CS209458B2 - Method of making the complex of the insuline salt with the protamine - Google Patents
Method of making the complex of the insuline salt with the protamine Download PDFInfo
- Publication number
- CS209458B2 CS209458B2 CS722923A CS292372A CS209458B2 CS 209458 B2 CS209458 B2 CS 209458B2 CS 722923 A CS722923 A CS 722923A CS 292372 A CS292372 A CS 292372A CS 209458 B2 CS209458 B2 CS 209458B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- insulin
- protamine
- salt
- complex
- sodium
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/28—Insulins
Description
Vynález - se týká způsobu výroby komplexu inzulínové soli s protaminem.
Předmětem vynálezu je tedy způsob výroby komplexu inzulínové soli -s protaminem, vyznačující se tím, že se při pH 6,5 až 8,0 uvede v reakci ve vodném prostředí protaminu a zinku a těžkých kovů prostá sůl inzulínu s alkalickým -kovem nebo- amonná sůl inzulínu tak, že na každých 100 jednotek inzulínu se přidá 0,2 až 1,5 mg protaminu, za vzniku suspenze ve vodě nerozpustného komplexu.
Současné inzulínové preparáty se obvykle rozdělují na krátkodobé, středně dlouhé nebo s prodlouženým účinkem s - ohledem na jejich biologickou účinnost. U mno/ ha případů cukrovky je žádaným -preparátem k terapeutickému užití takový, jež má rychlý nástup účinku a prodloužené trvání působení. Takové dvojité působení k účinému potlačení hyperglykemie, používající jediné injekce, nevykazuje dosud žádná z obchodně dosažitelných inzulínových směsí.
Přestože v posledních letech předem smíšené inzulínové přípravky, mající žádané krátkodobé a středně dlouhodobé hypoglykemické působení, byly zavedeny na trh, vyžadují tyto- preparáty stále ještě speciální skladování a konzervaci a vyžadují zlep2 šení. Předem smíšené preparáty se skládají z roztoku - krystalického zink-inzulínu -získaného z prasečích pankreatů a krystalického hovězího inzulínu s vysokým -obsahem zinku. Ostatní - dřívější - preparáty, ve - kterých se smísí roztoky krystalického zink-inzulínu nebo amorfního -inzulínu s preparáty protamin-zink-inzulínu, narážely na problémy stability vyvolané rozkladem protaminu a rovněž precipitací rozpustné - inzulínové vložky přebytkem protaminu - ve směsi. Mnoho problémů jako je nízká - čistota, nedostatečná stabilita barva, znečištění hyperglykemickým hormonem - (glukagonem) a antigenními proteiny s velkou molekulární vahou, brzdily vývoj přípravku majícího jak rychlý nástup, tak dlouhotrvající hypoglykemické působení.
Jednou z předností tohoto vynálezu je, že umožňuje jednotlivou injekci inzulínové suspenze, která po aplikaci vede jak k rychlému -nástupu účinku, tak k jeho - prolongovanému trvání. - Další předností je, že inzulínový komplex -nebo -suspenze mohou být skladovány po dlouhou dobu bez podstatného rozkladu.
Na obr. 1, 2, -3, 4 a 5 jsou grafy, -kde jsou vyneseny hladiny krevního cukru dosažené injekcemi řady různých inzulínových preparátů u zvířat.
Obr. 1 obsahuje graf . srovnávající účinek injekce preparátu natrium-protamin-inzulínového a isophanininzulínového (NPH). Na ose úseček je uveden čas v hodinách, na ose pořadnic hladina cukru v krvi v mg%.
Obr. 2 jde o graf · srovnávající účinek komplexu nebo suspenze připravené podle tohoto vynálezu s účinkem směsi kyselého obyčejného inzulínu a isophan-inzulín^u. Na ose úseček je uveden čas . v hodinách, na ose pořadnic ' hladinu cukru v krvi v mg ·%ol. Křivka 1 znázorňuje průběh hladiny cukru · v případě směsi běžného inzulínu a isophan-inzulínu, křivka ·2 v případě komplexu podle · vynálezu.
Obr. 3 jde o graf srovnávající tři suspenze připravené podle vynálezu a to, hovězího· inzulínu, vepřového inzulínu a jejich směsi. Na ose úseček je uveden čas v hodinách, na ose pořadnic hladina cukru v krvi v mg %. Křivka 1 znázorňuje vliv vepřového inzulínu, křivka 2 vliv směsi vepřového a hovězího inzulínu [75 % : 25 %) a křivka 3 vliv hovězího inzulínu.
