CN104012417A - 小木漆高效快速扩繁方法 - Google Patents

小木漆高效快速扩繁方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104012417A
CN104012417A CN201410311305.4A CN201410311305A CN104012417A CN 104012417 A CN104012417 A CN 104012417A CN 201410311305 A CN201410311305 A CN 201410311305A CN 104012417 A CN104012417 A CN 104012417A
Authority
CN
China
Prior art keywords
seedling
days
temperature
stem
medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201410311305.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104012417B (zh
Inventor
何承忠
赵月明
李旦
刘玉鲲
段安安
许玉兰
祝建兵
廖声熙
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Southwest Forestry University
Original Assignee
Southwest Forestry University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Southwest Forestry University filed Critical Southwest Forestry University
Priority to CN201410311305.4A priority Critical patent/CN104012417B/zh
Publication of CN104012417A publication Critical patent/CN104012417A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104012417B publication Critical patent/CN104012417B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
    • Y02A40/22Improving land use; Improving water use or availability; Controlling erosion
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P60/00Technologies relating to agriculture, livestock or agroalimentary industries
    • Y02P60/40Afforestation or reforestation

Abstract

本发明涉及植物组培方法,尤其是小木漆的组培方法。具体来说是一种小木漆高效快速扩繁方法,包括(1)外植体的选择与消毒(2)启动培养(3)增殖培养(4)生根培养(5)炼苗与移栽步骤,本发明具有遗传性状稳定、培养过程简单、易生根,培养扩繁周期短,移栽容易成活的优点。采用对优良小木漆优良单株进行组织培养的方法,可使其繁殖系数达到4-5倍,每10个有效小木漆腋芽,按繁殖系数为4.5,增殖周期为45天计算,除去污染损耗,其年繁殖量仍将达到175万个以上,有效解决了小木漆快速繁殖的问题,使得优良无性系材料能够大面积推广,同时也为工厂化育苗奠定了基础。

Description

小木漆高效快速扩繁方法
技术领域
[0001] 本发明涉及植物组培方法,尤其是小木漆的组培方法。
背景技术
[0002])藤域{Toxicodendron vernicifluum)是漆树科(Anacardiacceae)漆属的重要经济树种。其主产物“生漆”为树干割取的液汁,是目前世界上唯一来自绿色植物,在生物酶催化作用下,常温能固化成膜的生物高分子涂料。随着人们家具保健意识和环保意识的增强,化学油漆所含的甲醛和苯的衍生物的危害为人们所认识,在家居装修中,消费者越来越多的选择环保油漆,而环保油漆离不开生漆作重要原料。生漆越来越受到人们的重视,近10年来,生漆的价格一直在涨,2001年为2万-4万元/吨,3年后价格增长了 I倍,2006年为10万-14万元/吨,2008年达到16万-24万元/吨,2013年生漆价格高达26万-36万元/吨。
[0003] 漆树资源丰富,品种繁多,经过长期的人工培育和自然选择,日益适地适树,分大木漆、小木漆两大类,大木漆即野生的山漆树,小木漆树即人工栽培的家漆树。由于小木漆的产漆量相对较高,质量较好,开割时间较早,漆农主要通过人工栽培小木漆的方式割取生漆,早在上世纪80年代王道植等人曾开展了对大木漆组织培养的研究,但未见有成功的人工扩繁方式推广实施,而关于小木漆组织培养快繁的技术至今尚未见报道。
[0004] 小木漆的结实量少,甚至败育,种子育苗也往往发生性状分离,对母树的优良性状不能固定,因而漆农主要通过埋根育苗的传统方式获取幼苗,但其成苗率较低,繁殖速度慢,特别是使推广优良品种和优良单株受到了限制。所以要对小木漆成活率高的快速扩繁方法进行研究。
发明内容
[0005] 本发明要解决现有技术中小木漆获取幼苗成苗率低,繁殖速度慢的问题。
[0006]本发明提供了一种小木漆高效快速扩繁方法,其特征在于按下列步骤实施:
(I)外植体的选择与消毒:选取优良小木漆单株的当年生嫩茎或根萌幼苗,去除叶柄和叶片,用毛刷轻刷茎段表面,除去表面杂质,用2%的洗洁精水溶液浸泡10-15分钟,在线状自来水下冲洗1-2小时,剪成3-4cm长含1-2个叶腋的茎段,放于灭过菌的外植体缸内,移至超净工作台内进行消毒,75%乙醇浸泡20-30秒,1%的苯扎氯胺溶液浸泡1-2分钟,无菌蒸馏水冲洗2-3次后,用0.1%升汞浸泡10-20分钟,无菌蒸馏水冲洗5-8次,放于灭过菌的垫有滤纸的接种盘内,使滤纸能够吸干外植体表面的残留水分。
[0007] (2)启动培养:将茎段两端分别切去2_4mm,平放在启动培养基上,叶腋朝上,启动培养基的配方为:White + 6-BA 0.5_2mg/L + NAA 0.02-0.5mg/L, 20_30g/L 蔗糖,4.0-5.0g/L琼脂,pH为5.8-6.0。置于昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下暗培养15-20天后,叶腋处长出l_2cm高腋芽,再置于光照强度1000-2000Lux,光照时间12小时/天,昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下光照培养10-15天。[0008] (3)增殖培养:待腋芽长到3_4cm高时,将其从老茎上剪下,去掉底部1_2个叶片,直立于幼苗增殖培养基上,对于较高腋芽,从基部切取含1-2个腋芽的茎段,并平放于增殖培养基上,增殖培养基的配方为:MS + ΖΤ0.1-1.0mg/L + 6-BA0.5-3.0mg/L + TDZ0.lmg/L,20-30g/L 蔗糖,4.0-5.0g/L 琼脂,pH 为 5.8-6.0。置于昼温 25±2°C,夜温 20±2°C 的条件下暗培养15-20天后,腋芽基部形成约Icm3的愈伤组织,茎段叶腋处长出l-2cm高腋芽,形态学下端也形成约Icm3的愈伤组织,再置于光照强度1000-2000LUX,光照时间12小时/天,昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下光照培养10-15天。基部愈伤组织诱导可出4_8个l-2cm高的不定芽,同时腋芽长到3-4cm。待15天后,待不定芽小苗长到3-4cm高,再将小苗切下,转到相同的增殖培养基上,经过45天的培养,诱导出的小苗又可长到3-4cm,反复将高3-4cm的小苗切下进行增殖培养,可以使小木漆进行快速大量的扩繁,其增值倍数为4-5倍。
[0009] (4)生根培养:将3-4cm高的组培苗转接到生根培养基上,生根培养基配方为:1/2MS + IΑΑ0.05-0.2mg/L + IBA0.05-0.2mg/L,0.1-0.5g/L 活性炭,20_30g/L 蔗糖,
4.0-5.0g/L琼脂,pH为5.8-6.0。置于光照强度1000_2000Lux,光照时间12小时/天,昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下光照培养10-15天后,得到小木漆生根苗。
[0010] (5)炼苗与移栽:待生根苗的根长达1.5_2cm后,在室温为25°C的室内打开瓶盖,炼苗2-4天后,取出生根苗,洗净沾附在根部的培养基,之后移栽到基质配比为腐殖土:河沙=1:1的沙盘中,移栽后注意控制温室内的温度在25-30 0C之间,湿度在75-80%之间,10-15天后成活,移至杯口直径为IOcm的营养袋中,移栽基质配比同沙盘。再通过养护2-3个月,苗高达20-30cm时,移至室外空地造林,以待割取生漆。
[0011] 本发明有以下优点:(I)通过生物技术对小木漆进行组织培养快速繁殖,在短时间内培育出大量可供大田栽培的小木漆幼苗,显著提高了小木漆种苗的繁殖系数和种苗质量,实现规模化生产,满足生产上的需要。
[0012] (2)通过采用暗培养:光照培养=1:1,克服小木漆外植体伤口褐变死亡的问题。在启动培养的过程中,选择盐离子含量较低的White培养基降低褐变率。
[0013] (3)在增殖过程中,选择多种细胞分裂素(ZT、TDZ、6_BA)相结合的方法,使小木漆腋芽的增殖系数达到4-5倍。在生根过程中也综合运用各种生长素(四4、嫩4、^^、2,4-0),获得组培苗的生根率在99%,每株平均带3-4个根。
[0014] 本发明具有遗传性状稳定、培养过程简单、易生根,培养扩繁周期短,移栽容易成活的优点。采用对优良小木漆优良单株进行组织培养的方法,可使其繁殖系数达到4-5倍,每10个有效小木漆腋芽,按繁殖系数为4.5,增殖周期为45天计算,除去污染损耗,其年繁殖量仍将达到175万个以上,有效解决了小木漆快速繁殖的问题,使得优良无性系材料能够大面积推广,同时也为工厂化育苗奠定了基础。
具体实施方式 [0015] 实施例1、实施时间为2013年,小木漆的组培扩繁在西南林业大学林学院实验室和格林温室进行。
[0016] (I)外植体的选择与消毒:于2013年5月选取优良漆树单株,获得其当年生嫩茎,去除叶柄和叶片,用毛刷轻刷茎段表面,除去表面杂质,用2%的洗洁精水溶液浸泡10分钟,在线状自来水下冲洗2小时,剪成3-4cm长含1-2个叶腋的茎段,放于灭过菌的外植体缸内,移至超净工作台内进行消毒,75%乙醇浸泡20秒,1%的苯扎氯胺溶液浸泡I分钟,无菌蒸馏水冲洗2-3次后,用0.1%升汞浸泡2分钟,无菌蒸馏水冲洗5-8次,放于灭过菌的垫有滤纸的接种盘内,使滤纸能够吸干外植体表面的残留水分。
[0017] (2)启动培养:将茎段两端分别切去2_4mm,平放在启动培养基上,叶腋朝上,启动培养基的配方为=White + 6-BA2.0mg/L + NAA0.5mg/L, 20g/L 鹿糖,4.0g/L 琼脂,pH 为 5.8。置于昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下暗培养15天后,叶腋处长出l-2cm高腋芽,再置于光照强度1000-2000Lux,光照时间12小时/天,昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下光照培养15天。
[0018] (3)增殖培养:2013年6月腋芽长到3-4cm高时,将其从老茎上剪下,去掉底部1-2个叶片,直立于幼苗增殖培养基上,对于较高腋芽,从基部切取含1-2个腋芽的茎段,并平放于增殖培养基上,增殖培养基的配方为:MS + ΖΤ0.5mg/L + 6-BA 1.0mg/L + TDZ0.lmg/L,30g/L蔗糖,4.0g/L琼脂,pH为5.8。置于昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下暗培养15天后,腋芽基部形成约Icm3的愈伤组织,茎段叶腋处长出l-2cm高腋芽,形态学下端也形成约Icm3的愈伤组织,再置于光照强度1000-2000Lux,光照时间12小时/天,昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下光照培养15天。基部愈伤组织诱导可出4-8个l-2cm高的不定芽,同时腋芽长到3-4cm。待15天后,待不定芽小苗长到3-4cm高,再将小苗切下,转到相同的增殖培养基上,经过45天的培养,诱导出的小苗又可长到3-4cm,反复将高3_4cm的小苗切下进行增殖培养,可以使小木漆进行快速大量的扩繁,其增值倍数为4.89倍。
[0019] (4)生根培养:2013年7月开始将3-4cm高的组培苗转接到生根培养基上,生根培养基配方为:1/2MS + IΑΑ0.05mg/L + IBA0.2mg/L,0.2g/L活性炭,30g/L蔗糖,4.0g/L琼脂,pH为5.8。置于光照强度1000-2000Lux,光照时间12小时/天,昼温25 ± 2 °C,夜温20 ± 2 °C 的条件下光照培养15天后,得到小木漆生根苗。
[0020] (5)炼苗与移栽:待生根苗的根长达1.5_2cm后,在室温为25°C的室内打开瓶盖,炼苗3天后,取出生根苗,洗净沾附在根部的培养基,之后移栽到基质配比为腐殖土:河沙=1:1的沙盘中,移栽后注意控制温室内的温度在25-30°C之间,湿度在75-80%之间,15天后成活,移至杯口直径为IOcm的营养袋中,移栽基质配比同沙盘。再通过养护3个月,苗高达20-30cm时,移至室外空地造林,以待割取生漆。

Claims (1)

1.一种小木漆高效快速扩繁方法,其特征在于按下列步骤实施: (1)外植体的选择与消毒:选取优良小木漆单株的当年生嫩茎或根萌幼苗,去除叶柄和叶片,用毛刷轻刷茎段表面,除去表面杂质,用2%的洗洁精水溶液浸泡10-15分钟,在线状自来水下冲洗1-2小时,剪成3-4cm长含1-2个叶腋的茎段,放于灭过菌的外植体缸内,移至超净工作台内进行消毒,75%乙醇浸泡20-30秒,1%的苯扎氯胺溶液浸泡1-2分钟,无菌蒸馏水冲洗2-3次后,用0.1%升汞浸泡10-20分钟,无菌蒸馏水冲洗5-8次,放于灭过菌的垫有滤纸的接种盘内,使滤纸能够吸干外植体表面的残留水分; (2)启动培养:将茎段两端分别切去2-4mm,平放在启动培养基上,叶腋朝上,启动培养基的配方为:White + 6-BA 0.5_2mg/L + NAA 0.02-0.5mg/L, 20_30g/L 蔗糖,4.0-5.0g/L 琼月旨,pH为5.8-6.0 ;置于昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下暗培养15-20天后,叶腋处长出l_2cm高腋芽,再置于光照强度1000-2000 Lux,光照时间12小时/天,昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下光照培养10-15天; (3)增殖培养:待腋芽长到3-4cm高时,将其从老茎上剪下,去掉底部1-2个叶片,直立于幼苗增殖培养基上,对于较高腋芽,从基部切取含1-2个腋芽的茎段,并平放于增殖培养基上,增殖培养基的配方为:MS + ΖΤ0.1-1.0mg/L + 6-BA0.5-3.0mg/L + TDZ0.lmg/L,20-30g/L 蔗糖,4.0-5.0g/L 琼脂,pH 为 5.8_6.0 ;置于昼温 25±2°C,夜温 20±2°C 的条件下暗培养15-20天后,腋芽基部形成约Icm3的愈伤组织,茎段叶腋处长出l-2cm高腋芽,形态学下端也形成约Icm3的愈伤组织,再置于光照强度1000-2000LUX,光照时间12小时/天,昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下光照培养10-15天;基部愈伤组织诱导可出4_8个1-2cm高的不定芽,同时腋芽长到3-4cm ;待15天后,待不定芽小苗长到3_4cm高,再将小苗切下,转到相同的增殖培养基上,经过45天的培养,诱导出的小苗又可长到3-4cm,反复将高3-4cm的小苗切下进行增殖培养,可以使小木漆进行快速大量的扩繁,其增值倍数为4-5倍; (4)生根培养:将3-4cm高的组培苗转接到生根培养基上,生根培养基配方为:1/2MS +IΑΑ0.05-0.2mg/L + IBA0.05-0.2mg/L,0.1-0.5g/L 活性炭,20_30g/L 蔗糖,4.0-5.0g/L 琼月旨,pH为5.8-6.0 ;置于光照强度1000-2000Lux,光照时间12小时/天,昼温25±2°C,夜温20±2°C的条件下光照培养10-15天后,得到小木漆生根苗; (5)炼苗与移栽:待生根苗的根长达1.5-2cm后,在室温为25°C的室内打开瓶盖,炼苗2-4天后,取出生根苗,洗净沾附在根部的培养基,之后移栽到基质配比为腐殖土:河沙=1:I的沙盘中,移栽后注意控制温室内的温度在25-30°C之间,湿度在75-80%之间,10-15天后成活,移至杯口直径为IOcm的营养袋中,移栽基质配比同沙盘;再通过养护2-3个月,苗高达20-30cm时,移至室外空地造林,以待割取生漆。
CN201410311305.4A 2014-07-02 2014-07-02 小木漆高效快速扩繁方法 Active CN104012417B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410311305.4A CN104012417B (zh) 2014-07-02 2014-07-02 小木漆高效快速扩繁方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410311305.4A CN104012417B (zh) 2014-07-02 2014-07-02 小木漆高效快速扩繁方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104012417A true CN104012417A (zh) 2014-09-03
CN104012417B CN104012417B (zh) 2015-07-15

Family

ID=51429648

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410311305.4A Active CN104012417B (zh) 2014-07-02 2014-07-02 小木漆高效快速扩繁方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104012417B (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105532412A (zh) * 2016-02-01 2016-05-04 云南农业大学 一种甘薯雾培育苗方法
CN105638461A (zh) * 2015-12-30 2016-06-08 四川禾木本业农林科技有限公司 一种野漆愈伤组织防褐化的方法
CN105660398A (zh) * 2016-01-14 2016-06-15 湖北省林业科学研究院 一种毛坝大木漆的组织培养快繁方法
CN106818476A (zh) * 2017-01-19 2017-06-13 西南林业大学 天然三倍体漆树高效快速扩繁方法
CN106818477A (zh) * 2017-01-19 2017-06-13 西南林业大学 日本漆树高效快速扩繁方法
CN107343474A (zh) * 2017-07-31 2017-11-14 贵州绿荫河农业发展有限公司 一种糯米香高效快速扩繁的方法
CN107926710A (zh) * 2017-12-22 2018-04-20 绵阳市蜀创农业科技有限公司 一种野漆组培的快速繁殖方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
引田裕之: ""漆树萌芽组织培养试管苗的培育"", 《广西林业科技》, vol. 21, no. 4, 31 December 1992 (1992-12-31), pages 187 - 189 *
王道植等: ""漆树组织培养技术研究初报"", 《中国生漆》, no. 2, 31 December 1987 (1987-12-31), pages 4 - 8 *
陈佩佩: ""野漆树的组织培养"", 《山西林业科技》, no. 2, 31 December 1988 (1988-12-31), pages 28 *

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105638461A (zh) * 2015-12-30 2016-06-08 四川禾木本业农林科技有限公司 一种野漆愈伤组织防褐化的方法
CN105660398A (zh) * 2016-01-14 2016-06-15 湖北省林业科学研究院 一种毛坝大木漆的组织培养快繁方法
CN105660398B (zh) * 2016-01-14 2017-10-13 湖北省林业科学研究院 一种毛坝大木漆的组织培养快繁方法
CN105532412A (zh) * 2016-02-01 2016-05-04 云南农业大学 一种甘薯雾培育苗方法
CN105532412B (zh) * 2016-02-01 2018-12-21 云南农业大学 一种甘薯雾培育苗方法
CN106818477A (zh) * 2017-01-19 2017-06-13 西南林业大学 日本漆树高效快速扩繁方法
CN106818477B (zh) * 2017-01-19 2018-11-13 西南林业大学 日本漆树高效快速扩繁方法
CN106818476A (zh) * 2017-01-19 2017-06-13 西南林业大学 天然三倍体漆树高效快速扩繁方法
CN106818476B (zh) * 2017-01-19 2018-12-25 西南林业大学 天然三倍体漆树高效快速扩繁方法
CN107343474A (zh) * 2017-07-31 2017-11-14 贵州绿荫河农业发展有限公司 一种糯米香高效快速扩繁的方法
CN107926710A (zh) * 2017-12-22 2018-04-20 绵阳市蜀创农业科技有限公司 一种野漆组培的快速繁殖方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN104012417B (zh) 2015-07-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104012417B (zh) 小木漆高效快速扩繁方法
CN102301952B (zh) 一种甘菊繁殖方法
CN102187810B (zh) 一种所罗门姜黄的组织培养繁殖方法
CN102301951B (zh) 一种广豆根组织培养快速繁殖方法
CN103283599B (zh) 一种鄂西红豆树离体胚培养及植株再生的方法
CN101822220A (zh) 一种春兰名品茎尖组织培养快速繁殖方法
CN106417015B (zh) 一种怀集报春苣苔组织培养和快速繁殖方法
CN103004604B (zh) 一种万代兰品种的繁育方法
CN104041412A (zh) 一种贵州半蒴苣苔的组织培养快速繁殖方法
CN102845313A (zh) 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法
CN103430842A (zh) 一种杂交兰组织培养快速繁殖方法
CN104920223A (zh) 一种墨兰种苗繁殖方法
CN100391333C (zh) 安祖花无菌苗组织培养和试管苗炼苗移栽方法
CN103430845A (zh) 一种草莓组织培养方法
CN102210267A (zh) 玫瑰再生为完整植株的方法
CN109863997B (zh) 一种蒙桑种苗的组织培养方法
CN101855995B (zh) 川东灯台报春的组培繁殖方法
CN104686329A (zh) 一种杜仲组织培养方法
CN102613087A (zh) 生物组织培养繁育考来木的方法
CN104488721B (zh) 一种雪花草的组织培养快速繁殖方法
CN101743908A (zh) 红花银桦组培快繁及栽培方法
CN103444529B (zh) 一种鄂西红豆树植株再生及大量繁殖方法
CN101015280B (zh) 滇北球花报春的组培快繁方法
CN104686336A (zh) 一种臭椿组培快繁殖方法
CN104094848A (zh) 油桐下胚轴愈伤组织诱导及高效再生植株的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant