CN1452967A - 千金藤素在制备抗sars病毒药物中的应用 - Google Patents

千金藤素在制备抗sars病毒药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN1452967A
CN1452967A CN 03126918 CN03126918A CN1452967A CN 1452967 A CN1452967 A CN 1452967A CN 03126918 CN03126918 CN 03126918 CN 03126918 A CN03126918 A CN 03126918A CN 1452967 A CN1452967 A CN 1452967A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sars
cepharanthine
medicine
cell
sars virus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN 03126918
Other languages
English (en)
Other versions
CN1201737C (zh
Inventor
王一飞
李久香
王庆瑞
杨崇文
陆家海
刘新建
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Jinan Biomedicine Research and Development Base Co Ltd
Original Assignee
Guangzhou Jinan Biomedicine Research and Development Base Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Jinan Biomedicine Research and Development Base Co Ltd filed Critical Guangzhou Jinan Biomedicine Research and Development Base Co Ltd
Priority to CN 03126918 priority Critical patent/CN1201737C/zh
Publication of CN1452967A publication Critical patent/CN1452967A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1201737C publication Critical patent/CN1201737C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Images

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

一种千金藤素在制备抗SARS病毒药物中的应用，是以千金藤素为有效成分制备抗SARS病毒药物，在安全剂量范围内，对SARS病毒的抑制率高；强的预防SARS病毒感染的作用；愈后快，可以减轻感染病人的综合症状；药物毒性小，稳定性好，耐药性强。

Description

千金藤素在制备抗SARS病毒药物中的应用
技术领域
本发明涉及药物领域，具体地是千金藤素在制备抗SARS病毒药物中的应用。
背景技术
自正式确定非典型肺炎的病原体为SARS冠状病毒以来，对于非典型肺炎及其病原体的防治和研究取得了极大进展，抗SARS冠状病毒药物和疫苗研制工作也在全力进行。SARS病毒是一种新型的冠状病毒，具有较强的传染性和变异性。目前SARS还缺乏特效的治疗，目前的治疗包括抗病毒治疗如利巴韦林，血清疗法等，用激素降低免疫系统对肺的损伤，用抗生素治疗潜在的细菌感染，辨证的中西医结合治疗；呼吸机的应用以及应激和ARDS的对症支持治疗等。抗SARS药物研制目前尚处于初期阶段。国内外多家实验室用各种方式在不同水平正进行着抗SARS病毒药物的筛选工作。国内军事医学科学院研制的ω干扰素作为一种辅助性治疗SARS药物已通过鉴定，中国科学院上海药物研究所以非典病毒E蛋白、N蛋白和(3CL)蛋白水解酶作药靶，初步筛选到可能有抗SARS病毒活性的药物19种，但是尚未见到有明确抗SARS病毒药物的体外细胞实验结果报道。千金藤素为米黄色粉末，经图谱(红外、紫外、核磁、质谱)分析结果证明符合分子式C37H38N2O6，分子量为606.686，用非水滴定法测定纯度达95％以上。本品易溶于氯仿、甲醇、乙醇，不溶于水。临床上主要用于防治肿瘤患者因放、化疗及其它原因所致的白细胞减少症，是从防己科千金藤属(Stephanialour)植物中提取分离出来的生物碱。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术存在的缺陷，提供千金藤素在制备抗SARS病毒药物中的应用。
本发明是以千金藤素为有效成分制备抗SARS病毒药物，可采用常规的制备工艺，制备成不同的药物剂型供患者使用，如制成口服液、胶囊、粉剂、针剂等。
药物注射液的用法与用量：通常成人，一次50mg，一日一次，(与250ml 5％葡萄糖液混匀后，也可不加葡萄糖。)缓缓静脉滴注。
以千金藤素为有效成分制备的抗SARS病毒药物作用如下：
1、药物对细胞的保护作用
以不同浓度药物加到长满单层用于体外培养SARS病毒的Vero-E6细胞株Vero-E6细胞的96孔板中，培养2h后弃药液，接种100TCID50的SARS-CoV病毒液，37℃吸附5％CO2培养48h，观察药物处理后的细胞对SARS-CoV感染的影响。同时做单用病毒感染时的病毒对照、正常细胞对照。结果显示：在Vero-E6细胞上的最大无毒浓度为10μg/mL。
表1是用MTS/PMS法测定药物对Vero-E6细胞的毒性剂量试验结果
表1
 千金藤素(μg/mL)                            OD值  存活率
    M+sd
    100.00   0.285   0.287   0.287   0.280   0.285+0.003   16％
    50.00   0.258   0.254   0.259   0.246   0.254+0.006   14％
    25.00   0.672   0.532   0.708   0.637   0.637+0.076   35％
    12.50   1.215   1.157   1.129   1.359   1.215+0.102   66％
    6.25   1.761   1.751   1.812   1.722   1.762+0.038   98％
    3.13   1.797   1.808   1.819   1.808   1.808+0.009   100％
    1.56   1.759   1.754   1.757   1.745   1.753+0.006   97％
    细胞对照   1.815   1.791   1.796   1.801   1.801+0.010   100％
根据CC50综合法求得CC50 21.38ug/mL，即千金藤素对Vero-E6细胞的半致死剂量为21.38ug/ml。
2、药物的抗SARS病毒作用
用细胞病变(CPE)法观察得千金藤素在不同情况下的效果。表2是不同剂量的千金藤素作用48h后，SARS-CoV感染的Vero-E6细胞病变情况
表2
  千金藤素(μg/mL) 预防作用 治疗作用     直接杀伤作用 综合作用
    0.5        ++++        ++++        ++++        ++++
    1        ++++        ++++        ++++        ++++
    2        ++++        ++++        ++++        ++++
    4        ++++        +++        +++        ++++
    6        +++        ++        +++        +++
    8        +++        +        ++        ++
    10        +        ----        ----        ----
    细胞对照        ----        ----        ----        ----
    病毒对照        ++++        ++++        ++++        ++++
注：“+”为CPE等级，0～25％为+、25％～50％为++、50％～75％为+++、75％～100％为++++结果显示：
(1)药物对SARS-CoV增殖的影响
接种100TCID50的SARS-CoV于长满单层Vero-E6细胞的96孔板上，37℃吸附2h，换上含相应浓度药物的维持液，继续培养48h，观察药物对SARS-CoV增殖的影响。结果显示：千金藤素对SARS-CoV的半抑制剂量为8ug/ml。
(2)药物对SARS-CoV的直接杀伤作用
含不同浓度药物的维持液与等量病毒液后，置37℃作用2h后，将孵育液加入长满单层Vero-E6细胞的96孔板中，0.1ml/孔，37℃吸附1h，换上含相应浓度药物的维持液，继续培养48h，观察药物对SARS-CoV的直接杀伤作用。结果显示：不同浓度药物与病毒等量混合2h后，在10μg/ml时对细胞感染SARS-CoV皆有全抑制作用。
(3)药物对SARS-CoV感染细胞的综合作用
药物和病毒等量混合后直接加到长满单层Vero-E6细胞的96孔板上37℃吸附2h，弃混合液加维持液，继续培养48h，观察药物对SARS-CoV感染细胞的综合作用。结果显示：千金藤素对SARS-CoV感染细胞的综合作用效果为：8ug/ml有抑制作用，浓度为10ug/ml时，对SARS-CoV病毒有100％的抑制效果。
(4)药物对病毒感染细胞的预防作用
不同浓度药物预先与细胞作用2h后，接种病毒，千金藤素在10μg/mL时可以66％抑制SARS病毒感染的Vero-E6细胞病变。
(5)药物对病毒感染细胞的治疗作用
千金藤素在10μg/ml时对细胞感染SARS-CoV有全部抑制作用。
本发明与现有技术相比具有如下优点：
1、在安全剂量范围内，对SARS病毒的抑制率高。
2、有较强的预防SARS病毒感染的作用。
3、愈后快，可以减轻感染病人的综合症状。
4、药物毒性小，稳定性好，耐药性强。
附图说明
图1是Vero-E6正常细胞图；
图2是Vero-E6细胞被SARS-CoV感染后病变图；
图3是千金藤素药物对被SARS-CoV感染的Vero-E6细胞的保护效果图。
具体实施方式
如图1所示，正常Vero-E6细胞贴壁生长，具有贴壁细胞的一般特性，细胞之间空隙小。如图2所示，Vero-E6细胞被SARS-CoV感染后，细胞从壁上脱落，细胞碎裂。如图3所示，被SARS-CoV感染Vero-E6细胞加入千金藤素处理后，仅有部分细胞从壁上脱落，大部分细胞的形态与正常细胞相同。
实施例1
1、实验材料受试药物是千金藤素，实验时用生理盐水配成混悬液，供实验用。
2、实验动物  昆明种小鼠，体重(20±2)g；Wistar大鼠，体重(270±20)g；C57BL/6小鼠，体重(20±2)g。
3、经口灌胃给药的急、慢性毒性试验①对小鼠急性毒性(LD50)及最大耐受量测定试验：取预先空腹12h的动物30只，随机分为3组，每组10只，各剂量组间间距为0.85。将千金藤素分别配成浓度为(2.0，1.7，1.4％)，然后给动物0.4ml·10g-1体重，1次ig，最大剂量为800mg·kg-1，观察1周，所有动物一般情况良好，无任何毒性反应及死亡。在此基础上进行1天内最大耐受量试验；另取动物20只，雌雄各半，禁食(不禁水)12h，然后按上法给动物1天2.0％的浓度ig两次，总量达1600mg·kg-1，，相当于人用量1.0mg·kg-1的1000倍以上，仅有少数动物出现少动，停止饮水和进食，持续2～3h后，即恢复正常，无动物死亡。表明，千金藤素对昆明种小鼠ig途径给药的最大耐受剂量为1600mg·kg-1。②对大鼠的长期毒性实验：取大鼠60只，随机分为3组，每组20只，雌雄各半。(a)对照组：NS，20ml·kg-1，ig；(b)和(c)组为千金藤素组，剂量分别为40，80mg·kg-1，ig(相当于人用量的40，80倍)，每日1次，连用60d，ig；给药。在用药期间每日观察动物一般情况(活动、毛发、食量、大便等)，每10d称1次体重；在用药30d及60d时测定血象(白细胞总数及分类，血小板、红细胞、血色素)，肝肾功能，试验结束，处死各组部分动物，剖取主要脏器(心、肺、肝、脾、肾、肠、胃、睾丸、子宫)进行病理组织学检查。其结果为各组所有动物一般情况良好；大剂量组动物体重增长较慢，而对血象、肝肾功能及各主要脏器的病理组织学均无明显影响，与对照组相比，无差异。
实施例2
对人进行的临床试验，试验组用药，千金藤素注射液的用法与用量：一次50mg，一日一次，缓缓静脉滴注。对照组注射生理盐水，其病情状况如表3所示，治愈时间如表4所示：
            表3：病情状况
组别   n   减轻   稳定    加重     Ridit检验
试验组对照组   3028   192   816    3(0)10(2) P＜0.05
该表结果显示：试验组(即使用RD-01治疗组)的病人比对照组的病人在病情上有较大的减轻。
                 表4：治愈时间
组别   n   缩短     基本不变 延长     Ridit检验
试验组对照组   3028   213     710   217(2) P＜0.05
注：()号内的数字为死亡人数。该表结果显示：试验组(即使用RD-01治疗组)的病人在治疗时间比对照组有较大的缩短。

Claims (2)

1、一种千金藤素在制备抗SARS病毒药物中的应用，是以千金藤素为有效成分制备抗SARS病毒药物。
2、根据权利要求1所述的千金藤素在制备抗SARS病毒药物中的应用，制备的药物剂型是口服液、胶囊、粉剂、或针剂。
CN 03126918 2003-06-19 2003-06-19 千金藤素在制备抗sars病毒药物中的应用 Expired - Fee Related CN1201737C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 03126918 CN1201737C (zh) 2003-06-19 2003-06-19 千金藤素在制备抗sars病毒药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN 03126918 CN1201737C (zh) 2003-06-19 2003-06-19 千金藤素在制备抗sars病毒药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1452967A true CN1452967A (zh) 2003-11-05
CN1201737C CN1201737C (zh) 2005-05-18

Family

ID=29260348

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN 03126918 Expired - Fee Related CN1201737C (zh) 2003-06-19 2003-06-19 千金藤素在制备抗sars病毒药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1201737C (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1301713C (zh) * 2005-07-08 2007-02-28 闫雪生 千金藤素软胶囊及其制备方法
CN100346793C (zh) * 2005-06-01 2007-11-07 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 千金藤素用于制备抗单纯疱疹病毒ⅱ型的药物的用途
CN113827580A (zh) * 2020-06-24 2021-12-24 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种千金藤素吸入药剂和制剂及其制备方法与应用
CN113855627A (zh) * 2020-06-30 2021-12-31 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种盐酸千金藤素注射液
CN114288297A (zh) * 2021-12-28 2022-04-08 南方医科大学 千金藤素在制备抗流感病毒药物中的应用
CN115105502A (zh) * 2022-06-27 2022-09-27 陕西秦岭七药协同创新中心有限公司 一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102514488B1 (ko) * 2020-03-16 2023-03-28 한국한의학연구원 테트란드린 또는 이의 유사체를 포함하는 코로나바이러스 감염 예방 또는 치료용 조성물

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100346793C (zh) * 2005-06-01 2007-11-07 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 千金藤素用于制备抗单纯疱疹病毒ⅱ型的药物的用途
CN1301713C (zh) * 2005-07-08 2007-02-28 闫雪生 千金藤素软胶囊及其制备方法
CN113827580A (zh) * 2020-06-24 2021-12-24 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种千金藤素吸入药剂和制剂及其制备方法与应用
CN113855627A (zh) * 2020-06-30 2021-12-31 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种盐酸千金藤素注射液
CN114288297A (zh) * 2021-12-28 2022-04-08 南方医科大学 千金藤素在制备抗流感病毒药物中的应用
CN115105502A (zh) * 2022-06-27 2022-09-27 陕西秦岭七药协同创新中心有限公司 一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用
CN115105502B (zh) * 2022-06-27 2023-08-22 陕西秦岭七药协同创新中心有限公司 一种含千金藤属植物生物碱的化合物在制备猫传染性腹膜炎药物中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN1201737C (zh) 2005-05-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1201737C (zh) 千金藤素在制备抗sars病毒药物中的应用
CN1813711A (zh) 一种异黄酮类化合物的用途
CN102356872A (zh) 一种降血脂组合食物
CN107383150B (zh) 一种具有抗肝损伤活性的化合物及其制备方法和用途
CN112891362B (zh) 一种用于治疗脓毒症的药物组合物及其应用
CN1733125A (zh) 枳实或枳壳有效部位或其组合物及其制备方法和制药用途
CN104622864A (zh) 绿原酸在制备预防和治疗原发性皮肤t细胞淋巴癌的药物中的用途
CN1141101C (zh) 治疗乙肝的药物及其制备方法
CN1651433A (zh) 一种丹酚酸黄连素复盐及其制备方法与应用
US9629864B2 (en) Use of baicalin in preparation of drugs for treating acute hemolytic uremic syndrome
CN1296089C (zh) 一种莪术注射制剂及其制备方法
CN1130213C (zh) 一种抗癌止痛的中药药贴
US20160361334A1 (en) Application of baicalin in preparation of drug for treating ricin poisoning
CN111700900A (zh) 一种天然免疫活化剂、til细胞促进剂及其应用
CN1426783A (zh) 吴茱萸碱在制药中的应用
CN1306854A (zh) 山豆根水提醇沉物及其在制药中的应用
CN1305471C (zh) 氧化槐定碱在制备抗癌药的用途
CN114903897B (zh) 千金藤素在制备抗蜱传脑炎病毒药物中的应用
CN1219539C (zh) 一种免疫调节剂及其在制药中的应用
US11617729B2 (en) Uses of guanidine hydrochloride as a drug for treating cancers/tumors
CN101099769B (zh) 连翘在制备抗肿瘤化疗增敏减毒药物中的应用
CN1148958A (zh) 青阳参甙甲、甙乙在制药中的应用
CN102440994A (zh) 灵芝酸g在肿瘤治疗中作为免疫增效剂和超抗原依赖的治疗药物的应用
CN1834108B (zh) 红毛五加复合多糖、制备工艺、用途及该复合多糖组合物
CN1045723C (zh) 土贝母苷甲注射液

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C19 Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee