CN1694963A - 聚－3－羟基链烷酸的凝集方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种使聚－3－羟基链烷酸粒子凝集而提高其粒度的方法。本发明是包括将聚－3－羟基链烷酸粒子悬浮于亲水性溶剂、或水与亲水性溶剂的混合液中，并在该悬浮液的沸点或沸点以下的温度下进行搅拌的聚－3－羟基链烷酸的凝集方法。

Description

聚-3-羟基链烷酸的凝集方法
技术领域
本发明涉及使聚-3-羟基链烷酸粒子凝集的方法。
背景技术
聚-3-羟基链烷酸(以下称作PHA)是大多数微生物细胞中作为能量储备物质生成、蓄积的热塑性聚酯，具有生物分解性。现在，塑料废弃物通过焚烧、掩埋进行处理，但是这些处理方法存在地球温室化和掩埋地的土地松弛等问题。因此，随着对塑料循环利用的社会意识的提高，正在进行循环利用系统化。然而，可循环利用的用途有限，实际上，作为塑料废弃处理方法，仅仅焚烧、掩埋和循环利用还不能应付，所以目前原封不动放置在自然界的塑料还很多。因此，像废弃后进入自然界的物质循环中、且分解产物无害的PHA等生物分解性塑料受到关注，并热切希望其实用化。特别是，微生物在菌体内生成蓄积的PHA由于进入自然界的碳循环过程中，所以可以预想到对于生态系统几乎没有不良影响。另外，即使在医疗领域，也可以作为不需回收的医用生物材料、药物载体的利用可能性。
微生物生成的PHA，通常以直径为1μm或1μm以下的颗粒体蓄积在菌体内，所以为了将PHA作为塑料利用时，必须进行从菌体内分离提取出PHA的工序。作为从微生物菌体分离精制PHA的已知方法，大致可分为：采用可以溶解PHA的有机溶剂从菌体提取PHA的方法，和通过破碎或溶解除去PHA以外的菌体组成成分得到PHA的方法。
在利用由有机溶剂提取的PHA的分离精制方法中，有人提出，例如，使用1，2-二氯乙烷或氯仿等含卤烃作为可溶解PHA的溶剂进行提取的方法(特开昭55-118394号、特开昭57-65193号)、也有人提出，用二噁烷(特开昭63-198991号)或丙二醇(特开平02-69187号)或四氢呋喃(特开平07-79788号)等亲水性溶剂作为可解溶PHA的溶剂进行提取的方法。然而这些方法中提取PHA的溶剂层的粘稠度极高，故未溶解的菌体残渣与含有PHA的溶剂层的分离非常困难。另外，由于溶剂的使用量庞大，所以存在成本增大等缺点。
另一方面，作为通过机械处理、化学处理、酶处理溶解并除去PHA以外的菌体构成成分获得PHA的方法，例如在J.Gen.Microbiology，19，198-209页(1958)中记载了使用次氯酸钠处理菌体悬浮液使PHA以外的菌体构成成分溶解获得PHA的方法。
在特公平04-61638号中记载有通过在100℃或100℃以上对含PHA的微生物菌体悬浮液进行热处理来破坏菌体结构，然后组合进行蛋白质分解酶处理和磷脂分解酶处理或过氧化氢处理，使PHA以外的菌体构成成分溶解，从而获得PHA的方法。
曾有人提出，用表面活性剂处理含PHA菌体之后，将从菌体放出的核酸进行过氧化氢处理和分解，然后分离PHA的方法(特表平08-502415号)。
一种提案是采用高压均化器破碎含PHA的微生物菌体作为物理处理方法来分离PHA的方法(特开平07-177894号、特开平07-31488号)。
另外，有一种提案是，向含PHA的微生物悬浮液中添加碱并加热，然后破碎细胞并分离PHA的方法(特开平07-31487号)。还有一些提案是添加碱后进行物理破碎的方法(Bioseparation，第2卷，p.95-105，(1991)，特开平07-31489号)。
另外一种方案是，将含PHA的微生物悬浮液调节到pH低于2的酸性并在50℃或50℃以上使PHA以外的菌体构成成分溶解来获得PHA的方法(特开平11-266891号)。
这样制得的PHA是以像在微生物菌体内形成的直径为1μm或1μm以下的微细颗粒本身的形状得到的。将这样的微细粒子从液体介质中分离时比粒子大的埸合更困难。
另外，由于微粒爆炸需要的能量低，所以要考虑引起粉尘爆炸的危险性、呼吸埸所在肺部蓄积等，故在处理中有必要给以注意。
因此在使PHA凝集的技术探讨中，开发了用加热、碱金属盐的凝集、浮上·凝集的方法等。
作为加热凝集的方法，有将含聚-3-羟基丁酸酯(以下称作PHB)的悬浮液加热到PHB的熔点附近而使之凝集的方法(参见Bailey，Neil A.；George，Neil；Niranjan，K.；Varley，Julie.Biochemical Engieering group，UniversityReading，“IChemE Res.Event，Eur.Conf.Young Res.Chem.Eng.”，(英国)，第二版，Institution of Chemical Engineers，1996年，第1卷，p.196-198)。另外，在特表平07-509131号公报中提出直接往悬浮在水中的PHB和D-3-羟基戊酸(D-3-hydroxyvalerate)(3HV)的共聚物(以下称作PHBV)中注入适当温度和压力的蒸汽，并在120～160℃下进行加热搅拌，由此来提高PHBV的粒度的方法。在这些方法中要注入加热·加压的蒸汽，所以必须加热到非常高的温度。因此，必须设置可以高温加热·保温、且具有耐压性的特殊装置。而且还要在相当高的温度下进行处理，因此有可能引起分子量的下降。
另外，在特开平04-264125号公报中提出，采用二氯甲烷或氯仿、三氯乙烯之类与水不混合且沸点低于100℃的有机溶剂，在含水条件下，边进行加热搅拌边从含PHB的菌体提取PHB，并将含提取的PHB的该有机相注入到热水中，使PHB以絮凝状态析出而进行回收的方法。该方法是PHB的一种晶析方法，实际上并不使PHB凝集。另外，该方法的操作非常复杂，故难以工业化。而且需要相当于干燥菌体重量10～30倍的有机溶剂，加之近年来，从环境保护的观点考虑有机卤化合物的使用有受到限制的倾向，故这些的使用是不希望的。
作为添加碱金属盐使PHA凝集的方法，已知的有采用2价阳离子进行凝集的方法(J.Biotechnol.，1998年，第65(2，3)卷，p.173-182)，特别是还有报导提出，往PHB悬浮液中添加氯化钙、硫酸镁、氢化镁、醋酸镁使之凝集而进行分离PHB的方法(特表平05-507410号)。然而，该方法中由于金属盐混入聚合物中，所以用于制品是不理想的。
发明的简述
本发明的目的在于提供，解决以往技术中的上述问题、获得既抑制PHA的分子量下降，又是高纯度、容易处理的PHA凝集体的方法。
本发明人深入研究了有利于工业上获得PHA凝集体的方法。结果发现，通过将微细的PHA粒子悬浮到亲水性溶剂、或者，水和亲水性溶剂的混合液中，并在该悬浮液的沸点或沸点以下的温度下进行搅拌，则可使PHA粒子凝集，得到纯度高、过滤性和处理性优异的PHA凝集体，于是完成了本发明。
本发明包括将PHA粒子悬浮在亲水性溶剂、或者，水和亲水性溶剂的混合液中，并通过搅拌进行凝集。使悬浮在亲水性溶剂、或者，水和亲水性溶剂的混合液中的PHA凝集的温度，要在该悬浮液的沸点沸点以下，但是，为了更有效地得到充分凝集的PHA，优选在该悬浮液的沸点下进行保温、搅拌。采用本发明的凝集方法时，可以溶解除去PHA中所含的杂质(脂质等)，故可以提高PHA的纯度。进而在本发明的方法中，未必需要在实施中特殊装置所需要的高温或高压条件。
