CN115105502B - 一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用 - Google Patents

一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及医药技术领域，提供了一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用，本发明提出千金藤生物碱类化合物对引发猫传腹的猫冠状病毒(FIPV)的半数有效浓度EC50值均小于30μM，显示了对引发猫传染性腹膜炎的猫冠状病毒(FIPV)较强的抑制能力。

Description

一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎 药物中的应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体而言，涉及一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用。
背景技术
猫传染性腹膜炎（简称猫传腹，FIP）是一种具有传染性，复杂且严重的猫类高发疾病，整体发病率达10%左右，且最终易导致死亡。猫传腹按照发展期可分为早期和后期。其早期症状主要为发烧、嗜睡、体重下降、腹泻、腹围增大、呼吸困难等；后期症状可分干、湿两种类型。湿性猫传腹最显著的症状为胸、腹腔积液，腹围增大。干性猫传腹的主要症状为身体消瘦、发热。另外可能导致眼部、肾和中枢神经病变，如眼睛浑浊、结膜炎、眼睛蓄脓、视力障碍等。猫传腹致死率较高，然而仍缺乏有效的治疗方法。目前，猫传腹的主要治疗药物为免疫抑制药物和抗炎作用药物，如皮质类固醇药物，具有免疫调节作用的干扰素类药物等。这些药物虽然可在一定程度上延长病猫的生命期，但无法治愈。因此，猫传腹也被认为是兽医中已知的最具挑战性的猫传染病之一。因此，开发安全、高效的猫传腹治疗药物具有重要的社会意义和经济价值。
千金藤属植物在全世界约60余种，分布在亚洲、非洲和大洋洲等。我国约有千金藤属植物有39种，主要分布在云南和广西等地。该属植物主要以块根入药，具有清热解毒，散瘀消肿，凉血止血的功效。现代化学和药理学研究发现该属植物含有丰富的生物碱类活性成分，具有很高的深入研究和开发价值。现有技术公开了如下中国专利：CN201910928199.7 千金藤碱与自噬抑制剂联用在制备治疗肝癌药物中的应用、CN201510275098.6 一种含盐酸千金藤碱的药物组合物在制备治疗白细胞减少的药物中的应用以及CN202010176662.X 一种含千金藤碱的抗炎药物组合物及其制备方法；即千金藤属植物常用于急性肝炎，细菌性痢疾，流行性腮腺炎，淋巴结炎，神经性皮炎，急性阑尾炎，内出血以及跌打损伤等。
发明内容
基于现有技术研究中千金藤属植物常用于急性肝炎、细菌性痢疾、流行性腮腺炎、淋巴结炎、神经性皮炎、急性阑尾炎、内出血以及跌打损伤等；发明人经过研究创造性的发现了千金藤生物碱类化合物对引发猫传腹的猫冠状病毒（FIPV）有较强的抑制能力，经证实千金藤属植物生物碱可有效地应用于治疗猫传染性腹膜炎中，因此，本发明的目的在于提供一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用。
本发明的实施例通过以下技术方案实现：
本发明提供了含千金藤属植物生物碱类化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用。
进一步地，含千金藤属植物生物碱类化合物包括（1）~（13）中的一种或多种：（1）千金藤素；（2）千金藤碱；（3）表千金藤碱；（4）次表千金藤碱；（5）原千金藤碱；（6）间千金藤碱；（7）原间千金藤碱；（8）千金藤比斯碱；（9）千金藤默星碱；（10）表千金藤默星碱；（11）千金藤酮碱；（12）莲花宁碱；（13）轮环藤酚碱。
具体的，本发明提供了（1）~（13）所示化合物单体在制备治疗猫传染性腹膜炎的药物中的应用。
优选的，所述治疗猫传染性腹膜炎的药物还包括（1）~（13）所示化合物中任意两项或多项的组合；更加优选的为：①千金藤素+千金藤酮碱（摩尔浓度比为1:1）；②千金藤碱+莲花宁碱（摩尔浓度比为1:2）；③千金藤素+千金藤酮碱+莲花宁碱（摩尔浓度比为1:2:1）；④千金藤碱+莲花宁碱+轮环藤酚碱（摩尔浓度比为1:1:2）。
所述含千金藤属植物生物碱的化合物中的千金藤属植物包括景东千金藤、一文钱、雅丽千金藤、纤细千金藤、草质千金藤、西南千金藤、四川千金藤、光千金藤、桐叶千金藤、千金藤、粪箕笃、短梗地不容、金线吊乌龟、齿叶地不容、地不容、河谷地不容、汝兰、白线薯、荷包地不容、血散薯、大叶地不容、川南地不容、江南地不容、海南地不容、桂南地不容、广西地不容、临沧地不容、长柄地不容、大花地不容、马山地不容、小花地不容、米易地不容、药用地不容、小叶地不容、黄叶地不容、云南地不容中的一种或多种。
更加优选的，所述的千金藤属植物是千金藤、地不容、金线吊乌龟（白药子）中的一种或多种；还可以是千金藤属植物与其他中药组成的组合物形式。
优选的，所述的千金藤属植物提取物，是千金藤属植物的花、根、茎叶或全草的水提取物、乙醇提取物、乙醇-水混合提取物、甲醇-水混合提取物中的一种。
优选的，千金藤属植物有效部位是从千金藤属植物中提取、分离和精制后得到的粉末，有效部位中的活性成分为生物碱类化合物，总生物碱含量占提取物的重量百分比在50%以上。
本发明还提供了一种用于治疗猫传染性腹膜炎的千金藤属植物有效部位的制备方法，由以下步骤构成：
（1）取千金藤属植物的水提取物、乙醇提取物、乙醇-水混合提取物、甲醇-水混合提取物中的一种或多种；
（2）将步骤（1）中的千金藤属植物提取物用水混悬，得到提取物的水悬浮液；
（3）将步骤（2）所述提取物的水悬浮液加入质量分数为2％的盐酸水溶液，调节其pH至2～4，过滤得到酸水液。再向酸水液中加入浓氨水或碳酸氢钠或氢氧化钠溶液，调节溶液pH值至9～10，可得酸碱处理液；
（4）向步骤（3）所述酸碱处理液中加入氯仿或萃取3-6次，回收所述有机溶剂， 减压浓缩蒸干得千金藤属植物总生物碱粗提物；
（5）将步骤（4）中所得千金藤属植物总生物碱粗提物，采用大孔吸附树脂方法进行纯化，使用喷雾干燥或冷冻干燥方法去除溶剂，制的所述千金藤属植物生物碱。
优选的，步骤（1）中所述的千金藤属植物提取物为乙醇-水混合提取物。
本发明实施例的技术方案至少具有如下优点和有益效果：
本发明提供了千金藤生物碱类化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用。本发明经过创造性实验发现，千金藤生物碱类化合物对引发猫传腹的猫冠状病毒（FIPV）的半数有效浓度EC50值均小于30μM，显示了对FIPV较强的抑制能力。此外，这些单体还可呈浓度依赖方式，显著降低FIPV在细胞中的毒价，显示了这些化合物对FIPV的高效杀伤性。尤其是千金藤素对FIPV的EC50仅为1.84μM，且对猫肾细胞的毒性CC50为88.56μM，选择指数（SI）为48.18。显示出千金藤素对FIPV的选择性和高效杀伤性。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅展示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为千金藤属植物生物碱（1）~（13）单体的细胞毒性结果（CC50）和抗FIPV病毒活性结果（EC50）。
图2为千金藤属植物生物碱（1）~（13）单体抗FIPV病毒活性的TCID50测定结果；不同小写字母代表两组之间显著性为P-value<0.05，相同字母代表两组之间无显著性。
图3为千金藤生物碱不同单体及其组合物在总浓度为1μM情况下对FIPV的抑制效果；不同小写字母代表两组之间显著性为P-value<0.05，相同字母代表两组之间无显著性。
图4为组合物1、组合物2、组合物3及组合物4抗FIPV病毒活性的TCID50测定结果；不同小写字母代表两组之间显著性为P-value<0.05，相同字母代表两组之间无显著性。
图5为千金藤素和千金藤碱抗FIPV病毒活性的间接免疫荧光测定结果。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本发明实施例提供一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用。
进一步地，所述含千金藤属植物生物碱的化合物包括（1）~（13）中的一种或多种：（1）千金藤素；（2）千金藤碱；（3）表千金藤碱；（4）次表千金藤碱；（5）原千金藤碱；（6）间千金藤碱；（7）原间千金藤碱；（8）千金藤比斯碱；（9）千金藤默星碱；（10）表千金藤默星碱；（11）千金藤酮碱；（12）莲花宁碱；（13）轮环藤酚碱。
化合物（1）~（13）对引发猫传腹的猫冠状病毒（FIPV）的半数有效浓度EC50值均小于30μM，显示了对FIPV较强的抑制能力。此外，这些单体还可呈浓度依赖方式，显著降低FIPV在细胞中的毒价，显示了对FIPV的高效杀伤性。特别是千金藤素对FIPV的EC50仅为1.84μM，且对猫肾细胞的毒性CC50为88.56μM，选择指数（SI）为48.18，显示出千金藤素对FIPV的选择性和高效杀伤性。
可对单体进行任意组合使用，具体如表1所示，但不限于以下组合：
表1 优选的治疗猫传染性腹膜炎的药物单体组合物
更优地，本实施例中以组合物1-4进行举例说明，即：①千金藤素+千金藤酮碱；②千金藤碱+莲花宁碱；③千金藤素+千金藤酮碱+莲花宁碱；④千金藤碱+莲花宁碱+轮环藤酚碱，并通过实验证明上述组合物可以进一步增强对FIPV的抑制能力。
在本发明中，所述药物的剂型优选包括：乳剂、粉剂、胶囊、片剂、微囊、颗粒剂、口服液、注射液、冻干粉针、凝胶、腔道给药制剂或外用制剂。本发明对上述各剂型的制备方法不作特别限定，本领域常规方法均可。
此外，本发明还提供了一种用于治疗猫传染性腹膜炎的千金藤属植物有效部位提取物的制备方法，该方法制备得到的千金藤属植物提取物（包括有效部位）对传染性腹膜炎猫的症状有很好的治疗作用。
实施例1： 千金藤乙醇超声提取
取干燥的千金藤根部20克，粉碎成18目的颗粒，加入300ml浓度为50%的乙醇，在25℃和250W超声提取两次，每次30min，使用滤纸进行抽滤，此后合并两次得到的滤液，在60℃条件下减压加热，旋转蒸发除去有机溶剂，进一步通过真空干燥，得千金藤的乙醇超声提取物。
实施例2： 地不容乙醇超声提取
取干燥的地不容根部20克，粉碎成18目的颗粒，加入300ml浓度为50%的乙醇，在25℃和250W超声提取两次，每次30min，使用滤纸进行抽滤，此后合并两次得到的滤液，在60℃条件下减压加热，旋转蒸发除去有机溶剂，进一步通过真空干燥，得地不容的乙醇超声提取物。
实施例3： 白药子乙醇超声提取
取干燥的白药子根部20克，粉碎成18目的颗粒，加入300ml浓度为50%的乙醇，在25℃和250W超声提取两次，每次30min，使用滤纸进行抽滤，此后合并两次得到的滤液，在60℃条件下减压加热，旋转蒸发除去有机溶剂，进一步通过真空干燥，得白药子的乙醇超声提取物。
实施例4： 千金藤根总生物碱
将实施例1中的获得的提取物，均匀分散在5倍重量的水中，可得水悬浮液。将水悬浮液加入质量分数为2％的盐酸水溶液，调节其pH至2，过滤得到酸水液。再向酸水液中加入浓氨水溶液，调节溶液pH值至10，可得酸碱处理液。向酸碱处理液中加入氯仿萃取3-6次，回收所述有机溶剂, 通过减压浓缩蒸干，得到千金藤根总生物碱的粗提物。使用D-101型大孔吸附树脂对千金藤根总生物碱进行进一步纯化提取，使用喷雾干燥方法去除溶剂，可得千金藤根总生物碱。
实施例5： 地不容根总生物碱
将实施例2中的获得的地不容根的提取物，均匀分散在5倍重量的水中，可得水悬浮液。将水悬浮液加入质量分数为2％的盐酸水溶液，调节其pH至2，过滤得到酸水液。再向酸水液中加入浓氨水溶液，调节溶液pH值至10，可得酸碱处理液。向酸碱处理液中加入氯仿萃取3-6次，回收所述有机溶剂, 通过减压浓缩蒸干，得到地不容根总生物碱的粗提物。使用D-101型大孔吸附树脂对地不容根总生物碱进行进一步纯化提取，使用喷雾干燥方法去除溶剂，可得地不容根总生物碱。
实施例 6： 白药子根总生物碱有效部位
将实施例3中的获得的白药子根的提取物，均匀分散在5倍重量的水中，可得水悬浮液。将水悬浮液加入质量分数为2％的盐酸水溶液，调节其pH至2，过滤得到酸水液。再向酸水液中加入浓氨水溶液，调节溶液pH值至10，可得酸碱处理液。向酸碱处理液中加入氯仿萃取3-6次，回收所述有机溶剂, 通过减压浓缩蒸干，得到白药子根总生物碱的粗提物。使用D-101型大孔吸附树脂对白药子根总生物碱进行进一步纯化提取，使用喷雾干燥方法去除溶剂，可得白药子根总生物碱有效部位。
实验例1：千金藤属植物生物碱中（1）~（13）式单体对细胞的毒性试验
1..1 试验方法
1）将生长状态良好的猫肾细胞（CRFK）在温度为37℃，CO2比例为5%的条件下进行培养；
2）将CRFK细胞以5×103细胞/孔的密度接种在96孔板上。
3）使用千金藤属植物生物碱中（1）~（13）化合物药物在400μM、200μM、100μM、50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、3.125μM、1.56μM、0.78μM、0.39μM、0.195μM浓度水平下对细胞进行处理，并设置未加入药物的细胞对照。
4）在药物处理72小时后，通过MTT测定确定（1）~（13）化合物对CRFK细胞的细胞毒性作用，并使用酶标仪记录。观察化合物对细胞的最大作用效果，计算化合物的CC50值。
1.2. 试验结果
本实验例使用GraphPad Prism 9进行统计分析和数据可视化。结果见图1中A~M各图中右下方的曲线，可以看到千金藤属植物生物碱中（1）~（13）式单体对CRFK细胞存活率的影响，从而能反应对该细胞的毒性作用。从图中可以看出，绝大部分单体对CRFK细胞的毒性作用较小（CC50>60μM）。其中，原间千金藤碱、间千金藤碱、次表千金藤碱、原千金藤碱单体CC50>100μM，对CRFK细胞的毒性作用最小。另外需要说明的是，未加入药物的细胞组其浓度在零的情况下，抑制率是零。而在做图的过程中，数据不显示。
实验例2：千金藤属植物生物碱中（1）~（13）式单体抗FIPV病毒活性（EC50）试验
2.1. 试验方法
1）将生长状态良好的猫肾细胞（CRFK）在温度为37℃，CO2比例为5%的条件下进行培养；
2）将CRFK细胞以5×103细胞/孔的密度接种在96孔板上。
3）培养24h后，每孔加入0.01 MOI病毒液，并使用千金藤属植物生物碱中（1）~（13）化合物药物在400μM、200μM、100μM、50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、3.125μM、1.56μM、0.78μM、0.39μM、0.195μM浓度水平下对细胞进行处理，设置未加入药物的细胞对照。
4）在药物处理72小时后，通过MTT进行CRFK细胞的细胞活力检测。通过测定细胞存活率来计算不同化合物对病毒的抑制率，w计算化合物对FIPV抑制的EC50值。
2.2. 试验结果：
本实验例使用GraphPad Prism 9进行统计分析和数据可视化。结果见图1中A~M各图中左上方的曲线，通过测定CRFK细胞的存活率，可以计算千金藤属植物生物碱中（1）~（13）式单体对FIPV病毒的抑制效果。从图中可以看出，（1）~（13）式单体对FIPV的抑制效果都较好，半数最大效应浓度（EC50）小于30μM，并且呈剂量依赖性。尤其是莲花宁碱，原千金藤碱，轮环藤酚碱，千金藤碱，千金藤酮碱，千金藤素的半数最大效应浓度（EC50）均小于5μM，显示出了这些化合物对FIPV的强效抑制效果。此外，进一步计算了这些化合物的选择指数（SI=CC50/EC50），结果显示（1）~（13）式单体的SI都小于5，表明了这些化合物对FIPV的高度选择杀伤性，尤其是千金藤素，选择指数达到了48，说明了该化合物在制备猫传染性腹膜炎药物的价值。
实验例3：千金藤属植物生物碱中（1）~（13）式单体对猫冠状病毒活性TCID50的测定
3.1. 试验方法
1）将生长状态良好的猫肾细胞（CRFK）在温度为37℃，CO2比例为5%的条件下进行培养；
2）将CRFK细胞以5×103细胞/孔的密度接种在96孔板上。
3）培养24h后，使用千金藤属植物生物碱中（1）~（13）化合物药物在50μM、25μM、12.5μM、6.25μM、3.125μM、1.56μM浓度水平下对细胞进行处理，设置未加入药物的细胞对照，放入培养箱孵育。
4）在培养箱孵育1h后，取出24孔板，每孔接种0.01MOI的FIPV病毒，摇晃混匀，设置病毒对照与细胞对照，继续在37℃，CO2比例为5%的条件下进行培养。
5）培养12h后，在FIPV对照出现70％病变情况下，将24孔板转移至超低温（-80℃）冰箱冻融一次；
6）收集每孔液体，在4000rpm离心10min后，收集上清液，进行毒价测定。
3.2. 试验结果
本实验例使用GraphPad Prism 9进行统计分析和数据可视化。结果见图2中的A-M，从图中可以看出生物碱中（1）~（13）式单体均可降低FIPV病毒的毒价。其中有8个化合物浓度在25μM时可以使毒价下降4个滴度以上，其他化合物在25μM 时也能使毒价下降3个滴度以上（与浓度为0 μM的组别之间的差值）。尤其是千金藤素，在浓度为25μM可以下降4.21个滴度，12 .5μM时可以下降4.17个滴度，6 .25μM时降低4个滴度。表明这些化合物对猫冠状病毒FIPV具有很好的抑制作用。
实验例4： 千金藤属植物生物碱组合物抗FIPV病毒活性和TCID50测定
4.1. 试验方法：
1）利用国际权威的药物组合预测方法-概率系综相似度法（preDC）筛选千金藤属植物生物碱中能够增加抑制病毒效果的组合，并确定组合比例；
2）按照实施例3中所述方法，依据本实施例中步骤1）中计算得到的组合比例，测定不同组合的TCID50；
3）采用本实施例中确定的组合的比例，按照实施例2中所述步骤，测定在千金藤属植物生物碱组合化合物在总浓度为1μM条件下对FIPV病毒的抑制情况。
4.2. 试验结果
首先，本实施例通过preDC方法，确定了抗病毒效果较好的千金藤属植物生物碱组合物的排序，并选择其中的组合物1（千金藤素:千金藤酮碱=1:1）；组合物2（千金藤碱:莲花宁碱=1:2）；组合物3（千金藤素:千金藤酮碱:莲花宁碱=1:2:1）；组合物4（千金藤碱:莲花宁碱:轮环藤酚碱=1:1:2）进行进一步的实验验证，以上比例均为摩尔浓度比例。
本实验例使用GraphPad Prism 9进行统计分析和数据可视化。结果见图3 ，其为千金藤属植物生物碱组合物以及相关单体（千金藤素、千金藤碱、千金藤酮碱、莲花宁碱、轮环藤酚碱）在总浓度为1μM浓度下的抗FIPV效果。结果显示，上述组合物对病毒抑制效果均有显著提升，特别是组合物4，在1μM浓度下对FIPV病毒的抑制效果达到82%，说明千金藤属植物生物碱组合对猫冠状病毒的抑制效果。
本实验例使用GraphPad Prism 9进行统计分析和数据可视化。结果见图4中的A-D，结果显示组合物1-4均可降低猫冠状病毒FIPV的滴度。这些组合物浓度在12.5μM时，均可以使毒价下降4个滴度， 6.25μM时，均可降低3.5个滴度以上（与浓度为0μM的组别之间的差值）。表明千金藤生物碱组合物可以进一步提升对猫冠状病毒的抑制作用。
实验例5：千金藤素和千金藤碱对病毒活性间接免疫荧光检测
5.1. 试验方法：
1）将生长状态良好的猫肾细胞（CRFK）在温度为37℃，CO2比例为5%的条件下进行培养，以5×103细胞/孔的密度接种在96孔板上，继续培养24小时。
2）培养24h后，每孔接种0.01MOI的FIPV病毒，并按照千金藤素，千金藤碱为2组，加入相应化合物稀释，使每组浓度分别为50μM、10μM、5μM对细胞进行处理，同时设置未加入药物的细胞对照，放入培养箱继续培养。
3）待病毒对照组细胞出现70％病变的情况，弃掉孔中培养基，用PBS清洗后，使用4％多聚甲醛进行固定。
3）对每孔加入100μL5％的BSA进行封闭，在4℃水平下，封闭过夜。
4）PBS清洗3遍后，加入一抗；继续使用PBS清洗3遍，加入二抗。
5）培养12h后，在FIPV对照出现70％病变情况下，将24孔板转移至超低温（-80℃）冰箱冻融一次；
6）弃掉二抗后，使用荧光显微镜观察病毒侵染结果，并拍照保存。
5.2. 试验结果：
结果见图5，可以看出随着千金藤素和千金藤碱浓度增加，病毒抑制效果逐渐增强。在千金藤素和千金藤碱浓度为50μM时，抑制效果最明显，观察不到明显荧光。随着药物浓度降低，荧光越明显，说明FIPV增多，在5μM时，能观察到较多的CRFK细胞感染FIPV后出现的荧光。
实验例 6
（1）实验对象：与陕西秦岭七药协同创新中心有合作关系的5家宠物医院自2020年6月-2021年12月收治，并有完整治疗记录的，自然发生的猫传腹病例，共计420例。临床指标统计如表2所示：
表2 420例自然发生的猫传腹病例临床信息
临床指标 比例（%）
年龄（<2岁） 83
反复发烧，精神状态不佳，食欲下降 71
X光检测胸/腹积液，李凡他实验阳性 68
白蛋白比例下降 59
白细胞、中性粒细胞数目升高 63
眼睛出现炎症 26
腹水冠状病毒阳性 98
（2）分组和治疗方法
将以上收治的病例，按照随机数字表法，随机平均分成12组，采用不同的处理方式进行治疗：
1）常规治疗组：按照常规支持疗法进行治疗，依据患猫症状使用抗生素或激素进行治疗14天。
2）地不容提取物组：使用实施例2中的地不容根乙醇提取物对患猫灌食处理14天，每天剂量为干燥地不容根1g/kg所获得提取物的量。
3）白药子提取物：使用实施例3中的白药子根乙醇提取物对患猫灌食处理14天，每天剂量为干燥白药子根1g/kg所获得提取物的量。
4）千金藤提取物：使用实施例1中的千金藤根乙醇提取物对患猫灌食处理14天，每天剂量为干燥地千金藤根1g/kg所获得提取物的量。
5）地不容根总生物碱：使用实施例5中的地不容根总生物碱，加水后对患猫灌食处理14天，每天剂量为干燥地不容根1g/kg所获得根总生物碱的量。
6）白药子根总生物碱：使用实施例6中的白药子根总生物碱，加水后对患猫灌食处理14天，每天剂量为干燥白药子根1g/kg所获得根总生物碱的量。
7）千金藤根总生物碱：使用实施例4中的千金藤根总生物碱，加水后对患猫灌食处理14天，每天剂量为干燥千金藤1g/kg所获得根总生物碱的量。
8）组合物1：按照千金藤素:千金藤酮碱=1:1的摩尔比例配制后，对患猫进行灌食，连续14天，使用剂量每天按照2mg/kg使用。
9）组合物2：按照千金藤碱:莲花宁碱=1:2的摩尔比例配制后，对患猫进行灌食，连续14天，使用剂量每天按照2mg/kg使用。
10）组合物3：按照千金藤素:千金藤酮碱:莲花宁碱=1:2:1的摩尔比例配制后，对患猫进行灌食，连续14天，使用剂量每天按照2mg/kg使用。
11）组合物4：按照千金藤碱:莲花宁碱:轮环藤酚碱=1:1:2的摩尔比例配制后，对患猫进行灌食，连续14天，使用剂量每天按照2mg/kg使用。
12）千金藤素组：使用千金藤素加水后，对患猫进行灌食，连续14天，使用剂量每天按照2mg/kg使用。
（3）治疗标准
临床治疗效果的判断标准包括：1）治愈：连续治疗1个疗程（14天）后，5个月内无临床症状，血液学指标恢复正常。影像学监测无胸/腹腔积液等；2）复发：治疗1个疗程（14天）后症状缓解后，5个月内再次发病；3）死亡：治疗期间或治疗一个疗程后，3个月内发病死亡的。
（4）治疗结果
治愈定义为追踪 5 个月后无临床症状，血液学指标恢复正常。影像学监测以无胸、腹腔积液、髓质缘征等无发展。复发是指缓解后再次发病。
表2 不同处理组对猫传腹的治疗结果
组别 总数 治愈 复发 死亡 治愈率
常规治疗组 35 10 4 21 29%
地不容提取物 35 26 2 7 74%
白药子提取物 35 24 2 9 69%
千金藤提取物 35 25 1 9 71%
地不容根总生物碱 35 30 3 2 86%
白药子根总生物碱 35 31 2 2 89%
千金藤根总生物碱 35 32 1 2 91%
组合物1 35 32 3 0 91%
组合物2 35 29 4 2 83%
组合物3 35 31 2 2 89%
组合物4 35 29 2 4 83%
千金藤素 35 26 4 5 74%
结果显示：千金藤属植物的提取物和生物碱对猫传腹都有很好的治疗效果。地不容提取物，白药子提取物，千金藤提取物对猫传腹的治愈率分别为74%，69%和71%，显著高于使用传统疗法的治愈率（29%）。地不容、白药子及千金藤的提取物经精制后得到的生物碱治愈效果相对提取物有一定提升，分别达到了86%，89%和91%。单独使用千金藤素治愈率为74%，也显著高于使用传统疗法的治愈率。使用组合物1、组合物2、组合物3和组合物4治愈率分别为91%、83%、89%和83%。以上结果说明，千金藤藤属植物的提取物，千金藤属植物生物碱单体及生物碱的组合对猫传腹均有很好的治疗效果。
典型病例资料：
1.球球，1.5岁，雄性。主诉：该猫自2020年6月初起出现腹部膨大，食欲不振，体重下降，体温升高，精神状态不佳的症状。于2020年6月13日送至宠物医院就诊。兽医师检查发现，该猫精神状态和食欲很差，毛无光泽，眼结膜出现黄染现象，体温40.5 ℃，腹部有明显的对称性膨大现象，触摸有明显液体波动感。通过X光检测腹部有大量积液。通过无菌方式抽取出腹水，观察到腹水呈黄色粘稠样液体。腹水取样送陕西秦岭七药协同创新中心进行进一步检测，结果显示：白细胞、中性粒细胞数目升高，提示患猫体内存在炎症。液体李凡他实验呈阳性。进一步荧光定量PCR发现，腹水中存在猫冠状病毒。确诊该猫患有传染性腹膜炎。确诊之后，对该猫采取实施例2制的粉剂加水，灌食2周。5天后，腹部膨大现象明显改善，精神状态，食欲以及体温基本恢复正常。2周后，到宠物医院复诊检测，身体各项指标恢复正常。此后，连续5个月，每月复查一次，未出现复发现象。截至2021年12月，电话回访该猫仍正常生活，状态良好。
2.年糕，1岁2个月，雄性。主诉：该猫自2020年7月中旬起出现食欲下降，腹部膨大，精神状态不佳的症状。于2020年7月30日送至宠物医院就诊。接诊时猫有黏膜苍白，呼吸急促症状，测量体温40.6℃，观察腹部有明显的膨大现象，触摸有液体波动感。采集前肢静脉血液，进行血常规指标检查。结果显示：球蛋白明显偏高。进行胸腹部X光检查，发现其胸腔和腹部都充满积液。使用灭菌注射器抽取胸水后，送至陕西秦岭七药协同创新中心做进一步检测，发现液体李凡他实验呈阳性。进一步荧光定量PCR发现，该猫腹水中存在猫冠状病毒，确诊该猫患有传染性腹膜炎。确诊之后，对该猫采取实施例1制的粉剂加水，连续灌食2周。3天后，腹部膨大现象，精神状态和食欲都获得明显改善，体温恢复正常。2周后，到宠物医院复查，患病猫身体各项指标恢复正常。此后，连续5个月，每月复查一次，未出现复发现象。截至2021年12月，电话回访该猫仍正常生活，状态良好。
综上所述，本发明实施例提供的药物能够有效治疗猫传染性腹膜炎，并起到较好地根治效果。最后，应当指出，以上实施例仅是本发明较有代表性的例子。显然，本发明的技术方案并不限于上述实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员在任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化等，均应认为是等效的置换方式，且应属于本发明的保护范围。

Claims (7)

1.千金藤属植物生物碱在制备治疗猫传染性腹膜炎药物中的应用，其特征在于，所述生物碱为（1）~（13）中的一种或多种：（1）千金藤素；（2）千金藤碱；（3）表千金藤碱；（4）次表千金藤碱；（5）原千金藤碱；（6）间千金藤碱；（7）原间千金藤碱；（8）千金藤比斯碱；（9）千金藤默星碱；（10）表千金藤默星碱；（11）千金藤酮碱；（12）莲花宁碱；（13）轮环藤酚碱。
2.根据权利要求1所述的千金藤属植物生物碱在制备治疗猫传染性腹膜炎药物中的应用，其特征在于，所述生物碱为千金藤素和千金藤酮碱，且所述千金藤素和千金藤酮碱的摩尔比为1:1。
3.根据权利要求1所述的千金藤属植物生物碱在制备治疗猫传染性腹膜炎药物中的应用，其特征在于，所述生物碱为千金藤碱和莲花宁碱，且所述千金藤碱和莲花宁碱的摩尔比为1:2。
4.根据权利要求1所述的千金藤属植物生物碱在制备治疗猫传染性腹膜炎药物中的应用，其特征在于，所述生物碱为千金藤素、千金藤酮碱和莲花宁碱，且所述千金藤素、千金藤酮碱和莲花宁碱的摩尔比为1：2：1。
5.根据权利要求1所述的千金藤属植物生物碱在制备治疗猫传染性腹膜炎药物中的应用，其特征在于，所述生物碱为千金藤碱、莲花宁碱和轮环藤酚碱，且所述千金藤碱、莲花宁碱和轮环藤酚碱的摩尔比为1：1：2。
6.根据权利要求1所述的千金藤属植物生物碱在制备治疗猫传染性腹膜炎药物中的应用，其特征在于，所述药物还包括药剂学上允许的赋形剂。
7.根据权利要求1所述的千金藤属植物生物碱在制备治疗猫传染性腹膜炎药物中的应用，其特征在于，所述药物剂型包括：粉剂、胶囊、片剂、颗粒剂、口服液中的任意一种。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115779001A (zh) * 2022-12-05 2023-03-14 云南农业大学 一种地不容提取生物碱的方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1452967A (zh) * 2003-06-19 2003-11-05 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 千金藤素在制备抗sars病毒药物中的应用
CN104258084A (zh) * 2014-10-19 2015-01-07 卞毓平 一种治疗结核性腹膜炎的中药组合物及制备方法和应用
CN105999166A (zh) * 2016-06-30 2016-10-12 三峡大学 一种治疗冻疮的中药方剂及其制作方法
CN110063954A (zh) * 2019-04-10 2019-07-30 华中农业大学 Fhpi在制备治疗猫传染性腹膜炎药物中的应用
CN111228330A (zh) * 2020-03-13 2020-06-05 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 一种含千金藤碱的抗炎药物组合物及其制备方法
CN112516143A (zh) * 2020-11-30 2021-03-19 重庆医科大学 双苄四氢异喹啉衍生物在制备抗冠状病毒药物中的应用
KR20210116150A (ko) * 2020-03-16 2021-09-27 한국 한의학 연구원 테트란드린 또는 이의 유사체를 포함하는 코로나바이러스 감염 예방 또는 치료용 조성물
JP2022020082A (ja) * 2020-06-26 2022-02-01 太 松山 新型コロナウイルス感染と発症の予防ならびに治療と重症化リスクの低減にＴｉｎｏｓｐｏｒａ ｃｒｉｓｐａイボツヅラフジ類とその科目を用いた組成物とその使用の方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1452967A (zh) * 2003-06-19 2003-11-05 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 千金藤素在制备抗sars病毒药物中的应用
CN104258084A (zh) * 2014-10-19 2015-01-07 卞毓平 一种治疗结核性腹膜炎的中药组合物及制备方法和应用
CN105999166A (zh) * 2016-06-30 2016-10-12 三峡大学 一种治疗冻疮的中药方剂及其制作方法
CN110063954A (zh) * 2019-04-10 2019-07-30 华中农业大学 Fhpi在制备治疗猫传染性腹膜炎药物中的应用
CN111228330A (zh) * 2020-03-13 2020-06-05 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 一种含千金藤碱的抗炎药物组合物及其制备方法
KR20210116150A (ko) * 2020-03-16 2021-09-27 한국 한의학 연구원 테트란드린 또는 이의 유사체를 포함하는 코로나바이러스 감염 예방 또는 치료용 조성물
JP2022020082A (ja) * 2020-06-26 2022-02-01 太 松山 新型コロナウイルス感染と発症の予防ならびに治療と重症化リスクの低減にＴｉｎｏｓｐｏｒａ ｃｒｉｓｐａイボツヅラフジ類とその科目を用いた組成物とその使用の方法
CN112516143A (zh) * 2020-11-30 2021-03-19 重庆医科大学 双苄四氢异喹啉衍生物在制备抗冠状病毒药物中的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王文蜀，等.《中国民族地区药用植物化学成分与药理作用》.中央民族大学出版社,2013,290. *

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