CN101380339B - 灰兜巴有效成份的提取方法 - Google Patents
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Abstract
灰兜巴有效成份的提取方法,涉及从菌科植物灰兜巴中提取分析有效成份的工艺方法,属于中草药开发应用领域。将灰兜巴浸泡水提,抽滤分离,将滤液经旋转蒸发仪浓缩,然后用浓度不低于80%的乙醇沉淀,采用低温超速离心,分离出多糖沉淀,将沉淀出的多糖用有机溶剂洗涤,再经真空干燥,得灰兜巴粗多糖。本方法工艺简单,不含游离的蛋白质,无需三氯醋酸沉淀蛋白质,不必洗涤除酸,易于操作,能防止有效成份氧化失效。可将灰兜巴粗多糖作为口服药防治T型E型糖尿病使用,以提高药物疗效。
Description
技术领域
本发明涉及从菌科植物灰兜巴中提取分析有效成份的工艺方法,属于中草药开发应用领域。
背景技术
灰兜巴(又名闭口袋)是一种山蜘蛛寄生在海拔1500米以上的峨眉山老茶树头部生长出来的菌科植物。性味:平、淡。功能:1、益气健脾,滋补肾阴、消除、缓解糖尿病症状。2、改善胰岛B细胞性不足,促进体内血糖的自然平衡。3、平衡阴阳,调和气血,纠正代谢絮乱,防止糖尿病并发症。主治:糖尿病。适用于T型E型糖尿病,当血糖下降到正常值时,应健康饮食,坚持运动,使其控制血糖稳定,不需依赖药物治疗。称为仙山灵药、糖尿病克星、天然纯绿色的大自然珍宝。民间已有患者服用并显示其免疫力增强,血糖下降到正常值,且无毒副作用。但目前为止,人们对灰兜巴的理论研究尚少。
发明内容
本发明目的在于从研究一种灰兜巴有效成份的提取方法,以进一步开发灰兜巴产品为目的。
本发明技术方案是:将灰兜巴浸泡水提,抽滤分离,将滤液经旋转蒸发仪浓缩,然后用浓度不低于80%的乙醇沉淀,采用低温超速离心,分离出多糖沉淀,将沉淀出的多糖用有机溶剂洗涤,再经真空干燥,得灰兜巴粗多糖。
本发明方法工艺简单,不含游离的蛋白质,无需三氯醋酸沉淀蛋白质,不必洗涤除酸,易于操作,能防止有效成份氧化失效。可将灰兜巴粗多糖作为口服药防治T型E型糖尿病使用,以提高药物疗效,可望该多糖有效成份提取利用对增强人的免疫力,具有积极作用和深远意义。
本发明中,灰兜巴浸泡时,水为室温,提取时水浴温度60℃~90℃。如温度太低,有效成份溶出速率慢,如温度太高,可能会造成有效成份部分氧化。
为了将灰兜巴粗多糖尽可能完全地提取出来,按浓缩液体积3~4倍量的无水乙醇沉淀出多糖,并依次用有机溶剂洗涤。
为了进一步提纯,获得精制灰兜巴有成份,本发明还将粗多糖经柱层析分离得多糖产品。
为了充分利用灰兜巴,使有效成份尽可能完全溶解在水中,本发明先将灰兜巴粉碎后再浸泡。
所述有机溶剂为乙醇或丙酮或乙醚或石油醚。
具体实施方式
一、灰兜巴有效成份的提取:
称取一定质量灰兜巴剪碎,投入圆底烧瓶中,加蒸馏水至刚好将药品浸没,室温浸泡1~3小时后,于水浴回流提取1h,水浴温度60℃~90℃,抽出提取液。用同样的方法以蒸馏水再提取2次,每次1h,合并提取液。
将滤液经旋转蒸发仪浓缩,再用浓缩液体积3~4倍量的无水乙醇沉淀多糖,冰箱冷藏静置12小时,采用低温超速离心分离出固体多糖,然后依次用无水乙醇、丙酮和乙醚等有机溶剂反复洗涤多糖沉淀(每种溶剂至少洗3次)。真空干燥(由于最后用乙醚洗涤,所以真空干燥箱内放置一定量的吸水剂、抗氧剂,室温抽真空12小时,),得粉红色粉末,此为灰兜巴粗多糖。
将粗多糖再经柱层析分离得多糖产品。
洗涤多糖沉淀物时,可用的有机溶剂还有石油醚。
二、多糖产品性能表征、特点:
与镁粉-浓盐酸反应不显橙红色,提示不含黄酮类。
加入中性盐,三氯醋酸,未见絮状物析出,表明无游离蛋白质。
与茚三酮共热,显蓝紫色,紫外光谱测定在波长280nm处有吸收,表明提取物中有蛋白质结构部分。
红外光谱显示此多糖含有α-和β-糖苷键。
毛细管电泳分析灰兜巴多糖中氨基酸的组成。色谱法测定多糖分子量。
灰兜巴多糖系肽多糖。
三、应用:
某患者,经常感冒,血糖指数12mmol/L。
服用经本发明提取的灰兜巴粗多糖,每日30g灰兜巴的水提液,经60天后,其免疫力增强,与服用前的同季节相比,患感冒次数明显下降,血糖下降到正常值。
Claims (3)
1.灰兜巴有效成份提取方法,其特征在于将灰兜巴浸泡水提,抽滤分离,将抽滤液经旋转蒸发仪浓缩,然后用浓度不低于80%的乙醇沉淀,采用低温超速离心分离出多糖沉淀,将沉淀出的多糖依次用无水乙醇、丙酮和乙醚各至少洗涤3次,再经真空干燥,得灰兜巴粗多糖;浸泡灰兜巴时,水温为室温,提取时水浴温度为60℃~90℃。
2.根据权利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法,其特征在于先将灰兜巴剪碎后再浸泡。
3.根据权利要求1所述灰兜巴有效成份提取方法,其特征在于沉淀多糖时,按浓缩液体积3~4倍量的无水乙醇沉淀出多糖。
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