CS250661B2 - Method of hydantoin's derivatives production - Google Patents

Description

X znamená deuterium-tritium nebo halogen, a jejich solí s bázemi, spočívá v halogenaci 4S-6--luor-spiro [ chroman-4,4‘-imidazolidin]-2‘,5‘-dionu v poloze 8 působením elementárního fluoru, chloru či bromu, za vzniku odpovídajícího 6-lluor-8-halogenderivátu, ten se katalyticky redukuje deuteriem nebo tritiem na žádaný 6-lluor-8-deutero- nebo 6-lluor-8-tritioderivát, který se popřípadě převede na svoji larmakologicky přijatelnou sůl s bází.

Vyráběné sloučeniny jsou užitečné jako inhibitory aldoso-reduktasy pro léčbu určitých chronických komplikací diabetů.

Vynález se týká nových užitečných opticky aktivních derivátů hydantoinu z oblasti chemie léčiv. Vynález zejména popisuje určité nové 8-substituované deriváty d-6-Guor-spiiOfchroman-^^-iiiiidazolidinpZ^S*-dionu, které jsou zvlášť cenné vzhledem ke svým terapeutickým a fyzikálně chemickým vlastnostem.

V minulosti činili četní vynálezci na poli chemie léčiv různé pokusy směřující k získání nových a lepších antidiabetických prostředků k orálnímu podání. Toto úsilí většinou spočívalo v syntéze a testování různých, dosud nových organických sloučenin, zejména z oblasti sulfonylmočovin, s cílem zjistit jejich schopnost snižovat po orálním podání podstatným způsobem hladinu krevního cukru (tj. glukosy). Při hledání stále nových a ještě účinnějších antidiabetických činidel je však jen málo· známo· o účinku jiných organických sloučenin co do prevence nebo zástavy určitých chronických komplikací cukrovky, jako jsou diabetická katarakta, neuropathie, retinopathie apod. K. Sestanj a spol. v americkém patentovém spisu č. 3 821 383 nicméně popsali, že určité inhibitory aldoso-reduktasy, jako 1,3-diοχο-ΙΗ-benz [ d,e ] isochinolin-2 (3) -octová kyselina a některé její úzce příbuzné deriváty, jsou pro tyto účely použitelné, i když o těchto konkrétních sloučeninách není známo, že by působily jako hypoglykemika. Tyto konkrétní inhibitory aldoso-reduktasy působí tak, že inhlbují účinnost enzymu aldoso-reduktasy, který je primárně odpovědný za. řízení redukce aldos (jako glukosy a galaktosy) na odpovídající polyoly [jako sorbitol a galaktitol) v těle člověka. Tímto způsobem se předchází nebo snižuje nežádoucí akumulace galaktitolu v očních Čočkách galaktosemických pacientů a sorbitolu v očních čočkách, periferní nervové tkáni a ledvinách různých diabetiků. Z toho vyplývá, že uvedené sloučeniny jsou cenné jako inhibitory aldoso-reduktasy, k regulaci určitých chronických komplikací cukrovky, včetně komplikací oční povahy, protože v daném oboru je již známo, že přítomnost polyolů v očních čočkách vede k vzniku zákalu spojeného se ztrátou čirosti čoček.

V poslední době popsal Sarges v amerických patentových spisech č. 4 117 230 a 4 130 714 řadu spiro-hydantoinových sloučenin, které jsou užitečné jako inhibitory aldoso-reduktasy pro léčbu určitých chronických komplikací cukrovky.

Klíčovou sloučeninou popsanou v americkém patentovém spisu č. 4117 230 je dl-6-fluor- [ chroman-4,4‘-imidazolidin ] -2‘,5‘-dion, zatímco klíčovou sloučeninou popsanou v americkém patentovém spisu č. 4 130 714 je odpovídající pravotočivý isomer. Posledně zmíněná sloučenina, tedy d-6-fluor- [ chroman-4,4‘-imidazolidin ] - W-dion nebo· sorbinil, je nejvýhodnějším představite lem této skupiny a 4S-konfiguraci. Tato látka je zvlášť užitečná jako inhibitor aldoso-reduktasy v humánní medicíně, vhodný k prevenci nebo léčbě určitých chronických komplikací spojených s cukrovkou, včetně komplikací oční a nervové povahy (například diabetické katarakty, retinopathie a neuropathie, apod.).

Vynález se týká určitých nových 8-substituovaných derivátů sorbinilu, jako 8-deutero-, 8-tritio- a 8-halrgensubstiturvaných derivátů sorbinilu. Tyto sloučeniny mají vesměs 4S-konfiguraci a jsou užitečné v oblasti lékařské chemie jako inhibitory aldoso-reduktasy pro léčbu určitých chronických komplikací diabetů. Konkrétně řečeno jsou tyto nové sloučeniny podle vynálezu vybírány ze skupiny zahrnující 4S-isomery asymetrických spiro-hydantoinů obecného vzorce I

ч ve kterém

X znamená deuterium, tritium nebo halogen (fluor, chlor, brom nebo jód) a jejich solí s bázemi obsahující farmakologicky přijatelné kationty.

Tyto nové sloučeniny jsou inhibitory aldoso-reduktasy, a proto mají schopnost bránit akumulaci sorbitolu v čočkách a periferních nervech diabetiků. Značené 8-deutero- a 8-tritioderiváty jsou rovněž zvlášť užitečné při farmakokinetických studiích metabolismu a při studiích vazby léčiv v organismu živočichů a lidí. Zmíněné 8-halogenderiváty jsou užitečné jako meziprodukty pro výrobu značených forem léčiv kromě toho, že jsou samy účinnými inhibitory aldoso-reduktasy.

V tomto ohledu jsou zvlášť zajímavé ty typické a výhodné sloučeniny podle vynálezu, jako jsou 4S-6--luor-8--leιlterrsspiros [ chromai^X-imidazolidin) -2‘,5‘-dion, 4S-6-fluor^-tritio-spiroJchroman-^^-imidazolidin ]-2‘,5‘-dion, 4S-^-^,ť^--Hift^un’-spiro [ chromans4,4‘simidazolidin]s2‘,5‘-dion a 4S-6-fluors8-chlor-spiro[chroman-4,4‘simidazolidinj-2‘,5‘-dion.

V souhlase s vynálezem se shora popsané nové sloučeniny vyrábějí tak, že se známý 4S-6-f luor-spir o [ chroman-4,4‘-imidazolidin]-2‘,5‘-dion (viz americký patentový spis č. 4130 714) (a) přímo halogenu je v poloze 8 molekuly a vzniklý intermediární 6-fluor-8-halogenderivát se pak

6 (bj převede na odpovídající finální 6-fluor-8-deutero- nebo uor-8-tritioderivát katalytickou redukcí deuteriem nebo tritiem.

Tímto způsobem se 4S·tl·tluor-spiro[chrOt man^^-imidazolidin^^^-dion převede přes 4S-6’tluoг-8-thlor-spiro[chromant4,4‘t timidazolj.din]t2‘,5‘tdion na 4s-6-fluor-8tdeuteгo-spiгo(chromant4,4Чmidazolidin]t2‘,5‘t -dion resp. 4S-6-tluoг-8-triiio-spiro[chroman) ] 2‘,5‘-аюп.

Halogenační stupeň (a) se s výhodou uskutecňuje obvyklým způsobem, například za použití elementárního fluoru v dusíku, nebo za použití elementárního chloru či bromu, popřípadě v přítomnosti Friedel-Craítsova katalyzátoru, jako chloridu železitého, bromidu železitého nebo práškového železa, při teplotě pohybující se obecně v rozmezí zhruba od —50 do 50 °C, ve vhodném inertním organickém rozpouštědle, jako je například .chloroform, nitrobenzen, dimethylformamid nebo ledová kyselina octová apod. Alternativně je možno chloraci či bromaci provést jednoduše za použití sulfurylchloridu či -bromidu, popřípadě v přítomnosti jódu jako katalyzátoru, při teplotě pohybující se obecně ve stejném rozmezí jako výše, a i v tomto případě v přítomnosti vhodného inertního organického rozpouštědla, s výhodou ledové kyseliny octové nebo chloroformu. Po ukončení reakce se žádaný intermediární 6tfluor-8-halOt genderivát izoluje obvyklým způsobem, s výhodou za použití známé chromatografické techniky.

