CN113789379B - 一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用 - Google Patents

一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113789379B
CN113789379B CN202111006924.9A CN202111006924A CN113789379B CN 113789379 B CN113789379 B CN 113789379B CN 202111006924 A CN202111006924 A CN 202111006924A CN 113789379 B CN113789379 B CN 113789379B
Authority
CN
China
Prior art keywords
gene
pgr17
mrgprf
prostate cancer
detecting
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202111006924.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113789379A (zh
Inventor
杜飞
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yuanjian Biotechnology Shanghai Co ltd
Original Assignee
Yuanjian Biotechnology Shanghai Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yuanjian Biotechnology Shanghai Co ltd filed Critical Yuanjian Biotechnology Shanghai Co ltd
Priority to CN202111006924.9A priority Critical patent/CN113789379B/zh
Publication of CN113789379A publication Critical patent/CN113789379A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113789379B publication Critical patent/CN113789379B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/6851—Quantitative amplification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/166—Oligonucleotides used as internal standards, controls or normalisation probes

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用，所述的试剂盒包括检测MRGPRF基因的试剂、检测PGR17基因的试剂；检索MRGPRF基因的试剂为用于扩增MRGPRF基因的引物序列，检测PGR17基因的试剂为用于扩增PGR17基因的引物序列。本发明的有益效果为：本发明首次发现了MRGPRF和PGR17联合使用在前列腺癌中显著高表达，本发明采用MRGPRF基因和PGR17基因作为诊断前列腺癌的生物标记物，制备出一种检测前列腺癌的试剂盒，可方便指导临床诊断前列腺癌，指导临床治疗；且操作简单、方便，可节省时间和试剂，可为患者提供更多更准确的信息，帮助患者得到更及时的治疗，提高患者的生活质量。

Description

一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用
技术领域
本发明涉及医药和临床诊断技术领域，具体涉及一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用。
背景技术
前列腺癌是发生在前列腺上皮的恶性肿瘤，是中国男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤，前列腺癌发病率在中国男性肿瘤中第六位，且患病人数呈现快速增长的趋势。前列腺癌患者早期多无明显症状，确诊较晚、生存期不理想，超过2/3患者初诊时已属晚期或局部晚期。中国前列腺癌5年生存率平均水平为66.4％。因此需要早筛查、早诊断、早治疗，以提高前列腺癌患者的生存率和生活质量。
由于目前用于前列腺癌诊断的方法的限制，性质上为进行性的前列腺癌可能在检测之前已经转移，而患有转移性前列腺癌的个体的存活率非常低。对于患有会转移而尚未转移的前列腺癌患者，手术去除前列腺通常是有疗效的。因此，确定肿瘤范围对选择最佳治疗和提高患者生存率很重要。
目前，前列腺癌的诊断一般是根据前列腺特异性抗原(PSA)血检结果升高，或者较少见地，根据异常直肠指检(DRE)而做出的。PSA是前列腺上皮细胞生产的糖蛋白，PSA测试测量血样中PSA的量。尽管升高的PSA水平不一定指示前列腺癌的存在，但大部分患有前列腺癌的男性具有升高的PSA浓度(例如高于4ng/mL)，并且不存在患有前列腺癌的风险为0的PSA水平。事实上，PSA升高的最常见原因是良性前列腺增生(BPH)，前列腺的非癌性增大。
因此一种高灵敏度和特异性的前列腺癌检测方法是社会发展的需要，是更有效的挽救前列腺癌患者、提高其生活质量的需要。
发明内容
本申请的主要目的在于提供一种特异性更强，准确率更高的检测前列腺癌的诊断试剂盒。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明的第一方面，提供MRGPRF和PGR17在检测前列腺癌中的应用。
上述MRGPRF和PGR17在检测前列腺癌中的应用，作为一种优选的实施方案，所述MRGPRF的mRNA序列如：
ATGGCTGGAAACTGCTCCTGGGAGGCCCATCCCGGCAACAGGAACAAGATGTGCCCTGGCCTGAGCGAGGCCCCGGAACTCTACAGCCGGGGCTTCCTGACCATCGAGCAGATCGCGATGCTGCCGCCTCCGGCCGTCATGAACTACATCTTCCTGCTCCTCTGCCTGTGTGGCCTGGTGGGCAACGGGCTGGTCCTCTGGTTTTTCGGCTTCTCCATCAAGAGGAACCCCTTCTCCATCTACTTCCTGCACCTGGCCAGCGCCGATGTGGGCTACCTCTTCAGCAAGGCGGTGTTCTCCATCCTGAACACGGGGGGCTTCCTGGGCACGTTTGCCGACTACATCCGCAGCGTGTGCCGGGTCCTGGGGCTCTGCATGTTCCTTACCGGCGTGAGCCTCCTGCCGGCCGTCAGCGCCGAGCGCTGCGCCTCGGTCATCTTCCCCGCCTGGTACTGGCGCCGGCGGCCCAAGCGCCTGTCGGCCGTGGTGTGCGCCCTGCTGTGGGTCCTGTCCCTCCTGGTCACCTGCCTGCACAACTACTTCTGCGTGTTCCTGGGCCGCGGGGCCCCCGGCGCGGCCTGCAGGCACATGGACATCTTCCTGGGCATCCTCCTGTTCCTGCTCTGCTGCCCGCTCATGGTGCTGCCCTGCCTGGCCCTCATCCTGCACGTGGAGTGCCGGGCCCGACGGCGCCAGCGCTCTGCCAAGCTCAACCACGTCATCCTGGCCATGGTCTCCGTCTTCCTGGTGTCCTCCATCTACTTAGGGATCGACTGGTTCCTCTTCTGGGTCTTCCAGATCCCGGCCCCCTTCCCCGAGTACGTCACTGACCTGTGCATCTGCATCAACAGCAGCGCCAAGCCCATCGTCTACTTCCTGGCCGGGAGGGACAAGTCGCAGCGGCTGTGGGAGCCGCTCAGGGTGGTCTTCCAGCGGGCCCTGCGGGACGGCGCTGAGCTGGGGGAGGCCGGGGGCAGCACGCCCAACACAGTCACCATGGAGATGCAGTGTCCCCCGGGGAACGCCTCCTGA。
所述PGR17的mRNA序列为：
ATGAAAGAACACATCATATATCAGAAGCTTTATGGATTGATTCTCATGTCGAGTTTTATCTTTCTCTCAGATACACTTTCACTAAAAGGAAAAAAGCTGGATTTTTTTGGAAGAGGTGACACATATGTAAGCCTGATAGATACCATTCCTGAACTCAGCCGATTCACAGCATGCATTGATCTGGTATTCATGGATGACAACTCAAGGTATTGGATGGCCTTCTCTTATATTACTAATAACGCCCTCCTGGGCAGAGAAGACATAGACCTTGGACTTGCAGGAGACCATCAGCAGCTAATACTATACAGATTGGGAAAGACCTTTTCTATCCGTCACCACCTGGCTTCATTTCAATGGCATACAATATGCTTGATATGGGATGGTGTGAAGGGCAAATTAGAACTCTTCCTGAATAAAGAAAGGATACTGGAAGTAACGGATCAACCACACAACCTGACACCTCATGGGACTCTGTTCCTAGGGCACTTTCTCAAGAATGAGAGCAGCGAGGTTAAAAGCATGATGCGTAGCTTTCCTGGCAGCTTGTACTACTTTCAACTCTGGGACCACATCCTGGAAAACGAAGAGTTTATGAAGTGTTTAGATGGAAATATAGTTAGTTGGGAAGAAGACGTCTGGCTTGTCAACAAGATCATCCCAACTGTTGACAGGACACTGCGCTGCTTTGTTCCTGAAAATATGACAATTCAAGAAAAAAGTACAACTGTTTCACAACAGATAGATATGACCACTCCATCCCAAATTACTGGAGTAAAACCACAAAATACTGCACATTCCTCTACACTATTGTCTCAAAGCATACCTATATTTGCAACTGATTACACAACCATATCATATTCCAATACAACATCTCCACCTCTGGAAACAATGACTGCACAAAAAATCTTAAAGACACTGGTAGATGAGACAGCTACATTTGCAGTGGATGTTTTATCAACTTCATCAGCCATCTCTCTGCCTACCCAGAGTATATCCATAGACAATACTACCAATTCCATGAAAAAAACGAAATCTCCATCTTCAGAAAGCACAAAGACAACAAAAATGGTTGAAGCCATGGCTACTGAAATCTTTCAACCACCTACACCTTCTAATTTCCTATCCACATCCAGATTTACCAAGAATTCAGTTGTATCTACAACTTCAGCAATTAAATCTCAGTCGGCTGTTACGAAGACAACATCTTTATTTTCAACTATTGAGTCAACATCTATGTCTACAACACCTTGTCTCAAACAAAAATCCACAAATACTGGGGCACTCCCTATCTCCACAGCTGGCCAGGAGTTCATTGAATCTACAGCTGCCGGAACTGTACCTTGGTTTACAGTGGAAAAGACTTCACCTGCATCTACTCATGTTGGGACTGCATCATCATTCCCACCTGAGCCTGTGCTCATCTCCACAGCTGCTCCAGTAGATTCTGTATTTCCTAGAAACCAGACAGCATTTCCATTGGCAACAACTGATATGAAAATAGCATTTACAGTCCATTCATTGACTCTCCCAACTAGGCTTATTGAGACCACACCTGCCCCAAGGACAGCTGAAACAGAATTGACATCTACAAATTTTCAGGATGTCTCTTTACCCAGAGTGGAAGATGCCATGTCTACTTCCATGTCGAAAGAGACCTCCTCTAAGACCTTTTCTTTCTTAACATCCTTTTCATTTACTGGGACTGAGAGTGTACAGACAGTTATTGATGCTGAAGCTACACGTACAGCCTTAACTCCTGAAATCACACTTGCATCTACAGTGGCTGAAACTATGCTTTCCTCCACAATCACAGGACGAGTTTACACCCAGAATACACCTACAGCTGATGGACACTTGCTTACTTTGATGTCCACTAGATCAGCTTCCACATCCAAGGCACCTGAGTCAGGTCCCACATCCACAACTGATGAAGCTGCCCATCTGTTCTCCAGCAATGAGACCATTTGGACTTCTAGGCCAGACCAGGCCCTGCTGGCATCTATGAACACAACCACCATACTCACATTTGTGCCTAATGAAAATTTTACATCAGCATTTCATGAGAATACTACTTATACAGAATATTTATCCGCAACTACCAATATCACCCCACTGAAAGCATCTCCAGAGGGCAAAGGTACCACTGCCAATGATGCTACTACAGCCAGATATACAACAGCTGTATCCAAATTGACATCACCATGGTTTGCTAATTTCTCCATAGTTTCTGGAACCACATCCATAACCAATATGCCTGAATTTAAACTTACCACTTTACTACTAAAAACAATACCTATGTCTACAAAACCTGCAAATGAACTTCCTTTGACACCAAGGGAGACTGTTGTTCCATCAGTAGATATAATATCTACTCTTGCTTGCATTCAACCAAATTTTTCTACTGAGGAAAGTGCTTCTGAGACCACACAAACAGAAATAAATGGTGCAATTGTATTTGGAGGTACAACGACCCCTGTACCAAAGTCAGCAACAACACAAAGATTAAATGCCACTGTGACAAGAAAAGAAGCAACTTCCCATTATCTTATGAGAAAATCAACTATAGCAGCAGTGGCTGAGGTTTCTCCATTTTCAACAATGCTGGAAGTGACAGACGAATCAGCACAAAGGGTGACAGCTTCTGTCACTGTTTCCTCTTTTCCTGATATAGAAAAGCTAAGTACCCCATTGGATAATAAAACTGCAACAACTGAGGTGAGAGAAAGTTGGCTTTTGACAAAATTGGTGAAAACCACACCTAGGAGTTCATACAATGAAATGACAGAAATGTTTAATTTTAACCACACCTATGTAGCACATTGGACTTCAGAGACATCTGAGGGAATTTCAGCTGGATCTCCCACTTCTGGGAGCACACATATATTCGGTGAACCCCTGGGTGCTTCTACCACAAGGATATCAGAAACCAGTTTCTCCACTACCCCTACAGACAGGACAGCTACGTCCTTGTCTGATGGTATCTTACCTCCACAGCCTACAGCTGCTCATTCCTCAGCAACCCCTGTGCCTGTTACTCATATGTTCTCATTGCCAGTTAATGGCAGTTCTGTGGTGGCTGAGGAGACTGAGGTTACCATGTCTGAGCCTTCTACACTGGCCAGGGCTTTTTCTACATCTGTGCTCTCAGATGTCTCAAATCTATCCTCAACTACAATGACCACAGCATTGGTACCACCTTTGGATCAGACTGCTTCCACAACCATTGTTATTGTGCCTACCCATGGAGACTTGATTCGTACCACTTCAGAGGCCACGGTAATCTCTGTCAGGAAGACATCCATGGCAGTTCCTTCTCTGACAGAAACACCATTTCATTCACTGAGACTCTCCACTCCTGTGACAGCTAAGGCTGAGACCACCCTTTTCTCTACCTCAGTTGATACAGTAACCCCATCTACACACACTCTTGTCTGCTCAAAACCTCCCCCTGACAACATTCCTCCTGCGTCCTCCACTCATGTGATCTCAACTACGTCTACACCAGAAGCAACTCAACCAATATCTCAAGTAGAGGAGACTTCTACCTATGCTCTCAGCTTCCCATATACTTTCAGTGGTGGTGGAGTTGTTGCCAGCTTGGCTACTGGCACCACAGAGACCTCTGTTGTTGATGAGACCACACCCTCACACATCTCTGCCAATAAGTTGACTACTTCAGTAAACAGTCACATTTCTTCATCTGCCACATATCGTGTACACACACCAGTGTCCATCCAGTTGGTGACTAGCACCTCTGTCTTATCTTCCGACAAAGACCAGATGACCATATCCCTGGGAAAAACCCCTAGAACTATGGAGGTGACAGAAATGTCCCCATCAAAGAATTCTTTTATTTCATACTCCCGGGGTACTCCATCTTTGGAAATGACAGATACAGGATTTCCTGAGACCACAAAAATTTCCAGTCACCAAACACATTCGCCTTCAGAGATTCCACTTGGGACTCCCTCTGATGGAAATTTGGCTTCATCTCCCACTTCTGGAAGCACACAGATTACACCAACCTTGACCTCAAGTAACACAGTAGGTGTTCACATTCCAGAAATGTCTACCAGTCTTGGGAAAACAGCTCTCCCCTCACAAGCTCTGACAATCACCACTTTTTTGTGTCCTGAAAAGGAAAGCACGAGTGCCCTTCCAGCATATACTCCCAGGACTGTGGAAATGATAGTAAACTCCACCTATGTGACTCACTCTGTCTCATATGGCCAGGATACTTCATTTGTAGATACCACAACTTCCAGCTCAACAAGGATATCAAATCCTATGGACATCAATACAACTTTTTCACACTTGCATTCACTTAGGACACAACCTGAGGTGACTTCAGTTGCCTCTTTCATTTCTGAAAGCACACAGACTTTCCCTGAGTCCTTGTCTCTTTCCACAGCTGGACTATATAATGACGGTTTTACAGTTCTCTCCGACAGGATCACTACAGCCTTTTCTGTTCCAAATGTACCTACAATGCTTCCTAGAGAATCCTCTATGGCAACGTCCACTCCTATTTACCAGATGTCCTCATTGCCAGTTAATGTAACTGCCTTCACCTCCAAAAAAGTTTCTGACACTCCCCCAATAGTGATAACTAAATCTTCTAAAACAATGCATCCAGGTTGTTTGAAAAGTCCCTGTACAGCCACTTCTGGGCCTATGTCTGAGATGTCCTCAATACCAGTTAATAACTCTGCTTTCACACCTGCAACAGTCTCTTCTGACACTTCCACAAGAGTTGGGTTATTCTCTACTTTATTGTCTTCAGTTACCCCCAGGACTACTATGACCATGCAAACATCTACATTGGATGTCACACCTGTGATATATGCTGGGGCTACTTCAAAAAACAAAATGGTTTCCTCTGCTTTCACTACAGAAATGATAGAGGCACCTTCCAGGATCACACCTACGACCTTTCTCTCTCCAACAGAGCCAACTTTGCCCTTTGTAAAAACCGTTCCCACCACCATTATGGCTGGGATAGTGACTCCATTTGTAGGCACCACTGCCTTCTCTCCACTCAGTTCTAAGAGCACTGGAGCTATTTCCTCCATTCCAAAGACCACATTTTCACCATTTCTATCAGCAACTCAACAGTCATCACAAGCAGATGAGGCTACAACTTTGGGCATATTATCTGGGATTACTAACAGGTCCCTATCTACTGTGAACAGTGGTACAGGGGTAGCTCTCACAGATACTTATTCCAGAATCACTGTTCCTGAAAATATGCTTTCACCTACTCATGCAGATAGTCTCCATACTTCCTTCAATATTCAGGTTTCCCCATCTCTGACTAGCTTTAAGAGTGCTTCTGGACCCACAAAAAATGTTAAAACAACCACCAATTGCTTTTCTTCTAATACTAGAAAGATGACTTCCTTGTTAGAAAAGACTTCCTTAACAAACTATGCCACATCTTTGAATACCCCTGTTTCATACCCTCCATGGACCCCATCCAGTGCAACTCTACCCTCTTTGACATCATTTGTTTATTCACCTCATAGTACTGAAGCTGAGATCTCTACTCCAAAGACCTCTCCTCCTCCCACATCCCAAATGGTTGAATTTCCAGTTCTGGGAACAAGAATGACATCTAGTAATACCCAACCTCTGCTTATGACTTCCTGGAACATACCCACAGCTGAAGGTTCTCAGTTTCCAATTTCCACCACTATTAATGTACCTACATCCAATGAGATGGAAACAGAGACTCTACACCTTGTTCCTGGGCCTTTGTCAACATTCACAGCCTCTCAGACTGGTCTAGTATCTAAAGATGTCATGGCAATGTCATCAATTCCTATGTCAGGAATTCTTCCTAACCATGGGCTTTCTGAGAACCCTTCATTATCAACATCTTTAAGAGCTATCACTTCCACATTGGCTGACGTTAAGCACACATTTGAGAAAATGACCACATCTGTAACTCCTGGGACCACACTCCCATCAATTCTTTCTGGTGCCACTTCAGGATCTGTAATTTCAAAGTCACCCATTCTGACATGGCTCTTATCTAGTCTCCCTTCTGGCTCCCCTCCGGCAACTGTATCTAATGCCCCTCATGTTATGACTTCCTCTACAGTAGAGGTGTCAAAATCAACATTTCTGACATCTGACATGATATCAGCGCACCCATTCACTAACTTGACAACACTACCCTCTGCTACTATGAGCACCATACTCACCCGAACCATTCCTACACCTACACTGGGTGGTATCACTACTGGCTTCCCAACTTCTCTCCCTATGTCTATAAATGTCACAGATGACATTGTGTACATTTCCACACACCCTGAGGCATCCTCCAGAACCACAATAACTGCCAACCCCAGGACTGTGTCTCATCCTTCATCCTTCAGCAGAAAGACTATGTCACCTTCTACAACTGACCACACTCTATCTGTTGGTGCCATGCCTCTGCCTAGCTCTACAATAACATCTTCATGGAACAGAATTCCAACTGCATCATCACCCTCTACTTTAATTATTCCTAAGCCCACACTGGACTCCCTTCTAAATATAATGACTACTACATCCACTGTTCCTGGAGCCTCATTTCCACTCATATCCACTGGGGTGACATATCCTTTTACAGCAACTGTGTCTTCACCAATATCGTCCTTTTTTGAAACAACTTGGCTGGACTCCACACCTTCCTTTCTATCTACGGAAGCATCGACTTCGCCTACTGCCACCAAGTCCACAGTTTCCTTCTACAATGTTGAAATGAGCTTCTCTGTCTTTGTTGAAGAGCCAAGGATCCCTATTACCAGTGTTATAAATGAATTTACGGAAAATTCGTTGAATTCTATATTTCAGAACAGTGAATTTTCTCTTGCTACTCTGGAAACCCAAATTAAAAGCAGGGACATTTCAGAGGAAGAGATGGTCATGGATCGAGCTATTTTGGAACAGAGAGAAGGACAAGAAATGGCTACAATTTCCTATGTACCATACAGTTGTGTTTGTCAGGTCATCATAAAAGCCAGCTCTTCCTTAGCATCCTCTGAATTGATGAGAAAAATCAAAAGTAAAATACATGGCAACTTCACACATGGAAACTTCACACAAGATCAATTGACGTTATTAGTAAACTGTGAACACGTTGCAGTGAAAAAACTAGAGCCTGGAAATTGCAAAGCTGATGAAACAGCCTCTAAATACAAAGGGACCTATAAGTGGCTATTAACCAACCCTACGGAGACAGCCCAAACCAGATGCATAAAAAATGAGGATGGAAATGCCACAAGATTCTGTTCAATCAGCATCAACACGGGCAAATCTCAGTGGGAAAAGCCAAAGTTTAAACAATGCAAATTGCTTCAAGAACTTCCTGACAAGATTGTGGATCTTGCTAATATTACCATAAGTGATGAGAATGCTGAGGATGTTGCAGAGCATATTTTAAATTTGATAAATGAATCCCCAGCCCTGGGTAAAGAAGAGACAAAGATTATTGTTTCTAAAATATCAGATATTTCACAATGTGATGAGATAAGTATGAACCTAACTCATGTTATGTTACAAATAATCAACGTTGTTTTGGAAAAGCAAAACAATTCCGCCTCTGATCTGCATGAAATAAGCAATGAAATTCTGAGGATAATTGAGCGTACTGGTCACAAGATGGAGTTTTCTGGGCAGATAGCAAATCTGACGGTGGCCGGGCTGGCTTTGGCTGTGCTGCGGGGGGACCACACGTTTGATGGCATGGCTTTCAGCATTCACTCCTATGAAGAAGGCACAGACCCTGAGATTTTCCTAGGCAATGTCCCTGTGGGAGGGATTTTGGCTTCCATATATTTGCCTAAATCACTGACGGAGAGAATTCCTCTTAGCAACTTACAAACGATCTTGTTTAATTTCTTTGGCCAAACTTCACTCTTTAAGACCAAAAATGTCACTAAAGCATTAACCACCTATGTTGTGAGTGCCAGCATTTCAGATGATATGTTCATTCAAAACTTAGCTGACCCAGTGGTTATCACTCTGCAGCATATTGGAGGAAACCAGAATTATGGTCAAGTTCACTGTGCCTTTTGGGATTTTGAGAATAATAATGGGCTGGGTGGATGGAATTCGTCAGGCTGTAAAGTAAAGGAAACAAATGTAAATTACACAATCTGTCAGTGTGACCACCTCACCCATTTTGGAGTCTTAATGGATTTATCCAGGTCTACAGTGGATTCAGTGAATGAACAGATATTAGCGCTTATAACATACACCGGATGTGGAATCTCCTCCATTTTTCTGGGAGTTGCAGTGGTGACATACATAGCTTTTCACAAACTTCGAAAAGATTATCCTGCCAAAATTCTGATCAACCTGTGCACAGCACTACTGATGCTAAACCTGGTATTTTTGATCAATTCTTGGTTGTCATCATTTCAGAAAGTGGGAGTTTGTATCACAGCTGCAGTGGCACTTCATTACTTCCTGCTTGTTTCTTTTACTTGGATGGGCCTGGAGGCAGTCCACATGTATTTGGCTCTAGTCAAAGTCTTCAACATATACATTCCAAATTATATCCTTAAATTTTGTCTAGTTGGTTGGGGAATCCCGGCTATCATGGTGGCAATCACAGTCAGTGTGAAAAAAGATCTGTATGGAACTCTGAGCCCAACAACTCCGTTTTGTTGGATTAAAGATGATTCTATCTTTTACATCTCAGTGGTGGCTTATTTTTGCCTCATATTTCTCATGAATCTCTCCATGTTCTGCACTGTTCTTGTTCAACTGAATTCTGTGAAATCCCAAATCCAGAAGACTCGGCGGAAGATGATCCTGCATGACCTCAAAGGCACAATGAGCCTGACATTCTTACTTGGCCTCACCTGGGGGTTTGCATTTTTTGCTTGGGGACCCATGAGGAACTTTTTCTTGTATTTGTTTGCCATTTTTAACACTTTGCAAGGATTCTTCATTTTTGTGTTTCACTGTGTGATGAAGGAGAGTGTGCGGGAGCAGTGGCAGATACACCTCTGCTGTGGGTGGTTGCGATTGGATAACTCTTCTGATGGGAGCAGCCGGTGTCAGATAAAGGTTGGATATAAACAGGAGGGACTAAAGAAAATCTTTGAGCACAAACTGTTGACGCCATCTCTCAAGTCAACTGCAACTAGCTCCACTTTCAAATCTTTAGGCTCTGCACAAGGCACACCTTCAGAAATAAGCTTTCCAAATGATGACTTTGACAAAGATCCTTACTGTTCCTCTCCTTGA。
本发明的第二方面提供一种检测MRGPRF基因的试剂，所述的试剂为用于扩增MRGPRF基因的引物序列。
上述一种检测MRGPRF基因的试剂，作为一种优选的实施方案，用于扩增MRGPRF基因的引物序列为：
MRGPRF-F：GAGGCCCCGGAACTCTACA；
MRGPRF-R：GGATGGAGAACACCGCCTTG。
本发明的第三方面提供一种检测PGR17基因的试剂，所述的试剂为用于扩增PGR17基因的引物序列。
上述一种检测PGR17基因的试剂，作为一种优选的实施方案，用于扩增PGR17基因的引物序列为：
PGR17-F：TCTCAGTCGGCTGTTACGAAG
PGR17-R：GGGAGTGCCCCAGTATTTGTG。
本发明的第四方面，提供一种检测前列腺癌的诊断试剂盒，所述试剂盒包括上述检测MRGPRF基因的试剂、上述检测PGR17基因的试剂；所述检索MRGPRF基因的试剂为用于扩增MRGPRF基因的引物序列，所述检测PGR17基因的试剂为用于扩增PGR17基因的引物序列；
用于扩增MRGPRF基因的引物序列为：
MRGPRF-F：GAGGCCCCGGAACTCTACA
MRGPRF-R：GGATGGAGAACACCGCCTTG；
用于扩增PGR17基因的引物序列为：
PGR17-F：TCTCAGTCGGCTGTTACGAAG
PGR17-R：GGGAGTGCCCCAGTATTTGTG。
上述一种检测前列腺癌的诊断试剂盒，作为一种优选的实施方案，所述试剂盒还包括：所述试剂盒还包括采用实时荧光定量PCR扩增体系，反应体系包括：一对检测MRGPRF基因拷贝数的扩增引物序列，一对检测PGR17基因拷贝数的扩增引物序列，一对检测内参基因GAPDH基因拷贝数的扩增引物序列，PCR底物，PCR缓冲液，待检前列腺癌组织cDNA模板，无酶去离子水。
本发明的有益效果为：本发明首次发现了MRGPRF和PGR17联合使用在前列腺癌中显著高表达，本发明采用MRGPRF基因和PGR17基因作为诊断前列腺癌的生物标记物，制备出一种检测前列腺癌的试剂盒，可方便指导临床诊断前列腺癌，指导临床治疗。
本发明采用实时荧光量PCR试剂，制成检测试剂盒，试剂盒中包含一对检测MRGPRF基因拷贝数的扩增引物序列引物和一对PGR17基因拷贝数的扩增引物序列引物，其比包含单独一对MRGPRF基因拷贝数的扩增引物序列引物或一对PGR17基因拷贝数的扩增引物序列引物的特异性更强，准确率更高，能提供准确可靠的检测结果。
此外，本发明所述的检测前列腺癌的诊断试剂盒操作简单、方便，可节省时间和试剂，可为患者提供更多更准确的信息，帮助患者得到更及时的治疗，提高患者的生活质量。
附图说明
图1为在3株前列腺癌细胞株LNCap，DU145，PC3和正常前列腺上皮细胞RWPE1中MRGPRF的表达情况；
图2为在3株前列腺癌细胞株LNCap，DU145，PC3和正常前列腺上皮细胞RWPE1中PGR17的表达情况；
图3为10例前列腺癌患者组织及配对癌旁组织中差异mRNA的热图；
图4为100例前列腺癌患者组织及其配对的癌旁组织中MRGPRF的表达情况；
图5为100例前列腺癌患者组织及其配对的癌旁组织中PGR17的表达情况；
图6为MRGPRF和PGR17分别单独诊断前列腺癌曲线下的面积AUC；
图7为MRGPRF和PGR17联合诊断前列腺癌曲线下的面积AUC。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本申请方案，下面将结合案例对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分的实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本申请保护的范围。
本申请的第一方面，提供了MRGPRF和PGR17在检测前列腺癌中的应用。
本申请的第二方面，提供了检测MRGPRF基因的试剂，所述的试剂为用于扩增MRGPRF基因的引物序列。
优选地，用于扩增MRGPRF基因的引物序列为：
MRGPRF-F：GAGGCCCCGGAACTCTACA
MRGPRF-R：GGATGGAGAACACCGCCTTG。
本申请的第三方面，提供检测PGR17基因的试剂，所述的试剂为用于扩增PGR17基因的引物序列。
优选地，用于扩增PGR17基因的引物序列为：
PGR17-F：TCTCAGTCGGCTGTTACGAAG
PGR17-R：GGGAGTGCCCCAGTATTTGTG。
本申请的第四方面，提供一种检测前列腺癌的诊断试剂盒，所述试剂盒包括如权利要求2所述检测MRGPRF基因的试剂、如权利要求4所述检测PGR17基因的试剂；所述检索MRGPRF基因的试剂为用于扩增MRGPRF基因的引物序列，所述检测PGR17基因的试剂为用于扩增PGR17基因的引物序列；
用于扩增MRGPRF基因的引物序列为：
MRGPRF-F：GAGGCCCCGGAACTCTACA
MRGPRF-R：GGATGGAGAACACCGCCTTG；
用于扩增PGR17基因的引物序列为：
PGR17-F：TCTCAGTCGGCTGTTACGAAG
PGR17-R：GGGAGTGCCCCAGTATTTGTG。
优选地，所述试剂盒还包括采用实时荧光定量PCR扩增体系，反应体系包括：一对检测MRGPRF基因拷贝数的扩增引物序列，一对检测PGR17基因拷贝数的扩增引物序列，一对检测内参基因GAPDH基因拷贝数的扩增引物序列，PCR底物，PCR缓冲液，待检前列腺癌组织cDNA模板，无酶去离子水。
本申请实验所有数据均由SPSS 21.0统计软件分析输出，计量资料以均数±标准差表示，采用t检验，组间差异采用方差分析，P<0.05为差异有统计学意义，**P<0.01。
实施例1
1、MRGPRF和PGR17在前列腺癌和前列腺上皮细胞株中的表达：
1.1细胞培养
人正常前列腺上皮细胞RWPE1和前列腺癌细胞株LNCap，DU145和PC3分别用含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基于37℃、5％CO2，95％饱和湿度的培养箱中培养，细胞到对数生长期时，常规消化传代1次，并分别收集细胞，用于实验。细胞消化使用含0.25％EDTA的胰蛋白酶消化液。
备注：
LNCap是指人前列腺癌细胞LNCap，是从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。
DU145指人前列腺癌细胞DU145，是从一位有3年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者的脑部转移灶中建立的。
PC3指人前列腺癌细胞PC3，源于一位62岁白人男性IV级前列腺癌患者的骨转移灶。
1.2 RT-qPCR实验
1.2.1提取细胞总RNA
使用胰蛋白酶消化上述细胞，消化后将上述细胞分别收集于1.5ml EP管中，放入离心机中，1000rpm/min室温离心10min。离心后弃上清，加入1×PBS清洗两次，每个EP管中加入1ml Trizol(Invitrogen,USA)，将细胞团吹打混匀，室温静置5min，按1ml Trizol中加入200μl氯仿的比例加入氯仿，上下剧烈震荡混匀30s，至溶液呈现出乳糜状时放入离心机，4℃12000g离心20min。取出EP管，置于冰中，小心缓慢吸取上层溶液400μl至一新的EP管中，切记不要吸到沉淀，在吸出的400μl上清中加入400μl预冷的异丙醇，上下轻轻颠倒，置于-20℃冰箱静置20min以沉淀RNA，4℃12000g离心10min；吸弃上清，尽量吸净，轻轻沿管壁加入250μl含有70％乙醇的DEPC(焦碳酸二乙酯)水以清洗RNA，4℃，12000g离心10min，吸弃乙醇，尽量吸净，室温风干沉淀3min；加入适量的DEPC水溶解RNA，置于微量核酸浓度测定仪上，测定RNA浓度与A260/280值(A260/280的值正常范围在1.80-2.0之间，说明RNA的浓度可以用于后续实验)，测定后置于-80℃保存。
1.2.2逆转录合成cDNA
取3000ng总RNA，加入5×qRT super-Mix(5×逆转录混合液，Takara，大连)2μl，剩余用无酶超纯水补至10μl，在PCR仪中逆转录合成cDNA，逆转录条件：在PCR仪中，在25℃的条件下逆转录10min，将温度调至42℃，在此条件下逆转录30min，再将温度调至85℃，在此条件下逆转录5min得cDNA，cDNA分装后置于-20℃保存。
1.2.3实时荧光定量PCR
取PCR正向引物(10μM)1μl，PCR反向引物(10μM)1μl(引物序列见表1)，2×SYBRGreen qPCR Mix(2×荧光染料qPCR混合液)10μl，上述4种细胞的cDNA模板2μl，50×ROXDye2(50×ROX参比染料，Takara，大连)0.4μl，无酶去离子水5.6μl。将上述物质混合加入0.2ml的qPCR管中，重复加入3个复孔，同时设置无模板对照。经优化qPCR的反应条件如下：步骤1：95℃30s；步骤2(40个循环)：95℃5s，60℃34s；步骤3(熔解曲线)：95℃15s，60℃60s，95℃15s。设置在延伸阶段收集荧光信号，Quant Studio软件分析得到上述4种细胞中每个基因的循环阈值(Cq值)。qPCR反应结束后进行熔解曲线检测，95℃15s，60℃60s，95℃15s，1个循环。每个样本实验重复3次，结果如图1和图2所示：
从图1中可得出在3株前列腺癌细胞株LNCap，DU145和PC3中检测MRGPRF的表达均高于正常前列腺癌细胞中RWPE1的表达；
从图2中可以得出：在3株前列腺癌细胞株中LNCap，DU145和PC3检测PGR17的表达均高于正常前列腺癌细胞中RWPE1的表达。
表1 PCR引物序列
Figure BDA0003237546300000151
2、mRNA基因芯片分析
收集10例前列腺癌患者组织及配对癌旁组织，做mRNA基因芯片分析，以log2FC≥2，P<0.05为标准，筛选差异基因(结果如图3所示)。
从图3中可以得出差异最显著的是MRGPRF(4.5倍)和PGR17(3.1倍)，证明MRGPRF和PGR17在前列腺癌中高表达。
3、组织和细胞中MRGPRF和PGR17表达量的检测
收集100例前列腺癌患者组织及配对癌旁组织，剪取黄豆粒大小，研磨，抽提RNA，采用RT-qPCR的方法，检测前列腺癌组织中MRGPRF和PGR17 mRNA的表达量。检测细胞中MRGPRF和PGR17表达量，方法相同，抽提RNA后，采用RT-qPCR的方法，检测前列腺癌细胞中MRGPRF和PGR17 mRAN的表达量，结果如图4和图5所示。
从图4和图5中可以得出，在前列腺癌组织中MRGPRF和PGR17显著高表达。
4、为了验证MRGPRF和PGR17在前列腺癌中的诊断性能，我们绘制受试者工作曲线(ROC曲线，ROC曲线是指在特定刺激条件下，以被试在不同判断标准下所得的虚报概率P(y/N)为横坐标，以击中概率P(y/SN)为纵坐标，画得的各点的连线)。
结果显示MRGPRF单独诊断前列腺癌曲线下面积AUC是0.928，PGR17单独诊断前列腺癌曲线下面积AUC是0.78(如图6所示)，而二者联合诊断前列腺癌曲线下面积AUC是0.973(如图7所示)，即表明MRGPRF和PGR17联合诊断前列腺癌的价值极高。
备注：AUC被定义为ROC曲线下与坐标轴围成的面积，显然这个面积的数值不会大于1，又由于ROC曲线一般都处于y＝x这条直线的上方，所以AUC的取值范围在0.5和1之间；AUC越接近1.0，检测方法真实性越高；等于0.5时，则真实性最低，无应用价值。
5、采用上述MRGPR，PGR17和GAPDH基因的引物设计试剂盒。所述的试剂盒采用实时荧光定量PCR扩增体系，每20μl反应体系包括：一对检测MRGPRF基因拷贝数的扩增引物序列，一对检测PGR17基因拷贝数的扩增引物序列和一对检测内参基因GAPDH基因拷贝数的引物序列(见表1)，其正向引物(10μM)体积均为1μl，反向引物(10μM)体积均为1μl，2×SYBRGreen qPCR Mix的体积为10μl，50×ROX Dye2的体积为0.4μl，待检前列腺癌组织cDNA模板2μl，无酶去离子水5.6μl。
在该试剂盒中，MRGPRF和PGR17在前列腺癌中显著高表达，因此检测MRGPRF和PGR17能够准确诊断前脸腺癌。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.检测MRGPRF基因和PGR17基因的mRNA表达水平的试剂在制备前列腺癌诊断试剂盒中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测MRGPRF基因和PGR17基因的试剂为用于扩增MRGPRF基因的引物序列和PGR17基因的引物序列，
用于扩增MRGPRF基因的引物序列为：
MRGPRF-F：GAGGCCCCGGAACTCTACA
MRGPRF-R：GGATGGAGAACACCGCCTTG；
用于扩增PGR17基因的引物序列为：
PGR17-F：TCTCAGTCGGCTGTTACGAAG
PGR17-R：GGGAGTGCCCCAGTATTTGTG。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，
所述试剂盒还包括采用实时荧光定量PCR扩增体系，反应体系包括：一对检测MRGPRF基因拷贝数的扩增引物序列，一对检测PGR17基因拷贝数的扩增引物序列，一对检测内参基因GAPDH基因拷贝数的扩增引物序列，PCR底物，PCR缓冲液，待检前列腺癌组织cDNA模板，无酶去离子水。
CN202111006924.9A 2021-08-30 2021-08-30 一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用 Active CN113789379B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111006924.9A CN113789379B (zh) 2021-08-30 2021-08-30 一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202111006924.9A CN113789379B (zh) 2021-08-30 2021-08-30 一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113789379A CN113789379A (zh) 2021-12-14
CN113789379B true CN113789379B (zh) 2022-08-23

Family

ID=78876609

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202111006924.9A Active CN113789379B (zh) 2021-08-30 2021-08-30 一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113789379B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114788869B (zh) * 2022-04-18 2023-06-06 中山大学肿瘤防治中心（中山大学附属肿瘤医院、中山大学肿瘤研究所） 一种治疗复发或转移性鼻咽癌的药物及其疗效评估标志物

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6114139A (en) * 1994-08-11 2000-09-05 Takeda Chemical Industries, Ltd. G-protein coupled receptor protein and a DNA encoding the receptor
US20080260744A1 (en) * 2002-09-09 2008-10-23 Omeros Corporation G protein coupled receptors and uses thereof
CN102311953B (zh) * 2011-09-23 2013-12-18 上海市肿瘤研究所 尿液诊断膀胱癌的方法和试剂盒
WO2016050934A1 (en) * 2014-10-02 2016-04-07 Aliophtha Ag Endosomal disentanglement of artificial transcription factors
KR101999895B1 (ko) * 2016-08-19 2019-07-15 국립암센터 Tp53 돌연변이 유전자와 관련된 유전자를 탐색하는 방법 및이의 방법으로 선정된 위암의 예후 또는 약물 반응성 예측용 마커 조성물
US20200207836A1 (en) * 2017-08-22 2020-07-02 Monash University Screening Assays, Modulators and Modulation of Activation of Receptor for Advanced Glycation End-Products (RAGE)
WO2019158825A1 (en) * 2018-02-16 2019-08-22 Tampereen Korkeakoulusäätiö SR Xrcc5 as biomarker for prostate cancer
CN113038954A (zh) * 2018-12-05 2021-06-25 日东电工株式会社 用于处置癌症的组合
CN112626213A (zh) * 2020-12-28 2021-04-09 复旦大学附属肿瘤医院 基于二代测序技术的肝癌检测panel、试剂盒及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN113789379A (zh) 2021-12-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2018219264A1 (zh) 一种长链非编码rna作为前列腺癌分子标志物的应用
CN113789379B (zh) 一种检测前列腺癌的诊断试剂盒及其检测方法与应用
CN110541030B (zh) 膀胱癌检测试剂盒及其应用
CN109161597A (zh) 一种用于前列腺癌早期诊断的外泌体源性基因mRNA标志物组及其应用
CN113337613A (zh) 一种与肝癌相关的血清外泌体tsRNA标志物、探针及其应用
CN105907875A (zh) 一种筛选肾癌外周血miRNA标志物的方法及肾癌标志物miR-378
CN108753981A (zh) Hoxb8基因的定量检测在结直肠癌预后判断中的应用
CN104630357A (zh) 一种与结直肠癌相关的血浆miRNA生物标志物及其应用
CN117604110B (zh) 用于乳腺癌诊断和预后判断的生物标志物及其应用
CN117625790B (zh) 用于前列腺癌诊断和预后判断的生物标志物及其应用
CN117604111B (zh) 用于小细胞肺癌诊断和预后判断的生物标志物及其应用
CN104911248A (zh) 一种用于ii、iii期结直肠癌诊断及预后的微小核糖核酸组合及其应用
CN117604108B (zh) 用于肝癌诊断和预后判断的生物标志物及其应用
CN117604106B (zh) 用于非小细胞肺癌诊断和预后判断的生物标志物及其应用
CN113278700B (zh) 一种用于乳腺癌分型及预后预测的引物组及试剂盒
CN114921546B (zh) circHIPK2作为乳腺癌生物标志物的应用
CN116377062B (zh) 检测环状RNA hsa_circ_0033144的试剂在制备诊断胃癌产品中的应用
CN117625792B (zh) 用于胃癌诊断和预后判断的生物标志物及其应用
CN117625791B (zh) 用于结直肠癌诊断和预后判断的生物标志物及其应用
CN111534597B (zh) 一种适用于子宫颈腺癌组织mRNA的PCR内参
CN117265112B (zh) 一种前列腺癌的数字微液滴rna扩增检测系统及pca3基因在该系统中的应用
CN116287252B (zh) 长链非编码rna apcdd1l-dt在制备检测胰腺癌的产品中的应用
CN117604109B (zh) 用于膀胱癌诊断和预后判断的生物标志物及其应用
CN117701708A (zh) 一种用于辅助判断前列腺癌恶性程度的检测方法及试剂
CN114182016A (zh) Ap006284.1作为前列腺癌分子靶标的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant