CN115715783B - 一种防治猪白痢的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物制剂技术领域，公开了一种防治猪白痢的中药组合物。一种防治猪白痢的中药组合物由以下重量份的原料药制成：白头翁10～30份、九里根10～30份、黄芦木10～20份、倒水莲10～20份、罐子草10～20份、黄连5～20份、苦参5～20份、板蓝根5～20份和黄芪5～20份。本发明的中药组合物能够极大提高发病猪的治愈率，有效降低养殖损失；而且，绿色安全、无毒副作用、防治兼备的优点，具有良好的市场应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及兽药领域，具体涉及一种防治猪白痢的中药组合物及其制备方法。
背景技术
猪白痢，表现多样，原因复杂，临床上必须辨证分析、综合治疗，才能取得理想的效果。该疾病给畜牧业带来巨大危害。猪白痢主要由大肠杆菌病引起，发生于猪，引起肠炎及败血症。在临床上以腹泻、排乳白色或灰白色粘稠腥臭粪便为特征，在病理剖检上以肠道炎症为特征。该病在世界各国均普遍存在，在发病率较高，病死率较低，若治疗不及时，将对猪的成活率和生长发育有很大影响，会给养殖业带来较大经济损失。目前，猪白痢国内养猪场普遍采用抗生素进行治疗，造成猪体内抗生素大量残留。因此，亟需研究一种高效安全的药物来对猪白痢进行有效预防和治疗。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明的目的旨在提供一种防治猪白痢的中药组合物及其制备方法。
为实现发明目的，本发明采用的技术方案如下：
本发明第一方面提供了一种防治猪白痢的中药组合物，由以下重量份的原料药制成：白头翁10～30份、九里根10～30份、黄芦木10～20份、倒水莲10～20份、罐子草10～20份、黄连5～20份、苦参5～20份、板蓝根5～20份和黄芪5～20份，所述原料药的来源是中药材或相当于上述中药材生药量的中药提取物。
根据上述的中药组合物，优选地，所述中药组合物由以下重量份的原料药制成：白头翁30份、九里根30份、黄芦木10份、倒水莲10份、罐子草10份、黄连10份、苦参10份、板蓝根10份和黄芪10份。
本发明第二方面提供了一种上述第一方面所述的中药组合物的制备方法，该制备方法为：将白头翁、九里根、黄芦木、倒水莲、罐子草、黄连、苦参、板蓝根、黄芪按比例混合后加入溶剂进行提取，提取完成后过滤，收集滤液，即得中药组合物；
或采用含纤维素酶的水溶液对板蓝根进行浸提，得到板蓝根粗提液；对白头翁进行醇提，得到白头翁粗提液；将醇提后的白头翁药渣与九里根、黄芦木、倒水莲、罐子草、黄连、苦参、黄芪按比例混合后加入溶剂进行提取，提取完成后过滤，收集滤液；将所述滤液与白头翁粗提液、板蓝根粗提液混合均匀，即得中药组合物。
优选地，所述溶剂为水或乙醇溶液；所述提取方式为连续逆流式提取，所述连续逆流式提取的提取温度为100℃。更加优选地，所述乙醇溶液的体积分数为50％～70％。
优选地，采用体积分数为50％～70％的乙醇溶液对白头翁进行醇提；白头翁与乙醇溶液的质量比为1：(8～12)。
优选地，采用含纤维素酶的水溶液对板蓝根进行浸提的具体操作为：将板蓝根加入水中，再加入纤维素酶，在50～60℃进行浸提，浸提后过滤，得到板蓝根粗提液。更加优选地，所述纤维素酶的用量为板蓝根重量的0.1％～0.2％；所述板蓝根与水的质量比为1：(8～12)。
本发明第三方面提供了上述第一方面所述的中药组合物在制备治疗猪白痢的药物中的应用。
本发明第四方面提供了一种防治猪白痢的药物，所述药物由上述第一方面所述的中药组合物和药学上可接受的辅料制成。
优选地，所述药物为口服剂型。更加优选地，所述药物为口服液、颗粒剂或散剂。最优选地，所述药物为口服液。
优选地，所述辅料包括防腐剂或/和表面活性剂。所述防腐剂为脱氢乙酸钠或/和尼泊金乙脂；所述表面活性剂为聚山梨酯80。
优选地，所述药物的制备方法为：将白头翁、九里根、黄芦木、倒水莲、罐子草、黄连、苦参、板蓝根、黄芪按比例混合后加入溶剂进行提取，提取完成后过滤，收集滤液，将滤液浓缩(浓缩温度为50～60℃)至相对密度1.05～1.10，再加入药学上可接受的辅料，得到所述的药物。
更加优选地，所述药物的制备方法的具体步骤为：
A、采用乙醇溶液对白头翁进行醇提，醇提后过滤，得到滤液A和白头翁药渣，回收滤液A中的溶剂，得到白头翁提取液；
B、将板蓝根加入水中，再加入纤维素酶，在50～60℃进行浸提，过滤，得到滤液B，将滤液B浓缩(浓缩温度为50～60℃)至相对密度1.05～1.10，得到板蓝根粗提液；
C、将经步骤A处理后的白头翁药渣与九里根、黄芦木、倒水莲、罐子草、黄连、苦参、黄芪按比例混合，加入溶剂进行提取，提取完成后过滤，得到滤液C，将滤液C浓缩(浓缩温度为50～60℃)至相对密度1.05～1.10(50～60℃)；
D、步骤A制备的白头翁粗提液、步骤B制备的板蓝根粗提液与步骤C制得的滤液混合均匀，再加入药学上可接受的辅料，得到所述的药物。
更加优选地，步骤A中，所述乙醇溶液的体积分数为50％～70％；白头翁与乙醇溶液的质量比为1：(8～12)。
更加优选地，步骤B中，所述纤维素酶的用量为板蓝根重量的0.1％～0.2％；所述板蓝根与水的质量比为1：(8～12)。
更加优选地，步骤C中，所述溶剂为水或乙醇溶液；最优选地，所述溶剂为水。
更加优选地，步骤C中，所述提取方式为连续逆流式提取，所述连续逆流式提取的提取温度为100℃。
更加优选地，步骤C中，所述辅料包括防腐剂或/和表面活性剂。所述防腐剂为脱氢乙酸钠和尼泊金乙脂，脱氢乙酸钠和尼泊金乙脂联合使用，能够增强防腐效果；所述表面活性剂为聚山梨酯80。
本发明中药组合物中各组分皆采购市售品即可，所述中药组合物的组方原理如下：
白头翁：为毛茛科植物白头翁的干燥根；味苦、寒，归胃、大肠经；功效为清热解毒，凉血止痢。
九里根：野牡丹科植物星毛金锦香的根或果实；味甘、微苦、性凉；含有酯类、甾醇类、有机酸类、氨基酸类、黄酮苷类成分；功能为清热利湿；主湿热泻痢，痰热咳喘。
黄芦木：为小檗科植物黄芦木的根和茎、枝；味苦，性寒，功能为：清热燥湿，解毒；主治：肠炎、痢疾、目赤、口疮。
倒水莲：为毛莨科唐松草属植物峨眉唐松草的全草；性寒，味苦、涩；主含氧化小檗碱、小唐松草醛碱等；主治湿热黄疸泻痢。
罐子草：为野牡丹科植物朝天罐的枝叶，味苦、甘、平；含有酯类、甾醇类、黄酮苷类成分；主治湿热泄痢。
黄连：为毛茛科、黄连属多年生草本植物，味苦，性寒；功效为清热燥湿，泻火解毒；主治湿热痞满、呕吐吞酸、泻痢、黄疸等。
苦参：为豆科植物苦参的干燥根，味苦，性寒，有清热燥湿，杀虫，利尿之功。
板蓝根：为十字花科植物菘蓝IsatisindigoticaFort.的干燥根，味苦，性寒，归心、胃经，具有清热解毒、凉血、利咽的功效，主治外感发热，温病初起，温毒发斑，痄腮，丹毒，痈肿疮毒。
黄芪：为豆科黄芪属植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根，味甘，性微温；归脾、肺经；具有健脾补中，升阳举陷，益卫固表，利尿，托毒生肌的功效；主治脾气虚证，肺气虚证，气虚自汗证，气血亏虚等。
本发明中药组合物的组方机理为：白头翁和九里根性苦、寒，功能清热凉血，主治湿热泻痢、痰热咳喘，故为君药；黄芦木、倒水莲和罐子草性苦、寒共为臣药，加强清热解毒和清热燥湿之功；苦参和黄连共为佐药，合用增强清热泻火的功效；板蓝根清热解毒和黄芪补气升阳，提升免疫力。诸药合用，共奏清热解毒，燥湿止泻之功，抗菌消炎，敛肺涩肠，调节脾胃功能从而扭转病机，截断病势。本产品可从抗菌、消炎、抗病毒、解热、提升免疫等多方位调节和治疗，从而使热清、邪散等诸病得以缓解。
与现有技术相比，本发明取得的积极有益效果如下：
本发明中药组合物具有清热解毒，燥湿止泻，提升免疫力的能力，对大肠杆菌引起的猪白痢具有良好的预防和治疗效果。而且，通过疗效实验表明，本发明的中药组合物能够极大提高发病猪的治愈率，有效降低养殖损失；而且，绿色安全、无毒副作用、防治兼备的优点，具有良好的市场应用价值。
具体实施方式
以下通过具体实施例对本发明作进一步详细说明，但并不限制本发明的范围。
实施例1：
一种防治猪白痢的药物，该药物由中药组合物和药学上可接受的辅料制成。按重量份计，所述中药组合物由以下原料药制成：白头翁30份、九里根30份、黄芦木10份、倒水莲10份、罐子草10份、黄连10份、苦参10份、板蓝根10份和黄芪10份，所述原料药的来源是中药材。
上述药物的制备方法为：
A、采用体积分数为70％的乙醇对白头翁(白头翁与70％乙醇的质量比1:12)进行2次醇提，每次醇提时间为2h，醇提后过滤，得到滤液A和白头翁药渣，回收滤液A中的溶剂，得到白头翁提取液；
B、将板蓝根加入水中，再加入纤维素酶，在60℃进行2次浸提，每次浸提时间为4h，浸提后过滤，得到滤液B，将滤液B浓缩至相对密度1.08，得到板蓝根粗提液；其中，板蓝根与水的质量比为1:12，纤维素酶的加入量占板蓝根总重的0.1％；
C、将经步骤A得到的白头翁药渣与九里根、黄芦木、倒水莲、罐子草、黄连、苦参、黄芪按比例混合，加入水(水的用量为原料药总重的10倍)在100℃进行连续逆流式提取，提取时间为2h，提取完成后过滤，得到滤液C，将滤液C浓缩至相对密度1.08(50～60℃)；
D、将白头翁粗提液、板蓝根粗提液、步骤C制得的滤液C混合均匀，浓缩至每1ml药液相当于原生药材1g，得到中药组合物；向中药组合物种加入防腐剂和表面活性剂，混合均匀，即得防治猪白痢的药物。防腐剂为脱氢乙酸钠和尼泊金乙脂，防腐剂的用量占中药组合物总质量的0.1％。所述表面活性剂为聚山梨酯80，表面活性剂的用量占中药组合物总质量的0.1％。
实施例2：
一种防治猪白痢的药物，该药物由中药组合物和药学上可接受的辅料制成。按重量份计，所述中药组合物由以下原料药制成：白头翁10份、九里根10份、黄芦木10份、倒水莲10份、罐子草10份、黄连5份、苦参5份、板蓝根5份和黄芪5份，所述原料药的来源是中药材。
上述药物的制备方法与实施例1相同。
实施例3：
一种防治猪白痢的药物，该药物由中药组合物和药学上可接受的辅料制成。按重量份计，所述中药组合物由以下原料药制成：白头翁20份、九里根20份、黄芦木10份、倒水莲10份、罐子草10份、黄连10份、苦参5份、板蓝根5份和黄芪10份，所述原料药的来源是中药材。
上述药物的制备方法与实施例1相同。
实施例4：
一种防治猪白痢的药物，该药物由中药组合物和药学上可接受的辅料制成。按重量份计，所述中药组合物由以下原料药制成：白头翁20份、九里根15份、黄芦木10份、倒水莲10份、罐子草10份、黄连5份、苦参5份、板蓝根5份和黄芪20份，所述原料药的来源是中药材。
上述药物的制备方法与实施例1相同。
实施例5：
一种防治猪白痢的药物，该药物由中药组合物和药学上可接受的辅料制成。按重量份计，所述中药组合物由以下原料药制成：白头翁10份、九里根30份、黄芦木10份、倒水莲10份、罐子草10份、黄连5份、苦参5份、板蓝根10份和黄芪10份，所述原料药的来源是中药材。
上述药物的制备方法与实施例1相同。
实施例6：
一种防治猪白痢的药物，该药物由中药组合物和药学上可接受的辅料制成。按重量份计，所述中药组合物由以下原料药制成：白头翁25份、九里根25份、黄芦木18份、倒水莲18份、罐子草18份、黄连15份、苦参15份、板蓝根15份和黄芪15份，所述原料药的来源是中药材。
上述药物的制备方法与实施例1相同。
实施例7：
一种防治猪白痢的药物，该药物由中药组合物和药学上可接受的辅料制成。按重量份计，所述中药组合物由以下原料药制成：白头翁30份、九里根30份、黄芦木20份、倒水莲20份、罐子草20份、黄连20份、苦参20份、板蓝根20份和黄芪20份，所述原料药的来源是中药材。
上述药物的制备方法与实施例1相同。
(一)本发明防治猪白痢的药物功效验证实验：
为了验证本发明防治猪白痢的药物功效，以本发明实施例1、实施例2制备的药物为例，进行功效验证实验。同时，为了与本发明防治猪白痢的药物进行对比，本发明还设置了以下对比实验，即对比例1～对比例5；对比例1～对比例4药物与本发明实施例1基本相同，其不同之处在于配方中中药组合物采用的原料药不同，对比例1～对比例4中药组合物采用的原料药具体参见表1。对比例5采用的实验药物为恩诺沙星注射液，规格：100ml:10g，批号：20220601，生产企业齐鲁动物保健品有限公司生产。
表1试验各组采用的原料药
1、试验对象
河南雄峰猪场管家农业科技有限公司的养猪场，45日龄猪，发生猪白痢。所有试验用猪均采用猪用配合饲料(希杰饲料有限公司生产)，挑出自然发病猪160头，本试验利用160个定位栏，每栏饲养试验猪1头，1个料槽，自由采食，饮水方式为自动饮水装置。
2、实验药物：
实验药物为本发明实施例1～实施例2制备的药物、对比例1～对比例4制备的药物和对比例5的药物。
3、试验分组及用药：
将160头患病猪随机分为8组(实验1组～实验8组)，每组20只。
实验1组～实验6组采用的药物分别为实施例1～实施2、对比例1～对比例4制备的药物。实验1组～实验6组用药方法为：灌服，每kg体重给药0.50ml，连用5日。
实验7组采用的药物为恩诺沙星注射液对照组(规格为100ml：10g)，用药方法为：肌肉注射，每kg体重给药2.5mg，连用3日。
实验8组为不处理对照组，不采用药物进行治疗，仅给予同样的饮水和饲料饲养。
4、病原菌分离与鉴定
用药前，每头发病猪，用灭菌棉签沾取猪直肠内容物，置于装有1ml300ml/L甘油生理盐水的2mlEP管中冷藏保存。分离细菌时，取出装有样品的EP管，在无菌条件下，采取接种环沾取病原，划线接种于麦康凯营养培养基，培养后选取周边分红、中心深红色单个菌落划线接种于伊红美蓝营养琼脂，培养后，再选取黑色泛金属光泽单个菌落划线接种于普通营养琼脂培养备用，同时接种于营养肉汤培养细菌，保存菌种。按革兰氏染色操作规程和大肠埃希菌血清型鉴定规程，进行鉴定。
5、临床疗效观察及疗效评价标准：
A、观察时间：首次用药开始观察，停止给药后继续观察5天。
B、临床症状及记录：试验期间，每天观察并记录猪的临床表现，如体温、粪便状态、精神、食欲、小便等。
C、疗效评价标准：
治愈：试验期间，用药后，相关临床症状消失并无反复，症候总分不超过6分，为治愈。
有效：试验期间，用药后，试验结束时症候总分较试验第一天症候总分有减少，为有效。
无效：试验期间，用药后，试验结束时总分较试验第一天症候总分不变或增加，为无效。
治愈率＝治愈数/组内动物数×100％。
有效率＝(治愈数+有效数)/组内动物数×100％。
无效率＝无效数/组内动物数×100％。
其中，猪白痢的症候评分标准如表2所示。
表2猪白痢的症候评分标准
6、实验结果
(1)病原菌鉴定结果：
试验猪自然发病，病猪主要表现为精神萎靡，食欲减退，猪出现下痢，排出灰白色粪便，有腥臭。用灭菌棉签沾取猪直肠内容物，经病原菌分离与鉴定，最终确定猪感染的是大肠杆菌o抗原类型。
(2)猪白痢的治疗效果
根据疗效评价标准对药物治疗猪白痢效果进行统计，其实验结果如表3所示。
表3各实验组用药及治疗效果统计
由表3可知，停药后第5天(10d)，实验1组的治愈率(60.0％)最高，其次是实验2组(55.0％)，实验3组～实验7组次之，实验8组最低5.0％；而且实验1组的有效率(90.0％)最高，其次是实验2组(85.0％)，实验3组～实验7组次之，实验8组最低25.0％。恩诺沙星注射液对照组疗效不好，分析原因可能是产生了耐药性。由此说明，本发明通过将白头翁、九里根、黄芦木、倒水莲、罐子草、黄连、苦参、板蓝根和黄芪进行组合，起到了协同增效的作用，极大地提高了猪白痢的治疗效果。
(二)本发明防治猪白痢的药物的安全性实验：
1、试验动物及用药方法
将40头健康试验猪，随机分成4组(I～Ⅳ)，每组10头，设I组为空白对照组、II组为1倍剂量组、III组为3倍剂量组、Ⅳ组为5倍剂量组。试验用药为实施例1制备的药物，采用灌服给药，用药方法参见表4。每日上午清圈，试验猪自由采食，自由饮水，于每日09:00、14:00、19:00各加料1次。本试验利用40个栏位，每栏饲养试验猪1头，1个料槽，自由采食，饮水方式为自动饮水装置。所有试验用猪均采用猪用配合饲料(希杰饲料有限公司生产)详见表4。
表4实验动物分组及用药方法
2、观察及检测指标
(1)临床表现观察
给药第1天开始，至停药后第7天，连续观察12天。每天早上9点给料时，观察并记录各试验猪的精神状况、呼吸、食欲、二便等情况。停药后第7天，若仍有精神状况、呼吸、食欲、二便等异常者，需继续观察至体征恢复正常或再继续观察7天(即停药后第14天)。
(2)统计实验猪日采食量和日增重，计算料肉比。
(3)血液常规检测及血液生化指标检测：分别于给药前、停药后第1天、停药后第7天，每头前腔静脉采血5mL，分两管放置。
其中1管置于带抗凝剂的离心管中，用于血常规分析。检测指标包括血红蛋白含量(HGB)、白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血小板计数(PLT)、中性粒细胞计数(Neut)、嗜酸性细胞计数(Eos)、嗜碱性细胞计数(Baso)、淋巴细胞计数(Lymph)、单核细胞计数(Mono)。
另1管不加抗凝剂，血液样品于室温静置2h，然后以2500rpm的转速离心5min，取上层血清，-20℃保存，用于血液生化指标分析。检测指标包括谷丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(UN)、肌酐(Cr)、血糖(GLU)、总胆红素(TBILI)。
3、实验结果
(1)临床表现
给药期间及停药观察期间，空白对照组的试验猪精神状况、呼吸、食欲、二便未见异常。其余各剂量组的试验猪在给药期间及停药观察期间均未出现任何异常的临床反应。
(2)料肉比
统计给药期间、停药期间实验猪的日采食量和日增重，并计算料肉比(料肉比＝消耗饲料总量kg/增重总量kg)，其具体结果如表5所示。
表5实施例1不同剂量对靶动物(猪)生产性能的影响(n＝10)
由表5可知，给药期间(共5天)，与空白对照组相比，1、3、5倍剂量组的日采食量与空白对照组差异不显著；1、3、5剂量组日增重与空白对照组差异均不显著。停药期间(共7天)，1、3、5倍剂量组的日采食量和日增重与空白对照组差异均不显著。说明不同剂量组对猪的体重无不良影响。
(3)血常规指标
给药前各剂量组的试验猪的血常规指标检测结果如表6所示。
表6给药前靶动物(猪)血常规指标(n＝10)
| 项目 | 空白剂量组 | 1倍剂量组 | 3倍剂量组 | 5倍剂量组 |
| 白细胞(109/L) | 19.34±3.65 | 19.50±3.08 | 20.33±3.54 | 19.40±5.12 |
| 红细胞(1012/L) | 5.80±0.48 | 5.54±0.52 | 5.50±0.29 | 5.86±0.25 |
| 血红蛋白(g/L) | 112.00±10.13 | 113.80±12.32 | 106.90±5.55 | 114.00±6.82 |
| 血小板(109/L) | 308.60±91.55 | 294.90±48.37 | 266.08±88.22 | 244.90±56.50 |
| 中性粒细胞(％) | 45.92±8.95 | 43.33±7.77 | 43.05±7.89 | 50.75±7.27 |
| 嗜酸性细胞(％) | 1.20±0.42 | 1.70±0.82 | 1.70±0.68 | 1.20±0.42 |
| 嗜碱性细胞(％) | 0.20±0.63 | 0.10±0.32 | 0.20±0.42 | 0.10±0.32 |
| 淋巴细胞(％) | 48.56±8.19 | 50.16±7.26 | 51.04±9.16 | 44.54±6.88 |
| 单核细胞(％) | 4.12±2.92 | 4.71±2.59 | 4.01±2.54 | 3.41±2.40 |
参考值范围：白细胞计数(10.2～21.2)*109(个/L)，红细胞计数(3.4～7.9)*1012(个/L)，血红蛋白106.1～125.9(g/L)，血小板雄性(232～368)*103/mm3，血小板雌性(161～269)*103/mm3，中性粒细胞幼稚型0～5.4(％)，中性粒细胞杆核型3.0～7.0(％)，中性粒细胞分叶型28～45(％)，嗜酸性粒细胞0～5.8(％)，嗜碱性粒细胞0～1.0(％)，淋巴细胞40～70(％)，单核细胞2.0～6.0(％)。
由表6可知，给药前各剂量组的试验猪的血常规指标均在正常范围内，且与空白对照差异不显著(P>0.05)。
停药后第1天各剂量组的试验猪的血常规指标检测结果如表7所示。
表7停药第1天靶动物猪血常规指标(n＝10)
| 项目 | 空白剂量组 | 1倍剂量组 | 3倍剂量组 | 5倍剂量组 |
| 白细胞(109/L) | 19.12±4.49 | 19.22±0.66 | 21.58±3.57 | 20.90±6.42 |
| 红细胞(1012/L) | 5.99±0.38 | 6.33±0.17 | 6.08±0.36 | 6.20±0.61 |
| 血红蛋白(g/L) | 113.20±3.36 | 116.40±3.69 | 115.10±3.48 | 116.90±10.09 |
| 血小板(109/L) | 296.70±37.29 | 269.00±36.27 | 276.00±51.22 | 370.60±55.56* |
| 中性粒细胞(％) | 42.29±4.81 | 39.21±6.08 | 38.13±9.67 | 43.79±5.46 |
| 嗜酸性细胞(％) | 2.00±1.33 | 1.00±0.82* | 1.40±0.70 | 1.10±0.32* |
| 嗜碱性细胞(％) | 0.30±0.48 | 0.20±0.42 | 0.40±0.52 | 0.30±0.48 |
| 淋巴细胞(％) | 50.85±4.55 | 54.73±5.55 | 55.00±8.50 | 49.65±4.60 |
| 单核细胞(％) | 4.56±2.02 | 4.86±1.75 | 5.07±2.47 | 5.16±2.30 |
注：同列数据肩标*表示与空白对照组相比差异显著(P<0.05)，**表示与空白对照组相比差异极显著(P<0.01)。
由表7可知，停药第1天，与空白对照组比较，5倍剂量组血小板显著高于空白对照组(P<0.05)，1倍剂量组和5倍剂量组的嗜酸性细胞显著低于空白对照组(P<0.05)，其余各血常规指标与空白对照组差异不显著(P>0.05)。各组试验猪的血常规指标均在正常范围内。
停药后第7天，各剂量组的试验猪的血常规指标检测结果如表8所示。
表8停药第7天靶动物猪血常规指标(n＝10)
| 项目 | 空白剂量组 | 1倍剂量组 | 3倍剂量组 | 5倍剂量组 |
| 白细胞(109/L) | 16.52±3.15 | 21.22±5.63* | 20.80±4.15 | 16.80±4.95 |
| 红细胞(1012/L) | 5.68±0.43 | 5.85±0.49 | 6.14±0.45 | 6.39±0.62* |
| 血红蛋白(g/L) | 110.50±5.64 | 111.40±10.98 | 117.20±9.72 | 120.00±9.44* |
| 血小板(109/L) | 295.10±79.45 | 321.50±78.70 | 323.50±91.35 | 270.10±92.85 |
| 中性粒细胞(％) | 43.78±6.05 | 44.46±9.43 | 40.20±10.56 | 40.19±8.03 |
| 嗜酸性细胞(％) | 1.50±0.53 | 1.80±1.40 | 1.20±1.03 | 1.00±0.82 |
| 淋巴细胞(％) | 49.58±5.36 | 47.10±9.48 | 51.85±10.37 | 52.57±8.16 |
| 嗜碱性细胞(％) | 0.80±0.63 | 0.80±1.03 | 1.10±2.18 | 0.60±0.70 |
| 单核细胞(％) | 4.34±2.54 | 5.84±1.92 | 5.65±3.08 | 5.64±1.78 |
注：同列数据肩标*表示与空白对照组相比差异显著(P<0.05)，**表示与空白对照组相比差异极显著(P<0.01)。
由表8可知，停药第7天，与空白对照组比较，1倍剂量组白细胞显著高于空白对照组(P<0.05)；5倍剂量组红细胞、血红蛋白均显著高于空白对照组(P<0.05)，其余各血常规指标与空白对照组差异不显著(P>0.05)。各组试验猪的血常规指标均在正常范围内。
(4)血液生化指标
给药前实验猪血液生化指标的检测结果如表9所示。
表9给药前靶动物猪血液生化指标(n＝10)
| 项目 | 空白剂量组 | 1倍剂量组 | 3倍剂量组 | 5倍剂量组 |
| 总胆红素(μmol/L) | 1.20±0.41 | 0.79±0.35* | 0.93±0.34 | 1.11±0.43 |
| 总蛋白(g/L) | 46.12±3.75 | 44.20±4.05 | 41.87±3.15* | 44.08±2.78 |
| 谷丙转氨酶(IU/L) | 54.44±15.21 | 53.60±16.06 | 56.80±16.69 | 53.67±19.33 |
| 白蛋白(g/L) | 16.30±2.74 | 17.06±4.65 | 15.69±2.23 | 17.22±1.97 |
| 谷草转氨酶(IU/L) | 82.67±37.54 | 57.89±26.00 | 75.78±28.39 | 61.56±15.15 |
| 尿素氮(mmol/L) | 3.25±0.51 | 4.27±0.95* | 4.11±0.57* | 3.65±0.79 |
| 肌酐(μmol/L) | 69.11±8.24 | 71.30±13.45 | 72.10±13.18 | 82.70±11.05* |
| 血糖(mmol/L) | 5.00±1.25 | 5.31±0.63 | 4.65±1.12 | 5.25±0.96 |
注：同列数据肩标*表示与空白对照组相比差异显著(P<0.05)，**表示与空白对照组相比差异极显著(P<0.01)。
由表9可知，给药前，与空白对照组相比，1倍剂量组总胆红素显著低于空白对照组(P<0.05)，尿素氮显著高于空白对照组(P<0.05)；3倍剂量组总蛋白显著低于空白对照组(P<0.05)，尿素氮显著高于空白对照组(P<0.05)；5倍剂量组肌酐显著高于空白对照组(P<0.05)，其余各项血液生化指标与空白对照组差异不显著(P>0.05)。各组试验猪的血液生化指标均在正常范围内。
停药后第1天，实验猪血液生化指标的检测结果如表10所示。
表10停药第1天靶动物猪的血清生化指标(n＝10)
| 项目 | 空白剂量组 | 1倍剂量组 | 3倍剂量组 | 5倍剂量组 |
| 总胆红素(μmol/L) | 1.89±0.21 | 1.95±0.43 | 1.72±0.27 | 2.21±0.49 |
| 总蛋白(g/L) | 45.08±2.31 | 46.11±2.89 | 44.90±3.24 | 45.80±2.02 |
| 谷丙转氨酶(IU/L) | 47.90±8.23 | 36.50±5.29* | 39.67±9.51 | 41.50±9.00 |
| 白蛋白(g/L) | 18.07±3.17 | 17.76±2.44 | 16.90±2.17 | 19.21±3.00 |
| 谷草转氨酶(IU/L) | 50.78±14.78 | 43.63±9.56 | 48.33±15.97 | 40.70±13.75 |
| 尿素氮(mmol/L) | 2.51±0.58 | 3.73±0.61* | 3.67±0.70* | 2.97±0.68 |
| 肌酐(μmol/L) | 73.80±8.12 | 83.75±12.12 | 82.56±12.85 | 86.30±12.76* |
| 血糖(mmol/L) | 5.01±0.49 | 4.38±0.70 | 4.74±1.84 | 4.96±0.91 |
注：同列数据肩标*表示与空白对照组相比差异显著(P<0.05)，**表示与空白对照组相比差异极显著(P<0.01)。
由表10可知，停药第1天，与空白对照组相比，1倍剂量组谷丙转氨酶显著低于空白对照组(P<0.05)，尿素氮显著高于空白对照组(P<0.05)；3倍剂量组尿素氮显著高于空白对照组；5倍剂量组肌酐显著高于空白对照组(P<0.05)，其余各项指标与空白对照组差异不显著(P>0.05)。各组试验猪的血液生化指标均在正常范围内。
停药后第7天，实验猪血液生化指标的检测结果如表11所示。
表11停药第7天靶动物猪的血清生化指标(n＝10)
| 项目 | 空白剂量组 | 1倍剂量组 | 3倍剂量组 | 5倍剂量组 |
| 总胆红素(μmol/L) | 1.59±0.50 | 1.80±0.43 | 1.53±0.48 | 1.59±0.62 |
| 总蛋白(g/L) | 47.63±3.44 | 48.49±4.97 | 47.37±3.17 | 48.52±2.78 |
| 谷丙转氨酶(IU/L) | 39.10±7.64 | 40.10±10.09 | 41.50±9.31 | 48.80±9.26* |
| 白蛋白(g/L) | 21.40±4.49 | 19.70±3.46 | 20.09±3.73 | 21.68±2.58 |
| 谷草转氨酶(IU/L) | 38.50±9.28 | 36.60±10.43 | 42.20±18.24 | 44.70±16.87 |
| 尿素(mmol/L) | 3.15±0.77 | 3.29±1.20 | 3.84±0.85 | 3.57±0.93 |
| 肌酐(μmol/L) | 77.00±8.06 | 87.20±13.05 | 83.90±10.16 | 88.60±13.23* |
| 血糖(mmol/L) | 5.27±0.30 | 5.10±1.22 | 5.78±1.07 | 5.17±0.84 |
注：同列数据肩标*表示与空白对照组相比差异显著(P<0.05)，**表示与空白对照组相比差异极显著(P<0.01)。
由表11可知，停药后第7天，与空白对照组相比，5倍剂量组谷丙转氨酶和肌酐显著高于空白对照组(P<0.05)，其余各项指标与空白对照组差异不显著(P>0.05)。各组试验猪的血液生化指标均在正常范围内。
上述实验结果发现，本发明中药组合物按推荐剂量的1、3、5倍剂量灌服给药，连用5天，在试验期间，各实验组在给药期间和停药观察期间未出现任何临床不良反应；各剂量组的试验猪的日增重与空白对照组相比差异不显著(P>0.05)；各剂量组的部分血液生化指标与空白对照组相比有一定差异，但数值均在正常范围内；试验期间实验组猪均无死亡。上述结果表明，本发明中药组合物在推荐剂量内使用时，对猪临床症状、血常规、血液生化无不良影响，未出现任何临床不良反应，本产品临床使用是安全的。
综上，本发明中药组合物对猪白痢具有治疗效果好、绿色安全的优点，可大规模推广应用。综上所述，仅仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限定，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述技术内容作为启示加以变更或改型。这等同变化的等效实施例。但是，凡是未脱离本发明技术构思，依据本发明的技术实质对以上实施例所作出的简单修改，等同变化与改型，仍属于本发明权利要求的保护范围。
Claims (10)
1.一种防治猪白痢的中药组合物，其特征在于，由以下重量份的原料药制成：白头翁10～30份、九里根10～30份、黄芦木10～20份、倒水莲10～20份、罐子草10～20份、黄连5～20份、苦参5～20份、板蓝根5～20份和黄芪5～20份，所述原料药的来源是中药材或相当于上述中药材生药量的中药提取物。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物由以下重量份的原料药制成：白头翁30份、九里根30份、黄芦木10份、倒水莲10份、罐子草10份、黄连10份、苦参10份、板蓝根10份和黄芪10份。
3.权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，将白头翁、九里根、黄芦木、倒水莲、罐子草、黄连、苦参、板蓝根、黄芪按比例混合后加入溶剂进行提取，提取完成后过滤，收集滤液，即得中药组合物；
或采用含纤维素酶的水溶液对板蓝根进行浸提，得到板蓝根粗提液；对白头翁进行醇提，得到白头翁粗提液；将醇提后的白头翁药渣与九里根、黄芦木、倒水莲、罐子草、黄连、苦参、黄芪按比例混合后加入溶剂进行提取，提取完成后过滤，收集滤液；将所述滤液与白头翁粗提液、板蓝根粗提液混合均匀，即得中药组合物。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述溶剂为水或乙醇溶液，所述提取方式为连续逆流式提取。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，采用含纤维素酶的水溶液对板蓝根进行浸提的具体操作为：将板蓝根加入水中，再加入纤维素酶，在50～60℃进行浸提，浸提后过滤，得到板蓝根粗提液；将所述板蓝根粗提液与所述滤液合并，得到中药组合物。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述纤维素酶的用量为板蓝根重量的0.1%～0.2%；板蓝根与水的质量比为1：（8～12）。
7.权利要求1或2所述的中药组合物在制备治疗猪白痢的药物中的应用。
8.一种防治猪白痢的药物，其特征在于，所述药物由权利要求1或2所述的中药组合物和药学上可接受的辅料制成。
9.根据权利要求8所述的药物，其特征在于，所述药物为口服剂型。
10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于，所述药物为口服液、颗粒剂或散剂。
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Address after: No. 9, Yugang Road, Airport Economic Comprehensive Experimental Zone, Zhengzhou City, Henan Province, 451162 Patentee after: HENAN MUXIANG BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. Country or region after: China Address before: No. 9, Yugang Road, Airport Economic Comprehensive Experimental Zone, Zhengzhou, Henan 450000 Patentee before: HENAN SOAR VETERINARY PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Country or region before: China Patentee before: HENAN MUXIANG BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd. |
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