CN111892503B

CN111892503B - 一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法

Info

Publication number: CN111892503B
Application number: CN202010799074.1A
Authority: CN
Inventors: 吴磊; 曹明源; 胡居吾; 熊伟; 吴静; 谢传奇
Original assignee: Institute of Applied Chemistry Jiangxi Academy of Sciences
Current assignee: Institute of Applied Chemistry Jiangxi Academy of Sciences
Priority date: 2020-08-11
Filing date: 2020-08-11
Publication date: 2023-01-24
Anticipated expiration: 2040-08-11
Also published as: CN111892503A

Abstract

本发明公开一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法，主要包括以下步骤：（1）平卧菊三七花经过干燥，粉碎过80目筛，加醇溶液搅拌提取，得到平卧菊三七花的醇提取液；（2）醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入水溶液继续减压浓缩至干，得到蔓三七花的膏状物；（3）双相溶剂的制备；（4）将所配双相溶剂加入到膏状物中，充分震荡，收集上相和下相，经减压浓缩、干燥后得到高纯度的绿原酸；（5）利用高效液相色谱检测得到绿原酸的纯度。本发明制备过程不使用任何色谱柱层析，有机膜以及脱色产品，大大节省时间，所得到的绿原酸得率、纯度高，整个工艺操作简单适合大规模生产。

Description

一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法

技术领域

本发明属于植物有效活性成分提取技术领域，尤其是涉及一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法。

背景技术

平卧菊三七（Gynura procumbens（Lour.）Merr.）为菊科，三七属植物，又蛇接骨、续命草、神仙草，味辛、微苦、性凉，为多年生草本药食两用植物，广泛分布在中国、马来西亚、泰国、印度尼西亚、韩国和菲律宾等国家。平卧菊三七具有广泛的药理作用，2009年上半年，中国疾病预防控制中心、国家食品质量监督检验中心、中国食品发酵工业研究院等有关单位完成了平卧菊三七毒理学检验、卫生学检验和多种成分的检验，结论是：无毒、无致畸影响；其有效成份具有通经活络，消炎止咳，散淤消肿，活血生肌，治疗跌打损伤，支气管肺炎、肺结核等功效；能延缓衰老、激活免疫细胞、改善机体免疫功能、提高人体免疫力，增强人体的新陈代谢并对记忆障碍有一定改善作用；具有降血压、降血脂、降血糖、抗氧化、抗溃疡和预防慢性肾病、抑制乙型肝炎的显著效果；对预防和治疗心脑血管疾病、糖尿病等有一定的疗效；还具有抗病毒、抗菌活性、抑制骨髓癌和志贺样毒素细胞的活性。另一方面，平卧菊三七是一种药食兼可的独特植物，具有极好的营养价值，因此，广泛利用于食品医药工业、日用化工工业等领域，是一种极具潜力和高经济价值的药食两用植物。

目前，提取制备绿原酸多以金银花、杜仲以及咖啡豆为原料，上述原料相比于平卧菊三七花具有来源有限、制取成本高等缺点。用平卧菊三七花代替上述材料，提取高纯度绿原酸具有很高的经济价值和社会意义。另一方面，提取绿原酸的方法大多采用柱色谱、膜分离技术、脱色等技术来获得高纯度的绿原酸，提取步骤繁琐，虽然能够得到较高纯度的绿原酸，但是这些方法不适用于工业化大规模生产，即使能够生产，成本相对较高。

针对于此，本发明针对平卧菊三七这一植物，利用醇水作为提取溶媒，采用双相溶剂溶解，制备高纯度绿原酸。

发明内容

鉴于现有技术中制备高纯度绿原酸的方法只能采用柱色谱、膜分离技术、脱色技术等工艺现状。针对平卧菊三七这一植物，本发明提供一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法，平卧菊三七花经过干燥粉碎后，利用醇水作为提取溶媒，采用双相溶剂溶解，制备高纯度绿原酸。

为实现上述目的，本发明所采取的技术方案为；一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法，主要包括以下步骤：

（1）平卧菊三七花经过干燥，粉碎过80目筛，加醇溶液搅拌提取，得到平卧菊三七花的醇提取液；

（2）醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入一定量水溶液继续减压浓缩至干，得到蔓三七花的膏状物；

（3）双相溶剂的制备；

（4）将所配双相溶剂按照一定的比例加入到膏状物中，充分震荡，收集上相和下相，经减压浓缩、干燥后得到高纯度的绿原酸；

（5）利用高效液相色谱检测得到绿原酸的纯度。。

更特别的是，步骤（1）中，提取溶媒为甲醇或者乙醇，醇水比列为1:9-9:1（L/L），料液比为1:10-1:30（kg/L），提取时间为1-5h，提取次数为1-3次，提取温度为30-70℃，搅拌速度为：100-500r/min。

更特别的是，步骤（2）中，加入水的量为醇提取液的1/5-1/20。

更特别的是，步骤（3）中，双相溶剂为正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、石油醚、异丙醇、乙酸乙酯、正丁醇、水、乙腈、甲醇、甲酸、丙酮、1-丙醇、异丁醇、正戊烷、1-戊醇、2-戊醇与乙酸中的至少2种并且能达到分层的目的。

更特别的是，步骤（3）中，双相溶剂的比例为上相与下相的比例为1:1-1:10。

更特别的是，步骤（4）中，双相溶剂与膏状物的比例为20:1-10:1（L/kg）。

由于采用如上所述的技术方案，本发明具有如下优越性：

本发明以平卧菊三七花为原料进行绿原酸的制备，这与之前报道的以金银花、杜仲以及咖啡豆为原料不同，上述原料相比于平卧菊三七花具有来源有限、制取成本高等缺点。用平卧菊三七花代替上述材料，提取高纯度绿原酸具有很高的经济价值和社会意义。本发明的另外一个优点是通过双相溶剂的选择，得到合适的双相溶剂系统，提取物中的成分会在双相溶剂中分配系数的不同溶解在系统的上相和下相，从而可以制备高纯度高得率的绿原酸。本发明不使用任何柱色谱、膜分离技术、脱色技术等工艺，大大节省时间，所得到的绿原酸得率、纯度高，整个工艺操作简单适合大规模生产。

附图说明

图1是本发明蔓三七花的醇提取液液相色谱图。

图2是本发明制备绿原酸的液相色谱图。

图3是实施例1的上相和下相液相色谱图。

图4是实施例2的上相和下相液相色谱图。

图5是实施例3的上相和下相液相色谱图。

图6是实施例4的上相和下相液相色谱图。

图7是实施例5的上相和下相液相色谱图。

具体实施方式

参照以下实施例可以对本发明作进一步详细说明；但是，以下实施例仅仅是例证，本发明并不局限于这些实施例。

一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法，包括以下步骤：

平卧菊三七花经过干燥，粉碎过80目筛，提取溶媒为甲醇或者乙醇，醇水比列为1:9-9:1（L/L），料液比为1:10-1:30（kg/L），提取时间为1-5h，提取次数为1-3次，提取温度为30-70℃，搅拌速度为：100-500r/min,得到平卧菊三七花的醇提取液；醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入水的量为醇提液的1/5-1/20继续减压浓缩至干，得到蔓三七花的膏状物；双相溶剂为正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、石油醚、异丙醇、乙酸乙酯、正丁醇、水、乙腈、甲醇、甲酸、丙酮、1-丙醇、异丁醇、正戊烷、1-戊醇、2-戊醇与乙酸中的至少2种并且能达到分层的目的。双相溶剂的比例为上相与下相的比例为1:1-1:10。将所配双相溶剂按照一定的比例加入到膏状物中，双相溶剂与膏状物的比例为20:1-10:1（L/kg），充分震荡，收集上相和下相，经减压浓缩、干燥后得到高纯度的绿原酸；利用高效液相色谱检测得到绿原酸的纯度。本发明绿原酸得率为2～6%，所得绿原酸纯度达到99.24%。

实施例1

平卧菊三七花100g经过干燥，粉碎过80目筛，提取溶媒为甲醇，醇水比列为1:9（L/L），料液比为1:10，提取时间为1h，提取次数为1次，提取温度为50℃，搅拌速度为：100r/min。得到平卧菊三七花的醇提取液；醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入水的量为醇提液的1/5继续减压浓缩至干，得到蔓三七花的膏状物；双相溶剂为正己烷、二氯甲烷、水、甲醇。双相溶剂的比例为上相与下相的比例为1:1。将所配双相溶剂按照一定的比例加入到膏状物中，双相溶剂与膏状物的比例为20:1（L/kg），充分震荡，收集上相和下相，经减压浓缩、干燥后得到高纯度的绿原酸；利用高效液相色谱检测得到绿原酸的纯度为72.35%。本发明绿原酸得率为3.54%。

实施例2

平卧菊三七花100g经过干燥，粉碎过80目筛，提取溶媒为甲醇，醇水比列为3:7（L/L），料液比为1:15，提取时间为2h，提取次数为2次，提取温度为40℃，搅拌速度为：500r/min。得到平卧菊三七花的醇提取液；醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入水的量为醇提液的1/5继续减压浓缩至干，得到蔓三七花的膏状物；双相溶剂为正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、水和甲醇。双相溶剂的比例为上相与下相的比例为3:1。将所配双相溶剂按照一定的比例加入到膏状物中，双相溶剂与膏状物的比例为15:1（L/kg），充分震荡，收集上相和下相，经减压浓缩、干燥后得到高纯度的绿原酸；利用高效液相色谱检测得到绿原酸的纯度为51.27%。本发明绿原酸得率为3.08%。

实施例3

平卧菊三七花100g经过干燥，粉碎过80目筛，提取溶媒为甲醇，醇水比列为6:4（L/L），料液比为1:20，提取时间为2h，提取次数为2次，提取温度为50℃，搅拌速度为：300r/min。得到平卧菊三七花的醇提取液；醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入水的量为醇提液的1/5继续减压浓缩至干，得到蔓三七花的膏状物；双相溶剂为正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、水和甲醇。双相溶剂的比例为上相与下相的比例为3:2。将所配双相溶剂按照一定的比例加入到膏状物中，双相溶剂与膏状物的比例为20:1（L/kg），充分震荡，收集上相和下相，经减压浓缩、干燥后得到高纯度的绿原酸；利用高效液相色谱检测得到绿原酸的纯度为99.24%。本发明绿原酸得率为4.86%。

实施例4

平卧菊三七花100g经过干燥，粉碎过80目筛，提取溶媒为甲醇，醇水比列为7:3（L/L），料液比为1:20，提取时间为1h，提取次数为1次，提取温度为70℃，搅拌速度为：200r/min。得到平卧菊三七花的醇提取液；醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入水的量为醇提液的1/5继续减压浓缩至干，得到蔓三七花的膏状物；双相溶剂为正己烷、异丁醇、正戊烷、水、甲醇。双相溶剂的比例为上相与下相的比例为4:3。将所配双相溶剂按照一定的比例加入到膏状物中，双相溶剂与膏状物的比例为15:1（L/kg），充分震荡，收集上相和下相，经减压浓缩、干燥后得到高纯度的绿原酸；利用高效液相色谱检测得到绿原酸的纯度为37.59%。本发明绿原酸得率为2.12%。

实施例5

平卧菊三七花100g经过干燥，粉碎过80目筛，提取溶媒为甲醇，醇水比列为8:2（L/L），料液比为1:20，提取时间为1.5h，提取次数为1次，提取温度为40℃，搅拌速度为：100r/min。得到平卧菊三七花的醇提取液；醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入水的量为醇提液的1/5继续减压浓缩至干，得到蔓三七花的膏状物；双相溶剂为正己烷、水、甲醇。双相溶剂的比例为上相与下相的比例为5:4。将所配双相溶剂按照一定的比例加入到膏状物中，双相溶剂与膏状物的比例为20:1（L/kg），充分震荡，收集上相和下相，经减压浓缩、干燥后得到高纯度的绿原酸；利用高效液相色谱检测得到绿原酸的纯度为43.57%。本发明绿原酸得率为2.41%。

对比例

平卧菊三七花100g经过干燥，粉碎过80目筛，提取溶媒为甲醇，醇水比列为8:2（L/L），料液比为1:20，提取时间为1.5h，提取次数为1次，提取温度为40℃，搅拌速度为：100r/min。得到平卧菊三七花的醇提取液；醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入水的量为醇提液的1/5继续减压浓缩至干，得到蔓三七花的膏状物；溶剂为单相溶剂正己烷、二氯甲烷、三氯甲烷、石油醚、异丙醇、乙酸乙酯、正丁醇、水、乙腈、甲醇、甲酸、丙酮、1-丙醇、异丁醇、正戊烷、1-戊醇、2-戊醇与乙酸的其中一种时，无法得到有效的实验结果。

单相溶剂对浸膏进行溶解时，只是单纯的溶解，并没有产生物质分配，达不到绿原酸的纯化。通过双相溶剂的选择，得到合适的双相溶剂系统，提取物中的成分会在双相溶剂中分配系数的不同溶解在系统的上相和下相，从而可以制备高纯度高得率的绿原酸。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法，其特征是：主要包括以下步骤：

（2）醇提取液经过减压浓缩至无醇味，加入水溶液继续减压浓缩至干，得到平卧菊三七花的膏状物；

（3）双相溶剂的制备；

（4）将所配双相溶剂加入到膏状物中，充分震荡，收集上相和下相，经减压浓缩、干燥后得到高纯度的绿原酸，双相溶剂为正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、水和甲醇；

（5）利用高效液相色谱检测得到绿原酸的纯度。

2.根据权利要求1所述的一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法，其特征是：步骤（1）中提取溶媒为甲醇或者乙醇，醇水比例为1:9-9:1L/L，料液比为1:10-1:30kg/L，提取时间为1-5h，提取次数为1-3次，提取温度为30-70℃，搅拌速度为：100-500r/min。

3.根据权利要求1所述的一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法，其特征是：步骤（2）中，加入水的量为醇提取液的1/5-1/20。

4.根据权利要求1所述的一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法，其特征是：步骤（3）中，双相溶剂的比例为上相与下相的比例为3:2。

5.根据权利要求1所述的一种从平卧菊三七花中快速制备高纯度绿原酸的方法，其特征是：步骤（4）中，双相溶剂与膏状物的比例为20:1 L/kg。