附图的简述
图1示出PHBH凝集体的扫描型电子显微镜照片(放大倍率为2,000倍)。
图2示出1个PHBH凝集体的扫描型电子显微镜照片(放大倍率为5,000倍)。
图3示出PHBH凝集体的扫描型电子显微镜照片(放大倍率为50,000倍)。
发明的详述
本发明中所述的PHA，是羟基链烷酸的聚合物的总称。作为羟基链烷酸成分没有特别的限制，但具体地可以举出，D-3-羟基丁酸(以下称作3HB)的均聚物、或是3HB与其他的3-羟基链烷酸的共聚物、或D-3-羟基己酸(以下称作3HH)与其他3-羟基链烷酸的共聚物等。另外还可以举出，由选自3-羟基丙酸、3-羟基丁酸、3-羟基戊酸、3-羟基己酸、3-羟基庚酸、3-羟基辛酸中的至少2种单体构成的共聚物等。其中，从所得的聚酯的物性方面看，作为单体成分优选含3HH的聚合物，例如，3HB和3HH的二元共聚物(PHBH)(Macromolcules，28，4822～4828(1995))，或是3HB和D-3-羟基戊酸(以下称作3HV)以及3HH的三元共聚物(PHBVH)(特许第277757号、特开平08-289797号)。其中关于构成3HB和3HH的二元共聚物PHBH的各单体单元的组成比没有特殊的限制，优选3HH单元的组成比为1～99mol％。另外，关于构成3HB和3HV以及3HH的三元共聚物PHBVH的各单体单元的组成比没有特殊的限制，例如，优选3HB单元的含量为1～95mol％、3HV单元的含量为1～96mol％、3HH单元的含量为1～30mol％的范围。
作为本发明中使用的亲水性溶剂没有特别的限制，可以举出，例如，甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、异-丁醇、戊醇、己醇、庚醇等醇类，丙酮或丁酮等酮类，四氢呋喃、二噁烷等醚类，乙腈、丙腈等腈类，二甲基甲酰胺或乙酰胺等酰胺类，二甲基亚砜、吡啶、哌啶等。优选的是，从可除去性方面考虑，甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、1-丁醇、2-丁醇、异-丁醇、丙酮、丁酮、四氢呋喃、二噁烷、乙腈、丙腈等是合适的。从容易得到考虑，更优选甲醇、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、丁醇、丙酮等。最优选甲醇、乙醇、丙酮。
作为悬浮液中的PHA的浓度没有特殊的限制，优选1g/L或1g/L以上，更优选10g/L或10g/L以上，特别优选30g/L或30g/L以上。另外，优选500g/L或500g/L以下，更优选300g/L或300g/L以下，特别优选200g/L或200g/L以下。在PHA浓度极端高的埸合悬浮液的粘度增加，存在着实质上成为非流动性的倾向。
悬浮液，作为其介质，可以是只含亲水性溶剂的，也可以是含水和亲水性溶剂的混合液的。作为混合液中的亲水性溶剂的浓度，只要是在使用的亲水性溶剂对水的溶解度以下则没有特殊的限制，但为了获得更充分的凝集效果，优选10％v/v或10％v/v以上，更优选20％v/v或20％v/v以上。
在本发明的凝集方法中，是通过把将PHA粒子悬浮在亲水性溶剂、或者，水和亲水性溶剂的混合液中得到的悬浮液，在该悬浮液的沸点或沸点以下的温度下进行搅拌而使PHA粒子凝集。作为搅拌的装置，可举出搅拌槽等，使之发生湍流的装置，但没有特别的限制。
搅拌时的温度，优选室温或室温以上，较优选40℃或40℃以上，更优选60℃或60℃以上，但从凝集有效性的观点考虑，越接近悬浮液的沸点温度越好，而悬浮液的沸点最好。在本申请说明书中，所述悬浮液的沸点，是指悬浮液开始沸腾的温度。本发明的方法中，通常在100℃或100℃以下可以使PHA粒子凝集。而且本发明的凝集方法可以在加压下进行，但加压不是必须的，也可以在常压下进行。
凝集需要的时间随温度或浓度等条件而异，但一般在数分钟～数小时左右可以达到充分地凝集。
按照本发明的凝集方法，可以提高PHA凝集体的粒径。例如，可以得到体积平均粒径为20μm或20μm以上，优选50μm或50μm以上，更100μm或100μm以上的凝集体。上限没有特殊的限制，但可以得到体积平均粒径为1000μm或1000μm以下，优选500μm或500μm以下的凝集体。随着粒径的增大采用过滤的回收变得容易，而且在工业生产上可以减轻设备费用。
本发明的凝集方法，非常适用于对于将由微生物产生的PHA从该微生物菌体分离精制PHA。此场合，必须分解包围粒子的菌体构成物质，以便至少使PHA粒子在悬浮液中达到可以相互充分接触的程度。
最初回收的PHA粒子被可溶性的菌体构成物质和分解生成物PHA以外的其他物质污染时，特别是也可以将其再悬浮于第2液体介质中，进行通过搅拌的洗涤、化学处理等后续加工(例如采用漂白剂、如过氧化氢、或次氯酸钠的处理)，再从该新的液体介质中回收粒子。本发明的凝集方法，可以在其工艺过程的任何时刻进行。
上述微生物，只要是在细胞内蓄积PHA的微生物则没有特殊的限制。例如，可以列举产碱菌属(Alcaligenes)、ラルストニア属(Ralstonia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、芽胞杆菌属(Bacillus)、固氮菌属(Azotobacter)、诺卡氏菌属(Nocardia)、气单胞菌属(Aeromonas)的菌等。特别是，脂解产碱菌(アルカリゲネス·リポリテイカ(A.lipolytica))、广泛产碱菌(アルカリゲネス·ラトウス(A.latus))、豚鼠气单胞菌(アエロモナス·キヤビエ(A.caviae))、嗜水气单胞菌(アエロモナス·ハイドロフイラ(A.hydrophila))、ラルストニア·ユ-トロフア(R.eutropha)等的菌株，尤其是，导入了来自豚鼠气单胞菌的PHA合成酶组基因的ラルストニア·ユ-トロフア(R.eutropha)(旧名为真养产碱菌(Alcaligenes eutrophus)AC32)(根据布达佩斯条约国际保藏，国际保藏局：独立行政法人  产业技术综合研究所  特许生物保藏中心(日本茨城县つくば市东1丁目1番地中央第6)、保藏日1997年8月7日、保藏号FERM BP-6038，从原保藏的FERM P-15786号转保藏)(J.Bacteriol.，179，4821-4830页(1997))等更为优选。可以使用在适当的条件下培养这些微生物将PHA蓄积在菌体内的微生物菌体。关于其培养方法没有特别的限制，例如可以使用特开平05-93049号公报等中列举的方法。
本发明的凝集方法中使用的PHA粒子，凡是采用以往的技术项目中记载的公知方法从含PHA的菌体得到的任意的PHA粒子都可以使用。另外，作为从含PHA的菌体分离PHA粒子的优选方法，可以举出，边搅拌含PHA菌体的悬浮液，边在与物理破碎的同时进行加碱，由此将PHA以外的菌体构成物质溶解然后分离PHA的方法。由此可以以非常简便的方法且高效地从含PHA的菌体获得PHA粒子的凝集体。
所述的菌体悬浮液，指的是培养结束后的培养悬浮液本身，或者，是把用离心分离等从培养液分离出的菌体悬浮到水中的水性悬浮液。其中的菌体悬浮浓度，按干燥菌体换算优选500g/L或500g/L以下，更优选300g/L或300g/L以下。
作为物理破碎处理，只要是通过碱处理从菌体内溶出，并可以使成为粘度上升主要原因的核酸被有效地破碎，而且，能够充分地将菌体细胞壁或细胞膜或不溶性蛋白质等聚合物以外的不溶物质分散的即可，而且并不限于这些。具体地可以举出，采用超声波的破碎，采用乳化分散机、高压均化器或磨机等的破碎。
作为碱没有特别的限制，可以举出氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化钙等碱金属或碱土类金属的氢氧化物，碳酸钠、碳酸钾等碱金属碳酸盐，醋酸钠、醋酸钾等有机酸碱金属盐，硼砂等碱金属硼酸盐，磷酸三钠、磷酸氢二钠、磷酸三钾、磷酸氢二钾等碱金属磷酸盐或氨水等。其中，从适于工业生产，且从价格方面考虑，优选氢氧化钠、碳酸钠、氢氧化钾等。
添加碱时，优选通过添加该碱而控制悬浮液的pH。特别优选的是，控制在pH8～13.5，更优选pH10～13，最优选pH11～13的范围。为了控制pH，优选边测定悬浮液的pH边连续地或间断地添加碱。
作为进行物理破碎和碱处理时的温度没有特别的限制，但优选室温～50℃的范围，更优选30～40℃的范围。
图1是采用扫描电子显微镜(SEM)对本发明的一个实施方案涉及的PHA凝集体形态摄制的图。可以看到该凝集体中的一个凝集体，是由一个粒子的粒径为约0.1μm～约1.5μm的多个PHBH微粒粘结在一起形成的。这里采用扫描电子显微镜摄影求微粒粒径的方法是本领域技术人员众所周知的方法。即，以5000倍的分辨率摄制PHA凝集块的表面照片，通过从得到的照片直接读取各个微粒的直径而得到微粒的粒径。
实施发明的最佳方案
在本实施例中作为PHA使用PHBH。在本发明的实施中并不限于PHBH。
PHBH的悬浮液，是用J.Bacteriol.，179，4821-4830页(1997)中记载的方法培养导入了来自豚鼠气单胞菌的PHA合成酶组基因的R.eutropha(上述保藏号FERM BP-6038)得到含PHBH约为67wt％的菌体。向通过离心(5000rpm，10分钟)从培养液分离出的浆糊状菌体中加水制成75g干燥菌体/L的水性悬浮液，作为碱加入氢氧化钠水溶液，保持pH11.7同时进行搅拌和物理破碎，由此使PHBH以外的菌体构成物质溶解，进行离心分离(3000rpm，10分钟)得到沉淀物。再对该沉淀物进行水洗，则分离出平均分子量约为140万、3HH的摩尔分率为7％、纯度为97％的PHBH。将得到的PHBH制成20％w/v的水性悬浮液，待以后的实验中使用。
各实施例中使用的PHBH的纯度如下测定(但是，实施例3和实施例4则用后述的HPLC法测定纯度)。将PHBH的粉体10mg溶解在1ml氯仿中之后，加入0.85ml甲醇和0.15ml浓硫酸，在100℃下处理140分钟。将其冷却后，加入0.5ml硫酸铵饱和水溶液并激烈搅拌后静置。采用毛细管气相色谱分析下层部分，求出分离物中的PHBH的纯度和PHBH中的3HB、3HH的摩尔分率。
从菌体分离得到的PHBH的分子量如下进行分析：将从菌体分离得到的沉淀物10mg溶解在1ml氯仿中，然后通过过滤除去不溶物，所得溶液用安装有Shodex K805L(300×8mm，2根连接)的SHIMADZU公司制的GPC系统以氯仿作为流动相进行分析。
PHA粒子的粒径，采用日机装社制微观跟踪粒度计进行测定。由该装置测定的粒径值是作为体积平均粒径而获得。体积平均粒径，通常在表示粒径时时使用，并意味着其是由粒子的体积衡量的平均粒径。
(实施例1)
混合PHBH的20％w/v水性悬浮液40ml和乙醇160ml，在浴温90℃的搅拌槽内，加热·搅拌10分钟。然后边搅拌边将其冷却到室温。离心分离(2400rpm，15分钟)回收聚合物，测定水洗后粒径的结果示于表1。
表1
    粒度(μm)   分子量×104     纯度(％)
    无处理     8.6     144     97
    处理     199     130     97
从该结果可见，对含水和亲水性溶剂的混合液的悬浮液进行加热·搅拌时，PHA的分子量没有大的下降，PHA粒子凝集，且粒径增大。
(实施例2)
往与实施例1所用相同的PHBH悬浮液25ml中加入各种亲水性溶剂，在浴温80℃下进行加热搅拌15分钟。然后通过边搅拌边冷却到室温，和离心分离(2400rpm，15分钟)回收PHA，将其用水洗净后，再悬浮于水中并测定粒径。
表2
    有机溶剂(ml)     粒度(μm)     分子量×104
    甲醇(75)丙酮(25)丙酮(75)乙腈(25)四氢呋喃(25)     20129＞1000＞1000＞1000     141137131132127
从该结果可见，对含水和亲水性溶剂的混合液的悬浮液进行加热·搅拌时，PHA的分子量没有大的下降，PHA粒子凝集，且粒径增大。特别是采用乙腈或四氢呋喃等PHA溶解能力高的溶剂时，粒径变得更大
(实施例3)
将实施例1中使用的PHBH浆料，按照含10gPHBH的悬浮液100ml中的乙醇量分别为80ml、70ml那样调制PHBH的水性悬浮液(各悬浮液的pH分别是7.62和7.36)，在浴温90℃的搅拌槽内，进行加热搅拌。从悬浮液中适时取样，然后将其边搅拌边冷却到室温。将其离心分离(2400rpm，15分钟)回收，并再度悬浮于水中测定粒径的结果示于表3。
表3
乙醇量(mL) 加热时间(分钟)   粒径(μm) 分子量×104    纯度(％)
80     01015     8.6123211     144144135     9798.6＞99
70     01015     8.6140118     144142140     9798.9＞99
从该结果可见，对含水和亲水性溶剂的混合液的悬浮液进行加热·搅拌时，PHA的分子量没有大的下降，PHA粒子凝集，且粒径增大。另外也可见PHA的纯度上升。
(实施例4)
将按实施例1相同的方法从菌体分离出的PHBH(分子量为156万，纯度为99％)进行加热·减压干燥。将得到的8g干燥PHBH充分地悬浮在乙醇中，得到80mL的PHBH乙醇悬浮液(pH7.05)。将其与实施例1相同的方法进行加热·搅拌，冷却后悬浮于水中测定粒径的结果示于表4。
表4
加热时间(分钟)     粒径(μm)   分子量×104     纯度(％)
    0     24     156     98.8
    10     92     156     99.1
    15     125     154     ＞99
从该结果可见，对亲水性溶剂的悬浮液进行加热·搅拌时，PHA的分子量没有下降，PHA粒子凝集，且粒径增大。另外也可见PHA的纯度上升。
而且在实施例3和实施例4中，处理后的PHBH的纯度如下测定。
