CN1665521A - 纯化淀粉酶抑制剂及用于获得该纯化淀粉酶抑制剂的新颖方法 - Google Patents

纯化淀粉酶抑制剂及用于获得该纯化淀粉酶抑制剂的新颖方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1665521A
CN1665521A CN038153939A CN03815393A CN1665521A CN 1665521 A CN1665521 A CN 1665521A CN 038153939 A CN038153939 A CN 038153939A CN 03815393 A CN03815393 A CN 03815393A CN 1665521 A CN1665521 A CN 1665521A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bean
enzyme inhibitor
starch enzyme
inhibitor according
extract
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN038153939A
Other languages
English (en)
Inventor
米切尔·什科普
迪利普·肖科希
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Pharmachem Laboratories Inc
Original Assignee
Pharmachem Laboratories Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pharmachem Laboratories Inc filed Critical Pharmachem Laboratories Inc
Publication of CN1665521A publication Critical patent/CN1665521A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04Anorexiants; Antiobesity agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4702Regulators; Modulating activity
    • C07K14/4703Inhibitors; Suppressors
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/54Improvements relating to the production of bulk chemicals using solvents, e.g. supercritical solvents or ionic liquids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明提供了一种通过优良方法获得的纯化淀粉酶抑制剂,该方法包括利用超临界二氧化碳提取经过研磨的豆子。本发明还提供了一种用于对需要减肥的哺乳动物诱发减肥的方法,该方法包括给予哺乳动物有效量的通过上述优良方法获得的淀粉酶抑制剂。本发明还提供了一种用于改善患有糖尿病的哺乳动物食后葡萄糖耐量的方法,该方法包括给予哺乳动物有效量的通过上述优良方法获得的淀粉酶抑制剂。

Description

纯化淀粉酶抑制剂及用于获得该 纯化淀粉酶抑制剂的新颖方法
背景技术
淀粉酶是一种用于分解人类饮食中碳水化合物的主要来源,也就是用于分解淀粉的酶。淀粉的消化在口中开始,其中存在于唾液中的α-淀粉酶对淀粉的糖苷键进行水解。
经过彻底咀嚼的食物到达胃部时,淀粉的平均链长已从几千个葡萄糖单位减至小于八个葡萄糖单位。胃中的酸浓度使唾液α-淀粉酶失活。在小肠中淀粉的进一步消化通过胰α-淀粉酶而继续进行,该消化过程类似于唾液α-淀粉酶的消化。
例如,通过抑制淀粉的消化而降低碳水化合物的吸收,在减肥和糖尿病领域是一种非常具有前景的策略。从饮食观点来看,由于淀粉是一种相对来说非必需的营养素,它提供的是几乎不具益处的卡路里,因此将淀粉的分解作为目标是很重要的。
淀粉酶抑制剂可从不同来源获得,包括植物白蛋白和豆类植物。当前,将豆类的提取物作为淀粉酶抑制剂的来源被利用得最多。
当前用于提纯淀粉酶抑制剂的方法,包括热处理和/或使用溶剂法,其中淀粉酶抑制剂的提纯包括浓缩和干燥豆子。参见Cestaro等人的美国专利第6,340,699号。然而,热处理和/或使用溶剂法具有许多缺点。例如,在高温条件下,来自豆类的淀粉酶抑制剂的某些热敏性组分可能发生降解。其结果是,淀粉酶抑制剂显示出稳定性和效力的下降。
此外,关于在这种提纯处理过程中溶剂的使用,存在环保及健康方面的顾虑。例如,使用溶剂从豆类中提取淀粉酶抑制剂导致有毒溶剂对提取物的残留污染。另外,在提纯处理过程中所需的大量溶剂的处理是一个主要的环境问题。
通过传统的加热法和溶剂法从豆类提取物中获得的淀粉酶抑制剂是未经提纯的,也就是说,它们包含杂质和/或污染物。这类杂质的实例为溶剂残渣和豆类的无活性(inactive)组分。
通常将淀粉酶抑制剂添加到消费用的食品中,例如,粉末饮料混合物、精制混合饮料、快餐等。豆类提取物中残留的杂质和/或污染物与不良味道相关联,使得这些食品引不起食欲。
最近的研究显示,目前在市场上可以买到的淀粉酶抑制剂在体外非常有效,但在体内却没用效果。已提出的一些理由为,目前市场上可买到的淀粉酶抑制剂在胃肠道中由于pH而不稳定、在水中不可溶、和/或由于溶剂和热处理的使用而失去效力。参见,Layer,P.et al.Gastroenterology 1985;88(6):1895-1902。
因此,考虑到当前淀粉酶抑制剂中存在的上述缺陷,需要一种从豆类获得的更为纯净且有效的淀粉酶抑制剂,以及一种用于获得该淀粉酶抑制剂的更为完善的方法。
发明内容
通过提供一种由优良方法获得的淀粉酶抑制剂,本发明可满足上述这些及其它目的。该方法包括将白菜豆(白芸豆,white kidneybeans)进行研磨,然后在真空压力条件下,利用超临界二氧化碳对经过研磨的豆子进行提取以除去杂质,同时留下豆块(bean mass)。然后用去离子水保温该豆块,以获得包含第一固体组分和第一液体组分的第一豆悬浮液。将第一固体组分从第一豆悬浮液中分离出来,同时保留第一液体组分。随后用去离子水保温第一固体组分,以获得包含第二固体组分和第二液体组分的第二豆悬浮液。将第二固体组分从第二豆悬浮液中分离出来,同时保留第二液体组分。然后使第一和第二液体组分混合以获得最终液体溶液。对最终液体溶液进行热交换而获得浓缩豆提取物。对浓缩豆提取物进行干燥,即可获得纯化淀粉酶抑制剂。
本发明还提供了一种用于对需要减肥的哺乳动物诱发减肥的方法,包括给予哺乳动物有效量的通过上述优良方法所获得的淀粉酶抑制剂。
本发明还提供了一种用于改善患有糖尿病的哺乳动物的食后葡萄糖耐量的方法,包括给予哺乳动物有效量的通过上述优良方法所获得的淀粉酶抑制剂。
具体实施方式
申请人惊奇地发现,通过本发明的新颖方法可获得纯化淀粉酶抑制剂。
淀粉酶抑制剂是指能够抑制用于分解碳水化合物的酶,即,抑制淀粉酶的糖蛋白。本发明的淀粉酶从豆类中获得。适合用于本发明的豆类属于菜豆(Phaseolus vulgaris)科,例如,菜豆。优选地,该淀粉酶抑制剂从白菜豆获得。从白菜豆获得的淀粉酶抑制剂有时被称为“菜豆素”。优选地,豆子是非转基因豆子。这些豆子通常为体积较小、完好的豆子。
本发明的淀粉酶抑制剂优于其它的淀粉酶抑制剂,这是因为它比通过传统的提取方法,即加热法和化学法所获得的淀粉酶抑制剂具有更高的纯度。由于其高纯度,该淀粉酶抑制剂的体外和体内稳定性和效力比现有技术的淀粉酶抑制剂高。
本发明的淀粉酶抑制剂在升高的温度下,例如,120-200°F条件下能够保持稳定。例如,这种热稳定性使得该淀粉酶抑制剂能够应用在烹制的食品中,而不会损失有益的淀粉阻断(starch-blocking)效果。
