CN1309556A - 生物可降解的缓释藻酸酯凝胶 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及使用生物可降解藻酸酯缓释凝胶或颗粒的缓释制剂及其制备方法。

Description

生物可降解的缓释藻酸酯凝胶
                      技术领域
本发明涉及使用生物可降解的藻酸酯凝胶珠和/或缓释凝胶的缓释制剂及其制备方法。
                      发明背景
随着基因和细胞工程技术的进展，在使用蛋白作为治疗药物的领域内，重组蛋白的可用性已有了很大发展。用药物蛋白治疗的许多疾病或病症需要缓释的蛋白水平来获得最有效治疗效果。然而，因为大多数蛋白药物通常具有短的生物半衰期，所以需要频繁给药。这些反复注射是以不同时间间隔进行的，造成了波动的药物水平，给患者带来了严重的身体和经济负担。因为许多病症对控制水平的药物有更好反应，所以需要控制药物的释放以提供更长时间的持续释放。这种缓释药物不仅能给患者提供增强的预防、治疗或诊断作用，而且还能降低给药频率以及整个成本。
在给药之间维持人或动物中药物水平的通常尝试包括使用生物可降解的聚合物作为基质来控制药物释放。例如，第1388580号英国专利公开了水凝胶在缓释胰岛素中的应用。US4789550公开了多熔素包衣的藻酸酯微胶囊在递送蛋白中的应用，其中是通过将活细胞封入胶囊而实现的。缓释尝试还使用了以具有相反电荷的离子聚合物环绕的阴离子或阳离子组合物来包封能产生生物活性组分的细胞；US4,744,933。同样，还有人公开了使用多包衣阴离子或阳离子交联聚合物来实现控释；US4690682和US4789516。此外，其它尝试公开了单独使用藻酸酯、或使用用生物可降解聚合物包衣的藻酸酯来控制多肽组合物或其阳离子沉淀物的释放；PCT WO96/00081、PCT WO95/29664和PCT WO96/03116。
然而，这些尝试所提供的手段不足以实现所需蛋白药物的持续释放。人们普遍知道，一些生物可降解聚合物例如聚丙交酯-乙交酯共聚物(polylactide co-glycolide)在体内条件下使用时会表现出高的初始爆发性药物释放；Johnson,O.等人，Nature Med.,2(7):795(1996)。此外，人们普遍知道，当暴露于包封剂时，以常规缓释剂型使用的蛋白可能会变性并失去其生物活性。这种制剂使用了对所选蛋白可能有有害作用的有机溶剂。再者，如下所述，单独使用藻酸酯不能提供有效治疗结果所需的理想的蛋白控制释放。
一般来说，藻酸酯是众所周知的、天然的阴离子多糖，它由1,4-相连的-β-D-甘露糖醛酸和α-L-古洛糖醛酸组成；Smidsrod,O.等人，Trends in Biotechnol.,8:71-78(1990)；Aslani,P.等人，J.Microencapsulation,13(5):601-614(1996)。藻酸酯的组成通常从70％甘露糖醛酸和30％古洛糖醛酸到30％甘露糖醛酸和70％古洛糖醛酸变化；上述Smidsrod的文献，藻酸不溶于水，然而其与单价离子形成的盐例如钠盐、钾盐和铵盐是溶于水的；McDowell,R.H.,“藻酸盐特征”(London,Alginate Industries Ltd,4th edition 1977)。已知多价阳离子能与藻酸盐反应并自发形成凝胶。
藻酸酯具有很广的应用，例如用作食品添加剂、粘合剂、药物片剂和伤口敷料。还有人建议将藻酸盐用于蛋白分离技术。例如，Gray,C.J.等人在Biotechnology and Bioengineering,31:607-612(1988)中提出，在藻酸锌/藻酸钙凝胶中截留胰岛素来将胰岛素与其它血清蛋白分离开。
藻酸酯基质已被充分证实可用作药物递送系统；参见例如US4695463，其中公开了以藻酸酯为基质的口香糖递送系统和药物制剂。藻酸酯珠已用于多种蛋白的控制释放，例如：在用聚阳离子包衣的阳离子藻酸酯珠中的肿瘤坏死因子受体；Wee,S.F,Proceed.Intern.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.,21:730-31(1994)；包封在藻酸酯珠中的转化生长因子；Puolakkainen,P.A.等人，Gastroenterology,107:1319-1326(1994)；包封在藻酸钙珠中的血管生成因子；Downs,E.C.等人，J.of Cellular Physiology,152:422-429(1992)；包封在脱乙酰壳多糖-藻酸酯微胶囊中的白蛋白；Polk,A.等人，J.Pharmaceutical Sciences,83(2):178-185(1994)；用聚合物包衣的脱乙酰壳多糖-藻酸钙珠；Okhamafe,A.O.等人，J.Microencapsul.,13(5):497-508(1996)；包封在脱乙酰壳多糖-藻酸钙珠中的血红蛋白；Huguet,M.L.等人，J.Applled Polymer Science,51:1427-1432(1994),Huguet,M.L.等人，Process Biochemistry,31:745-751(1996)；和包封在藻酸酯-脱乙酰壳多糖微球中的白细胞介素-2；Liu,L.S.等人，Proceed.Intern.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater,22:542-543(1995)。
使用藻酸酯凝胶珠或藻酸酯/钙凝胶珠来包封蛋白的系统的缺点是缺乏任何缓释效果，这是由于蛋白迅速地从藻酸酯珠中释放所致；Liu,L.等人，J.Control.Rel.,43:65-74(1997)。为了防止这种迅速释放，有多种上述系统尝试使用聚阳离子聚合物包衣(例如多熔素、脱乙酰壳多糖)来延迟蛋白藻酸酯珠的释放；参见例如Wheatley,M.A.等人，J.Applied Polymer Science,43:2123-2135(1991)；上文中Wee,S.F.等人的文献；上文中Liu,L.S.等人的文献；Wee,S.F.等人，Controlled Release Society,22:566-567(1995)和上文中Lim，等人的文献。
聚阳离子例如多熔素是携带正电荷的聚电解质，其与携带负电荷的藻酸酯分子相互作用以形成在珠表面上起扩散屏障的聚电解质复合物。使用聚阳离子可能会带来问题，这是因为：(1)这种制剂可能由于聚阳离子而具有细胞毒性；上文中Huguet,M.L.等人的文献；Zimmermann,Ulrich,Electrophoresis,13:269(1992)；Bergmann,P.等人，ClincialScience,67:35(1984)；(2)聚阳离子易于氧化；(3)具有聚阳离子包衣的珠在体内不易于被侵蚀和增大；(4)这种制剂是通过包括用聚阳离子多熔素多次包衣的费力包衣操作制得的；Padol,等人，Proceed.Intern.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater,2:216(1986)；和(5)蛋白和聚阳离子之间的离子相互作用可导致蛋白活性损失或使蛋白不稳定。
Francesco等人的US533668(及其引用文献)中描述了通过不同方法制得的藻酸的全酯和偏酯，以及它们所具有药用特性。其中描述了如何将藻酸酯在医疗-外科应用中用作生物可降解塑性材料；用作多种聚合材料的添加剂；或在多种药物的制备中使用。其中没有描述藻酸酯和藻酸酯水凝胶在缓释制剂中的潜在应用。
Nightlinger等人的Proceed.Inter.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.,22:738-739(1995)中描述了具有控释能力的酯化透明质酸(NA)微球。该文献提出HA衍生物具有不同降解速度，并描述了透明质酸酯是如何“折断”以释放出醇和HA部分。其中没有描述HA自身骨架是如何或者是否分解成小分子量聚合物单元。
为了使基于多糖的缓释系统能够适用，多糖必须能生物降解成无毒产物。已经发现，一些藻酸酯凝胶系统，虽然能有效地提供药物缓释效果，但是会由于凝胶的消散速度非常慢而在注射位点产生“肿块”(或小结)。在涉及低剂量药物和注射频率很小的治疗中，这可能不是严重问题。但是，在涉及高剂量药物和注射频率较高的治疗中，这种影响是必须禁止的。必须找到能提高藻酸酯凝胶从注射位点消散的速度的手段。
对于临床应用，还需要开发能获得更通用和更有效缓释手段的药物制剂。多种重组或天然蛋白可受益于恒定的长期释放，并因此提供更有效的临床效果。
本发明提供了这样的进步。本发明使用生物可降解藻酸酯凝胶颗粒或凝胶的药物组合物能提供提高的生物利用度、蛋白保护、降解降低和缓释以及蛋白稳定性和效力提高。本发明药物组合物还提供了控制重组蛋白释放的简单、迅速和低廉的手段，以提供有效的预防、治疗或诊断效果。
                      发明简述
本发明产生自在蛋白缓释方面使用未修饰藻酸酯(一类阴离子多糖)水凝胶的研究。这些含有蛋白的未修饰藻酸酯水凝胶(参见未结案的美国专利申请08/857913和08/912902)是以延时方式形成的，因此这些材料可填充在注射器中，并且在同一注射器中放置形成随后的凝胶；我们发现这些凝胶是可注射的。在啮齿动物模型中进行一次皮下注射后，观察到了蛋白在很多天内的持续释放；然而，注射位点长时间保持着可察觉的肿块或小结，肿块或小结的大小在长时间内变化很小。该肿块由填充水的藻酸酯水凝胶组成，并且肿块的大小是注射凝胶体积的函数。凝胶珠也保留在注射位点。
因此，本发明涉及一类新的生物可降解的生物可相容多糖水凝胶例如藻酸酯水凝胶在治疗蛋白缓释中的应用。出乎意料的是，藻酸酯水凝胶除了具有凝胶化作用以外，还具有未修饰藻酸酯所具有的可注射性和缓释特性，在注射位点不会留下肿块，也就是说，藻酸酯水凝胶是生物可降解或可侵蚀的，并且能逐步被再吸收到周围组织内，注射位点反应很小。
本发明组合物包含在含有治疗剂例如蛋白的水凝胶(含水)基质中离子交联的藻酸酯或其衍生物。
本发明还涉及制备生物可降解缓释组合物的方法。
本发明还涉及液体混合物中的藻酸酯材料在体内延迟凝胶化中的应用。
本发明还涉及组合物，其中藻酸酯水凝胶以珠或微球形式用于活性剂、优选治疗蛋白的缓释。
在本发明一个实施方案中，藻酸酯水凝胶提供了用于在患者体内靶位点施用的组合物。这些组合物可用于：阻止或抑制手术或创伤后形成组织粘连；补充组织来尤其是填充软和硬组织；用可再吸收的材料填充局部间隙；用作组织生长的框架；和用作伤口敷料。
在另一实施方案中，藻酸酯水凝胶提供了含有活性剂的用于植入到体内的装置，其中活性剂结合或未结合到藻酸酯聚合物上。
在另一实施方案中，本发明藻酸酯水凝胶组合物提供了改善组合物中活性剂的生物利用度的方法。
最后，本发明藻酸酯水凝胶组合物还提供了在患者中获得随时间流逝基本上恒定的血液水平的方法。
                        发明详述
组合物
包括藻酸酯及其衍生物的亲水性聚合物可通过本领域众所周知的商业、天然或合成来源获得。在本说明书中使用的术语亲水性聚合物是指水溶性聚合物或具有吸水亲合力的聚合物。亲水性聚合物是本领域技术人员众所周知的。它们包括但不限于聚阴离子，包括阴离子多糖例如藻酸酯、羧甲基直链淀粉、聚丙烯酸盐、聚甲基丙烯酸盐、乙烯马来酸酐共聚物(半酯)、羧甲基纤维素、葡聚糖硫酸酯、肝素、羧甲基葡聚糖、羧基纤维素、2,3-二羧基纤维素、三羧基纤维素、羧基阿拉伯树胶、羧基角叉菜胶、果胶、羧基果胶、羧基黄蓍胶、羧基黄原胶、戊聚糖多硫酸酯、羧基淀粉、羧甲基甲壳质/脱乙酰壳多糖、凝胶多糖、肌醇六硫酸酯、β-环糊精硫酸酯、透明质酸、软骨素-6-硫酸酯、硫酸皮肤素、肝素硫酸酯、羧甲基淀粉、角叉菜胶、聚半乳糖醛酸酯(或盐)、羧基瓜尔胶、缩聚磷酸盐(或酯)、聚醛碳酸、聚-1-羟基-1-磺酸酯丙烯-2、共聚苯乙烯马来酸、琼脂糖、中聚糖(mesoglycan)、磺基丙基化聚乙烯醇、硫酸纤维素、硫酸鱼精蛋白、磷酸瓜尔胶、聚谷氨酸、聚天冬氨酸、聚氨基酸、它们的衍生物或混合物。本领域技术人员应当知道在本发明范围内的其它各种亲水性聚合物。
同样，结合的多价金属离子可通过本领域众所周知的商业、天然或合成来源获得。尤其是，金属离子可包括但不限于铝离子、钡离子、钙离子、铁离子、锰离子、镁离子、锶离子和锌离子。优选的金属离子是钙离子和锌离子或其盐例如乙酸锌、乙酸钙或盐酸盐。也可使用水溶性小分子和盐例如硫酸铵、丙酮、乙醇和甘油。
用作本发明藻酸羧基的酯化部分的脂肪醇是例如具有最多34个碳原子的脂肪醇，所述醇可以是饱和或不饱和醇，并且也可以被其它游离基团或官能化修饰的基团取代，所述基团有例如氨基、羟基、醛基、酮基、巯基、羧基，或衍生自它们的基团例如烃基或二烃基氨基(在下文中术语“烃基”不仅表示单价烃基例如CnH2n+1，还表示二价基团或三价基团例如“亚烷基”-CnH2n-或“亚烷基”=CnH2n)、醚基或酯基、缩醛或缩酮基、硫醚或硫酯基以及酯化的羧基或脲基或被1个或2个羟基、被腈基或被卤素取代的脲基。
在上述包含烃基的基团当中，低级脂族基团是优选的，例如杂原子例如氧、氮和硫。被1个或2个上述官能团取代的醇是优选的。
依据本发明优选使用的上述醇是这样的醇：它们具有最多12个碳原子、尤其是最多6个碳原子，并且在上述氨基、醚基、酯基、硫醚基、硫酯基、缩醛基、缩酮基中的烃基代表具有最多4个碳原子的烷基，并且在酯化羧基或取代脲基中烃基是具有相同数目碳原子的烷基，以及氨基或脲基可以是具有最多8个碳原子的亚烷基氨基或亚烷基脲基。在这些醇中，首先和主要提及的是饱和未取代醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、戊醇、己醇、辛醇、壬醇和十二醇，以及具有直链的所有上述醇例如正辛醇和正十二醇。在取代的醇中，应包括二元醇例如乙二醇、丙二醇或丁二醇，三元醇例如甘油，醛醇例如羟基丙二醇(tartronic alcohol)，羧基醇例如乳酸，例如α-羟基丙酸、乙醇酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸，氨基醇例如氨基乙醇、氨基丙醇、氨基正丁醇及其在氨基官能团中的二甲基和二乙基衍生物、胆碱、吡咯烷基乙醇、哌啶基乙醇、哌嗪基乙醇、及正丙醇或正丁醇的相应衍生物、一硫代乙二醇或其烷基衍生物，例如在巯基官能团中的乙基衍生物。
在高级饱和脂肪醇中，可特别提及的是例如鲸蜡醇和肉豆蔻醇，但是对于本发明目的尤其重要的是具有1个或2个双键的高级不饱和醇，例如在许多精油中含有的并具有类似于萜烯结构的醇，例如香茅醇、香叶醇、橙花醇、橙花叔醇、里哪醇、法尼醇、叶绿醇。
在低级不饱和醇当中，可提及的有炔丙醇。
尤其要提及的脂肪醇是这样的醇：它们仅具有一个苯基，脂族链具有最多4个碳原子，该苯基可被1-3个甲基或羟基、或被卤素原子尤其是氯、溴或碘取代，并且脂族链可被一个或多个选自游离氨基或一甲基氨基或二甲基氨基的官能团或被吡咯烷基或哌啶基取代。在这些醇当中，苯甲醇和苯乙醇是特别优选的。环脂肪醇或脂族环脂肪醇可衍生自单环或多环烃，并且可具有最多34个碳原子。在衍生自单环烃的醇中，可特别提及的是具有最多12个碳原子、并且环优选包含5-7个碳原子、以及可能被例如1-3个低级烷基例如甲基、乙基、丙基或异丙基取代的醇。具体的这类醇有环己醇、环己二醇、1,2,3-环己三醇、1,3,5-环己三醇(间环己烷三醇)、肌醇，衍生自对烷的醇例如香芹醇、醇、称为“松油醇”的α-松油醇和γ-松油醇以及1-松油醇、1,4-萜二醇和1,8-萜二醇。衍生自具有稠合环的烃的醇是例如苧烷、蒎烷、莰烷类醇，尤其是苧醇、桧萜醇、蒎醇水合物、D-冰片、L-冰片、D-异冰片和L-异冰片。
还包括的醇是衍生自环氧化合物与藻酸酯的酯化反应的醇(参见例如US2463824和US2426125)。
本发明含有聚阴离子的全酯或偏酯通常是酸性多糖，其中配糖氧连接到酯的羰基碳β位上。虽然不受缚于任何具体机制，但是各部分的排列使得聚合物链在生理条件下通过β-消除机制断裂。
本发明藻酸酯由通过式Ⅰ所示配糖醚氧键合连接在一起的甘露糖醛酸残基(m-COOH或m-COO阴离子)和古洛糖醛酸(g-COOH或g-COO阴离子)组成：-(M)n1-(M＇)n2-(G)n3-(G＇)n4-(A)n5-    Ⅰ
其中：
M是甘露糖醛酸残基、m-COOH或m-COO阴离子；
M＇是甘露糖醛酸酯残基、m-COOR1；
G是古洛糖醛酸残基、g-COOH或g-COO阴离子；
G＇是古洛糖醛酸酯残基、g-COOR2；
A代表非-g或非-m链单元，例如糖，糖氧化产物，或可被连接在链内或链末端的杂原子取代和间隔的脂族、芳族、芳脂族、脂芳族、环状脂族基团；
n1、n2、n3、n4和n5是代表合并单元平均相对数目的整数；
R1和R2独立地为可被杂原子取代和间隔的脂族、芳族、芳脂族、脂芳族、环状脂族基团；
和它们的衍生物(例如其中羟基被乙酰化和与异氰酸酯反应)及其可药用盐。
在本发明酯中，可取的是，R1=R2=脂族或脂芳族基团，并且100(n2+n4)/(n1+n2+n3+n4)为1-99mol％、优选为5-50mol％、更优选为6-30mol％、还更优选为6-15mol％、最优选为7-12mol％，以及100n5/(n1+n2+n3+n4+n5)优选低于10mol％。
在本发明偏酯中，未酯化羧基可以是游离的或成盐。用于形成盐的碱是依据产物的最终应用来选取的。无机盐可由碱金属例如钾和尤其是钠与铵形成，或衍生自碱土金属例如钙或镁或铝盐。
特别适用的是与有机碱、尤其是氮化碱如脂肪胺、芳族脂肪胺、环状脂肪胺或杂环胺形成的盐。这些铵盐可衍生自可治疗用胺或无毒但是无治疗活性的胺，或衍生自具有治疗作用的胺。在第一类胺中，优选脂肪胺，例如其中烷基具有最多8个碳原子的一烷基胺、二烷基胺和三烷基胺，或芳基烷基胺，其中烷基部分具有最多8个碳原子，并且当芳基表示苯基时，其可被1-3个甲基或卤素原子或羟基取代。用于形成盐的无生物活性的碱可以是环状胺，例如具有4-6个环碳原子的单环亚烷基胺，环状胺的环中可具有选自氮、氧和硫的杂原子，例如哌嗪或吗啉，或者胺可被取代、例如被氨基或羟基取代，例如氨基乙醇、乙二胺醇(ethylenediamol)、乙二胺、麻黄碱或胆碱。
可通过本领域已知合成方法控制酯化的程度和类型。优选在非质子有机溶剂例如二甲亚砜中用常规烷化剂处理藻酸的季铵盐来制备藻酸酯。所得酯优选为一元醇酯，例如低级烷基酯例如乙基酯或芳烷基酯例如苄基酯或它们的混合物。还可通过将藻酸与环氧乙烷或环氧化合物例如环氧乙烷或环氧乙烷反应来形成酯。
还可以形成偏酯的季铵盐，例如具有上述数目碳原子的四烷基铵盐，优选为其中第4个烷基具有1-4个碳原子例如甲基的这类盐。
藻酸酯的酯化度(以mol％)表示与凝胶在患者组织中的消除速度有关。凝胶的消除速度一般与活性剂从凝胶中的所需释放速度有关，活性剂从凝胶中的所需释放速度通常为5年或5年以下、通常2天-270天、更通常2天-180天、更通常2天-90天释放完。酯化度(DE)一般为1mol％-99mol％、优选为5mol％-50mol％、更优选为6mol％-30mol％、更优选为6mol％-15mol％、更优选为7mol％-12mol％。
在本说明书中使用的术语缓冲液或缓冲溶液是指使用无机酸或有机酸或它们的混合物制得的本领域已知的缓冲溶液。在本发明范围内的无机酸包括氢卤酸(例如盐酸)、磷酸、硝酸或硫酸。其它无机酸是本领域技术人员众所周知的，在这儿是这样认为。在本发明范围内有机酸包括脂族羧酸和芳香酸例如甲酸、碳酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸、丙烯酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、己二酸、马来酸、富马酸、甘氨酸或苯酚磺酸。其它有机酸是本领域技术人员众所周知的。
在本说明书中使用的生物活性剂是指用于预防、治疗或诊断疾病的重组或天然人或动物蛋白、以及非蛋白类活性剂例如小分子。生物活性剂可以是天然、合成、半合成活性剂或其衍生物。本发明活性剂必须是可沉淀的。本发明适用于多种生物活性剂。其包括但不限于激素、细胞因子、造血因子、生长因子、抗肥胖因子、营养因子、抗炎因子、和酶(参见US4695463中适用的生物活性剂的其它实例)。本领域技术人员能很容易地将所需生物活性剂加到本发明组合物中。
所述蛋白包括但不限于干扰素(参见US5372808、US5541293、US4897471和US4695623，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、白细胞介素(参见US5075222，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、促红细胞生成素(参见US4703008、US5441868、US5618698、US5547933和US5621080，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、粒细胞集落刺激因子(参见US4810643、US4999291、US5581476、US5582823和第94/17185号PCT公开，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、干细胞因子(第91/05795、92/17505和95/17206号PCT公开，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、和OB蛋白(参见第96/40912、96/05309、97/00128、97/01010和97/06816号PCT公开，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)。此外，生物活性剂还可包括但不限于与抗肥胖相关的产品、胰岛素、胃泌素、促乳素、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促甲状腺激素(TSH)、促黄体激素(LH)、促卵泡成熟激素(FSH)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)、能动素、干扰素(α-干扰素、β-干扰素、γ-干扰素)、白细胞介素(IL-1-IL-12)、肿瘤坏死因子(TNF)、肿瘤坏死因子结合蛋白(TNF-bp)、脑衍生神经营养因子(BDNF)、神经胶质衍生神经营养因子(GDNF)、神经营养因子3(NT3)、成纤维细胞生长因子(FGF)、神经营养生长因子(NGF)、骨生长因子例如osteoprotegerin(OPG)、胰岛素样生长因子(IGFs)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨角质形成细胞衍生生长因子(MGDF)、血小板生成素、血小板衍生生长因子(PGDF)、集落刺激生长因子(CSFs)、骨形态发生蛋白(BMP)、过氧化物歧化酶(SOD)、组织纤维蛋白溶酶原激活物(TPA)、尿激酶、链激酶和激肽释放酶。本说明书中使用的术语蛋白包括肽、多肽、其共有序列分子、类似物、衍生物或组合物。
生物活性剂衍生物可包括在蛋白部分上附加上一个或多个化学部分。已经发现，在某些情况下，将生物活性剂进行化学修饰可提供另外的优点，例如提高治疗蛋白的稳定性和循环时间以及降低免疫原性。本领域技术人员应当能根据所需剂量、循环时间、对蛋白水解抗性、治疗应用和其它考虑选择所需的化学修饰。
本说明书使用的生物可降解性是指特定聚合物的分子量分解成在链中具有较少数目的单元，即分解成分子量较小的单元。生物可降解凝胶是指凝胶在使用环境中的消散，其中消散依导致聚合物链中有产生较少单元的聚合物的分解而定。
复合物
蛋白、类似物或衍生物可复合于结合组分。这种结合组分可延长蛋白、类似物或衍生物循环时间、或增强生物活性剂的活性。这种组分可以是蛋白(或肽)、衍生物、类似物或它们的组合。例如，OB蛋白的结合蛋白是OB蛋白受体或其部分例如其可溶性部分。可通过检查OB蛋白来确定其它结合蛋白，或在血清中选择蛋白，或凭经验选择来筛选是否结合。这种结合通常不妨碍OB蛋白或类似物或衍生物结合内源性OB蛋白受体和/或影响信号转导的能力。除了OB蛋白以外，结合复合物还可用于本发明其它治疗蛋白。本领域技术人员能确定合适的结合蛋白来依据本发明使用。
同样，用于沉淀生物活性剂的沉淀剂可得自本领域众所周知的各种商业、天然或合成来源。沉淀剂包括但不限于多价金属离子或它们的盐例如其乙酸盐、柠檬酸盐、盐酸盐、碳酸盐、氢氧化物、草酸盐、酒石酸盐或氢氧化物、酸或水溶性聚合物。特别是金属离子可包括但不限于铝离子、钡离子、钙离子、铁离子、锰离子、镁离子、锶离子和锌离子。金属离子优选为锌离子或其盐例如乙酸盐和盐酸盐。也可使用水溶性小分子和盐例如硫酸铝、丙酮、乙醇和甘油。
水溶性聚合物包括但不限于聚乙二醇、乙二醇/丙二醇共聚物、羧甲基纤维素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1,3-二氧戊烷、聚-1,3,6-三氧杂环己烷、乙烯/马来酸酐共聚物、聚氨基酸、葡聚糖、聚(正乙烯基吡咯烷酮)聚乙二醇、丙二醇均聚物、聚氧化丙烯/氧化乙烯共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇琥珀酸酯、甘油、环氧乙烷、氧化丙烯、泊咯沙姆(poloxamers)、烷氧基化共聚物、水溶性聚阴离子、其衍生物或混合物。水溶性聚合物可具有任意分子量，并且可以是支链或非支链的。例如，为了易于控制沉淀的效力，聚乙二醇优选的分子量为约700Da-约100Da。