Obr. 4 jde o· graf porovnávající účinnost komplexu podle vynálezu po· skladování. Na ose úseček je uveden v hodinách, na ose pořadnic hladina · cukru v krvi v mg %. Na křivce 1 je účinek ' · při · použití ihned po · výrobě při 25 °C, · na křivce 2 účinek po 1 týdnu při 25 °C, křivce 3 účinek po 4 týdnech při 25 °C. Je zřejmé, že účinnost je v podstatě stálá.
Obr, 5 obsahuje graf srovnávající příkla· dy komplexů a suspenzí připravených podle vynálezu. Na ose úseček je uveden č.as v hodinách, na se pořadnic hladina cukru v krvi v mg °/o. Na· křivce 1 je účinek amonné · soli, · na · křivce 2 lithné soli na křivce 3 draselné soli a · na křivce 4 sodné soli. Je zřejmé, že · sodná sůl je nejvýhodnější.
Obr. 6 · obsahuje graf, získaný podáním komplexu · podle vynálezu [křivka 1) a směsi · natriumprotaímininzulínu s ísophan-inzulínem· NPH (křivka 2) čtyřem osobám na lačno1 [od půlnoci do 17 hodin). · Bylo podáno · vždy 0,25 jednotek/kg. Na ose úseček je uveden čas v hodinách, na ose pořadnic hladina cukru v krvi v mg %. Je zřejmé, že účinek komplexu podle vynálezu je podstatně příznivější.
Komplex inzulínové soli s protaminem utvořený způsobem podle vynálezu je užitečný jako aktivní složka v hypoglykemícké směsi mající jak rychlý· nástup, tak prolongovaný účinek. Inzulínová sůl je buď solí alkalického kovu, nebo solí amonnou a protamin se s výhodou užívá jako sulfát v poměru na každých 100 jednotek inzulínu od 0,2 do 1,5 mg, s · výhodou od 0,4 do 0,8 mg.
Inzulínová sůl, která je v podstatě zbavena zinku nebo jiného těžkého· kovu se s výhodou připraví krystalizaci inzulínu v alkalickém prostředí s užitím hydroxidu sodného, hydridu alkalického kovu nebo' hydroxidu amonného. Po krystalizaci se krystaly · promyjí a usuší na vlhký zbytek nepřesáhující 10 %) obsahu · vody. Inzulínová sůl je rychle rozpustná ve vodě za . .. neutrálního pH a může být v roztoku skladována po dobu tří měsíců bez podstatných změn.
V souhlasu se způsobem podle vynálezu se · svrchu popsaná inzulínová sůl a protamin smísí ve vodném prostředí, a tak vytvoří komplex inzulínové soli a protaminu. Vodné prostředí má pH kolem 6,5 do 8,0. Komplex protaminu a inzulínové soli může být snadno oddělen filtrací nebo podobnými způsoby od tekutého prostředí a usušen. Komplex může být v suché formě . skladován nejméně po· dobu jednoho roku i déle bez poškození. Je-li třeba použít komplex protaminu a inzulínové soli, suchý · materiál se rekonstituuje ve vodném prostředí, s výhodou se užívá jako rozpouštědla izotonických roztoků o pH · 6,5 až 8,0. Po rekonstituci je komplex připraven k injekci. Pacient, jemuž byl rekonstituovaný preparát * aplikován, pocítí jak rychlý nástup, tak prodloužené trvání hypoglykemícké aktivity.
Typická metoda k přípravě · komplexu protaminu s inzulínovou solí zahrnuje přípravu · sodné soli inzulínu takovým · způsobem, že natrium inzulín je prakticky bezzinkový, to znamená, že obsahuje méně než 0,05 % zinku. Sodná ·· sůl je krystalická, · ale je rozpustná ve vodě a v izotonických rozpouštědlech. Po · přípravě se sodná sůl rozpustí v tekutém prostředí a to v poměru 90 až 115 jednotek na 100 ml tekutého média. Do· tekutého· média se přidá přiměřené množství protaminsulfátu. Ihned se vytvoří nerozpustný komplex ve formě velmi jemného· precipitátu. Precipitát rozptýlený na jemné částečky zůstává dobře suspendován v tekutém médiu a · dovoluje uživateli ·snadnou injekční · aplikaci. Je-li komplex skladován v tekutém médiu, zůstává stálý a · nevykazuje žádnou ztrátu účinnosti po dobu nejméně jednoho roku. Jestliže · se sušený komplex protaminu · a inzulínové soli rekonstituje, je · žádoucí míchat komplexem v tekutém prostředí, aby se precipitát rovnoměrně v tekutině distribuoval k injekčnímu použití.
Přesná povaha asociace mezi inzulínovou solí a protaminem není známa, avšak aso- * ciace je dostatečně pevná, takže nerozpustný komplex je snadno separovatelný z tekutého prostředí a dá se vysušit, což usnadňuje zacházení při distribuci přípravku · % a umožňuje dlouhodobé skladování. Výro- * bek v suché formě může · být skladován bez časového omezení.
Nejprve · · se mělo za to, že rychlý · nástup účinku pozorovaný · s preparáty · komplexu protaminu s inzulínovou solí je způsoben volným inzulínem v mateřském tekutém médiu, avšak analýza ukázala, že jenom 0,015 °/o celkové inzulínové aktivity přípravku zůstává v rozpustné formě.
Z toho plyne, že · spojení inzulínu · s · protaminem není příliš pevné, a tak inzulín může · být brzy po· injekci schopen absorpce.
Také je možné, že povaha tohoto komplexu je odlišná od známých komerčních preparátů protamin-zink-inzulínových, u nichž je disociace inzulínu z komplexu ve tkáních mnohem pomalejší a kde nedochází к žádnému rychlému nástupu v působení.
Komplex inzulínové soli s protaminem se tvoří v kapalném prostředí o pH 6,5 až 8,0, s výhodou 7,2 až 7,6.
Sůl inzulínu s alkalickým kovem se získá tak, že se uvede surový inzulín ve styk s ionty alkalického kovu, čímž dojde ke Krystalizací inzulínu ve formě soli s alkalickým kovem. Z ekonomických důvodů a pro snadné provedení tohoto postupu je ja* ко zdroj iontu alkalického kovu nejvýhod^ nější hydroxid sodný. Sodná sůl se připraví tak, že se vodný roztok surového inzulínu uvede ve styk s hydroxidem sodným v množství, které je dostatečné к zajištění pH 8,0 až 8,5. Postup se provádí za míchání alkalického roztoku alespoň 15 minut, s výhodou hoainu nebo delší dohu. Sodná sůl inzulínu se vysráží a lze ji snadno izolovat odstředěním, filtrací, slitím apod. Produkt může být čištěn rozpuštěním a opětovaným vysrážením tak dlouho, až se získá sraženina, podobná krystalkům. Analýzou bylo prokázáno, že v případě sodné soli inzulínu, sůl obsahuje 1 mol sodíku na 1 mol inzulínu. Krystaly sodné soli inzulínu mohou být vyrobeny z inzulínu hovězího nebo vepřového, jsou velmi rozpustné ve vodě a v izotonických roztocích při neutrálním pH.
Vhodnými alkalickými kovy nebo kovy alkalických zemin, kterých lze užít к přípravě inzulínových solí, jsou zejména draslík, lithium, cesium, sodík a amonný iont.
Protamin se obvykle užije ve formě síranu nebo jakékoli jiné vhodné, ve vodě rozpustné formě.
V případě, že se jako kapalného prostředí pro síran protaminu a inzulínovou sůl užije izotonický roztok běžného typu, je výhodné, aby obsahoval ještě konzervační prostředek, například fenol, nebo methylparahydrcxybenzoát.
Biologická účinnost komplexu inzulínu s protaminem byla stanovena na králících následujícím způsobem: 36 králíků bylo rozděleno na dvě stejně veliké skupiny a 24 hodin před pokusem jim nebyla podávána potrava, v průběhu testu nedostávala zvířata potravu ani vodu. Vzořek krve byl odebrán z ušní žíly a ve vzorku byla stanovena počáteční koncentrace krevního cukru. Kontrolní skupině králíků byl podán neutrální Hagedornův protamininzulín (NPH) v předem stanovené dávce. Zkušební skupina dostala komplex sodné soli inzulínu s protaminem (PSI). Jednotlivá dávka byla 1,0 jednotky pro králíka, tato dávka byla podána v objemu přibližně 0,01 ml. První vzorky krve byly u každého králíka odebrány po 1/2 hodině, další vzorky za 1,5 hodin, 3,0 hodin, 5,0, 7,0 a 9,0 hodin po injekci. Každý vzorek krve byl zkoumán na hladinu krevního- cukru, výsledky byly vyjádřeny v mg % glukózy. Pro obě skupiny byla potem vypočítána průměrná hladina krevního cukru při každém odběru.
Po týdnu byl pokus opakován se stejnými skupinami králíků až na to, že obě skupiny byly zaměněny, to znamená, že původní kontrolní skupina nyní obdržela komplex sodné soli inzulínu s protaminem a obráceně. Výsledky jsou vyjádřeny jako průměrná hladina krevního cukru v mg % na obr. 1 a v tabulce 1.
T a b u 1 к a 1
Hladina krevního cukru mg %
Cas v hodinách 0 0,5 1,5 3,0 5,0 7,09,0 kontrola (NPH) 83,8 64,9
PSI 80,1 51,1
43,3 41,3 64,6 67,469,8
36,9 36,1 51,1 60,670,9
Je zřejmé, že komplex sodné soli inzulínu s protaminem zajistí rychlejší nástup účinku a delší trvání účinku než přípravek, který byl užit pro srovnání.
PSI (sodná sůl inzulínu s protaminem) býla srovnávána se směsí ARI (běžný inzulín kyselé povahy) a NPH v poměru 1 : 1.
Koncentrace protaminsulfátu byla 0,8 mg na ml.
Při tomto testu bylo užito 36 králíků opět dvakrát. Každý králík dostal 0,01 ml inzulínu, tak aby toto množství tvořilo jednu inzulínovou jednotku. Výsledky jsou uvedeny na obr. 2 a v tabulce 2.
1,5 3,0
5,0 7,0 9,0
Tabulka 2
Oas v hodinách 0 0,5
ARI a NPH 88,0 45,9
PSI 87,2 59,3
34,2 | 43,5 | 71,6 | 84,2 | 88,6 |
47,1 | 45,2 | 51,9 | 58,0 | 64,3 |
Uvedené výsledky potvrzují rychlý nástup áčinku u komplexu protaminu s inzulínem stejně jako dlouhé trvání tohoto účinku.
Bylo· provedeno srovnání tří typů neutrálního protaminu a sodné soli inzulínu v kombinaci s O,02 mg zinku na 100 jednotek inzulínu. Každý z inzulínových přípravků obsahoval 0,02 mg zinku na 100 inzulínových jednotek. Zinek byl přidáván proto, aby mohlo být stanoveno případné působení zinku na rychlý nástup účinku nebo na prodloužené působení přípravku. Jak je z vý sledků zřejmé, nebyl zjištěn žádný nepříznivý účinek v tomto smyslu.
Srovnávány byly tři přípravky, a to vepřový inzulín, hovězí inzulín a směs obsahující 75 % hovězího inzulínu a 25 % vepřového Inzulínu.
Každá ze zkoušek byla provedena na šesti králících, a to jedinou injekcí 0,01 ml přípravku s obsahem 1 jednotky inzulínu. Výsledky jsou uvedeny na obr. 3 a v tabulce
3.
Tabulka 3
Čas v nudinách 0
Hladina krevního cukru mg %
1,5 3,0 5,0
7,0
9,0
vepřový inzulín | 80,3 | 41,5 |
směs | 80,2 | 40,5 |
hovězí inzulín | 85,5 | 42,6 |
44.5 55,4 73,076,7
37.6 53,1 60,765,6
35,3 38,5 53,463,0
Vepřový inzulín má rychlý nástup účinku, přestože trvání účinku nebývá tak dlouhé, jako u ostatních inzulínových přípravků. Hovězí inzulín a smíšený přípravek mají i rychlý nástup účinku i dlouhé trvání.
Mimoto je třeba se zmínit o tom, že malé množství zinku bylo přidáváno i ke komplexu sodné soli inzulínu s protaminem. Bylo totiž zijštěno, že dvojmocné kovy, jako je zinek nemají být přítomny ve velkých množstvích již v průběhu tvorby sodné so-li inzulínu. Inzulín byl ke komplexu přidáván proto, aby bylo prokázáno, zda má zinek nějaký vliv na inzulínový komplex. Z výsledků je zřejmé, že zinek ani nesnižoval ani nezvyšoval léčebnou hodnotu přípravku.
Vynález bude osvětlen následujícími příklady.
Píklail
Krystalický hovězí inzulín ve formě své sodné soli byl připraven takto:
Inzulín byl extrahován z hovězí slinivky břišní okyselenou směsí vody a alkoholu, extrakt byl koncentrován destilací ve vakuu a částečně čištěn frakčním srážením chloridem sodným a izoelektrickým srážením. Inzulín . byl dále čištěn krystalizací v alkalickém prostředí při pH 8,2. Výsledné krystalky byly rozpuštěny v 0,5 N kyselině octové a dále podrobeny gelové filtraci na přípravku Sephadex G-50 (Pharmacia Fine Chemicals, Uppsala, Švédsko).
Eluát, který sestával z 0,5 N roztoku kyseliny octové a obsahoval inzulín, byl alkaúčinnost dusík obsah vody barevný index lizován až na pH 8,2 1,0 N roztokem hydroxidu sodného a míchán 1 hodinu při teplotě místnosti. Krystalky sodné soli inzulínu byly odděleny filtrací a promyty - 2% roztokem chloridu sodného. Promyté krystaly byly pak smíseny s absolutním alkoholem za energického míchání a odděleny filtrací. Po druhém promytí absolutním . alkoholem byly krystaly promyty éterem' - a usušeny ve vakuu.