该淀粉酶抑制剂还能在极端pH值情况下保持完好。例如,胃的pH约为1-2。本发明的淀粉酶抑制剂在这种pH条件下仍能保持大体完好。
此外,该淀粉酶抑制剂比通过传统的加热/溶剂法得到的淀粉酶抑制剂更有效力。在不受理论束缚的前提下,本发明提出通过避免化学溶剂的使用,淀粉酶抑制剂很重要的三级结构不会被破坏。
根据本发明,对白菜豆进行研磨,以生产出经过粗略研磨的豆子。通过本领域技术人员所已知的方法对豆子进行研磨。例如,豆子可通过手工或机械装置进行研磨。手工研磨法的实例包括研钵和研棒。机械研磨法的实例包括研磨机,例如由Robinson制造的Fitzpatrick Mill。
对经过粗略研磨的豆子进行提取以除去杂质,这将在下文进行论述。提取步骤涉及到超临界二氧化碳的使用。二氧化碳在通常条件下,即,在环境温度及压力下以气态存在。CO2的临界温度(Tc)为31.06℃(88°F),而临界压力(Pc)为73.8巴。当CO2的温度和压力均高于其Tc和Pc时,它处于超临界状态。在超临界状态下,CO2实质上是一种高密度压缩液体。
将经过粗略研磨的豆子放入提取器(即,萃取器),并在真空压力下利用超临界CO2进行提取。真空压力通常指的是低于大气压的任意压力。在一个实施例中,在大约120-200°F的温度下提取约2小时。优选地,提取步骤在约135-160°F温度下进行约2小时。更为优选地,提取步骤在约145°F温度下进行约2小时。
在提取步骤过程中,超临界CO2液体流过经过研磨的豆子,溶解并提取出豆子中的杂质,从而形成超临界溶液。这样,该超临界溶液包含豆子中的杂质。这些杂质通常为豆子中的非极性组分,例如,包括脂质、油、脂肪、以及香料。
在提取完成后,通过压力值降低将超临界溶液从提取器中除去。超临界液体的压力和溶解能力降低,从而使得豆子中的杂质在分离器中沉淀下来。对本发明而言,残留产物基本不合杂质,将其称作豆块。该豆块包含糖蛋白,也就是淀粉酶抑制剂。
然后将豆块在去离子水中进行保温(温育)以形成第一豆悬浮液。去离子水通常为已除去离子的水。去离子水的温度优选地约为120-160°F,更优选地,去离子水温度约为140°F。豆块在去离子水中保温的时间最长可达约6小时,更优选地为约4小时。在保温(incubation)过程中,将糖蛋白从豆块中提取出来。
如上所述,在经过保温后,获得第一豆悬浮液。该第一豆悬浮液包含第一固体组分和第一液体组分。第一液体组分包含去离子水和来自豆块的糖蛋白(即淀粉酶抑制剂)。第一固体组分包含所有残留的未提取组分,例如,其包括各种杂质。然后,将第一固体组分从第一液体组分中分离出来。第一液体组分保留在分离容器中。
分离可通过本领域已知的任意方法来完成。例如,可通过离心法或过滤法来实现分离。优选采用压滤机进行过滤。例如,在过滤过程中,将第一豆悬浮液倾倒在多孔材料(例如,过滤器)上,如滤纸。该过滤器使得液体组分通过过滤器,并阻止固体组分的通过。
离心法利用离心力来促进固体和液体的分离。例如,在离心过程中,将第一豆悬浮液放入管中。然后将该管放入离心机中,并施加离心力。结果,固体组分在管的底部聚集(即,颗粒状物),同时液体组分保留在管的上部(即,上层清液)。然后将液体组分倒出,并保留在分离容器中。
一旦第一固体组分与第一液体组分分离,如上所述,就将第一固体组分在去离子水中进行保温,以形成第二豆悬浮液。该第二豆悬浮液包含第二液体组分和第二固体组分。第二液体组分包含去离子水和来自第一固体组分的糖蛋白(即,淀粉酶抑制剂)。第二固体组分包含所有残留的未提取成分,例如,其包括各种杂质。然后利用包括上面论述的方法的任意方法,将第二固体组分从第二液体组分中分离出来。第二固体组分保留在分离容器中。
然后将第一液体组分和第二液体组分混合而获得最终液体溶液。然后对该最终液体溶液进行热交换。热交换是一种蒸馏过程,该过程中除去水分。热交换优选地在真空压力条件下进行。适于热交换的装置为本领域所已知。
热交换步骤的结果是,将水分从最终液体溶液中除去而获得浓缩豆提取物。该浓缩豆提取物可包含大约25-50%的水分。更优选地,该浓缩豆提取物包含大约35%的水分。
然后将浓缩豆提取物进行干燥。对最终豆浓缩物的干燥可通过本领域已知的任意方法实现。例如,在一个实施例中,干燥步骤通过冷冻干燥法进行,即冷冻干燥。冷冻干燥法通过升华和解吸从浓缩豆提取物中除去残留的水分。
