CN111273001A - 一种快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV的系统及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种快速检测血液样本中新冠状病毒2019‑nCoV的系统，所述系统用于检测新冠状病毒2019‑nCoV的IgM与IgG，其包括扣卡、胶体金免疫层析试纸条和样本缓冲液；所述胶体金免免疫层析试纸条包括依次连接的样品垫、全血分离膜、标记垫、层析膜和吸水垫与底板；所述标记垫上同时固定有胶体金‑新冠状病毒N蛋白连接抗原复合物和胶体金‑质控分子复合物；所述检测线上分别固定有鼠抗人IgM‑μ链抗体和鼠抗人IgG‑μ链抗体，检测时，加入待检测血液样本到所述样品垫之后，然后加入所述样本缓冲液。如果不使用本发明的样本缓冲液，将样本直接进行检测，样本中的新冠状病毒IgM与IgG则不能够被检测或易出现假阳性，本发明的样本缓冲液存在对于实现样本的检测至关重要。

Description

一种快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV的系统及其 制备方法

技术领域

本发明涉及医学检验、免疫诊断系统领域，具体涉及一种快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV的系统。

背景技术

冠状病毒最先是1937年从鸡身上分离出来，1965年，Tyrrell与Bynoe 利用胚胎的带有纤毛的气管组织首次培养出冠状病毒，此病毒在电子显微镜下可见如日冕般外围的冠状，因此被称为冠状病毒(Coronaviridae)。冠状病毒颗粒的直径60～200nm，平均直径为100nm，呈球形或椭圆形，具有多形性。冠状病毒属的病毒是具外套膜(envelope)的正链单股RNA病毒，其遗传物质是所有RNA，外套膜上存在棘突，整个病毒像日冕，不同的冠状病毒的棘突有明显的差异，其中冠状病毒的一个变种是引起非典型肺炎的病原体，是一种起病急、传播快、病死率高的传染病，引起呼吸功能紊乱等，甚至危及生命。冠状病毒中最大的感染群为人、鼠、猪、猫、犬、狼、鸡、牛、禽类脊椎动物。

冠状病毒(Coronavirus，CoV)属巢状病毒目，冠状病毒科，分为α、β、γ三个属。α、β属仅对哺乳动物致病，γ属主要引起鸟类感染，CoV 主要通过直接接触分泌物或经气溶胶、飞沫传播，也有证据表明可经粪口途径传播。到目前为止，引起人类呼吸道疾病的人冠状病毒(HCoV)已达7种： HCoV-229E、HCoV-OC43、SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、MERS- CoV和新型冠状病毒(2019-nCoV)，是人呼吸道感染的重要病原体。

2019新型冠状病毒，即“2019-nCoV”，新型冠状病毒是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。临床表现为发热、乏力等全身症状，伴有干咳，呼吸困难等，可迅速发展为重症肺炎、呼吸衰竭、急性呼吸窘迫综合征，脓毒性休克，多器官功能衰竭，严重酸碱代谢紊乱等，甚至危及生命。2020年1月20日，国家卫健委发布2020年1号公告，将新型冠状病毒感染的肺炎纳入《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病，并采取甲类传染病的预防、控制措施。将新型冠状病毒感染的肺炎纳入《中华人民共和国国境卫生检疫法》规定的检疫传染病管理。

新型冠状病毒(2019-nCoV)是威胁人类健康最严重的疾病之一，感染者和病人以中老年人为主，局部地区正面临着集中发病和死亡的高峰。给人民的财产造成巨大的损失。因此引起国家极为高度的重视。及时筛查并发现感染病人，隔离感染者和接触者，阻止其进一步传播仍然是新型冠状病毒防治的重要手段。

近期，全国的科研人员在新型冠状病毒(2019-nCoV)感染检测方面都做了大量的研究工作，并迅速有多家荧光定量PCR检测试剂和应急上市，但是，PCR荧光定量检测试剂盒具有操作复杂等特点，很难用于大规模的筛查。

本项目拟开发新冠状病毒IgM/IgG联合快速检测试剂盒(胶体金法)，胶体金免疫层析技术出现于80年代前期，是一种独特的免疫分析技术，其基本原理是以条状纤维层析材料为固相，通过毛细作用使样本溶液在层析条上泳动，同时样本中的待测物与层析材料上针对待测物的抗原或抗体发生高特异、高亲和性免疫反应，层析过程中免疫复合物富集或截留在层析材料的一定区域，通过与之结合的示踪标志物得到直观的反应结果。而游离标记物越过检测条带，达到与结合标记物自动分离的目的。

发明内容

本发明的目的是针对上述现有技术中新冠状病毒荧光定量PCR检测试剂中存在不足，提供一种操作简便、能够快速筛查新冠状病毒感染者的一种检测系统。

在一种实施方式中，本发明提供一种快速检测血液样本中新冠状病毒 2019-nCoV的系统，所述系统用于检测新冠状病毒2019-nCoV的IgM与IgG，其包括扣卡、胶体金免疫层析试纸条和样本缓冲液；所述扣卡为胶体金免疫层析试纸条的外部壳结构，设有加样孔和观察窗；所述胶体金免免疫层析试纸条包括依次连接的样品垫、全血分离膜、标记垫、层析膜和吸水垫与底板，所述样品垫、全血分离膜、标记垫、层析膜和吸水垫搭载于所述底板之上，所述样品垫位于所述加样孔的下方，所述层析膜上固定有两条检测线和一条质控线，所述检测线和质控线位于所述观察窗的下方，一条检测线用于检测检测新冠状病毒2019-nCoV的IgM，另一条用于检测检测新冠状病毒2019- nCoV的IgG；所述标记垫上同时固定有胶体金-新型冠状病毒抗原复合物和胶体金-质控分子复合物；所述检测线上分别固定有鼠抗人IgM-μ链抗体和鼠抗人IgG-μ链抗体，标记垫上的胶体金-新冠状病毒抗原复合物与样本中的新冠状病毒IgM和IgG特异性结合，形成胶体金-新型冠状病毒抗原-IgM复合物和胶体金-新型冠状病毒抗原-IgG复合物；该复合物分别与检测线上的鼠抗人 IgM-μ链抗体和鼠抗人IgG-μ链抗体特异性结合；胶体金-质控分子复合物与质控线上的特异性抗体结合，形成胶体金-质控分子-抗体复合物；检测时，加入待检测血液样本到所述样品垫之后，然后加入所述样本缓冲液，所述样本缓冲液包含牛血清白蛋白组分V、表面活性剂、磷酸盐缓冲系统和防腐剂， pH值为6.5-7.5，其中，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为0.05～2％，所述表面活性剂浓度为0.05～2％，和所述防腐剂浓度为0.1-1％。

在一种实施方式中，所述新型冠状病毒抗原是N蛋白、S蛋白或E蛋白。

在一种实施方式中，吸附所述质控分子的胶体金颗粒大小与吸附新冠状病毒N蛋白链接抗原的胶体金颗粒大小相同，大小范围为20～70nm，优选为 38nm。

在一种实施方式中，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为0.1-1％，表面活性剂TritonX-100的浓度为0.1-1％，防腐剂P300的浓度为0.1-0.5％。

在一种实施方式中，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为0.5％，表面活性剂TritonX-100的浓度为0.1％，防腐剂P300的浓度为0.2％。

在一种实施方式中提供上述快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV 的系统的制备方法，所述方法包括如下步骤：步骤1：分别将新冠状病毒抗原和质控分子吸附在胶体金颗粒表面，分别得到胶体金-新冠状病毒N蛋白连接抗原复合物和胶体金-质控分子复合物；步骤2：将步骤1得到的胶体金-新冠状病毒抗原复合物和胶体金-质控分子复合物均固定到标记垫上；步骤3：在所述层析膜上分别设置一条IgM检测线、一条IgG检测线和一条质控线，其中，质控线上固定有能与质控分子特异性结合的生物分子，检测线上固定有鼠抗人IgM-μ链抗体和鼠抗人IgG-μ链抗体；步骤4：将样品垫、全血过滤膜、标记垫、层析膜、吸水垫和底板构建成胶体金免疫层析试纸条；步骤5：将胶体金免疫层析试纸条装卡；和步骤6：将上述装条试剂卡、盛有样本缓冲液的滴瓶封装，所述样本缓冲液包含牛血清白蛋白组分V、表面活性剂、磷酸盐缓冲系统和防腐剂，pH值为6.5-7.5，其中，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为 0.05～2％，所述表面活性剂浓度为0.05～2％，和所述防腐剂浓度为0.1-1％。

在一种实施方式中，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为0.1-1％，表面活性剂TritonX-100的浓度为0.1-1％，防腐剂P300的浓度为0.1-0.5％。

在本发明中，采用胶体金电荷吸附新冠状病毒N蛋白连接抗原或质控分子，步骤为：制备好的胶体金颗粒，加入一定量的新冠状病毒N蛋白连接抗原或质控分子，以缓冲液作为反应介质，反应2-4小时，10000rpm离心0.5-2小时，得到荧光染料修饰的新冠状病毒IgM与IgG特异性抗体或质控分子。

为了提高产品检测灵敏度，本发明中胶体金颗粒大小为20-70nm，优选为38nm。

本发明的新冠状病毒N蛋白连接抗原为冠状病毒特异性抗原。质控分子可以是小分子，也可以是多抗，例如兔IgG，与质控分子特异性结合的生物分子例如羊抗兔IgG。

本发明中，待测样本可以是血清、血浆，此时胶体金免疫层析试纸条可以不包括全血分离膜。待测样本也可以是全血，此时胶体金免疫层析试纸条还包括全血分离膜，用于过滤血细胞。全血分离膜可设置在样品垫和标记垫之间，分别与样品垫和标记垫直接毛细作用接触，或者设置在样品垫前端，与样品垫直接毛细作用接触，也可直接与样品垫合并为同一结构，从而对样本同时具有样本收集、释放及过滤的作用。

本发明的胶体金免疫层析快速检测系统对血液样本中的新冠状病毒IgM 与IgG抗体进行快速检测。检测时，将10μl待测样本滴加到加样孔中，然后滴加20μl样本缓冲液，样本沿层析膜向吸水垫方向层析运动。样本层析时间通常为8-25分钟，优选15分钟。

层析结束后，观察IgM检测线、IgM检测线和质控线：质控线无颜色，说明检测结果无效；在检测结果有效前提下，检测线颜色色度越弱，表示样本中新冠状病毒抗体IgM或IgG的的浓度越低，反之越高；如果检测线无颜色，则表示样本为阴性样本。

本发明的胶体金免疫层析系统的工作原理为：采用胶体金免疫层析技术及捕获法原理快速检测样本(血清或血浆、全血)中的新冠状病毒IgM与IgG 的含量。检测时，将10μl样本滴加到加样孔中，然后滴加20μl样本缓冲液，样本流经标记垫时与胶体金-新冠状病毒抗原复合物相结合，并沿着层析膜向吸水垫方向毛细运动，分别流经层析膜上的鼠抗人IgM-μ链检测带、鼠抗人IgG-μ链检测带及质控带。若样本中含有新冠状病毒IgM与IgG抗体，则与标记垫上的胶体金-新冠状病毒抗原复合物相结合，当层析至检测线时，会被鼠抗人IgM-μ链检测带、鼠抗人IgG-μ链检测带特异性结合，从而形成胶体金-新冠状病毒抗原-人IgM-鼠抗人IgM-μ链复合物、胶体金-新冠状病毒抗原 -人IgG-鼠抗人IgG-μ链检测复合物，因而显色，进而可分析出样本中含有新冠状病毒IgM与IgG抗体。

本发明的主要优点如下：

1)本发明采胶体金标记，与其他方法相比，具有简单、操作简便、成本低不需要专业人员操作等优势。

2)为了能够检测样本中的新冠状病毒IgM与IgG，滴加待检测样本到加样孔后，然后滴加滴样本缓冲液；所述样本稀释包括有牛血清白蛋白组分V、表面活性剂、磷酸盐缓冲系统和防腐剂，pH值为6.5-7.5；如果不使用本发明的样本缓冲液，将样本直接进行检测，样本中的新冠状病毒IgM与IgG则不能够被检测或易出现假阳性，本发明的样本缓冲液存在对于实现样本的检测至关重要。

4)本发明快速新冠状病毒IgM与IgG联合检测系统，样本缓冲液可减少非特异性吸附，降低干扰本底，增强特异性结合，进而提高检测灵敏度，有利于样本中新冠状病毒IgM与IgG含量极低时的准确检测。

5)本发明方法与常规荧光定量PCR相比，具有操作简单、操作简便、成本低不需要专业人员、无需仪器、能够现场及时检测等优势。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。

图1为本发明的胶体金免疫层析试纸条样本测试原理示意图；

图2为本发明的新冠状病毒IgM/IgG快速检测系统示意图，其中1.样品垫；2.全血分离膜；3.标记垫；4.IgM检测线；5.IgG检测线；6.质控线；7.吸水垫；8.PVC背板；9.NC膜；10.加样孔；11.观察窗；12.试纸条；13.卡扣。

具体实施方式

为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合下面结合实施例对本发明作进一步说明，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都应当属于本申请保护的范围。

实施例1本发明的快速新冠状病毒IgM与IgG联合检测系统及其制备

如图1-2所示，本发明的快速新冠状病毒IgM与IgG联合检测系统包括扣卡13、胶体金免疫层析试纸条12和样本缓冲液，其中，扣卡13为胶体金免疫层析试纸条的外部壳结构，包括加样孔10和观察窗11。

胶体金免疫层析试纸条结构如图2所示，包括样品垫1；标记垫3；吸水垫7；PVC背板8；和NC膜9。当进行全血样本品检测时，试纸条还包括全血分离膜2。其中，样品垫1搭在全血分离膜2上，全血分离膜2搭在标记垫3上，标记垫3搭在NC膜9一端，吸水垫7搭载NC膜9另一端，上述结构全部搭载在PVC背板8上。样品垫1位于加样孔10的下方，且连接于全血分离膜2，全血分离膜2连接于标记垫3，标记垫3搭在NC膜9一端，吸水垫7搭载NC膜9另一端，NC膜9上固定有一条IgM3检测线4、 IgG检测线5以及一条质控线5，相邻检测线和质控线两两之间距离优选为 3mm～8mm，并位于观察窗11的下方。

标记垫3上同时固定有胶体金-新冠状病毒N蛋白连接抗原复合物，和胶体金-质控分子复合物，胶体金-新冠状病毒N蛋白连接抗原复合物的胶体金颗粒大小与胶体金-质控分子的的胶体金颗粒大小相同，大小范围为20- 70nm。

检测线4上固定有鼠抗人IgM-μ链抗体，检测线5上固定有鼠抗人IgG- μ链抗体，该抗体与固定在标记垫2上的荧光染料修饰的新冠状病毒IgM与 IgG新冠状病毒IgM与IgG特异性抗体竞争性结合。质控线6上固定有能与质控分子特异性结合的生物分子。

制备上述定量检测新冠状病毒IgM与IgG系统，其包括如下步骤：

步骤1：用电荷吸附法将新冠状病毒N蛋白链接抗原和质控分子分别吸附到胶体金颗粒表面，分别得到胶体金-新冠状病毒N蛋白链接抗原复合物，和胶体金-质控分子复合物，吸附所述质控分子的胶体金颗粒大小与吸附新冠状病毒N蛋白链接抗原的胶体金颗粒大小相同，大小范围为20～70nm。

步骤2：将步骤1得到的胶体金-新冠状病毒N蛋白链接抗原复合物和胶体金-质控分子复合物均固定到标记垫3上；

步骤3：在NC膜9上分别设置定量检测线4和5和一条质控线6。

步骤4：将样品垫1、全血分离膜2、标记垫3、NC膜9、吸水垫7和 PVC背板8构建成胶体金免疫层析试纸条；

步骤5：将胶体金免疫层析试纸条装卡；

步骤6：将上述装条试剂卡、盛有样本缓冲液的滴瓶封装。

实施例2：本发明的快速新冠状病毒IgM与IgG联合检测系统对血液样本中新冠状病毒IgM与IgG的进行快速检测

1.胶体金与新冠状病毒N蛋白连接抗原标记

取胶体金10ml，用0.2M NaHCO3缓冲液pH8.0，加100μg新冠状病毒 N蛋白连接抗原，混匀，放置20min，加入5％BSA 1ml混匀，4℃、10000r/min 离心1h，弃上清，将沉淀用TBS缓冲液溶解至10ml，4℃、10000r/min离心 1h，弃上清，沉淀用TBS稀释至1ml，得胶体金标记的新冠状病毒N蛋白连接抗原；

同样步骤制备质控分子，胶体金标记兔IgG。

2.系统构建

a)标记垫制备

以1:1的比例混合两种胶体金标记复合物，并加入牛血清白蛋白组分V (含量为1％)、蔗糖(含量为10％)以及表面活性剂TritonX-100(含量为 0.8％)，随后均匀喷涂在标记垫上，40℃干燥后密封，室温下保存。

b)包被膜制备

将鼠抗人IgM-μ链抗体、鼠抗人IgG-μ链抗体用包被抗体样本缓冲液 (20％稳定剂+0.1M PB,pH7.4)稀释至0.5mg/mL稀释，羊抗兔IgG用包被抗体样本缓冲液(20％稳定剂+0.1M PB,pH7.4)稀释至1mg/mL；将上述稀释好的鼠抗人IgM-μ链抗体、鼠抗人IgG-μ链抗体和羊抗兔IgG按照33ul/板的量用划膜仪划膜，然后，40℃干燥后密封，室温下保存。

c)组装

如图2所示，将样品垫1、标记垫3、NC膜9、吸水垫7组成，顺次粘贴于白色PVC背板8上。其中，样品垫1为孔状隔膜，选择全血分离玻璃纤维膜，为待测样本收集区；标记垫中含有荧光染料修饰的新冠状病毒IgM 与IgG，新冠状病毒IgM与IgG特异性抗体及荧光染料修饰的兔IgG；层析膜上固定有定量检测线4、定量检测5和质控线6，检测线和质控线的间隔为5mm，且检测线4和检测线5固定有新冠状病毒IgM与IgG抗原，质控线6固定有羊抗兔抗体。

组装好后，按照要求切割为4mm宽度，并置于扣卡13内，如图2所示，加入干燥剂，将铝箔袋封装，封装好的铝箔袋单测试剂与样本缓冲液共同构建为本发明的快速新冠状病毒IgM与IgG联合检测系统。样本缓冲液为pH 7.2的磷酸盐缓冲系统，其包括牛血清白蛋白组分V的浓度为0.5％，表面活性剂TritonX-100的浓度为0.1％，防腐剂P300的浓度为0.2％。

3)样本的检测

血液样本：滴管全血、血清或血浆10μl，加入到检测卡的加样孔中，滴瓶滴加样本缓冲液60μl，等待15分钟，观察检测结果。

4)结果分析

结果表明，本发明的检测系统其最低检测限IgM中阳质控灭活样本，稀释度为1:1000倍，检测结果为阳性；IgG中阳质控灭活样本，稀释度为1:2000 倍，检测结果为阳性；且批内与批间重复性均较好，对新冠状病毒IgM与 IgG快速检测具有参考价值。

经过测试，其它条件不变，如果不使用本发明的样本缓冲液，本发明的检测系统其最低检测限IgM中阳质控灭活样本，稀释度为1:50倍，检测结果为阳性，稀释度为1:100倍，检测结果为阴性；IgG中阳质控灭活样本，稀释度为1:100倍，检测结果为阳性，稀释度为1:500倍，检测结果为阴性。

经过测试，其它条件不变，如果将样本缓冲液中牛血清白蛋白组分V和表面活性剂Triton X100去掉，本发明的检测系统其最低检测限IgM中阳质控灭活样本，稀释度为1:100倍，检测结果为阳性，稀释度为1:500倍，检测结果为阴性；IgG中阳质控灭活样本，稀释度为1:500倍，检测结果为阳性，稀释度为1:1000倍，检测结果为阴性。

经过测试，其它条件不变，如果将样本缓冲液中牛血清白蛋白组分V去掉，本发明的检测系统其最低检测限IgM中阳质控灭活样本，稀释度为1:10 倍，检测结果为阳性，稀释度为1:100倍，检测结果为阴性；IgG中阳质控灭活样本，稀释度为1:200倍，检测结果为阳性，稀释度为1:400倍，检测结果为阴性。

经过测试，其它条件不变，如果将样本缓冲液中Triton X100去掉，本发明的检测系统其最低检测限IgM中阳质控灭活样本，稀释度为1:200倍，检测结果为阳性，稀释度为1:1000倍，检测结果为阴性；IgG中阳质控灭活样本，稀释度为1:500倍，检测结果为阳性，稀释度为1:1000倍，检测结果为阴性。

经过测试，其它条件不变，如果将样本缓冲液中牛血清白蛋白组分V用牛血清白蛋白或酪蛋白替代，本发明的检测系统其最低检测限IgM中阳质控灭活样本，稀释度为1:200倍，检测结果为阳性，稀释度为1:500倍，检测结果为阴性；IgG中阳质控灭活样本，稀释度为1:250倍，检测结果为阳性，稀释度为1:500倍，检测结果为阴性。

经过测试，其它条件不变，如果将样本缓冲液中TritonX-100用吐温20 或吐温80替代，本发明的检测系统其最低检测限IgM中阳质控灭活样本，稀释度为1:400倍，检测结果为阳性，稀释度为1:800倍，检测结果为阴性； IgG中阳质控灭活样本，稀释度为1:500倍，检测结果为阳性，稀释度为1:1000 倍，检测结果为阴性。

应该理解到披露的本发明不仅仅限于描述的特定的方法、方案和物质，因为这些均可变化。还应理解这里所用的术语仅仅是为了描述特定的实施方式方案的目的，而不是意欲限制本发明的范围，本发明的范围仅受限于所附的权利要求。

本领域的技术人员还将认识到，或者能够确认使用不超过常规实验，在本文中所述的本发明的具体的实施方案的许多等价物。这些等价物也包含在所附的权利要求中。

Claims (7)

1.一种快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV的系统，其特征在于，所述系统用于检测新冠状病毒2019-nCoV的IgM与IgG，其包括扣卡、胶体金免疫层析试纸条和样本缓冲液；

所述扣卡为胶体金免疫层析试纸条的外部壳结构，设有加样孔和观察窗；

所述胶体金免免疫层析试纸条包括依次连接的样品垫、全血分离膜、标记垫、层析膜和吸水垫与底板，所述样品垫、全血分离膜、标记垫、层析膜和吸水垫搭载于所述底板之上，所述样品垫位于所述加样孔的下方，所述层析膜上固定有两条检测线和一条质控线，所述检测线和质控线位于所述观察窗的下方，一条检测线用于检测检测新冠状病毒2019-nCoV的IgM，另一条用于检测检测新冠状病毒2019-nCoV的IgG；

所述标记垫上同时固定有胶体金-新型冠状病毒抗原复合物和胶体金-质控分子复合物；

所述检测线上分别固定有鼠抗人IgM-μ链抗体和鼠抗人IgG-μ链抗体，标记垫上的胶体金-新冠状病毒抗原复合物与样本中的新冠状病毒IgM和IgG特异性结合，形成胶体金-新型冠状病毒抗原-IgM复合物和胶体金-新型冠状病毒抗原-IgG复合物；该复合物分别与检测线上的鼠抗人IgM-μ链抗体和鼠抗人IgG-μ链抗体特异性结合；胶体金-质控分子复合物与质控线上的特异性抗体结合，形成胶体金-质控分子-抗体复合物；

检测时，加入待检测血液样本到所述样品垫之后，然后加入所述样本缓冲液，所述样本缓冲液包含牛血清白蛋白组分V、表面活性剂、磷酸盐缓冲系统和防腐剂，pH值为6.5-7.5，其中，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为0.05～2％，所述表面活性剂浓度为0.05～2％，和所述防腐剂浓度为0.1-1％。

2.根据权利要求1所述的快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV的系统，其特征在于，所述新型冠状病毒抗原是N蛋白、S蛋白或E蛋白。

3.根据权利要求1所述的快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV的系统，其特征在于，吸附所述质控分子的胶体金颗粒大小与吸附新冠状病毒N蛋白链接抗原的胶体金颗粒大小相同，大小范围为20～70nm，优选为38nm。

4.根据权利要求1所述的快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV的系统，其特征在于，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为0.1-1％，表面活性剂TritonX-100的浓度为0.1-1％，防腐剂P300的浓度为0.1-0.5％。

5.根据权利要求4所述的快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV的系统，其特征在于，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为0.5％，表面活性剂TritonX-100的浓度为0.1％，防腐剂P300的浓度为0.2％。

6.一种制备权利要求1-5任一所述的快速检测血液样本中新冠状病毒2019-nCoV的系统的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

步骤1：分别将新冠状病毒抗原和质控分子吸附在胶体金颗粒表面，分别得到胶体金-新冠状病毒N蛋白连接抗原复合物和胶体金-质控分子复合物；

步骤2：将步骤1得到的胶体金-新冠状病毒抗原复合物和胶体金-质控分子复合物均固定到标记垫上；

步骤3：在所述层析膜上分别设置一条IgM检测线、一条IgG检测线和一条质控线，其中，质控线上固定有能与质控分子特异性结合的生物分子，检测线上固定有鼠抗人IgM-μ链抗体和鼠抗人IgG-μ链抗体；

步骤4：将样品垫、全血过滤膜、标记垫、层析膜、吸水垫和底板构建成胶体金免疫层析试纸条；

步骤5：将胶体金免疫层析试纸条装卡；和

步骤6：将上述装条试剂卡、盛有样本缓冲液的滴瓶封装，所述样本缓冲液包含牛血清白蛋白组分V、表面活性剂、磷酸盐缓冲系统和防腐剂，pH值为6.5-7.5，其中，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为0.05～2％，所述表面活性剂浓度为0.05～2％，和所述防腐剂浓度为0.1-1％。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述牛血清白蛋白组分V的浓度为0.1-1％，表面活性剂TritonX-100的浓度为0.1-1％，防腐剂P300的浓度为0.1-0.5％。

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