazolové skupiny substituované R'

01-0127-03-Ma radikálem, NHSO₂R' skupiny a NR'SO₂R' skupiny, přičemž

R' je definováno výše;

za vzniku meziproduktu obecného vzorce III:

169 kde:

R'i, R' 2, R3z A' a n mají výše definované významy a buď X_xznamená atom vodíku a X₂ reprezentuje -Z-CO-X3 skupinu, kde X3 reprezentuje zbytek karbonylačního činidla, nebo X₂ znamená -ZH skupinu a X_x reprezentuje CO-X3 skupinu, kde X3 má výše definovaný význam;

b) stupeň, během kterého se získaný meziprodukt cyklizuje v přítomnosti báze; a

c) případně stupni a) předchází a/nebo za stupněm b) následuje jedna nebo více následujících reakcí volených ve vhodném pořadí:

- ochrana reakčních funkčních skupin;

- odstranění ochrany reakčních funkčních skupin;

- esterifikace;

- zmýdelnění;

- sulfatace;

- fosfatace;

- amidace;

- acylace;

- sulfonylace;

«· « ·

01-0127-03-Ma

170

- alkylace;

- zavedení dvojné vazby;

- tvorba močovinové skupiny;

- zavedení tetrazolové skupiny;

- redukce karboxylových kyselin;

- dehydratace amidu na nitril;

- salifikace;

- iontová výměna;

- rezoluce nebo separace diastereoisomerů; a

- oxidace sulfidu na sulfoxid a/nebo suifon.
9.Způsob podle nároku 8, vyznačující se tím, že se karbonylační činidlo zvolí z množiny tvořené fosgenem, difosgenem, trifosgenem, arylchlorformiáty, arylalkylchlorformiáty, alkylchlorformiáty, alkenylchlorformiáty, alkyldikarbonáty, karbonyldiimidazolem a jejich směsmi.
10. Způsob podle nároku 8 nebo 9, vyznačující se tím, že se karbonylační reakce provádí v přítomnosti báze.
11. Způsob podle nároku 10, vyznačující se tím, že bází je amin.
12. Způsob podle nároku 8, vyznačující se tím, že se báze ve stupni b) zvolí z množiny tvořené aminy, hydridy, alkoholáty, amidy nebo karbonáty alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin.

·» *«·· • ·

01-0127-03-Ma

171
13. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, a stejně tak jejich soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami a bázemi, jako léčiva.
14. Sloučeniny obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 2 až 7, a stejně tak jejich soli s farmaceuticky přijatelnými kyselinami a bázemi, jako léčiva.
15. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou složku alespoň jedno léčivo podle nároku 13 nebo 14.
16. Sloučenina obecného vzorce III nebo jedna z jejích solí s kyselinou, zejména její hydrochlorid:

R'i, R'₂, R₃, A', n,

Xi a X₂ mají významy definované v nároku 8.