CN111562370B - 一种基于胶体金的病毒抗体检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种基于胶体金的病毒抗体检测方法,属于病毒抗体检测技术领域,包括制作可拆卸的抗体检测卡和使用胶体金法检测抗体,胶体金法检测快速、操作便捷及结果准确可靠;抗体检测卡壳体包括面盖、底盒和推框,底盒内部前后左右各设置有一个滑座,推框通过滑座与底盒滑动连接,面盖下表面设置有压杆,通过将面盖和底盒分离,在底盒上设置滑座,并配合推框、压杆和弹簧实现面盖和底盒之间的可拆卸配合,方便在检测完成后对壳体的回收处理,本发明提供的方法具有快速、便捷准确、环保和可循环利用的优点。
Description
技术领域
本发明涉及病毒抗体检测技术领域,尤其是涉及一种基于胶体金的病毒 抗体检测方法。
背景技术
鉴于病毒的高传染性,对患者进行“早发现、早诊断、早隔离、早治疗”是控制疫情蔓延的有力措施。疫情初始,核酸检测被推荐为新冠肺炎的主要确诊手段。但在临床实践中,核酸检测可能受样本采集部位、采集方法、病程等因素的影响而出现假阴性结果。且由于核酸检测对检测环境和人员的要求较高,也为疾控中心和医院带来很大挑战。
病毒抗体IgM和IgG在疾病的不同发展阶段具有不同的变化规律,通过 IgM和IgG联合检测,可以实现从感染早起到恢复期的患者辅助诊断,更适 合于实际诊疗中不同疾病阶段患者的就诊需求,有助于降低漏诊率。
但是目前的抗体检测方法和应用于抗体检测的抗体卡为了方便生产,其 壳体多为一体注塑成型,无法拆开,每个抗体卡检测一次后就整体丢弃处理, 在疫情期间会造成大量的医疗垃圾,不符合环保的要求,所以极需要研发一 种快速、准确、简便、有效且环保的抗体检测方法及抗体检测卡。
发明内容
为了达到上述目的,本发明采用的技术方案为,一种基于胶体金的病毒 抗体检测方法,其特征在于,其包括如下步骤:
步骤S1:制作抗体检测卡,将2019-nCoV重组抗原金标结合物和兔IgG 金标结合物添加到结合垫;再以碳酸纤维素膜作为抗体区域,碳酸纤维素膜 依次设置有包被待测试物抗体的检测线和包被抗兔IgG抗体的质控线;最后 依次将样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和吸水纸依次固定在抗体检测卡壳体内的检测区域(23)形成抗体检测卡,保存备用;结合垫与碳酸纤维素膜的 检测线端接触,吸水纸与碳酸纤维素膜的质控线端接触;所述待测试物包括 抗人IgM抗体、抗人IgG抗体、抗人IgA抗体和抗人IgD抗体;
步骤S2:使用采血针获取受试者血液样本,将血液样本添加到抗体检测 卡的加样孔(11),样品落入样品垫并在吸水纸的作用下通过毛细作用依次 移动经过结合垫和碳酸纤维素膜,直至质控线处显示红色条带,观察其他检测线处是否显示红色条带并判断是否存在对应的抗原,完成检测。
优选的,所述的一种基于胶体金的病毒抗体检测方法还包括步骤S3,完 成检测后将抗体检测卡壳体打开,将样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和吸水 纸从抗体检测卡壳体上分离,回收抗体检测卡壳体,所述抗体检测卡为可拆 卸抗体检测卡。
优选的,所述抗体检测卡壳体包括面盖、底盒和推框,所述底盒内部左 右两侧各设置有一个U形滑座,所述U形滑座的U形开口均向左侧设置,所 述U形滑座的侧壁中部开设有贯穿U形滑座两侧侧壁的滑槽且滑槽一直向左边延伸至U形滑座左边边缘;所述底盒内部前后两侧各设置有一个L形滑座, 所述的L形滑座的长杆端与壳体长度方向平行,且短杆端垂直于壳体侧壁并 固定连接到壳体侧壁,L形滑座的长杆端与所在一侧的壳体侧壁之间有间隙, 所述L形滑座的长杆端侧壁中部开设有贯穿L形滑座侧壁和壳体侧壁的滑槽 且滑槽一直向左边延伸至L形滑座左边边缘,两个L形滑座和两个U形滑座 之间的位置为壳体检测区域;
所述推框左右两侧都设置有与U形滑座的U形两侧壁之间的间隙相匹配 的长条推杆,所述长条推杆向右延伸且最右端为圆角三角形状;所述推框前 后两侧都设置匹配于L形滑座的L形长杆端和壳体侧壁之间的间隙的T形推 杆,所述T形推杆的竖杆端向右延伸且最右端为圆角三角形状;
