CN108129532A - 一种以化橘红为基础制备柚皮苷的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种以化橘红为基础制备柚皮苷的方法。具体方法如下：将化橘红干果在50～60℃下低温烘干，粉碎，过筛，得到化橘红粉末，经石油醚脱脂，以水‑乙醇为溶剂，将化橘红粉末置于热水浴浸提两次，经浓缩和大孔树脂纯化可得柚皮苷纯品。经HPLC检测，柚皮苷含量为96.9～97.5％，收率为7.8～8.3％。与目前从获取柚皮苷的方法相比，本发明具有工艺简单，操作方便，含量、收率高、可工业化的特点。此外，本发明所得的柚皮苷可广泛用于合成新型甜味素，抗炎、抗菌等领域。

Description

一种以化橘红为基础制备柚皮苷的方法

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及一种以化橘红为基础制备柚皮苷的方法及其应用。

背景技术

柚皮苷(naringin)，是一种二氢黄酮类化合物，主要存在于芸香科植物柚，酸橙，葡萄柚，及其变种的果皮和果实中，以及积实、积壳、骨碎补、化橘红等中草药中。柚皮苷是葡萄柚和普通柚的主要苦味物质和特征性黄酮类化合物，分别占葡萄柚和普通柚中二氢黄酮总量的 96～99.8％和89％。柚皮苷具有降血脂，抗肿瘤，抗真菌，抗氧化，抗突变，抗动脉粥样硬化等生物活性。食品工业上，柚皮苷既可作为天然色素、风味改良剂和苦味剂用于食品、饮料的生产，又可作为合成新型甜味剂柚皮苷二氢查耳酮和新橙皮苷二氢查耳酮的原料。这两种甜味剂不仅甜度高，甜味持久，而且安全性高，是新一代无毒、低能量、防龋齿的高甜度的甜味剂。在医药工业上，柚皮苷可用于生产防治心脑血管疾病、镇痛、清热及消炎药物。

化橘红(Exocarpium citri grandis)又称化州橘红，是芸香科植柑橘属(Citrus)植物化州柚 (Citrus grandis Osbeek)或柚(C.grandis Osbeek)的未成熟或成熟的干燥外层果皮，化橘红作为一种药材，有很悠久的历史，据报道在宋代以后就开始入药，可治风寒咳嗽、喉痒痰多、实积暖气等症。但是，随着化橘红种植的连年增加，化橘红作为药材的市场已达饱和，因此对化橘红进一步的开发利用显得尤为重要。化橘红含有多种活性物质，如黄酮、多糖、挥发油等。而化橘红黄酮的主要成分是柚皮苷以及少量的枳属苷、野漆树苷、新陈皮苷。且研究发现，化州橘红中的总黄酮与柚皮苷的含量较高。因此通过化橘红提取制备柚皮苷，既可以满足市场对柚皮苷的需求，也可以为化橘红带来经济效益。

目前柚皮苷的获得方法多为从芸香科植物中提取。已报到的有：将粉碎后的柚子粉经高压萃取釜萃取，浓缩后弃除不溶物，然后调节pH析晶，再用无水乙醇重结晶的到柚皮苷(许晨等，CN200910229939.4)；将新鲜柚子制备成柚子白皮粉，经提取罐反复提取，过滤，超滤，浓缩，沉淀，溶解等操作得到柚皮苷(陈尧辉等，CN201610513481.5)，将枳壳用60％乙醇提取后，通过大孔树脂，然后用高速逆流色谱纯化后的到柚皮苷(范国荣等，CN200410053284.7)。尽管提取柚皮苷的方法很多，但是多是从柚子或柚子皮中提取得到柚皮苷，没有涉及从化橘红中提取柚皮苷。另外目前的方法中主要存在收率低，成本高，产品颜色过深或提取过程复杂等问题，不利于生产。

发明内容

本发明的目的是针对化橘红深加工利用的不足，提供一种从化橘红中提取柚皮苷的方法，具有方法简便，可工业化，纯品收率、纯度高的特点。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

步骤一、预处理：将化橘红干果，在低温烘干，粉碎，过40-50目筛，得到黄化橘红粉末，加入一定量的石油醚，浸泡过夜，过滤，弃除石油醚，粉末挥干溶剂，备用；

步骤二、提取：以乙醇-水为溶剂，将预处理后的化橘红粉末置于热水中浸泡提取，过滤，得滤液；

步骤三、浓缩：用真空旋转蒸发浓缩滤液；

步骤四、大孔树脂纯化：将上述浓缩液上已处理的大孔树脂，进行吸附、洗脱，收集洗脱液；

步骤五、浓缩重结晶：将收集的洗脱液真空浓缩后，室温下静置24h结晶，过滤，洗涤 2～3次，于60℃下干燥，即得柚皮苷纯品。

进一步地，所述步骤一的低温为50～60℃，粉碎用机械粉碎，加入石油醚与化橘红粉末的料液比为1:6g/mL。

进一步地，所述步骤二的溶剂为体积分数80％～100％的食用酒精，加入的料液比为 1:10g/mL，提取的温度为70～90℃，提取时间为1.5h，提取次数为2次，过滤合并滤液，滤液用于制备柚皮苷，滤渣可用于提取化橘红多糖。

进一步地，所述步骤三，浓缩的温度为55～65℃，真空度为0.05～0.1MPa，提取液浓缩至原体积的1/10。

进一步地，所述步骤四，大孔树脂为AB-8或HPD400，大孔吸附树脂用95％乙醇浸泡24h，使树脂充分溶胀，再用95％乙醇清洗树脂至流出液体不呈白色浑浊，然后用去离子水洗至无醇味，备用。上样吸附、洗脱的条件为：大孔树脂与生药量＝1:2～1:5，吸附时间为 2～3小时，洗脱液依次为去离子水，30-50％乙醇溶液，洗脱速度为1～3mL/min，收集30～50％乙醇溶液的洗脱液。

进一步地，所述步骤五，将洗脱液浓缩至上样液量的1/2，室温静置24h，过滤，固体用冰水洗涤2～3次，60℃真空干燥过夜，得柚皮苷纯品。

与现有技术相比，本发明的优势在于：

1、本发明以化橘红为原料，以水和乙醇为溶剂，热水提取，不仅绿色环保无环境污染，且提取条件温和，不易破坏物质生物活性；

2、本发明步骤简短方便，有利于减少柚皮苷的损失和降低劳动生产的成本。利用大孔树脂纯化，所得的柚皮苷外观美观，不用脱色，纯度高；

3、与其它方法相比，本发明所得柚皮苷纯度高，收率好，过程简便。

附图说明

图1为本发明的实施流程图。

图2为本发明所得柚皮苷与样品的色谱图。

具体实施方式

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1

一种以化橘红为基础制备柚皮苷的方法，其具体工艺步骤如下：

取已干燥过筛的化橘红粉末100.2g，加入石油醚600mL，搅拌均匀后静置过夜，过滤，去除石油醚，粉末挥干溶剂后，按料液比为1:10g/mL的量加入体积分数为95％的食用酒精，在温度为80℃的热水中浸泡提取，提取时间为1.5h，提取次数为2次，过滤合并滤液，滤液用于制备柚皮苷，滤渣可用于提取化橘红多糖。将所得的滤液在温度为55-65℃，真空度为0.05～0.1MPa的条件下浓缩至原体积的1/10，得到化橘红提取浓缩液；将浓缩液上已处理的大孔树脂HPD400进行吸附、洗脱，吸附时间为2小时，上样速度为1～2mL/min，洗脱液依次为去离子水，40％乙醇溶液，洗脱速度为1～2mL/min，各洗至近无色，收集40％乙醇溶液的洗脱液，真空浓缩至上样体积1/2，室温静置24h，过滤，固体用冰水洗涤2～3次，60℃真空干燥过夜，得柚皮苷纯品，其纯度为96.9％，收率为8.2％。

实施例2

一种以化橘红为基础制备柚皮苷的方法，其具体工艺步骤如下：

称取已干燥过筛的化橘红粉末100.1g，加入石油醚600mL，搅拌均匀后静置过夜，过滤，去除石油醚，粉末挥干溶剂后，按料液比为1:10g/mL的量加入体积分数为95％的食用酒精，在温度为80℃的热水中浸泡提取，提取时间为1.5h，提取次数为2次，过滤合并滤液，滤液用于制备柚皮苷，滤渣可用于提取化橘红多糖。将所得的滤液在温度为55～65℃，真空度为0.05～0.1MPa的条件下浓缩至至原体积的1/10，得到化橘红提取浓缩液；将浓缩液上已处理的大孔树脂HPD400，进行吸附、洗脱，吸附时间为2小时，上样速度为1～2mL/min，洗脱液依次为去离子水，40％乙醇溶液，洗脱速度为1～2mL/min，各洗至近无色，收集40％乙醇溶液的洗脱液，真空浓缩至上样体积1/2，室温静置24h，过滤，固体用冰水洗涤2～3 次，60℃真空干燥过夜，得柚皮苷纯品，其纯度为97.2％，收率为8.0％。

实施例3

一种以化橘红为基础制备柚皮苷的方法，其具体工艺步骤如下：

称取已干燥过筛的化橘红粉末100.1g，加入石油醚600mL，搅拌均匀后静置过夜，过滤，去除石油醚，粉末挥干溶剂后，按料液比为1:10g/mL的量加入体积分数为95％的食用酒精,在温度为80℃的热水中浸泡提取，提取时间为1.5h，提取次数为2次，过滤合并滤液，滤液用于制备柚皮苷，滤渣可用于提取化橘红多糖。将所得的滤液在温度为55～65℃，真空度为0.05～0.1MPa的条件下浓缩至至原体积的1/10，得到化橘红提取浓缩液；将浓缩液上已处理的大孔树脂HPD400，进行吸附、洗脱，吸附时间为2小时，上样速度为1～2mL/min，洗脱液依次为去离子水，40％乙醇溶液，洗脱速度为1～2mL/min，各洗至近无色，收集40％乙醇溶液的洗脱液，真空浓缩至上样体积1/2，室温静置24h，过滤，固体用冰水洗涤2～3 次，60℃真空干燥过夜，得柚皮苷纯品，其纯度为97.4％，收率为8.1％。

Claims (6)

1.一种以化橘红为基础制备柚皮苷的方法，其特征在于，包括如步骤：

步骤一、预处理：将化橘红干果，在低温烘干，粉碎，过40-50目筛，得黄化橘红粉末；加入石油醚，浸泡过夜，过滤，弃除石油醚，粉末挥干溶剂，备用；

步骤二、提取：以乙醇-水为溶剂，将预处理后化橘红粉末置于热水中浸泡提取，过滤，得滤液；

步骤三、浓缩：用真空旋转蒸发浓缩滤液；

步骤四、大孔树脂纯化：上述浓缩液上已处理的大孔树脂，进行吸附、洗脱，收集洗脱液；

步骤五、浓缩重结晶：将收集的洗脱液真空浓缩后，室温下静置24h结晶，过滤，洗涤2～3次，于60℃下干燥，即得柚皮苷纯品。

2.如权利要求1所述的以化橘红为基础制备柚皮苷的方法，其特征在于：所述步骤一中低温烘干为50～60℃，所述粉碎用机械粉碎，所述石油醚与化橘红粉末的料液比为1:6g/mL。

3.如权利要求1所述的以化橘红为基础制备柚皮苷的方法，其特征在于：所述步骤二的溶剂为体积分数80％～100％的食用酒精，所述溶剂与化橘红粉末的料液比为1:10g/mL，所述提取的温度为70～90℃，所述提取时间为1.5h，所述提取次数为2次。

4.如权利要求1所述的以化橘红为基础制备柚皮苷的方法，其特征在于：所述步骤三浓缩的温度为55～65℃，真空度为0.05～0.1MPa，提取液浓缩至原体积的1/10。

5.如权利要求1所述的以化橘红为基础制备柚皮苷的方法，其特征在于：所述步骤四中大孔树脂为AB-8或HPD400；所述大孔吸附树脂用95％乙醇浸泡24h，使树脂充分溶胀，再用95％乙醇清洗树脂至流出液体不呈白色浑浊，然后用去离子水洗至无醇味，即得。

所述上样吸附、洗脱的条件为：大孔树脂与生药量＝1:2～1:5，吸附时间为2～3小时；所述洗脱液依次为去离子水、30～50％乙醇溶液；所述洗脱速度为1-3mL/min。

6.如权利要求1所述的以化橘红为基础制备柚皮苷的方法，其特征在于：所述步骤五中上样液量为将洗脱液的1/2，所述洗涤溶剂为冰水。