CN101843763B - 一种具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的清化瘀热中药复方及其应用。该中药复方由下列重量份数的原料组成：生地5～30份、丹参5～30份、丹皮5～15份、黄连2～10份、赤芍5～15份、鬼箭羽5～30份。本发明提供的中药复方，根据中医药理论，采用辨证论治的理论进行中药配比组方，实验结果表明，本发明提供的中药复方具有多环节、多靶点的综合作用，可纠正糖代谢紊乱，降低血糖，改善胰岛B细胞功能和改善胰岛素抵抗功能；且实验结果表明本发明提供的中药复方能够改善心肌病变，对心肌具有很好的保护作用；并且具有降低血清总胆固醇、甘油三酯和抗脂质过氧化作用。因此，本发明提供的中药复方有望开发成为新一代防治糖尿病及其糖尿病瘀热并发症的药物。

Description

一种具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方及其应用

技术领域

本发明涉及一种药物，具体涉及一种具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方及其应用。

背景技术

糖尿病是一种全球性的常见病和多发病，已成为继肿瘤和心血管疾病之后的第三大疾病。糖尿病合并瘀热病症是糖尿病主要的并发病症，临床上常见的有糖尿病性心脏病，糖尿病性心脏病包括糖尿病特异性心肌病变，与糖尿病有关的心脏微血管病变、大血管病变、心脏植物神经病变等，同时常伴有非特异性的冠状动脉粥样硬化性心脏病和(或)高血压心脏病，在患有糖尿病的基础上，可以统称为糖尿病性心脏病。糖尿病性心脏病与非糖尿病人发生的冠状动脉粥样硬化性心脏病和心肌病相比，有病情重、矛盾多、治疗难度大、预后差及病死率高的特点。WHO报告，冠心病在糖尿病患者中占26％～35％，老龄和女性患病率最高。糖尿病合并高脂血症也是最常见合并疾病之一，目前已明确糖尿病的脂代谢紊乱是其冠心病、高血压、心肌梗死、脑卒中等心脑血管并发症发病率的主要危险因素，国内外每年因糖尿病及糖尿病并发症死亡的人数逐渐攀升，严重影响到人们的生活质量。目前治疗糖尿病及其并发症的药物较多，临床上使用的西药，虽具有一定的疗效，但多数存在较大的不良反应，如出现停药后反弹，患者肝肾损害、横纹肌融解症等副作用，治标不治本，而中医药在治疗糖尿病方面具有其独特的优势，具有疗效持久，无明显毒副作用的优点，但目前针对糖尿病的中药多偏于单方、验方，缺乏系统完善的临床药效研究，且中药组方依据各有不同，治则不统一，且目前针对糖尿病合并瘀热病症的药物未见报道，故立足中医中药，根据糖尿病及其瘀热并发症的发病机制，积极寻找和努力探索治疗糖尿病及其瘀热并发症的高效无毒的药物具有重要的意义。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种配比科学合理，疗效确切，临床使用安全，不良反应低的中药复方。本发明另一个目的是提供该中药复方在制备治疗糖尿病及其瘀热并发症药物中的应用。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方，它由下列重量份数的原料组成：生地5～30份、丹参5～30份、丹皮5～15份、黄连2～10份、赤芍5～15份、鬼箭羽5～30份。

作为优选方案，以上所述的具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方，它由下列重量份数的原料组成：生地10～30份、丹参10～30份、丹皮5～15份、黄连2～8份、赤芍5～15份、鬼箭羽10～30份。

作为更优的方案，以上所述的具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方，它由下列重量份数的原料组成：生地10～20份、丹参10～20份、丹皮5～10份、黄连5～8份、赤芍5～10份、鬼箭羽10～20份。

作为另一方案，本发明提供的一种具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方，它由下列重量份数的原料组成：生地15份、丹参15份、丹皮10份、黄连6份、赤芍10份、鬼箭羽15份。

作为其它优选方案，以上所述的具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方，也可以在原有配比的基础上添加具有清热生津、消肿排脓之功的5～15份的天花粉。