所述面盖对应样品垫处设置有加样孔,加样孔的一侧对应碳酸纤维素膜 处的面盖设置有结果显示窗,面盖的下表面设置有四个向下延伸的压杆,所 述压杆下表面左侧为与T形推杆或者长条推杆右端圆角三角形状相匹配的倾 斜面,所述倾斜面的上方设置有与T形推杆或者长条推杆右端圆角三角形状 相匹配的凹槽;
所述推框左右两边滑动的设置在U形滑座的滑槽内且长条推杆与U形间 隙的重合,推框的两个T形推杆的横杆分别滑动的设置在L形滑座的滑槽内, 且T形推杆的横杆远离推框的一端穿过壳体侧壁,T形推杆的竖杆重合于L 形长杆和壳体侧壁之间的间隙,推框的左侧通过弹簧弹性连接到壳体左侧侧 壁,所述面盖盖合在底盒上表面且四个压杆分别与两个长条推杆和两个T形 推杆相配合,两个长条推杆和两个T形推杆右端插入到压杆的凹槽。
优选的,所述的一种基于胶体金的病毒抗体检测方法还包括压框,所述 底盒中部为检测区域,所述检测区域的四个顶角设置有限位座,所述压框与 限位座相匹配并限制压框在水平方向的移动,所述压框压紧设置于检测区域 内的样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和吸水纸的边缘,压框顶部在面盖盖合时与面盖接触。
优选的,所述步骤S3包括将压框从抗体检测卡壳体上分离,压框作为 医疗废物处理。
优选的,所述面盖和底盒相互接触的边缘是相互匹配的倾斜面,倾斜的 拼合面可以增加面盖下表面和底盒上表面开口的面积差,提升安装面盖和底 盒时的容错率,安装时无需精细对准拼合,提升安装效率。
优选的,所述L形滑座长杆端的滑槽上部的长杆端侧壁设置有安装缺口, 方便推框在安装的时候,容易将T形推杆插入到壳体内壁。
优选的,所述T形推杆的横杆远离推框的一端设置有凹凸推压纹,增加 摩檫力,方便用手带动T形推杆和推框移动。
与现有技术相比,本发明的优点和积极效果在于:
1、通过胶体金法进行检测,具有快速、操作便捷及结果准确可靠的特 点,相比而言,其生产成本和检测成本均较低,操作人员不需经过专门技术 培训(需医疗机构人员),检测无特殊仪器设备,可单人份测定,且试剂稳 定、易保存,结果重复性好,检测标本种类广泛,特别适用于急诊检验、现 场检验、家庭检验及需要大面积推广的筛查项目的检验。
2、抗体检测卡壳体通过将面盖和底盒分离,在底盒上设置滑座,并配 合推框、压杆和弹簧实现面盖和底盒之间的可拆卸配合,方便在检测完成后 对壳体的回收处理,具有环保和可循环利用的优点。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案,下面将对实施例描述中所 需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的 一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动性的前提 下,还可以根据这些附图获得其他的附图。为了方便撰写,申请文本中的前、 后、左、右、上和下等方位指示均是以附图的方位为基础,不代表该特征包 含有特定的方位特征。
图1为本发明专利提供的检测方法的示意图。
图2为检测抗体卡的立体结构示意图;
图3为检测抗体卡隐藏部分面盖的立体结构示意图;
图4为检测抗体卡隐藏部分面盖的俯视结构示意图;
图5为图4沿剖视线切割后的剖视图;
图6为检测抗体卡的爆炸示意图;
图7为检测抗体卡的另一角度的爆炸示意图。
具体实施方式
为了能够更清楚地理解本发明的上述目的、特征和优点,下面结合 附图和实施例对本发明做进一步说明。需要说明的是,在不冲突的情况 下,本申请的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明,但是, 本发明还可以采用不同于在此描述的其他方式来实施,因此,本发明并 不限于下面公开说明书的具体实施例的限制。
实施例一,由说明书附图1-7可知,本方案一种基于胶体金的病毒 抗体检测方法,其包括如下步骤:
步骤S1:制作抗体检测卡,将2019-nCoV重组抗原金标结合物和兔 IgG金标结合物添加到结合垫;再以碳酸纤维素膜作为抗体区域,碳酸纤 维素膜依次设置有包被抗人IgM抗体的检测线并定义为μ链、包被抗人 IgG抗体的检测线并定义为γ链和包被抗兔IgG抗体的质控线并定义为C 线,γ链和μ链合并形成检测线定义为T线;最后依次将样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和吸水纸依次固定在抗体检测卡壳体内的检测区域23 形成抗体检测卡,保存备用;结合垫与碳酸纤维素膜的检测线端接触, 吸水纸与碳酸纤维素膜的质控线端接触。
步骤S2:使用采血针获取受试者血液样本,将血液样本添加到抗体 检测卡的加样孔11,样品落入样品垫并在吸水纸的作用下通过毛细作用 依次移动经过结合垫和碳酸纤维素膜,直至质控线处显示红色条带,观察其他检测线处是否显示红色条带并判断是否存在对应的抗原,完成检 测,结合垫包含示踪剂(2019-nCoV重组抗原金标结合物和兔IgG金标结 合物),样本中2019-nCoV IgM或IgG可与示踪剂相互反应形成复合物, 再与兔IgG金标结合物移动至硝酸纤维素膜上固定的抗体区域(检测线、 质控线)。
检测线区域包括抗人IgM(μ链)抗体和抗人IgG(γ链)抗体,质 控线区域包被抗兔IgG抗体。兔IgG金标结合物可被抗兔IgG抗体捕获, 再质控线(C线)处呈现红色条带,显示质控正常,2019-nCoV IgM或IgG 与示踪剂的复合物,可被抗人IgM(μ链)或抗人IgG(γ链)抗体捕获, 在测试线(T线)呈现红色条带,显示2019-nCoV抗体(IgM/IgG)阳性, 1-15分钟即可肉眼判读。
步骤S3,完成检测后将抗体检测卡壳体打开,将样品垫、结合垫、 碳酸纤维素膜和吸水纸从抗体检测卡壳体上分离,回收抗体检测卡壳体, 所述抗体检测卡为可拆卸抗体检测卡。
其中,需要重点指出的是,临床免疫学机理表明,不同病原体都是激 发机体免疫应答的抗原物质,病原体感染机体后这些抗原能诱导宿主产 生体液免疫/细胞免疫应答。作为体液免疫应答中的关键组成部分,免疫 球蛋白(即抗体)主要为IgG、IgM、IgA、IgD等。IgM和IgG的作用最 为关键,IgM是初次免疫应答中最早出现的抗体,亲和力较低,持续时间较短,IgM阳性提示急性期感染。IgG发挥主要保护作用,是再次免疫应 答产生的主要抗体,产生较晚,亲和力较强,持续时间较长,IgG阳性提 示病情进入中后期或存在既往感染。
实施例二,由说明书附图2-7可知,本方案的检测抗体卡包括壳体 和依次固定设置在壳体检测区域23内的样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜 和吸水纸,所述壳体包括面盖1、底盒2、推框3和压框4,所述底盒2 内部左右两侧各设置有一个U形滑座21,所述U形滑座21的U形开口均 向左侧设置,所述U形滑座21的侧壁中部开设有贯穿U形滑座21两侧 侧壁的滑槽5且滑槽5一直向左边延伸至U形滑座21左边边缘;所述底盒2内部前后两侧各设置有一个L形滑座22,所述的L形滑座22的长杆 端与壳体长度方向平行,且短杆端垂直于壳体侧壁并固定连接到壳体侧 壁,L形滑座22的长杆端与所在一侧的壳体侧壁之间有间隙,所述L形滑座22的长杆端侧壁中部开设有贯穿L形滑座22侧壁和壳体侧壁的滑 槽5且滑槽5一直向左边延伸至L形滑座22左边边缘,所述L形滑座22 长杆端的滑槽5上部的长杆端侧壁设置有安装缺口221,两个L形滑座 22和两个U形滑座21之间的位置为壳体检测区域23;
所述推框3左右两侧都设置有与U形滑座21的U形两侧壁之间的间 隙相匹配的长条推杆31,所述长条推杆31向右延伸且最右端为圆角三角形状;所述推框3前后两侧都设置匹配于L形滑座22的L形长杆端和壳 体侧壁之间的间隙的T形推杆32,所述T形推杆32的竖杆端向右延伸且 最右端为圆角三角形状;
所述面盖1对应样品垫处设置有加样孔11,加样孔11的一侧对应碳 酸纤维素膜处的面盖1设置有结果显示窗12,面盖1的下表面设置有四 个向下延伸的压杆13,所述压杆13下表面左侧为与T形推杆32或者长 条推杆31右端圆角三角形状相匹配的倾斜面131,所述倾斜面131的上 方设置有与T形推杆32或者长条推杆31右端圆角三角形状相匹配的凹 槽132;
所述推框3左右两边滑动的设置在U形滑座21的滑槽5内且长条推 杆31与U形间隙的重合,推框3的两个T形推杆32的横杆分别滑动的设置在L形滑座22的滑槽5内,且T形推杆32的横杆远离推框3的一 端穿过壳体侧壁并且设置有凹凸推压纹321,T形推杆32的竖杆重合于L 形长杆和壳体侧壁之间的间隙,推框3的左侧通过弹簧弹性连接到壳体 左侧侧壁,所述面盖1盖合在底盒2上表面且四个压杆13分别与两个长 条推杆31和两个T形推杆32相配合,两个长条推杆31和两个T形推杆 32右端插入到压杆13的凹槽132;所述底盒2中部为检测区域23,所述 检测区域23的四个顶角设置有限位座24,所述压框4与限位座24相匹配并限制压框4在水平方向的移动,所述压框4压紧设置于检测区域23 内的样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和吸水纸的边缘,压框4顶部在面 盖1盖合时与面盖1接触。
在上述方案中,所述面盖1和底盒2相互接触的边缘是相互匹配的倾 斜面。
其中,需要重点指出的是,在具体实施过程中,安装的时候先将样品垫、 结合垫、碳酸纤维素膜和吸水纸依次设置在检测区域23,放入压框4将 样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和吸水纸压紧,再盖合面盖1,此时压杆 13下方的倾斜面131与两种推杆的圆角三角形端部作用将推框3向左推 动,弹簧受到压缩;当面盖1下降到推杆端部越过倾斜面131后,由于弹簧的弹力,推杆端部与凹槽132配合快速将面盖1压下并压紧,实现 对面盖1的锁紧。
当检测完成后,可以通过手或者其他工具通过T形推杆32拨动推框, 解除对面盖的锁定后,即可将压框4、样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和 吸水纸丢弃作医疗废物处理,其余部分回收消毒,循环使用,或者在检 测量不大时还可以将压框4也进行回收,进行加强消毒并再次使用。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非是对本发明作其它 形式的限制,任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容 加以变更或改型为等同变化的等效实施例应用于其它领域,但是凡是未 脱离本发明技术方案内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的 任何简单修改、等同变化与改型,仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (6)
1.金标结合物在制备可循环使用的病毒抗体检测卡中的应用,其特征在于,其包括如下步骤:
步骤S1:制作抗体检测卡,将2019-nCoV重组抗原金标结合物和兔IgG金标结合物添加到结合垫;再以碳酸纤维素膜作为抗体区域,碳酸纤维素膜依次设置有包被待测试物抗体的检测线和包被抗兔IgG抗体的质控线;最后依次将样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和吸水纸依次固定在抗体检测卡壳体内的检测区域(23)形成抗体检测卡,保存备用;结合垫与碳酸纤维素膜的检测线端接触,吸水纸与碳酸纤维素膜的质控线端接触;所述待测试物包括抗人IgM抗体、抗人IgG抗体、抗人IgA抗体和抗人IgD抗体;
步骤S2:使用采血针获取受试者血液样本,将血液样本添加到抗体检测卡的加样孔(11),样品落入样品垫并在吸水纸的作用下通过毛细作用依次移动经过结合垫和碳酸纤维素膜,直至质控线处显示红色条带,观察其他检测线处是否显示红色条带并判断是否存在对应的抗原,抗体检测卡使用完毕;
步骤S3,将抗体检测卡壳体打开,将样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和吸水纸从抗体检测卡壳体上分离,回收抗体检测卡壳体,所述抗体检测卡为可拆卸抗体检测卡;
所述抗体检测卡壳体包括面盖(1)、底盒(2)和推框(3),所述底盒(2)内部左右两侧各设置有一个U形滑座(21),所述U形滑座(21)的U形开口均向左侧设置,所述U形滑座(21)的侧壁中部开设有贯穿U形滑座(21)两侧侧壁的滑槽(5)且滑槽(5)一直向左边延伸至U形滑座(21)左边边缘;所述底盒(2)内部前后两侧各设置有一个L形滑座(22),所述的L形滑座(22)的长杆端与壳体长度方向平行,且短杆端垂直于壳体侧壁并固定连接到壳体侧壁,L形滑座(22)的长杆端与所在一侧的壳体侧壁之间有间隙,所述L形滑座(22)的长杆端侧壁中部开设有贯穿L形滑座(22)侧壁和壳体侧壁的滑槽(5)且滑槽(5)一直向左边延伸至L形滑座(22)左边边缘,两个L形滑座(22)和两个U形滑座(21)之间的位置为壳体检测区域(23);
所述推框(3)左右两侧都设置有与U形滑座(21)的U形两侧壁之间的间隙相匹配的长条推杆(31),所述长条推杆(31)向右延伸且最右端为圆角三角形状;所述推框(3)前后两侧都设置匹配于L形滑座(22)的L形长杆端和壳体侧壁之间的间隙的T形推杆(32),所述T形推杆(32)的竖杆端向右延伸且最右端为圆角三角形状;
所述面盖(1)对应样品垫处设置有加样孔(11),加样孔(11)的一侧对应碳酸纤维素膜处的面盖(1)设置有结果显示窗(12),面盖(1)的下表面设置有四个向下延伸的压杆(13),所述压杆(13)下表面左侧为与T形推杆(32)或者长条推杆(31)右端圆角三角形状相匹配的倾斜面(131),所述倾斜面(131)的上方设置有与T形推杆(32)或者长条推杆(31)右端圆角三角形状相匹配的凹槽(132);
所述推框(3)左右两边滑动的设置在U形滑座(21)的滑槽(5)内且长条推杆(31)与U形间隙的重合,推框(3)的两个T形推杆(32)的横杆分别滑动的设置在L形滑座(22)的滑槽(5)内,且T形推杆(32)的横杆远离推框(3)的一端穿过壳体侧壁,T形推杆(32)的竖杆重合于L形长杆和壳体侧壁之间的间隙,推框(3)的左侧通过弹簧弹性连接到壳体左侧侧壁,所述面盖(1)盖合在底盒(2)上表面且四个压杆(13)分别与两个长条推杆(31)和两个T形推杆(32)相配合,两个长条推杆(31)和两个T形推杆(32)右端插入到压杆(13)的凹槽(132)。
2.根据权利要求1所述的金标结合物在制备可循环使用的病毒抗体检测卡中的应用,其特征在于,所述抗体检测卡壳体还包括压框(4),所述底盒(2)中部为检测区域(23),所述检测区域(23)的四个顶角设置有限位座(24),所述压框(4)与限位座(24)相匹配并限制压框(4)在水平方向的移动,所述压框(4)压紧设置于检测区域(23)内的样品垫、结合垫、碳酸纤维素膜和吸水纸的边缘,压框(4)顶部在面盖(1)盖合时与面盖(1)接触。
3.根据权利要求2所述的金标结合物在制备可循环使用的病毒抗体检测卡中的应用,其特征在于,所述步骤S3包括将压框(4)从抗体检测卡壳体上分离,压框(4)作为医疗废物处理。
4.根据权利要求3所述的金标结合物在制备可循环使用的病毒抗体检测卡中的应用,其特征在于,所述面盖(1)和底盒(2)相互接触的边缘是相互匹配的倾斜面。
5.根据权利要求4所述的金标结合物在制备可循环使用的病毒抗体检测卡中的应用,其特征在于,所述L形滑座(22)长杆端的滑槽(5)上部的长杆端侧壁设置有安装缺口(221)。
6.根据权利要求5所述的金标结合物在制备可循环使用的病毒抗体检测卡中的应用,其特征在于,所述T形推杆(32)的横杆远离推框(3)的一端设置有凹凸推压纹(321)。
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2020
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