intermediární G-f lu or-8-halogenderivát získaný ve stupni (a) se pak podrobí katalytické hydrogenaci podle stupně (b), která se s výhodou provádí za použití deuteria nebo tritia v kombinaci s katalyzátorem na bázi ušlechtilého kovu, jako je paládium, obvykle naneseném na vhodném nosiči, jako na uhlíku, síranu barnatém apod. Výhodným rozpouštědlem pro tuto reakci je obecně nižší alkanol, jako methanol či ethanol, nebo cyklický ether, jako dioxan nebo tetrahydrofuran. Po ukončení redukce se katalyzátor z reakční směsi snadno odstraní filtrací a z filtrátu se pak za sníženého tlaku odpaří rozpouštědlo. Tímto způsobem se získá surový zbytek, který je možno snadno vyčistit standardními technikami, jako sloupcovou chromatografií apod., a získat tak žádaný finální produkt (tedy sloučeninu značenou v poloze 8) v prakticky čistém stavu.

Chemickými bázemi, které se používají jako reakční činidla k přípravě farmaceuticky upotřebitelných solí s bázemi podle vynálezu, jsou takové báze, které tvoří netoxické soli shora popsaných kyselých hydantoinových sloučenin s bázemi, Jako konkrétní netoxické soli s bázemi lze uvést soli s takovými farmakologicky přijatelnými kationty, jako jsou kationty sodné, drasel né, vápenaté, hořečnaté apod. Tyto soli lze snadno připravit jednoduchou reakcí shora popsaných kyselých spirothydantoinot vých sloučenin s vodným roztokem žádaného farmakologicky přijatelného kationtu, a pak odpařením výsledného roztoku k suchu, s výhodou za sníženého tlaku. Alternativně lze tyto soli připravit tak, že se roztok kyselé sloučeniny v nižším alkanolu smísí s roztokem žádaného alkoxidu alkalického kovu v nižším alkanolu, a výsledný roztok se stejným způsobem jako výše odpaří k suchu. V obou těchto případech se s výhodou používají stechiometrická množství reakčních činidel, aby se zajistil úplný průběh reakce a maximální výtěžek žádaného finálního produktu.

Jak již bylo uvedeno výše, jsou nové značené 8-deutero- a 8-tritioderiváty vyrobené způsobem podle vynálezu, jako 4S-6-fluor-8-tritio-spiro· [ chroman-4,4‘-imidazolidin ] -2‘,5‘-dion, zvlášť užitečné při metabolických farmakokinetických studiích a při studiů vazby léčiva v organismu živočicha a zvířete. Naproti tomu nové 8-halogenderiváty, jako 4S-6-tluor-8-thlor-spiro[chromant4,4‘-imidazolidin]-2^í,5‘-dion, jsou užitečné jako meziprodukty k výrobě shora zmíněných značených forem, a kromě toho i samy působí jako účinné inhibitory aldoso-reduktasy.

Sloučeniny vyrobené způsobem podle vynálezu je možno aplikovat buf orálně, nebo parenterálně. Obecně se tyto sloučeniny běžně podávají v dávkách pohybujících se v rozmezí zhruba od 0,05 do cca 10 mg na kilogram tělesné hmotnosti denně, i když zde nutně dochází k různým variacím v závislosti na hmotnosti a stavu pacienta, a na zvoleném způsobu podání. Je ovšem třeba mít na zřeteli, že použití 8-tritioderivátu je vzhledem k jeho radioaktivitě omezeno pouze na aplikaci zvířatům a u člověka pouze na aplikaci stopových množství (pro shora zmíněné farmakokinetické studie a studie vazbyJ.

Asymetrické spiro-hydantoinové sloučeniny podle vynálezu je možno k shora uvedeným účelům podávat buď samotné, nebo v kombinaci s farmaceuticky upotřebitelnými nosiči, kteroukoli z výše popsaných cest. Tuto aplikaci je možno provést buď jednorázově nebo vícenásobně. Sloučeniny podle vynálezu je možno aplikovat v široké paletě různých dávkovačích forem. Tak například lze tyto látky spolu s různými farmaceuticky přijatelnými inertními nosiči zpracovávat na tablety, kapsle, pastilky, trocheje, tvrdé bonbóny, prášky, spreje, vodné suspenze, injekční roztoky, elixíry, sirupy apod.

Mezi vhodné nosiče náležejí pevná ředidla či plnidla, sterilní vodná prostředí a různá netoxické organická rozpouštědla. Obecně jsou sloučeniny podle vynálezu v těchto lékových formách přítomny v kon250661

centraci zhruba od 0,5 do 90 % hmotnostních, vztaženo na celkovou hmotnost prostředku tvořící žádanou jednotkovou dávku.

K orální aplikaci je možno používat tablety obsahující různé pomocné látky, jako citronan sodný, uhličitan vápenatý a fosforečnan vápenatý, spolu s různými desintegračními činidly, jako jsou škroby, s výhodou bramborový nebo tapiokový škrob, alginová kyselina a některé složitější silikáty, a dále . spolu s pojidly, jako jsou polyvinylpyrrolidon, želatina a arabská guma. Pro přípravu . tablet jsou . často velmi užitečné kluzné látky, . jako stearát hořečnatý, natrium-laurylsulfát a mastek. Pevné prostředky podobného typu lze rovněž používat k plnění měkkých a tvrdých želatinových kapslí — výhodné materiály pro toto použití by měly rovněž obsahovat polyethylenglykoly, o vysoké molekulové hmotnosti. K přípravě vodných suspenzí nebo/a elixírů k orální aplikaci je možno základní účinnou látku kombinovat s různými sladidly nebo aromatickými látkami, barvivý a popřípadě emulgátory nebo/a dispergátory, jakož i s ředidly, jimiž mohou být například voda, ethanol, propylenglykol, glycerin a jejich různé kombinace.

K parenterálnímu podání je možno používat roztoky shora uvedených asymetrických spiro-hydantoinů v sesamovém nebo podzemnicovém oleji, nebo ve vodném propylenglykolu či Ν,Ν-dimethylformamidu, jakož i sterilní vodné roztoky odpovídajících ve vodě rozpustných solí s alkalickými kovy nebo kovy alkalických zemin, uvedených výše. Tyto vodné roztoky lze v případě potřeby vhodně pufrovat a kapalné ředidlo nejprve přidáním soli nebo glukosy uvést do isotonického stavu. Tyto konkrétní vodné roztoky jsou zvlášť vhodné pro intravenosní, intramuskulární, subkutánní a intraperitoneální injekce.

Sterilní vodná prostředí používaná k těmto účelům lze vesměs snadno získat standardními technikami známými v daném oboru. Mimoto je rovněž možno aplikovat shora zmíněné spiro-hydantoinové sloučeniny místně ve formě vhodného očního roztoku aplikovaného kapáním do očí.

Účinnost sloučenin podle vynálezu jako prostředků k prevenci nebo/a léčbě chronických komplikací cukrovky determinuje jejich schopnost úspěšně vyhovět jednomu nebo několika standardním biologickým nebo farmakologickým testům, jako jsou:

(1) měření schopnosti testovaných látek inhibovat enzymatickou aktivitu izolované aldoso-reduktasy, (2) měření schopnosti testovaných sloučenin snižovat nebo. inhibovat akumulaci sorbitolu v sedacím nervu krys po akutním podání streptozotocinu (tj. diabetických krys], (3) měření schopnosti testovaných slouče- nin zvrátit již zvýšené hladiny sorbitolu v sedacím nervu a v očních čočkách krys, u nichž byla vyvolána chronická cukrovka podáváním streptozotocinu, (4) měření schopnosti testovaných sloučenin předcházet nebo inhibovat tvorbu galaktítolu v očních čočkách akutně galaktosemických krys a (5) měření schopnosti testovaných sloučenin zbrzdit tvorbu zákalu a snížit opacitu očních čoček chronicky galaktosemických krys.

Vynález ilustrují následující příklady provedení, jimiž se však rozsah vynálezu v žádném směru neomezuje.

Příklad 1

Do vhodné reakční nádoby se předloží 2,00 gramy (0,00847 mol] 4S-6-Huor-spiro[chroman-4,4‘-imidazolidin]-2^ť,5‘-dionu (připraven podle postupu popsaného v americkém patentovém spisu č. 4 130 714] rozpuštěného při teplotě místnosti (20 °C] ve 100 ml ledové kyseliny octové. Reakční nádoba se opatří skleněnou promývačkou plynu naplněnou ethanolickým roztokem hydroxidu sodného. Přes tuto promývačku se do reakční směsi po dobu 60 minut uvádí dusík s obsahem 10 % fluoru. Po dalším šestnáctihodinovém profoukávání dusíkem se výsledná reakční směs zahustí ve vakuu na olejovitý zbytek, který se dvakrát trituruje vždy se 100 ml hexanu a pak se odpaří ve vakuu.

Triturací pěnovitého odparku s diethyletherem se získá hnědá pevná látka, která se překrystaluje z čerstvě připraveného 10% vodného roztoku hydrogensiřlčitanu sodného a produkt se pak podrobí vysokotlaké kapalinové chromatografií (na koloně 8 Zorbax C—8] za použití směsi vody a acetonitrilu (85 : 15] jako elučního činidla. Příslušné frakce se spojí a zahustí se ve vakuu. Kapalný zbytek se postupně azeotropicky destiluje s ethanolem, ethylacetátem a nakonec s cyklohexanem, čímž se získá žádaný produkt ve formě bílé práškové látky. Po překrystalování tohoto. . materiálu z vody se získá 13 mg čistého 4S-6,8-difluor-spiro [ chroman-4,4‘-imidazolidin ] -2‘,5‘-dionu o teplotě tání 198 až 200 °C. Tento čistý produkt byl kromě elementární analýzy dále charakterizován pomocí hmotnostní spektroskopie a nukleární magnetické resonanční spektroskopie.

Hmotnostní spektrum: m/e 254 ·(M+).

Příklad 2

Do roztoku 1,181 g (0.00465 mol] 4S-6-f luor-splr o [ chr oman-4,4‘-imidazolidin ] -2‘,5‘-dionu v 10 ml dimethylformamidu vysušeného nad molekulárním sítem, obsahu250661 jícího stopové množství chloridu železitého, se po dobu 20 minut uvádí při teplotě —40 stupňů Celsia proud plynného chloru. Výsledný roztok se 2 až 2,5 hodiny míchá při teplotě —20 °C a pak se nechá během dalších 2 hodin pomalu ohřát na teplotu místnosti (20 ?C). Po pomalém přidání 50 ml vody se reakční směs intenzívně míchá přes ncc zhruba 16 hodin) při teplotě místnosti.

Po ukončení tohoto reakčního stupně se výsledná směs vnese do 100 ml ethylacetátu. Vodná fáze se extrahuje 25 ml čerstvého ethylacetátu, organické extrakty se spojí, dvakrát se promyjí roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým. Po odfiltrování sušicího činidla se rozpouštědlo, odpaří za sníženého tlaku. Zlatožlutý olejovitý zbytek se chromatografuje na sloupci (4,5 x 15,0 cm) silikagelu (67 až 37 .-m), který se vymývá ethylacetátem, přičemž se odebírají frakce o objemu 30 ml. Frakce č. 7 se zahustí na bezbarvý olejovitý odparek, který popřípadě zkrystaluje na bílý pevný materiál (výtěžek 0,251 g) o teplotě tání 108 až 114 °C. Frakce č. 8 se zahustí na bezbarvý olejovitý zbytek, který triturací s petroletherem poskytne 0,196 g (15,4 %) čistého 4S-6-fluor-8-chlor-spir o [ chr oman-4,4‘-imidazolidin ] -2‘,5‘-dionu ve formě bílé pevné látky, tající za rozkladu při 99 až 102 °C.

Frakce č. 9 se zahustí na čirý olejovitý zbytek, který triturací s pentanem poskytne bílý krystalický materiál, který je rovněž tvořen čistým 4S-6-fluor-8-chlor-spiro[chroman-4,4‘-imidazolidin]-2‘,5‘-dionem tajícím za rozkladu při 100 až 103 cq. Výtěžek čistého produktu z této frakce činí 0,257 g (20,2 %). Čistý produkt z frakce č.

byl kromě elementární analýzy ještě dále charakterizován hmotnostní spektroskopií a nukleární magnetickou resonanční spektroskopií.

Hmotnostní spektrum: m/e 272/270 (M+).

Analýza: pro C_uH_sCl₂FN₂O··.. 1/3 H₂0 vypočteno:

47,75 % C, 3,16 % H, 10,13 % N, nalezeno:

43,19 % C, 3,51 % H, 9,68 % N.

Příkla d 3

Do reakční baňky s kulatým dnem, o objemu 35 ml, se předloží roztok 60 mg (0,00022 mol) 4S-6--luor-8--hlor-spiro[chrGman-4,4‘-in^m^bazo]^:^(^b^nJ-2^<,5^<-dionu (frakce č.

získaná v příkladu 2) ve 4 ’ ml ethanolu. K tomuto roztoku se přidá 0,5 ml triethyl aminu a 100 mg 10% paládia na uhlí jako katalyzátoru a na směs se v hydrogenační aparatuře za míchání po dobu 4 hodin působí za atmosférického tlaku plynným deute riem (D₂). Po uplynutí této doby se míchání přeruší a reakční směs se nechá přes noc stát při teplotě místnosti (20 °C) po dobu zhruba 16 hodin. Reakční směs se z hydrogenační aparatury vyjme, k odstranění katalyzátoru se zfiltruje přes křemelinu a nakonec se zahustí ve vakuu. Zbylý žlutý pevný produkt se 1 hodinu suší ve vysokém vakuu, přičemž přejde na bílý pevný materiál tvořený surovým 4_lS-^i^-nl^u^ir^í8-(^eiitero-spiro[chroman-4,4‘-imtdazolidin]-2‘,5‘-dionem.

Tento surový materiál se suspenduje v ethylacetátu a chromatografuje se na sloupci (5 ml v lOml pipetě] silikagelu (67 až 37 gm], který se vymývá 100% ethylacetátem, přičemž se odebírají frakce o objemu 1,5 ml. Frakce 5 až 9, které podle stanovení. obsahují čistý produkt, se spojí a zahustí se ve vakuu. Zbytek se k odstranění ethylacetátu evakuuje ve vysokém vakuu, čímž se získá bílý voskovitý pevný materiál, který po překrystalování ze směsi ethanolu a diethyletheru poskytne čistý 4S-6- fl иог-8-d eutero-sp iro[chroman-4,4Mmida.zolidin]-2‘,5‘-dion o teplotě tání 228 až 231 stupňů Celsia. Čistý produkt se dále charakterizuje za pomoci hmotnostní spektroskopie v porovnání s autentickým vzorkem čistého 4S-^<^-nl^^(^L^^í^i^^i?o[chrGman^-4₎4‘-hi^idazolidin]-2^É,5^<-dionu. Z této charakterizace vyplývá, že 41 % finálního produktu obsahuje deuterium (tj., že během deuteračního stupně došlo k inkorporaci 41 % ²H).

Příklad 4

K roztoku 60 mg (0,00022 mol) 4S-6-fluor-β-chlor-spiro [ chroman-4.4^s-imidazolidin ] -2‘,5‘-dionu (frakce č. 8 získaná v příkladu 2] ve 4,0 ml ethanolu, obsahujícímu 0,5 mililitru triethylaminu, se přidá 100 mg 10% paládia na uhlí jako katalyzátoru a směs se v hydrogenační aparatuře 18 hodin míchá při teplotě místnosti (20 Έ) v atmosféře tritia za atmosférického tlaku. Po ukončení reakce se reakční směs z hydrogenační aparatury vyjme, nadbytek tritia se odstraní azeotropickou destilací s mcthanolcm a katalyzátor se z reakční směsi odfiltruje. Filtrát se zahustí ve vakuu a zbytek se znovu rozpustí v 5 ml methanolu a 5 ml benzenu. Roztok se analyzuje chromatografií na tenké vrstvě za použití 100% ethylacetátu jako rozpouštědla. Podle této analýzy již produkt neobsahuje žádný výchozí materiál. Shora zmíněný roztok snurového 4S-6-fhюr-8--гitϊ.o-spiiΌ[ chroman-4,4MmidazGlid.nl-2‘,5‘-diGnu se zahustí ve vakuu, odparek se rozpustí v 0,5 inl čistého ethylacetátu a chromatografuje se na sloupci (5 ml v 10 ml pipetě) silikagelu (67 až 37 .«rn). za použití 100/6 ethylacetátu jako elučního činidla. Frakce č. 6 a 7, které nudle chromatografie na tenké vrstvě obsahují materiál dávající pouze jednu skvrnu, se spojí a zahustí se ve vakuu, čímž se zís250661 ká čistý 4S-6-nuor-8-tritio-spiro[chroman-IMMmidazolidinJ-ZýS^dion.

Tento čistý produkt při porovnání s autentickým vzorkem čistého výchozího materiálu za použití radiochemické analýzy vykazuje přítomnost 34,6 % tritia (tzn., že v průběhu shora popsaného reakčního stupně došlo k inkorporaci 34,6 % 3hj.

Příklad 5

Podlo tohoto příkladu se konverse 43-6,8-dinaor-spiro [ cliromant4,4‘timidazolidin] -2' ,5‘-dionu na 4S-(6Πuor-8-tritio-spirr[chromaant4.4Mmidazrlidln]t2^t,5^<tdion provádí redukcí za použití Raney-niklu jako katalyzátoru ve vodném hydroxidu draselném za použití plynného tritia podle postupu, který popsal A. J. deKoning [Org. Prep. Proceed. Int., 7, 31—34 (1970)]. Čištění žádaného finálního produktu se uskutečňuje stejnou vysokotlakou kapalinovou chromatografií, která již byla používána k izolaci čistého materiálu. v příkladu .1. Získaný finální produkt, jímž je 4S-6-fíuori8-tritro-spiгo[chrrma.π-4,4^t-im^í^5^^rz<^]^ΐ^<^]^l^lj-2^ς,5‘-dton, je v každém ohledu identický s produktem z příkladu

4.

Příklad 6

Následující asymetrické spirothydantoinot vé sloučeniny z příkladů 1 a 2 byly v koncentraci 10 ’> mol testovány co do schopnosti redukovat nebo inhibovat aktivitu enzymu aldoso-reduktasy. Používá se postup, který popsali S. Hayman a spol. v Journal of Biological ' Chemistry, sv. 240, str. 877 (1965) a modifikovali K. Sestanj a spol. (viz americký patentový spis č. 3 821 383). Jako substrát se používá částečně vyčištěný enzym aldoso-reduktasa získaný z očních čoček telete. Výsledky dosažené s oběma testovanými sloučeninami jsou uvedeny níže v hodnotách procentické inhibice aktivity enzymu při koncentraci 10_⁶M.

testovaná látka inhibice v % (10’6‘M) produkt z příkladu 1 74 produkt z příkladu 2 64

Claims (10)

1. PŘEDMĚT VYNALEZU

   1. Způsob výroby derivátů hydantoinu vybraných ze skupiny zahrnující pravotočívé isomery asymetrických spiro-hydantomů obecného vzorce I vo kíei.óíui

   X znamená deuterium, tritium nebo halogen, a jejich soli s bázemi obsahující farmakologicky přijatelné kationty, vyznačující se tím, že se 4S-6-fluor-spiгo[chrrman^Jkimidazolidin^^búdion halogenuje v poloze 8 molekuly elementárním fluorem, chlorem, či bromem za vzniku odpovídajícího 6-fluor-8-halogenderivátu, který se pak popřípadě podrobí katalytické redukci deuteriem nebo tritiem za vzniku žádaného 6-fluor-8-deutero- nebo 6-fluor-8-tritioderivátu, a popřípadě se získaný produkt převede na svoji farmakologicky přijatelnou sůl s hází.
2. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se halogenační reakce provádí v inertníni organickém rozpouštědle při teplotě v rozmezí zhruba od —50 do 50 °C.
3. 3. Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím, že se jako rozpouštědlo použije ledová kyselina octová.
4. 4. Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím, že se jako rozpouštědlo použije dimethylformamid.
5. 5. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se katalytická redukce provádí v nižším alkanolu jako rozpouštědle, v přítomnosti katalyzátoru na bázi ušlechtilého kovu.
6. 6. Způsob podle bodu 5, vyznačující se tím, že se jako katalyzátor použije paládium.
7. 7. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako· spiro-hydantoinová sloučenina v prvním reakčním stupni připraví 4S-6.8-dif luor-spiro (chromá n. -4,4-imidazolidin ] -2‘,5‘-dion.
8. 8. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako spiro-hydantoinová sloučenina v prvním reakčním stupni připraví 4S-6-fl uor-8-chlor-spiro [ chroman-4,4‘-imldazoИС1п]-2‘,5‘-Сюп.
9. 9. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako spiro-hydantoinová sloučenina ve druhém reakčním stupni připraví 4S-6-f luor-8-deuter o-spiro [ chroman-4,4‘-imidazolídin ] -2‘,5‘-Сюп.
10. 10. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se jako spiro-hydantoinová sloučenina ve druhém reakčním stupni připraví 4S-6-f luor-8-triti o-spiro [ chroman-4,4‘-tmtdat zolidin]-2‘,5‘-dtrn.