CN109797177A - 一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法 - Google Patents
一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN109797177A CN109797177A CN201910048775.9A CN201910048775A CN109797177A CN 109797177 A CN109797177 A CN 109797177A CN 201910048775 A CN201910048775 A CN 201910048775A CN 109797177 A CN109797177 A CN 109797177A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- phillygenol
- folium forsythia
- water
- prepared
- forsythia
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000555712 Forsythia Species 0.000 title claims abstract description 77
- CPJKKWDCUOOTEW-YJPXFSGGSA-N 4-[(3s,3ar,6r,6ar)-6-(3,4-dimethoxyphenyl)-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrofuro[3,4-c]furan-3-yl]-2-methoxyphenol Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1[C@H]1[C@@H](CO[C@@H]2C=3C=C(OC)C(O)=CC=3)[C@@H]2CO1 CPJKKWDCUOOTEW-YJPXFSGGSA-N 0.000 title claims abstract description 76
- CPJKKWDCUOOTEW-UHFFFAOYSA-N sylvatesmin Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1C(COC2C=3C=C(OC)C(O)=CC=3)C2CO1 CPJKKWDCUOOTEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 76
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 39
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 31
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 28
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 28
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims abstract description 26
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 17
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 17
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims abstract description 8
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 24
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 7
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 3
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 2
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 2
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 abstract 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 abstract 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 abstract 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 7
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000011160 research Methods 0.000 description 5
- KFFCKOBAHMGTMW-LGQRSHAYSA-N Forsythin Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1[C@H]1[C@@H](CO[C@@H]2C=3C=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)=CC=3)[C@@H]2CO1 KFFCKOBAHMGTMW-LGQRSHAYSA-N 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 241000576429 Forsythia suspensa Species 0.000 description 2
- 241000207834 Oleaceae Species 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000002612 cardiopulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- RSWGJHLUYNHPMX-UHFFFAOYSA-N Abietic-Saeure Natural products C12CCC(C(C)C)=CC2=CCC2C1(C)CCCC2(C)C(O)=O RSWGJHLUYNHPMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- DTOUWTJYUCZJQD-UJERWXFOSA-N Forsythiaside Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](OC(=O)\C=C\C=2C=C(O)C(O)=CC=2)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OCCC=2C=C(O)C(O)=CC=2)O1 DTOUWTJYUCZJQD-UJERWXFOSA-N 0.000 description 1
- KHPCPRHQVVSZAH-HUOMCSJISA-N Rosin Natural products O(C/C=C/c1ccccc1)[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 KHPCPRHQVVSZAH-HUOMCSJISA-N 0.000 description 1
- 206010044565 Tremor Diseases 0.000 description 1
- GKRBWXABVALDGQ-GCELSKRESA-N [(2r,3r,4s,5r,6r)-2-[2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]-3,5-dihydroxy-6-[[(2r,3r,4r,5r,6s)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxymethyl]oxan-4-yl] (e)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)prop-2-enoate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)\C=C\C=2C=C(O)C(O)=CC=2)[C@@H](O)[C@H](OCCC=2C=C(O)C(O)=CC=2)O1 GKRBWXABVALDGQ-GCELSKRESA-N 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002929 anti-fatigue Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 1
- 239000002221 antipyretic Substances 0.000 description 1
- 208000002399 aphthous stomatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 239000010977 jade Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 1
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 1
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N teicoplanin aglycone Chemical compound N([C@H](C(N[C@@H](C1=CC(O)=CC(O)=C1C=1C(O)=CC=C2C=1)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)OC=1C=C3C=C(C=1O)OC1=CC=C(C=C1Cl)C[C@H](C(=O)N1)NC([C@H](N)C=4C=C(O5)C(O)=CC=4)=O)C(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3NC(=O)[C@@H]1C1=CC5=CC(O)=C1 DKVBOUDTNWVDEP-NJCHZNEYSA-N 0.000 description 1
- KHPCPRHQVVSZAH-UHFFFAOYSA-N trans-cinnamyl beta-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC=CC1=CC=CC=C1 KHPCPRHQVVSZAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Abstract
本发明提供了一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法,包括如下步骤：1)将连翘叶粉碎，过40目筛，喷洒适量水至连翘叶粗粉含水量为30％‑60％，控制温度为25～50℃，保温发酵1～3h后烘干；2)将上述连翘叶发酵产物用含醇溶剂提取、减压浓缩、冷藏静置、过滤、水洗涤沉淀、干燥沉淀得连翘脂素含量为30％以上的粗产物；3)将粗产物用非极性或弱极性大孔吸附树脂柱进行纯化，先用10％～40％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，再用50％～80％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，收集50％～80％乙醇淋洗液，减压浓缩干燥，得连翘脂素含量为80％～85％的产物。本发明工艺简单，便于操作，对设备要求低，加工成本低，适用于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及天然植物提取物领域，具体是一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法。
背景技术
连翘叶为木犀科(Oleaceae)植物连翘[(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)]的干燥叶，是山西省、四川省地方习用药材，具有清热解毒作用，主要用于心烦尿赤，咽喉肿痛，口舌生疮等疾病的治疗。《玉樵医令》记载“连翘叶味苦、微辛、性寒、可泻火，寒能清热，入心肺二经”，《中华本草》记载“连翘茎叶，味苦，性寒，功能主治为：清热解毒，主治心肺积热”。现代研究表明，连翘叶含有连翘脂素、松脂素、连翘苷、芦丁、连翘酯苷I、连翘酯苷A等化学成分。药理学研究已证明连翘叶提取物具有抑菌、抗氧化、保肝、抗疲劳、降血脂、抗衰老等多种生物活性。
连翘脂素是连翘叶中含量较高的主要活性成分连翘苷的苷元，最早是ShizukaKitagawa(1984)等从连翘叶中提取分离出的木脂素类单体化合物。现代研究表明连翘脂素具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、保肝、降血脂等多种药理活性。连翘脂素虽具有多种药理活性，但因其在连翘叶、果实中的含量不高，因此，目前还没有成熟的转化方法而实现大规模开发利用。近年来，国内外对连翘脂素的制备方法研究已有一些研究，例如，利用微生物将连翘苷转化为连翘脂素、采用纤维素酶水解连翘苷制备连翘脂素，两种制备方法虽然工艺简单，但是需要大量的连翘苷单体，成本较高，很难实现工业化生产。此外，也有报道利用酸碱法处理连翘果实提取物制备连翘脂素的方法，但该方法存在较大环境污染问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法。
所述的连翘脂素制备方法，是以连翘叶为原料，经自然发酵、含醇水溶液提取、大孔树脂分离、结晶、重结晶获得。连翘脂素的含量可达到95％以上，连翘脂素具体制备方法，包括如下步骤：
(1)连翘叶发酵：取干燥连翘叶，粉碎，过40目筛，喷洒适量水至连翘叶粗粉含水量为30％～60％，控制温度为25～50℃，保温发酵1～3h后，烘干，得连翘叶发酵产物。
(2)连翘脂素粗产物制备：将上述连翘叶发酵产物用20倍(重量比)、醇浓度为70％～90％的含醇水溶液提取。提取液经减压浓缩、冷藏静置、过滤，收集沉淀用水洗涤1～3次、干燥，得连翘脂素含量为30～35％的粗产物。
(3)连翘脂素纯化：将连翘脂素粗产物用非极性或弱极性大孔吸附树脂柱进行纯化，首先用10％～40％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，再用50％～80％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，收集50％～80％乙醇淋洗液，减压浓缩、干燥，得连翘脂素含量为80％～85％的产物。
步骤(1)中所述的连翘叶粗粉含水量优选为50％；发酵温度优选为30℃；保温发酵时间优选为2h。
步骤(2)中所述的70％～90％的含醇水溶液，可为乙醇或甲醇水溶液的任意一种，优选80％乙醇水溶液；沉淀用水洗涤优选为2次。
步骤(3)中所述的非极性或弱极性大孔吸附树脂柱的材料，可为非极性大孔吸附树脂D101或弱极性大孔吸附树脂AB-8的任意一种；淋洗剂优选70％乙醇水溶液。
本发明的有益效果：
本发明从连翘叶中制备连翘脂素的方法，是以药用植物连翘非药用部位连翘叶为原料，经自然发酵、含醇水溶液提取、大孔树脂分离、结晶、重结晶获得连翘脂素。具有如下明显优点：
(1)以连翘叶为原料制备连翘脂素，使资源得到了充分利用。
(2)本发明以连翘叶为发酵底物，不添加任何添加剂，利用植物自身的酶将其他成分转化成连翘脂素，转化后连翘叶发酵产物中连翘脂素的含量比发酵前连翘叶中含量提高25倍以上。
(3)本发明制备条件温和，生产工艺简单、周期短、成本低。利用该工艺可获得不同纯度要求的连翘脂素。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐明本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明，而不用于限制本发明的保护范围。
实施例1
从连翘叶中制备连翘脂素的方法，包括以下步骤：
(1)连翘叶发酵：取干燥连翘叶，粉碎，过40目筛，喷洒水至连翘叶粗粉含水量为50％，控制温度为30℃，保温发酵2h后，烘干，得连翘叶发酵产物。经HPLC法测定：按上述方法发酵后，连翘叶发酵产物中连翘脂素含量为47.51mg/g，比未经发酵处理的连翘叶含量提高了28倍。
(2)连翘脂素粗产物制备：上述连翘叶发酵产物用20倍(重量比)、醇浓度为80％的乙醇水溶液提取。提取液经减压浓缩、冷藏静置、过滤，收集沉淀用水洗涤2次、干燥，得连翘脂素含量为35.0％的粗产物。
