CN112114127A - 一种甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒及其制备方法和应用 - Google Patents
一种甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒及其制备方法和应用，包括R1试剂和R2试剂，其中所述R1试剂中包括缓冲液、抗甘胆酸特异性抗体、L‑乳酸锂、稳定剂、防腐剂和表面活性剂；所述R2试剂中包括缓冲液、β‑NAD+、乳酸脱氢酶‑甘胆酸偶联物、保护剂和防腐剂。本发明针对现有的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒稳定性差的缺陷，将体系中的6‑磷酸葡萄糖脱氢酶更换为乳酸脱氢酶，从而显著提高了试剂盒的分析灵敏度、精密度、热稳定性和长期稳定性。本发明还通过调节体系中乳酸脱氢酶‑甘氨酸偶联物与β‑NAD+的含量，进一步提高了试剂盒的各项性能指标，从而得到了一种分析灵敏度高、精密度和稳定性优异的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒。
Description
技术领域
本发明属于生化检测体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒及其制备方法和应用。
背景技术
肝脏疾病是危害人体健康的一大杀手，其中肝炎、肝硬化、肝癌等更是因其流行广泛、病程长、预后较差、死亡率高等特点而受到医学界的普遍关注。以血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及谷酰转肽酶(GGT)为代表的肝脏酶学指标可较好地反映肝细胞的病理状态，然而上述这些常规指标反映肝脏损害的特异性较差，会因为某些疾病、药物或生理原因导致指标检测无法准确反映肝脏的损害情况，如心脏疾病、胰腺疾病会导致血清ALT等升高。针对这些缺陷，甘胆酸的检测逐渐成为诊断肝脏疾病更为灵敏且特异性更好的指标，结合甘胆酸检测指标和其他指标的分析可以为肝脏疾病的诊断、治疗和预后分析提供更多的依据。此外，甘胆酸水平也是多种胆道系统疾病、妊娠期肝内胆汁淤积症及酒精性肝损伤等的重要诊断依据。
市场上的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，都是采用甘胆酸与6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联的，如专利CN106405069A公开了一种甘胆酸均相酶免疫诊断试剂的制备方法，其中包括甘胆酸酶偶联物溶液的制备，具体为：将甘胆酸加入到MES缓冲液中，加入羧基活化剂进行羧基活化，然后在羧基活化后的甘胆酸中加入6-磷酸葡萄糖脱氢酶进行缩合反应得到甘胆酸偶联物粗品，经透析纯化后加入到Tris-HCl缓冲液中并加入辅助试剂，混合均匀即为甘胆酸酶偶联物溶液。然而6-磷酸葡萄糖脱氢酶极易受到外界条件的影响，对温度、pH等易导致蛋白质变性的多种因素均非常敏感，因此，在与甘胆酸进行偶联反应时，对偶联条件的要求高，同时所制备的偶联物纯度不高、稳定性不好，进而导致制备得到的试剂盒的分析灵敏度低、热稳定性和长期稳定性较差。
发明内容
本发明针对现有技术存在的缺陷，提供了一种甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，通过选用稳定性更好的乳酸脱氢酶以替代6-磷酸葡萄糖脱氢酶，与甘胆酸进行偶联制备得到乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物，从而有效提高了甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒的分析灵敏度、精密度以及稳定性。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一种甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂中包括缓冲液、抗甘胆酸特异性抗体、L-乳酸锂、稳定剂、防腐剂和表面活性剂；所述R2试剂中包括缓冲液、β-NAD+、乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、保护剂和防腐剂。
该试剂盒的具体反应原理为：乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物通过甘胆酸与抗体结合后，乳酸脱氢酶的活性会被抑制，无法催化体系中β-NAD+的转化，而在检测样本时，由于样本中含有甘胆酸，其可与乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物竞争结合体系中的抗甘胆酸特异性抗体，从而释放了乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物，使乳酸脱氢酶的活性增强，进而催化L-乳酸锂和β-NAD+生成丙酮酸和NADH，其中NADH在340nm处有吸收峰，通过分析仪检测NADH的含量变化，并绘制相应的标准曲线，从而可通过检测NADH的含量变化计算得到样本中甘胆酸的浓度，通过选用稳定性更好的乳酸脱氢酶与甘胆酸偶联生成偶联物，可显著提高试剂盒的分析灵敏度、精密度、热稳定性和长期稳定性。
进一步的，所述R2试剂中乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物和β-NAD+的体积质量比为1mL：1～5g。通过调节体系中乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物和β-NAD+的含量，可进一步提高试剂盒的各项性能。
进一步的，所述R1试剂的pH为7.0～8.0，具体包括：50～500mM缓冲液，1～10g/L抗甘胆酸特异性抗体，0.5～5g/L L-乳酸锂，0.1～10g/L稳定剂，0.5～5mL/L防腐剂，质量浓度0.05～1％表面活性剂；
所述R2试剂的pH为6.5～7.5，具体包括：50～500mM缓冲液，4～10g/Lβ-NAD+，1～5mL/L乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物，10～100g/L保护剂，0.5～5mL/L防腐剂。
进一步的，所述缓冲液为HEPES缓冲液(N-(2-羟乙基)哌嗪-N’-(2-乙磺酸)缓冲液)、PBS缓冲液(十二水合磷酸氢二钠—二水合磷酸二氢钠缓冲液)、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、Tris缓冲液(三羟甲基氨基甲烷缓冲液)、MOPS缓冲液(3-(N-吗啉代)丙磺酸缓冲液)、TAPSO缓冲液(3-[N-tris(羟甲基)甲基氨基]2-羟基丙磺酸缓冲液)、MES缓冲液(2-(N一吗啉代)乙磺酸缓冲液)、PIPES缓冲液(哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸)缓冲液)、MOPSO缓冲液(3-(N-吗啉代)-2-羟基丙磺酸缓冲液)中的一种或多种。
进一步的，所述稳定剂为EDTA·2Na、EDTA·3Na、EDTA·2NaMn、EDTA·Zn、PVP-K30(聚乙烯吡咯烷酮K30)、PVP-K90(聚乙烯吡咯烷酮K90)中的一种或多种。稳定剂可用于维持体系中抗体的稳定。
进一步的，所述保护剂为蔗糖、海藻糖、葡聚糖、甘露醇、乳糖醇、山梨醇中的一种或多种。用于保护体系中的乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物，使其更稳定，避免失活。
进一步的，所述表面活性剂为Tween-20、Tween-80、曲拉通X-100、Brij-35、Thesit、APG(烷基糖苷)中的一种或多种。
进一步的，所述防腐剂为Proclin系列、KroVin系列中的一种或多种。
本发明还提供了一种上述甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒的制备方法，所述方法包括：
S1、R1试剂的制备：向缓冲液中依次加入L-乳酸锂、抗甘胆酸特异性抗体、稳定剂、防腐剂和表面活性剂，定容得到R1试剂；
S2、乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物的制备：将甘胆酸溶解后加入活化剂进行活化，然后加入乳酸脱氢酶进行偶联，得到乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物；
S3、R2试剂的制备：向缓冲液中依次加入β-NAD+、乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、保护剂和防腐剂，定容得到R2试剂。
进一步的，步骤S2的具体为：①将甘胆酸溶解于MES缓冲液中，加入活化剂EDC进行活化，其中EDC和甘胆酸的质量比为1：50～500，在温度为18～42℃条件下搅拌活化5～20min；②活化后加入乳酸脱氢酶，其中乳酸脱氢酶和甘胆酸的质量比为1：50～500，在温度为18～42℃条件下搅拌偶联0.5～3h，得到乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物粗品；③将上述乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物粗品用PBS缓冲液进行透析提纯8～24h，即得到乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物。
本发明还提供了一种上述甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒的在检测甘胆酸含量中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明针对现有的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒稳定性差的缺陷，将体系中的6-磷酸葡萄糖脱氢酶更换为乳酸脱氢酶，从而显著提高了试剂盒的分析灵敏度、精密度、热稳定性和长期稳定性。本发明还通过调节体系中乳酸脱氢酶-甘氨酸偶联物与β-NAD+的含量，进一步提高了试剂盒的各项性能指标，从而得到了一种分析灵敏度高、精密度和稳定性均十分优异的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒。
具体实施方式
下面将结合本发明中的实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动条件下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供了一种甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒及其制备方法，其中各组分及含量为：
即R2试剂中乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物和β-NAD+的体积质量比为1mL:2g。
试剂盒的制备方法为：
S1、R1试剂的制备：配制MOPS缓冲液，并按上表加入L-乳酸锂、鼠抗人甘胆酸特异性抗体、防腐剂Proclin 300、表面活性剂APG以及稳定剂PVP-K30，定容即得所述R1试剂。
S2、乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物的制备：①将甘胆酸溶于100mmol/L，pH为5.5的MES缓冲液中，得到浓度为5g/L的小分子半抗原溶液，然后加入活化剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)，其中EDC与甘胆酸的质量比为1:200，在温度为18℃～42℃，搅拌速度为130rpm～300rpm的条件下，活化5min～20min；②活化后加入乳酸脱氢酶，其中乳酸脱氢酶与甘胆酸的质量比为1:300，然后在温度为18℃～42℃，搅拌速度为130rpm～300rpm的条件下，偶联0.5h～3h，得到乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物粗品；③将上述偶联物粗品在2℃～8℃的条件下进行透析提纯，其中透析液为100mmol/L，pH 7.5的PBS缓冲液，透析时间为8h～24h，即得到乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物。
S3、R2试剂的制备：配制MOPSO缓冲液，然后按照上表中的含量依次加入β-NAD+，上述乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物，防腐剂Proclin 300和保护剂甘露醇，定容即得到R2试剂。
实施例2
本实施例与实施例1的不同之处在于：本实施例提供的试剂盒中各组分及含量为：
即R2试剂中乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物和β-NAD+的体积质量比为1mL:1g。
实施例3
本实施例与实施例1的不同之处在于：本实施例提供的试剂盒中各组分及含量为：
即R2试剂中乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物和β-NAD+的体积质量比为1mL:5g。
实施例4
本对比例与实施例1的不同之处在于：R2试剂中乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物的含量为2mL/L，β-NAD+的含量为2g/L，即乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物和β-NAD+的体积质量比为1mL：1g。
实施例5
本对比例与实施例1的不同之处在于：R2试剂中乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物的含量为2mL/L，β-NAD+的含量为12g/L，即乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物和β-NAD+的体积质量比为1mL：6g。
对比例1
本对比例与实施例1的不同之处在于：将R2试剂中的乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物更换为6-磷酸葡萄糖脱氢酶-甘胆酸偶联物，相应的将R1试剂中的底物L-乳酸锂更换为葡萄糖-6-磷酸。
对比例2
本对比例与实施例1的不同之处在于：将R2试剂中的β-NAD+添加至R1试剂中，即辅酶β-NAD+与L-乳酸锂存在于同一体系中。
评价方案
分别对实施例1-3和对比例1-4制得的试剂盒进行如下测试：
(1)空白吸光度：试剂在340nm波长处，空白吸光度应≤3.0000。
(2)准确度：检测质控品，其中质控品的靶值为5.00μg/mL，计算测定平均值与靶值的偏差，相对偏差应≤10％。
(3)精密度：在重复性条件下，用试剂盒测试同一血清样本或控制物质，重复测试10次，比较变异系数(CV)，CV应≤8％。
(4)分析灵敏度：试剂盒测试10.00μg/mL被测物时，吸光度差值(ΔA)应≥0.020。
(5)线性：在0～60μg/mL范围内，线性相关系数r≥0.995。
(6)热稳定性：将试剂分别置于37℃恒温水箱中进行热处理，热破坏7天后，评价试剂空白吸光度、准确度、精密度、分析灵敏度和线性。
(7)长期稳定性：试剂在2℃～8℃储存18个月后，评价试剂空白吸光度、准确度、精密度、分析灵敏度和线性。
测定结果如表1所示。
表1性能评价测试结果
根据表1的测定结果，其中对比例1的试剂在处理前，其分析灵敏度和线性均低于实施例1-5，同时对比例1的试剂在热处理和长期储存18个月后，其准确度、精密度、分析灵敏度相比于处理前发生了显著变化，即对比例1中使用的6-磷酸葡萄糖脱氢酶的稳定性差，不利于试剂的储存。对比例2的试剂，由于L-乳酸锂和辅酶β-NAD+共存于同一体系即R1试剂中，容易缓慢地发生反应，因此显著影响了试剂的准确度、分析灵敏度、灵敏度、线性以及稳定性。而实施例1-5的试剂不仅在处理前的准确度、分析灵敏度、精密度及线性等性能均显著较优，并且在热处理和长期储存18个月，试剂的各项性能数据无显著变化，即试剂的稳定性好。更进一步的，实施例1-3的试剂各项性能均优于实施例4-5，即乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物和β-NAD+的含量比对试剂的性能有一定的影响，但实施例4-5仍可满足使用需求。即本发明得到了一种分析灵敏度高、精密度和稳定性均优异的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，可充分满足使用需求。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，其特征在于，所述R1试剂中包括缓冲液、抗甘胆酸特异性抗体、L-乳酸锂、稳定剂、防腐剂和表面活性剂；所述R2试剂中包括缓冲液、β-NAD+、乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、保护剂和防腐剂。
2.根据权利要求1所述的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，其特征在于，所述R2试剂中乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物和β-NAD+的体积质量比为1mL：1～5g。
3.根据权利要求1所述的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，其特征在于，所述R1试剂的pH为7.0～8.0，具体包括：50～500mM缓冲液，1～10g/L抗甘胆酸特异性抗体，0.5～5g/L L-乳酸锂，0.1～10g/L稳定剂，0.5～5mL/L防腐剂，质量浓度0.05～1％表面活性剂；
所述R2试剂的pH为6.5～7.5，具体包括：50～500mM缓冲液，4～10g/Lβ-NAD+，1～5mL/L乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物，10～100g/L保护剂，0.5～5mL/L防腐剂。
4.根据权利要求1所述的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为HEPES缓冲液、PBS缓冲液、柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液、Tris缓冲液、MOPS缓冲液、TAPSO缓冲液、MES缓冲液、PIPES缓冲液、MOPSO缓冲液中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为EDTA·2Na、EDTA·3Na、EDTA·2NaMn、EDTA·Zn、PVP-K30、PVP-K90中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒，其特征在于，所述保护剂为蔗糖、海藻糖、葡聚糖、甘露醇、乳糖醇、山梨醇中的一种或多种。
7.权利要求1-6任一项所述的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒的制备方法，其特征在于，所述方法包括：
S1：R1试剂的制备：向缓冲液中依次加入L-乳酸锂、抗甘胆酸特异性抗体、稳定剂、防腐剂和表面活性剂，定容得到R1试剂；
S2、乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物的制备：将甘胆酸溶解后加入活化剂进行活化，然后加入乳酸脱氢酶进行偶联，得到乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物；
S3、R2试剂的制备：向缓冲液中依次加入β-NAD+、乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、保护剂和防腐剂，定容得到R2试剂。
8.根据权利要求7所述的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤S2的具体为：①将甘胆酸溶解于MES缓冲液中，加入活化剂EDC进行活化，其中EDC和甘胆酸的质量比为1：50～500，在温度为18～42℃条件下搅拌活化5～20min；②活化后加入乳酸脱氢酶，其中乳酸脱氢酶和甘胆酸的质量比为1：50～500，在温度为18～42℃条件下搅拌偶联0.5～3h，得到乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物粗品；③将上述乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物粗品用PBS缓冲液进行透析提纯8～24h，即得到乳酸脱氢酶-甘胆酸偶联物。
9.一种如权利要求7所述的甘胆酸均相酶免疫测定试剂盒的在检测甘胆酸含量中的应用。
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| CN (1) | CN112114127A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113373124A (zh) * | 2021-06-10 | 2021-09-10 | 吉林基蛋生物科技有限公司 | 一种乳酸脱氢酶的提取方法及其应用 |
Citations (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4273866A (en) * | 1979-02-05 | 1981-06-16 | Abbott Laboratories | Ligand analog-irreversible enzyme inhibitor conjugates and methods for use |
| WO2000073797A2 (en) * | 1999-05-28 | 2000-12-07 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Homogeneous tests for sequentially determining lipoprotein fractions |
| CN101048660A (zh) * | 2004-08-27 | 2007-10-03 | 灵芝国际股份有限公司 | 口腔液的同质酶免疫分析 |
| CN102766677A (zh) * | 2012-07-31 | 2012-11-07 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 乳酸脱氢酶检测试剂盒及其制备方法 |
| CN103760348A (zh) * | 2014-02-11 | 2014-04-30 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 一种甘胆酸免疫检测试剂及其制备和检测方法 |
| CN105132521A (zh) * | 2015-09-14 | 2015-12-09 | 绍兴圣康生物科技有限公司 | 一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法 |
| CN106226512A (zh) * | 2016-07-29 | 2016-12-14 | 胡清 | 一种试剂盒、试剂盒的制备方法及利用该试剂盒实现的外周血甘氨胆酸的检测方法 |
| CN106405069A (zh) * | 2016-04-06 | 2017-02-15 | 李松羊 | 一种甘胆酸均相酶免疫诊断试剂的制备方法 |
| CN106565809A (zh) * | 2016-07-08 | 2017-04-19 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 一种β半乳糖苷酶的酶供体偶联物及其在甘胆酸检测中的用途 |
| US20180156816A1 (en) * | 2013-03-15 | 2018-06-07 | Xiujuan Hao | Immunoassays of s-adenosylmethionine and methylation index in personalized medicine and health evaluation |
| CN108761068A (zh) * | 2018-04-02 | 2018-11-06 | 深圳上泰生物工程有限公司 | 克隆酶供体免疫检测试剂、制备方法、检测系统、检测方法以及试剂盒 |
| CN108872205A (zh) * | 2018-06-19 | 2018-11-23 | 深圳上泰生物工程有限公司 | 目标物含量检测方法以及检测试剂在该检测方法中的应用 |
| CN109444399A (zh) * | 2018-10-26 | 2019-03-08 | 重庆中元汇吉生物技术有限公司 | 一种甘胆酸检测试剂盒 |
| CN109884317A (zh) * | 2019-03-12 | 2019-06-14 | 杭州博谱医药科技有限公司 | 氧化型硫代辅酶i在均相酶免疫诊断试剂中的应用 |
| CN110174363A (zh) * | 2019-01-09 | 2019-08-27 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN110346311A (zh) * | 2019-07-15 | 2019-10-18 | 三诺生物传感股份有限公司 | 一种乳酸脱氢酶检测试剂 |
-
2020
- 2020-09-09 CN CN202010939133.0A patent/CN112114127A/zh active Pending
Patent Citations (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4273866A (en) * | 1979-02-05 | 1981-06-16 | Abbott Laboratories | Ligand analog-irreversible enzyme inhibitor conjugates and methods for use |
| WO2000073797A2 (en) * | 1999-05-28 | 2000-12-07 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Homogeneous tests for sequentially determining lipoprotein fractions |
| CN101048660A (zh) * | 2004-08-27 | 2007-10-03 | 灵芝国际股份有限公司 | 口腔液的同质酶免疫分析 |
| CN102766677A (zh) * | 2012-07-31 | 2012-11-07 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 乳酸脱氢酶检测试剂盒及其制备方法 |
| US20180156816A1 (en) * | 2013-03-15 | 2018-06-07 | Xiujuan Hao | Immunoassays of s-adenosylmethionine and methylation index in personalized medicine and health evaluation |
| CN103760348A (zh) * | 2014-02-11 | 2014-04-30 | 苏州博源医疗科技有限公司 | 一种甘胆酸免疫检测试剂及其制备和检测方法 |
| CN105132521A (zh) * | 2015-09-14 | 2015-12-09 | 绍兴圣康生物科技有限公司 | 一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法 |
| CN106405069A (zh) * | 2016-04-06 | 2017-02-15 | 李松羊 | 一种甘胆酸均相酶免疫诊断试剂的制备方法 |
| CN106565809A (zh) * | 2016-07-08 | 2017-04-19 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 一种β半乳糖苷酶的酶供体偶联物及其在甘胆酸检测中的用途 |
| CN106226512A (zh) * | 2016-07-29 | 2016-12-14 | 胡清 | 一种试剂盒、试剂盒的制备方法及利用该试剂盒实现的外周血甘氨胆酸的检测方法 |
| CN108761068A (zh) * | 2018-04-02 | 2018-11-06 | 深圳上泰生物工程有限公司 | 克隆酶供体免疫检测试剂、制备方法、检测系统、检测方法以及试剂盒 |
| CN108872205A (zh) * | 2018-06-19 | 2018-11-23 | 深圳上泰生物工程有限公司 | 目标物含量检测方法以及检测试剂在该检测方法中的应用 |
| CN109444399A (zh) * | 2018-10-26 | 2019-03-08 | 重庆中元汇吉生物技术有限公司 | 一种甘胆酸检测试剂盒 |
| CN110174363A (zh) * | 2019-01-09 | 2019-08-27 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 6-磷酸葡萄糖脱氢酶突变体及其在制备检测试剂中的用途 |
| CN109884317A (zh) * | 2019-03-12 | 2019-06-14 | 杭州博谱医药科技有限公司 | 氧化型硫代辅酶i在均相酶免疫诊断试剂中的应用 |
| CN110346311A (zh) * | 2019-07-15 | 2019-10-18 | 三诺生物传感股份有限公司 | 一种乳酸脱氢酶检测试剂 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113373124A (zh) * | 2021-06-10 | 2021-09-10 | 吉林基蛋生物科技有限公司 | 一种乳酸脱氢酶的提取方法及其应用 |
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