CN101518207B - 一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属植物繁殖技术领域，主要是一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，包括如下步骤：种子采集、无菌播种、丛生芽增殖培养、壮苗培养、生根培养、移栽。基本培养基为：选用1/6MS～1/3MS培养基，附加蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.4～5.6。本发明的优点是：快速建立无菌组培快繁体系，繁殖速度快，组培苗健壮均匀，移栽成活率高，在短期内形成大量的优良组培苗，进行规模化、生产化生产。

Description

一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法
技术领域
本发明涉及植物组培快繁技术领域，尤其涉及一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法。
背景技术
瓶子草(Sarracenia)又名眼镜蛇花，属于瓶子草科瓶子草属植物，本属植物原产西欧、北美和墨西哥等地。瓶子草为多年生草本植物，根状茎，匍匐，须根。叶常绿，粗糙，圆筒状，叶瓶状并带有顶盖，基生成莲座状叶丛，每一张瓶状叶就是一个捕虫器，瓶内分泌粘液和消化液，将粘住误入瓶内的昆虫并消化、吸收。瓶子草花葶直立，花单生，下垂，紫或绿紫色，4～5月开放，花茎从叶基部抽出，花较大，且很有特点，花芯长有一个巨大的盔状柱头，花黄绿色或深红色，具有很高的观赏价值。可作垂吊花卉栽植观赏，更适宜在学校作生物科普材料栽培。瓶子草一般是分株繁殖，但繁殖速度很慢。在一定程度上制约了瓶子草的工厂化生产。
发明内容
本发明要解决上述现有技术的缺陷，提供一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法。
本发明目的通过以下技术方案来实现：这种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，按如下步骤进行：
1)、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：
(1)基本培养基：选用1/6MS～1/3MS培养基，附加蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；
(2)种子萌发培养基为：1/6MS～1/3MS；
(3)增殖培养基为：1/6MS～1/3MS+BA 0.1～2.0mg/L+NAA 0.01～0.2mg/L；
(4)壮苗培养基为：1/6MS～1/3MS+BA 0.1～0.5mg/L+NAA 0.01～0.1mg/L；
(5)生根培养基：1/6MS～1/3MS+NAA0.01～1.0mg/L；
2)、种子采集：采用瓶子草为亲本，开花时选取生长健壮的母株进行瓶子草的自交授粉及杂交，授粉后120～150天蒴果成熟时作为外植体用于播种；
3)、无菌播种：从蒴果中取出种子，种子在20％硫酸溶液浸种5～10h，再用体积比为75％酒精表面消毒30～45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20～30min，无菌水冲洗3～5遍；将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上，在培养条件下培养30～45天后，从种子萌发成实生苗；培养温度为25±2℃，暗培养30～45天，种子萌发后转为光照培养，光照光强为1000～2000Lx，光照时间为12h/d；
4)、丛生芽增殖培养：将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30～45天增殖出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30～45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；
5)、壮苗培养：将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达3～5厘米；
6)、生根培养：将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达约5～7cm、苗基部长出5～10根细根；
7)、移栽：将生根组培苗移栽于泥碳基质中，培育1～2个月至成苗。
所述的丛生芽增殖培养、壮苗培养、生根培养阶段的培养条件是，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000Lx，光照时间为12h/d。
本发明的有益效果是：本发时所提供的瓶子草无菌播种和组培快繁方法，快速建立无菌组培快繁体系，繁殖速度快，组培苗健壮均匀，移栽成活率高，在短期内形成大量的优良组培苗，进行规模化、生产化生产。
具体实施方式
通过以下实施例对本发明作进一步的详细说明，但本发明的内容并不局限于此。
实施例1
这种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，按如下步骤进行：
1)、种子采集：采用瓶子草为亲本，开花时选取生长健壮的母株进行瓶子草的自交授粉及杂交，授粉后120～150天蒴果成熟时作为外植体用于播种；
2)、无菌播种：从蒴果中取出种子，种子在体积比为20％硫酸溶液浸种5～10h，再用体积比为75％酒精表面消毒30～45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20～30min，无菌水冲洗3～5遍；将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上，在培养条件下培养30～45天后，从种子萌发成实生苗；培养温度为25±2℃，暗培养30～45天，种子萌发后转为光照培养，光照光强为1000～2000Lx，光照时间为12h/d；种子萌发培养基为：1/6MS～1/3MS；
3)、丛生芽增殖培养：将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30～45天增殖出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30～45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；增殖培养基为：1/6MS～1/3MS+BA 0.1～2.0mg/L+NAA 0.01～0.2mg/L；
4)、壮苗培养：将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达3～5厘米；壮苗培养基为：1/6MS～1/3MS+BA 0.1～0.5mg/L+NAA 0.01～0.1mg/L；
5)、生根培养：将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达约5～7cm、苗基部长出5～10根细根；生根培养基：1/6MS～1/3MS+NAA0.01～1.0mg/L；
6)、移栽：将生根组培苗移栽于泥碳基质中，培育1～2个月至成苗。
所述的丛生芽增殖培养、壮苗培养、生根培养阶段的培养条件是，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000Lx，光照时间为12h/d。
实施例2：
本例中，种子萌发培养基为：1/6MS；丛生芽增殖培养基：1/3MS+BA 1.0mg/L+NAA0.1mg/L；壮苗培养基：1/4MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.05mg/L；生根培养基：1/5MS+NAA0.5mg/L。
其余步骤，条件均同于实施例1。
除上述实施例外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。

Claims (2)

1.一种瓶子草无菌播种和组培快繁方法，其特征在于：该方法按以下步骤进行：
1)、培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：
(1)基本培养基：选用1/6MS～1/3MS培养基，附加蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；
(2)种子萌发培养基为：1/6MS～1/3MS；
(3)增殖培养基为：1/6MS～1/3MS+BA0.1～2.0mg/L+NAA0.01～0.2mg/L；
(4)壮苗培养基为：1/6MS～1/3MS+BA0.1～0.5mg/L+NAA0.01～0.1mg/L；
(5)生根培养基：1/6MS～1/3MS+NAA0.01～1.0mg/L；
2)、种子采集：采用瓶子草为亲本，开花时选取生长健壮的母株进行瓶子草的自交授粉及杂交，授粉后120～150天蒴果成熟时作为外植体用于播种；
3)、无菌播种：从蒴果中取出种子，种子在20％硫酸溶液浸种5～10h，再用体积比为75％酒精表面消毒30～45s，无菌水冲洗3遍，然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌20～30min，无菌水冲洗3～5遍；将灭菌处理后的种子在无菌条件下，接种在种子萌发培养基上，在培养条件下培养30～45天后，从种子萌发成实生苗；培养温度为25±2℃，暗培养30～45天，种子萌发后转为光照培养，光照光强为1000～2000Lx，光照时间为12h/d；
4)、丛生芽增殖培养：将实生苗接种到增殖培养基上，在培养条件下培养30～45天增殖出丛生芽；根据对幼苗数量的需求，每隔30～45天按同样方法进行幼苗再增殖培养；
5)、壮苗培养：将增殖出的丛生芽分割成单芽，接种到壮苗培养基上，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达3～5厘米；
6)、生根培养：将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养，在培养条件下培养20～30天后，幼苗苗高生长达5～7cm、苗基部长出5～10根细根；
7)、移栽：将生根组培苗移栽于泥碳基质中，培育1～2个月至成苗。
2.根据权利要求1所述的瓶子草无菌播种和组培快繁方法，其特征在于，所述的丛生芽增殖培养、壮苗培养、生根培养阶段的培养条件是，培养温度为25±2℃，光照光强为2500～3000Lx，光照时间为12h/d。
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