CS243652B1 - MySí lyafocytární hybrido· IMG CZAS HP-03 - Google Patents
MySí lyafocytární hybrido· IMG CZAS HP-03 Download PDFInfo
- Publication number
- CS243652B1 CS243652B1 CS84741A CS74184A CS243652B1 CS 243652 B1 CS243652 B1 CS 243652B1 CS 84741 A CS84741 A CS 84741A CS 74184 A CS74184 A CS 74184A CS 243652 B1 CS243652 B1 CS 243652B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- lymphocytoid
- mousy
- hybridom
- hybridoma
- peroxidase
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
MySí lyafocytární hybrido·, produkující
protilátku proti křenové peroxidáze,
uložený ve Sbírce hybridoaů Ústavu molekulární
genetiky ČSAV pod označení· HP-03.
Monoklonalnl protilátka hybridomu HP-03
je vhodná pro použití v enzyaoiaunologické
a radioimulogické analýz® a M přípravě peroxidáza-antiperoxidáza
komplexu.
Description
(54) MySí lyafocytární hybrido· IMG CZAS HP-03
MySí lyafocytární hybrido·, produkující protilátku proti křenové peroxidáze, uložený ve Sbírce hybridoaů Ústavu molekulární genetiky ČSAV pod označení· HP-03. Monoklonalnl protilátka hybridomu HP-03 je vhodná pro použití v enzyaoiaunologické a radioimulogické analýz® a M přípravě peroxidáza-antiperoxidáza komplexu.
Vynález se týká nového hybridomů, tj. hybridního jednobuněčného organismu, sestrojeného fúzí buňky myěí myelomové linie P3-X63-Ag6.653 a myěí slesinná lymfoidní buňky, produkující protilátku proti křenové peroxidáze.
Doposud se protilátky proti křenové peroxidáze vyrábějí tak, že je křenová peroxidáza opakovaně injikována jako antigen pokusným zvířatům, nejčastěji králíkům a prasatům. Sérum takto imunizovaných zvířat, odebírané po urSitá době působení antigenu, slouží jako zdroj protilátek, užívaných zejaána pro přípravu komplexu peroxidáza anti-peroxidáza používaného k detekci antigenů, zejména v tkáňových řezech.
Tento postup nazývaný konvenSnl imunizaci, má několik nevýhod. V séru imunizovaných zvířat ae nachází heterogenní směs protilátek, jejichž spektrum je v každém jednotlivém organismu různé a neopakovatelné.
Organismus spravidla vytváří kromě protilátek vůči žádanému antigenu i protilátky proti nečistotám antigenního preparátu: ty je nutná ze sér odstraňovat vysycováním. Výrobní Šarže konvenčních sér se proto dají těžko standardizovat a vycházejí z výroby v širokém rozmezí kvality. Pro výrobu každé Serže je třeba připravit čistý imunizačni antigen a dalěí antigeny pro vysycení balastnlch protilátek proti nečistotám.
Uvedené nedostatky výěe zmíněného a dosud používaného postupu odpadnou, je-li k dispozici hybridom, produkující monoklonální protilátku IgOl proti křenové peroxidáze, uložený ve Sbírce hybridomů Ústavu molekulární genetiky fiSAV v Prase 4, Vídeňská 1083, pod označením IMG CZAS HP-03.
Uvedený hybridom byl lískán způsobem známým z odborná literatury (Pazekas de St. Qroth, S., Scheidigger, D.: Production of monoclonal antibodies stratégy and tactics, J. Immunol. Meth., 35: 1-2), 1980; Glafré, G., Howe, S.C., Milstein, C., Butcher, G. W., Howard, J. C.: Antibodies to major histocompatibility antigens produced by bybrid cell lineš.
Nátuře 266 : 550, 1977) klonování souboru hybridních buněk, vzniklých fůzí buněk myěí myelomové linie P3-X63-Ag8.653 a buněk, získaných ze sleziny myěí kmene C57B1/10 (B 10), imunizovaných křenovou peroxidásou.
Výhodou hybridomů je, že produkuje homogenní protilátku, tzv. protilátku monoklonální, která je achopnm specificky reagovat s křenovou peroxidásou. hybridou HP-03 je možné kultivovat in vitro v mediích vhodných pro živočiěné buňky a je adaptován pro růst in vivo v paritonaálnl dutině myěí F, (BlOxBALB/c).
konserv, uchovávaných v kapalném dusíku, je možné zahájit produkci protilátky bez dalžího angtiganu. Protilátka, produkovaná hybridomem HP-03 reaguje specificky a křenovou peroxidásou a vytváří a ní stabilní komplex, využitelný pro detekci antigenů v ansymoimunologických testech.
Příklad
Za účelem pomnožení hybridomových buněk in vivo bylo aplikováno 2 χ 106 buněk do peritoneálnl dutiny myěí. Aby doělo k lepěímu uchycení aplikovaných buněk, byla myě 14 dní před přenosem buněk hybridomů ovlivněna parafinovým olejem (0,5 ml intraperitoneálně).
Po 16 dnech růstu hybridomů v peritonaální dutině byla^tyš zabita a neprodukovaná asdtická tekutina odebrána. Celkem hylo získáno 4,6 ml aacitioké tekutiny, která obsahovala 13 mg/ml imunoglobulinu.
Monoklonální protilátka reagovala aa specifickým sntigenam v ansymoiaunologiekém testu (při použití prasečí antimyáí protilátky, značené křenovou peroxidézou) až do ředění 1 : 107.
Buňky hybridomu HP-03 nají ultrastrukturální obraz typických myelomových buněk, kde převažující organelou jsou volné a na membrány vázané polyribosomy. In vitro rostou jako polosuspenznl kultury.
Základním kultivačním médiem je Eaglovo minimální esenciální medium s Hanksovou solnou směsí doplněné o neesenciální aminokyseliny, L-glutaain (3 aít), pyruvát sodný (1 mlí). Toto médium (označované jako H-MElíd) je pro kultivaci hybridomu HP-03 doplněno penicilinem, streptomycinea, gentamycinea, 2-aerkapthoethanolem (0,05 alt) pufrea HEPES (10 aU) a inaktivováným bovinním šerem (10%).
hybridou je kultivován při 37 °C. Střední generační čas je 11,4 h a 3 měsíce po sestrojení byl modální počet chroaosoaů 83. Produkovaná protilátka je monoklonální iaunoglobulin podtřídy IgOl, pl 6,6 až 7,2.
Monoklonální protilátka, produkovaná hybridomem HP-03 reaguje specificky s křenovou peroxidézou.
hybridoa (HP-03) může být průmyslově využíván jako zdroj monoklonální protilátky proti křenové peroxidáze v metodách analytických, preparativních nebo pro přípravu peroxidáza-anti peroxidáza koaplexu.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUMyěí lyafocytární hybridoa IMG CZAS HP-03, produkující aonoklonální protilátku imunoglobulin podtřídy IgGl proti křenová peroxidáze.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS84741A CS243652B1 (cs) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | MySí lyafocytární hybrido· IMG CZAS HP-03 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS84741A CS243652B1 (cs) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | MySí lyafocytární hybrido· IMG CZAS HP-03 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS74184A1 CS74184A1 (en) | 1985-09-17 |
| CS243652B1 true CS243652B1 (cs) | 1986-06-12 |
Family
ID=5340107
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS84741A CS243652B1 (cs) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | MySí lyafocytární hybrido· IMG CZAS HP-03 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS243652B1 (cs) |
-
1984
- 1984-02-01 CS CS84741A patent/CS243652B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS74184A1 (en) | 1985-09-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2758394B2 (ja) | ヒト腫瘍壊死因子に対するモノクロナール抗体 | |
| CS243652B1 (cs) | MySí lyafocytární hybrido· IMG CZAS HP-03 | |
| CS243348B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridem IMG-CZAS HTF-21 | |
| CA1220147A (en) | Detection of gonococcal infections using monoclonal antibodies | |
| WO1986002362A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| CS238780B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridem IMG-CZAS HTF 01 | |
| CS240846B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS IN - 04 | |
| CS244398B1 (cs) | Myěí lymfocytámí hybridom IMG - CZAS AL - 01 | |
| CS228857B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému transferům | |
| CS253336B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS RT-12 | |
| CS235850B1 (cs) | Myší lymfocitární hybridom produkující protilátku proti lidskému -transferinu | |
| CS228860B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému transferinu | |
| Kudo et al. | Isolation the characterization of monoclonal antibodies against pili of Corynebacterium renale and Corynebacterium pilosum | |
| CS228858B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti prasečímu imunoglobulinu 6 | |
| CS228856B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti prasečímu imunoglobulinu G | |
| CS236001B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti lidskému transferinu | |
| CS233810B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom produkující protilátku proti praseSímu a lidskému insulinu | |
| CS253337B1 (cs) | Myši lymfocytárnf hybridem IMG CZAS RT-14 | |
| SU1685997A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS.мUSсULUS L. - продуцент моноклональных антител к тиреотропному гормону человека | |
| WO1986002363A1 (en) | Monoclonal antibodies and their use | |
| CS223535B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom | |
| CS222781B1 (en) | Electromotor with friction brake with decreased noise | |
| CS234935B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridem IMG CZAS B2M-01 | |
| CS222780B1 (cs) | Myší lymfocytámí hybridem | |
| CS239800B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS TU-04 |