CN107027627B - 一种多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法 - Google Patents
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- A01H4/005—Methods for micropropagation; Vegetative plant propagation using cell or tissue culture techniques
Abstract
本发明提供一种多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法,包括如下具体步骤:多花黄精优良单株的选择、未成熟种子幼胚的剥取、幼胚的诱导培养、微块茎的诱导形成、微块茎的扩繁增殖、微块茎的直接移栽培养成苗。本发明提供的多花黄精幼胚培养具有生长迅速、分化力强、扩繁系数大的优点,以其微块茎进行扩繁和移栽具有扩繁速度快、数量多、周期短、移栽方便、耐存储、耐运输、直接移栽、管理简单、成活率高等优点;解决了目前多花黄精种子繁殖成苗慢,根茎繁殖系数低、成本高的育苗问题,推进多花黄精种苗快速繁育,工厂化、规模化生产。
Description
技术领域
本发明属于药用植物育种领域,具体涉及一种多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法。
技术背景
多花黄精是药食两用中药材,具补气养阴、健脾、润肺、益肾之功效,市场需求量大,自然生长的多花黄精已远不能满足社会需求,人工栽培的多花黄精已成为市场供应的主体。多黄精繁殖方式主要有种子繁殖和根茎繁殖两种方式,因其种子成熟后具较长的休眠期,种子萌芽生长缓慢、自然发芽率低、育苗和成苗时间长,不易管理,且种子萌发只生长成单个小植株,收获单个小根茎,扩繁速度慢,耗时,在生产上应用较少;人工栽培多采用其根状茎进行无性繁殖,该方法虽然成苗快,但繁殖系数低,种苗参差不齐,种根茎用量大,既不经济,又限制育苗生产规模,且长期进行无性繁殖,易造成种质退化。因此,多花黄精种苗快速繁育成为解决该药材大面积种植的关键环节。
多花黄精幼胚培养,是从多花黄精未成熟果实中获取未成熟种子,将幼小胚从种子中上分离出来,放在人工培养基上进行无菌离体诱导培养,促使其生长发育形成大量小苗。
发明内容
本发明提供了一种多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法,可工厂化、规模化快速繁育多花黄精种苗,解决多花黄精人工栽培需要迅速繁育大量种源的问题。
本发明是通过如下技术方案实现的:
多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法,包括如下步骤:
(1)多花黄精优良单株的选择:选择生长健壮、抗病性强、根茎大、品质好优良农艺性状的多花黄精单株,观察其开花结果情况,在果实成熟前1-2个月,采收优良单株未成熟的果实。
(2)未成熟种子幼胚的剥取:将多花黄精优良单株未成熟果实,按照常规组培外殖体消毒程序进行消毒处理,在无菌的环境中,打开果实,取出种子,剥取种子中幼嫩完整的种胚。
(3)幼胚的诱导培养:将无菌剥取的幼嫩种胚接入诱导生长培养基MS+2.0mg/L 6-BA+ 0.2mg/L NAA,暗培养15-20天,再进行1000 Lux弱光培养15-20天,幼胚膨大形成细胞团块。
(4)微块茎的诱导形成:将幼胚形成的细胞团块接入诱导分化培养基MS+6.0mg/L6-BA+ 0.2mg/L NAA,常规光照培养30-45天,细胞团块表面形成许多凸起的小芽点,继续光照培养30-45天,诱导形成微块茎;
(5)微块茎的扩繁增殖;将微块茎进行切割分块,接入诱导分化培养基MS+4.0mg/L6-BA+ 0.2mg/L NAA培养45-60天,小块的微球茎生长膨大成为大块的微块茎,重复前面的切割分块培、扩繁增殖、循环培养,形成大量的微块茎。
(6)微块茎的直接移栽培养成苗:将扩繁增殖产生的大量微块茎,取出清洗,去除叶片,分割为小块,每个小块1-3个芽点,晾干切口,直接播种移栽到苗床或繁殖地培养,常规管理,生长成苗。
本发明与现有的多花黄精种苗繁殖技术(种子繁殖、根茎繁殖、常规组培)相比,本发明具有以下突出优点和效果:(1)选择多花黄精农艺性状优良单株种子的胚进行培养繁殖,是融合了多花黄精种子繁殖(有性繁殖)和常规组培繁殖(无性繁殖)的优点而开展的一种创新性的繁殖方式;(2)幼嫩的种胚生命力旺盛,细胞分裂生长迅速、培养速度快;(3)种胚培养形成的细胞团块分化能力强,形成的微块茎周身都是凸起的小芽,组培效率高;(4)微块茎切割分块、循环培养,扩繁增殖系数大,生产效率高;(5)微块茎直接移栽,生长成苗,管理便捷,成活率高,省去了常规组培的生根壮苗、炼苗驯化过程,既节约生产成本,又提高育苗效率;(6)微块茎无根无叶,移栽方便,不易失水,耐存储、耐运输。
具体实施方式
实施例1
多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法,包括如下步骤:
(1)多花黄精优良单株的选择:选择生长健壮、抗病性强、根茎大、品质好的优良农艺性状的多花黄精单株,观察其开花结果情况,在果实成熟前1个月,采收优良单株未成熟的果实。
(2)未成熟种子幼胚的剥取:将多花黄精优良单株未成熟果实,按照常规组培外殖体消毒程序进行消毒处理,在无菌的环境中,打开果实,取出种子,剥取种子中幼嫩完整的种胚。
(3)幼胚的诱导培养:将无菌剥取的幼嫩种胚接入诱导生长培养基MS+2.0mg/L 6-BA+ 0.2mg/L NAA,暗培养17天,再进行1000 Lux弱光培养17天,幼胚膨大形成细胞团块。
(4)微块茎的诱导形成:将幼胚形成的细胞团块接入诱导分化培养基MS+6.0mg/L6-BA+ 0.2mg/L NAA,常规光照培养40天,细胞团块表面形成许多凸起的小芽点,继续光照培养40天,诱导形成微块茎;
(5)微块茎的扩繁增殖;将微块茎进行切割分块,接入诱导分化培养基MS+4.0mg/L6-BA+ 0.2mg/L NAA培养55天,小块的微球茎生长膨大成为大块的微块茎,重复前面的切割分块培、扩繁增殖、循环培养,形成大量的微块茎。
(6)微块茎的直接移栽培养成苗:将扩繁增殖产生的大量微块茎,取出清洗,去除叶片,分割为小块,每个小块2个芽点,晾干切口,直接播种移栽到苗床或繁殖地培养,常规管理,生长成苗。
微块茎直接移栽,生长成苗,成活率高达100%,且成苗的质量优于常规品种培育的。省去了常规组培的生根壮苗、炼苗驯化过程,既节约生产成本,又提高育苗效率。
实施例2
多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法,包括如下步骤:
(1)多花黄精优良单株的选择:选择生长健壮、抗病性强、根茎大、品质好的优良农艺性状的多花黄精单株,观察其开花结果情况,在果实成熟前2个月,采收优良单株未成熟的果实。
(2)未成熟种子幼胚的剥取:将多花黄精优良单株未成熟果实,按照常规组培外殖体消毒程序进行消毒处理,在无菌的环境中,打开果实,取出种子,剥取种子中幼嫩完整的种胚。
(3)幼胚的诱导培养:将无菌剥取的幼嫩种胚接入诱导生长培养基MS+2.0mg/L 6-BA+ 0.2mg/L NAA,暗培养15天,再进行1000 Lux弱光培养15天,幼胚膨大形成细胞团块。
(4)微块茎的诱导形成:将幼胚形成的细胞团块接入诱导分化培养基MS+6.0mg/L6-BA+ 0.2mg/L NAA,常规光照培养30天,细胞团块表面形成许多凸起的小芽点,继续光照培养30天,诱导形成微块茎;
(5)微块茎的扩繁增殖;将微块茎进行切割分块,接入诱导分化培养基MS+4.0mg/L6-BA+ 0.2mg/L NAA培养45天,小块的微球茎生长膨大成为大块的微块茎,重复前面的切割分块培、扩繁增殖、循环培养,形成大量的微块茎。
(6)微块茎的直接移栽培养成苗:将扩繁增殖产生的大量微块茎,取出清洗,去除叶片,分割为小块,每个小块1个芽点,晾干切口,直接播种移栽到苗床或繁殖地培养,常规管理,生长成苗。
微块茎直接移栽,生长成苗,成活率高达98%,且成苗的质量优于常规品种培育的。省去了常规组培的生根壮苗、炼苗驯化过程,既节约生产成本,又提高育苗效率。
实施例3
多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法,包括如下步骤:
(1)多花黄精优良单株的选择:选择生长健壮、抗病性强、根茎大、品质好的优良农艺性状的多花黄精单株,观察其开花结果情况,在果实成熟前1个月,采收优良单株未成熟的果实。
(2)未成熟种子幼胚的剥取:将多花黄精优良单株未成熟果实,按照常规组培外殖体消毒程序进行消毒处理,在无菌的环境中,打开果实,取出种子,剥取种子中幼嫩完整的种胚。
(3)幼胚的诱导培养:将无菌剥取的幼嫩种胚接入诱导生长培养基MS+2.0mg/L 6-BA+ 0.2mg/L NAA,暗培养20天,再进行1000 Lux弱光培养20天,幼胚膨大形成细胞团块。
(4)微块茎的诱导形成:将幼胚形成的细胞团块接入诱导分化培养基MS+6.0mg/L6-BA+ 0.2mg/L NAA,常规光照培养45天,细胞团块表面形成许多凸起的小芽点,继续光照培养45天,诱导形成微块茎;
(5)微块茎的扩繁增殖;将微块茎进行切割分块,接入诱导分化培养基MS+4.0mg/L6-BA+ 0.2mg/L NAA培养60天,小块的微球茎生长膨大成为大块的微块茎,重复前面的切割分块培、扩繁增殖、循环培养,形成大量的微块茎。
(6)微块茎的直接移栽培养成苗:将扩繁增殖产生的大量微块茎,取出清洗,去除叶片,分割为小块,每个小块3个芽点,晾干切口,直接播种移栽到苗床或繁殖地培养,常规管理,生长成苗。
微块茎直接移栽,生长成苗,成活率高达100%,且成苗的质量优于常规品种培育的。省去了常规组培的生根壮苗、炼苗驯化过程,既节约生产成本,又提高育苗效率。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰,皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (1)
1.一种多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法,其特征在于,包含如下具体步骤:
(1)多花黄精优良单株的选择:选择生长健壮、抗病性强、根茎大、品质好的优良农艺性状的多花黄精单株,观察其开花结果情况,在果实成熟前1-2个月,采收优良单株未成熟的果实;
(2)未成熟种子幼胚的剥取:将多花黄精优良单株未成熟果实,按照常规组培外植 体消毒程序进行消毒处理,在无菌的环境中,打开果实,取出种子,剥取种子中幼嫩完整的种胚;
(3)幼胚的诱导培养:将无菌剥取的幼嫩种胚接入诱导生长培养基MS+2.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA,暗培养15-20天,再进行1000 Lux弱光培养15-20天,幼胚膨大形成细胞团块;
(4)微块茎的诱导形成:将幼胚形成的细胞团块接入诱导分化培养基MS+6.0mg/L 6-BA+ 0.2mg/L NAA,常规光照培养30-45天,细胞团块表面形成许多凸起的小芽点,继续光照培养30-45天,诱导形成微块茎;
(5)微块茎的扩繁增殖;将微块茎进行切割分块,接入诱导分化培养基MS+4.0mg/L 6-BA+ 0.2mg/L NAA培养45-60天,小块的微球茎生长膨大成为大块的微块茎,重复前面的切割分块、扩繁增殖、循环培养,形成大量的微块茎;
(6)微块茎的直接移栽培养成苗:将扩繁增殖产生的大量微块茎,取出清洗,去除叶片,分割为小块,每个小块1-3个芽点,晾干切口,直接播种移栽到苗床或繁殖地培养,常规管理,生长成苗。
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