离心分离处理后的PHBH悬浮液除去上清液，对于回收的PHBH，加入乙醇至达到与上述PHBH悬浮液同容量洗涤2次。洗净后、对加热(50℃)减压干燥得到的PHBH的纯度用高速液相色谱进行测定。
高速液相色谱的条件：
色谱柱：资生堂カプセルパツクUG80 4.6mm×250mm
流动相：20mmol磷酸缓冲剂(pH3.0)∶甲醇＝80∶20(用磷酸1钾+磷酸调节)
流速：1.0mL/min
柱温度：40℃
而且，将约25mg聚合物、4mL甲醇、300μL甲磺酸进行混合，在100℃加热3小时，然后冷却到室温，将用10mL甲醇掺混的混合物10μL注入到高速液体色谱中。
(实施例5)
摄制采用实施例2的甲醇凝集得到的凝集体的扫描电子显微镜照片(图1～3)。由分散法对凝集体取样，用日立S-4000扫描电子显微镜以3kV加速电压观察表面的结果表明，凝集体是凝集成带亚微米级粒子的PHBH粒子，并形成不定形的2次凝集体(图1、2)。进而用日立S-5000扫描电子显微镜以1kV加速电压高倍率观察表面的结果表明，粒子和粒子之间存在接合部分(图3)。
工业实用性
按照本发明的PHA的凝集方法，通过极简便的方法，即可以抑制PHA的分子量下降，又可以得到纯度高的PHA的凝集体。按照该方法PHA可成为过滤性或处理性优异的粒径的粒子。

Claims (13)

1.聚-3-羟基链烷酸的凝集方法，该方法是凝集悬浮于液体中的聚-3-羟基链烷酸的方法，其特征在于，将聚-3-羟基链烷酸粒子悬浮于亲水性溶剂、或水与亲水性溶剂的混合液中，并在该悬浮液的沸点或沸点以下的温度下进行搅拌。
2.按照权利要求1所述的凝集方法，其中聚-3-羟基链烷酸是含选自3-羟基丙酸、3-羟基丁酸、3-羟基戊酸、3-羟基己酸、3-羟基庚酸和3-羟基辛酸中的至少2种单体的共聚物。
3.按照权利要求1所述的凝集方法，其中聚-3-羟基链烷酸是D-3-羟基己酸与其他的D-3-羟基链烷酸的共聚物。
4.按照权利要求3所述的凝集方法，其中聚-3-羟基链烷酸是D-3-羟基己酸与D-3-羟基丁酸的二元共聚物，或D-3-羟基己酸与D-3-羟基丁酸和D-3-羟基戊酸的三元共聚物。
5.按照权利要求1～4中任一项所述的凝集方法，其中聚-3-羟基链烷酸是由微生物产生，并从该微生物菌体分离精制的产物。
6.按照权利要求5所述的凝集方法，其中产生聚-3-羟基链烷酸的微生物是气单胞菌属。
7.按照权利要求6所述的凝集方法，其中产生聚-3-羟基链烷酸的微生物是豚鼠气单胞菌或嗜水气单胞菌。
8.按照权利要求5所述的凝集方法，其中产生聚-3-羟基链烷酸的微生物是导入来自豚鼠气单胞菌的聚-3-羟基链烷酸合成酶组基因的菌株。
9.按照权利要求5所述的凝集方法，其中含有聚-3-羟基链烷酸的微生物是导入来自豚鼠气单胞菌的聚-3-羟基链烷酸合成酶组基因的Ralstoniaeutropha。
10.按照权利要求1～9中任一项所述的凝集方法，其中聚-3-羟基链烷酸粒子是通过边搅拌含聚-3-羟基链烷酸菌体的悬浮液，边在与物理粉碎的同时添加碱溶解聚-3-羟基链烷酸以外的菌体构成物质并分离出聚-3-羟基链烷酸的粒子。
11.按照权利要求1～10中任一项所述的凝集方法，其中亲水性溶剂是选自醇类、酮类、腈类、酰胺类和醚类中的溶剂。
12.按照权利要求11所述的凝集方法，其中醇类是甲醇或乙醇，酮类是丙酮，腈类是乙腈，酰胺类是二甲基甲酰胺，醚类是四氢呋喃。
13.一种聚-3-羟基链烷酸的凝集体，其特征在于，该凝集体是粒径0.1μm～1.5μm的聚-3-羟基链烷酸微粒之间粘结形成的。
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