Výsledná krystalická sodná sůl hovězího inzulínu měla tyto vlastnosti:
25,08 jednote-k/tóg 15,82 . % 8,0 · - ' % 0,005 pro 1% roztok při 340 nfn.
3,98 g sodné soli inzulínu bylo rozpuštěno v 990 ml apyrogenní - vody -s obsahem 2,27 g fenolu a 1,5 ml 10% kyseliny solné. pH tohoto roztoku . bylo pak upraveno - : na
7,4 přidáním 1,7 ml 10% hydroxidu sodného. Imunologické zkoušky ukázaly, že účinnost inzulínu je 101,3 jednotek/ml. Tento roztok byl sterilizován filtrací, pak byl plněn do ampulí v množství 1,0 ml na ampúli a ampule byly i s obsahem lyofilizovány za sterilních podmínek, čímž byl získán · v každé ampuli sušený přípravek sodné soli inzulínu. Tento přípravek byl v - této formě skladován až do použití.
Do- každé z ampulí bylo uvedeno dostatečné množství isotonického ředidla a -inzulín byl rekonstituován tak, že obsahoval
101,3 jednotek inzulínu v 1 ml prostředí.
Izotonické ředidlo sestávalo z 0,4 mg protaminsulfátu/ml, 1,6 . glycerinu a 0,25 % fenolu (váha/objem). Ředidlo· mělo pH 7,4. Po přidání této ' kapaliny k sušené sodné soli inzulínu došlo okamžitě ke tvorbě komplexu protaminu se sodnou solí inzulínu. Tento komplex bylo možno pozorovat jako velmi jemně rozptýlenou sraženinu. Tato sraženina vytvořila suspenzi dostatečně jemnou, takže ji bylo možno odebírat injekční stříkačkou a přitom bylo možno zajistit stejné množství inzulínu v každém z odebraných podílů.
P ř í k 1 a d 2 losí komplexu protaminu s inzulínem. Neutrální PSI, užitý v tomto příkladu, byl připraven podle příkladu 1 ' s tím · rozdílem, že izotonické ředidlo obsahovalo 1,2 mg protaminu v ml.
Každá ze zkoušek byla provedena na 9 králících. Přípravek byl skladován při teplotě 25 °C v intervalu mezi jednotlivými zkouškami ve formě suspenze v izotonickém ředidle. Stejně jako v předchozích pokusech bylo králíkům injekčně aplikováno 0,01 ml přípravku.
Výsledky jsou znázorněny na obr. 4 a uvedeny v tabulce 4.
V příkladu 2 je prokázána výborná stáTabulka 4
Hladina krevního cukru v mg %
Cas v hodinách | 0 | 1,5 | 3,0 | 5,0 | 7,0 | 9,0 |
na počátku | 91,0 | 51,2 | 43,4 | 54,0 | 59,5 | 65,8 |
po 1 týdnu | 84,1 | 49,3 | 43,2 | 48,4 | 52,1 | 61,2 |
po 2 týdnech | 78,3 | 45,D | 33,5 | 37,6 | 48,9 | 54,6 |
po 4 týdnech | 95,3 | 40,9 | 29,8 | 36,6 | 45,7 | 55,8 |
Údaje v tabulce 4 jasně prokazují, že i když je izotonický roztok komplexu protaminu se sodnou solí inzulínu skladován . při 25 °C, je velmi stálý v tom smyslu, že účinnost inzulínu je uchována i pokud jde o rychlý nástup účinku i pokud jde o jeho dlouhé trvání.
Příklad 3
V příkladu je uvedena tvorba komplexu protaminu s amonnou solí inzulínu, lithnou solí inzulínu a 'draselnou solí inzulínu, stejně jako se sodnou solí inzulínu z příkladu i.
Každá ze svrchu zmíněných solí byla utvořena způsobem podle příkladu 1, to znamená, že po tvorbě soli byl její roztok smíšen s izotonickým roztokem, který obsahoval 0,4 mg protaminsulfátu na ml. Výsledný roztok byl pak injekčně podán 18 králíkům způsobem. stejným jako v příkladu 1. Výsledky jsou znázorněny na obr. 5 a v tabulce 5.