在冷冻干燥过程中,将浓缩豆提取物装入冷冻管中输送到冷冻干燥器以进行干燥。冷冻干燥器的干燥室中的冷凝管收集从浓缩豆提取物中除去的水分,同时真空系统减压以促进干燥过程。冷冻干燥过程完成之后,即可获得纯化淀粉酶抑制剂。
在另一实施例中,干燥步骤通过利用喷雾干燥器来进行。喷雾干燥器由进料泵、喷雾器、空气加热器、空气分配器、干燥室、及用于排放清洁空气和粉末回收的系统组成。空气或气体可用在喷雾干燥器中。可用在喷雾干燥器中的热气的实例包括但不限于氮气。
例如,喷雾干燥器法中采用的喷嘴可以是离心轮喷嘴或高压喷嘴。用于喷雾干燥的热空气的输入(进口)温度约为400-500°F,优选约为440°F。用于喷雾干燥的热空气的输出(出口)温度约为150-250°F,优选地约为210°F。在喷雾干燥过程中,将浓缩豆提取物喷射到热气中,从而将浓缩豆提取物转化成自由流动的颗粒状干燥豆提取物。
经过喷雾干燥以后,使经过干燥的豆提取物再水化,以获得再水化的豆提取物。再水化可通过将水加入到经过干燥的豆提取物中而实现。优选地,加入的水为去离子水。在一个优选实施例中,大约40-70%的经过干燥的豆提取物被再水化。更优选地,大约60%的经过干燥的豆提取物被再水化。
然后对经过再水化的豆提取物进行冷冻干燥,即,如上所述的冷冻干燥。经过再水化的豆提取物进行冷冻干燥后即可获得纯化的淀粉酶抑制剂。
淀粉酶抑制剂的主要功能是引起暂时的、安全的、无副作用的食用淀粉的吸收障碍。在不受理论束缚的前提下,我们相信,本发明的淀粉酶抑制剂能够束缚并中和α-淀粉酶。通过中和α-淀粉酶,碳水化合物的吸收被抑制。正如下面将要论述的,该淀粉酶抑制剂对于减肥很有效果。
如上所述,淀粉酶抑制剂是一种天然产生的淀粉酶,用于淀粉的分解。例如,在人体中,食用淀粉必须分解为较小的组分,例如葡萄糖,以被人体所利用。被消耗、但未被分解成为较小组分(例如,葡萄糖)的淀粉无法在体内进行利用。因此,通过中和身体中的α-淀粉酶,人体利用淀粉的能力受到阻碍,最终将未被利用的淀粉进行排泄。
淀粉的消化或者分解成为葡萄糖引发了胰岛素的生成。因此,吃富含淀粉膳食可能导致胰岛素的异常增长。过量的胰岛素将引发饥饿和嗜欲(cravings),从而产生恶性循环。结束这种循环的一条途径是减少或削减淀粉的摄取量。这种方法对于长期减肥具有很少或甚至不具效果。
在本发明的一个实施例中,提供了一种用于对需要减肥的哺乳动物诱发减肥的方法。该方法包括给予哺乳动物有效量本发明的淀粉酶抑制剂。
例如,需要减肥的哺乳动物是任何一种体重对其健康有害的哺乳动物。需要减肥的哺乳动物的另一个实例是由于超重而对其外表不满意的哺乳动物。哺乳动物的超重是主观上的。需要减肥的哺乳动物的一些实例包括但不限于患有糖尿病和/或肥胖症的哺乳动物。
在不受理论束缚的前提下,我们相信,本发明的高纯度淀粉酶抑制剂可通过抑制淀粉的吸收而诱发减肥(体重减轻)。此外,该淀粉酶抑制剂可控制与碳水化合物吸收相关联的嗜欲。通过抑制食用淀粉的吸收,并控制与碳水化合物吸收相关联的嗜欲,该淀粉酶抑制剂对于诱发减肥很有效果。
本发明所要求保护的淀粉酶抑制剂还可用于患有匍萄糖利用缺陷的哺乳动物,例如,患有糖尿病的哺乳动物。葡萄糖利用缺陷可能由胰腺产生的胰岛素缺乏,或者由产生用来利用葡萄糖的胰岛素的无效性而引起。如下文将要论述的,胰岛素对于将葡萄糖从血液输送到细胞中是必需的。
胰岛素是一种由人体自发生成的激素,它是控制血糖水平的关键。循环的血液携带有向细胞提供养料的葡萄糖。使葡萄糖进入细胞中需要胰岛素,其在胰腺中由β细胞生成。一般而言,胰腺产生的胰岛素刚好足够能够满足人体的需要。这与高血糖症的情况不同,例如下文将要论述的糖尿病(DM)。
对于糖尿病而言,胰岛素或者不存在,或者供给不足,或者无法有效发挥功效。如果葡萄糖无法进入到细胞中,它将在血液中聚集,从而使得血糖增加。将吃饭后血液中的葡萄糖量称为食后葡萄糖水平。
例如,在没有患糖尿病的人的体内,血浆葡萄糖水平在餐后约1小时达到最高,并在餐后2-3小时内回到饭前水平。与此相反的是,对于那些患有糖尿病的人来说,与那些没有患糖尿病的个体相比,食后葡萄糖水平增加到更高的水平,并且维持时间更长。食后葡萄糖耐量的缺陷可导致例如心血管疾病的发生。
患有糖尿病的个体通常需要摄取胰岛素来帮助将血糖吸收到细胞中。通常来说,在享用一顿富含碳水化合物的食物后,糖尿病患者的胰岛素需求可显著增加,以处理升高的血糖水平。
因此,通过抑制食用淀粉的吸收,本发明的淀粉酶抑制剂将有效地降低患糖尿病的哺乳动物的胰岛素需求。此外,本发明的淀粉酶抑制剂还将降低血液中的食后葡萄糖水平,从而提高了食后葡萄糖的耐量。因此,在本发明的另一实施例中,提供了一种用于改善患糖尿病的哺乳动物的食后葡萄糖耐量的方法。
优选地,全身性地给予淀粉酶抑制剂。全身给药可以是肠内的或胃肠外的。优选为肠内给药。例如,该淀粉酶抑制剂很容易口服给药。可以采用液体或固体(例如,片剂、胶囊)剂型。剂型可以包括药用赋形剂、佐剂、稀释剂、或载体。
该淀粉酶抑制剂还能以可咀嚼的片剂颗粒、有糖或无糖、粉末饮料混合物、口香糖、和焙烧产品的形式给药。在优选实施例中,由于淀粉酶抑制剂在焙烧温度下很稳定,因此它能有效地以诸如薄烤饼、华夫饼干、面包、饼干或曲奇饼的焙烧混合物的形式给药。
根据本发明,该淀粉酶抑制剂的有效量为本领域技术人员所已知的、能够有效地抑制食用淀粉的分解的任意量。优选地,给予哺乳动物有效量的淀粉酶抑制剂可在吃富含淀粉食物之前、过程之中、或之后立即进行。例如,该淀粉酶抑制剂的典型餐前剂量约为500mg-1,500mg。
根据本发明,哺乳动物包括,例如,人、以及诸如狗和猫这样的宠物、诸如大鼠和小鼠这样的实验动物、以及诸如马和奶牛这样的饲养动物。最优选的是人。
实施例1
利用喷雾干燥法的淀粉酶抑制剂提纯
1、研磨
对全部经过干燥的非转基因生物体(non-GMO)菜豆检查其清洁度(cleanliness)。经过对豆子的质量控制确认后,将1000g经过干燥的豆子放入Fitzpatrick研磨机中。该研磨机中采用的是A#4筛(过程研磨尺寸)。连续进行研磨,直至豆子达到合适的尺寸。
2、提取
将经过粗略研磨的豆子放入到提取管中,然后利用超临界CO2进行提取。提取过程在真空压力、约145°F温度条件下进行约2小时。超临界CO2从经过粗略研磨的豆子中除去杂质(例如,脂质、油、脂肪、和香料等),同时留下豆块。
然后降低提取管中的压力。压力的降低使得豆子中的杂质从超临界溶液中沉淀出来,并进入到分离器中。
3、保温
在140°F温度下,将去离子水加入豆块,并进行保温约4小时。在保温过程中,将糖蛋白从豆块中提取出来。获得第一豆悬浮液。
4、分离
然后利用压滤机对第一豆悬浮液进行过滤,以将固体组分从该豆悬浮液中分离出来。第一液体组分(含糖蛋白)保留在分离容器中。然后,与上述方法一样,对第一固体组分在去离子水中进行保温,以形成第二豆悬浮液。然后,与上述过程一样,对第二豆悬浮液进行过滤,以将第二固体组分从第二液体组分中分离出来。然后将第一和第二液体组分混合以获得最终液体溶液。
5、热交换
对最终液体溶液进行热交换以除去水分,从而获得浓缩豆提取物。
6、干燥
然后对浓缩豆提取物进行喷雾干燥以除去残留的水分。喷雾干燥过程中使用的是高压喷嘴。将浓缩豆提取物放入热空气中,其输入温度为440°F,输出温度为210°F,直至形成干燥的豆提取物。
利用去离子水对大约40%(w/w)的干燥豆提取物进行再水化。然后对经过再水化的豆提取物进行冷冻干燥,以获得纯化淀粉酶抑制剂。由1000g干燥豆子,可获得大约120g的纯化淀粉酶抑制剂。
实施例2
利用冷冻干燥法的淀粉酶抑制剂提纯
1、研磨
对全部经过干燥的非转基因生物体(non-GMO)菜豆检查其清洁度。经过对豆子的质量控制确认后,将1000g经过干燥的豆子放入Fitzpatrick研磨机中。该研磨机中采用的是A#4筛(过程研磨尺寸)。连续进行研磨直至豆子达到合适的尺寸。
2、提取
将经过粗略研磨的豆子放入到提取管中,然后利用超临界CO2进行提取。提取过程在真空压力、约145°F温度条件下进行约2小时。超临界CO2从经过粗略研磨的豆子中除去杂质(例如,脂质、油、脂肪、和香料等),同时留下豆块。
然后降低提取管中的压力。压力的降低使得豆子中的杂质从超临界溶液中沉淀出来,并进入到分离器中。
3、保温
在140°F温度下,将去离子水加入豆块,并进行保温约4小时。在保温过程中,糖蛋白从豆块中提取出来。获得第一豆悬浮液。
4、分离
然后利用压滤机对第一豆悬浮液进行过滤,以将固体组分从该豆悬浮液中分离出来。第一液体组分(含糖蛋白)保留在分离容器中。然后,与上述方法一样,对第一固体组分在去离子水中进行保温,以形成第二豆悬浮液。然后,与上述过程一样,对第二豆悬浮液进行过滤,以将第二固体组分从第二液体组分中分离出来。然后将第一和第二液体组分混合以获得最终液体溶液。
5、热交换
对最终液体溶液进行热交换以除去水分,从而获得浓缩豆提取物。
6、干燥
然后对浓缩豆提取物进行冷冻干燥以获得纯化淀粉酶抑制剂。由初始的1000g豆子,可获得大约120g的纯化淀粉酶抑制剂。

Claims (14)

1.一种通过包括以下步骤的方法获得的纯化淀粉酶抑制剂:
(i)研磨白菜豆以生成经过粗略研磨的豆子;
(ii)通过将所述豆子放入超临界二氧化碳,在真空压力下,从所述经过粗略研磨的豆子中提取杂质,以获得豆块;
(iii)在去离子水中保温所述豆块,以获得包含第一固体组分和第一液体组分的第一豆悬浮液;
(iv)将所述第一固体组分从所述豆悬浮液中分离出来,并且保留所述第一液体组分;
(v)在去离子水中保温所述第一固体组分,以获得包含第二固体组分和第二液体组分的第二豆悬浮液;
(vi)将所述第二固体组分从所述第二豆悬浮液中分离出来,并且保留所述第二液体组分;
(vii)将所述第一液体组分与所述第二液体组分混合以获得最终液体溶液;
(viii)将所述最终液体溶液进行热交换,以获得浓缩豆提取物;
(ix)干燥所述浓缩豆提取物;
由此获得纯化淀粉酶抑制剂。
2.根据权利要求1所述的纯化淀粉酶抑制剂,其中,所述方法中的步骤(iv)和(vi)的分离由通过压滤机的过滤来完成。
3.根据权利要求1所述的纯化淀粉酶抑制剂,其中,所述方法的步骤(iv)和(vi)的分离通过离心法来完成。
4.根据权利要求1所述的纯化淀粉酶抑制剂,其中,所述方法的步骤(ix)的干燥通过喷雾干燥所述浓缩豆提取物以形成干燥豆提取物来完成,并且其中,所述方法还包括以下步骤:
(x)对所述干燥豆提取物进行再水化,以形成经过再水化的豆提取物;以及
(xi)对所述经过再水化的豆提取物进行冷冻干燥。
5.根据权利要求1所述的纯化淀粉酶抑制剂,其中,所述方法的步骤(ix)的干燥通过冷冻干燥来完成。
6.根据权利要求1所述的纯化淀粉酶抑制剂,其中,所述方法的步骤(ii)的提取在约120-200°F温度下进行约2小时。
7.根据权利要求1所述的纯化淀粉酶抑制剂,其中,所述方法的步骤(ii)的提取在约135-160°F温度下进行约2小时。
8.根据权利要求1所述的纯化淀粉酶抑制剂,其中,所述方法的步骤(ii)的提取在约145°F温度下进行约2小时。
9.根据权利要求4所述的纯化淀粉酶抑制剂,其中,对大约40-70%的步骤(x)的所述干燥豆提取物进行再水化。
10.根据权利要求4所述的纯化淀粉酶抑制剂,其中,对大约60%的步骤(x)的所述干燥豆提取物进行再水化。
11.一种用于对需要减肥的哺乳动物诱发减肥的方法,其包括给予所述哺乳动物有效量的根据权利要求1所述的纯化淀粉酶抑制剂。
12.根据权利要求11所述的方法,其中,所述哺乳动物为人。
13.一种用于改善需要改善食后葡萄糖耐量的哺乳动物食后葡萄糖耐量的方法,包括给予所述哺乳动物有效量的根据权利要求1所述的纯化淀粉酶抑制剂。
14.根据权利要求13所述的方法,其中,所述哺乳动物为人。
CN038153939A 2002-06-28 2003-06-27 纯化淀粉酶抑制剂及用于获得该纯化淀粉酶抑制剂的新颖方法 Pending CN1665521A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US39267602P 2002-06-28 2002-06-28
US60/392,676 2002-06-28

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN1665521A true CN1665521A (zh) 2005-09-07

Family

ID=30000916

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN038153939A Pending CN1665521A (zh) 2002-06-28 2003-06-27 纯化淀粉酶抑制剂及用于获得该纯化淀粉酶抑制剂的新颖方法

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20060147565A1 (zh)
EP (1) EP1551431A4 (zh)
JP (1) JP2005535643A (zh)
CN (1) CN1665521A (zh)
AU (1) AU2003279636A1 (zh)
CA (1) CA2490079A1 (zh)
MX (1) MXPA05000092A (zh)
WO (1) WO2004002239A2 (zh)

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100349614C (zh) * 2005-10-21 2007-11-21 南京工业大学 一种含α-淀粉酶抑制剂的固体混合物及其制备工艺和在制药中的应用
CN101514227B (zh) * 2009-03-20 2011-08-17 云南天保桦生物资源开发有限公司 淀粉酶抑制蛋白提取工艺
CN101555275B (zh) * 2009-05-08 2011-09-28 广东省食品工业研究所 一种利用生物酶法制备α-淀粉酶抑制剂的方法
CN103920140A (zh) * 2014-05-04 2014-07-16 云南康洲生物科技有限公司 一种人用降糖减肥降脂复方制剂
CN103919141A (zh) * 2013-01-15 2014-07-16 宋济民 花豆种子萃取物及其制备方法与用途
CN104770737A (zh) * 2015-03-25 2015-07-15 陕西鑫茂生物科技有限公司 白芸豆α-淀粉酶抑制剂的提取分离方法
CN105008392A (zh) * 2013-03-13 2015-10-28 阳光喜悦饮料公司 用于增强来自菜豆提取物的淀粉酶抑制效力的方法
CN106310707A (zh) * 2016-08-31 2017-01-11 青岛佰福得科技有限公司 一种菜豆素的提取方法

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITMI20040619A1 (it) * 2004-03-30 2004-06-30 Consiglio Nazionale Ricerche Estratto purificato di inibitore dell'alfa-amilasi da fagioli essenzialmente privi di fitoemoagglutinina procedimento di estrazione e composizioni che lo contengono
ITMI20052450A1 (it) * 2005-12-22 2007-06-23 Indena Spa Estratti di phaseolus vulgaris loro uso e formulazioni che li contengono
ITMI20052451A1 (it) * 2005-12-22 2007-06-23 Indena Spa Estratti di phaseolus vulgaris loro uso e formulazioni che li contengono
EP1967200A1 (en) * 2007-03-07 2008-09-10 Indena S.P.A. Formulations of alpha-amylase inhibitors of P. vulgaris with alpha-glucosidade inhibitores of S. oblonga or S. reticulata useful in the treatment of diabetes and obesity
WO2009025338A1 (ja) * 2007-08-21 2009-02-26 Sumco Corporation Igbt用のシリコン単結晶ウェーハ及びigbt用のシリコン単結晶ウェーハの製造方法
WO2012158048A1 (en) * 2011-05-16 2012-11-22 Vital Food Processors Limited A dietary supplement
CN111560057B (zh) * 2020-05-29 2021-07-06 颜如玉医药科技有限公司 一种从白芸豆中提取α-淀粉酶抑制剂的方法

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3950319A (en) * 1970-01-29 1976-04-13 Farbenfabriken Bayer Aktiengesellschaft Amylase inhibitor from wheat gluten using alcohol
US4493854A (en) * 1983-09-20 1985-01-15 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Production of defatted soybean products by supercritical fluid extraction
US4910297A (en) * 1987-06-29 1990-03-20 Abi Biotechnology Inc. Alpha-amylase inhibitor
JPH09194392A (ja) * 1996-01-18 1997-07-29 Nisshin Flour Milling Co Ltd アミラーゼ阻害物質
US6294194B1 (en) * 1997-10-14 2001-09-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Method for extraction and reaction using supercritical fluids
JP2002535288A (ja) * 1999-01-22 2002-10-22 ウンツァ ディ マリア カルメラ マラッツィータ エッセ.ア.エッセ. リポタンパク質複合体およびそれらを含む組成物
US6117431A (en) * 1999-12-03 2000-09-12 Pharmline Inc. Method for obtaining an extract from ginkgo biloba leaves
US6797287B2 (en) * 2001-09-25 2004-09-28 Pharmachem Laboratories, Inc. Phaseolamin compositions and methods for using the same
US20030082168A1 (en) * 2001-10-22 2003-05-01 Inna Yegorova Compositions and methods for facilitating weight loss

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100349614C (zh) * 2005-10-21 2007-11-21 南京工业大学 一种含α-淀粉酶抑制剂的固体混合物及其制备工艺和在制药中的应用
CN101514227B (zh) * 2009-03-20 2011-08-17 云南天保桦生物资源开发有限公司 淀粉酶抑制蛋白提取工艺
CN101555275B (zh) * 2009-05-08 2011-09-28 广东省食品工业研究所 一种利用生物酶法制备α-淀粉酶抑制剂的方法
CN103919141A (zh) * 2013-01-15 2014-07-16 宋济民 花豆种子萃取物及其制备方法与用途
CN105008392A (zh) * 2013-03-13 2015-10-28 阳光喜悦饮料公司 用于增强来自菜豆提取物的淀粉酶抑制效力的方法
CN103920140A (zh) * 2014-05-04 2014-07-16 云南康洲生物科技有限公司 一种人用降糖减肥降脂复方制剂
CN103920140B (zh) * 2014-05-04 2016-06-08 云南康洲生物科技有限公司 一种人用降糖减肥降脂复方制剂
CN104770737A (zh) * 2015-03-25 2015-07-15 陕西鑫茂生物科技有限公司 白芸豆α-淀粉酶抑制剂的提取分离方法
CN106310707A (zh) * 2016-08-31 2017-01-11 青岛佰福得科技有限公司 一种菜豆素的提取方法
CN106310707B (zh) * 2016-08-31 2018-09-18 青岛佰福得科技有限公司 一种菜豆素的提取方法

Also Published As

Publication number Publication date
AU2003279636A1 (en) 2004-01-19
US20060147565A1 (en) 2006-07-06
WO2004002239A2 (en) 2004-01-08
JP2005535643A (ja) 2005-11-24
MXPA05000092A (es) 2005-09-30
WO2004002239A3 (en) 2004-03-18
CA2490079A1 (en) 2004-01-08
EP1551431A2 (en) 2005-07-13
EP1551431A4 (en) 2005-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1665521A (zh) 纯化淀粉酶抑制剂及用于获得该纯化淀粉酶抑制剂的新颖方法
CN1163157C (zh) 新型菊粉组分、其制备方法以及含有所述菊粉组分的食品
CN100336832C (zh) 虾夷扇贝多糖提取工艺
JPH07213252A (ja) γ−アミノ酪酸を富化した食品素材及びγ−アミノ酪酸の製造法
CN1043722C (zh) 透明蜂王浆溶液制造方法
CN1202749C (zh) 鲍鱼食品原液的制备方法
CN102838686A (zh) 一种制备高纯度姬松茸多糖的方法
CN1531863A (zh) 一种以菊芋或菊苣为原料制造菊粉的新方法
JPH11151072A (ja) γ−アミノ酪酸を富化した大豆食品素材
CN1267019C (zh) 鲍鱼食品及其制备方法
CN1747739A (zh) 羽扇豆球蛋白用于治疗ⅱ型糖尿病的用途
KR101058964B1 (ko) 마늘과 호유실 추출물을 포함한 오리사료의 제조방법
JP3806693B2 (ja) 大豆加工副産物からピニトールを高収率で回収する方法
CN1864545A (zh) 青稞sod的制备以及含青稞sod的调理食品
JP2001269163A (ja) アガリクス菌糸体粉末、アガリクス菌糸体β―D―グルカン類含有粉末、及びこれらの製造方法
CN1270640C (zh) 鲍鱼食品及其制备方法
CN1287691C (zh) 鲍鱼食品及其制备方法
WO2022050171A1 (ja) アワビ又はウニの食欲増進剤、アワビ又はウニにおけるニューロペプチドyの合成促進剤、及びこれらの製造方法
KR101058956B1 (ko) 마늘과 호유실 추출물을 포함한 소 사료의 제조방법
KR102614780B1 (ko) 인삼열매 추출물, 건조효모 및 밀크씨슬 추출물을 포함하는 숙취해소 및 간기능개선용 조성물
KR100620080B1 (ko) 대두가공 부산물로부터 피니톨의 회수방법
KR101059020B1 (ko) 마늘과 호유실 추출물을 포함한 양어용 사료의 제조방법
CN107699599B (zh) 一种具有降血压和降血脂作用的驼血多肽
CN1045208C (zh) 异戊他定化合物、其制备方法及生产该化合物的微生物
CN1089656A (zh) 新的α-淀粉酶抑制剂及其制备方法与应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication