CN116381253A - 偶联物的制备方法 - Google Patents
偶联物的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116381253A CN116381253A CN202310508418.2A CN202310508418A CN116381253A CN 116381253 A CN116381253 A CN 116381253A CN 202310508418 A CN202310508418 A CN 202310508418A CN 116381253 A CN116381253 A CN 116381253A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- glucose
- methotrexate
- phosphate dehydrogenase
- buffer
- mutant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 claims abstract description 38
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 claims abstract description 38
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 claims abstract description 38
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims abstract description 9
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical class C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims description 73
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 23
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 claims description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 5
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000010 aprotic solvent Substances 0.000 claims description 3
- RZQXOGQSPBYUKH-UHFFFAOYSA-N 3-[[1,3-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)propan-2-yl]azaniumyl]-2-hydroxypropane-1-sulfonate Chemical compound OCC(CO)(CO)NCC(O)CS(O)(=O)=O RZQXOGQSPBYUKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108700016232 Arg(2)-Sar(4)- dermorphin (1-4) Proteins 0.000 claims description 2
- 238000011033 desalting Methods 0.000 claims description 2
- 239000004973 liquid crystal related substance Substances 0.000 claims 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 33
- 238000011002 quantification Methods 0.000 abstract 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 56
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 24
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 20
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 10
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 10
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 10
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 7
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 102000010705 glucose-6-phosphate dehydrogenase activity proteins Human genes 0.000 description 6
- 108040005050 glucose-6-phosphate dehydrogenase activity proteins Proteins 0.000 description 6
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 6
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 5
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 4
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 229940045189 glucose-6-phosphate Drugs 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 3
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 229940035722 triiodothyronine Drugs 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 2
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 2
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N Thyrolar Chemical compound IC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC=C(O)C(I)=C1 AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 208000034953 Twin anemia-polycythemia sequence Diseases 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 239000004052 folic acid antagonist Substances 0.000 description 2
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 102200061299 rs1064794096 Human genes 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N theophylline Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2 ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 2
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 2
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N (+)-estrone Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIKROCXWUNQSPJ-VIFPVBQESA-N (-)-cotinine Chemical compound C1CC(=O)N(C)[C@@H]1C1=CC=CN=C1 UIKROCXWUNQSPJ-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- PROQIPRRNZUXQM-UHFFFAOYSA-N (16alpha,17betaOH)-Estra-1,3,5(10)-triene-3,16,17-triol Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(C(O)C4)O)C4C3CCC2=C1 PROQIPRRNZUXQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PUWBXDQHRRUKNY-CKOVTTQDSA-N (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O PUWBXDQHRRUKNY-CKOVTTQDSA-N 0.000 description 1
- JWUBBDSIWDLEOM-XHQRYOPUSA-N (3e)-3-[(2e)-2-[1-(6-hydroxy-6-methylheptan-2-yl)-7a-methyl-2,3,3a,5,6,7-hexahydro-1h-inden-4-ylidene]ethylidene]-4-methylidenecyclohexan-1-ol Chemical compound C1CCC2(C)C(C(CCCC(C)(C)O)C)CCC2\C1=C\C=C1/CC(O)CCC1=C JWUBBDSIWDLEOM-XHQRYOPUSA-N 0.000 description 1
- FMNQRUKVXAQEAZ-JNRFBPFXSA-N (5z,8s,9r,10e,12s)-9,12-dihydroxy-8-[(1s)-1-hydroxy-3-oxopropyl]heptadeca-5,10-dienoic acid Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@@H](O)[C@H]([C@@H](O)CC=O)C\C=C/CCCC(O)=O FMNQRUKVXAQEAZ-JNRFBPFXSA-N 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182837 (R)-adrenaline Natural products 0.000 description 1
- GMRQFYUYWCNGIN-ZVUFCXRFSA-N 1,25-dihydroxy vitamin D3 Chemical compound C1([C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@@H](CCCC(C)(C)O)C)=CC=C1C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C GMRQFYUYWCNGIN-ZVUFCXRFSA-N 0.000 description 1
- FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxy-7-azabenzotriazole Chemical compound C1=CN=C2N(O)N=NC2=C1 FPIRBHDGWMWJEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 description 1
- DBPWSSGDRRHUNT-UHFFFAOYSA-N 17alpha-hydroxy progesterone Natural products C1CC2=CC(=O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(=O)C)(O)C1(C)CC2 DBPWSSGDRRHUNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- SFRDXVJWXWOTEW-UHFFFAOYSA-N 2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(CO)CO SFRDXVJWXWOTEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NCPQROHLJFARLL-UHFFFAOYSA-N 4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoic acid Chemical compound OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O NCPQROHLJFARLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- KFGOFTHODYBSGM-IJCBKZNRSA-N 6-Keto-prostaglandin F1a Chemical compound CCCCC[C@H](O)C=C[C@H]1[C@H](O)C[C@H](O)[C@@H]1CC(=O)CCCCC(O)=O KFGOFTHODYBSGM-IJCBKZNRSA-N 0.000 description 1
- KFGOFTHODYBSGM-UHFFFAOYSA-N 6-Oxoprostaglandin F1alpha Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(O)C1CC(=O)CCCCC(O)=O KFGOFTHODYBSGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000830 Acute leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 239000000275 Adrenocorticotropic Hormone Substances 0.000 description 1
- PQSUYGKTWSAVDQ-ZVIOFETBSA-N Aldosterone Chemical compound C([C@@]1([C@@H](C(=O)CO)CC[C@H]1[C@@H]1CC2)C=O)[C@H](O)[C@@H]1[C@]1(C)C2=CC(=O)CC1 PQSUYGKTWSAVDQ-ZVIOFETBSA-N 0.000 description 1
- PQSUYGKTWSAVDQ-UHFFFAOYSA-N Aldosterone Natural products C1CC2C3CCC(C(=O)CO)C3(C=O)CC(O)C2C2(C)C1=CC(=O)CC2 PQSUYGKTWSAVDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010064733 Angiotensins Proteins 0.000 description 1
- 102000015427 Angiotensins Human genes 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 1
- 101100013805 Aspergillus niger gsdA gene Proteins 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical class OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010075254 C-Peptide Proteins 0.000 description 1
- 235000021318 Calcifediol Nutrition 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 101800001982 Cholecystokinin Proteins 0.000 description 1
- 102100025841 Cholecystokinin Human genes 0.000 description 1
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 description 1
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 description 1
- 101800000414 Corticotropin Proteins 0.000 description 1
- 102400000739 Corticotropin Human genes 0.000 description 1
- UIKROCXWUNQSPJ-UHFFFAOYSA-N Cotinine Natural products C1CC(=O)N(C)C1C1=CC=CN=C1 UIKROCXWUNQSPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDJUZGPOPHTGOT-OAXVISGBSA-N Digitoxin Natural products O([C@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2C[C@@H]3[C@@](C)([C@@H]4[C@H]([C@]5(O)[C@@](C)([C@H](C6=CC(=O)OC6)CC5)CC4)CC3)CC2)C[C@H]1O)[C@H]1O[C@@H](C)[C@H](O[C@H]2O[C@@H](C)[C@@H](O)[C@@H](O)C2)[C@@H](O)C1 WDJUZGPOPHTGOT-OAXVISGBSA-N 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N Digoxin Natural products O([C@H]1[C@H](C)O[C@H](O[C@@H]2C[C@@H]3[C@@](C)([C@@H]4[C@H]([C@]5(O)[C@](C)([C@H](O)C4)[C@H](C4=CC(=O)OC4)CC5)CC3)CC2)C[C@@H]1O)[C@H]1O[C@H](C)[C@@H](O[C@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)C2)[C@@H](O)C1 LTMHDMANZUZIPE-AMTYYWEZSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 1
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 1
- DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N Estrone Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 1
- 206010015946 Eye irritation Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 1
- 101800002068 Galanin Proteins 0.000 description 1
- 102400001370 Galanin Human genes 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 108010007979 Glycocholic Acid Proteins 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DOMWKUIIPQCAJU-LJHIYBGHSA-N Hydroxyprogesterone caproate Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(C)=O)(OC(=O)CCCCC)[C@@]1(C)CC2 DOMWKUIIPQCAJU-LJHIYBGHSA-N 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 206010060820 Joint injury Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 1
- 241001468196 Leuconostoc pseudomesenteroides Species 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LILMPCQZFWXQAP-HQVZTVAUSA-N NCC(C(=O)O)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)C1=CC=C(NCC2=CN=C3N=C(N)NC(=O)C3=N2)C=C1 Chemical compound NCC(C(=O)O)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)C1=CC=C(NCC2=CN=C3N=C(N)NC(=O)C3=N2)C=C1 LILMPCQZFWXQAP-HQVZTVAUSA-N 0.000 description 1
- RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N Na salt-Glycocholic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 RFDAIACWWDREDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101800003845 Neuropeptide Y Proteins 0.000 description 1
- 102400000064 Neuropeptide Y Human genes 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 101800001814 Neurotensin Proteins 0.000 description 1
- 102400001103 Neurotensin Human genes 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000004067 Osteocalcin Human genes 0.000 description 1
- 108090000573 Osteocalcin Proteins 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N Phenytoin Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C1(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004353 Polyethylene glycol 8000 Substances 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 108010048233 Procalcitonin Proteins 0.000 description 1
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102100028255 Renin Human genes 0.000 description 1
- 108090000783 Renin Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 108010086019 Secretin Proteins 0.000 description 1
- 102100037505 Secretin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 description 1
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 1
- XNRNNGPBEPRNAR-UHFFFAOYSA-N Thromboxane B2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1OC(O)CC(O)C1CC=CCCCC(O)=O XNRNNGPBEPRNAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 1
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 description 1
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 235000009754 Vitis X bourquina Nutrition 0.000 description 1
- 235000012333 Vitis X labruscana Nutrition 0.000 description 1
- 240000006365 Vitis vinifera Species 0.000 description 1
- 235000014787 Vitis vinifera Nutrition 0.000 description 1
- 238000011481 absorbance measurement Methods 0.000 description 1
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 1
- VFRROHXSMXFLSN-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose 6-phosphate Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O VFRROHXSMXFLSN-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002478 aldosterone Drugs 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910000288 alkali metal carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008041 alkali metal carbonates Chemical class 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 1
- 229960005260 amiodarone Drugs 0.000 description 1
- IYIKLHRQXLHMJQ-UHFFFAOYSA-N amiodarone Chemical compound CCCCC=1OC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC(I)=C(OCCN(CC)CC)C(I)=C1 IYIKLHRQXLHMJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AEMFNILZOJDQLW-QAGGRKNESA-N androst-4-ene-3,17-dione Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 AEMFNILZOJDQLW-QAGGRKNESA-N 0.000 description 1
- 229960003473 androstanolone Drugs 0.000 description 1
- 229960005471 androstenedione Drugs 0.000 description 1
- AEMFNILZOJDQLW-UHFFFAOYSA-N androstenedione Natural products O=C1CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 AEMFNILZOJDQLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000003432 anti-folate effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940127074 antifolate Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 description 1
- 229960000892 attapulgite Drugs 0.000 description 1
- 206010003883 azoospermia Diseases 0.000 description 1
- 239000007982 barbital buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- -1 bromoacetyl Chemical group 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940097217 cardiac glycoside Drugs 0.000 description 1
- 239000002368 cardiac glycoside Substances 0.000 description 1
- 150000003943 catecholamines Chemical class 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 229940107137 cholecystokinin Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229960000258 corticotropin Drugs 0.000 description 1
- IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N corticotropin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)C1=CC=C(O)C=C1 IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N 0.000 description 1
- 229950006073 cotinine Drugs 0.000 description 1
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 1
- ZOOGRGPOEVQQDX-KHLHZJAASA-N cyclic guanosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)O[P@](O)(=O)O[C@@H]1[C@H](O)[C@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-KHLHZJAASA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 229960000648 digitoxin Drugs 0.000 description 1
- WDJUZGPOPHTGOT-XUDUSOBPSA-N digitoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)CC5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O WDJUZGPOPHTGOT-XUDUSOBPSA-N 0.000 description 1
- 229960005156 digoxin Drugs 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N digoxin Chemical compound C1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@@H]3C[C@@H]4[C@]([C@@H]5[C@H]([C@]6(CC[C@@H]([C@@]6(C)[C@H](O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)C[C@@H]2O)C)C[C@@H]1O LTMHDMANZUZIPE-PUGKRICDSA-N 0.000 description 1
- LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N digoxine Natural products C1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(C)OC(OC2C(OC(OC3CC4C(C5C(C6(CCC(C6(C)C(O)C5)C=5COC(=O)C=5)O)CC4)(C)CC3)CC2O)C)CC1O LTMHDMANZUZIPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003511 ectopic pregnancy Diseases 0.000 description 1
- 229960005139 epinephrine Drugs 0.000 description 1
- 229960001123 epoprostenol Drugs 0.000 description 1
- KAQKFAOMNZTLHT-VVUHWYTRSA-N epoprostenol Chemical compound O1C(=CCCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H](O)C[C@@H]21 KAQKFAOMNZTLHT-VVUHWYTRSA-N 0.000 description 1
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 229960001348 estriol Drugs 0.000 description 1
- PROQIPRRNZUXQM-ZXXIGWHRSA-N estriol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H]([C@H](O)C4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 PROQIPRRNZUXQM-ZXXIGWHRSA-N 0.000 description 1
- 229960003399 estrone Drugs 0.000 description 1
- DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hydrate Chemical compound O.CCOCC DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 231100000013 eye irritation Toxicity 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N glycocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 description 1
- 229940099347 glycocholic acid Drugs 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 229940084986 human chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 229950000801 hydroxyprogesterone caproate Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- GUWHRJQTTVADPB-UHFFFAOYSA-N lithium azide Chemical compound [Li+].[N-]=[N+]=[N-] GUWHRJQTTVADPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 description 1
- SLZIZIJTGAYEKK-CIJSCKBQSA-N molport-023-220-247 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CN)[C@@H](C)O)C1=CNC=N1 SLZIZIJTGAYEKK-CIJSCKBQSA-N 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001452 natriuretic effect Effects 0.000 description 1
- PCJGZPGTCUMMOT-ISULXFBGSA-N neurotensin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 PCJGZPGTCUMMOT-ISULXFBGSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008634 oligospermia Diseases 0.000 description 1
- 230000036616 oligospermia Effects 0.000 description 1
- 231100000528 oligospermia Toxicity 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- LPMXVESGRSUGHW-HBYQJFLCSA-N ouabain Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C[C@@]2(O)CC[C@H]3[C@@]4(O)CC[C@H](C=5COC(=O)C=5)[C@@]4(C)C[C@@H](O)[C@@H]3[C@@]2(CO)[C@H](O)C1 LPMXVESGRSUGHW-HBYQJFLCSA-N 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052625 palygorskite Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002036 phenytoin Drugs 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003169 placental effect Effects 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 229940093429 polyethylene glycol 6000 Drugs 0.000 description 1
- 229940085678 polyethylene glycol 8000 Drugs 0.000 description 1
- 235000019446 polyethylene glycol 8000 Nutrition 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 1
- CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N procalcitonin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(O)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CSSC1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 CWCXERYKLSEGEZ-KDKHKZEGSA-N 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 229940001470 psychoactive drug Drugs 0.000 description 1
- 239000004089 psychotropic agent Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229960002101 secretin Drugs 0.000 description 1
- OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N secretin human Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N sincalide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C1=CC=C(OS(O)(=O)=O)C=C1 IZTQOLKUZKXIRV-YRVFCXMDSA-N 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229930002534 steroid glycoside Natural products 0.000 description 1
- 208000002254 stillbirth Diseases 0.000 description 1
- 231100000537 stillbirth Toxicity 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229960001967 tacrolimus Drugs 0.000 description 1
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 description 1
- 230000003390 teratogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 229960000278 theophylline Drugs 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N thromboxane A2 Chemical compound OC(=O)CCC\C=C/C[C@@H]1[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)O[C@@H]2O[C@H]1C2 DSNBHJFQCNUKMA-SCKDECHMSA-N 0.000 description 1
- 230000001646 thyrotropic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical compound CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K trisodium;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylate;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O XPFJYKARVSSRHE-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960000281 trometamol Drugs 0.000 description 1
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 1
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本申请涉及偶联物的制备方法。具体而言，本申请的6‑磷酸葡萄糖脱氢酶突变体相较于野生型6‑磷酸葡萄糖脱氢酶包含选自以下的一个突变或其组合：D306C、D375C、G426C。使用本申请的6‑磷酸葡萄糖脱氢酶突变体所制备的检测试剂盒，其特异性强、灵敏度高、操作方便、检测时间短、定量准确，适合高通量检测。
Description
本申请是2020年1月7日提交的专利申请《6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备甲氨喋呤检测试剂中的用途》(申请号202010013644X)的分案申请。
技术领域
本申请涉及生物检测领域，特别是涉及一种突变的酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶(简称G6PDH)及其在甲氨喋呤检测试剂盒中的应用。
背景技术
半抗原，某些小分子物质(分子量小于4000Da)，其单独不能诱导免疫应答，即不具备免疫原性，但当其与大分子蛋白质或非抗原性的多聚赖氨酸等载体交联或结合后可获得免疫原性，诱导免疫应答。这些小分子物质可与应答效应产物结合，具备抗原性，它只有免疫反应性，不具免疫原性，又称不完全抗原。
半抗原能与对应抗体结合出现抗原-抗体反应，又不能单独激发人或动物体产生抗体的抗原。它只有免疫反应性，不具免疫原性，又称不完全抗原。大多数多糖、类脂、激素、小分子药物都属于半抗原。如果用化学方法把半抗原与某种蛋白分子(载体)结合，会获得新的免疫原性，并能刺激动物产生相应的抗体。
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，多采用竞争模式。原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，显色愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。
甲氨喋呤(Methotrexate)结构式如下所示：
甲氨喋呤又名氨甲基叶酸、甲氨蝶呤、氨甲喋呤，橙黄色结晶性粉末，熔点185至204℃，常温下暴露于空气中性质稳定，易溶于稀碱、酸或碱金属的碳酸盐溶液，微溶于稀盐酸，几乎不溶于水、乙醇、氯仿、乙醚。
甲氨喋呤为抗叶酸类抗肿瘤药，主要通过对二氢叶酸还原酶的抑制而达到阻碍肿瘤细胞的合成，而抑制肿瘤细胞的生长与繁殖。主要功能全身用药治疗绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、各类急性白血病、乳腺癌、肺癌、头颈部癌、消化道癌、宫颈癌及恶性淋巴瘤等。用动脉插管灌注对头颈部癌和肝癌也有较好疗效，而甲氨蝶呤与阿达木单抗等生物制剂联合用药，可以更有效地缓解关节风湿病患者的疾病症状，减缓关节损伤的进展，并且可以改善身体功能。还可在异位妊娠局部胎囊注射缓解出血。
甲氨喋呤是白血病的主要治疗药在使用，但1951年Gubner等人提出有关将氨基喋呤用于慢性RA是有效的报告后，作为RA的治疗药而受到注意，并主要在欧美使用。甲氨喋呤是处方药，必须由医生开置，高剂量可引起骨质疏松、关节痛、眼刺激以及糖尿病，还可能引起卵细胞缺乏和精子减少，生育能力减退。和其他叶酸拮抗剂一样，甲氨喋呤也有致畸作用，还可造成死胎。
基于上述原因，在治疗过程中需及时进行甲氨喋呤血药浓度监测，是辅助临床治疗、改善治疗效果、降低毒性风险的有效方式。
目前已知的甲氨喋呤检测方法主要有：高效液相色谱法(HPLC)、发光免疫、酶联免疫吸附剂测定(ELISA)等方法。高效液相色谱法可将药物与代谢产物以及内源性物质分离，具有专一性强的特点，是检测MTX血浆浓度的金标准，但该法需复杂的前处理过程和较长的测定时间，不适合大样本的快速检测。免疫法一定程度上会受到交叉反应的影响，但是其凭借快速、易操作的优点，已逐渐成为治疗药物监测的主要方法。发光免疫法试剂成本昂贵，不适合常规治疗药物检测，不利于大范围推广。
现有技术CN104569373A描述了一种甲氨蝶呤均相酶免疫检测试剂及其制备和检测方法，其中公开了6-磷酸葡萄糖脱氢酶和甲氨喋呤偶联物的制备方法：
a)配置缓冲溶液称取1.09g/L磷酸二氢钾、1.70g/L磷酸氢二钠、8.5g/L氯化钠，pH调为7.4；
b)称取3mg 6-磷酸葡萄糖脱氢酶，室温溶解于3mL前述a步骤所得溶液中，配置成6-磷酸葡萄糖脱氢酶溶液；
c)称取3mg甲氨蝶呤衍生物，室温溶解于300μL前述a步骤所得溶液中，配置成甲氨蝶呤衍生物溶液：甲氨蝶呤衍生物如下所示：
d)将前述b和c步骤所得溶液混合在在2-8℃搅拌1小时，使6-磷酸葡萄糖脱氢酶与甲氨蝶呤的末端羧基连接；
e)将上述d步骤所得混合溶液放置于前述a步骤所得溶液中进行透析纯化，获得6-磷酸葡萄糖脱氢酶-甲氨喋呤偶联物。
上述现有技术中仅仅指出酶与甲氨蝶呤的末端羧基进行连接，然而酶上存在众多可以和羧基发生结合的基团(如氨基)，那么将难以保证定向的偶联，因此仍存在所得偶联物一致性不强、试剂盒批间差异大的问题。
发明内容
鉴于本领域的需求，本申请提供了一种新型的6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体、及其在制备甲氨喋呤检测试剂盒中的用途。
根据一些实施方案，提供了一种6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体。区别于已有发表的专利US006090567A(Homogeneous immunoassays using mutant glucose-6-phosphatedehydrogenases)的6磷酸葡萄糖脱氢酶突变体，本申请的6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体，其包含选自以下的突变：D306C、D375C、G426C。
根据一些实施方案，提供了一种6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体，所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体是选自以下的序列所示：SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4。
根据一些实施方案，提供了一种多核苷酸，其编码本申请的6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体。
根据一些实施方案，提供了一种表达载体，其包含本申请的多核苷酸。
根据一些实施方案，提供了一种宿主细胞，其包含本申请的表达载体。宿主细胞可以是原核(如细菌)或真核(如酵母)。
根据一些实施方案，提供了一种偶联物，其是本申请的6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体与半抗原按照摩尔比1：1偶联而成。
在一些具体的实施方案中，半抗原的分子量为100Da至4000Da，例如：100、150、200、250、300、350、400、410、420、430、440、450、460、470、480、490、500、520、550、570、600、620、650、700、750、800、850、900、950、1000、1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2100、2200、2300、2400、2500、2600、2700、2800、2900、3000、3100、3200、3300、3400、3500、3600、3700、3800、3900、4000。
根据本申请，技术人员将理解，“半抗原”还包含其衍生物的形式。为了便于和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进行偶联，对于那些自身不带有偶联基团(例如，与巯基反应的基团)的半抗原(例如甲氨喋呤)，可以经改造而带有接头，以便和巯基共价结合。因此，在本申请中，半抗原衍生物是指，经改造而带有巯基反应基团的半抗原。
半抗原选自：小分子药物(如抗生素、精神药物)、激素、代谢物、糖、脂质、氨基酸。
半抗原例如但不限于：万古霉素、茶碱、苯妥英、维生素D、25羟维生素D、1，25双羟维生素D、叶酸、强心甙(包括地高辛、洋地黄毒苷)、酶酚酸、雷帕明、环孢霉素A、甲氨喋呤、乙胺碘复酮、甲胺喋呤、他克莫司、血清氨基酸、胆汁酸、甘胆酸、苯丙氨酸、乙醇、尿尼柯丁代谢产物柯替宁、尿吗啡、尿单羟酚衍生物、神经肽酪氨酸、血浆甘丙素、多胺、组织胺、促甲状腺激素、泌乳素、胎盘泌乳素、生长激素、促卵泡刺激素、促黄体生成素、促肾上腺皮质激素、抗利尿激素、降钙素、降钙素原、甲状旁腺激素、甲状腺素、三碘甲状原氨酸、反三碘甲状原氨酸、游离甲状腺素、游离三碘甲状原氨酸、皮质醇、尿17-羟皮质类固醇、尿17-酮类固醇、脱氢表雄酮及硫酸酯、醛固酮、尿香草苦杏仁酸、血浆肾素、血管紧张素、促红细胞生成素、睾酮、双氢睾酮、雄烯二酮、17α羟孕酮、雌酮、雌三醇、雌二醇、孕酮、人绒毛膜促性腺激素、胰岛素、胰岛素原、C肽、胃泌素、血浆前列腺素、血浆6-酮前列腺素F1α、前列环素、肾上腺素、儿茶酚胺、去甲肾上腺素、胆囊收缩素、纳素、环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷、血管活性肽、生长抑素、促胰液素、P-物质、神经降压素、血栓素A2、血栓素B2、5羟色胺、神经肽Y、骨钙素。
在具体的实施方案中，半抗原是甲氨喋呤或其衍生物。
在具体的实施方案中，半抗原是甲氨喋呤衍生物，其带有巯基反应基团，例如来酰亚胺、溴乙酰基、乙烯基砜或氮丙啶。
在具体的实施方案中，半抗原是甲氨喋呤衍生物，如式I所示：
在一些实施方案中，m为1至10的整数，优选1至5的整数，例如1、2、3、4、5。
在具体的实施方案中，甲氨喋呤衍生物如式II所示：
根据一些实施方案，提供了一种试剂，其包含本申请的偶联物。
根据一些实施方案，提供了本申请的6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体在制备甲氨喋呤检测试剂中的用途。
根据一些实施方案，提供了本申请的偶联物在制备甲氨喋呤检测试剂中的用途。
在具体的实施方案中，所述的检测试剂选自：酶联免疫法检测试剂、化学发光免疫法检测试剂、均相酶免疫法检测试剂、胶乳增强免疫比浊法检测试剂。
在具体的实施方案中，所述的检测试剂优选是基于竞争法检测的试剂。
根据一些实施方案，提供了本申请的偶联物在制备甲氨喋呤检测装置中的用途。
在具体的实施方案中，所述的检测装置可以制备成孔板(例如96-孔板)的形式，比如板上包被根据本申请的试剂。
在具体的实施方案中，所述的检测装置可以制备成颗粒(例如胶乳、磁珠)的形式，比如颗粒上包被根据本申请的试剂。
根据一些实施方案，提供了一种甲氨喋呤检测试剂盒，其包含：
-第一试剂，所述第一试剂包含底物、缓冲液和甲氨喋呤抗体；所述底物是6-磷酸葡萄糖脱氢酶的底物；
-第二试剂，所述第二试剂包含本申请的偶联物和缓冲液；
-任选地，校准品，所述校准品包含10mM至500mM缓冲液、0μM至2.0μM甲氨喋呤；以及
-任选地，质控品，所述质控品包含10mM至500mM缓冲液、0.2μM至2.0μM甲氨喋呤。
根据一个实施方案，提供了一种甲氨喋呤检测试剂盒，其包含：
第一试剂，其包含：
10mM至500mM缓冲液、
5mM至50mM底物、
0.05％至0.5％w/v，优选0.2％至0.5％w/v甲氨喋呤抗体、0.05％至0.5％w/v，优选0.05％至0.1％w/v稳定剂、
0.05％至1％w/v，优选0.5％至1％w/v氯化钠、
0.05％至0.5％w/v，优选0.05％至0.1％w/v防腐剂；
第二试剂，其包含：
10mM至500mM缓冲液、
0.1％至0.5％w/v根据本申请的偶联物、
0.05％至0.5％w/v，优选0.05％至0.1％w/v稳定剂、
0.05％至1％w/v，优选0.5％至1％w/v氯化钠、
0.05％至0.5％w/v，优选0.05％至0.1％w/v防腐剂；
在一些实施方案中，所述缓冲液选自以下的一种或组合：TAPS、氨基丁三醇缓冲液、磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、巴比妥缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、三羟甲基甲烷缓冲液；优选地，磷酸盐缓冲液；所述缓冲液的浓度为10mmol/L至500mmol/L，优选50至200mM；所述缓冲液的pH为7至8.4。
在一些实施方案中，所述稳定剂选自以下的一种或组合：牛血清白蛋白、海藻糖、甘油、蔗糖、甘露醇、甘氨酸、精氨酸、聚乙二醇6000、聚乙二醇8000；优选牛血清白蛋白。
在一些实施方案中，所述的防腐剂选自以下的一种或组合：叠氮化物、MIT、生物防腐剂PC(如PC-300)、硫柳汞；所述叠氮化物选自：叠氮钠、叠氮锂。
在一些实施方案中，所述底物包含：6-磷酸葡糖糖、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸。
在一些具体的实施方案中，所述甲氨喋呤抗体源自：兔、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、猫、豚鼠、犬、灵长类、牛、马、骆驼科、禽、人。
在一些具体的实施方案中，所述甲氨喋呤抗体选自：单抗、多抗、重组抗体、嵌合抗体、抗原结合片段。
根据一些实施方案，提供了一种偶联物的制备方法，包括步骤：
1)提供根据本申请的甲氨喋呤衍生物，尤其是在非质子性溶剂(例如但不限于乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜)中提供根据本申请的甲氨喋呤衍生物；
2)提供6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体，优选在缓冲液(其提供反应环境，例如但不限于PBS、Tris、TAPS、TAPSO，所述缓冲液pH为6.0至8.0)中提供6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体；
3)在18℃至28℃，将所述甲氨喋呤衍生物和所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体按照摩尔比n:1接触1小时至4小时(优选2小时至3小时)使得所述甲氨喋呤衍生物和所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体发生偶联，得到所述种偶联物；
4)根据需要，任选对所述种偶联物进行纯化，例如脱盐处理等。
在一些实施方案中，反应体系中酶和半抗原的接触摩尔比1：n，其中n是0.1至500，例如，0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、100、200、300、400、500及其任意上述数值之间的范围。在一个具体的实施方案中，反应体系中酶和半抗原的接触摩尔比为5：1至1：5。
在一些具体的实施方案中，步骤1)和2)能够互换或并行。
在一些具体的实施方案中，在偶联之前，所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶包含一个或多个游离的巯基，从而允许和甲氨喋呤实现定向反应。
野生型6-磷酸葡萄糖脱氢酶不含游离的巯基，因此在一些具体的实施方案中，6-磷酸葡萄糖脱氢酶是经过基因工程改造的，使其在特定位点(306、375或426位)上的氨基酸突变为半胱氨酸，从而带有一个游离巯基。
附图说明
图1.G6PDH(野生型)氨基酸序列(SEQ ID No.1)；源自假肠膜明串珠菌Leuconostoc pseudomesenteroides。
图2.G6PDH(D306C)氨基酸序列(SEQ ID No.2)。
图3.G6PDH(D375C)氨基酸序列(SEQ ID No.3)。
图4.G6PDH(G426C)氨基酸序列(SEQ ID No.4)。
具体实施方式
实施例
实施例1.甲氨喋呤衍生物的合成
向圆底烧瓶中加入甲氨蝶呤(100mg，0.22mmol)，溶于干燥的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，向其中加入4-马来酰亚胺丁酸(39mg，0.22mmol)，加入三乙胺(44mg，0.44mmol)，氮气保护下，搅拌至全部溶解。
向反应体系中加入HOAt(45mg，0.33mmol)，搅拌至全部溶解，加入HATU(125mg，0.33mmol)，室温(18-28℃，优选20至25℃)搅拌约4h，TLC检测。反应完毕直接用制备板纯化(MeOH/DCM＝5:3)，最终得到甲氨蝶呤衍生物(45mg，产率35％)。
按常规方法确认产物结构。本实施例使得甲氨喋呤带有一个可以和酶结合的基团。
实施例2.甲氨喋呤衍生物与G6PDH分子的偶联
一、本申请的偶联方法
根据本申请的G6PDH-甲氨喋呤偶联物，按照以下方式进行偶联：甲氨喋呤衍生物分子上的巯基反应性基团(如但不限于马来酰亚胺基团)与G6PDH分子上的巯基共价结合。
1.将实施例1制备的甲氨喋呤衍生物溶于N,N-二甲基甲酰胺中(10mM)；
2.G6PDH溶液：G6PDH(本申请的突变体或现有技术突变体)溶于0.2M磷酸盐缓冲液，pH 8.0(6.4mM酶)；
3.将200μl葡萄糖6磷酸脱氢酶突变体溶液加入至750μL缓冲溶液(0.05mol/LNa2HPO4、150mM NaCl、10mM EDTA、0.1％ NaN3、pH＝7.2)中，再加入50μl甲氨喋呤衍生物溶液；
4.上述混合溶液，在室温(18-28℃，优选20至25℃)下充分震荡2-3小时，脱盐处理，所得产物即G6PDH-甲氨喋呤偶联物(浓度0.1mM-2.0mM)。
二、对照偶联方法A
参照CN104569373A实施例四中公开的方法制备G6PDH-甲氨喋呤偶联物。
三、对照偶联方法B(依靠对甲氨喋呤自带基团的激活)
1.将2.38mL葡萄糖六磷酸脱氢酶溶解于12mL Tris缓冲液中，然后依次加入225mg还原态的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH，135mg葡萄糖-6-磷酸和2.25mL二甲基亚砜；所述Tris缓冲液pH为9.0，各组分浓度为：0.05mol/L Tris、3.3mM氯化镁、145.4mM氯化钠。
2.甲氨喋呤衍生物的活化：将10mg甲氨喋呤衍生物溶解于420μL二甲基亚砜和180μL二甲基甲酰胺中，加入6μL三丁胺和350μL氯甲酸异丁酯在2-8℃条件下搅拌30分钟；
3.将所述步骤1和2所得的溶液混合，在2-8℃条件下搅拌12-16小时，并将偶联的酶标抗原进行G-25凝胶层析柱纯化，得到葡萄糖-6-磷酸脱氢酶标记的甲氨喋呤衍生物。
实施例3.试剂盒的制备
制备以下检测甲氨喋呤的试剂盒，其包含：
1.第一试剂的制备：
2.第二试剂的制备：
3.校准品：20mM HEPES缓冲液，以及0.2-0.8μM、0.9-1.2μM、1.3-2.0μM甲氨喋呤(或按需加入)；
4.质控品：20mM HEPES缓冲液，以及0μM、0.13μM、0.25μM、0.50μM、1.00μM、2.00μM甲氨喋呤(或按需加入)。
5.将上述试剂(任选包含质控品、校准品)，组装成检测试剂盒。
检测例
在均相反应体系中，样本中的甲氨喋呤和G6PDH-甲氨喋呤偶联物同时竞争结合抗甲氨喋呤抗体位点，由于抗体与偶联物结合后酶活性下降，样品中游离的甲氨喋呤越多，竞争结合的抗体位点越多，抗体与酶偶联物的结合就越少，未结合抗体的酶偶联物催化β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型(NAD+)转化为β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型(NADH)，样品中的甲氨喋呤浓度与NADH的生成量成正比，通过吸光度的变化即可得到样品中甲氨喋呤的浓度。
表1.全自动生化仪参数
检测例1.本申请试剂盒的性能
1.定标吸光度
甲氨喋呤校准品溶于缓冲溶液中(0.9％ NaCl，0.1％NaN3)，配制6种浓度的校准品。定标工作体积为2-10μL，然后加入100-200μL的第一试剂和50-100μL的第二试剂，速率法，检测主波长340nm，副波长405nm，特定读点的吸光度变化率，绘制成定标曲线。本申请中定标曲线的建立和优化均是在日立7180上完成，但其他主流机型(AU680、雅培C16000等)经检测可用。
2.精密度实验
利用如上建立起的定标曲线，测定高、中、低质控品、临床样本。
表2.精密度
3.线性
表3.线性
4.机载稳定性(D375C突变体)
选择高、中、低三个浓度的质控品，每天或者隔天检测三次，数据显示本申请的试剂盒定标周期可以稳定两周以上；试剂开封之后放置于机器上，检测显示机载稳定性超过40天，数据参见表6(其中，40天*表示机载40天重新定标之后检测数据)。
5.药物干扰实验
选取常用的20种化合物和药物，在甲氨喋呤浓度为10μM，如下浓度的化合物对本申请试剂盒的检测(D375C突变体)无明显干扰。
表4.药物干扰实验
检测例2.偶联物中的抗体抑制率
1.抗体抑制率的检测原理
当抗体与G6PDH-甲氨喋呤偶联物结合时，由于空间位阻导致G6PDH酶活性受到影响，从而使得其催化NAD转化为NADH的效率降低，通过检测NADH量的变化，从而比较加入抗体与未加入抗体的实验组的差异，这种差异即体现为抗体对G6PDH的抑制能力。
2.反应体系
表5.抗体抑制率的检测试剂制备
3.结果
比较加入抗体与未加入抗体时，分别检测G6PDH-甲氨喋呤偶联物吸光度测值，即可得到抗体对G6PDH的抑制情况。
相对于已发表的突变位点(A45C、K55C)所制备的偶联物相比，本申请的酶突变体在抗体抑制率上有明显提高，能达到44.6％以上(G426C：44.6％；D375C：51％)，最高达60.3％(D306C)。而之前已发表的突变位点(例如A45C、K55C)的抑制率为39.7％至42.2％。
虽然不限于具体理论，但是可以部分地解释为：和现有技术中的G6PDH突变体(A45C、K55C)相比，本申请酶突变体中突变位点(即引入游离巯基的位点)是和半抗原(比如激素、小分子药物等)发生偶联的位置所在。半抗原在这个位置上与半抗原特异性抗体结合时，所构成的空间位阻对G6PDH酶的活性影响大，同时在引入突变后，还不能实质上影响分子的空间折叠。因此，这个突变位点的位置非常重要，需要同时兼顾G6PDH酶的活性、偶联分子的空间折叠、以及半抗原表位的充分暴露。
由于酶的突变体在抗体抑制率上有明显的提高。将酶的突变体与甲氨喋呤偶联后的偶联物配制成试剂盒后，试剂在批间变异系数、线性、特异性等性能方面有明显的性能提升。
Claims (2)
1.一种偶联物的制备方法，其包括步骤：
1)提供甲氨喋呤衍生物；
2)提供6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体；
3)所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体与所述甲氨喋呤衍生物按摩尔比发生1:1偶联；
所述甲氨喋呤衍生物是式I所示：
其中，
m为1至10的整数，优选1至5的整数；
优选地，所述甲氨喋呤衍生物是式II所示：
相较于野生型6-磷酸葡萄糖脱氢酶，所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体包含D306C突变；所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体是SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的偶联物的制备方法，其包括步骤：
1)提供甲氨喋呤衍生物，优选在非质子性溶剂中提供甲氨喋呤衍生物；
2)提供所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体，优选在缓冲液中提供所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体；
3)在18℃至28℃优选20℃至25℃，将所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体和所述甲氨喋呤衍生物接触1小时至4小时，优选2小时至3小时，使得所述甲氨喋呤衍生物和所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体发生偶联，得到所述偶联物；
4)任选，对所述偶联物进行纯化，优选对所述偶联物进行脱盐纯化；
步骤1)和步骤2)能够互换或并行；
所述缓冲液选自：磷酸缓冲液、Tris缓冲液、Hepes缓冲液、PBS缓冲液、TAPSO缓冲液，
所述缓冲液的pH为6.0至8.0；
所述非质子性溶剂选自以下一种或组合：乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜；
优选地，在步骤3)之前，所述6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体包含一个游离巯基。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2019100177644 | 2019-01-09 | ||
| CN201910017764 | 2019-01-09 | ||
| CN2019104231224 | 2019-05-21 | ||
| CN201910423122.4A CN110174363A (zh) | 2019-01-09 | 2019-05-21 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN202010013644.XA CN111487208B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备甲氨喋呤检测试剂中的用途 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010013644.XA Division CN111487208B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备甲氨喋呤检测试剂中的用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116381253A true CN116381253A (zh) | 2023-07-04 |
Family
ID=67691613
Family Applications (52)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910423122.4A Pending CN110174363A (zh) | 2019-01-09 | 2019-05-21 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN201911365439.3A Active CN111239060B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-26 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备茶碱检测试剂中的用途 |
| CN202310257027.8A Pending CN116144619A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-26 | 茶碱检测试剂盒 |
| CN202310217235.5A Pending CN116359146A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-26 | 偶联物的制备方法 |
| CN202310811498.9A Pending CN116698772A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 偶联物的制备方法 |
| CN201911372535.0A Active CN112285038B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备洋地黄毒苷检测试剂中的用途 |
| CN202211151405.6A Pending CN115791649A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 甘胆酸检测试剂盒 |
| CN202211153004.4A Pending CN115808398A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 偶联物的制备方法 |
| CN201911372147.2A Active CN112285037B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN202211151264.8A Pending CN116008201A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310811210.8A Pending CN116626281A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 一种洋地黄毒苷检测试剂盒 |
| CN202310811212.7A Pending CN116735512A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310726498.9A Pending CN116559472A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 一种皮质醇检测试剂盒 |
| CN202310364266.3A Pending CN116718764A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 偶联物在制备苯妥英检测试剂中的用途 |
| CN201911403882.5A Active CN111650135B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备苯妥英检测试剂中的用途 |
| CN202310364997.8A Pending CN116298257A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 苯妥英检测试剂盒 |
| CN202310726493.6A Pending CN116773795A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 一种偶联物的制备方法 |
| CN202310365160.5A Pending CN116355873A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 一种偶联物的制备方法 |
| CN202310724066.4A Pending CN116773827A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN201911404154.6A Active CN111504920B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备皮质醇检测试剂中的用途 |
| CN202010000321.7A Active CN111487206B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-02 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备万古霉素检测试剂中的用途 |
| CN202311025762.2A Pending CN117054643A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-02 | 万古霉素检测试剂盒 |
| CN202311025752.9A Pending CN117074335A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-02 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202311025756.7A Pending CN117030640A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-02 | 偶联物的制备方法 |
| CN202010004879.2A Active CN111487207B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-03 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备地高辛检测试剂中的用途 |
| CN202310811497.4A Pending CN116840468A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-03 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310810479.4A Pending CN116819060A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-03 | 地高辛检测试剂盒 |
| CN202310810455.9A Pending CN116840467A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-03 | 偶联物的制备方法 |
| CN202310452740.8A Pending CN116430056A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 偶联物的制备方法 |
| CN202010009771.2A Active CN111504921B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备庆大霉素检测试剂中的用途 |
| CN202310453290.4A Pending CN116338215A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 他克莫司检测试剂盒 |
| CN202310452946.0A Pending CN116559425A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202010009570.2A Active CN111537451B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备他克莫司检测试剂中的用途 |
| CN202310320137.4A Pending CN116148198A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 庆大霉素检测试剂的制备方法 |
| CN202310318754.0A Pending CN116124721A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 庆大霉素检测试剂盒 |
| CN202310320729.6A Pending CN116297271A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 偶联物在制备试剂盒中的用途 |
| CN202010013174.7A Active CN111678874B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备环孢霉素a检测试剂中的用途 |
| CN202310508418.2A Pending CN116381253A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 偶联物的制备方法 |
| CN202310508217.2A Pending CN116298330A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310507880.0A Pending CN116754756A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 甲氨喋呤检测试剂盒 |
| CN202010013644.XA Active CN111487208B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备甲氨喋呤检测试剂中的用途 |
| CN202310555230.3A Pending CN116718761A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 环孢霉素a检测试剂盒 |
| CN202310553479.0A Pending CN116699125A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310554774.8A Pending CN116679047A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 偶联物的制备方法 |
| CN202310702870.2A Pending CN116840462A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 偶联物的制备方法 |
| CN202310702858.1A Pending CN116859035A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310726069.1A Pending CN116754761A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 阿米卡星检测试剂盒 |
| CN202310726230.5A Pending CN116577495A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 偶联物的制备方法 |
| CN202010016535.3A Active CN111693473B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备雷帕霉素检测试剂中的用途 |
| CN202010017376.9A Active CN111537452B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备阿米卡星检测试剂中的用途 |
| CN202310725902.0A Pending CN116577494A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310702860.9A Pending CN116699122A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 雷帕霉素检测试剂盒 |
Family Applications Before (37)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910423122.4A Pending CN110174363A (zh) | 2019-01-09 | 2019-05-21 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN201911365439.3A Active CN111239060B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-26 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备茶碱检测试剂中的用途 |
| CN202310257027.8A Pending CN116144619A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-26 | 茶碱检测试剂盒 |
| CN202310217235.5A Pending CN116359146A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-26 | 偶联物的制备方法 |
| CN202310811498.9A Pending CN116698772A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 偶联物的制备方法 |
| CN201911372535.0A Active CN112285038B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备洋地黄毒苷检测试剂中的用途 |
| CN202211151405.6A Pending CN115791649A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 甘胆酸检测试剂盒 |
| CN202211153004.4A Pending CN115808398A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 偶联物的制备方法 |
| CN201911372147.2A Active CN112285037B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN202211151264.8A Pending CN116008201A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310811210.8A Pending CN116626281A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 一种洋地黄毒苷检测试剂盒 |
| CN202310811212.7A Pending CN116735512A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-27 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310726498.9A Pending CN116559472A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 一种皮质醇检测试剂盒 |
| CN202310364266.3A Pending CN116718764A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 偶联物在制备苯妥英检测试剂中的用途 |
| CN201911403882.5A Active CN111650135B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备苯妥英检测试剂中的用途 |
| CN202310364997.8A Pending CN116298257A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 苯妥英检测试剂盒 |
| CN202310726493.6A Pending CN116773795A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 一种偶联物的制备方法 |
| CN202310365160.5A Pending CN116355873A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 一种偶联物的制备方法 |
| CN202310724066.4A Pending CN116773827A (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN201911404154.6A Active CN111504920B (zh) | 2019-01-09 | 2019-12-31 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备皮质醇检测试剂中的用途 |
| CN202010000321.7A Active CN111487206B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-02 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备万古霉素检测试剂中的用途 |
| CN202311025762.2A Pending CN117054643A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-02 | 万古霉素检测试剂盒 |
| CN202311025752.9A Pending CN117074335A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-02 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202311025756.7A Pending CN117030640A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-02 | 偶联物的制备方法 |
| CN202010004879.2A Active CN111487207B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-03 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备地高辛检测试剂中的用途 |
| CN202310811497.4A Pending CN116840468A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-03 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310810479.4A Pending CN116819060A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-03 | 地高辛检测试剂盒 |
| CN202310810455.9A Pending CN116840467A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-03 | 偶联物的制备方法 |
| CN202310452740.8A Pending CN116430056A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 偶联物的制备方法 |
| CN202010009771.2A Active CN111504921B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备庆大霉素检测试剂中的用途 |
| CN202310453290.4A Pending CN116338215A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 他克莫司检测试剂盒 |
| CN202310452946.0A Pending CN116559425A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202010009570.2A Active CN111537451B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备他克莫司检测试剂中的用途 |
| CN202310320137.4A Pending CN116148198A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 庆大霉素检测试剂的制备方法 |
| CN202310318754.0A Pending CN116124721A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 庆大霉素检测试剂盒 |
| CN202310320729.6A Pending CN116297271A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-06 | 偶联物在制备试剂盒中的用途 |
| CN202010013174.7A Active CN111678874B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备环孢霉素a检测试剂中的用途 |
Family Applications After (14)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310508217.2A Pending CN116298330A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310507880.0A Pending CN116754756A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 甲氨喋呤检测试剂盒 |
| CN202010013644.XA Active CN111487208B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备甲氨喋呤检测试剂中的用途 |
| CN202310555230.3A Pending CN116718761A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 环孢霉素a检测试剂盒 |
| CN202310553479.0A Pending CN116699125A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310554774.8A Pending CN116679047A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-07 | 偶联物的制备方法 |
| CN202310702870.2A Pending CN116840462A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 偶联物的制备方法 |
| CN202310702858.1A Pending CN116859035A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310726069.1A Pending CN116754761A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 阿米卡星检测试剂盒 |
| CN202310726230.5A Pending CN116577495A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 偶联物的制备方法 |
| CN202010016535.3A Active CN111693473B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备雷帕霉素检测试剂中的用途 |
| CN202010017376.9A Active CN111537452B (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备阿米卡星检测试剂中的用途 |
| CN202310725902.0A Pending CN116577494A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 偶联物在制备检测试剂中的用途 |
| CN202310702860.9A Pending CN116699122A (zh) | 2019-01-09 | 2020-01-08 | 雷帕霉素检测试剂盒 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (52) | CN110174363A (zh) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110174363A (zh) * | 2019-01-09 | 2019-08-27 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN113046335B (zh) * | 2019-12-27 | 2023-05-26 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种仿生辅酶偏好性的葡萄糖6-磷酸脱氢酶突变体及其应用 |
| CN115856278A (zh) * | 2020-01-07 | 2023-03-28 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 妥布霉素检测试剂盒 |
| CN112114127A (zh) * | 2020-09-09 | 2020-12-22 | 武汉生之源生物科技股份有限公司 | 一种甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒及其制备方法和应用 |
| CN112225795A (zh) * | 2020-10-14 | 2021-01-15 | 湖南苏阳医疗科技有限公司 | 6-羟基硫酸褪黑素衍生物及其免疫原、特异性抗体的制备方法和应用 |
| CN112574969A (zh) * | 2020-12-28 | 2021-03-30 | 郑州伊美诺生物技术有限公司 | G6pdh突变体及其应用 |
| CN113567662A (zh) * | 2021-07-08 | 2021-10-29 | 重庆中元汇吉生物技术有限公司 | 一种测定甘胆酸的试剂盒及其制备方法 |
| CN113736744B (zh) * | 2021-10-14 | 2023-07-18 | 江南大学 | 洋地黄毒苷单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用 |
| CN115236216B (zh) * | 2022-06-07 | 2024-03-01 | 合肥和合医疗科技有限公司 | 高效液相色谱串联质谱检测全血中免疫抑制剂的试剂盒，其制备方法和检测方法 |
Family Cites Families (62)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2116301B1 (zh) * | 1970-12-07 | 1974-08-30 | Brun Lab Sa Le | |
| US4190496A (en) * | 1971-05-14 | 1980-02-26 | Syva Company | Homogeneous enzyme assay for antibodies |
| US3997525A (en) * | 1974-01-16 | 1976-12-14 | Bio-Tec, Inc. | Tetra-125 iodo-di-tyramine of digitalis derivative and process for making the same |
| DE2901218A1 (de) * | 1979-01-13 | 1980-07-17 | Byk Gulden Lomberg Chem Fab | Ung von theophyllin |
| JPS5618983A (en) * | 1979-07-25 | 1981-02-23 | Eisai Co Ltd | Theophylline derivative and its preapration |
| US4262089A (en) * | 1980-04-07 | 1981-04-14 | Syva Company | Theophylline antigens and antibodies |
| US4341866A (en) * | 1980-06-02 | 1982-07-27 | Syva Company | Antienzyme termination in enzyme immunoassays |
| JPS57178159A (en) * | 1981-04-27 | 1982-11-02 | Banyu Pharmaceut Co Ltd | Chemical reagent for detection of amicacin and its determination |
| US4608336A (en) * | 1981-08-27 | 1986-08-26 | Miles Laboratories, Inc. | #3B theophylline immunoassay employing 9-theophylline reagents |
| US4469797A (en) * | 1982-09-23 | 1984-09-04 | Miles Laboratories, Inc. | Digoxigenin immunogens, antibodies, labeled conjugates, and related derivatives |
| DE3483620D1 (de) * | 1983-03-11 | 1991-01-03 | Fujirebio Kk | Verfahren zur bestimmung von liganden. |
| IT1199088B (it) * | 1984-03-09 | 1988-12-30 | Miles Italiana | Saggio di legame specifico mediante impiego di anti-g6pdh come marcante |
| US4622294A (en) * | 1985-02-08 | 1986-11-11 | Kung Viola T | Liposome immunoassay reagent and method |
| US5068198A (en) * | 1986-03-26 | 1991-11-26 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Liquid single reagent for assays involving confining gels |
| EP0399127A1 (en) * | 1989-05-23 | 1990-11-28 | Pharmacia ENI Diagnostics Inc. | Homogeneous immunochemical method for determining haptens by means of ion selective electrodes |
| DE3919915A1 (de) * | 1989-06-19 | 1990-12-20 | Boehringer Mannheim Gmbh | Aminoalkylmaleimide und davon abgeleitete hapten- und antigenderivate sowie konjugate mit peptiden oder proteinen |
| JPH0833394B2 (ja) * | 1990-10-03 | 1996-03-29 | 三洋化成工業株式会社 | 酵素標識ハプテンの製法 |
| ATE142344T1 (de) * | 1990-11-20 | 1996-09-15 | Behringwerke Ag | Immunotest für cyclosporin |
| ES2148144T3 (es) * | 1990-11-20 | 2000-10-16 | Dade Behring Marburg Gmbh | Procedimiento para la estabilizacion de conjugados de enzima. |
| CA2087397A1 (en) * | 1992-01-22 | 1993-07-23 | Kazuhisa Kubotsu | Immunoassay and reagents used therefor |
| US6455288B1 (en) * | 1993-04-08 | 2002-09-24 | Dade Behring Marburg Gmbh | Homogeneous immunoassays using mutant glucose-6-phosphate dehydrogenases |
| CA2156397C (en) * | 1993-04-08 | 2007-05-15 | Valerie Quesniaux | Rapamycin assay |
| US5747352A (en) * | 1994-05-23 | 1998-05-05 | Beckman Instruments, Inc. | Reagents and methods for the rapid and quantitative assay of pharmacological agents |
| JP3595506B2 (ja) * | 1998-10-09 | 2004-12-02 | アイソテクニカ インコーポレイテッド | シクロスポリンおよびシクロスポリン代謝産物の、特定領域に対する抗体の生産方法 |
| AUPP751398A0 (en) * | 1998-12-04 | 1999-01-07 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Methotrexate derivatives |
| US7078495B1 (en) * | 1999-08-03 | 2006-07-18 | Dade Behring Inc. | Monoclonal antibodies to tacrolimus and immunoassay methods for tacrolimus |
| US6653456B2 (en) * | 2001-07-31 | 2003-11-25 | Roche Diagnostics Corporation | Site-specific aminoglycoside derivatives and their use in immunodiagnostic assays |
| US20050176080A1 (en) * | 2004-02-10 | 2005-08-11 | Vani Bodepudi | Hapten, immunogens and derivatives of ascomycin useful for preparation of antibodies and immunoassays |
| US20060046273A1 (en) * | 2004-08-27 | 2006-03-02 | Lin-Zhi International Inc. | Homogeneous enzyme immunoassay for oral fluid |
| MX2007007262A (es) * | 2004-12-17 | 2007-10-19 | Isotechnika Inc | Metabolitos de analogos de ciclosporina. |
| US7189582B2 (en) * | 2005-04-27 | 2007-03-13 | Dade Behring Inc. | Compositions and methods for detection of sirolimus |
| JP4746926B2 (ja) * | 2005-06-29 | 2011-08-10 | シスメックス株式会社 | グルコース−６−リン酸脱水素酵素含有試薬及びグルコース−６−リン酸脱水素酵素安定化方法 |
| CN101638640B (zh) * | 2009-09-07 | 2011-01-12 | 北京利德曼生化股份有限公司 | 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶及其核苷酸序列、重组载体、重组宿主细胞和试剂盒 |
| EP2643474A4 (en) * | 2010-11-24 | 2014-05-21 | Dh Technologies Dev Pte Ltd | SENSITIVE, HIGH SPEED DETECTION OF GLUCOSE-6-PHOSPHATE DEHYDROGENASE |
| CN102565399B (zh) * | 2010-12-07 | 2015-06-03 | 北京望尔生物技术有限公司 | 一种检测氢化可的松的方法及其专用酶联免疫试剂盒 |
| CN102807618A (zh) * | 2011-08-10 | 2012-12-05 | 重庆金域医学检验所有限公司 | 苯妥因均相酶免疫检测试剂盒及其多克隆抗体的制备方法 |
| JP5896375B2 (ja) * | 2011-09-09 | 2016-03-30 | 池田食研株式会社 | 改変型グルコース脱水素酵素遺伝子 |
| CN102424829B (zh) * | 2011-10-26 | 2013-10-16 | 苏州汉酶生物技术有限公司 | 一种酶催化合成坦西莫司的方法 |
| US8771964B2 (en) * | 2012-02-02 | 2014-07-08 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Compositions and methods for detection of methadone metabolite |
| CN104619350A (zh) * | 2012-06-14 | 2015-05-13 | Ambrx公司 | 结合到核受体配体多肽的抗psma抗体 |
| CN103242446A (zh) * | 2012-07-25 | 2013-08-14 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 茶碱免疫原及其制备方法和应用 |
| CN102757391B (zh) * | 2012-08-01 | 2015-08-26 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 一种苯巴比妥衍生物及其制备方法和应用 |
| US20160312208A1 (en) * | 2013-12-17 | 2016-10-27 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Preparation of multi-hapten mutant g6pdh conjugates and their use for detection of multiple analytes |
| CN104016923B (zh) * | 2014-01-08 | 2016-08-31 | 南开大学 | 苯妥英衍生物及其制备方法和用途 |
| CN103760348B (zh) * | 2014-02-11 | 2015-03-11 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 一种甘胆酸免疫检测试剂及其制备和检测方法 |
| CN103739703B (zh) * | 2014-02-11 | 2015-07-15 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 甘胆酸免疫原、抗甘胆酸特异性抗体及检测试剂 |
| JP6398295B2 (ja) * | 2014-04-30 | 2018-10-03 | ニプロ株式会社 | 変異型グルコース−６−リン酸脱水素酵素 |
| CN104447745B (zh) * | 2014-11-06 | 2016-03-30 | 济南金域医学检验中心有限公司 | 一种茶碱均相酶免疫检测验试剂盒及其制备方法 |
| CN104569373B (zh) * | 2015-01-27 | 2016-08-17 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 一种甲氨蝶呤均相酶免疫检测试剂及其制备和检测方法 |
| CA2975875A1 (en) * | 2015-02-04 | 2016-08-11 | Genentech, Inc. | Mutant smoothened and methods of using the same |
| CN105131105A (zh) * | 2015-07-27 | 2015-12-09 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 皮质醇免疫原、衍生物、抗体、检测试剂及制备方法 |
| CN106565809B (zh) * | 2016-07-08 | 2018-05-01 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 一种β半乳糖苷酶的酶供体偶联物及其在甘胆酸检测中的用途 |
| CN106226512B (zh) * | 2016-07-29 | 2018-10-16 | 胡清 | 一种试剂盒、试剂盒的制备方法及利用该试剂盒实现的外周血甘氨胆酸的检测方法 |
| CN106190996B (zh) * | 2016-08-30 | 2019-05-21 | 美康生物科技股份有限公司 | 一种葡萄糖6磷酸脱氢酶突变体 |
| CN109797143B (zh) * | 2016-09-22 | 2021-02-12 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 一种包含大肠杆菌β半乳糖苷酶受体的试剂 |
| CN106872681B (zh) * | 2017-01-23 | 2019-11-19 | 四川精卫食品检测科技有限公司 | 丁胺卡那霉素和卡那霉素二合一快速检测酶联免疫试剂盒及其应用 |
| CN108593905A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-09-28 | 太原瑞盛生物科技有限公司 | 一种地高辛免疫检测试剂及其制备和检测方法 |
| CN108586562B (zh) * | 2018-05-08 | 2019-09-06 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 一种皮质醇衍生物及其制备方法与应用 |
| CN108717117A (zh) * | 2018-05-23 | 2018-10-30 | 太原瑞盛生物科技有限公司 | 一种万古霉素免疫检测试剂及其制备和检测方法 |
| CN109111494A (zh) * | 2018-08-30 | 2019-01-01 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 雌二醇衍生物、免疫原、抗体、酶标偶联物、检测试剂及其制备方法 |
| CN110174363A (zh) * | 2019-01-09 | 2019-08-27 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN112574969A (zh) * | 2020-12-28 | 2021-03-30 | 郑州伊美诺生物技术有限公司 | G6pdh突变体及其应用 |
-
2019
- 2019-05-21 CN CN201910423122.4A patent/CN110174363A/zh active Pending
- 2019-12-26 CN CN201911365439.3A patent/CN111239060B/zh active Active
- 2019-12-26 CN CN202310257027.8A patent/CN116144619A/zh active Pending
- 2019-12-26 CN CN202310217235.5A patent/CN116359146A/zh active Pending
- 2019-12-27 CN CN202310811498.9A patent/CN116698772A/zh active Pending
- 2019-12-27 CN CN201911372535.0A patent/CN112285038B/zh active Active
- 2019-12-27 CN CN202211151405.6A patent/CN115791649A/zh active Pending
- 2019-12-27 CN CN202211153004.4A patent/CN115808398A/zh active Pending
- 2019-12-27 CN CN201911372147.2A patent/CN112285037B/zh active Active
- 2019-12-27 CN CN202211151264.8A patent/CN116008201A/zh active Pending
- 2019-12-27 CN CN202310811210.8A patent/CN116626281A/zh active Pending
- 2019-12-27 CN CN202310811212.7A patent/CN116735512A/zh active Pending
- 2019-12-31 CN CN202310726498.9A patent/CN116559472A/zh active Pending
- 2019-12-31 CN CN202310364266.3A patent/CN116718764A/zh active Pending
- 2019-12-31 CN CN201911403882.5A patent/CN111650135B/zh active Active
- 2019-12-31 CN CN202310364997.8A patent/CN116298257A/zh active Pending
- 2019-12-31 CN CN202310726493.6A patent/CN116773795A/zh active Pending
- 2019-12-31 CN CN202310365160.5A patent/CN116355873A/zh active Pending
- 2019-12-31 CN CN202310724066.4A patent/CN116773827A/zh active Pending
- 2019-12-31 CN CN201911404154.6A patent/CN111504920B/zh active Active
-
2020
- 2020-01-02 CN CN202010000321.7A patent/CN111487206B/zh active Active
- 2020-01-02 CN CN202311025762.2A patent/CN117054643A/zh active Pending
- 2020-01-02 CN CN202311025752.9A patent/CN117074335A/zh active Pending
- 2020-01-02 CN CN202311025756.7A patent/CN117030640A/zh active Pending
- 2020-01-03 CN CN202010004879.2A patent/CN111487207B/zh active Active
- 2020-01-03 CN CN202310811497.4A patent/CN116840468A/zh active Pending
- 2020-01-03 CN CN202310810479.4A patent/CN116819060A/zh active Pending
- 2020-01-03 CN CN202310810455.9A patent/CN116840467A/zh active Pending
- 2020-01-06 CN CN202310452740.8A patent/CN116430056A/zh active Pending
- 2020-01-06 CN CN202010009771.2A patent/CN111504921B/zh active Active
- 2020-01-06 CN CN202310453290.4A patent/CN116338215A/zh active Pending
- 2020-01-06 CN CN202310452946.0A patent/CN116559425A/zh active Pending
- 2020-01-06 CN CN202010009570.2A patent/CN111537451B/zh active Active
- 2020-01-06 CN CN202310320137.4A patent/CN116148198A/zh active Pending
- 2020-01-06 CN CN202310318754.0A patent/CN116124721A/zh active Pending
- 2020-01-06 CN CN202310320729.6A patent/CN116297271A/zh active Pending
- 2020-01-07 CN CN202010013174.7A patent/CN111678874B/zh active Active
- 2020-01-07 CN CN202310508418.2A patent/CN116381253A/zh active Pending
- 2020-01-07 CN CN202310508217.2A patent/CN116298330A/zh active Pending
- 2020-01-07 CN CN202310507880.0A patent/CN116754756A/zh active Pending
- 2020-01-07 CN CN202010013644.XA patent/CN111487208B/zh active Active
- 2020-01-07 CN CN202310555230.3A patent/CN116718761A/zh active Pending
- 2020-01-07 CN CN202310553479.0A patent/CN116699125A/zh active Pending
- 2020-01-07 CN CN202310554774.8A patent/CN116679047A/zh active Pending
- 2020-01-08 CN CN202310702870.2A patent/CN116840462A/zh active Pending
- 2020-01-08 CN CN202310702858.1A patent/CN116859035A/zh active Pending
- 2020-01-08 CN CN202310726069.1A patent/CN116754761A/zh active Pending
- 2020-01-08 CN CN202310726230.5A patent/CN116577495A/zh active Pending
- 2020-01-08 CN CN202010016535.3A patent/CN111693473B/zh active Active
- 2020-01-08 CN CN202010017376.9A patent/CN111537452B/zh active Active
- 2020-01-08 CN CN202310725902.0A patent/CN116577494A/zh active Pending
- 2020-01-08 CN CN202310702860.9A patent/CN116699122A/zh active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111487208B (zh) | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备甲氨喋呤检测试剂中的用途 | |
| JP2000180449A (ja) | 免疫測定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |