CN112243631B - 一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法 - Google Patents

一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，包括下列步骤：取出组织培养繁育获得的绿花百合籽鳞茎，清洗后用32‑35℃的温水进行水浴处理30‑60分钟，于室内常温条件下自然干燥24h，浸泡于浓度为1.0‑6.0 mg/L的噻苯隆溶液中，于常温下放置12‑48h，取出，杀菌，于全光照条件下放置7‑15天，得打破休眠的籽鳞茎，即可转入土壤或种植基质中栽培。本发明不受组培鳞茎出瓶季节的限制，比常规破除休眠节约60‑90天，大大缩短绿花百合休眠时间，实现绿花百合的规模化快速繁育，使绿花百合籽鳞茎在30天内整齐发芽，发芽率达80%以上，解决现有技术绿花百合繁育周期长的问题。

Description

一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法
技术领域
本发明涉及一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，属于植物栽培技术领域。
技术背景
绿花百合（Lilium fargesii Franch.）是中国特有的百合科百合属植物。分布于云南、四川、湖北和陕西等海拔在2000-2800米的温暖湿润的山坡林下。 绿花百合的花朵呈绿白色，花瓣上有紫褐色斑点，不仅花朵美丽芬芳，观赏性极强，而且绿花百合的鳞茎还是药食两用的佳品。由于野生的绿花百合植株的繁殖周期较长，鳞茎因休眠而带来难于发芽、生长缓慢的问题，加上人们长期的过度采挖，致使种群数量急剧下降，导致目前很难找到绿花百合的野生植株。为此，研究人员经过多年的努力，虽然研究出能够获得大量绿花百合组培小鳞茎的组培繁殖方法，但由于百合鳞茎具有休眠的习性，在萌发前需要进行处理，以打破其休眠，促进发芽。现有技术在培育绿花百合鳞茎时，是将绿花百合的组培鳞茎放置在0- 4℃黑暗低温的环境中储藏3 - 4个月才能发芽，造成鳞茎的生长周期过长，难于满足市场需求。在申请号为201611102101.5、名称为 “一种提前打破大百合休眠的方法”的中国专利中，是以秋季从土壤中直接采收的大百合小球作为外植体进行组织培养，外植体无菌消毒前需要进行低温打破休眠处理，低温条件为3 - 5℃，处理时间为40 - 50天，该专利虽然能促进组织培养过程中大百合芽的萌发，但并未提及组培种球的培育，仅以外植体小球进行了组培苗的扩繁，更不涉及组织培养出来的籽鳞茎出瓶后的打破休眠处理，也就是说打破休眠处理的对象不同。由于组培繁殖的百合种苗需要在经过多个步骤的结球生长成为小鳞茎后才能出瓶移栽到土壤或种植基质中，并且百合属于宿根类草本植物，其鳞茎具有休眠特性，因此组织培养后的籽鳞茎在出瓶后，必须打破休眠才能在土壤中发芽生长，而籽鳞茎休眠的打破仍然需要在0 - 4℃的低温下冷藏3 - 4个月，因此该专利并没有解决如何使百合组培籽鳞茎打破休眠、快速移栽至大田生长繁育的问题。因此，快速打破绿花百合籽鳞茎休眠，对加快该物种的繁育速度有重要意义。
发明内容
为缩短绿花百合籽鳞茎的休眠时间、提高绿花百合籽鳞茎的发芽率、促进绿花百合生长繁育，本发明提供一种打破绿花百合籽鳞茎休眠，让其提早发芽的方法。
本发明通过下列技术方案实现：一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，其特征在于包括下列步骤：
A、取出组织培养繁育获得的围径为1.0 - 2.0cm的绿花百合籽鳞茎，以无菌水清洗3遍，去除附着于籽鳞茎上的培养基残留物，保留籽鳞茎的根系组织；
B、将A步骤清洗后的籽鳞茎用32 - 35℃的温水进行水浴处理30 - 60分钟，于室内常温条件下自然干燥24h，除去籽鳞茎表面的水分；
C、将B步骤的籽鳞茎浸泡于浓度为1.0 - 6.0 mg/L的噻苯隆溶液中，于常温下放置12 - 48h，取出，杀菌；
D、将C步骤的籽鳞茎于全光照条件下放置7 - 15天，得打破休眠的籽鳞茎，即可转入土壤或种植基质中栽培。
所述B步骤的水浴处理期间保持水温恒定在32 - 35℃。
所述C步骤的杀菌是：以50%的多菌灵可湿性粉剂为溶质，溶剂为无菌水，配制多菌灵体积浓度为1000倍的悬浮液，将籽鳞茎在悬浮液中浸泡20分钟。
所述D步骤的全光照条件是指24h全光照的常温条件，其中光照强度为2500 -3000Lx，放置7 -15天后，发芽率达80%以上，之后即可转入基质中栽培。
本发明通过用32 - 35℃的温水对籽鳞茎进行水浴处理30 - 60分钟，是充分利用温水浴的热激作用，来改变籽鳞茎细胞膜的透性，诱发其产生热激蛋白，增强细胞的呼吸强度，有利于鳞茎芽的萌发。
本发明通过将籽鳞茎浸泡于浓度为1.0 - 6.0 mg/L的噻苯隆溶液中，于常温下放置12 - 48h，是利用噻苯隆同时具有细胞分裂素和生长素的两种功能来改变籽鳞茎中的内源激素水平，增强细胞活力，使细胞组织形态发生变化、重新进入程序化发育阶段，进而诱导籽鳞茎发芽。
本发明与现有技术相比具有下列优点和效果：
1、本发明适用于任何培养基培育出的绿花百合籽鳞茎，无需低温处理，不受组培鳞茎出瓶季节的限制，能够满足缩短绿花百合休眠时间的需求，并加快绿花百合种球的生产周期，实现绿花百合的规模化快速繁育。
2、本发明处理绿花百合籽鳞茎，不仅流程简单，操作方便，效果显著，而且比常规的绿花百合鳞茎破除休眠的处理方法节约60 - 90天的时间，大大缩短了绿花百合籽鳞茎的休眠时间。
3、本发明可使绿花百合籽鳞茎在30天内整齐发芽，发芽率达80%以上，实现绿花百合的规模化种植管理，助力解决绿花百合繁育周期长的问题，具有较好的经济效益和生态效益。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，其特征在于包括下列步骤：
A、取出组织培养繁育获得的围径为1.0cm的绿花百合籽鳞茎，以无菌水清洗3遍，去除附着于籽鳞茎上的培养基残留物，保留籽鳞茎的根系组织；
B、将A步骤清洗后的籽鳞茎用32℃的温水进行水浴处理60分钟，水浴处理期间保持水温恒定在32℃，于室内常温条件下自然干燥24h，除去籽鳞茎表面的水分；
C、将B步骤的籽鳞茎浸泡于浓度为1.0 mg/L的噻苯隆溶液中，于常温下放置48h，取出，进行下列杀菌处理：以50%的多菌灵可湿性粉剂为溶质，溶剂为无菌水，配制多菌灵体积浓度为1000倍的悬浮液，将籽鳞茎在悬浮液中浸泡20分钟；
D、将C步骤的籽鳞茎于全光照条件下放置7天，全光照条件是指24h全光照的常温条件，其光照强度为3000Lx，得打破休眠的籽鳞茎，其发芽率为85%，且各个籽鳞茎的发芽整齐，即可转入常规基质中栽培。
实施例2
一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，其特征在于包括下列步骤：
A、取出组织培养繁育获得的围径为2.0cm的绿花百合籽鳞茎，以无菌水清洗3遍，去除附着于籽鳞茎上的培养基残留物，保留籽鳞茎的根系组织；
B、将A步骤清洗后的籽鳞茎用35℃的温水进行水浴处理30分钟，水浴处理期间保持水温恒定在35℃，于室内常温条件下自然干燥24h，除去籽鳞茎表面的水分；
C、将B步骤的籽鳞茎浸泡于浓度为6.0 mg/L的噻苯隆溶液中，于常温下放置12 h，取出，进行下列杀菌处理：以50%的多菌灵可湿性粉剂为溶质，溶剂为无菌水，配制多菌灵体积浓度为1000倍的悬浮液，将籽鳞茎在悬浮液中浸泡20分钟；
D、将C步骤的籽鳞茎于全光照条件下放置15天，全光照条件是指24h全光照的常温条件，其光照强度为2500Lx，得打破休眠的籽鳞茎，其发芽率为82%，且各个籽鳞茎的发芽整齐，即可转入常规基质中栽培。
实施例3
一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，其特征在于包括下列步骤：
A、取出组织培养繁育获得的围径为1.5cm的绿花百合籽鳞茎，以无菌水清洗3遍，去除附着于籽鳞茎上的培养基残留物，保留籽鳞茎的根系组织；
B、将A步骤清洗后的籽鳞茎用33℃的温水进行水浴处理48分钟，水浴处理期间保持水温恒定在33℃，于室内常温条件下自然干燥24h，除去籽鳞茎表面的水分；
C、将B步骤的籽鳞茎浸泡于浓度为4.0 mg/L的噻苯隆溶液中，于常温下放置24h，取出，进行下列杀菌处理：以50%的多菌灵可湿性粉剂为溶质，溶剂为无菌水，配制多菌灵体积浓度为1000倍的悬浮液，将籽鳞茎在悬浮液中浸泡20分钟；
D、将C步骤的籽鳞茎于全光照条件下放置12天，全光照条件是指24h全光照的常温条件，其光照强度为2800Lx，得打破休眠的籽鳞茎，其发芽率为89%，且各个籽鳞茎的发芽整齐，即可转入常规基质中栽培。
实施例4
一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，其特征在于包括下列步骤：
A、取出组织培养繁育获得的围径为1.2cm的绿花百合籽鳞茎，以无菌水清洗3遍，去除附着于籽鳞茎上的培养基残留物，保留籽鳞茎的根系组织；
B、将A步骤清洗后的籽鳞茎用34℃的温水进行水浴处理40分钟，水浴处理期间保持水温恒定在34℃，于室内常温条件下自然干燥24h，除去籽鳞茎表面的水分；
C、将B步骤的籽鳞茎浸泡于浓度为5.0 mg/L的噻苯隆溶液中，于常温下放置19h，取出，进行下列杀菌处理：以50%的多菌灵可湿性粉剂为溶质，溶剂为无菌水，配制多菌灵体积浓度为1000倍的悬浮液，将籽鳞茎在悬浮液中浸泡20分钟；
D、将C步骤的籽鳞茎于全光照条件下放置10天，全光照条件是指24h全光照的常温条件，其光照强度为2600Lx，得打破休眠的籽鳞茎，其发芽率为88%，且各个籽鳞茎的发芽整齐，即可转入常规基质中栽培。
以下通过本发明的具体实验阐述本发明
从表1可看出，本发明的处理方法极大地缩短了绿花百合籽鳞茎的休眠时间，无需低温条件，且鳞茎发芽时间比常规方法节约70天以上。相比之下，绿花百合籽鳞茎打破休眠的常规处理要将鳞茎在0 - 4℃的低温环境中放置90天以上才能发芽，本发明显然比常规方法更高效、更便捷。
表1 本发明方法与常规方法比较
Figure DEST_PATH_IMAGE002
。

Claims (3)

1.一种快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，其特征在于包括下列步骤：
A、取出组织培养繁育获得的围径为1.0 - 2.0cm的绿花百合籽鳞茎，以无菌水清洗3遍，去除附着于籽鳞茎上的培养基残留物，保留籽鳞茎的根系组织；
B、将A步骤清洗后的籽鳞茎用32 - 35℃的温水进行水浴处理30 - 60分钟，于室内常温条件下自然干燥24h，除去籽鳞茎表面的水分；所述水浴处理期间保持水温恒定在32 -35℃；
C、将B步骤的籽鳞茎浸泡于浓度为1.0 - 6.0 mg/L的噻苯隆溶液中，于常温下放置12- 48h，取出，杀菌；
D、将C步骤的籽鳞茎于全光照条件下放置7 - 15天，得打破休眠的籽鳞茎，即可转入土壤或种植基质中栽培。
2.根据权利要求1所述的快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，其特征在于所述C步骤的杀菌是：以50%的多菌灵可湿性粉剂为溶质，溶剂为无菌水，配制多菌灵体积浓度为1000倍的悬浮液，将籽鳞茎在悬浮液中浸泡20分钟。
3.根据权利要求1所述的快速打破绿花百合籽鳞茎休眠的方法，其特征在于所述D步骤的全光照条件是指24h全光照的常温条件，其中光照强度为2500 - 3000Lx。
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