Tabulka 5
Hladina krevního cukru v mg %
Čas v hodinách | 0 | 1,5 | 3,0 | 5,0 | 7,0 | 9,0 |
amonná sůl | 86,1 | 42,1 | 51,6 | 81,5 | 79,4 | 88,9 |
lithná sůl | 87,1 | 38,6 | 38,6 | 60,2 | 75,9 | 81,1 |
draselná sůl | 86,6 | 42,9 | 50,8 | 67,1 | 74,6 | 79,4 |
sodná sůl | 80,1 | 36,9 | 36,1 | 51,1 | 60,6 | . 70,9 |
Přestože ' sodná sůl má dlouhodobý účinek i ostatní typy solí mají poměrně velmi dlouhodobé účinky na snížení krevního cukru.
Příklad 4
Příklad dokládá stálost komplexu protaminu se sodnou solí inzulínu. Komplex byl připraven stejně jako v příkladu 1 použitím protaminsulfátu v koncentraci 0,4 mg/ml v izotonickém ředidle. Hotový komplex byl rozdělen do několika zkumavek, které byly odstředěny a supernatant byl slit. Sraženi na byla promyta 15 ml absolutního alkoholu a pak 15 ml éteru. Promytá sraženina byla pak usušena ve vakuu při teplotě místnosti.
Takto usušený výsledný produkt byl znovu rozpuštěn nebo uveden v suspenzi v neutrálním izotonickém ředidle, stejného složení jako svrchu až na to, že neobsahoval protaminsulfátu. Pak byla určena účinnost této suspenze a bylo zjištěno, že se pohybuje v rozmezí 88 až 95 jednotek/ml, takže zřejmě došlo k malým ztrátám inzulínu při promývání komplexu protaminu se sodnou solí inzulínu před sušením ve vakuu.
Zkoušky byly prováděny stejně jako v předchozích příkladech na 9 králících. Údaje jsou uvedeny v tabulce 6. Pokus s lyofilizovaným materiálem byl proveden tak, že komplex byl lyofilizován až po· vytvoření druhé suspenze ve vodě.
Tabulka 6
Hladina krevního cukru mg °/o
Cas v hodinách | 0 | 0,5 | 1,0 | 3,0 | 5,0 | . 7,0 | 9,0 |
sušeno ve vakui | 82,0 | 52,5 | 57,3 | 67,8 | 76,7 | 74,3 | 77,3 |
lyofilizováno | 85,4 | 44,7 | 45,6 | 53,1 | 78,9 | 80,7 | 80,0 |
Oba přípravky způsobovaly podstané snížení hladiny krevního cukru.
Claims (4)
1. Způsob výroby komplexu inzulínové soli s protaminem, vyznačující se tím, že se při pH 6,5 až 8,0 uvede v reakci ve vodném prostředí protamin a zinku a těžkých kovů prostá sůl inzulínu s alkalickým kovem nebo amonná sůl inzulínu tak, že na každých 100 jednotek inzulínu se přidá 0,2 až 1,5 mg protaminu, za vzniku suspenze ve vodě nerozpustného komplexu.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že jako vodného prostředí se užije izotonického roztoku.
3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že jako inzulínové soli se užije sodné soli inzulínu.
4. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se získaný nerozpustný komplex izoluje z vodného prostředí a jeho obsah vody se sníží pod 10 hmotnostních %.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US13912071A | 1971-04-30 | 1971-04-30 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CS209458B2 true CS209458B2 (en) | 1981-12-31 |
Family
ID=22485216
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS722923A CS209458B2 (en) | 1971-04-30 | 1972-04-28 | Method of making the complex of the insuline salt with the protamine |
Country Status (23)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US3758683A (cs) |
JP (1) | JPS5735185B1 (cs) |
BE (1) | BE782651A (cs) |
CA (1) | CA976085A (cs) |
CH (1) | CH566784A5 (cs) |
CS (1) | CS209458B2 (cs) |
DD (1) | DD100708A5 (cs) |
DE (1) | DE2219635C3 (cs) |
DK (1) | DK131760C (cs) |
ES (1) | ES402176A1 (cs) |
FI (1) | FI49773C (cs) |
FR (1) | FR2134658B1 (cs) |
GB (1) | GB1385086A (cs) |
HU (1) | HU166989B (cs) |
IL (1) | IL39181A (cs) |
NL (1) | NL178258C (cs) |
NO (1) | NO137178C (cs) |
PL (1) | PL86966B1 (cs) |
RO (1) | RO64387A (cs) |
SE (1) | SE378066B (cs) |
SU (1) | SU508162A3 (cs) |
YU (1) | YU36155B (cs) |
ZA (1) | ZA722243B (cs) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DK140801B (da) * | 1975-01-15 | 1979-11-19 | Nordisk Insulinlab | Fremgangsmåde til fremstilling af et stabilt langtidsvirkende insulinpræparat. |
NL193099C (nl) * | 1981-10-30 | 1998-11-03 | Novo Industri As | Gestabiliseerde insuline-oplossing. |
WO1988002633A1 (en) * | 1986-10-20 | 1988-04-21 | Novo Industri A/S | Protamine zinc insulin preparations |
IE62879B1 (en) * | 1987-02-25 | 1995-03-08 | Novo Nordisk As | Novel insulin derivatives |
DE19726167B4 (de) | 1997-06-20 | 2008-01-24 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Insulin, Verfahren zu seiner Herstellung und es enthaltende pharmazeutische Zubereitung |
US6624141B1 (en) * | 1999-03-17 | 2003-09-23 | The Regents Of The University Of Michigan | Protamine fragment compositions and methods of use |
DE10114178A1 (de) * | 2001-03-23 | 2002-10-10 | Aventis Pharma Gmbh | Zinkfreie und zinkarme Insulinzubereitungen mit verbesserter Stabilität |
DE10227232A1 (de) * | 2002-06-18 | 2004-01-15 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Saure Insulinzubereitungen mit verbesserter Stabilität |
PT3228320T (pt) | 2008-10-17 | 2020-03-26 | Sanofi Aventis Deutschland | Combinação de uma insulina e de um agonista do glp-1 |
TR201809460T4 (tr) | 2009-11-13 | 2018-07-23 | Sanofi Aventis Deutschland | Bir GLP- 1-agonisti, bir insülin ve metiyonin içeren farmasötik bileşim. |
JP5973918B2 (ja) | 2009-11-13 | 2016-08-23 | サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | Glp−1アゴニスト及びメチオニンを含む薬学的組成物 |
JP6199186B2 (ja) | 2010-08-30 | 2017-09-20 | サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | 2型糖尿病の治療用の医薬の製造のためのave0010の使用 |
US9821032B2 (en) | 2011-05-13 | 2017-11-21 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin |
AR087693A1 (es) | 2011-08-29 | 2014-04-09 | Sanofi Aventis Deutschland | Combinacion farmaceutica para uso en el control glucemico en pacientes con diabetes de tipo 2 |
TWI559929B (en) | 2011-09-01 | 2016-12-01 | Sanofi Aventis Deutschland | Pharmaceutical composition for use in the treatment of a neurodegenerative disease |
CA2970200A1 (en) | 2014-12-12 | 2016-06-16 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Insulin glargine/lixisenatide fixed ratio formulation |
TWI748945B (zh) | 2015-03-13 | 2021-12-11 | 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 | 第2型糖尿病病患治療 |
TW201705975A (zh) | 2015-03-18 | 2017-02-16 | 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 | 第2型糖尿病病患之治療 |
CN111050750A (zh) | 2017-08-24 | 2020-04-21 | 诺沃挪第克公司 | Glp-1组合物及其用途 |
EP4106727A1 (en) | 2020-02-18 | 2022-12-28 | Novo Nordisk A/S | Pharmaceutical formulations |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR5038E (fr) * | 1904-03-09 | 1905-12-02 | Georges Frederic Brade | Perfectionnements dans la fabrication des organes du métronome |
GB889769A (en) * | 1957-07-18 | 1962-02-21 | Nordisk Insulinlab | Slowly acting insulin preparation in crystalline form |
-
1971
- 1971-04-30 US US00139120A patent/US3758683A/en not_active Expired - Lifetime
-
1972
- 1972-04-04 ZA ZA722243A patent/ZA722243B/xx unknown
- 1972-04-10 IL IL39181A patent/IL39181A/en unknown
- 1972-04-17 FI FI721077A patent/FI49773C/fi active
- 1972-04-20 DD DD162448A patent/DD100708A5/xx unknown
- 1972-04-21 DE DE2219635A patent/DE2219635C3/de not_active Expired
- 1972-04-24 NO NO1423/72A patent/NO137178C/no unknown
- 1972-04-26 SU SU1778186A patent/SU508162A3/ru active
- 1972-04-26 BE BE782651A patent/BE782651A/xx not_active IP Right Cessation
- 1972-04-26 JP JP4209072A patent/JPS5735185B1/ja active Pending
- 1972-04-27 ES ES402176A patent/ES402176A1/es not_active Expired
- 1972-04-27 DK DK209472A patent/DK131760C/da not_active IP Right Cessation
- 1972-04-27 PL PL1972155003A patent/PL86966B1/pl unknown
- 1972-04-28 SE SE7205698A patent/SE378066B/xx unknown
- 1972-04-28 HU HUEI419A patent/HU166989B/hu unknown
- 1972-04-28 GB GB1974172A patent/GB1385086A/en not_active Expired
- 1972-04-28 CH CH633872A patent/CH566784A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1972-04-28 YU YU1142/72A patent/YU36155B/xx unknown
- 1972-04-28 CS CS722923A patent/CS209458B2/cs unknown
- 1972-04-28 CA CA140,826A patent/CA976085A/en not_active Expired
- 1972-04-28 NL NLAANVRAGE7205865,A patent/NL178258C/xx not_active IP Right Cessation
- 1972-04-28 FR FR7215270A patent/FR2134658B1/fr not_active Expired
- 1972-04-29 RO RO7270743A patent/RO64387A/ro unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US3758683A (en) | 1973-09-11 |
YU36155B (en) | 1982-02-25 |
YU114272A (en) | 1981-06-30 |
CA976085A (en) | 1975-10-14 |
ES402176A1 (es) | 1975-03-01 |
CH566784A5 (cs) | 1975-09-30 |
DE2219635C3 (de) | 1981-10-15 |
DK131760C (da) | 1976-02-02 |
IL39181A0 (en) | 1972-06-28 |
NL178258B (nl) | 1985-09-16 |
DE2219635B2 (de) | 1980-11-27 |
DE2219635A1 (de) | 1972-11-09 |
FI49773B (cs) | 1975-06-30 |
FR2134658B1 (cs) | 1975-10-17 |
NL178258C (nl) | 1986-02-17 |
NO137178B (no) | 1977-10-10 |
DD100708A5 (cs) | 1973-10-05 |
GB1385086A (en) | 1975-02-26 |
IL39181A (en) | 1974-09-10 |
BE782651A (fr) | 1972-10-26 |
JPS5735185B1 (cs) | 1982-07-27 |
PL86966B1 (cs) | 1976-06-30 |
SU508162A3 (ru) | 1976-03-25 |
FR2134658A1 (cs) | 1972-12-08 |
DK131760B (da) | 1975-09-01 |
SE378066B (cs) | 1975-08-18 |
FI49773C (fi) | 1975-10-10 |
ZA722243B (en) | 1973-11-28 |
RO64387A (fr) | 1979-07-15 |
HU166989B (cs) | 1975-07-28 |
NL7205865A (cs) | 1972-11-01 |
NO137178C (no) | 1978-01-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CS209458B2 (en) | Method of making the complex of the insuline salt with the protamine | |
EP0306824B1 (de) | Stabilisierte Humanprotein-Präparate | |
DE69631996T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von acylierten Proteinpuder | |
US4186192A (en) | Stabilized immune serum globulin | |
RU2108341C1 (ru) | Способ получения кристаллов гр или производных гр, кристаллы человеческих гр или производных человеческих гр и фармацевтический препарат | |
CZ299637B6 (cs) | Stabilní inzulinové prostredky | |
US5028587A (en) | Mixed crystals of insulin and insulin derivatives | |
CZ305297A3 (cs) | Parenterální farmaceutický prostředek na bázi analogu monomerního inzulínu | |
IE910579A1 (en) | Novel protein compositions | |
PL99927B1 (pl) | Sposob wytwarzania trwalego preparatu insulinowego o przedluzonym dzialaniu | |
US4089944A (en) | Rapidly solubilized AHF composition and process for preparing same | |
JPS61103825A (ja) | ブロモクリプチン含有眼料用製材 | |
DE60009926T2 (de) | Stabilisierung von gefriergetrocknetem kuchen | |
DE2920020C2 (cs) | ||
US5780599A (en) | Growth hormone crystals and a process for production of growth hormone crystals | |
CA2126932A1 (en) | Semi-solid pharmaceutical composition comprising an anhydrous oligosaccharide and process to produce the same | |
CS240957B2 (en) | Production method of stabile solution containing iron and selenium | |
KR100725076B1 (ko) | N-[o-(p-피발로일옥시벤젠술포닐아미노)벤조일]글리신·모노나트륨염·4수화물 함유 용액 및 제제 | |
US2793156A (en) | Repository penicillin products | |
Pennell et al. | Preparation of stabilized solutions of hemoglobin | |
US4390694A (en) | Method for preparing stable crystals of salt of Ceftizoxime | |
CZ20011998A3 (cs) | Troferutin s vysokým obsahem trihydroxietylrutinu a způsob jeho výroby | |
JPH05170664A (ja) | 安定なペプチド医薬組成物 | |
US2881114A (en) | Process for the removal of pyrogens from therapeutically active preparations with insoluble phosphate salts | |
JPH03287540A (ja) | カルシトニン注射液 |