本发明提供的中药组方，根据中医药理论和糖尿病及糖尿病瘀热并发症的发病机制，以“瘀热致消”的理论为指导，确立“清热通络，凉血化瘀”为治疗方法，组方由生地、丹皮、黄连、丹参、鬼箭羽、赤芍或加味天花粉组成，组方重于清热通络，凉血化瘀，药精而力专，一药多效，配伍严谨，切合病机，既治疗已病，又可未病先防，是防治糖尿病及其糖尿病瘀热并发症，如糖尿病合并心脏病，糖尿病合并高脂血症的有效复方。方中生地，性味甘，寒，归心、肝、肾经，具有清热生津，凉血，止血功效，为本方君药，主清热生津；丹参，味苦，性微寒，入心、肝经，具有活血祛瘀，凉血消痈、止痛、养血安神等多种功能，为本方君药；丹皮，性味苦辛，寒，归心、肝、肾经，具有清热凉血，活血行瘀功效，为本方臣药；黄连，味苦、性寒，入心、肝、胃、大肠经，具有清热燥湿，泻火解毒的功效，为本方臣药。赤芍性味苦、微寒，归肝经，具有清热凉血、散瘀止痛之功能；鬼箭羽不但能够刺激胰岛素分泌，还能增加外周组织对葡萄糖的利用，能够提高胰岛素与受体的亲和力，降低血脂，改善血液流变学。天花粉，性味苦、微甘寒，具清热生津、消肿排脓之功；以上各位药配比组成清化瘀热方，全方清热通络，凉血化瘀，具有养阴、清热、通络、化瘀之效，对糖尿病及糖尿病瘀热并发症具有很好的疗效。

本发明提供的具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方，可以将各原料药的提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂、片剂、粉针剂或注射剂剂型药物。

本发明提供的中药复方的提取物制成胶囊剂时把各原料的提取物和载体玉米淀粉混合均匀，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。

将本发明提供的中药复方的各原料的提取物制成口服液时，将各原料的提取物加蒸馏水溶解，过滤，调节pH值，制成口服液。

将本发明提供的中药复方的各原料的提取物制成片剂时，把各原料和玉米淀粉，需要时加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，整粒，然后压片制成片剂。

本发明提供的中药复方的各原料的提取物制成颗粒剂时，把各原料的提取物和稀释剂玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂。

本发明提供的中药复方的各原料的提取物制成粉针剂时，把各原料的提取物冷冻干燥，杀菌，制成粉针剂。

本发明提供的中药复方的各原料的提取物制成注射液时，取各原料的提取物加入生理盐水溶解然后加入活性碳，搅拌均匀，80℃加热30分钟，过滤，调节pH值，用垂熔玻璃漏斗或其它滤器过滤至澄明，灌装，在100至115℃灭菌30分钟制成注射液。

本发明提供的中药复方制剂的制备方法包括以下步骤：

(1)按重量份数取生地5～30份、丹参5～30份、丹皮5～15份、黄连2～10份、赤芍5～15份、鬼箭羽5～30份，用5～10倍量的水煎煮1～3次，合并煎煮液，过滤，浓缩，得浓缩液；

(2)取步骤(1)得到的浓缩液与药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂、片剂、粉针剂或注射液剂型的药物。

本发明提供的的具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方在制备防治糖尿病药物中的应用。

作为优选方案，本发明提供的中药复方在制备防治糖尿病合并瘀热病症药物中的应用。

作为优选方案，本发明提供的中药复方在制备防治糖尿病合并心脏病药物中的应用。

作为另一优选方案，本发明提供的中药复方在制备防治糖尿病合并高脂血症药物中的应用。

有益效果：本发明提供的中药复方和现有技术相比具有以下优点：

1、本发明根据中医药理论，采用清热通络，凉血化瘀的辨证论治的理论进行中药组方配比得到清化瘀热方，各位中药复方配比科学合理，本发明提供的中药复方具有多环节、多靶点的综合作用，可以很好清除瘀热，具有治疗瘀热导致的一系列并发症。实验结果表明，本发明提供的中药复方可纠正糖代谢紊乱，降低血糖，改善胰岛B细胞功能，改善胰岛素抵抗；且实验结果表明本发明提供的中药复方能够改善心肌病变，对心肌具有很好的保护作用；并且本发明提供的中药复方能有效降低血清总胆固醇、甘油三酯，具有很好抗脂质过氧化作用。

2、本发明提供的中药复方的提取物可以方便和药学载体制备成多种剂型，临床上服用方便，且实验结果表明本发明提供的中药复方，疗效可靠，使用安全，长期服用无毒副作用。

具体实施方式：

下面结合具体实施例进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

实施例1

1、中药复方的原料药组成：

生地15克、丹参15克、丹皮10克、黄连6克、赤芍10克、鬼箭羽15克。

2、中药复方组合物制剂制备方法，包括以下步骤：

(1)取炙生地15克、丹参15克、丹皮10克、黄连6克、赤芍10克、鬼箭羽15克，用8倍量的水煎煮2次，第一次1.5小时，第二次1小时，合并煎煮液，过滤，浓缩，得浓缩液，备用；

(2)取步骤(1)得到的浓缩液加水，过滤，调节pH值，制成口服液。(批号：001)，本发明提供的中药复方重在清热通络，凉血化瘀，因此得到清化瘀热复方口服液。

实施例2

1、中药复方的原料药组成：

生地20克、丹参20克、丹皮10克、黄连8克、赤芍10克、鬼箭羽20克。

2、中药复方组合物制剂制备方法，包括以下步骤：

(1)取生地20克、丹参20克、丹皮10克、黄连8克、赤芍10克、鬼箭羽20克，用6倍量的水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎煮液，过滤，浓缩，得浓缩液，备用；

(2)取步骤(1)得到的浓缩液加入玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成清化瘀热复方颗粒剂。(批号：002)

实施例3

1、中药复方的原料药组成：

生地10克、丹参10克、丹皮5克、黄连3克、赤芍5克、鬼箭羽10克。

2、中药复方组合物制剂制备方法，包括以下步骤：

(1)取生地10克、丹参10克、丹皮5克、黄连3克、赤芍5克、鬼箭羽10克用8倍量的水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎煮液，过滤，浓缩，得浓缩液，备用；

(2)取步骤(1)得到的浓缩液，冷冻干燥，杀菌，制成清化瘀热复方粉针剂。(批号：003)

实施例4

1、中药复方的原料药组成：

生地30克、丹参30克、丹皮15克、黄连10克、赤芍15克、鬼箭羽30克。

2、中药复方组合物制剂制备方法，包括以下步骤：

(1)取生地30克、丹参30克、丹皮15克、黄连10克、赤芍15克、鬼箭羽30克，用10倍量的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，过滤，浓缩，得浓缩液，备用；

(2)取步骤(1)得到的浓缩液和玉米淀粉混合均匀，加入润滑剂硬脂酸镁，混合均匀，整粒，然后压片制成清化瘀热复方片剂。(批号：004)

实施例5

1、中药复方的原料药组成：

生地20克、丹参20克、丹皮12克、黄连6克、赤芍10克、鬼箭羽15克，天花粉10克。

2、中药复方组合物制剂制备方法，包括以下步骤：

(1)取生地20克、丹参20克、丹皮12克、黄连6克、赤芍10克、鬼箭羽15克，天花粉10克，用8倍量的水煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，过滤，浓缩，得浓缩液，备用；

(2)取步骤(1)得到的浓缩液和玉米淀粉混合均匀，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。(批号：005)

实施例6药理实验研究

1.实验材料

1.1主要试剂与药物

本发明提供的中药复方浸膏粉，每g浸膏相当于2.74g生药，人日用量为97g(生药)/60kg体重，批号：001。二甲双胍(格华止，中美上海施贵宝制药有限公司，0.85克/片，批号0803076)。链脲佐菌素：美国sigma公司产品(s-0130)，购自上海美济生物技术有限公司。枸橼酸三钠(Na₃C₆H₅O₇.H₂O)、枸橼酸(C6H8O7.H2O)、40％甲醛、25％戊二醛、多聚甲醛、NaH₂PO₄·2H₂O、Na₂HPO₄·12H₂O、NaCl、戊巴比妥钠。二甲苯、10％福尔马林、PBS、乙醇、H₂O₂、甲醇、复染染液：苏木素或甲基绿等。

1.2实验动物

清洁级Sprague-Dawley(SD)雄性SPF级大鼠120只，由南京中医药大学实验动物中心提供。8周龄，体重180-220克，许可证号scxk20030001。

1.3高糖高脂饲料配方

2％胆固醇、4％蔗糖、4％蛋黄粉、10％猪油、80％普通饲料(南京青龙山动物养殖场提供)。

1.4主要仪器和器材

快速血糖仪及同批号血糖试纸：强生(中国)医疗器材有限公司，Olympus-BH2(日本Olympus公司)光学显微镜，透射电子显微镜，全自动生化分析仪，(SYSMEX，日本)，全自动免疫浊度分析仪(美国Beckman Coulter公司)、-20℃冰箱，-70℃冰箱，台式离心机，液氮罐，精密电子天平等。

2.实验方法

2.1 2型糖尿病大鼠模型制作

实验前适应性普通饲料饲养一周后随机分组。除正常对照组大鼠外其他各组大鼠均喂以高糖高脂饲料，正常对照组大鼠喂以普通饲料。高糖高脂饲料2周喂养后，禁食、水12h，造模组给予一次性腹腔注射2％链脲佐菌素(STZ)溶液30mg/Kg，继续高糖高脂饲料喂养1周后测随机血糖≥16.7mmol/L判断为糖尿病成模；正常对照组腹腔注射同剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，继续喂以普通饲料。

2.2动物分组与给药

(1)正常组：给予等量蒸馏水；

(2)模型组：给予等量蒸馏水；

(3)中药复方高剂量组：给予中药复方19.4g生药/kg体重；

(4)中药复方中剂量组：给予中药复方9.7g生药/kg体重；

(5)中药复方低剂量组：给予中药复方4.85g生药/kg体重；

(6)阳性对照组：给予二甲双胍0.14g/kg体重。

各组均灌胃给药，给药体积为10ml/kg体重，每日1次，固定时间给药，连续给4周。

2.3血液标本收集

所有大鼠给药前、给药2周时及给药4周后清晨空腹留取静脉血。

前两次采用大鼠眼内毗静脉取血方式取血，大鼠一次可采血1ml，注入无菌1.5mlEP管内，迅速高速离心，取上清即刻冻于-20℃冰箱。最后一次取血：正血糖高胰岛素钳夹实验结束时，摘眼球取血。其中2ml放于不抗凝管中，3000r/min离心10min，取血清，-20℃保存待生化等指标(血糖、血脂等)。

2.3心脏标本收集

收集血标本后，所有大鼠行心脏标本留取。打开胸腔，用预冷0.01mol/l PBS液心脏灌流后迅速取出心脏，冰盐水或预冷的PBS缓冲液中反复冲洗，剪除包膜、血管及心房组织，电子天平检测计算心脏重量与体重比值(HW/BW)。取部分左心室组织置于4％多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液固定，用于光镜检查。取少量心脏组织，置于2.5％戊二醛液(pH值7.4)中待透射电镜检测。

2.4生化及免疫等指标检测

血糖、血脂用全自动生化分析仪检测。所有测定严格按照试剂盒说明书操作。

2.5心肌组织结构普通光学显微镜下观察

组织取材后甲醛固定，经过固定、脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋等程序，制成4μm厚切片，每只大鼠心脏制作10张切片，取1张制作常规HE染色切片，其余备用。观察心肌细胞形态并拍片。

2.5.1组织脱水、包埋及切片

心脏组织用标明实验组别的拭镜纸包好后放入乙醇中脱水，每次取出标本时，应将液体控干后再放入下一瓶液体中；心脏组织置于80％乙醇10min；95％乙醇10min×3次；无水乙醇15min×3次；二甲苯10min×2次。石蜡包埋：56-58℃浸蜡2次，20min和60min各一次。切片：切片厚度3μm，置烤箱中，65℃烤片2-3小时，常规HE染色，光镜观察，摄片。

2.5.2苏木素-伊红(hematoylineosine.HE)染色

将组织切片经Harris苏木素浸染1min至6min左右，水洗2min，1％的盐酸乙醇分化5-30s，水洗，伊红染2min，流水快速冲洗、脱水、透明、封片固定。

2.6透射电子显微镜下心肌超微结构分析

在电子显微镜下观察超薄切片(×5000倍)心肌组织，每张电镜切片随机选择8个包含心肌组织的视野，观察心肌组织的变化情况，并摄像。

2.7统计学处理

采用SPSS for Windows11.5统计学软件包，全部计量资料数据以均值±标准差

表示，两组间及前后比较用t检验，多组间比较用方差分析(Oneway-ANOVA)。P＜0.05为差异有统计学意义。

3实验结果

3.1治疗前糖尿病各组之间体重、空腹血糖、血脂均衡性检验。

糖尿病心肌病大鼠之间治疗前的体重、空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、HDL-C、LDL-C均无显著性差异，具有可比性，p＞0.05。具体实验结果如表1和表2所示。

表1治疗前各组体重及空腹血糖均衡性检验

表2治疗前各组血脂谱均衡性检验

3.2中药复方对糖尿病大鼠体重、空腹血糖影响。

实验结果表明，在治疗2周后中药复方高剂量组、中药复方中剂量组大鼠体重下降明显，与治疗前比有显著差异p＜0.05，与糖尿病模型组体重比有显著差异，(p＜0.05)；治疗4周后中药复方高剂量组大鼠体重进一步下降(p＜0.05)；治疗4周后中药复方各组、二甲双胍组心脏重量与体重比值(HW/BW)低于糖尿病模型组(p＜0.05)；并在治疗2周及4周后中药复方各剂量组、二甲双胍组空腹血糖与糖尿病模型组比较均有显著性差异(p＜0.05)，实验结果表明本发明提供的中药复方能显著降低糖尿病模型大鼠的血糖，与治疗前比较也均有显著性差异(p＜0.05)。具体实验结果如表3和表4所示。

表3中药复方对糖尿病大鼠体重、HW/BW的影响

注：^*与糖尿病模型组比较，p＜0.05；△与治疗前比较，p＜0.05。

表4中药复方对糖尿病大鼠空腹血糖影响

注：^*与糖尿病模型组比较，p＜0.05；△与治疗前比较，p＜0.05。

3.3中药复方对糖尿病大鼠葡萄糖利用率(GIR)变化的影响。

实验结果表明，本发明提供的中药复方在治疗后2周及4周后，中药复方高剂量组、中药复方中剂量组、中药复方低剂量组及二甲双胍组胰岛素抵抗指数均下降，与治疗前比较差异有显著性(p＜0.05)，与糖尿病模型组比有显著性差异(p＜0.05)；治疗4周后中药复方高剂量组、中药复方中剂量组、中药复方低剂量组及二甲双胍组葡萄糖利用率与糖尿病模型组比，有显著性差异(p＜0.05)，说明中药复方能够改善胰岛素抵抗，增加糖尿病大鼠葡萄糖利用率。具体实验结果如表5所示。

表5中药复方对糖尿病大鼠胰岛素抵抗指数、葡萄糖利用率(GIR)的影响

注：^*与正常对照组比较，p＜0.05；#与糖尿病组比较，p＜0.05；△与治疗前比较，p＜0.05

3.4中药复方对糖尿病大鼠血脂变化影响。

实验结果表明，在治疗2周、4周后中药复方各组、二甲双胍组的总胆固醇下降与治疗前比，均有显著性差异(p＜0.05)，与糖尿病模型组比也有显著性差异(p＜0.05)；治疗2周、4周后中药复方各组及二甲双胍组大鼠甘油三酯均显著下降，与糖尿病模型组比有显著性差异(p＜0.05)；治疗4周后中药复方各组及二甲双胍组LDL-C均下降，与糖尿病组比有显著性差异(p＜0.05)，且在治疗4周后，中药复方各剂量组大鼠的高密度脂蛋白(HDL-C)具有增加趋势，说明本发明提供的中药复方具有明显的降低糖尿病模型大鼠总胆固醇和甘油三酯的含量，具有很好的降低糖尿病模型大鼠血脂的作用，具体实验结果如表6和表7所示。

表6中药复方对糖尿病大鼠血脂影响。

注：^*与糖尿病模型组比较，p＜0.05；△与治疗前比较，p＜0.05。

表7中药复方对糖尿病大鼠血脂影响

注：^*与糖尿病组比较，p＜0.05；△与治疗前比较，p＜0.05。

3.5中药复方对糖尿病心肌病大鼠心肌病理组织学的影响

光镜下HE染色可见正常对照组大鼠心肌细胞排列整齐致密，结构清晰，细胞间质较少，可见少量成纤维细胞。糖尿病模型组大鼠心肌细胞排列紊乱、心肌细胞肥大、扭曲，细胞间隙增大，间质及血管周围细胞外基质积聚和胶原成分增多、间质纤维化明显；中药复方各治疗组光镜下HE染色结果表明心肌纤维排列稍紊乱，心肌细胞正常，间质无明显淋巴细胞浸润。

3.6中药复方对糖尿病大鼠心肌超微结构的影响

电镜可见正常对照组大鼠心肌细胞排列整齐，密集，细胞连接清晰，细胞核呈卵圆形，胞浆内可见大量的结构正常的线粒体和糖原，糖尿病模型大鼠心肌细胞线粒体肿胀、扩张，肌丝溶解、断裂，闰盘间歇显著扩大，核肿胀、染色质边集，中药复方各治疗组的大鼠心肌细胞排列整齐，密集，细胞连接清晰，明显较糖尿病模型组及二甲双胍组好转。说明本发明提供的中药复方能够明显减轻心肌病变，对糖尿病大鼠心肌具有保护作用。

实施例7中药复方对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响

1实验材料

1.1主要试剂与药物

中药复方浸膏粉，每g浸膏相当于2.74g生药，人日用量为97g(生药)/60kg体重，由实施例3制备得到的批号003。

二甲双胍(格华止，中美上海施贵宝制药有限公司，0.85克/片，批号0803076)

链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)：美国sigma公司产品(s-0130)，购自上海美济生物技术有限公司。

TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(石蜡切片)

二甲苯、10％福尔马林、PBS、乙醇、H2O2、甲醇、复染染液：苏木素或甲基绿等、盖玻片、载玻片、染色缸等。

1.2实验动物

清洁级Sprague-Dawley(SD)雄性SPF级大鼠120只，由南京中医药大学实验动物中心提供。8周龄，体重180-220克，许可证号scxk20030001。实验地点为南京中医药大学动物实验中心(D8)，室温18～28℃，相对湿度50％，分笼饲养，普通饲料，5只/笼。

1.3主要仪器和器材

Olympus-BH2(日本Olympus公司)光学显微镜。

快速血糖仪及同批号血糖试纸：强生(中国)医疗器材有限公司。

全自动生化分析仪，SYSMEX，日本。全自动免疫浊度分析仪，美国Beckman Coulter公司。-20℃冰箱、-70℃冰箱、台式离心机、液氮罐、精密电子天平、电子秤、手提式高压蒸气消毒器等。

2实验方法

2.1高脂饲料配方：

2％胆固醇、4％蔗糖、4％蛋黄粉、10％猪油、80％普通饲料(南京青龙山动物养殖场提供)。

2.2 2型糖尿病大鼠模型制作

实验前适应性普通饲料饲养一周后随机分组。除正常对照组大鼠外其他各组大鼠均喂以高糖高脂饲料，正常对照组大鼠喂以普通饲料。高糖高脂饲料2周喂养后，禁食、水12h，造模组给予一次性腹腔注射2％链脲佐菌素(STZ)溶液30mg/Kg，继续高糖高脂饲料喂养1周后测随机血糖≥16.7mmol/L判断为糖尿病成模；正常对照组腹腔注射同剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，继续喂以普通饲料。

2.3动物分组与给药

(1)正常组：给予等量蒸馏水；

(2)模型组：给予等量蒸馏水；

(3)中药复方高剂量组：给予中药复方19.4g生药/kg体重；

(4)中药复方中剂量组：给予中药复方9.7g生药/kg体重；

(5)中药复方低剂量组：给予中药复方4.85g生药/kg体重；

(6)阳性对照组：给予二甲双胍0.14g/kg体重。

各组均灌胃给药，给药体积为10ml/kg体重，每日1次，固定时间给药，连续给4周。

2.4原位末端酶标记法(TUNEL)技术测定心肌细胞情况

按试剂盒说明书进行操作；计算凋亡指数。心肌细胞核(圆形或椭圆形位于心肌细胞中央)，每个标本随机选取10个高倍视野(×400倍)，分别计数凋亡细胞核(黄色)和正常细胞核(蓝色)，以凋亡细胞核与正常细胞核的比值平均值作为凋亡指数。

结果判断：心肌细胞核(圆形或椭圆形位于心肌细胞中央)，每个标本随机选取10个高倍视野(×400)，分别计数凋亡细胞核(黄色)和正常细胞核(蓝色)，以凋亡细胞核与正常细胞核的比值平均值作为凋亡指数。

2.6统计方法

采用SPSS for Windows11.5统计学软件包，全部计量资料数据以均值±标准差

表示，二组间及前后比较用t检验，多组间比较用方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

3实验结果

心肌细胞凋亡观察结果：糖尿病模型组阳性染色细胞数最多，正常对照组阳性染色细胞数目最少，两组比较有统计学意义(P＜0.01)，二甲双胍组、中药复方高剂量组与中药复方中剂量组阳性染色细胞数较糖尿病组明显减少，有统计学意义(P＜0.05)，且实验结果表明中药复方高剂量组比阳性对照药二甲双胍具有更好的保护心肌作用，具体实验结果如表8所示。

表8中药复方对对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡指数的影响

注：^*与正常对照组比较，p＜0.05；#与糖尿病心肌病模型组比较，p＜0.05。

本发明根据中医药理论，采用“瘀热致消”的辨证论治的理论进行配比组方得到清化瘀热复方，通过以上实验结果表明，本发明提供的中药复方具有多环节、多靶点的综合作用，能够有效清除瘀热，具有治疗瘀热导致的一系列糖尿病并发症的作用，以上实验结果表明，本发明提供的中药复方，能够纠正糖尿病患者的糖代谢紊乱，具有降低血糖和血脂，改善胰岛素抵抗，增加胰岛素敏感性，且能够显著减轻糖尿病心肌病大鼠心脏重量与体重比值、明显减轻心肌病理组织学异常和心肌超微结构异常，能够显著改善2型糖尿病模型大鼠的心肌病变，对心肌具有保护作用。

本发明提供的中药复方能够用于防治糖尿病及其糖尿病瘀热并发症，如糖尿病合并心脏病，糖尿病合并高脂血症。且临床实验结果表明本发明提供的中药复方长期使用无不良反应，因此有望开发成为新一代防治糖尿病及其糖尿病瘀热并发症的药物。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方，其特征在于，它由下列重量份数的原料组成：生地10～20份、丹参10～20份、丹皮5～10份、黄连5～8份、赤芍5～10份、鬼箭羽10～20份。

2.根据权利要求1所述的具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方，其特征在于，它由下列重量份数的原料组成：生地15份、丹参15份、丹皮10份、黄连6份、赤芍10份、鬼箭羽15份。

3.具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方制剂，其特征在于，将权利要求1或2所述的中药复方的各原料提取物和药学上可接受的载体制备成口服液、颗粒剂、胶囊剂、片剂、粉针剂或注射液剂型的药物。

4.权利要求1或2所述的具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方在制备防治糖尿病药物中的应用。

5.权利要求1或2所述的具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方在制备防治糖尿病心肌病药物中的应用。

6.权利要求1或2所述的具有治疗糖尿病合并瘀热病症作用的中药复方在制备防治糖尿病合并高脂血症药物中的应用。