CN101518206B - 一种茅膏菜组培快繁方法 - Google Patents

一种茅膏菜组培快繁方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种茅膏菜组培快繁方法,包括如下步骤:培养基的配制、外植体的选取与灭菌、诱导培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、移栽。基本培养基:选用1/5MS~1/2MS培养基,蔗糖或白糖20~30g/L,琼脂7~9g/L,pH5.6~5.8;诱导培养基:1/5MS~1/2MS+BA0.5~2.0mg/L+NAA 0.0~0.2mg/L;增殖培养基:1/5MS~1/2MS+BA 0.1~1.0mg/L+NAA 0.0~0.1mg/L;壮苗培养基:1/5MS~1/2MS+BA 0.1~0.5mg/L+NAA 0.0~0.1mg/L;生根培养基:1/5MS~1/2MS或1/5MS+NAA0.01~0.5mg/L;本发明的优点是:繁殖速度快,生产健壮均匀,移栽成活率高,在短期内形成大量的优良组培苗,进行规模化生产。

Description

一种茅膏菜组培快繁方法
技术领域
[0001] 本发明涉及植物组培快繁技术领域,尤其涉及一种茅膏菜组培快繁方法。 背景技术
[0002] 茅膏菜(Drosera peltata)又称捕虫草,茅膏菜科茅膏菜属植物,是食虫植物种类最多分布最广的一个大族,也是株形奇特、人工栽培较为麻烦的一类。茅膏菜为多年生草本,10〜20厘米,根茎短,圆球形,叶互生,叶片半圆形,边缘密生能分泌粘液的腺毛,当小虫停落叶面时,即被粘液胶着,逐渐被腺毛分泌的蛋白质分解酶所消化。茅膏菜喜温暖、湿润和充足阳光,栽培土壤以透气性好的泥炭土和苔藓的混和基质较好。生长适温为20〜 30°C,冬季不低于5°C。茅膏菜是一种观赏性较强的植物,可作为一种环保型的家庭小盆栽之一,也是我国市场上近几年来刚刚流行的奇特花卉之一。茅膏菜还可以药用。茅膏菜市场主要依靠进口,国内进行工厂化生产茅膏菜的企业很少,而且不能满足国内市场的需要。 茅膏菜的繁殖主要利用种子、扦插等方式进行,而且栽培要求技术很高,成活率不高,在一定程度上制约了茅膏菜的工厂化生产。
发明内容
[0003] 本发明要解决上述现有技术的缺陷,提供一种茅膏菜组培快繁方法。
[0004] 本发明目的通过以下技术方案来实现:这种茅膏菜组培快繁方法,按如下步骤进行:
[0005] 1)、培养基的配制,包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为:
[0006] (1)基本培养基:选用1/5MS〜1/2MS培养基,蔗糖或白糖20〜30g/L,琼脂7〜 9g/L, ρΗ5· 6 〜5· 8 ;
[0007] (2)诱导培养基:1/5MS 〜1/2MS+BA0. 5 〜2. Omg/L+NAA 0. 0 〜0. 2mg/L ;
[0008] (3) ±曾殖培养基:1/5MS 〜1/2MS+BA0. 1 〜1. Omg/L+NAA 0. 0 〜0. lmg/L ;
[0009] (4)壮苗培养基:1/5MS 〜1/2MS+BA0. 1 〜0. 5mg/L+NAA 0. 0 〜0. lmg/L ;
[0010] (5)生根培养基:1/5MS 〜1/2MS 或 1/5MS+NAA0. 01 〜0. 5mg/L ;
[0011] 2)、外植体的选取与灭菌:取茅膏菜的叶片、根茎、花梗及花蕾作为外植体,经表面灭菌处理后备用;
[0012] 3)、诱导培养:将灭菌处理后的外植体在无菌条件下,接种在诱导培养基上,在培养条件下培养30〜45天后,从外植体诱导形成幼芽或丛生芽;
[0013] 4)、增殖培养:将诱导形成的幼芽或丛生芽分割成单芽,接种到增殖培养基上,在培养条件下培养30〜45天增殖出丛生芽;根据对幼苗数量的需求,每隔30〜45天按同样方法进行幼苗再增殖培养;
[0014] 5)、壮苗培养:将增殖出的丛生芽分割成单芽,接种到壮苗培养基上,在培养条件下培养20〜30天后,幼苗冠径生长达2〜3厘米;[0015] 6)、生根培养:将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养,在培养条件下培养20〜30天后,幼苗冠径生长达约3〜5cm、苗基部长出5〜10根细根;
[0016] 7)、移栽:将生根组培苗移栽于苔藓基质中,培育1〜2个月至成苗。
[0017] 所述的培养基,包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为:
[0018] (1)基本培养基:选用1/5MS〜1/2MS培养基,蔗糖或白糖20〜30g/L,琼脂7〜 9g/L, ρΗ5· 6 〜5· 8 ;
[0019] (2)诱导培养基:1/2MS+BA 1. Omg/L+NAA 0. lmg/L ;
[0020] (3) ±曾殖培养基:1/3MS+BA 0. 5mg/L+NAA 0. 05mg/L ;
[0021] (4)壮苗培养基:1/4MS+BA 0. lmg/L ;
[0022] (5)生根培养基:1/5MS 或 1/5MS+NAA0. 05mg/L。
[0023] 所述的灭菌处理是整理好的外植体进行预处理,用加体积比为中性洗洁精的溶液浸泡并振荡5〜lOmin,自来水冲洗20〜30min ;预处理后的外植体用体积比为75% 酒精表面消毒30〜45s,无菌水冲洗3遍;然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌10〜15min, 无菌水冲洗3〜5遍。
[0024] 所述的各组培阶段的培养条件是,培养温度为25士2°C,光照光强为2500〜 3000Lx,光照时间为12h/d。
[0025] 本发明的有益效果是:
[0026] 本发时所提供的茅膏菜组培快繁方法,繁殖速度快,生产健壮均勻,移栽成活率高,在短期内形成大量的优良组培苗,进行规模化、生产化生产。
具体实施方式
[0027] 通过以下实施例对本发明作进一步的详细说明,但本发明的内容并不局限于此。
[0028] 实施例1 :
[0029] 这种茅膏菜组培快繁方法,按如下步骤进行:
[0030] 1)、培养基的配制,包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为:
[0031] (1)基本培养基:选用1/5MS〜1/2MS培养基,蔗糖或白糖20〜30g/L,琼脂7〜 9g/L, ρΗ5· 6 〜5· 8 ;
[0032] (2)诱导培养基:1/5MS 〜1/2MS+BA0. 5 〜2. Omg/L+NAA 0. O 〜0. 2mg/L ;
[0033] (3) ±曾殖培养基:1/5MS 〜1/2MS+BA 0. 1 〜1. Omg/L+NAA 0. O 〜0. lmg/L ;
[0034] (4)壮苗培养基:1/5MS 〜1/2MS+BA 0. 1 〜0. 5mg/L+NAA 0. O 〜0. lmg/L ;
[0035] (5)生根培养基:1/5MS 〜1/2MS 或 1/5MS+NAA0. 01 〜0. 5mg/L ;
[0036] 2)、外植体的选取与灭菌:取茅膏菜的叶片、根茎、花梗及花蕾作为外植体,经表面灭菌处理后备用;
[0037] 3)、诱导培养:将灭菌处理后的外植体在无菌条件下,接种在诱导培养基上,在培养条件下培养30〜45天后,从外植体诱导形成幼芽或丛生芽;
[0038] 4)、增殖培养:将诱导形成的幼芽或丛生芽分割成单芽,接种到增殖培养基上,在培养条件下培养30〜45天增殖出丛生芽;根据对幼苗数量的需求,每隔30〜45天按同样方法进行幼苗再增殖培养;
[0039] 5)、壮苗培养:将增殖出的丛生芽分割成单芽,接种到壮苗培养基上,在培养条件下培养20〜30天后,幼苗冠径生长达2〜3厘米;
[0040] 6)、生根培养:将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养,在培养条件下培养20〜30天后,幼苗冠径生长达约3〜5cm、苗基部长出5〜10根细根;
[0041] 7)、移栽:将生根组培苗移栽于苔藓基质中,培育1〜2个月至成苗。
[0042] 所述的灭菌处理是整理好的外植体进行预处理,用加1 %中性洗洁精的溶液浸泡并振荡5〜lOmin,自来水冲洗20〜30min ;预处理后的外植体用75%酒精表面消毒30〜 45s,无菌水冲洗3遍;然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌10〜15min,无菌水冲洗3〜5 遍。
[0043] 所述的各组培阶段的培养条件是,培养温度为25士2°C,光照光强为2500〜 3000Lx,光照时间为12h/d。
[0044] 实施例2 :
[0045] 本例中,基本培养基:选用1/5MS〜1/2MS培养基,蔗糖或白糖20〜30g/L,琼脂 7 〜9g/L, ρΗ5· 6 〜5. 8 ;诱导培养基:1/2MS+BA1. Omg/L+NAA 0. lmg/L ;增殖培养基: 1/3MS+BA0. 5mg/L+NAA 0. 05mg/L ;壮苗培养基:1/4MS+BA 0. lmg/L ;生根培养基:1/5MS 或 1/5MS+NAA0. 05mg/Lo
[0046] 其余步骤,条件均同于实施例1。
[0047] 除上述实施例外,本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成的技术方案,均落在本发明要求的保护范围。

Claims (2)

1 一种茅膏菜组培快繁方法,其特征在于按以下步骤进行:1)、培养基的配制,包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为:(1)基本培养基:选用1/5MS〜1/2MS培养基,蔗糖20〜30g/L,琼脂7〜9g/L,pH5. 6〜5. 8 ;(2)诱导培养基:1/5MS 〜1/2MS+BA0. 5 〜2. 0mg/L+NAA0. 0 〜0. 2mg/L ;(3) ±曾殖培养基:1/5MS 〜1/2MS+BA0. 1 〜1. 0mg/L+NAA0. 0 〜0. lmg/L ;(4)壮苗培养基:1/5MS 〜1/2MS+BA0. 1 〜0. 5mg/L+NAA0. 0 〜0. lmg/L ;(5)生根培养基:1/5MS 〜1/2MS 或 1/5MS+NAA0. 01 〜0. 5mg/L ;2)、外植体的选取与灭菌:取茅膏菜的叶片、根茎、花梗及花蕾作为外植体,经表面灭菌处理后备用;3)、诱导培养:将灭菌处理后的外植体在无菌条件下,接种在诱导培养基上,在培养条件下培养30〜45天后,从外植体诱导形成幼芽或丛生芽;4)、增殖培养:将诱导形成的幼芽或丛生芽分割成单芽,接种到增殖培养基上,在培养条件下培养30〜45天增殖出丛生芽;根据对幼苗数量的需求,每隔30〜45天按同样方法进行幼苗再增殖培养;5)、壮苗培养:将增殖出的丛生芽分割成单芽,接种到壮苗培养基上,在培养条件下培养20〜30天后,幼苗冠径生长达2〜3厘米;6)、生根培养:将培养的壮苗接种在生根培养基中进行生根培养,在培养条件下培养 20〜30天后,幼苗冠径生长达约3〜5cm、苗基部长出5〜10根细根;7)、移栽:将生根组培苗移栽于苔藓基质中,培育1〜2个月至成苗;所述的灭菌处理是整理好的外植体进行预处理,用加中性洗洁精的溶液浸泡并振荡5〜lOmin,自来水冲洗20〜30min ;预处理后的外植体用75%酒精表面消毒30〜45s, 无菌水冲洗3遍;然后用次氯酸钠溶液浸泡振荡灭菌10〜15min,无菌水冲洗3〜5遍;所述的各组培阶段的培养条件是,培养温度为25 士 2°C,光照光强为2500〜3000Lx,光照时间为12h/d。
2.根据权利要求1所述的茅膏菜组培快繁方法,其特征在于:所述的培养基,包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为:(1)基本培养基:选用1/5MS〜1/2MS培养基,蔗糖20〜30g/L,琼脂7〜9g/L,pH5. 6〜·5. 8 ;(2)诱导培养基:1/2MS+BA1. 0mg/L+NAA0. lmg/L ;(3) ±曾殖培养基:1/3MS+BA0. 5mg/L+NAA0. 05mg/L ;(4)壮苗培养基:1/4MS+BA0. lmg/L ;(5)生根培养基:1/5MS 或 1/5MS+NAA0. 05mg/L。
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