CN111929442A - 一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,包括固定器、加样区、反应膜设置区和吸水垫设置区,其特征在于,试剂盒中包含有新型冠状病毒抗原检测卡和新型冠状病毒抗体检测卡两种检测卡,所述固定器固定装有稀释液的容器,所述加样区内设有样本垫,所述反应膜设置区内设有反应膜,所述吸水垫设置区内设有吸水垫,所述样本垫和所述反应膜之间依次设计有结合垫和加速垫,所述样本垫上设有样本孔。新型冠状病毒抗原检测卡的检测样本为唾液,新型冠状病毒抗体检测卡检测样本为血液,本发明样本前处理快速、简单,检测成本低廉,适于推广。

Description

一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒
技术领域
本发明涉及化合物检测技术领域,特别涉及一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,具体的说是应用胶体金免疫层析双抗体夹心法的原理来达到检测人唾液中的新型冠状病毒抗原同时利用捕获法包被鼠抗人IgM、鼠抗人IgG,胶体金标记重组新型冠状病毒抗原来检测人体血液中新型冠状病毒抗体的目的。
背景技术
冠状病毒是自然界广泛存在的一个大型病毒家族,因其形态在电镜下观察似王冠而得名,主要引起呼吸系统疾病。2020年2月11日,世界卫生组织(WHO)宣布,将把从2019 年12月开始出现的新型冠状病毒肺炎,正式命名为“COVID-19”,全称Coronavirus Disease2019,新型冠状病毒属于β属的新型冠状病毒,有包膜,颗粒呈圆形或椭圆形,常为多形性,直径60~140nm,其基因特征为单正链RNA,有包膜,包膜上有蘑菇状蛋白刺突使病毒体形如王冠状与SARSr-CoV和MERSr-CoV有明显区别,目前研究显示与蝙蝠SARS样冠状病毒(bat-SL-CoVZC45)同源性达85%以上。
感染新型冠状病毒患者初始症状多为发热、乏力、干咳,并逐渐出现重症表现,部分严重病例 可出现急性呼吸窘迫综合征或脓毒性休克,甚至死亡,而部分患者病症状轻微,甚至存在无临床症状的无症状患者,具备人传人的特点,一般潜伏期1- 14天,且潜伏期具有传染性,而无症状感染者也可能成为传染源,其主要通过呼吸道飞沫和密切接触传染传播,人群普遍易感,对于新型冠状病毒的确诊变得非常重要,如何快速且准确的确定是否患有新型冠状病毒的肺炎变成了目前难以解决的问题。
至今,仍有不少疑似病例因为检测效率不足等原因尚未确诊,如何大规模快速筛查疑似病例,供临床医生快速判断是否为新型冠状病毒肺炎,以便于快速隔离免于传染给更多的人,是亟需解决的问题。
目前的新型冠状病毒检测试剂盒,因研发周期短、样本收集不规范等问题,普遍存在检测假阴性高,容易漏检的问题;并且检测试剂盒的安全性也是亟需解决的另一个问题。
发明内容
本发明的目的是提供一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,用于新型冠状病毒的检测,试剂盒特异性好、敏感性高,检测成本低廉,适于推广。
为解决上述技术问题,本发明的技术方案为:
本发明提供一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,试剂盒内含有新型冠状病毒抗原检测卡盒新型冠状病毒抗体检测卡两种检测卡,本试剂盒检测卡采用侧流向免疫层析法,沿样本液流动方向依次设置有固定器、加样区、反应膜设置区和吸水垫设置区,所述固定器固定装有稀释液的容器,所述加样区内设有样本垫,所述反应膜设置区内设有反应膜,所述吸水垫设置区内设有吸水垫,所述样本垫和所述反应膜之间依次设计有结合垫和加速垫,所述样本垫上设有样本孔。
其中,优选地,新型冠状病毒抗原检测卡的所述T线和所述C线可互相平行,且与样本液流动方向垂直。
其中,优选地,新型冠状病毒抗体检测卡的所属M线、G线和C线互相平行,且与样本液流动方向垂直。
其中,优选地,所述吸水垫上可覆盖有封盖,封盖为防水材质的,用于固定检测卡的各个组件,避免样本试剂与外界环境中的物质发生反应,影响检测卡的检测效果,封盖上设有透明滑盖,透明滑盖可沿样本流动方向滑动15mm。
其中,优选地,所述样本垫的长度为16mm,所述结合垫和所述加速垫的长度均为4mm,所述反应膜的长度为25mm,所述吸水垫的长度为16mm。
其中,优选地,所述样本垫和所述结合垫设有2mm的重叠区,所述结合垫和所述加速垫设有2mm的重叠区,所述加速垫和所述反应膜设有2mm的重叠区。
其中,优选地,所述反应膜、所述样本垫、所述吸水垫通过双面胶固定在底板上。
其中,优选地,所述所述底板上设有针刺,用于刺破装有稀释液的容器。
其中,优选地,所述反应膜与所述底板之间设有隔离膜。
本发明的有益效果:
本发明采用侧流向免疫层析法,利用胶体金免疫层析双抗体夹心法的原理来达到检测人唾液中的新型冠状病毒抗原的目的,同时利用捕获法包被鼠抗人IgM、鼠抗人IgG,胶体金标记的重组新型冠状病毒抗原来检测人体血液中新型冠状病毒抗体的目的,检测方法快速、准确,降低检测成本,提高校测效率。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明中新型冠状病毒抗原检测卡的结构示意图;
图2图1沿A向视图;
图3为本发明中新型冠状病毒抗原检测卡的结果示意图;
图4为本发明中新型冠状病毒抗体检测卡的结构示意图;
图5为图4沿A向视图;
图6为为本发明中新型冠状病毒抗体检测卡的结果示意图;
图1中1、底板;2、反应膜;3、样本垫;4、结合垫(金标垫);5、加速垫;6、吸水垫;7、封盖;8、T线;9、C线;10、样本孔;11、针刺;12、卡底;13、显示窗口;14、稀释液;15、固定器;16、透明滑盖;17、间缝;
图4中1、底板;2、反应膜;3、样本垫;4、结合垫(金标垫);5、加速垫;6、吸水垫;7、封盖;8、T线;9、C线;10、样本孔;11、针刺;12、卡底;13、显示窗口;14、稀释液;15、固定器;16、透明滑盖;17、间缝;18、M线。
具体实施方式
下面将结合本发明具体实施例,对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
如图1、图4所示,本实施例提供一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,沿样本液流动方向依次设置有加样区、反应膜设置区和吸水垫设置区,加样区内设有样本垫3,反应膜设置区内设有反应膜2,吸水垫设置区内设有吸水垫6,样本垫3和反应膜2之间依次设有结合垫4和加速垫5,样本垫3上设有样本孔10。
本发明中包括的新型冠状病毒抗原检测卡结合垫4上包被有胶体金标记的新型冠状病毒抗原结构类似人工表达的蛋白片段单克隆抗体E7以及胶体金标记的鸡IgY抗体混合物,反应膜2上沿样本液流动方向依次设有包被有新型冠状病毒结构类似抗原人工表达的蛋白片段单克隆抗体H8的T线8和包被有羊抗鸡多克隆抗体的C线9。
本发明中包括的新型冠状病毒抗体检测卡结合垫4上包被有胶体金标记的重组新型冠状病毒抗原以及胶体金标记的鸡IgY抗体混合物,反应膜2上沿样本液流动方向依次设有包被有鼠抗人IgM单抗M线18、包被有鼠抗人IgG单抗的G线8和包被有羊抗鸡多克隆抗体的C线9,其中M线用于检测新型冠状病毒IgM抗体,G线用于检测新型冠状病毒IgG抗体。
其中,新型冠状病毒抗原检测卡的T线8与C线9平行,并与样本液的流动方向垂直。T线8靠近加速垫5,C线9靠近吸水垫6,新型冠状病毒抗体检测卡的M线18、G线8与C线9平行,并与样本液的流动方向垂直,M线18靠近加速垫5,C线9靠近吸水垫6。
其中,吸水垫6上覆盖有封盖7,封盖7为防水材质的,用于固定检测卡的各个组件,避免样本试剂与外界环境中的物质发生反应,影响检测卡的检测效果。
其中,样本垫3的长度为16mm,结合垫4和加速垫5的长度均为4mm,反应膜2的长度为25mm,吸水垫6的长度为16mm。
其中,反应膜2、样本垫3、吸水垫6通过双面胶固定在底板1上。
一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒中包括的新型冠状病毒抗原检测卡的检测原理:
当样本溶液中含有新型冠状病毒抗原时,在扩散过程中,样本中的新型冠状病毒抗原通过夹心法结合胶体金标记的新型冠状病毒抗原结构类似人工表达的蛋白片段单克隆抗体E7,同T线上的具有新型冠状病毒结构类似人工表达的蛋白片段抗体H8分别结合,T线显色,而C线的载体蛋白抗体可与胶体金标记的鸡IgY抗体分别结合,C线即显示红色印迹。当样本中新型冠状病毒抗原低于检测卡检测限时,胶体金标记的新型冠状病毒抗原结构类似人工表达的蛋白片段单克隆抗体E7与T线上的具有新型冠状病毒结构类似人工表达的蛋白片段抗体H8不结合,T线不显示红色印迹,液体渗透到C线时,C线上的抗载体蛋白抗体可与胶体金标记的鸡IgY抗体结合,C线显示红色。
一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒中包括的新型冠状病毒抗体检测卡的检测原理:
待测时,取适量样本加入检测卡样品孔中,在扩散过程中,若样本中含有适量活性IgM抗体,则该适量活性IgM抗体与胶体金标记重组新型冠状病毒抗原结合,该免疫复合物在M线处与包被的鼠抗人IgM抗体可形成复合物,M线显色,标志样本中新型冠状病毒IgM抗体阳性,若样本中含有适量活性IgG抗体,则该适量活性IgG抗体与胶体金标记重组新型冠状病毒抗原结合,该免疫复合物在G线处与包被的鼠抗人IgG抗体可形成复合物,G线显色,标志样本中新型冠状病毒IgG抗体阳性,C线的载体蛋白抗体可与胶体金标记的鸡IgY抗体分别结合,C线即显示红色印迹,若检测线G和M都不显色,显示待测样本为阴性结果。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (11)

1.一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:包括新型冠状病毒抗原检测卡和新型冠状病毒抗体检测卡两种检测卡,沿样本液流动方向依次设置有加样区、反应膜设置区和吸水垫设置区,所述加样区内设有样本垫,所述反应膜设置区内设有反应膜,所述吸水垫设置区内设有吸水垫,所述样本垫和所述反应膜之间依次设计有结合垫和加速垫,所述样本垫上设有样本孔。
2.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:试剂盒内包括的新型冠状病毒抗原检测卡所述结合垫上包被有胶体金标记的新型冠状病毒抗原结构类似人工表达的蛋白片段单克隆抗体E7以及胶体金标记的鸡IgY抗体混合物,所述反应膜上沿样本液流动方向依次设有包被有新型冠状病毒结构类似抗原人工表达的蛋白片段单克隆抗体H8的T线和包被有羊抗鸡多克隆抗体的C线。
3.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:试剂盒内包括的新型冠状病毒抗体检测卡所述结合垫上包被有胶体金标记的重组新型冠状病毒抗原和质控金标记抗体复合物,所述反应膜上沿样本液流动方向依次设有包被有鼠抗人IgM单抗的M线,包被有鼠抗人IgG单抗的G线和包被有质控抗体的C线。
4.根据权利要求3所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:所述新型冠状病毒抗体检测卡M线用于检测新型冠状病毒IgM抗体;G线用于检测新型冠状病毒IgG抗体。
5.根据权利要求2所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:所述T线与所述C线平行,并与样本液的流动方向垂直。
6.根据权利要求3所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:所述M线 、G线与所述C线平行,并与样本液的流动方向垂直。
7.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:所述吸水垫上覆盖有封盖。
8.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:所述样本垫的长度为16mm,所述结合垫和所述加速垫的长度均为4mm,所述反应膜的长度为25mm,所述吸水垫的长度为16mm。
9.根据权利要求8所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:所述样本垫和所述结合垫设有2mm的重叠区,所述结合垫和所述加速垫设有2mm的重叠区,所述加速垫和所述反应膜设有2mm的重叠区。
10.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:所述反应膜、所述样本垫、所述吸水垫通过双面胶固定在底板上。
11.根据权利要求8所述的一种新型冠状病毒抗原和抗体检测试剂盒,其特征在于:所述反应膜与所述底板之间设有隔离膜。
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FEIYUN CUI等: "Diagnostic methods and potential portable biosensors for coronavirus disease 2019", 《BIOSENSORS AND BIOELECTRONICS》, vol. 165 *
ZHENGTU LI等: "Development and Clinical Application of A Rapid IgM-IgG Combined Antibody Test for SARS-CoV-2", 《INFECTION DIAGNOSIS》, vol. 92, no. 9 *
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