CN115152633A - 一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法 - Google Patents

一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，步骤如下：A、组培小鳞茎预处理：在无菌条件下，取直径为0.7～1.0cm的港合组培鳞茎处理后作为组培小鳞茎，组培小鳞茎铺在两层培养纸之间后放入组培瓶内、直至组培瓶装满为止；B、低温打破休眠：把组培瓶放入冷库中预冷培育、使组培小鳞茎提前预冷及发育，然后放入冰箱中培育打破休眠；C、小鳞茎转接：在无菌条件下，把低温处理的小鳞茎去掉培养纸后、直接放入大规格鳞茎基质中进行培养；D、鳞茎培养：光暗培养3‑5个月后，鳞茎叶枯萎后，即可收获周径为6‑10cm的大规格港合鳞茎。本发明的组培方法过程操作简单、易规模化实施，为百合规模化种球繁育提供关键性技术支持。

Description

一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法
技术领域
本发明涉及种苗培育技术领域，具体地说是一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法。
背景技术
随着世界百合生产和百合种球贸易的扩大，百合生产面积及种球需求量加大，然而在百合生长过程中，百合种球规模化繁育已成为我国百合种球产业化发展的瓶颈。
目前关于百合组培鳞茎的报道多集中在扩繁方面，对培养大规格的百合鳞茎却极少报道，传统的组培技术大多在蔗糖单一环境下培养组培鳞茎，使鳞茎规格小、长时间培养易褐化，炼苗易死亡等缺点。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术存在的问题，提供一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法。
本发明的目的是通过以下技术方案解决的：
一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：该方法步骤如下：
A、组培小鳞茎预处理：在无菌条件下，取直径为0.7～1.0cm的港合组培鳞茎、去掉顶部鳞茎叶且保留鳞茎盘底部根系作为组培小鳞茎，组培小鳞茎铺在两层培养纸之间后放入组培瓶内、直至组培瓶装满为止；
B、低温打破休眠：把组培瓶放入10℃～15℃冷库中预冷培育、使组培小鳞茎提前预冷及发育，然后放入冰箱中培育打破休眠；
C、小鳞茎转接：在无菌条件下，把低温处理的小鳞茎去掉培养纸后、直接放入大规格鳞茎基质中进行培养，大规格鳞茎基质的配方为：1/5MS+0.1mg/LNAA+0.3mg/L赤霉素+0.2mg/LIBA +10g/L蔗糖+120g/L草炭、且pH值=6.2；
D、鳞茎培养：光暗培养3-5个月后，鳞茎叶枯萎后，即可收获周径为6-10cm的大规格港合鳞茎。
所述步骤C中的大规格鳞茎基质的配制方法为：
C1、按量称取MS及蔗糖放入蒸煮容器中并加入水；
C2、加热蒸煮容器使蔗糖充分溶化后，再加入NAA、赤霉素、IBA搅匀，搅匀后用水定容，调pH值；
C3、加入草炭混匀后，装入组培瓶中、容量为组培瓶体积的1/5-1/6之间；
C4、组培瓶在120℃、1.5MPa的条件下高温高压灭菌30min，冷却后获得大规格鳞茎基质。
所述步骤A中的鳞茎盘底部根系保留0.3～0.5cm。
所述步骤A中的培养纸含有MS液体培养基且培养纸的湿度为70%～75%。
所述步骤A中的培养纸采用卫生纸。
所述步骤B中的冷库预冷培育时间为10d～15d。
所述步骤B中的冰箱温度为0℃～4℃，冰箱培育45d～50d打破休眠。
所述步骤D中的鳞茎培养的光照强度为3000lx、光暗条件为光照10/黑暗14小时、培养温度为25℃～28℃。
所述步骤D中的鳞茎培养时，每隔40d～45d，在无菌操作条件下、打开通气一次。
每次通气时间不低于2min。
本发明相比现有技术有如下优点：
本发明的组培方法在无菌条件下，结合组培小鳞茎预处理、低温打破休眠、小鳞茎转接和专门配置的大规格鳞茎基质、利用光照和糖同时供给百合鳞茎营养，从而培育出规格大、品质好的大规格港合鳞茎，不仅减少组培鳞茎炼苗时病虫害、也缩短田间栽培所需1-2年的年限，具有措施独特、工艺简单、容易实施的特点，为百合及新品系扩繁提供必要的技术支持。
本发明公开了一种有效培养周径为6-10cm的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其目的就是克服现有百合组培鳞茎较小的不足，而提供一种全新的培养百合大规格鳞茎的组培方法进行规模化繁育百合籽球，该过程操作简单、易规模化实施，有效的缩短了百合田间栽培的时间段，为百合规模化种球繁育提供关键性技术支持，是一种全新的培养方法进行规模化繁殖百合无病毒籽球的过程，在繁殖无病毒籽球过程中具有易规模化实施的优点。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，该方法步骤如下：A、组培小鳞茎预处理：在无菌条件下，取直径为0.7～1.0cm的港合组培鳞茎、去掉顶部鳞茎叶且保留0.3～0.5cm的鳞茎盘底部根系作为组培小鳞茎，组培小鳞茎铺在两层培养纸之间后放入组培瓶内、多层夹在培养纸中的组培小鳞茎叠加直至组培瓶装满为止，上述培养纸采用含有MS液体培养基的卫生纸且培养纸的湿度为70%～75%；B、低温打破休眠：把组培瓶放入10℃～15℃冷库中预冷培育10d～15d、使组培小鳞茎提前预冷及发育，然后放入0℃～4℃冰箱中、培育45d～50d打破休眠；C、小鳞茎转接：在无菌条件下，把低温处理的小鳞茎去掉培养纸后、直接放入大规格鳞茎基质中进行培养，大规格鳞茎基质的配方为：1/5MS+0.1mg/LNAA+0.3mg/L赤霉素+0.2mg/LIBA +10g/L蔗糖+120g/L草炭、且pH值=6.2；D、鳞茎培养：在光照强度为3000lx、光暗条件为光照10/黑暗14小时、培养温度为25℃～28℃的条件下，每隔40d～45d，在无菌操作条件下打开通气一次，每次组培瓶开口时间不低于2min，培养3-5个月后，鳞茎叶枯萎后，即可收获周径为6-10cm的大规格港合鳞茎。
上述大规格鳞茎基质的配制方法为：C1、按量称取MS及蔗糖放入蒸煮容器中并加入水；C2、加热蒸煮容器使蔗糖充分溶化后，再加入NAA、赤霉素、IBA搅匀，搅匀后用水定容，调pH值；C3、加入草炭混匀后，装入组培瓶中、容量为组培瓶体积的1/5-1/6之间；C4、组培瓶在120℃、1.5MPa的条件下高温高压灭菌30min，冷却后获得大规格鳞茎基质。
本发明提供的百合组培用的大规格鳞茎基质改变了传统蔗糖单一培养的环境，合理的减少蔗糖并逐渐增加栽培基质。在无菌环境条件下，保证了组培鳞茎既可以利用蔗糖培养、又可以通过光合作用培养的两种培养环境共同促进百合组培鳞茎的膨大，打破了组培单一蔗糖培养的局限；同时通过优化激素配比，改变鳞茎在培养环境的适应性，以达到快速提高鳞茎的膨大效率；同时适当提高pH值，提高百合组培鳞茎在两种培养环境同时存在生长的适应性。
实施例一
一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，该方法步骤如下：A、组培小鳞茎预处理：在无菌条件下，取直径为0.7～1.0cm的港合组培鳞茎、去掉顶部鳞茎叶且保留0.5cm的鳞茎盘底部根系作为组培小鳞茎，组培小鳞茎铺在两层培养纸之间后放入组培瓶内、多层夹在培养纸中的组培小鳞茎叠加直至组培瓶装满为止，上述培养纸采用含有MS液体培养基的卫生纸且培养纸的湿度为75%；B、低温打破休眠：把组培瓶放入10℃冷库中预冷培育15d、使组培小鳞茎提前预冷及发育，然后放入4℃冰箱中、培育48d打破休眠；C、小鳞茎转接：在无菌条件下，把低温处理的小鳞茎去掉培养纸后、直接放入大规格鳞茎基质中进行培养，大规格鳞茎基质的配方为：1/5MS+0.1mg/LNAA+0.3mg/L赤霉素+0.2mg/LIBA +10g/L蔗糖+120g/L草炭、且pH值=6.2；D、鳞茎培养：在光照强度为3000lx、光暗条件为光照10/黑暗14小时、培养温度为25℃～28℃的条件下，每隔40d，在无菌操作条件下打开通气一次，每次组培瓶开口时间不低于2min，培养3-5个月后，鳞茎叶枯萎后，即可收获周径为6-10cm的大规格港合鳞茎。
实施例二
一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，该方法步骤如下：A、组培小鳞茎预处理：在无菌条件下，取直径为0.7～1.0cm的港合组培鳞茎、去掉顶部鳞茎叶且保留0.3cm的鳞茎盘底部根系作为组培小鳞茎，组培小鳞茎铺在两层培养纸之间后放入组培瓶内、多层夹在培养纸中的组培小鳞茎叠加直至组培瓶装满为止，上述培养纸采用含有MS液体培养基的卫生纸且培养纸的湿度为70%；B、低温打破休眠：把组培瓶放入12℃冷库中预冷培育15d、使组培小鳞茎提前预冷及发育，然后放入0℃冰箱中、培育50d打破休眠；C、小鳞茎转接：在无菌条件下，把低温处理的小鳞茎去掉培养纸后、直接放入大规格鳞茎基质中进行培养，大规格鳞茎基质的配方为：1/5MS+0.1mg/LNAA+0.3mg/L赤霉素+0.2mg/LIBA +10g/L蔗糖+120g/L草炭、且pH值=6.2；D、鳞茎培养：在光照强度为3000lx、光暗条件为光照10/黑暗14小时、培养温度为25℃～28℃的条件下，每隔43d，在无菌操作条件下打开通气一次，每次组培瓶开口时间不低于2min，培养3-5个月后，鳞茎叶枯萎后，即可收获周径为6-10cm的大规格港合鳞茎。
实施例三
一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，该方法步骤如下：A、组培小鳞茎预处理：在无菌条件下，取直径为0.7～1.0cm的港合组培鳞茎、去掉顶部鳞茎叶且保留0.5cm的鳞茎盘底部根系作为组培小鳞茎，组培小鳞茎铺在两层培养纸之间后放入组培瓶内、多层夹在培养纸中的组培小鳞茎叠加直至组培瓶装满为止，上述培养纸采用含有MS液体培养基的卫生纸且培养纸的湿度为70%；B、低温打破休眠：把组培瓶放入15℃冷库中预冷培育10d、使组培小鳞茎提前预冷及发育，然后放入4℃冰箱中、培育45d～50d打破休眠；C、小鳞茎转接：在无菌条件下，把低温处理的小鳞茎去掉培养纸后、直接放入大规格鳞茎基质中进行培养，大规格鳞茎基质的配方为：1/5MS+0.1mg/LNAA+0.3mg/L赤霉素+0.2mg/LIBA +10g/L蔗糖+120g/L草炭、且pH值=6.2；D、鳞茎培养：在光照强度为3000lx、光暗条件为光照10/黑暗14小时、培养温度为25℃～28℃的条件下，每隔45d，在无菌操作条件下打开通气一次，每次组培瓶开口时间不低于2min，培养3-5个月后，鳞茎叶枯萎后，即可收获周径为6-10cm的大规格港合鳞茎。
本发明公开了一种有效培养周径为6-10cm的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其目的就是克服现有百合组培鳞茎较小的不足，而提供一种全新的培养百合大规格鳞茎的组培方法进行规模化繁育百合籽球，该过程操作简单、易规模化实施，有效的缩短了百合田间栽培的时间段，为百合规模化种球繁育提供关键性技术支持，是一种全新的培养方法进行规模化繁殖百合无病毒籽球的过程，在繁殖无病毒籽球过程中具有易规模化实施的优点。
以上实施例仅为说明本发明的技术思想，不能以此限定本发明的保护范围，凡是按照本发明提出的技术思想，在技术方案基础上所做的任何改动，均落入本发明保护范围之内；本发明未涉及的技术均可通过现有技术加以实现。

Claims (10)

1.一种百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：该方法步骤如下：
A、组培小鳞茎预处理：在无菌条件下，取直径为0.7～1.0cm的港合组培鳞茎、去掉顶部鳞茎叶且保留鳞茎盘底部根系作为组培小鳞茎，组培小鳞茎铺在两层培养纸之间后放入组培瓶内、直至组培瓶装满为止；
B、低温打破休眠：把组培瓶放入10℃～15℃冷库中预冷培育、使组培小鳞茎提前预冷及发育，然后放入冰箱中培育打破休眠；
C、小鳞茎转接：在无菌条件下，把低温处理的小鳞茎去掉培养纸后、直接放入大规格鳞茎基质中进行培养，大规格鳞茎基质的配方为：1/5MS+0.1mg/LNAA+0.3mg/L赤霉素+0.2mg/LIBA +10g/L蔗糖+120g/L草炭、且pH值=6.2；
D、鳞茎培养：光暗培养3-5个月后，鳞茎叶枯萎后，即可收获周径为6-10cm的大规格港合鳞茎。
2.根据权利要求1所述的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：所述步骤C中的大规格鳞茎基质的配制方法为：
C1、按量称取MS及蔗糖放入蒸煮容器中并加入水；
C2、加热蒸煮容器使蔗糖充分溶化后，再加入NAA、赤霉素、IBA搅匀，搅匀后用水定容，调pH值；
C3、加入草炭混匀后，装入组培瓶中、容量为组培瓶体积的1/5-1/6之间；
C4、组培瓶在120℃、1.5MPa的条件下高温高压灭菌30min，冷却后获得大规格鳞茎基质。
3.根据权利要求1或2所述的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：所述步骤A中的鳞茎盘底部根系保留0.3～0.5cm。
4.根据权利要求1或2所述的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：所述步骤A中的培养纸含有MS液体培养基且培养纸的湿度为70%～75%。
5.根据权利要求1或2所述的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：所述步骤A中的培养纸采用卫生纸。
6.根据权利要求1或2所述的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：所述步骤B中的冷库预冷培育时间为10d～15d。
7.根据权利要求1或2所述的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：所述步骤B中的冰箱温度为0℃～4℃，冰箱培育45d～50d打破休眠。
8.根据权利要求1或2所述的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：所述步骤D中的鳞茎培养的光照强度为3000lx、光暗条件为光照10/黑暗14小时、培养温度为25℃～28℃。
9.根据权利要求8所述的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：所述步骤D中的鳞茎培养时，每隔40d～45d，在无菌操作条件下、打开通气一次。
10.根据权利要求9所述的百合品种港合的大规格鳞茎组培方法，其特征在于：每次通气时间不低于2min。
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