CN105132521A - 一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种甘胆酸测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型、兔抗人甘胆酸多克隆抗体、第一检测液牛血清白蛋白；第二检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、第二检测液牛血清白蛋白。本发明所述的一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法，其均相酶免疫法，操作简单，准确性高，便于推广。
Description
技术领域
本发明涉及一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法。
背景技术
甘胆酸是肝细胞功能及其肝胆系物质循环功能的敏感指标，急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、胆石症伴黄疸患者胆管、胆囊排泄功能障碍、梗阻性肝病、肠—肝循环障碍都会引起甘胆酸升高。但目前所使用的关于甘胆酸测定试剂盒其准确性低，且操作复杂，不易推广。
发明内容
本发明的目的在于提供一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法，其均相酶免疫法法，操作简单，准确性高，便于推广。
为了达到上述目的，本发明的技术方案是：
一种甘胆酸测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型、兔抗人甘胆酸多克隆抗体、第一检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸:β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型:兔抗人甘胆酸多克隆抗体:第一检测液牛血清白蛋白=（990—1100）:（2—4）:（2—4）:（18—22）:（18—22）；第二检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、第二检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物:第二检测液牛血清白蛋白=（490—510）:（0.8—1.2）:（9—11）。
第一检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型、兔抗人甘胆酸多克隆抗体、第一检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸:β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型:兔抗人甘胆酸多克隆抗体:第一检测液牛血清白蛋白=1000:3:3:20:20；第二检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、第二检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物:第二检测液牛血清白蛋白=500:1:10。
一种甘胆酸测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液15μL混合均匀并孵育5分钟；然后在第一试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度，将吸光度与已知浓度的标准液比较，从而得出检测液中甘胆酸浓度。
所述孵育时的温度均为37℃。
标准液中游离的甘胆酸与葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物竞争性结合抗甘胆酸特异性抗体位点。标准液中游离的甘胆酸越多，竞争结合的抗体位点越多，抗体释放出的酶标偶联物就越多。游离出来的甘胆酸酶标偶联物催化β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型（NAD+）转化为β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（NADH），标准液中甘胆酸浓度与NADH生成量成正比，通过NADH生成量从而判断甘胆酸的浓度。
本发明的有益效果是：一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法，其均相酶免疫法法，操作简单，准确性高，便于推广。
具体实施方式
实施例1
一种甘胆酸测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型、兔抗人甘胆酸多克隆抗体、第一检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸:β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型:兔抗人甘胆酸多克隆抗体:第一检测液牛血清白蛋白=1000:3:3:20:20；第二检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、第二检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物:第二检测液牛血清白蛋白=500:1:10。
一种甘胆酸测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液15μL混合均匀并孵育5分钟；然后在第一试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度，将吸光度与已知浓度的标准液比较，从而得出检测液中甘胆酸浓度。所述孵育时的温度均为37℃。
本实施例的一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法，其均相酶免疫法法，操作简单，准确性高，便于推广。
实施例2
一种甘胆酸测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型、兔抗人甘胆酸多克隆抗体、第一检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸:β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型:兔抗人甘胆酸多克隆抗体:第一检测液牛血清白蛋白=990:2:2:18:18；第二检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、第二检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物:第二检测液牛血清白蛋白=490:0.8:9。
一种甘胆酸测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液15μL混合均匀并孵育5分钟；然后在第一试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度，将吸光度与已知浓度的标准液比较，从而得出检测液中甘胆酸浓度。所述孵育时的温度均为37℃。
本实施例的一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法，其均相酶免疫法法，操作简单，准确性高，便于推广。
实施例3
一种甘胆酸测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型、兔抗人甘胆酸多克隆抗体、第一检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸:β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型:兔抗人甘胆酸多克隆抗体:第一检测液牛血清白蛋白=1100:4:4:22:22；第二检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、第二检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物:第二检测液牛血清白蛋白=510:1.2:11。
一种甘胆酸测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液15μL混合均匀并孵育5分钟；然后在第一试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度，将吸光度与已知浓度的标准液比较，从而得出检测液中甘胆酸浓度。所述孵育时的温度均为37℃。
本实施例的一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法，其均相酶免疫法法，操作简单，准确性高，便于推广。
Claims (4)
1.一种甘胆酸测定试剂盒，其特征在于：包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型、兔抗人甘胆酸多克隆抗体、第一检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸:β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型:兔抗人甘胆酸多克隆抗体:第一检测液牛血清白蛋白=（990—1100）:（2—4）:（2—4）:（18—22）:（18—22）；第二检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、第二检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物:第二检测液牛血清白蛋白=（490—510）:（0.8—1.2）:（9—11）。
2.根据权利要求1所述的一种甘胆酸测定试剂盒，其特征在于：第一检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸、β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型、兔抗人甘胆酸多克隆抗体、第一检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸:β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型:兔抗人甘胆酸多克隆抗体:第一检测液牛血清白蛋白=1000:3:3:20:20；第二检测液包括三羟甲基氨基甲烷、葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物、第二检测液牛血清白蛋白，原材料浓度比份为：三羟甲基氨基甲烷:葡萄糖六磷酸脱氢酶-甘胆酸偶联物:第二检测液牛血清白蛋白=500:1:10。
3.根据权利要求1所述的一种甘胆酸测定试剂盒的使用方法，其特征在于包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240μL，蒸馏水15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240μL，标准液15μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240μL，检测液15μL混合均匀并孵育5分钟；然后在第一试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入60μL混合均匀并孵育5分钟；最后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度，将吸光度与已知浓度的标准液比较，从而得出检测液中甘胆酸浓度。
4.根据权利要求3所述的一种甘胆酸测定试剂盒的使用方法，其特征在于：所述孵育时的温度均为37℃。
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| CN201510578138.4A CN105132521A (zh) | 2015-09-14 | 2015-09-14 | 一种甘胆酸测定试剂盒及其使用方法 |
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Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN115791649A (zh) * | 2019-01-09 | 2023-03-14 | 北京九强生物技术股份有限公司 | 甘胆酸检测试剂盒 |
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Legal Events
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| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20151209 |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |