CN111388608A - 一种凤尾竹提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种凤尾竹提取物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明适用于植物提取及医药技术领域，提供了一种凤尾竹提取物及其制备方法和应用，该凤尾竹提取物的制备方法包括以下步骤：以凤尾竹叶作为原料，并对所述凤尾竹叶进行提取，得到凤尾竹叶提取液；往所述凤尾竹叶提取液中添加酸，使所述凤尾竹叶提取液中氢离子的终浓度达到0.25～2mol/L后，再进行酸水解反应，得到水解产物；将所述水解产物进行萃取分离，得到所述凤尾竹提取物。本发明通过往凤尾竹叶提取液中加入盐酸或硫酸进行酸水解反应，可以使凤尾竹提取物中其他竹叶黄酮等成分的含量降低，以及可以提高凤尾竹提取物中的异荭草苷和牡荆苷的含量，进而为异荭草苷和牡荆苷单体的纯化带来便利。

Description

一种凤尾竹提取物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于植物提取及医药技术领域，尤其涉及一种凤尾竹提取物及其制备方法和应用。
背景技术
竹叶黄酮是常用的食品抗氧化剂和新食品资源。其中，竹叶黄酮中主要的功能成分为异荭草苷和牡荆苷等碳苷黄酮，研究表明异荭草苷和牡荆苷有抗氧化、保护心脑血管、降血糖、保肝护肝等多种药理作用，是相关药物研发的潜在原料。
凤尾竹(Bambusa multiplex cv.Fernleaf)是竹子的一种，在我国南方地区有栽培。经研究发现凤尾竹叶中含有较丰富的异荭草苷和牡荆苷，其含量要高于毛竹叶，故凤尾竹是制备异荭草苷和牡荆苷的潜在原料。但凤尾竹叶中也含有许多其他碳苷黄酮成分，故其给异荭草苷和牡荆苷的分离纯化带来困难。
另外，传统竹叶有效成分的提取方法存在提取效果较差的问题，利用传统方法提取得到的凤尾竹提取物中异荭草苷和牡荆苷的含量较低，故不便于异荭草苷和牡荆苷单体的纯化。
发明内容
本发明实施例的目的在于提供一种凤尾竹提取物的制备方法，旨在解决背景技术中提出的问题。
本发明实施例是这样实现的，一种凤尾竹提取物的制备方法，包括以下步骤：
以凤尾竹叶作为原料，并对所述凤尾竹叶进行提取，得到凤尾竹叶提取液；
往所述凤尾竹叶提取液中添加酸，使所述凤尾竹叶提取液中氢离子的终浓度达到0.25～2mol/L后，再进行酸水解反应，得到水解产物；
将所述水解产物进行萃取分离，得到所述凤尾竹提取物。
作为本发明实施例的一种优选方案，所述酸水解反应的温度为60～90℃，时间为30～60min。
作为本发明实施例的另一种优选方案，所述酸为盐酸和/或硫酸。
作为本发明实施例的另一种优选方案，所述对所述凤尾竹叶进行提取，得到凤尾竹叶提取液的步骤，具体包括：
将凤尾竹叶烘干后，再经粉碎，得到凤尾竹叶粉末；
将凤尾竹叶粉末与乙醇溶液进行混合后，再经超声提取，并经抽滤后得到粗提取液；
将所述粗提取液进行真空浓缩，得到浓缩液；
利用大孔树脂对所述浓缩液进行吸附处理后，再经乙醇洗脱，得到洗脱液；
将所述洗脱液进行真空浓缩，得到凤尾竹叶提取液。
作为本发明实施例的另一种优选方案，所述将所述水解产物进行萃取分离，得到所述凤尾竹提取物的步骤，具体包括：
将所述水解产物置于0～10℃的温度下进行静置后，再去除沉淀，得到澄清液；
利用有机溶剂对所述澄清液进行萃取，得到萃取液；
将所述萃取液置于50～70℃的温度下进行减压浓缩至干，得到所述凤尾竹提取物。
作为本发明实施例的另一种优选方案，所述有机溶剂为乙酸乙酯。
本发明实施例的另一目的在于提供一种采用上述制备方法制得的凤尾竹提取物。
作为本发明实施例的另一种优选方案，所述凤尾竹提取物中异荭草苷的质量含量为10％～12％，牡荆苷的质量含量为6％～8％。
本发明实施例的另一目的在于提供一种如上述的凤尾竹提取物在制备异荭草苷和/或牡荆苷中的应用。具体的，可以通过树脂吸附、萃取、重结晶、硅胶柱层析、半制备色谱、高速逆流色谱等常规分离纯化方法从上述凤尾竹提取物分分离出异荭草苷和牡荆苷单体。
本发明实施例的另一目的在于提供一种上述凤尾竹提取物在制备含有异荭草苷和/或牡荆苷的药物中的应用。
本发明实施例提供的一种凤尾竹提取物的制备方法，通过往凤尾竹叶提取液中加入盐酸或硫酸进行酸水解反应，可以使凤尾竹提取物中其他竹叶黄酮等成分的含量降低，以及可以提高凤尾竹提取物中的异荭草苷和牡荆苷的含量，进而为异荭草苷和牡荆苷单体的纯化带来便利。
附图说明
图1为本发明实施例1制得的凤尾竹提取物以及对比例1制得的凤尾竹提取物的高效液相液色谱图(图中：2号峰为异荭草苷；4号峰为牡荆苷；a为对比例1制得的凤尾竹提取物的高效液相液色谱图；b为实施例1制得的凤尾竹提取物的高效液相液色谱图)。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
该实施例提供了一种凤尾竹提取物的制备方法，其包括以下步骤：
S1、首先，将凤尾竹叶烘干后，再经粉碎，并过40目筛，得到凤尾竹叶粉末；接着，将100g凤尾竹叶粉末与1L的50％乙醇溶液进行混合后，再经频率为40kHz的超声波进行超声提取30min，并经抽滤，以及将滤渣重复提取一次，合并提取液，得到粗提取液。
S2、将上述粗提取液置于50℃的温度下进行真空浓缩，回收乙醇，得到1L的浓缩液。
S3、将上述浓缩液流过H103大孔树脂床(柱床体积为90mL，柱床高度为50cm)进行吸附操作；接着，用4倍柱床体积的80％乙醇进行洗脱操作，收集洗脱液；然后，将洗脱液置于50℃的温度下进行真空浓缩，回收乙醇，得到80mL的凤尾竹叶提取液。
S4、往上述凤尾竹叶提取液中添加盐酸，使上述凤尾竹叶提取液中氢离子的终浓度达到0.75mol/L后，再置于80℃的水浴中进行酸水解反应60min，得到水解产物。
S5、将上述水解产物置于4℃的冰箱中进行静置12h后，再去除沉淀(黑色)，得到澄清液；接着，利用等体积的乙酸乙酯对澄清液进行重复萃取三次，合并乙酸乙酯层，得到萃取液；然后，将上述萃取液置于60℃的温度下进行减压浓缩至干，即可得到凤尾竹提取物。
实施例2
该实施例提供了一种凤尾竹提取物的制备方法，其包括以下步骤：
S1、首先，将凤尾竹叶烘干后，再经粉碎，并过40目筛，得到凤尾竹叶粉末；接着，将100g凤尾竹叶粉末与1L的50％乙醇溶液进行混合后，再经频率为50kHz的超声波进行超声提取30min，并经抽滤，以及将滤渣重复提取一次，合并提取液，得到粗提取液。
S2、将上述粗提取液置于40℃的温度下进行真空浓缩，回收乙醇，得到1L的浓缩液。
S3、将上述浓缩液流过H103大孔树脂床(柱床体积为90mL，柱床高度为50cm)进行吸附操作；接着，用4倍柱床体积的80％乙醇进行洗脱操作，收集洗脱液；然后，将洗脱液置于60℃的温度下进行真空浓缩，回收乙醇，得到80mL的凤尾竹叶提取液。
S4、往上述凤尾竹叶提取液中添加硫酸，使上述凤尾竹叶提取液中氢离子的终浓度达到0.25mol/L后，再置于90℃的水浴中进行酸水解反应30min，得到水解产物。
S5、将上述水解产物置于0℃的冰箱中进行静置12h后，再去除沉淀(黑色)，得到澄清液；接着，利用等体积的乙酸乙酯对澄清液进行重复萃取三次，合并乙酸乙酯层，得到萃取液；然后，将上述萃取液置于50℃的温度下进行减压浓缩至干，即可得到凤尾竹提取物。
实施例3
该实施例提供了一种凤尾竹提取物的制备方法，其包括以下步骤：
S1、首先，将凤尾竹叶烘干后，再经粉碎，并过40目筛，得到凤尾竹叶粉末；接着，将100g凤尾竹叶粉末与1L的50％乙醇溶液进行混合后，再经频率为30kHz的超声波进行超声提取30min，并经抽滤，以及将滤渣重复提取一次，合并提取液，得到粗提取液。
S2、将上述粗提取液置于60℃的温度下进行真空浓缩，回收乙醇，得到1L的浓缩液。
S3、将上述浓缩液流过H103大孔树脂床(柱床体积为90mL，柱床高度为50cm)进行吸附操作；接着，用4倍柱床体积的80％乙醇进行洗脱操作，收集洗脱液；然后，将洗脱液置于60℃的温度下进行真空浓缩，回收乙醇，得到80mL的凤尾竹叶提取液。
S4、往上述凤尾竹叶提取液中添加盐酸和硫酸，使上述凤尾竹叶提取液中氢离子的终浓度达到2mol/L后，再置于60℃的水浴中进行酸水解反应40min，得到水解产物。
S5、将上述水解产物置于10℃的冰箱中进行静置12h后，再去除沉淀(黑色)，得到澄清液；接着，利用等体积的乙酸乙酯对澄清液进行重复萃取三次，合并乙酸乙酯层，得到萃取液；然后，将上述萃取液置于70℃的温度下进行减压浓缩至干，即可得到凤尾竹提取物。
实施例4
该实施例提供了一种凤尾竹提取物的制备方法，其包括以下步骤：
S1、首先，将凤尾竹叶烘干后，再经粉碎，并过40目筛，得到凤尾竹叶粉末；接着，将100g凤尾竹叶粉末与1L的50％乙醇溶液进行混合后，再经频率为40kHz的超声波进行超声提取30min，并经抽滤，以及将滤渣重复提取一次，合并提取液，得到粗提取液。
S2、将上述粗提取液置于40～60℃的温度下进行真空浓缩，回收乙醇，得到凤尾竹叶提取液。
S3、往上述凤尾竹叶提取液中添加盐酸，使上述凤尾竹叶提取液中氢离子的终浓度达到1mol/L后，再置于70℃的水浴中进行酸水解反应60min，得到水解产物。
S4、将上述水解产物置于5℃的冰箱中进行静置12h后，再去除沉淀(黑色)，得到澄清液；接着，利用等体积的乙酸乙酯对澄清液进行重复萃取三次，合并乙酸乙酯层，得到萃取液；然后，将上述萃取液置于60℃的温度下进行减压浓缩至干，即可得到凤尾竹提取物。
对比例1
该对比例提供了一种凤尾竹提取物的制备方法，其包括以下步骤：
S1、首先，将凤尾竹叶烘干后，再经粉碎，并过40目筛，得到凤尾竹叶粉末；接着，将100g凤尾竹叶粉末与1L的50％乙醇溶液进行混合后，再经频率为40kHz的超声波进行超声提取30min，并经抽滤，以及将滤渣重复提取一次，合并提取液，得到粗提取液。
S2、将上述粗提取液置于40～60℃的温度下进行真空浓缩，回收乙醇，得到1L的浓缩液。
S3、将上述浓缩液流过H103大孔树脂床(柱床体积为90mL，柱床高度为50cm)进行吸附操作；接着，用4倍柱床体积的80％乙醇进行洗脱操作，收集洗脱液；然后，将洗脱液置于40～60℃的温度下进行真空浓缩，回收乙醇，得到80mL的凤尾竹叶提取液。
S4、利用等体积的乙酸乙酯对上述凤尾竹叶提取液进行重复萃取三次，合并乙酸乙酯层，得到萃取液；然后，将上述萃取液置于60℃的温度下进行减压浓缩至干，即可得到凤尾竹提取物。
在相同的实验条件下，将上述实施例1和对比例1制得的凤尾竹提取物分别进行高效液相(HPLC)分析，其得到的高效液相色谱图如附图1所示。其中，图1中的2号峰为异荭草苷，4号峰为牡荆苷，1、3号峰为其他竹叶黄酮成分；另外，图1中的b为实施例1制得的凤尾竹提取物的高效液相液色谱图；a为对比例1制得的凤尾竹提取物的高效液相液色谱图；从图中可以看出，相比于对比例1，本发明实施例1制得的凤尾竹提取物中1、3号峰基本消失，2，4号峰的面积增大。另外，经计算，上述实施例1和对比例1制得的凤尾竹提取物中的异荭草苷和牡荆苷的质量含量如下表1所示。
其中，HPLC分析使用市售的安捷伦(Agilent)1260HPLC系统，配自动进样器和DAD检测器，色谱柱为市售的沃特世(Waters)Symmetry C18柱(250mm×4.6mm i.d.，5μm)；流动相为乙腈(A)及0.1％醋酸水溶液(B)；线性梯度程序为0～30min，1％～40％A；流速为1mL/min，柱温为40℃，进样量10μL。
表1
凤尾竹提取物 异荭草苷含量(％) 牡荆苷含量(％)
实施例1 11.2 7.1
对比例1 6.3 4.1
从上表1可以看出，本发明实施例通过往凤尾竹叶提取液中加入盐酸或硫酸进行酸水解反应，可以使凤尾竹提取物中其他竹叶黄酮等成分的含量降低，以及可以提高凤尾竹提取物中的异荭草苷和牡荆苷的含量。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种凤尾竹提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
以凤尾竹叶作为原料，并对所述凤尾竹叶进行提取，得到凤尾竹叶提取液；
往所述凤尾竹叶提取液中添加酸，使所述凤尾竹叶提取液中氢离子的终浓度达到0.25～2mol/L后，再进行酸水解反应，得到水解产物；
将所述水解产物进行萃取分离，得到所述凤尾竹提取物。
2.根据权利要求1所述的一种凤尾竹提取物的制备方法，其特征在于，所述酸水解反应的温度为60～90℃，时间为30～60min。
3.根据权利要求1所述的一种凤尾竹提取物的制备方法，其特征在于，所述酸为盐酸和/或硫酸。
4.根据权利要求1所述的一种凤尾竹提取物的制备方法，其特征在于，所述对所述凤尾竹叶进行提取，得到凤尾竹叶提取液的步骤，具体包括：
将凤尾竹叶烘干后，再经粉碎，得到凤尾竹叶粉末；
将凤尾竹叶粉末与乙醇溶液进行混合后，再经超声提取，并经抽滤后得到粗提取液；
将所述粗提取液进行真空浓缩，得到浓缩液；
利用大孔树脂对所述浓缩液进行吸附处理后，再经乙醇洗脱，得到洗脱液；
将所述洗脱液进行真空浓缩，得到凤尾竹叶提取液。
5.根据权利要求1所述的一种凤尾竹提取物的制备方法，其特征在于，所述将所述水解产物进行萃取分离，得到所述凤尾竹提取物的步骤，具体包括：
将所述水解产物置于0～10℃的温度下进行静置后，再去除沉淀，得到澄清液；
利用有机溶剂对所述澄清液进行萃取，得到萃取液；
将所述萃取液置于50～70℃的温度下进行减压浓缩至干，得到所述凤尾竹提取物。
6.根据权利要求5所述的一种凤尾竹提取物的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙酸乙酯。
7.一种如权利要求1～6中任一项所述制备方法制得的凤尾竹提取物。
8.根据权利要求7所述的一种凤尾竹提取物，其特征在于，所述凤尾竹提取物中异荭草苷的质量含量为10％～12％，牡荆苷的质量含量为6％～8％。
9.一种如权利要求7或8所述的凤尾竹提取物在制备异荭草苷和/或牡荆苷中的应用。
10.一种如权利要求7或8所述的凤尾竹提取物在制备含有异荭草苷和/或牡荆苷的药物中的应用。
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