CN1865290A - 冬枣多糖的提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种冬枣多糖的提取方法，本发明的冬枣多糖提取方法，包括如下步骤：首先将冬枣破碎、榨汁制得枣渣；然后将枣渣进行浸提制得提取液和残渣；最后将提取液浓缩后沉淀法回收多糖。所述步骤b中浸提方式包括冷水浸提。本发明的生产工艺简单而且效率高，耗能少，节约能源，同时也最大限度的保存了多糖的天然化学构造。极大的降低了借鉴其他方法提取冬枣多糖的生产成本，使冬枣多糖的提取工艺在很大程度上得到简化，将有效的推动冬枣多糖的利用效率。

Description

冬枣多糖的提取方法
                        技术领域
本发明涉及一种多糖的提取方法，特别涉及一种冬枣多糖的提取方法。
                        背景技术
冬枣在我国有着悠久的栽培与利用历史，历来被作为药食同源的经典样品。明代李时珍的《本草纲目》中就有“大枣味甘无毒，主心邪气，安中养脾，平胃气，通九窍，助十二经，补少气，久服轻身延年”的记载。同时由于其独特的风味，近年在我国开始有大面积的种植，其产区主要分布于天津的大港、静海，河北省的沧州、黄骅、衡水和山东省的滨州、德州、聊城、东营等地区。
冬枣营养丰富，除含有大量的糖以外，还含有19种人体必需的氨基酸、大量的无机盐类、多种维生素、膳食纤维等，其中多糖含量高达50％以上，高于金丝小枣20％。一般认为，多糖是红枣中重要的生物活性物质，可作为免疫促进剂，控制细胞的分裂和分化，有明显的抗补体活性和促进淋巴细胞增殖作用，具有抗癌、抗氧化、抗衰老等生理活性，可广泛应用于医药、保建品及功能食品。红枣的补血作用主要是由于枣中的多糖成分影响造血系统，通过诱导机体造血基质细胞和脾细胞等产行类造血生长因子物质，促进造血干细胞和祖细胞的分化增殖，而且促使基质细胞粘附性增加，有助于基质细胞和造血细胞的相互作用，达到促进造血的效果。尤其枣中的酸性多糖是抗补体活性的内在原因。然而关于冬枣中多糖的提取方法、化学性质与功能的研究还未见报道。目前，从其它红枣中提取多糖多用热水浸提，如1.《红枣中营养、药用有效成分多糖的提纯及其鉴定》，延安大学学报(自然科学版)，2004，23(3)：38-40；2.《大枣渣多糖不同提取方法的比较研究》，中成药，2004，26(10)：860-861；3.《大枣多糖的提取工艺》，食品与发酵工业，2004，11：128-129。用热水法浸提，耗能高，提取不彻底，而且只能得到纯度很低的粗糙的多糖的混合物，极大的限制了多糖的分离、纯化，以及化学性质、化学构造和生理功能的解析与实际的利用效率。
                        发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种冬枣多糖的提取方法。本发明的冬枣多糖提取方法，既最大限度的保存了多糖的天然化学构造，又使多糖的提取工艺在很大程度上得到简化，极大的降低了借鉴其他方法提取冬枣多糖的生产成本，将有效的推动冬枣多糖的利用效率。
本发明的冬枣多糖提取方法，包括如下步骤：
a.将冬枣破碎、榨汁制得枣渣；
b.将枣渣进行浸提制得提取液和残渣；
c.将提取液浓缩后沉淀法回收多糖；
所述步骤b中浸提方式包括冷水浸提。所述冷水浸提为将枣渣用冷水进行提取，直至提取液的糖反应消失为止。
优选所述步骤b依次采用冷水、热水、酸溶液和碱溶液四种方式进行浸提。优选按如下步骤进行：
(1)将经过榨汁后的枣渣用冷水浸提，每次水与枣渣的重量比为2-5∶1，浸提2-8h，过滤得提取液和残渣，重复提取2-10次，直至提取液的糖反应消失为止，合并提取液；
(2)将冷水提取后的残渣用热水浸提，每次水与枣渣的重量比为2-5∶1，浸提2-8h，过滤得提取液和残渣，重复提取2-10次，直至提取液的糖反应消失为止，合并提取液；
(3)将热水提取后的残渣分别进行碱溶液和酸溶液浸提，浸提顺序无先后，所述酸溶液浸提为将残渣加入其重量2-5倍的酸溶液中，浸提2-8h，过滤得提取液和残渣，重复提取2-10次，直至提取液的糖反应消失为止，合并提取液；所述碱溶液浸提为将残渣加入其重量2-5倍的碱溶液中，浸提2-8h，过滤得提取液和残渣，重复提取2-10次，直至提取液的糖反应消失为止，合并提取液；
所述步骤C优选为将上述步骤(1)、(2)、(3)中得到提取液分别浓缩至原体积的1/3-1/10，沉淀法制得冷水可溶性多糖，热水可溶性多糖，碱可溶性多糖和酸可溶性多糖。
优选：所述冷水温度为4℃-30℃，热水温度为70℃-100℃，酸溶液的浓度为0.01-1.0M，温度70℃-100℃，碱溶液浓度0.01-1.0M，温度70℃-100℃。
最优选：冷水温度为25℃，热水温度为90℃，酸溶液浓度为0.05M，温度80℃，碱溶液浓度为0.05M，温度80℃。
所述冷、热水种类无特殊要求，如去离子水，蒸馏水，纯净水等均可使用，优选蒸馏水。所述酸、碱类型也无特殊要求，可单一使用，也可为两种以上物质的混合物。如酸为盐酸、硫酸、硝酸等，碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙等，优选：酸为盐酸，碱为氢氧化钠。
本发明所述沉淀法优选乙醇沉淀法。所用乙醇的体积分数为60-90％，用量为提取液浓缩后体积的2-6倍。
本发明所用的原料为新鲜或干燥的冬枣，或冬枣经榨汁后的果渣。如果是果渣，省略榨汁步骤，干燥后可直接进行浸提。
以所提多糖的干重/榨汁后枣渣的干重算得的各多糖的收率，冷水浸提的多糖收率可达到14.3％。采用冷、热水、酸、碱四个步骤浸提时，各多糖的收率可分别达到14.3％、1.8％、0.3％和5.7％，以苯酚-硫酸法求得的各多糖的糖含量分别为74％、69％、70％和58％。由实验数据表明，冬枣中主要的多糖为冷水可溶性多糖，占到多糖总量的近70％，这一发现使冬枣多糖的提取工艺在很大程度上得到简化，极大的降低了借鉴其他方法提取冬枣多糖的生产成本，将有效的推动冬枣多糖的利用效率。
与现有技术相比，本发明有如下有益效果：
(1)由实验数据表明，冬枣中主要的多糖为冷水可溶性多糖，本发明采用冷水浸提多糖，耗能少，节约能源，同时也最大限度的保存了多糖的天然化学构造。
(2)本发明的生产工艺简单而效率高，做到了多糖的提取与分离纯化同步进行，产品成本低。
(3)原料充足，可产业化大批量生产。
                             附图说明
图1冬枣多糖提取工艺流程图。
                             具体实施方式
实施例一
将新鲜冬枣破碎、榨汁，取枣渣100g，干燥、粉碎，加入25℃蒸馏水400ml提取，浸提4h，过滤，得滤液和残渣，重复提取4次，将滤液浓缩合并为原体积的1/4，用体积比为5倍的乙醇(体积分数为80％)进行沉淀、过滤，回收沉淀，得冷水可溶性多糖和残渣；将残渣加入90℃4倍重量的蒸馏水提取，浸提2h，过滤，得滤液和残渣，重复提取4次，将滤液浓缩合并为原体积的1/4，用体积比为5倍的乙醇(体积分数为80％)进行沉淀回收，得热水可溶性多糖和残渣；再将残渣加入4倍重量，0.05M的盐酸溶液(80℃)中提取，浸提1h，重复提取4次，将滤液浓缩合并为原体积的1/5，用体积比为5倍的乙醇(体积分数为80％)进行沉淀回收，得热酸可溶性多糖和残渣；再将残渣加入4倍重量，0.05M的氢氧化钠溶液(80℃)中提取，浸提1h，过滤，得滤液和残渣，重复提取4次，将滤液浓缩合并为原体积的1/5，用体积比为5倍的乙醇(体积分数为80％)进行沉淀回收，得热碱可溶性多糖和残渣。
本实施例的提取工艺流程图见图1。
实施例二
取干燥冬枣破碎、榨汁，取枣渣100g，干燥、粉碎，加入4℃蒸馏水200ml，浸提6h，过滤，得滤液和残渣，重复提取8次，将滤液浓缩合并为原体积的1/6，用体积比为2倍的乙醇(体积分数为90％)进行沉淀、过滤，回收沉淀，得冷水可溶性多糖和残渣；将残渣加入100℃2倍重量的蒸馏水，浸提6h，过滤，得滤液和残渣，重复提取8次，将滤液浓缩合并为原体积的1/6，用体积比为2倍的乙醇(体积分数为90％)进行沉淀回收，过滤，得热水可溶性多糖和残渣；再将残渣加入2倍重量，0.01M的盐酸溶液(90℃)中提取，浸提7h，重复提取4次，将滤液浓缩合并为原体积的1/6，用体积比为2倍的乙醇(体积分数为90％)进行沉淀回收，得热酸可溶性多糖和残渣；再将残渣加入2倍重量，0.02M的氢氧化钠溶液(100℃)中提取，浸提7h，过滤，得滤液和残渣，重复提取4次，将滤液浓缩合并为原体积的1/6，用体积比为2倍的乙醇(体积分数为90％)进行沉淀回收，得热碱可溶性多糖和残渣。
实施例三
取新鲜冬枣破碎、榨汁，取枣渣100g，干燥、粉碎，加入15℃蒸馏水500ml，浸提2h，过滤，得滤液和残渣，重复提取2次，将滤液浓缩合并为原体积的1/6，用体积比为2倍的乙醇(体积分数为60％)进行沉淀，过滤，回收沉淀，得冷水可溶性多糖和残渣；将残渣加入70℃5倍重量的蒸馏水，浸提2h，过滤，得滤液和残渣，重复提取2次，将滤液浓缩合并为原体积的1/6，用体积比为2倍的乙醇(体积分数为60％)进行沉淀回收，过滤，得热水可溶性粗多糖和残渣；再将残渣加入5倍重量，1.00M的氢氧化钙溶液(70℃)中提取，浸提2h，过滤，得滤液和残渣，重复提取2次，将滤液浓缩合并为原体积的1/6，用体积比为2倍的乙醇(体积分数为60％)进行沉淀回收，得热碱可溶性多糖和残渣；再将残渣加入5倍重量，1.00M的硫酸溶液(70℃)中提取，浸提2h，重复提取2次，将滤液浓缩合并为原体积的1/6，用体积比为2倍的乙醇(体积分数为60％)进行沉淀回收，得热酸可溶性多糖和残渣。
实施例四
将新鲜冬枣破碎、榨汁，取枣渣100g，干燥、粉碎，加入30℃蒸馏水400ml提取，浸提1h，过滤，得滤液和残渣，重复提取4次，将滤液浓缩合并为原体积的1/6，用体积比为2倍的乙醇(体积分数为85％)进行沉淀、过滤，回收沉淀，得冷水可溶性多糖和残渣。
相关实验
1.多糖的收率      多糖的收率＝所提多糖的干重/榨汁后枣渣的干重
2.多糖的糖含量    以苯酚-硫酸法求得。
标准葡萄糖曲线的制作
准确称量100mg干燥恒重的分析纯D-葡萄糖，加蒸馏水溶解定溶在容量瓶中至1000mL。蒽酮试剂1g溶于20mL乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中。取6支试管(10mL以上)，依次加入葡萄糖原液(100μg/mL)0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，然后再依次加入蒸馏水2.0、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0mL，在每支试管中加入蒽酮试剂0.5mL，再用酸式滴定管加入浓硫酸5mL，摇匀，放置10min，在620nm波长下比色，以标准葡萄糖浓度作横坐标，以吸光度作纵坐标，做出标准曲线。
测定：准确称取1mg待测样品，加蒸馏水溶解稀释至200μg/mL，取0.1ml此溶液，立即加入蒽酮试剂0.5mL，再用酸式滴定管加入浓硫酸5mL，摇匀，放置10min，在波长620nm处测定吸光度。以标准曲线计算苦瓜多糖的含量。
测试数据汇总如下：

Claims (8)

1.一种冬枣多糖提取方法，其特征是包括如下步骤：
a.将冬枣破碎、榨汁制得枣渣；
b.将枣渣进行浸提制得提取液和残渣；
c.将提取液进行浓缩后沉淀法回收多糖；
其特征是所述步骤b中浸提方式包括冷水浸提。
2.如权利要求1所述的冬枣多糖提取方法，其特征是所述步骤b依次采用冷水、热水、酸溶液和碱溶液四种方式进行浸提。
3.如权利要求2所述的冬枣多糖提取方法，其特征所述b包括如下步骤：
(1)将经过榨汁后的枣渣用冷水浸提，每次水与枣渣的重量比为2-5∶1，浸提2-8h，过滤得提取液和残渣，重复提取2-10次，直至提取液的糖反应消失为止，合并提取液；
(2)将冷水提取后的残渣用热水浸提，每次水与枣渣的重量比为2-5∶1，浸提2-8h，过滤得提取液和残渣，重复提取2-10次，直至提取液的糖反应消失为止，合并提取液；
(3)将热水提取后的残渣分别进行碱溶液和酸溶液浸提，浸提顺序无先后，所述酸溶液浸提为将残渣加入其重量2-5倍的酸溶液中，浸提2-8h，过滤得提取液和残渣，重复提取2-10次，直至提取液的糖反应消失为止，合并提取液；所述碱溶液浸提为将残渣加入其重量2-5倍的碱溶液中，浸提2-8h，过滤得提取液和残渣，重复提取2-10次，直至提取液的糖反应消失为止，合并提取液；
所述步骤C为将上述步骤(1)、(2)、(3)中得到提取液分别浓缩至原体积的1/3-1/10，沉淀
法制得冷水可溶性多糖，热水可溶性多糖，碱可溶性多糖和酸可溶性多糖。
4.如权利要求3所述的冬枣多糖提取方法，其特征是所述冷水温度为4℃-30℃，热水温度为70℃-100℃，酸溶液的浓度为0.01-1.0M，温度70℃-100℃，碱溶液浓度0.01-1.0M，温度70℃-100℃。
5.如权利要求4所述的冬枣多糖提取方法，其特征是所述冷水温度为25℃，热水温度为90℃，酸溶液浓度为0.05M，温度80℃，碱溶液浓度为0.05M，温度80℃。
6.如权利要求5所述的冬枣多糖提取方法，其特征是所述冷、热水为蒸馏水，酸为盐酸，碱为氢氧化钠。
7.如权利要求1至6之一所述的冬枣多糖提取方法，其特征是所述沉淀法为乙醇沉淀法。
8.如权利要求1所述的冬枣多糖提取方法，其特征是原料为新鲜或干燥的冬枣或冬枣经榨汁后的果渣。
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