(3)连翘脂素纯化：连翘脂素粗产物用D101非极性大孔吸附树脂柱纯化，首先用30％乙醇水溶液淋洗3个柱体积，再用70％乙醇水溶液淋洗3个柱体积，收集70％乙醇淋洗液，减压浓缩、干燥，得连翘脂素含量为85.0％的产物。
实施例2
从连翘叶中制备连翘脂素的方法，包括以下步骤：
(1)连翘叶发酵：取干燥连翘叶，粉碎，过40目筛，喷洒水至连翘叶粗粉含水量为50％，控制温度为30℃，保温发酵2h后，烘干，得连翘叶发酵产物。经HPLC法测定：按上述方法发酵后，连翘叶发酵产物中连翘脂素含量为47.51mg/g，比未经发酵处理的连翘叶含量提高了28倍。
(2)连翘脂素粗产物制备：上述连翘叶发酵产物用20倍(重量比)、醇浓度为70％的甲醇水溶液提取。提取液经减压浓缩、冷藏静置、过滤，收集沉淀用水洗涤2次、干燥，得连翘脂素含量为34.2％的粗产物。
(3)连翘脂素纯化：连翘脂素粗产物用AB-8弱极性大孔吸附树脂柱纯化，首先用30％乙醇水溶液淋洗3个柱体积，再用70％乙醇水溶液淋洗3个柱体积，收集70％乙醇淋洗液，减压浓缩、干燥，得连翘脂素含量为84.6％的产物。
实施例3
从连翘叶中制备连翘脂素的方法，包括以下步骤：
(1)连翘叶发酵：取干燥连翘叶，粉碎，过40目筛，喷洒水至连翘叶粗粉含水量为30％，控制温度为25℃，保温发酵2h后，烘干，得连翘叶发酵产物。经HPLC法测定：按上述方法发酵后，连翘叶发酵产物中连翘脂素含量为31.40mg/g，比未经发酵处理的连翘叶含量提高了26.0倍。
(2)连翘脂素粗产物制备：上述连翘叶发酵产物用20倍(重量比)、醇浓度为70％的乙醇水溶液提取。提取液经减压浓缩、冷藏静置、过滤，收集沉淀用水洗涤1次、干燥，得连翘脂素含量为30％的粗产物。
(3)连翘脂素纯化：连翘脂素粗产物用D101非极性大孔吸附树脂柱纯化，首先用10％乙醇水溶液淋洗4个柱体积，再用70％乙醇水溶液淋洗3个柱体积，收集70％乙醇淋洗液，减压浓缩、干燥，得连翘脂素含量为83.5％的产物。
实施例4
从连翘叶中制备连翘脂素的方法，包括以下步骤：
(1)连翘叶发酵：取干燥连翘叶，粉碎，过40目筛，喷洒水至连翘叶粗粉含水量为60％，控制温度为50℃，保温发酵1h后，烘干，得连翘叶发酵产物。经HPLC法测定：按上述方法发酵后，连翘叶发酵产物中连翘脂素含量为31.42mg/g，比未经发酵处理的连翘叶含量提高了25.4倍。
(2)连翘脂素粗产物制备：上述连翘叶发酵产物用20倍(重量比)、醇浓度为90％的乙醇水溶液提取。提取液经减压浓缩、冷藏静置、过滤，收集沉淀用水洗涤3次、干燥，得连翘脂素含量为32.0％的粗产物。
(3)连翘脂素纯化：连翘脂素粗产物用D101非极性大孔吸附树脂柱纯化，首先用40％乙醇水溶液淋洗2个柱体积，再用80％乙醇水溶液淋洗2个柱体积，收集80％乙醇淋洗液，减压浓缩、干燥，得连翘脂素含量为80.6％的产物。
实施例5
从连翘叶中制备连翘脂素的方法，包括以下步骤：
(1)连翘叶发酵：取干燥连翘叶，粉碎，过40目筛，喷洒水至连翘叶粗粉含水量为50％，控制温度为30℃，保温发酵2h后，烘干，得连翘叶发酵产物。经HPLC法测定：按上述方法发酵后，连翘叶发酵产物中连翘脂素含量为43.60mg/g，比未经发酵处理的连翘叶含量提高了26.0倍。
(2)连翘脂素粗产物制备：上述连翘叶发酵产物用20倍(重量比)、醇浓度为80％的乙醇水溶液提取。提取液经减压浓缩、冷藏静置、过滤，收集沉淀用水洗涤2次、干燥，得连翘脂素含量为34.0％的粗产物。
(3)连翘脂素纯化：连翘脂素粗产物用AB-8弱极性大孔吸附树脂柱纯化，首先用30％乙醇水溶液淋洗3个柱体积，再用50％乙醇水溶液淋洗4个柱体积，收集50％乙醇淋洗液，减压浓缩、干燥，得连翘脂素含量为84.5％的产物。
实施例6
从连翘叶中制备连翘脂素的方法，包括以下步骤：
(1)连翘叶发酵：取干燥连翘叶，粉碎，过40目筛，喷洒水至连翘叶粗粉含水量为50％，控制温度为30℃，保温发酵2h后，烘干，得连翘叶发酵产物。经HPLC法测定：按上述方法发酵后，连翘叶发酵产物中连翘脂素含量为46.08mg/g，比未经发酵处理的连翘叶含量提高了28.0倍。
(2)连翘脂素粗产物制备：上述连翘叶发酵产物用20倍(重量比)、醇浓度为80％的乙醇水溶液提取。提取液经减压浓缩、冷藏静置、过滤，收集沉淀用水洗涤2次、干燥，得连翘脂素含量为34.0％的粗产物。
(3)连翘脂素纯化：连翘脂素粗产物用AB-8弱极性大孔吸附树脂柱纯化，首先用30％乙醇水溶液淋洗3个柱体积，再用80％乙醇水溶液淋洗3个柱体积，收集80％乙醇淋洗液，减压浓缩、干燥，得连翘脂素含量为84.2.0％的产物。
Claims (7)
1.一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)连翘叶发酵：取干燥连翘叶，粉碎，过40目筛，喷洒适量水至连翘叶粗粉含水量为30％～60％，控制温度25～50℃，保温发酵1～3h，烘干，得连翘叶发酵产物；
(2)连翘脂素粗产物制备：将上述连翘叶发酵产物用20倍重量的醇浓度70％～90％的醇水溶液提取，提取液经减压浓缩、冷藏静置、过滤，收集沉淀用水洗涤1～3次、干燥，得连翘脂素粗产物；
(3)连翘脂素纯化：将连翘脂素粗产物用非极性或弱极性大孔吸附树脂柱进行纯化，先用10％～40％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，再用50％～80％乙醇水溶液淋洗2～4个柱体积，收集50％～80％乙醇淋洗液，减压浓缩、干燥，得连翘脂素产物。
2.如权利要求1所述的从连翘叶中制备连翘脂素的方法，其特征在于，步骤(1)中所述连翘叶粗粉的含水量为50％；发酵温度为30℃；保温发酵时间为2h。
3.如权利要求1所述的从连翘叶中制备连翘脂素的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的醇水溶液，为乙醇或甲醇水溶液；所述沉淀用水洗涤次数为2次。
4.如权利要求3所述的从连翘叶中制备连翘脂素的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的乙醇水溶液为80％乙醇水溶液。
5.如权利要求1所述的从连翘叶中制备连翘脂素的方法，其特征在于，所述步骤(3)中的非极性大孔吸附树脂柱的材料为非极性大孔吸附树脂D101。
6.如权利要求1所述的从连翘叶中制备连翘脂素的方法，其特征在于，所述步骤(3)中的弱极性大孔吸附树脂柱的材料为弱极性大孔吸附树脂AB-8。
7.如权利要求1所述的从连翘叶中制备连翘脂素的方法，其特征在于，所述步骤(3)中的淋洗剂选择70％乙醇水溶液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910048775.9A CN109797177B (zh) | 2019-01-18 | 2019-01-18 | 一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910048775.9A CN109797177B (zh) | 2019-01-18 | 2019-01-18 | 一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN109797177A true CN109797177A (zh) | 2019-05-24 |
| CN109797177B CN109797177B (zh) | 2022-03-18 |
Family
ID=66559613
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910048775.9A Active CN109797177B (zh) | 2019-01-18 | 2019-01-18 | 一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN109797177B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113455572A (zh) * | 2021-08-04 | 2021-10-01 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种连翘叶速溶茶及其制备方法和应用 |
| CN113476456A (zh) * | 2021-08-26 | 2021-10-08 | 山西大学 | 一种富含连翘脂素的药物组合物及其应用 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016019685A1 (zh) * | 2014-08-07 | 2016-02-11 | 富力 | 一种原料药连翘苷的质量检测方法 |
| CN105331653A (zh) * | 2014-08-07 | 2016-02-17 | 富力 | 一种制备抗病毒药物连翘脂素的方法 |
| CN105367581A (zh) * | 2014-08-07 | 2016-03-02 | 富力 | 一种连翘脂素的制备方法 |
| CN106905339A (zh) * | 2017-03-09 | 2017-06-30 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种从连翘叶中提纯连翘苷元的方法 |
| US20170233403A1 (en) * | 2014-08-07 | 2017-08-17 | Li Fu | Phillygenin ibuprofen ester, preparation method therefor, and application thereof |
-
2019
- 2019-01-18 CN CN201910048775.9A patent/CN109797177B/zh active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016019685A1 (zh) * | 2014-08-07 | 2016-02-11 | 富力 | 一种原料药连翘苷的质量检测方法 |
| CN105331653A (zh) * | 2014-08-07 | 2016-02-17 | 富力 | 一种制备抗病毒药物连翘脂素的方法 |
| CN105367581A (zh) * | 2014-08-07 | 2016-03-02 | 富力 | 一种连翘脂素的制备方法 |
| US20170233403A1 (en) * | 2014-08-07 | 2017-08-17 | Li Fu | Phillygenin ibuprofen ester, preparation method therefor, and application thereof |
| CN106905339A (zh) * | 2017-03-09 | 2017-06-30 | 鲁南制药集团股份有限公司 | 一种从连翘叶中提纯连翘苷元的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| QINGMIAO ZHANG: "Phillyrin producedby Colletotrichum gloeosporioides,anendophyticfungus", 《FITOTERAPIA》 * |
| 梅建凤等: "微生物转化连翘苷制备连翘脂素的研究", 《工业微生物》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113455572A (zh) * | 2021-08-04 | 2021-10-01 | 中国科学院过程工程研究所 | 一种连翘叶速溶茶及其制备方法和应用 |
| CN113476456A (zh) * | 2021-08-26 | 2021-10-08 | 山西大学 | 一种富含连翘脂素的药物组合物及其应用 |
| CN113476456B (zh) * | 2021-08-26 | 2022-09-23 | 山西大学 | 一种富含连翘脂素的药物组合物及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN109797177B (zh) | 2022-03-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102976909B (zh) | 一种从生姜中提取纯化6-姜酚的方法 | |
| CN101260131A (zh) | 从杜仲中提取环烯醚萜活性部位及单体的方法 | |
| CN101012163B (zh) | 一种高纯度丹参素的制备方法 | |
| CN105481711B (zh) | 一种羟基‑β‑山椒素单体的制备方法 | |
| CN104173438A (zh) | 一种紫苏总黄酮的制备方法 | |
| AU2020101569A4 (en) | A Method of Extracting Xanthotoxol from the Root of Angelica Dahurica | |
| CN101812098B (zh) | 一种从巴戟天药材中提取分离水晶兰苷单体的方法 | |
| CN109797177A (zh) | 一种从连翘叶中制备连翘脂素的方法 | |
| CN109879919B (zh) | 一种从酸枣仁中分离制备三种黄酮苷的方法 | |
| CN101591680B (zh) | 氧化白藜芦醇的提取方法 | |
| CN101955479A (zh) | 一种从竹叶中提取荭草苷的方法 | |
| WO2012061984A1 (zh) | 制备芍药内酯苷和芍药苷的方法 | |
| CN104940280A (zh) | 一种应用酶制剂提取葛根总黄酮的方法 | |
| Yuan et al. | Efficient short extraction and purification procedures of kinsenoside from Anoectochilus roxburghii with deep eutectic solvent by column chromatographic extraction | |
| CN100586449C (zh) | 一种制备白芍总苷提取物的方法 | |
| CN103130851A (zh) | 一种从萝卜皮中分离制备四种天竺葵素衍生物的方法 | |
| CN102260307A (zh) | 一种特女贞苷的制备方法 | |
| CN102504007B (zh) | 一种鲁斯考皂苷元单体的分离纯化方法 | |
| CN101297874A (zh) | 一种高含量白芍有效成份的提取工艺 | |
| CN104402949B (zh) | 一种从紫丁香中同时分离制备紫丁香苷和橄榄苦苷的方法 | |
| CN107880084B (zh) | 从凌霄属植物花中提取制备高纯度毛蕊花糖苷的方法 | |
| CN102920785A (zh) | 一种从番石榴叶中提取总黄酮的方法 | |
| CN108864131A (zh) | 一种山藿香定的提取方法 | |
| CN1272331C (zh) | 一种提取葛根中三种有效成分的方法 | |
| CN101891729B (zh) | 一种从青天葵中提取高纯度鼠李秦素的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20230911 Address after: No. 419, Xinjian Lane, Yangzhai Village, Pingcheng Town, Lingchuan County, Jincheng, Shanxi Province 048300 Patentee after: Shanxi Lvzhijin Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 030006, No. 92, Hollywood Road, Xiaodian District, Shanxi, Taiyuan Patentee before: SHANXI University Patentee before: TAIYUAN JINGZHIDA TECHNOLOGY Co.,Ltd. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: No. 419, Xinjian Lane, Yangzhai Village, Pingcheng Town, Lingchuan County, Jincheng, Shanxi Province 048300 Patentee after: Shanxi Lvzhijin Pharmaceutical Co.,Ltd. Address before: No. 419 Xinjian Lane, Yangzhai Village, Pingcheng Town, Lingchuan County, Jincheng City, Shanxi Province 048300 Patentee before: Shanxi Lvzhijin Biotechnology Co.,Ltd. |
|
| CP03 | Change of name, title or address |