CN115364176A - 石斛来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用 - Google Patents

石斛来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于植物性原料技术领域，公开了石斛来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用。石斛来源纳米囊泡由石斛水提取分离得到，成分天然，无毒副作用，具有良好的生物相容性和安全性，因此具有广阔的应用前景。本发明利用石斛来源纳米囊泡进行体内外实验，发现其具有强大的保护内皮细胞、抗动脉粥样硬化的作用，具体表现为可降低和防止ox‑LDL诱导下的HUVEC损伤、减缓动脉粥样硬化的程度，为石斛来源纳米囊泡在动脉粥样硬化防治的应用提供重要依据。

Description

石斛来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的 应用
技术领域
本发明属于植物性原料技术领域，特别涉及石斛来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
背景技术
动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）是冠心病、中风等心脑血管疾病的主要病理基础。随着生活水平的提高和生活方式的改变，由AS所致的心脑血管疾病已经成为严重危害人类健康的疾病之一，美国、欧洲及日本死于该病者占死亡总数的50%左右。众多的研究和探索发现血管内皮损伤是AS的始动环节，所以通过减轻血管内皮损伤来防治AS的研究目前是心脑血管疾病研究的热点。
随着中医药在防病治病中的独特优势不断显现，许多中药药方或制剂在防治动脉粥样硬化的研究被大量报道。中药多成分、多靶点、多途径的作用特点，使得许多中药的有效成分及作用机制仍未得到有效阐释。近年来，植物来源纳米囊泡尤其是中药来源纳米囊泡的研究逐渐引起科学界的关注。中药来源纳米囊泡不同于以往被广泛研究的中药单体，其内含丰富的蛋白质、核酸、代谢物等，其生物学功能有待挖掘。
石斛是中国传统的滋补药材，具有良好的抗炎、降血压、降血糖等疗效，且被发现具有一定的内皮细胞保护作用。然而，目前关于石斛在动脉粥样硬化防治中的作用未见有深入研究及报道。
发明内容
为了克服上述现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供石斛来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
本发明的目的通过下述方案实现：
石斛来源纳米囊泡（DDNV）在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
石斛来源纳米囊泡（DDNV）在制备预防动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
石斛来源纳米囊泡（DDNV）在制备治疗动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
所述药物相同或不同的分别包括治疗有效量的石斛来源纳米囊泡。
所述的药物相同或不同的分别可采用常规方法制成各种药用剂型，这些剂型包括：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、丹剂、混悬剂、酒剂、酊剂、滴剂等口服给药的剂型及注射液等口服以外的给药剂型，如针剂等。
所述的药物相同或不同的分别还可含有一种或一种以上药学上可接受的载体或赋形剂。
所述的赋形剂可包括稀释剂、湿润剂、润滑剂、填充剂、防腐剂等。
所述的动脉粥样硬化疾病可包括动脉粥样硬化或由动脉粥样硬化导致的冠心病、脑梗死、脑中风、心肌梗塞、心律失常或外周血管病等。
所述的石斛来源纳米囊泡可由石斛的茎部中分离得到。
所述的石斛可选自铁皮石斛、金钗石斛、细茎石斛、小粉花石斛、鼓槌石斛、马鞭石斛、黄草石斛、环草石斛，蝴蝶石斛等中的至少一种。
所述的石斛选自铁皮石斛、金钗石斛、细茎石斛等中的至少一种。
所述的石斛优选为铁皮石斛。
所述的石斛来源纳米囊泡可通过常规分离方法分离得到。如可通过粉碎或破壁加提取剂进行提取分离得到；进一步的，可对提取得到的提取液进行高速离心分离得到；更进一步的，可对提取液经进行预离心后得到上清液，上清液再进行高速离心，所得沉淀即为石斛来源纳米囊泡。
所述预离心的速度可为10000g或以下。通过预离心可将分非目标物质分离除去，减少杂质对于后续离心分离的影响。
所述超速离心的速度可为100000g或以上。
所述提取剂可为常规使用的水或加入磷酸盐等缓冲液的水溶液。
所述沉淀可用PBS等缓冲液重悬从而得到石斛来源纳米囊泡悬浮液。
所述石斛来源纳米囊泡悬浮液使用前可使用过滤器过滤以获得无菌的石斛来源纳米囊泡悬浮液。所述的过滤器可为0.22μm的过滤器。
石斛来源纳米囊泡由石斛水提取分离得到，成分天然，无毒副作用，具有良好的生物相容性和安全性，因此具有广阔的应用前景。
本发明利用石斛来源纳米囊泡进行体内外实验，发现其具有强大的保护内皮细胞、抗动脉粥样硬化的作用，具体表现为可降低和防止ox-LDL诱导下的HUVEC损伤、减缓动脉粥样硬化的程度，为石斛来源纳米囊泡在动脉粥样硬化防治的应用提供重要依据。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为DDNV的透射电镜图。
图2为不同倍数下观察HUVEC对DDNV摄取的荧光图。
图3为DDNV对HUVEC的增殖活力的影响效果图。
图4为DDNV对ox-LDL干预HUVEC的增殖活力的影响效果图。
图5和图6为DDNV对ox-LDL干预HUVEC的ROS水平影响效果图。
图7和图8为DDNV对ox-LDL干预HUVEC的单核细胞黏附能力影响效果图。
图9和图10为DDNV对ox-LDL诱导的HUVEC的凋亡的影响效果图。
图11-图13为DDNV改善高脂喂养Apoe-/-小鼠的动脉粥样硬化效果图。
其中，图中数据以means±SD表示，＊P＜0.05；＊＊P＜0.01；＊＊＊P＜0.001。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。下列实施例中涉及的物料若无特殊说明均可从商业渠道获得。所述方法若无特别说明均为常规方法。
一实施方式，石斛来源纳米囊泡（DDNV）在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
另一实施方式，石斛来源纳米囊泡（DDNV）在制备预防动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
再一实施方式，石斛来源纳米囊泡（DDNV）在制备治疗动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
一实施例中，石斛来源纳米囊泡可通过常规分离方法分离得到。
一实施例中，石斛来源纳米囊泡可通过粉碎或破壁后加提取剂进行提取分离得到。
一实施例中，石斛来源纳米囊泡可通过粉碎或破壁后加提取剂进行提取，对提取得到的提取液进行高速离心分离得到。
一实施例中，石斛来源纳米囊泡可通过粉碎或破壁后加提取剂进行提取，对提取得到的提取液进行预离心后得到上清液，上清液再进行高速离心，所得沉淀即为石斛来源纳米囊泡。
一实施例中，所述预离心的速度可为10000g或以下。通过预离心可将分非目标物质分离除去，减少杂质对于后续离心分离的影响。
一实施例中，所述超速离心的速度可为100000g或以上。
一实施例中，所述提取剂可为常规使用的水。
一实施例中，所述沉淀可用PBS等缓冲液重悬从而得到石斛来源纳米囊泡悬浮液。
一实施例中，所述石斛来源纳米囊泡悬浮液使用前可使用过滤器过滤以获得无菌的石斛来源纳米囊泡悬浮液。所述的过滤器可为0.22μm的过滤器。
一实施例中，石斛来源纳米囊泡可通过包括以下步骤方法得到：将新鲜铁皮石斛清洗干净、晾干，加入双蒸水，浸泡过夜，利用破壁机进行破碎，分离得到上清液，对上清液在100-10000g下进行多次的预离心，如可依次在300g、2000g、10000g下分别离心10-30min，分别取上清液，弃去沉淀，以除去非目标物质；预离心后的上清液在离心力100000g或以上（如135000g）进行超速离心，离心时间可为10-100min，所得沉淀即为石斛来源纳米囊泡；利用PBS重悬，得到石斛来源纳米囊泡悬液。
一实施例中，还对石斛来源纳米囊泡悬液重复多次超速离心。通过多次离心和重悬可获得纯度更高的石斛来源纳米囊泡。
一实施例中，还对石斛来源纳米囊泡悬液采用0.22μm过滤器进行过滤。通过过滤器的过滤可得到无菌的石斛来源纳米囊泡悬液。
一实施例中，利用透射电镜对DDNV进行形态学鉴定。由透射电镜（Tecnai G2SpiritTwin+GATAN 832.10W）观察可见，DDNV呈类圆形或椭圆形的囊泡（见图1），如托盘状，直径分布在50-200nm。
一实施例中，利用颗粒跟踪分析仪（NanoSight NS300）测定DDNV悬浮液中DDNV的粒径及其颗粒数。
一实施例中，利用BCA检测试剂盒（Thermo 科学公司）对DDNV的蛋白浓度进行定量测定，测定562nm波长的吸光度，测定悬浮液中蛋白浓度为11.89μg/μL。
新鲜铁皮石斛水提取物（Fresh dendrobium water extraction，FDWE）的制备为常规水提取方法即可，为使DDNV与FDWE具备可比性，故控制原材料质量与初始溶剂——双蒸水的体积一致，具体操作可如下：
（1）将等量的新鲜铁皮石斛清洗干净，粉碎，加入双蒸水，在40-80℃水浴中进行提取，过滤并收集滤液，重复提取3次，每次1h，合并3次提取液，3次提取采用水的总体积与DDNV所用水体积一致；
（2）在55℃下减压浓缩，冷冻干燥至恒重，得到新鲜铁皮石斛水提取物。使用前，用PBS重悬，并用0.22μm的过滤器过滤，再用PBS稀释成需要的浓度，如100mg/mL。
实施例1：HUVEC对DDNV的摄取
人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC）购买自上海中乔新舟生物科技有限公司（zqxzbio，ZQ0446）。
（1）DIL荧光探针的孵育：将10mg DIL染料（Solarbio，D8700）与1010个颗粒数的DDNV共孵育，37℃避光孵育30min，得到DIL-DDNV；
（2）去除游离的DIL：把步骤（1）孵育后混合液在100000g或以上进行超速离心，如在离心力135000g下离心70min，取沉淀，以PBS缓冲液重悬，得到DIL-DDNV悬浮液；
（3）将HUVEC接种于6孔板中，待细胞融合度长至50-60%，加入10μL的DIL-DDNV，37℃避光孵育6h；
（4）DAPI核染色：用PBS洗2-3次，每孔加入2mL基础ECM培养基，并加入10μL的1mg/mL的DAPI，放入培养箱孵育30-40mins；
（5）利用荧光显微镜进行观察，结果见图2。由图可见，DAPI核染色呈现为蓝染，DIL-DDNV聚集于胞质，呈现为红染。
实施例2：DDNV对HUVEC的增殖活力的影响
（1）将HUVEC接种于96孔板中，每孔5000个细胞，37℃孵育4h后细胞贴壁；
（2）按不同浓度加入DDNV（0，10μg/mL，20μg/mL，40μg/mL，80μg/mL，按BCA定量的蛋白浓度）和FDWE（0，1μg/mL，10μg/mL，100μg/mL，1000μg/mL），每组5个平行，设置空白组，37℃孵育6h后，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，继续培养至24h；
（3）每孔加入10μL CCK8检测液，37℃避光孵育2h，酶标仪上机检测450nm的吸光度，结果如图3所示。结果显示，低浓度DDNV对HUVEC的增殖活力有促进作用，而高浓度DDNV则会抑制其增殖。而低浓度FDWE对HUVEC的增殖没有促进作用，且高浓度时具有明显的抑制作用。
实施例3：DDNV对ox-LDL干预HUVEC的增殖活力的影响
处理分组：①NC组（空白对照组），②ox-LDL组（75μg/mL），③ox-LDL（75μg/mL）+DDNV（20μg/mL），④ox-LDL（75μg/mL）+FDWE（100μg/mL）；
（1）将HUVEC接种于96孔板中，每孔5000个细胞，37℃孵育4h后细胞贴壁；
（2）按分组设置，其中第③组先加入DDNV干预6h，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，加入ox-LDL，继续培养24小时；第④组先加入FDWE干预6h，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，加入ox-LDL，继续培养24小时；第①组不添加任何其他试剂，第②组加入ox-LDL（75μg/mL），分别培养24h；
（3）每孔加入10μL CCK8检测液，37℃避光孵育2h，酶标仪上机检测450nm的吸光度，结果如图4所示。由图可见，DDNV可有效降低和防止ox-LDL诱导下的HUVEC损伤；而FDWE不具有该逆转作用。
实施例4：DDNV对ox-LDL干预HUVEC的ROS水平影响
处理分组：①NC组（空白对照组），②ox-LDL组（75μg/mL），③ox-LDL（75μg/mL）+DDNV（20μg/mL），④ox-LDL（75μg/mL）+FDWE（100μg/mL）；
（1）将HUVEC接种于12孔板中，待细胞融合度长至70-80%，按分组设置分别加入试剂后继续培养；其中第③组先加入DDNV干预6h，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，加入ox-LDL，继续培养24小时；第④组先加入FDWE干预6h，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，加入ox-LDL，继续培养24小时；第①组不添加任何其他试剂，第②组加入ox-LDL（75μg/mL），分别培养24h；
（2）培养结束后，弃培养基，无血清培养基洗2次，加入DVFH-DA（1：1000），孵育0.5h，再次用无血清培养基换液洗2次，清除游离的荧光探针，加入500μL完全培养基，荧光显微镜下观察拍照；结果如图5和图6所示。由图可见，ox-LDL干预后ROS明显上调（荧光强度明显增强），DDNV可降低和预防这种效应，而FDWE不具有该逆转作用。
实施例5：DDNV对ox-LDL干预HUVEC的单核细胞黏附能力影响
处理分组：①NC组（空白对照组），②ox-LDL组（75μg/mL），③ox-LDL（75μg/mL）+DDNV（20μg/mL），④ox-LDL（75μg/mL）+FDWE（100μg/mL）；
（1）THP-1细胞（购自MeisenCTCC，CTCC-001-0044）离心重悬，用PBS重悬离心洗2次，加入calcein AM，终浓度为5μmol/L，37℃避光孵育30min后，PBS洗2次，加入ECM完全培养基重悬，细胞计数；
（2）将HUVEC接种于12孔板中，待细胞融合度长至70-80%，按分组设置分别加入试剂后继续培养；其中，第③组先加入DDNV干预6h，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，加入ox-LDL，继续培养24小时；第④组先加入FDWE干预6h，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，加入ox-LDL，继续培养24小时；第①组不添加任何其他试剂，第②组加入ox-LDL（75μg/mL），分别培养24h；
（3）培养结束后，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，按每孔5×105个细胞加入步骤（1）得到的THP-1，37℃避光孵育30min；用PBS换液，洗2次，最后加入1mL ECM完全培养基，荧光显微镜下观察拍照；结果如图7和图8所示。由图可见，ox-LDL干预后单核细胞黏附作用明显增强（绿色荧光标记的细胞明显增多），DDNV可减少和预防这种效应的发生，而FDWE不具有该逆转作用。
实施例6：DDNV对ox-LDL诱导的HUVEC的凋亡的影响
处理分组：①NC组（空白对照组），②ox-LDL组（75μg/mL），③ox-LDL（75μg/mL）+DDNV（20μg/mL），④ox-LDL（75μg/mL）+FDWE（100μg/mL）；
（1）将HUVEC接种于6孔板中，待细胞融合度长至70-80%，按分组设置分别加入试剂后继续培养；其中，第③组先加入DDNV干预6h，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，加入ox-LDL，继续培养24小时；第④组先加入FDWE干预6h，弃培养基，PBS洗2次，更换培养基，加入ox-LDL，继续培养24小时；第①组不添加任何其他试剂，第②组加入ox-LDL（75μg/mL），分别培养24h；
（2）细胞收集：悬浮细胞直接收集到10mL的离心管中，每样本细胞数为1×106/mL，500-1000r/min离心5min，弃去培养液；
（3）用1x binding buffer洗涤1次，500-1000r/min离心5min，用binding buffer重悬细胞；加入相应的Annexin V/PI探针，孵育30min，上流式细胞仪检测。结果如图9和图10所示。由图可见，ox-LDL显著激活了HUVEC的凋亡，DDNV可减少和预防这种效应的发生，而FDWE不具有该逆转作用。
实施例7：DDNV改善高脂喂养Apoe-/-小鼠的动脉粥样硬化
（1）实验对象：8周龄大雄性Apoe-/-小鼠；
（2）实验分组：①对照组（高脂喂养+PBS灌胃）；②DDNV灌胃（高脂喂养+DDNV灌胃剂量：10mg/kg/次）；③FDWE灌胃（高脂喂养+FDWE灌胃剂量：10mg/kg/次），每组5只；
（3）实验步骤：高脂喂养（21%乳脂、0.15%胆固醇）12周，每周根据分组的不同，给予3次灌胃。12周后，小鼠安乐死，并留取血液、心脏、主动脉等组织进一步实验；
（4）甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的测定：参照甘油三酯检测试剂盒（Boxbio，AKFA003C）、总胆固醇测定试剂盒（南京建成，A111-1-1）、低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒（南京建成，A113-1-1）进行小鼠血清的甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇测定，结果如图11所示。相比对照组，DDNV灌胃组可明显降低小鼠的血脂水平；FDWE灌胃组虽然具有一定降低总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇的作用，但对甘油三酯物无明显作用；
（5）主动脉大体油红染色：取出小鼠自主动脉弓到腹主动脉的肾动脉分支处，将主动脉纵向剪开，平铺于油红O染液工作液中15min，再放置到体积分数为70％的乙醇中分化，当正常的组织颜色变为乳白色，取出放到PBS中清洗2次，观察动脉的染色情况。结果如图12和图13所示。由图可见，相比对照组，DDNV灌胃组可显著减少主动脉斑块的面积，减缓动脉粥样硬化的程度；而FDWE灌胃组不具有该作用。
综上所述，石斛来源纳米囊泡具有强大的保护内皮细胞、抗动脉粥样硬化的作用，具体表现为可降低和防止ox-LDL诱导下的HUVEC损伤，为石斛来源纳米囊泡在动脉粥样硬化防治的应用提供重要依据。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.石斛来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
2.石斛来源纳米囊泡在制备预防动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
3.石斛来源纳米囊泡在制备治疗动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
4.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述的药物相同或不同的分别包括治疗有效量的石斛来源纳米囊泡。
5.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述的药物相同或不同的分别采用常规方法制成各种药用剂型，所述剂型包括：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、丹剂、混悬剂、酒剂、酊剂、滴剂的口服给药的剂型及注射液的口服以外的给药剂型。
6.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述的药物相同或不同的分别还含有一种或一种以上药学上可接受的载体或赋形剂。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述的赋形剂包括稀释剂、湿润剂、润滑剂、填充剂和防腐剂中的至少一种。
8.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述的动脉粥样硬化疾病包括动脉粥样硬化或由动脉粥样硬化导致的冠心病、脑梗死、脑中风、心肌梗塞、心律失常或外周血管病。
9.根据权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述的石斛来源纳米囊泡由石斛的茎部中分离得到。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115607606A (zh) * 2022-12-19 2023-01-17 中国医学科学院阜外医院深圳医院(深圳市孙逸仙心血管医院) 辣椒来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用
CN117045759A (zh) * 2023-03-27 2023-11-14 温州医科大学 一种温郁金来源脂质纳米囊泡在制备缓解非酒精性脂肪性肝病的药物中的应用
CN117180317A (zh) * 2023-11-02 2023-12-08 深圳市第二人民医院(深圳市转化医学研究院) 詹氏乳杆菌来源纳米囊泡在制备防治卵巢早衰治疗药物中的应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107308141A (zh) * 2017-05-31 2017-11-03 合肥师范学院 石斛酚及其组合物在制备预防和治疗动脉粥样硬化药物中的应用
CN108888713A (zh) * 2018-05-16 2018-11-27 遵义医学院 金钗石斛总碱在制备动脉粥样硬化药物中的应用
CN111759952A (zh) * 2020-08-10 2020-10-13 安徽同济生生物科技有限公司 石斛提取物在制备调节胆固醇代谢药物中的应用
CN111905107A (zh) * 2020-08-19 2020-11-10 福建医科大学 一种能保护芦荟活性成分且可作为药物载体的芦荟外泌体样囊泡
CN113846046A (zh) * 2021-10-22 2021-12-28 科丝美诗(中国)化妆品有限公司 石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在改善脱发症中的应用
CN113952417A (zh) * 2021-10-30 2022-01-21 安徽同济生生物科技有限公司 一种用于自发性高血压的干石斛醇提物制备方法
CN114159373A (zh) * 2021-10-22 2022-03-11 科丝美诗(中国)化妆品有限公司 石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在护肤化妆品中的应用

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107308141A (zh) * 2017-05-31 2017-11-03 合肥师范学院 石斛酚及其组合物在制备预防和治疗动脉粥样硬化药物中的应用
CN108888713A (zh) * 2018-05-16 2018-11-27 遵义医学院 金钗石斛总碱在制备动脉粥样硬化药物中的应用
CN111759952A (zh) * 2020-08-10 2020-10-13 安徽同济生生物科技有限公司 石斛提取物在制备调节胆固醇代谢药物中的应用
CN111905107A (zh) * 2020-08-19 2020-11-10 福建医科大学 一种能保护芦荟活性成分且可作为药物载体的芦荟外泌体样囊泡
CN113846046A (zh) * 2021-10-22 2021-12-28 科丝美诗(中国)化妆品有限公司 石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在改善脱发症中的应用
CN114159373A (zh) * 2021-10-22 2022-03-11 科丝美诗(中国)化妆品有限公司 石斛来源外泌体样囊泡及其制备和在护肤化妆品中的应用
CN113952417A (zh) * 2021-10-30 2022-01-21 安徽同济生生物科技有限公司 一种用于自发性高血压的干石斛醇提物制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
季爱兵等: "铁皮石斛水提物对高脂血症小鼠血脂和血糖的影响", 《食品研究与开发》 *
李亚梅等: "铁皮石斛对ApoE~(-/-)小鼠血脂及TNF-α,IL-6的影响", 《中国实验方剂学杂志》 *
李毓扬等: "铁皮石斛干预代谢综合征的作用分子机制研究进展", 《中国中药杂志》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115607606A (zh) * 2022-12-19 2023-01-17 中国医学科学院阜外医院深圳医院(深圳市孙逸仙心血管医院) 辣椒来源纳米囊泡在制备防治动脉粥样硬化疾病药物中的应用
CN117045759A (zh) * 2023-03-27 2023-11-14 温州医科大学 一种温郁金来源脂质纳米囊泡在制备缓解非酒精性脂肪性肝病的药物中的应用
CN117180317A (zh) * 2023-11-02 2023-12-08 深圳市第二人民医院(深圳市转化医学研究院) 詹氏乳杆菌来源纳米囊泡在制备防治卵巢早衰治疗药物中的应用
CN117180317B (zh) * 2023-11-02 2024-01-26 深圳市第二人民医院(深圳市转化医学研究院) 詹氏乳杆菌来源纳米囊泡在制备防治卵巢早衰治疗药物中的应用

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