根据所需治疗情况(例如所需缓释持续时间、对生物活性的影响(若有的话)、便于控制、抗原性程度或缺乏抗原性、以及所需沉淀剂对治疗蛋白或类似物的其它已知作用)，可使用其它大小和种类的沉淀剂。本领域技术人员知道在本发明范围内的其它合适沉淀剂。
此外，本发明组合物还可包含用于稳定生物活性剂和/亲水性聚合物的外加赋形剂。赋形剂可包含在缓冲液中，并可包括但不限于防腐剂。
药物组合物
本发明缓释药物组合物可以是口服制剂(例如胶囊剂如硬胶囊剂和软胶囊剂，固体制剂例如粒剂、片剂、丸剂、锭剂或糖锭剂、扁囊剂、小丸剂、粉剂和冷冻干燥制剂，液体制剂例如悬浮剂)和非口服制剂(例如肌内给药制剂、皮下给药制剂、经皮给药制剂、内脏用制剂、IV(静脉内)给药制剂、IP(腹膜内)给药制剂、动脉内给药制剂、鞘内给药制剂、囊内给药制剂、眼眶内给药制剂、注射剂、肺给药制剂、鼻内给药制剂、直肠给药制剂、和子宫透粘膜给药制剂)。
本发明一般包括缓释药物组合物，其中包含有效量的蛋白或衍生物、本发明缓释组分以及可药用稀释剂、防腐剂、助溶剂、乳化剂、辅料和/或给药所需载体。参见PCT97/01331，该专利引入本发明以作参考。对于所需的生物活性剂，最佳药物制剂由本领域技术人员根据给药途径和所需剂量来决定。Remington＇s Pharmaceutical Science(MackPublishing Co.,18th Ed.,Easton,PA,pgs.1435-1712(1990))中公开了药物组合物的实例。
由于缓释凝胶制剂具有触变性，因此可使用注射器来将其皮下给药。可将组合物在注射器中凝胶化以随后进行注射。可以以延时方式进行凝胶化。如果需要的话，通过正确调节混合物中胶凝剂和质子给体的量来控制凝胶化时间。这种制剂可用于注射后在体内的再凝胶化。本说明书所用术语触变性是指凝胶混合物的粘度在压力下减小，例如在混合物可流动的点经由例如注射器针头从注射器活塞中注射出来，然后在注射位点再形成凝胶。
延迟凝胶化的概念也可适用于填充注射器，将缓释凝胶组合物填充在注射器中，事先调整在注射器中的凝胶化时间，例如在填充后几分钟到数小时凝胶化。这防止了在填充时注射器包含已经凝胶化的材料-这一问题。可将这些预填充的注射器贮存，以后再注射到患者体内。
给药所需的组分包括具有不同缓冲组分(例如Tris-HCl、乙酸盐)、pH和离子强度的稀释剂；添加剂例如表面活性剂和助溶剂(例如吐温80、HCO-60、聚山梨醇酯80)、抗氧化剂(例如抗坏血酸、谷胱甘肽、偏亚硫酸氢钠)、其它多糖(例如羧甲基纤维素、藻酸钠、透明质酸钠、硫酸鱼精蛋白、聚乙二醇)、防腐剂(例如硫柳汞、苯甲醇、尼泊金甲酯、尼泊金丙酯)、和填充剂(例如乳糖、甘露醇)；加到聚合化合物颗粒制剂中的材料，聚合化合物例如聚乳酸/聚乙醇酸聚合物或共聚物等，或者加入脂质体。透明质酸也可用作给药组分，并且透明质酸可进一步提高在循环中的持续时间。此外，也可用油(例如芝麻油、玉米油、植物油)、或油与磷脂(例如卵磷脂)的混合物、或中链脂肪酸甘油三酯(例如Miglyol812)来分散本发明缓释组合物，以提供油悬浮液。还可用分散剂例如水溶性多糖(例如甘露醇、乳糖、葡萄糖、淀粉)、透明质酸、甘氨酸、纤维蛋白、胶原和无机盐(例如氯化钠)来分散本发明组合物。
此外，还可使用设计用来给肺递送治疗药物的机械装置将本发明缓释组合物给药，包括但不限于喷雾器、计量吸入器、和粉末吸入器，所有这些装置都是本领域技术人员所熟悉的。
给药组分可影响这些蛋白和衍生物的物理状态、稳定性、体内释放速度、和体内清除速度。本领域技术人员知道根据治疗应用、给药途径、所需剂量、循环时间、对蛋白水解抗性、蛋白稳定性以及其它考虑来使用合适的给药组分和/或适当机械装置。
使用方法
治疗。治疗应用取决于所用的生物活性剂。为了实现治疗应用，本领域技术人员能很容易地使所需生物活性剂适应本发明。下述出版物中更详细地列出了这些生物活性剂的治疗应用，这些出版物包括附图引入本发明以作参考。治疗应用包括但不限于使用干扰素(参见US5372808、US5541293、US4897471和US4695623，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、白细胞介素(参见US5075222，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、促红细胞生成素(参见US4703008、US5441868、US5618698、US5547933和US5621080，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、粒细胞集落刺激因子(参见US4,999,291、US4999291、US5581476、US5582823和第94/17185号PCT公开，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、干细胞因子(第91/05795、92/17505和95/17206号PCT公开，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)、和OB蛋白(参见第96/40912、96/05309、97/00128、97/01010和97/06816号PCT公开，将这些专利及其附图引入本发明以作参考)作为蛋白。
此外，本发明治疗应用包括使用生物活性剂，包括但不限于与抗肥胖相关的产品、胰岛素、胃泌素、促乳素、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促甲状腺激素(TSH)、促黄体激素(LH)、促卵泡成熟激素(FSH)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)、能动素、干扰素(α-干扰素、β-干扰素、γ-干扰素)、白细胞介素(IL-1-IL-12)、肿瘤坏死因子(TNF)、肿瘤坏死因子结合蛋白(TNF-bp)、脑衍生神经营养因子(BDNF)、神经胶质衍生神经营养因子(GDNF)、神经营养因子3(NF3)、成纤维细胞生长因子(FGF)、神经营养生长因子(NGF)、骨生长因子例如osteoprotegerin(OPG)、胰岛素样生长因子(IGFs)、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、巨角质形成细胞衍生生长因子(MGDF)、血小板生成素、血小板衍生生长因子(PGDF)、集落刺激生长因子(CSFs)、骨形态发生蛋白(BMP)、过氧化物歧化酶(SOD)、组织纤维蛋白溶酶原激活物(TPA)、尿激酶、链激酶和激肽释放酶。本说明书中使用的术语蛋白包括肽、多肽、其共有序列分子、类似物、衍生物或混合物。另外，本发明组合物还可用于制备一种或多种用于治疗或改善可用所述生物活性剂治疗的病症的药物。
例如，治疗应用是可在不减轻体重的情况下实现在血液中的氧合和减轻骨再吸收或骨质疏松。
联合治疗.本发明组合物和方法可以与其它治疗例如调节饮食和锻炼联合采用。其它药物，例如用于治疗糖尿病的药物(例如胰岛素和可能是支链淀粉)、降低胆固醇和血压的药物(例如降低血液脂质水平的药物或其它心血管药物)、活性提高药物(例如安非他明)、利尿剂(用于液体清除)、和食欲抑制剂。这种联合给药可同时进行或依次进行。此外，本发明方法可以与手术、例如设计用来改变身体外观的整容手术(例如用来减少身体物质的抽脂术和激光手术，或用来增加身体物质外观的植入手术)联合使用。心脏手术例如旁路手术或其它用来解除由于血管被脂肪沉积物阻塞的有害病症例如动脉斑的手术的健康效果可由于和本发明组合物以及方法联合采用而得到提高。可在实施本发明方法之前、期间或之后使用消除胆结石的方法例如超声法或激光法。此外，本发明方法可以作为用于骨折、肌肉损伤的手术或治疗、或可通过增加肌肉组织质量而改善其他治疗的附属治疗。
剂量
本领域技术人员能通过给药和观察所需治疗效果来确定有效剂量。缓释制剂的剂量是需要在给定期间内达到生物活性剂有效体内浓度的量。缓释制剂的剂量和优选的给药频率随生物活性剂种类、所需的释放持续时间、靶疾病、所需给药频率、受治疗的动物种类以及其它因素的不同而不同。为了达到所需治疗效果，制剂的剂量(按活性分子计)优选为约0.10μg/kg/天-100mg/kg/天。
可用诊断手段随时间确定有效剂量。例如，本发明提供了OB蛋白的剂量。例如，可首先使用诊断手段来测定血液(血浆或血清)中OB蛋白的量，以确定出OB蛋白的内源水平。这种诊断手段可以是抗体分析，例如抗体夹层分析。首先定量测定内源性OB蛋白的量，确定基准。当内源性和外源性OB蛋白(体内存在的自身产生或给予的蛋白、类似物或衍生物)的定量比率在治疗期间延续时确定治疗剂量。例如，起初可能需要相对高的剂量，直至观察到治疗效果，然后采用较低的剂量来维持治疗效果。
材料和方法
材料.藻酸钠形式的藻酸盐可得自本领域内众所周知的来源。OB蛋白和GCSF得自Amgen Inc.。其它化学药品得自本领域内众所周知的来源。
制备藻酸酯水凝胶颗粒/珠.
未结案的美国专利申请08/842756中详细描述了含有或不含有蛋白的藻酸酯水凝胶颗粒和珠的制备，该专利引入本发明以作参考。
制备缓释凝胶.
未结案的美国专利申请08/857913和08/912902详细描述了含有或不合有蛋白的缓释藻酸酯水凝胶的制备，这两篇专利引入本发明以作参考。
下述实施例是为了更充分地说明本发明，而不是对本发明范围的限制。根据上面的公开和下面的实施例，本领域技术人员能将公开方案作必要改变以大规模生产。
                        实施例1
下述实施例描述了用于本发明的藻酸酯的制备。
制备A：藻酸四丁基铵(TBA)
在室温采用分批处理方法，通过用氢氧化四丁基铵(Aldrich)处理将磺酸树脂(Bio-Rad,AG MP-50)转化成四丁基铵型。向10g藻酸钠在800ml蒸馏水中的溶液内加入60ml四丁基铵盐形式的60ml磺酸树脂(Bio-Rad,AG MP-50)。将该混合物在室温搅拌0.5小时。通过过滤除去树脂，并用蒸馏水洗涤。通过冷冻干燥分离出滤液中的TBA藻酸盐(产量为16.8g)，通过1H NMR证实。
制备B：藻酸的偏乙酯，酯化度(DE)=30mol％。
在室温将TBA藻酸盐(6g,14.4mol TBA单位)溶于500ml二甲亚砜(DMSO)中。然后加入碘乙烷(Aldrich,673mg,4.3mmol)。将该混合物在30℃搅拌15小时，然后冷却至室温。向该溶液中缓慢地加入2g NaCl在20ml水中的溶液，以将TBA完全转化成钠盐。搅拌15-30分钟后，将该溶液缓慢地倒入1500ml乙酸乙酯中。通过过滤收集沉淀，用丙酮/水(8∶1v/v)洗涤3次，用丙酮洗涤3次，然后真空干燥。在0℃，将该化合物再溶于蒸馏水(约100ml)中，用0.2％碳酸氢钠将pH调节至约6.5。然后用蒸馏水在4℃将该溶液透析(截留分子量为8000)过夜，之后冷冻干燥。获得了2.8g该偏酯，酯化度为30+/-1％(1H NMR，以马来酰亚胺作为内标)。
制备C：藻酸的全乙酯和偏乙酯，DE=100％、50％、20％、10％和5％。
这些化合物的制备与制备B类似，只是调节碘乙烷的用量以达到所需的酯化度。
制备D：藻酸的偏丙酯、己酯、辛酯和十二烷基酯。
这些化合物的制备与上面制备B和C类似，只是分别用1-碘丙烷、1-碘己烷、1-碘辛酯或1-碘十二烷来代替碘乙烷。
制备E：藻酸的偏苄酯，DE=30％。
在室温将TBA藻酸盐(2.5g,5.99mmol TBA单位)溶于约200mlDMSO中。加入苄基溴(Aldrich,307mg,1.8mmol)和TBA碘化物(Aldrich,30mg)。将该混合物在30℃搅拌15小时，然后冷却至室温。向该溶液中缓慢地加入0.6g NaCl在10ml水中的溶液，以将TBA完全转化成钠盐。搅拌15-30分钟后，将该溶液缓慢地倒入500ml乙酸乙酯中。通过过滤收集沉淀，用丙酮/水(8∶1v/v)洗涤3次，用丙酮洗涤3次，然后真空干燥。在0℃，将该化合物再溶于蒸馏水(约60ml)中，用0.2％碳酸氢钠将pH调节至约6.5。然后用蒸馏水在4℃将该溶液透析(截留分子量为8000)过夜。获得了1.3g该偏酯，酯化度为30+/-1％(1H NMR，以马来酰亚胺作为内标)。
制备F：藻酸的全苄酯和具有不同DE的偏苄酯。
这些化合物的制备与制备E类似，只是调节苄基溴和TBA碘化物的用量以达到所需的酯化度。
                        实施例2
下述实施例表明了含有蛋白药物(Leptin)的藻酸乙酯(DE=15mol％和10mol％)凝胶的制备以及在体外药物从该凝胶中的缓释。
将Leptin(100mg/ml；10mM Tris HCl,pH8.8；用1M NaOH将pH调节至8.0-8.8)和6％藻酸乙酯(15mol％,10mM Tris HCl,pH8.6)在冰浴上冷却。将Leptin(0.5ml)加到该6％藻酸乙酯(0.18ml)中，将该混合物在冰浴上搅拌10-15分钟；最终pH为8.6-8.8。向该混合物中加入1M碳酸钙悬浮液(16μL)，将所得悬浮液充分混合。在搅拌下向该悬浮液中滴加0.1M ZnCl2溶液(100μL)；然后加入水以使体积为1ml。将该混合物充分混合，并在冰浴上放置10-20分钟。然后将1.68M δ-葡萄糖酸内酯(Aldrich,56μL)溶液充分搅拌到该混合物中。将最终的混合物(50mg/ml 1eptin,1％藻酸乙酯；0.1ml)置于微量离心管(eppendorf tube)内，在4℃放置过夜以使其凝胶化。贮存过夜后，在pH为7.4的10mM组氨酸缓冲液中进行体外释放。酯化度为15％的凝胶表现出极微的爆发性释放，并且表现出相当恒定的Leptin释放，在6天内释放了60％。酯化度为10mol％的凝胶表现出极微的爆发性释放，并且表现出相当恒定的leptin释放，在6天内释放了55％。
                        实施例3
下述实施例表明了含有蛋白药物(Leptin)的藻酸己酯(DE=15mol％和10mol％)凝胶的制备以及在体外药物从该凝胶中的缓释。
以类似于实施例2所述的方式进行本实施例，只是不使用藻酸乙酯。
酯化度为15mol％和10mol％的藻酸己酯凝胶表现出极微的爆发性释放，并且表现出缓释效果，在6天内释放了50％。
                        实施例4
下述实施例表明了含有蛋白药物(Zn-Leptin)的藻酸乙酯(DE=15mol％)凝胶的制备以及在体外从该凝胶中的缓释。
向4％(w/v)藻酸乙酯(15mol％,0.75ml)溶液中加入1M TrisHCl,pH8.0(7.5μL)、0.5M PIPES pH6.8(33μL)和0.1M ZnCl2(8.5μL)。将该混合物充分搅拌。向该溶液中加入Zn-Leptin悬浮液(100mg/ml,675μL)，将该混合物充分搅拌。然后将1M碳酸钙悬浮液(24μL)和1.68M d-葡萄糖酸内酯(70μL)充分搅拌到该混合物中。将最终的混合物(0.1ml)置于微量离心管内，在4℃放置过夜以使其凝胶化。贮存过夜后，在pH为7.4的10mM组氨酸缓冲液中进行体外释放。酯化度为15mol％的该藻酸乙酯凝胶表现出很小的爆发性释放，和持续的leptin释放，在4天内释放了65％。
                        实施例5
下述实施例表明了含有蛋白药物(GCSF)的藻酸乙酯(DE=30mol％)凝胶的制备以及在体外药物从该凝胶中的缓释。
向2.39％藻酸乙酯(30mol％,0.50ml)溶液中加入0.1M乙酸盐缓冲液(pH4.5,100μL)、GCSF(104μL,48.2mg/ml,HCl pH3)和蒸馏水(246ml)。将该混合物充分搅拌。将1M CaHPO4(10μL)和1.68Mδ-葡萄糖酸内酯(40μL)充分搅拌到该混合物中。将最终的混合物(0.2ml)置于微量离心管内，在4℃放置过夜以使其凝胶化。凝胶贮存过夜后，在pH为7.5的10mM Tris缓冲液中进行体外释放。酯化度为30mol％的该藻酸乙酯凝胶表现出低于5％的爆发性释放，并表现出缓释，在1天内释放了20％，在2天内释放了40％。
                        实施例6
下述实施例表明了含有蛋白药物(GCSF)的藻酸苄酯(DE=30mol％)凝胶的制备以及在体外药物从该凝胶中的缓释。
以类似于实施例5所述的方式进行本实施例，只是使用藻酸苄酯来代替藻酸己酯。藻酸酯在过夜贮存中凝胶化。酯化度为30mol％的藻酸苄酯凝胶表现出低于5％的爆发性释放，并表现出缓释，在1天内释放了40％，在2天内释放了80％。
                        实施例7
该实施例表明了藻酸乙酯珠的制备。
该凝胶珠是通过将2％藻酸乙酯溶液滴加到100mM氯化钙溶液(蒸馏水或1M Tris HCl pH7.0缓冲液)中制得的。用蒸馏水或缓冲液洗涤形成的珠子。采用30％或50％酯化度制备珠子。
                        实施例8
该实施例表明了含有Leptin的藻酸酯珠的制备。
该珠子是通过将25mg/ml的Leptin在2％藻酸乙酯(Tris HCl,pH8.7)中的溶液滴加到100mM氯化钙和25mM氯化锌溶液中制得的。采用30％酯化度制备珠子。所得珠子在体外表现出持续的Leptin释放。
                        实施例9
该实施例表明了藻酸酯在缓冲液中于中性生理pH下的分子量分解(或降解)。
将藻酸酯(1％溶液)溶于磷酸盐缓冲液(0.1M磷酸钠，pH6.8)或0.1M Tris缓冲液(pH7.0)中，并在37℃培养。通过在选择的时间间隔下测定溶液粘度的下降(Brookfield,25℃)来测定分子量分解。结果发现未修饰的藻酸钠相当稳定，因为其粘度在8天内仅下降了5％(磷酸盐缓冲液)。然而，藻酸乙酯和藻酸苄酯(DE=30％)在8天内在相同缓冲液中下降了35％。藻酸酯的降解量还取决于酯化度，例如具有较低酯化度(DE=15％)的藻酸乙酯，其粘度在8天内下降了25％。因此分子量分解与酯化度直接相关。
                        实施例10
该实施例表明了不含有蛋白的藻酸酯水凝胶和含有蛋白的藻酸酯水凝胶在体内的降解(或逐渐消失)。
按照类似于实施例3所述的方式制备藻酸酯凝胶，但是将最终的混合物置于注射器中，并在注射器中于4℃过夜凝胶化。然后将100μL凝胶皮下注射到小鼠(Charles River,12周大小的雌性小鼠，BDF1,20g，每组5只)的颈背部，并且定期通过手术检查每组的不同小鼠的注射位点。
使用DE=30％的藻酸乙酯和藻酸苄酯，该单次注射位点试验的结果表明，藻酸酯水凝胶在2周内消失。使用DE=15％的藻酸乙酯凝胶，在第30和61天仍存在凝胶，但是尺寸减小了。使用DE=5％的藻酸乙酯材料，在30和61天凝胶还存在，尺寸减小很少。使用未取代的藻酸钠材料，在整个61天期间凝胶保持相对不变。
含有或未含有蛋白的藻酸酯凝胶的消失速度相似。
                      实施例11
该实施例提供了关于藻酸酯水凝胶在大鼠中的体重减轻和药动学数据。
按照类似于实施例4所述的方式制备藻酸乙酯凝胶，但是将最终的混合物置于注射器中，并在注射器中于4℃过夜凝胶化。给大鼠提供0mg/kg(对照)和100mg/kg的快速浓注剂量(bolus dose)，然后监测7天血液水平和体重减轻情况。
结果表明：DE=5mol％的藻酸乙酯在3天内表现出约2000ng/mL的稳定血液水平，在3-4天后降至2-3ng/ml；DE=15mol％的藻酸乙酯在2天内表现出约2000ng/mL的稳定血液水平，在第5天下降至2-3ng/ml；DE=30mol％的藻酸乙酯在1天内表现出约2000ng/mL的稳定血液水平，在第4天下降至2-3ng/ml；Zn-leptin悬浮液的血液水平在12个小时达到峰值，在第6天下降至1-2ng/ml。所有动物都表现出体重减轻，表明Zn-leptin是有活性的。结果还表明，在藻酸乙酯凝胶(DE=5mol％和15mol％)中掺入Zn-leptin几乎使Zn-leptin曲线下面积(AUC)翻倍(因数(factor)为1.8-1.9)，这意味着生物利用度翻倍；使用藻酸乙酯凝胶(DE=30mol％)表现出类似于Zn-leptin的生物利用度(基于AUC)。

Claims (63)

1．缓释凝胶组合物，包含：
a)亲水性聚合物；
b)生物活性剂；和
c)至少一种结合的多价金属离子，其中所述凝胶是生物可降解的。
2．权利要求1的缓释组合物，其中所述结合的多价金属离子是结合和未结合多价金属离子的混合物。
3．权利要求1的缓释凝胶，所述凝胶还包含用于稳定生物活性剂或亲水性聚合物的赋形剂。
4．权利要求1的组合物，其中所述结合的多价金属离子是选自其乙酸盐、磷酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、氯化物、碳酸盐或氢氧化物的盐。
5．权利要求4的组合物，其中所述金属离子选自锰离子、锶离子、铁离子、镁离子、钙离子、钡离子、铜离子、铝离子或锌离子。
6．权利要求5的组合物，其中所述金属离子是钙离子。
7．权利要求1的组合物，其中所述质子供给体是得自酸来源。
8．权利要求7的组合物，其中所述酸来源选自缓冲液、酯、溶解缓慢的酸或内酯。
9．权利要求1的组合物，其中所述亲水性聚合物是聚阴离子。
10．权利要求1的组合物，其中所述亲水性聚合物是多糖。
11．权利要求10的组合物，其中所述多糖是酸性多糖。
12．权利要求11的组合物，其中所述多糖是藻酸酯。
13．权利要求12的组合物，其中所述藻酸酯包含至少30％的古洛糖醛酸。
14．权利要求12的组合物，其中所述藻酸酯占至少0.05％重量。
15．权利要求1的组合物，其中所述生物活性剂包括蛋白，并且所述组合物改善了生物利用度。
16．权利要求15的组合物，其中蛋白占至少0.001mg/ml。
17．权利要求15的组合物，其中所述蛋白选自造血因子、集落刺激因子、抗肥胖因子、生长因子、营养因子、和抗炎因子。
18．权利要求15的组合物，其中所述蛋白选自leptin、G-CSF、SCF、BDNF、GDNF、NT3、GM-CSF、IL-1ra、IL2、TNF-bp、MGDF、OPG、干扰素、促红细胞生成素、KGF、胰岛素和它们的类似物或衍生物。
19．权利要求1的组合物，其中所述生物活性剂是复合生物活性剂。
20．权利要求19的组合物，其中所述复合生物活性剂是沉淀蛋白。
21．权利要求20的组合物，其中所述沉淀蛋白是Zn-leptin沉淀。
22．制备缓释凝胶组合物的方法，其中所述凝胶是生物可降解的，所述方法包括下述步骤：
a)将生物活性剂与亲水性聚合物在溶剂中混合以形成第一个混合物；
b)将第一个混合物与至少一种结合的多价金属离子混合以形成第二个混合物。
23．权利要求22的方法，其中还包括步骤c)将第二个混合物与至少一种能释放结合的多价金属离子的质子供给体混合。
24．权利要求22的方法，其中在与质子给体或结合的多价金属离子混合前将第一个混合物浓缩。
25．权利要求22的方法，其中所述结合的多价金属离子是选自其乙酸盐、磷酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、氯化物、碳酸盐或氢氧化物的盐。
26．权利要求22的方法，其中所述方法给患者提供了在一定时间内基本上恒定的所述生物活性剂的血液水平。
27．权利要求24的组合物，其中所述金属离子选自锰离子、锶离子、铁离子、镁离子、钙离子、钡离子、铜离子、铝离子或锌离子。
28．权利要求26的组合物，其中所述金属离子是钙离子。
29．权利要求23的组合物，其中所述质子供给体是得自酸来源。
30．权利要求28的组合物，其中所述溶解缓慢的酸选自缓冲液、酯、溶解缓慢的酸或内酯。
31．权利要求29的组合物，其中所述酸来源是δ-葡萄糖酸内酯。
32．权利要求22的组合物，其中所述亲水性聚合物是聚阴离子。
33．权利要求22的组合物，其中所述亲水性聚合物是多糖。
34．权利要求32的组合物，其中所述多糖是酸性多糖。
35．权利要求33的组合物，其中所述多糖是藻酸酯。
36．权利要求34的组合物，其中所述藻酸酯包含至少30％的古洛糖醛酸。
37．权利要求34的组合物，其中所述藻酸酯占至少0.05％重量。
38．权利要求22的组合物，其中所述生物活性剂包括蛋白。
39．权利要求37的组合物，其中蛋白占至少0.001mg/ml。
40．权利要求37的组合物，其中所述蛋白选自造血因子、集落刺激因子、抗肥胖因子、生长因子、营养因子、和抗炎因子。
41．权利要求37的组合物，其中所述蛋白选自leptin、G-CSF、SCF、BDNF、GDNF、NT3、GM-CSF、IL-1ra、IL2、TNF-bp、MGDF、OPG、干扰素、促红细胞生成素、KGF和它们的类似物或衍生物。
42．权利要求22的组合物，其中所述生物活性剂是复合生物活性剂。
43．权利要求41的组合物，其中所述复合生物活性剂是沉淀蛋白。
44．权利要求42的组合物，其中所述沉淀蛋白是Zn-leptin沉淀。
45．权利要求22的方法，该方法还包括分离缓释组合物的步骤。
46．通过权利要求22或44的方法制得的缓释产品。
47．在可药用载体、稀释剂或辅料中包含权利要求1、2、3或45的缓释组合物的药物制剂。
48．权利要求46的药物制剂，其中，制成制剂是在注射器中进行。
49．以在可药用载体、稀释剂或辅料中的权利要求1,2,3或45的缓释组合物治疗适应症的方法。
50．用在可药用载体、稀释剂或辅料中的权利要求1、2、3或45的缓释组合物治疗选自肥胖、糖尿病、高血脂、动脉硬化、动脉斑的疾病；减轻或防止生成胆结石、肌肉组织质量不足、对胰岛素敏感性不足、和中风的方法，其中所述生物活性剂是leptin、其类似物或衍生物。
51．用在可药用载体、稀释剂或辅料中的权利要求1、2、3或45的缓释组合物治疗选自造血细胞不足、感染、和嗜中性白细胞减少症的方法，其中所述生物活性剂是G-CSF、其类似物或衍生物。
52．用在可药用载体、稀释剂或辅料中的权利要求1、2、3或45的缓释组合物治疗炎症的方法，其中所述生物活性剂是IL-1ra、其类似物或衍生物。
53．缓释组合物，包含：
a)亲水性聚合物；
b)生物活性剂；和
c)至少一种沉淀剂；
其特征在于，所述生物活性剂在亲水性聚合物内共沉淀，其中所述组合物是凝胶颗粒形式，并且所述凝胶颗粒是生物可降解的。
54．权利要求52的组合物，其中所述沉淀剂选自多价金属离子或其盐、乙酸盐、柠檬酸盐、氯化物、碳酸盐或氢氧化物。
55．权利要求53的组合物，其中所述金属离子选自锰离子、锶离子、铁离子、镁离子、钙离子、钡离子、铜离子、铝离子或锌离子。
56．权利要求54的组合物，其中所述沉淀剂是选自锌离子、钙离子或它们的组合的多价离子。
57．权利要求52的组合物，其中所述亲水性聚合物是多糖。
58．权利要求56的组合物，其中所述多糖是藻酸酯。
59．制备缓释组合物的方法，该方法包括下述步骤：
a)用溶剂将生物活性剂和亲水性聚合物溶解以形成第一个混合物；
b)将至少一种沉淀剂溶于溶剂中以形成第二个混合物；
c)将第一个混合物与第二个混合物混合；和
d)将生物活性剂与亲水性聚合物共沉淀以形成共沉淀的凝胶颗粒，其中所述颗粒是生物可降解的。
60．权利要求58的方法，该方法还包括分离共沉淀的颗粒的步骤。
61．通过权利要求59的方法制得的缓释产品。
62．在可药用载体、稀释剂或辅料中的权利要求52的药物制剂。
63．用在可药用载体、稀释剂或辅料中的权利要求52的缓释组合物治疗适应征的方法。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101170963B (zh) * 2005-02-28 2011-04-20 尼奥斯治疗公司 制备缓释液体制剂的组合物和方法
CN109293138A (zh) * 2018-10-08 2019-02-01 曹布道 一种养殖污水净化处理方法
CN114539442A (zh) * 2022-04-02 2022-05-27 青岛海之林生物科技开发有限公司 一种脂溶性藻酸乙酯及其制备方法与应用
CN115850533A (zh) * 2022-09-28 2023-03-28 青岛格诚经纬生物科技有限公司 一种海藻酸材料及其制备方法、应用

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20010007673A1 (en) * 1999-11-12 2001-07-12 Merrill Seymour Goldenberg Sustained-release delayed gels
KR100426636B1 (ko) * 2001-05-18 2004-04-08 한국과학기술연구원 주사 가능한 젤 상의 조성물 및 그의 제조방법
WO2002100425A1 (en) * 2001-06-11 2002-12-19 Ltt Institute Co., Ltd. Aggregate composition for sustained-release preparation, process for producing the same, and sustained-release preparation containing the same
AU2003205106A1 (en) * 2002-01-16 2003-09-02 Agency For Disease Diagnosis And Prevention Pace-a microspheres for delivery of antigens
US6592852B1 (en) * 2002-04-25 2003-07-15 Unilever Home & Personal Care Usa, Division Of Conopco, Inc. Zinc citrate beads in oral compositions
KR100523953B1 (ko) * 2002-08-27 2005-10-25 주식회사 엘지생명과학 천연다당류와 히알루론산의 마이크로비드 및 이의 제조 방법
KR100507545B1 (ko) * 2002-09-03 2005-08-09 주식회사 엘지생명과학 히알루론산 유도체 및 그의 제조방법
JP4459543B2 (ja) 2003-03-17 2010-04-28 株式会社メドジェル 徐放性ハイドロゲル製剤
SI1682184T1 (sl) * 2003-11-04 2014-02-28 Lek Pharmaceuticals D.D. Stabilen farmacevtski sestavek, obsegajoč faktor za stimulacijo kolonije granulocitov
CN1319525C (zh) * 2004-09-16 2007-06-06 北京圣医耀科技发展有限责任公司 紫杉醇－海藻酸钠微球血管栓塞剂及其制备
EP1803464A4 (en) * 2004-09-17 2009-09-09 Cellgentech Inc TOPICAL PREPARATION FOR THE TREATMENT OF SKIN DISEASES
CA2583373C (en) * 2004-10-12 2013-09-03 Fmc Biopolymer As Self-gelling alginate systems and uses thereof
US8414907B2 (en) 2005-04-28 2013-04-09 Warsaw Orthopedic, Inc. Coatings on medical implants to guide soft tissue healing
US9119901B2 (en) 2005-04-28 2015-09-01 Warsaw Orthopedic, Inc. Surface treatments for promoting selective tissue attachment to medical impants
US8663686B2 (en) * 2005-05-09 2014-03-04 University Of Washington Biodegradable chitosan-PEG compositions and methods of use
US9012605B2 (en) 2006-01-23 2015-04-21 Amgen Inc. Crystalline polypeptides
US20080085295A1 (en) * 2006-07-14 2008-04-10 Fmc Biopolymer As Hydrogels containing low molecular weight alginates and biostructures made therefrom
DE102007039871A1 (de) * 2007-08-21 2009-02-26 Friedrich-Baur-Gmbh Weichgewebe-Implantat mit antibakterieller Wirkung
CN103463638A (zh) * 2007-08-28 2013-12-25 Fmc有限公司 延迟的自胶凝藻酸盐体系及其应用
ES2327375B1 (es) 2007-11-14 2010-08-05 Universidad Del Pais Vasco Empleo de microparticulas para su uso como vacunas y la liberacion de moleculas biologicamente activas.
US20090183503A1 (en) * 2008-01-18 2009-07-23 Alberto Verdesi Exhaust apparatus
US20100015240A1 (en) * 2008-07-16 2010-01-21 Danielle Biggs Process for preparing microparticles containing bioactive peptides
US9446168B2 (en) 2010-06-07 2016-09-20 Beta-O2 Technologies Ltd. Multiple-layer immune barrier for donor cells
WO2010032242A1 (en) * 2008-09-17 2010-03-25 Beta O2 Technologies Ltd. Optimization of alginate encapsulation of islets for transplantation
CA2780274C (en) 2009-11-09 2018-06-26 Spotlight Technology Partners Llc Fragmented hydrogels
CA2780294C (en) 2009-11-09 2018-01-16 Spotlight Technology Partners Llc Polysaccharide based hydrogels
US20130149349A1 (en) * 2010-06-03 2013-06-13 Indiana University Research And Technology Corporation Use of compounds with thrombopoietic activity to promote bone growth and healing
WO2012005783A1 (en) 2010-07-09 2012-01-12 Board Of Regents Of The University Of Texas System Biodegradable scaffolds
CR20160147A (es) 2011-03-25 2016-08-03 Amgen Inc Formulaciones de anticuerpos
CN102489027B (zh) * 2011-12-12 2014-06-04 山东凯翔生物化工有限公司 一种葡萄糖酸内酯节能浓缩方法及装置
CN103830266A (zh) * 2013-04-24 2014-06-04 杨亚勤 部分氧化海藻酸钠羧甲基化衍生物的制备方法和应用
RU2548777C2 (ru) * 2013-07-09 2015-04-20 Александр Александрович Кролевец Способ получения частиц инкапсулированных жирорастворимой полимерной оболочкой солей металлов, обладающих супрамолекулярными свойствами
US10611850B2 (en) 2014-07-14 2020-04-07 Amgen Inc. Crystalline antibody formulations
AU2015289874A1 (en) 2014-07-14 2017-02-02 Amgen Inc. Crystalline antibody formulations
CA2995372C (en) * 2015-08-13 2023-10-24 Northeastern University Biomaterials for combined radiotherapy and immunotherapy of cancer
EP3501553A1 (en) * 2017-12-21 2019-06-26 Association for the Advancement of Tissue Engineering and Cell based Technologies & Therapies (A4TEC) - Associação Hydrogel comprising manganese, methods and uses thereof
WO2020254179A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Alfasigma S.P.A. Pharmaceutical compositions in the form of gel containing xyloglucan and alcohols for the controlled release of active ingredients
CN112426981B (zh) * 2020-11-30 2021-12-28 西安交通大学 一种金属离子交联水凝胶及制备方法和应用
CN114685778B (zh) * 2020-12-30 2023-10-17 苏州艾博生物科技有限公司 长循环阳离子脂质体的合成方法
CN112843328B (zh) * 2021-02-25 2022-05-13 山东大学 一种具有抑菌作用的鲍鱼壳粉/ZnO复合材料掺杂的智能水凝胶伤口敷料的制备方法

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3640741A (en) * 1970-02-24 1972-02-08 Hollister Inc Composition containing gel
JPS5416979B2 (zh) * 1972-01-08 1979-06-26
US4401456A (en) * 1980-01-09 1983-08-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Controlled release of bioactive materials using alginate gel beads
US4690682A (en) * 1983-04-15 1987-09-01 Damon Biotech, Inc. Sustained release
US4789516A (en) * 1983-04-15 1988-12-06 Damon Biotech, Inc Production of sustained released system
US4744933A (en) * 1984-02-15 1988-05-17 Massachusetts Institute Of Technology Process for encapsulation and encapsulated active material system
CA1215922A (en) * 1984-05-25 1986-12-30 Connaught Laboratories Limited Microencapsulation of living tissue and cells
US5147861A (en) * 1986-06-30 1992-09-15 Fidia S.P.A. Esters of alginic acid
JPS645460A (en) * 1987-06-29 1989-01-10 Sanei Kagaku Kogyo Kk Production of delaying gelatinous material
JPH07503943A (ja) * 1991-10-29 1995-04-27 クローバー　コンソリデイテッド，リミテッド 封入及び薬剤放出に有用な架橋性の多糖類、ポリカチオン及び脂質
US5656297A (en) * 1992-03-12 1997-08-12 Alkermes Controlled Therapeutics, Incorporated Modulated release from biocompatible polymers
GB2275686B (en) * 1993-03-03 1997-04-30 Johnson & Johnson Medical Swellable wound dressing materials
US5709854A (en) * 1993-04-30 1998-01-20 Massachusetts Institute Of Technology Tissue formation by injecting a cell-polymeric solution that gels in vivo
JPH10503179A (ja) * 1994-06-24 1998-03-24 イミュネックス・コーポレーション 放出制御性ポリペプチド組成物および炎症性腸疾患の治療方法
US5660859A (en) * 1994-12-29 1997-08-26 Mcneil-Ppc, Inc. Gelling agent for polyethylene glycol
WO1997015322A1 (en) * 1995-10-25 1997-05-01 The Regents Of The University Of California Methods for restoring or enhancing reproductive function in reproductively impaired hosts
JP2000505791A (ja) * 1996-01-25 2000-05-16 イーライ・リリー・アンド・カンパニー 肥満症タンパク質類似体化合物およびその製剤
US6656508B2 (en) * 1997-04-17 2003-12-02 Amgen Inc. Sustained-release alginate gels
EA199901013A1 (ru) * 1997-05-16 2000-06-26 Амген Инк. Гели пролонгированного действия
GB2339442B (en) * 1998-07-09 2002-06-05 Smith International Downhole tension swivel sub

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101170963B (zh) * 2005-02-28 2011-04-20 尼奥斯治疗公司 制备缓释液体制剂的组合物和方法
CN109293138A (zh) * 2018-10-08 2019-02-01 曹布道 一种养殖污水净化处理方法
CN114539442A (zh) * 2022-04-02 2022-05-27 青岛海之林生物科技开发有限公司 一种脂溶性藻酸乙酯及其制备方法与应用
CN115850533A (zh) * 2022-09-28 2023-03-28 青岛格诚经纬生物科技有限公司 一种海藻酸材料及其制备方法、应用

Also Published As

Publication number Publication date
AU3993999A (en) 1999-12-06
BR9910553A (pt) 2001-01-30
EP1079811A1 (en) 2001-03-07
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