CN111912980A - 唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置及其制备方法 - Google Patents

唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置及其制备方法 Download PDF

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Abstract

一种唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，包括卡壳、含处理液的收集瓶、采样拭子，所述卡壳上并列设有抗原检测试纸条和抗体检测试纸条；所述抗原检测试纸条和抗体检测试纸条均包括背板以及依次衔接并设置在背板上的样品垫、金标垫、NC膜和吸水滤纸，所述NC膜上表面设置有检测线和质控线，所述质控线设于靠近吸水纸一侧，检测线设于靠近样品垫一侧；本发明的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置取样简单方便，易为受测者接受，可有效降低医护人员感染风险，采样更为安全无创伤，无需大型设备仪器，操作简单，结果易判断，适用于大规模人群的自我检测，抗原和抗体联合检测可缩短窗口期，灵敏度高。

Description

唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置及其制 备方法
技术领域
本发明属于试纸技术领域，具体涉及一种唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置及其制备方法。
背景技术
新型冠状病毒感染的肺炎是一种急性感染性肺炎，2020年1月30日，世界卫生组织将新型冠状病毒感染肺炎疫情列为国际关注的突发公共卫生事件(PHEIC)。
感染新型冠状病毒后，患者初始症状多为发热、乏力和干咳，并逐渐出现呼吸困难等严重表现。多数患者预后良好，部分严重病例可出现急性呼吸窘迫综合征或脓毒症休克，甚至死亡。目前，缺乏针对病原体的有效抗病毒药物，以隔离治疗、对症支持治疗为主。新型冠状病毒的检测，急性期以核酸、抗原、IgM/IgG检测为主，康复期以IgG检测为主。
核酸检测作为新型冠状病毒检测的金标准，通过获取鼻咽拭子样本、痰液或肺泡灌洗液等样本，经过处理后进行PCR检测样本中是否含有新型冠状病毒的核酸，整个测试需要在PCR实验室完成，耗时2-3小时，且由于样本收集的时间过早或过完，保存、运输、处理等不当，容易引起结果误判，加之需要设备仪器，反而不利于基层或大规模人群的初筛。
人体感染新型冠状病毒后，病毒在体内复制，抗原同核酸同步出现。相比抗体检测，抗原检测可以提前2-3周实现早期诊断，但要筛选出具有特异性诊断价值的抗原、筛选出与抗原结合最好的抗体，技术难度更大。在出现发热、咳嗽等症状的第一周，新冠患者唾液中的病毒载量就达到了最高峰。同时，约有1/3的患者唾液中检出新冠病毒RNA的时间会持续20天以上，甚至在临床康复之后仍能检出。
唾液中的免疫球蛋白主要有2类：IgA（90%-98%）和IgG(1%-10%)，其余为极少量的IgM、IgD和IgE。血清中的IgG和IgA通过龈沟液、黏膜渗出液、唾液腺腺泡的超滤作用进入口腔，实现唾液中新型冠状病毒总抗的检测。
抗体检测一般为血液样本，需要通过针刺或静脉抽血，属有创取样；核酸检测所用的鼻拭子或咽拭子，极易造成暴露感染的风险，同时极易引起不适，且由于样本收集的时间过早或过完，保存、运输、处理等不当，容易引起结果误判，加之需要设备仪器，反而不利于基层或大规模人群的初筛。
李兰娟院士团队研究使用唾液样本代替鼻咽样本进行病毒载量检测，表明使用唾液进行病毒载量检测的可行性。鼻咽标本的收集过程会使患者感到不适，并给医护人员带来感染的风险。而自行收集的唾液更容易为患者接受，对于医护人员来说更安全。
有鉴于此，为解决目前新型冠状病毒检测中的问题，有必要开发一种可以联合检测唾液样本中新型冠状病毒抗原和抗体的快速检测试剂，为新型冠状病毒检测提供感染风险低、安全无创、高性价比、快速简便、可自行检测的早期筛查和辅助诊断的手段。
发明内容
本发明的目的是提供一种唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置及其制备、使用方法。
一种唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，包括卡壳、含处理液的收集瓶、采样拭子，所述卡壳上并列设有抗原检测试纸条和抗体检测试纸条；
所述抗原检测试纸条和抗体检测试纸条均包括背板以及依次衔接并设置在背板上的样品垫、金标垫、NC膜和吸水滤纸，所述NC膜上表面设置有检测线和质控线，所述质控线设于靠近吸水纸一侧，检测线设于靠近样品垫一侧；
所述抗原检测试纸条中：利用双抗体夹心法原理检测唾液样本中新型冠状病毒的抗原，所述金标垫带有胶体金颗粒标记新冠病毒抗体Ab2，所述检测线上包被有新型冠状病毒抗体Ab1；所述质控线带有根据胶体金标记新冠抗体的来源而进行相应选择的抗体，抗体包括抗人抗体、抗鼠抗体或独立质控，所述独立质控包括鼠源抗体IgG和抗鼠IgG二抗的配对、兔源抗体IgG和抗兔IgG二抗配对或鸡源抗体IgY和抗鸡IgY二抗配对中的一种。
所述抗体检测试纸条中：利用捕获法原理检测唾液样本中新型冠状病毒的总抗体，所述金标垫带有胶体金颗粒标记新型冠状病毒重组抗原，所述检测线上包被有混合的抗人IgG抗体和抗人IgA抗体；所述质控线带有鼠源抗体IgG和抗鼠IgG二抗的配对、兔源抗体IgG和抗兔IgG二抗配对或鸡源抗体IgY和抗鸡IgY二抗配对中的一种。
优选的是，所述收集瓶包括大头盖子小头盖子。
优选的是，所述处理液的制备方法为：在基础液1中加入乙二胺四乙酸和曲拉通，或加入氯化钠、S9和聚乙烯吡咯烷酮；
其中，所述基础液1包含三羟甲基氨基甲烷、盐酸、乙醇和硫氰酸胍。
优选的是，所述处理液的制备方法为：在基础液2中加入甘油、氢氧化钠、胆酸，或加入酪蛋白、牛血清白蛋白、氯化钙；
其中，所述基础液2包含柠檬酸钠、乙醇、十二烷基硫酸钠。
优选的是，所述采样拭子包括手柄和设于手柄端部端的刷头，刷头材质包括棉、海绵或尼龙植绒。
进一步的，所述手柄为塑料材质，手柄近刷头一侧设有折断点，以便采样后将刷头和手柄折断分离，并将刷头密闭在含处理液的收集瓶中。
优选的是，所述卡壳为塑料卡壳，卡壳上设有加样孔和视窗，其中，所述加样孔对应设于样品垫处。
一种唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置的制备方法，包括：
S1.抗原检测试纸条的制备
S1.1 .胶体金制备
胶体金制备：加热1000份超纯水至沸腾，向沸水中加入4 份 10%氯金酸溶液，快速加入4.5份10%柠檬酸三钠溶液，搅拌混匀；保继续持溶液沸腾，直到液体呈酒红色即停止加热，冷却至室温后补足失水；
S1.2. 新型冠状病毒特异性抗体Ab2金结合物制备
S1.2.1 .新型冠状病毒Ab2标记
取100份胶体金溶液，加入1～2份 0.2M碳酸钾溶液，混合均匀；缓慢加入Ab2使其终浓度为0.02～0.1mg/ml，继续搅拌30分钟，加入2份 10％ BSA溶液封闭20分钟，选择12000～15000r/min离心30分钟，弃去上清液，用50份缓冲液1重悬，得到新型冠状病毒Ab2金结合物溶液，其中，所述缓冲液1pH值为7.0-8.0，含0.1M Tris-HCl buffer，1%BSA；
S1.2.2 .新型冠状病毒Ab2金标垫制备
取S1.2.1中新型冠状病毒Ab2金结合溶液，用缓冲液2稀释后以滚轮推动溶液，均匀的浸润玻璃纤维，稀释比为1:1～1:4，其中，缓冲液2 pH值为7.0-8.0，含0.1M Tris-HClbuffer，1%-5% BSA，0.5%-1% PVP、0.5%-2% PEG，5%-20% 蔗糖；
S1.3 .新型冠状病毒特异性抗体Ab1包被板制备
以pH7.4，0.01M PBS溶液稀释Ab1至0.8～1.5mg/ml作为检测线工作液，以pH7.4，0.01MPBS稀释羊抗人IgG抗体至0.5～1.0mg/ml作为质控线工作液；取NC膜贴在背板上，划膜仪设置0.5～2.0ul/cm出液量进行划膜后干燥。
S1.4. 样品垫制备
将玻璃纤维浸润在样品垫处理液中，静置30分钟后取出，沥干水分，自然干燥后备用，其中，所述样品垫处理液pH值为8.0-9.0，含0.05M-1M Tris-HCl，0.5%-1% PVP，0.5%PEG，0.2%-5% BSA。
S1.5 .抗原检测试制备
S1.5.1. 裁条
将金标垫、样品垫、吸水纸裁成合适宽度。
S1.5.2 .贴板
将吸水纸、金标垫、样品垫贴在包被板上，并裁成所需宽度。
S2.抗体检测试纸条的制备
S2.1.胶体金制备
加热1000份超纯水至沸腾，向沸水中加入4份10%氯金酸溶液，快速加入4.5份10%柠檬酸三钠溶液，搅拌混匀；保继续持溶液沸腾，直到液体呈酒红色即停止加热，冷却至室温后补足失水。
S2.2.新型冠状病毒重组抗原金结合物制备
S2.2.1. 新型冠状病毒重组抗原标记
取100份胶体金溶液，加入3～5 份0.2M碳酸钾溶液，混合均匀；缓慢加入新冠重组抗原使其终浓度为0.05～0.2mg/ml，继续搅拌30分钟，加入2份10％ BSA溶液封闭20分钟，然后12000～15000r/min离心30分钟，弃去上清液，用50份缓冲液1重悬，得到新型冠状病毒重组抗原金结合物溶液。
S2.2.2.鼠IgG标记
取100份胶体金溶液，加入1～2份0.2M碳酸钾溶液，混合均匀；缓慢加入新冠重组抗原使其终浓度为0.05～0.1mg/ml，继续搅拌30分钟，加入2份 10％ BSA溶液封闭20分钟，选择12000～15000r/min离心30分钟，弃去上清液，用50份缓冲液1重悬，得到新型冠状病毒重组抗原金结合物溶液。
S2.2.3.新型冠状病毒重组抗原金标垫制备
取S2.2.1中新型冠状病毒重组抗原金结合溶液，另取鼠IgG金结合物溶液，分别用缓冲液2稀释后,以滚轮推动溶液，均匀的浸润玻璃纤维，其中，新型冠状病毒重组抗原的稀释比为1:1～1:3，鼠IgG稀释比为1:5～1:10。
S2.3.抗人抗体包被板制备
S2.3.1.包被板制备
以pH7.4 ，0.01M PBS溶液稀释抗人IgG抗体至0.8～2mg/ml，稀释抗人IgA抗体至0.6～2mg/ml，作为检测线工作液，以pH7.4，0.01M PBS稀释羊抗鼠IgG抗体至0.5～1.0mg/ml，作为质控线工作液。取NC膜贴在背板上，划膜仪设置0.5～2.0ul/cm出液量进行划膜后干燥。
S2.4.样品垫制备
将玻璃纤维浸润在样品垫处理液中，静置30分钟后取出，沥干水分，自然干燥后备用，其中，所述样品垫处理液pH值为8.0-9.0，含0.05M-1M Tris-HCl，0.5%-1% PVP，0.5%PEG，0.2%-5% BSA。
S2.5.抗体检测试纸条制备
S2.5.1 .裁条
将金标垫、样品垫、吸水纸裁成合适宽度。
S2.5.2.贴板
将吸水纸、金标垫、样品垫贴在包被板上，并裁成所需宽度。
S3.抗原抗体联合检测卡制备
将抗原检测试纸条和抗体检测试纸条装在卡壳中，盖上盖子经压壳机压紧，装于含干燥剂的铝箔袋中。
S4.处理液的配置及分装
将处理液按1ml-2ml/瓶分装入处理瓶中，旋紧大头和小头盖子。
优选的是，所述快速联合检测装置在样本采集及测试时，采样拭子和收集瓶共同组成采样系统，采集样本时，以刷头刮擦上下牙龈线各5-6次，再将刷头翻面，轻柔擦拭咽喉和扁桃体5-6次，拧开收集瓶大头盖子，将刷头放入含处理液的收集瓶中，折下刷头，旋紧大头盖子。上下颠倒收集瓶使样本充分混匀。
进一步的，测试时，将测试卡放置在平整桌面上，拧开收集瓶的小头盖子，于加样孔中各滴加3-4滴，记录时间，10分钟读数。
所述采样系统采集的样本包括牙龈液、龈沟液及咽喉液和扁桃体液。
本发明的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，至少具有以下优点：
1.取样简单方便，易为受测者接受，可有效降低医护人员感染风险，采样更为安全无创伤，无需大型设备仪器，操作简单。
2.结果易判断，适用于大规模人群的自我检测，抗原和抗体联合检测可缩短窗口期，灵敏度高，抗原联合总抗体检测确保灵敏度。
3.适用范围广，可用于出现相应症状的人群、对鼻咽拭子取样不适感较强的人群、不能取血或晕血人群、面临较大感染风险的医务工作者、治愈者及疫苗注射者群体等更为广泛的人群筛查；还可应用于基础医疗条件差或偏远地区、医疗物资严重紧缺不足地区、有较大感染风险的地区等，以一种更为安全便捷的筛查和辅助诊断的手段发挥作用。
4.检测高效便捷，可在10分钟同时完成抗原和抗体的检测,仅需1次取样，即可同时完成抗原和抗体检测。采样方便，2分钟即可完成样本采集，测试过程10分钟出结果，全程仅需20分钟即可完成；较之鼻拭子、咽拭子取样过程更为简单方便，更易接受，无需样本处理，降低医护人员感染风险；较之血液样本，采样更为安全无创伤；抗原和抗体联合检测可缩短窗口期，实现早发现早隔离。
5.通过是否出现红色反应线判断结果，采集样本、检测、判断均可参照说明书自行完成，适用于大规模人群或家庭、个人的自我检测。
6.样本采集后密闭在处理液内，且处理液中的部分化学成分使病毒失去活性，有效防止操作者被感染。
附图说明
图1为快速联合检测装置测试结果呈阳性的三种表现形式。
图2为快速联合检测装置测试结果呈阴性的表现形式。
图3为快速联合检测装置测试结果的四种无效表现形式。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”，“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
一种唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，包括卡壳、含处理液的收集瓶、采样拭子，所述卡壳上并列设有抗原检测试纸条和抗体检测试纸条；
所述抗原检测试纸条和抗体检测试纸条均包括背板以及依次衔接并设置在背板上的样品垫、金标垫、NC膜和吸水滤纸，所述NC膜上表面设置有检测线和质控线，所述质控线设于靠近吸水纸一侧，检测线设于靠近样品垫一侧；
本实施例中，依托胶体金免疫层析平台，采用双抗体夹心法检测唾液中新型冠状病毒抗原，将特异性的新型冠状病毒抗体Ab1固定在NC膜上作为检测线，依据胶体金标记新冠抗体的来源（人源、鼠源）选择相应的抗人抗体、抗鼠抗体作为质控线，也可选择独立质控。将特异性的新型冠状病毒抗体Ab2同纳米胶体金颗粒偶联并固定在玻璃纤维上，若唾液样本中含有新冠抗原，样本滴加在样品垫上，层析至纳米胶体金颗粒偶联的新冠抗体Ab2时，会先形成“抗原-抗体Ab2-胶体金”复合物，继续层析至NC膜上，同固定在NC膜上的抗体Ab1形成抗体-抗原-抗体夹心，即抗体Ab1-抗原-抗体Ab2-胶体金，检测线处产生红色反应线，判断为阳性；若唾液样本中无新冠抗原，则无法形成夹心，检测线处没有红色反应线，判断为阴性；无论样本中是否含有新冠抗原，抗体Ab2-胶体金层析至NC膜，都会与质控线结合，产生红色反应线，作为判断试剂有效的质控线。
依托胶体金免疫层析平台，采用捕获法检测唾液中新型冠状病毒总抗体，将抗人IgG抗体和抗人IgA抗体混合后固定在NC膜上作为检测线，将新型冠状病毒重组抗原同纳米金颗粒偶联并固定在玻璃纤维上，若唾液样本中含有新冠抗体，新冠抗体会首先同胶体金偶联的新冠重组抗原结合，形成“新冠抗体-新冠抗原-胶体金” 复合物，层析NC膜上，同固定在NC膜上的抗人IgG/IgA形成“抗人抗体-新冠抗体-新冠抗原-胶体金”复合物，检测线处产生红色反应线，判断为阳性；若唾液样本中无新冠抗体则检测线处没有红色反应线，判断为阴性；无论样本中是否含有新冠抗体，胶体金标记的鼠IgG和NC膜上预先固定的羊抗鼠IgG抗体都会产生红色反应线作为质控，确保试剂的有效性。或者胶体金标记的兔IgG和NC膜上的羊抗兔IgG抗体配对，或者胶体金标记的鸡IgY和NC膜上的羊抗鸡IgY抗体配对均可以作为质控。
若抗原为阳性，无论抗体阴性或阳性，均判断为阳性；若抗原和抗体均为阴性，判断为阴性，但疑似病例需临床诊断；若抗原为阴性、抗体为阳性，判断阳性，可能为治愈或注射疫苗者。
将唾液抗原检测试纸条和抗体检测试纸条装与联检卡壳中，可实现1份样本同时完成唾液中抗原和抗体的检测，检测时间仅需10-15分钟，通过判断有无红色反应线即可实现结果判读，简单、便捷、快速。
实施案例
一、联合检测卡
1. 抗原检测试纸条的制备
1.1胶体金制备
胶体金制备：加热1L超纯水至沸腾，向沸水中加入4 ml 10%氯金酸溶液，快速加入4.5ml 10%柠檬酸三钠溶液，搅拌混匀；保继续持溶液沸腾，直到液体呈酒红色即停止加热，冷却至室温后补足失水。
1.2 新型冠状病毒特异性抗体Ab2金结合物制备
1.2.1 新型冠状病毒特异性抗体来源
新型冠状病毒特异性抗体Ab2购自常州天地人和生物技术有限公司，该抗体为人源的单克隆抗体，为新型冠状病毒的IgG抗体。
1.2.2新型冠状病毒Ab2标记
取100ml胶体金溶液，加入1.8ml 0.2M碳酸钾溶液，混合均匀；缓慢加入Ab2使其终浓度为0.06mg/ml左右，继续搅拌30分钟，加入2ml 10％ BSA溶液封闭20分钟，选择15000r/min离心30分钟，弃去上清液，用50ml缓冲液（0.1M Tris-HCl buffer，1%BSA，pH8.0）重悬，得到新型冠状病毒Ab2金结合物溶液。
1.2.3 新型冠状病毒Ab2金标垫制备
取1.2.1中新型冠状病毒Ab2金结合溶液，用缓冲液（0.1M Tris-HCl buffer，1%BSA，0.5%PVP、0.5%PEG，10%蔗糖，pH8.0）稀释后浸润玻璃纤维，稀释比为1:4。
1.3 新型冠状病毒特异性抗体Ab1包被板制备
1.3.1 新型冠状病毒特异性抗体来源
新型冠状病毒特异性抗体Ab2购自常州天地人和生物技术有限公司，该抗体为人源的单克隆抗体，为新型冠状病毒的IgM抗体。
1.3.2 新型冠状病毒特异性抗体Ab1包被板制备
以pH7.4 0.01M PBS溶液稀释Ab1至1.5mg/ml作为T线（检测线）工作液，以pH7.4 0.01MPBS稀释羊抗人IgG抗体至0.5mg/ml作为C线（质控线）工作液。取NC膜贴在背板上，划膜仪设置1.5ul/cm出液量进行划膜后干燥。
1.4 样品垫制备
制备样品垫处理液（0.05M Tris-HCl，0.5%PVP，0.5%PEG，0.2%BSA，pH8.0）并处理玻璃纤维，自然干燥后备用。
1.5 试纸条制备
1.5.1 裁条
将金标垫、样品垫、吸水纸裁成合适宽度。
1.5.2 贴板
将吸水纸、金标垫、样品垫，按要求贴在包被板上，并裁成所需试纸条的宽度。
2抗体检测试纸条的制备
2.1胶体金制备
胶体金制备：加热1L超纯水至沸腾，向沸水中加入4 ml 10%氯金酸溶液，快速加入4.5ml 10%柠檬酸三钠溶液，搅拌混匀；保继续持溶液沸腾，直到液体呈酒红色即停止加热，冷却至室温后补足失水。
2.2 新型冠状病毒重组抗原金结合物制备
2.2.1 新型冠状病毒重组抗原来源
新型冠状病毒重组抗原购自厦门万渤生物技术有限公司，为N蛋白的重组抗原，经测评其特异性强，灵敏度高。
2.2.2 新型冠状病毒重组抗原标记
取100ml胶体金溶液，加入5ml 0.2M碳酸钾溶液，混合均匀；缓慢加入新冠重组抗原使其终浓度为0.1mg/ml左右，继续搅拌30分钟，加入2ml 10％ BSA溶液封闭20分钟，选择15000r/min离心30分钟，弃去上清液，用50ml缓冲液（0.1M Tris-HCl buffer，1%BSA，pH8.0）重悬，得到新型冠状病毒重组抗原金结合物溶液。
2.2.3 鼠IgG标记
取100ml胶体金溶液，加入1ml 0.2M碳酸钾溶液，混合均匀；缓慢加入新冠重组抗原使其终浓度为0.06mg/ml左右，继续搅拌30分钟，加入2ml 10％ BSA溶液封闭20分钟，选择15000r/min离心30分钟，弃去上清液，用50ml缓冲液（0.1M Tris-HCl buffer，1%BSA，pH8.0）重悬，得到新型冠状病毒重组抗原金结合物溶液。
2.2.4 新型冠状病毒重组抗原金标垫制备
取2.2.1中新型冠状病毒重组抗原金结合溶液和鼠IgG金结合物溶液，用缓冲液（0.1MTris-HCl buffer，1%BSA，0.5%PVP、0.5%PEG，10%蔗糖，pH8.0）稀释后浸润玻璃纤维，新型冠状病毒重组抗原的稀释比为1:1，鼠IgG稀释比为1:10。
2.3抗人抗体包被板制备
2.3.1抗人抗体来源
抗人IgG抗体购自厦门万渤生物技术有限公司，抗人IgA抗体购自奥创生物技术有限公司，该2个抗体均为鼠源抗体。
2.3.2包被板制备
以pH7.4，0.01M PBS溶液稀释抗人IgG抗体至2mg/ml，稀释抗人IgA抗体至2mg/ml，作为T线（检测线）工作液，以pH7.4 0.01M PBS稀释羊抗鼠IgG抗体至0.5mg/ml，作为C线（质控线）工作液。取NC膜贴在背板上，划膜仪设置1.5ul/cm出液量进行划膜后干燥。
2.4 样品垫制备
制备样品垫处理液（0.05M Tris-HCl，0.5%PVP，0.5%PEG，0.2%BSA，pH8.0）并处理玻璃纤维，自然干燥后备用。
2.5 试纸条制备
2.5.1 裁条
将金标垫、样品垫、吸水纸裁成合适宽度。
2.5.2 贴板
将吸水纸、金标垫、样品垫，按要求贴在包被板上，并裁成所需试纸条的宽度。
3. 抗原抗体联合检测卡制备
将抗原检测试纸条和抗体检测试纸条装在卡壳中，并盖好盖子经压壳机压紧，装于含干燥剂的铝箔袋中。
4. 处理液的配置及分装
按配方：1M三羟基甲基氨基甲烷，用盐酸调节pH至8.4，2.5M硫氰酸胍，30%乙醇，0.1M乙二胺四乙酸，1%曲拉通，0.9%氯化钠，1%S9,0.5%聚乙烯吡咯烷酮，配置溶液。按1ml/管分装到处理瓶中。
二、样本采集及测试
以采样拭子的海绵头刮擦上下牙龈线各5-6次，将海绵头翻面，轻柔擦拭咽喉和扁桃体5-6次，拧开收集瓶大头盖子，将海绵头放入含处理液的收集瓶中，折断手柄，旋紧大头盖子。上下颠倒收集瓶使样本充分混匀。
测试时，将测试卡放置在平整桌面上，拧开收集瓶的小头盖子，于加样孔中各滴加3-4滴，记录时间，10分钟读数。
三、结果判断：
如图1所示，快速联合检测装置测试呈阳性的三种表现形式：
①抗原阳性，抗体阴性，即抗原质控线和检测测线均为红色，抗体仅红色质控线；
②抗原阴性，抗体阳性，即抗原仅红色质控线，抗体质控线和检测线均为红色；
③抗原阳性，抗体阳性，即抗原和抗体均出现质控线和检测线。
如图2所示，快速联合检测装置测试呈阴性：抗原和抗体均为阴性，即抗原和抗体均只显示质控线。
如图3所示，快速联合检测装置测试的几种无效表现：质控区（C）无红色反应线出现，检测无效，建议此时用新测试卡重新测试。
四、检测结果
将上述联合检测唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速检测试剂，在医护人员协助下获取确证的新型冠状病毒阳性患者唾液样本20份，其中18份检出阳性，该18份阳性中有5例仅抗体阳性，为已治愈患者。获取新型冠状阴性健康人群样本50例，全为阴性。初步确定试纸条的敏感性>90%，说明该检测方式可行。
本发明一种联合检测唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速检测试剂的开发，相较于鼻咽标本的收集过程的不适和感染风险、血液样本的创伤性，自行收集的唾液更易接收且更为安全。可应用于基础医疗条件差或偏远地区、医疗物资严重紧缺不足地区、有较大感染风险的地区等，以一种更为安全便捷的筛查和辅助诊断的手段发挥作用。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。

Claims (10)

1.一种唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，其特征在于，包括卡壳、含处理液的收集瓶、采样拭子，所述卡壳上并列设有抗原检测试纸条和抗体检测试纸条；
所述抗原检测试纸条和抗体检测试纸条均包括背板以及依次衔接并设置在背板上的样品垫、金标垫、NC膜和吸水滤纸，所述NC膜上表面设置有检测线和质控线，所述质控线设于靠近吸水纸一侧，检测线设于靠近样品垫一侧；
所述抗原检测试纸条中：利用双抗体夹心法原理检测唾液样本中新型冠状病毒的抗原，所述金标垫带有胶体金颗粒标记新冠病毒抗体Ab2，所述检测线上包被有新型冠状病毒抗体Ab1；所述质控线带有根据胶体金标记新冠抗体的来源而进行相应选择的抗体，抗体包括抗人抗体、抗鼠抗体或独立质控，所述独立质控包括鼠源抗体IgG和抗鼠IgG二抗的配对、兔源抗体IgG和抗兔IgG二抗配对或鸡源抗体IgY和抗鸡IgY二抗配对中的一种；
所述抗体检测试纸条中：利用捕获法原理检测唾液样本中新型冠状病毒的总抗体，所述金标垫带有胶体金颗粒标记新型冠状病毒重组抗原，所述检测线上包被有混合的抗人IgG抗体和抗人IgA抗体；所述质控线带有鼠源抗体IgG和抗鼠IgG二抗的配对、兔源抗体IgG和抗兔IgG二抗配对或鸡源抗体IgY和抗鸡IgY二抗配对中的一种。
2.根据权利要求1所述的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，其特征在于，所述收集瓶包括大头盖子小头盖子。
3.根据权利要求2所述的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，其特征在于，所述处理液的制备方法为：在基础液1中加入乙二胺四乙酸和曲拉通，或加入氯化钠、S9和聚乙烯吡咯烷酮；
其中，所述基础液1包含三羟甲基氨基甲烷、盐酸、乙醇和硫氰酸胍。
4.根据权利要求2所述的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，其特征在于，所述处理液的制备方法为：在基础液2中加入甘油、氢氧化钠、胆酸，或加入酪蛋白、牛血清白蛋白、氯化钙；
其中，所述基础液2包含柠檬酸钠、乙醇、十二烷基硫酸钠。
5.根据权利要求1所述的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，其特征在于，所述采样拭子包括手柄和设于手柄端部端的刷头，刷头材质包括棉、海绵或尼龙植绒。
6.根据权利要求5所述的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，其特征在于，所述手柄为塑料材质，手柄近刷头一侧设有折断点，以便采样后将刷头和手柄折断分离，并将刷头密闭在含处理液的收集瓶中。
7.根据权利要求1所述的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置，其特征在于，所述卡壳为塑料卡壳，卡壳上设有加样孔和视窗，其中，所述加样孔对应设于样品垫处。
8.一种唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置的制备方法，其特征在于，包括：
S1.抗原检测试纸条的制备
S1.1 .胶体金制备
胶体金制备：加热1000份超纯水至沸腾，向沸水中加入4 份 10%氯金酸溶液，快速加入4.5份10%柠檬酸三钠溶液，搅拌混匀；保继续持溶液沸腾，直到液体呈酒红色即停止加热，冷却至室温后补足失水；
S1.2. 新型冠状病毒特异性抗体Ab2金结合物制备
S1.2.1 .新型冠状病毒Ab2标记
取100份胶体金溶液，加入1～2份 0.2M碳酸钾溶液，混合均匀；缓慢加入Ab2使其终浓度为0.02～0.1mg/ml，继续搅拌30分钟，加入2份 10％ BSA溶液封闭20分钟，选择12000～15000r/min离心30分钟，弃去上清液，用50份缓冲液1重悬，得到新型冠状病毒Ab2金结合物溶液，其中，所述缓冲液1pH值为7.0-8.0，含0.1M Tris-HCl buffer，1%BSA；
S1.2.2 .新型冠状病毒Ab2金标垫制备
取S1.2.1中新型冠状病毒Ab2金结合溶液，用缓冲液2稀释后以滚轮推动溶液，均匀的浸润玻璃纤维，稀释比为1:1～1:4，其中，缓冲液2 pH值为7.0-8.0，含0.1M Tris-HClbuffer，1%-5% BSA，0.5%-1% PVP、0.5%-2% PEG，5%-20% 蔗糖；
S1.3 .新型冠状病毒特异性抗体Ab1包被板制备
以pH7.4，0.01M PBS溶液稀释Ab1至0.8～1.5mg/ml作为检测线工作液，以pH7.4，0.01MPBS稀释羊抗人IgG抗体至0.5～1.0mg/ml作为质控线工作液；取NC膜贴在背板上，划膜仪设置0.5～2.0ul/cm出液量进行划膜后干燥；
S1.4. 样品垫制备
将玻璃纤维浸润在样品垫处理液中，静置30分钟后取出，沥干水分，自然干燥后备用，其中，所述样品垫处理液pH值为8.0-9.0，含0.05M-1M Tris-HCl，0.5%-1% PVP，0.5%PEG，0.2%-5% BSA；
S1.5 .抗原检测试制备
S1.5.1. 裁条
将金标垫、样品垫、吸水纸裁成合适宽度；
S1.5.2 .贴板
将吸水纸、金标垫、样品垫贴在包被板上，并裁成所需宽度；
S2.抗体检测试纸条的制备
S2.1.胶体金制备
加热1000份超纯水至沸腾，向沸水中加入4份10%氯金酸溶液，快速加入4.5份10%柠檬酸三钠溶液，搅拌混匀；保继续持溶液沸腾，直到液体呈酒红色即停止加热，冷却至室温后补足失水；
S2.2.新型冠状病毒重组抗原金结合物制备
S2.2.1. 新型冠状病毒重组抗原标记
取100份胶体金溶液，加入3～5 份0.2M碳酸钾溶液，混合均匀；缓慢加入新冠重组抗原使其终浓度为0.05～0.2mg/ml，继续搅拌30分钟，加入2份10％ BSA溶液封闭20分钟，然后12000～15000r/min离心30分钟，弃去上清液，用50份缓冲液1重悬，得到新型冠状病毒重组抗原金结合物溶液；
S2.2.2.鼠IgG标记
取100份胶体金溶液，加入1～2份0.2M碳酸钾溶液，混合均匀；缓慢加入新冠重组抗原使其终浓度为0.05～0.1mg/ml，继续搅拌30分钟，加入2份 10％ BSA溶液封闭20分钟，选择12000～15000r/min离心30分钟，弃去上清液，用50份缓冲液1重悬，得到新型冠状病毒重组抗原金结合物溶液；
S2.2.3.新型冠状病毒重组抗原金标垫制备
取S2.2.1中新型冠状病毒重组抗原金结合溶液，另取鼠IgG金结合物溶液，分别用缓冲液2稀释后,以滚轮推动溶液，均匀的浸润玻璃纤维，其中，新型冠状病毒重组抗原的稀释比为1:1～1:3，鼠IgG稀释比为1:5～1:10；
S2.3.抗人抗体包被板制备
S2.3.1.包被板制备
以pH7.4 ，0.01M PBS溶液稀释抗人IgG抗体至0.8～2mg/ml，稀释抗人IgA抗体至0.6～2mg/ml，作为检测线工作液，以pH7.4，0.01M PBS稀释羊抗鼠IgG抗体至0.5～1.0mg/ml，作为质控线工作液；取NC膜贴在背板上，划膜仪设置0.5～2.0ul/cm出液量进行划膜后干燥；
S2.4 .样品垫制备
将玻璃纤维浸润在样品垫处理液中，静置30分钟后取出，沥干水分，自然干燥后备用，其中，所述样品垫处理液pH值为8.0-9.0，含0.05M-1M Tris-HCl，0.5%-1% PVP，0.5%PEG，0.2%-5% BSA；
S2.5 .抗体检测试纸条制备
S2.5.1 .裁条
将金标垫、样品垫、吸水纸裁成合适宽度；
S2.5.2.贴板
将吸水纸、金标垫、样品垫贴在包被板上，并裁成所需宽度；
S3.抗原抗体联合检测卡制备
将抗原检测试纸条和抗体检测试纸条装在卡壳中，盖上盖子经压壳机压紧，装于含干燥剂的铝箔袋中；
S4.处理液的配置及分装
将处理液按1ml-2ml/瓶分装入处理瓶中，旋紧大头和小头盖子。
9.根据权利要求8所述的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置的制备方法，其特征在于，所述快速联合检测装置在样本采集及测试时，采样拭子和收集瓶共同组成采样系统，采集样本时，以刷头刮擦上下牙龈线各5-6次，再将刷头翻面，轻柔擦拭咽喉和扁桃体5-6次，拧开收集瓶大头盖子，将刷头放入含处理液的收集瓶中，折下刷头，旋紧大头盖子，上下颠倒收集瓶使样本充分混匀；
测试时，将测试卡放置在平整桌面上，拧开收集瓶的小头盖子，于加样孔中各滴加3-4滴，记录时间，10分钟读数。
10.根据权利要求9所述的唾液中新型冠状病毒抗原和抗体的快速联合检测装置的制备方法，其特征在于，所述采样系统采集的样本包括牙龈液、龈沟液及咽喉液和扁桃体液。
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Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112557654A (zh) * 2020-12-14 2021-03-26 南通伊仕生物技术股份有限公司 一种新型冠状病毒抗原检测试纸条
CN112730832A (zh) * 2021-02-04 2021-04-30 厦门稀土材料研究所 一种covid-19抗原检测卡、其制备方法和应用
CN112858675A (zh) * 2021-01-05 2021-05-28 杭州奥泰生物技术股份有限公司 一种新型冠状病毒抗原、抗体联合智能化检测装置
CN113176411A (zh) * 2021-03-10 2021-07-27 北京大学口腔医学院 利用唾液检测新型冠状病毒肺炎的生物标志物及其应用
CN113238044A (zh) * 2021-01-27 2021-08-10 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种产气荚膜梭菌ε毒素快速定量检测卡
CN114062673A (zh) * 2021-11-23 2022-02-18 济南百博生物技术股份有限公司 一种高灵敏度新冠抗原检测试剂条及制备方法
KR102364997B1 (ko) * 2021-06-30 2022-02-21 에스디바이오센서 주식회사 코로나 바이러스 진단용 조성물 및 이의 용도
CN114113597A (zh) * 2021-12-08 2022-03-01 江苏晶红生物医药科技股份有限公司 一种新型冠状病毒抗原检测试剂盒及其制备方法
CN114624447A (zh) * 2022-03-15 2022-06-14 杭州亿米诺生物科技有限公司 一种用于新型冠状病毒的检测试纸及其制备工艺
CN114934023A (zh) * 2022-06-08 2022-08-23 万绵水 一种唾液保存液及其制备方法和应用
CN115201474A (zh) * 2022-08-12 2022-10-18 万华普曼生物工程有限公司 一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒及其制备方法
WO2023206203A1 (zh) * 2022-04-28 2023-11-02 常州市诚鑫环保科技有限公司 具多形态抗原检测试剂

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040184954A1 (en) * 2003-03-18 2004-09-23 Huiyan Guo Lateral flow immunoassay devices for testing saliva and other liquid samples and methods of use of same
US20090170072A1 (en) * 1999-03-29 2009-07-02 Orasure Technologies, Inc. Device for collection and assay of oral fluids
US20160108463A1 (en) * 2007-10-01 2016-04-21 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological Specimen Collection and Transport System
CN108732347A (zh) * 2018-05-23 2018-11-02 江苏维尔生物科技有限公司 一种检测唾液中hcv抗体的检测试剂盒及其制备方法
CN111024954A (zh) * 2020-03-09 2020-04-17 深圳市易瑞生物技术股份有限公司 联合检测covid-19抗原和抗体的胶体金免疫层析装置及其使用法
CN111060691A (zh) * 2020-03-17 2020-04-24 深圳市易瑞生物技术股份有限公司 检测covid-19的荧光免疫层析装置及其使用方法
CN111089962A (zh) * 2020-03-25 2020-05-01 中山生物工程有限公司 联合检测新型冠状病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒及制备方法
CN111233985A (zh) * 2020-02-09 2020-06-05 北京丹大生物技术有限公司 一种新型冠状病毒IgA抗体快速检测试纸条的制备方法

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090170072A1 (en) * 1999-03-29 2009-07-02 Orasure Technologies, Inc. Device for collection and assay of oral fluids
US20040184954A1 (en) * 2003-03-18 2004-09-23 Huiyan Guo Lateral flow immunoassay devices for testing saliva and other liquid samples and methods of use of same
US20160108463A1 (en) * 2007-10-01 2016-04-21 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological Specimen Collection and Transport System
CN108732347A (zh) * 2018-05-23 2018-11-02 江苏维尔生物科技有限公司 一种检测唾液中hcv抗体的检测试剂盒及其制备方法
CN111233985A (zh) * 2020-02-09 2020-06-05 北京丹大生物技术有限公司 一种新型冠状病毒IgA抗体快速检测试纸条的制备方法
CN111024954A (zh) * 2020-03-09 2020-04-17 深圳市易瑞生物技术股份有限公司 联合检测covid-19抗原和抗体的胶体金免疫层析装置及其使用法
CN111060691A (zh) * 2020-03-17 2020-04-24 深圳市易瑞生物技术股份有限公司 检测covid-19的荧光免疫层析装置及其使用方法
CN111089962A (zh) * 2020-03-25 2020-05-01 中山生物工程有限公司 联合检测新型冠状病毒IgM/IgG抗体的胶体金试剂盒及制备方法

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112557654B (zh) * 2020-12-14 2021-09-24 南通伊仕生物技术股份有限公司 一种新型冠状病毒抗原检测试纸条
CN112557654A (zh) * 2020-12-14 2021-03-26 南通伊仕生物技术股份有限公司 一种新型冠状病毒抗原检测试纸条
CN112858675A (zh) * 2021-01-05 2021-05-28 杭州奥泰生物技术股份有限公司 一种新型冠状病毒抗原、抗体联合智能化检测装置
CN113238044A (zh) * 2021-01-27 2021-08-10 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种产气荚膜梭菌ε毒素快速定量检测卡
CN112730832A (zh) * 2021-02-04 2021-04-30 厦门稀土材料研究所 一种covid-19抗原检测卡、其制备方法和应用
CN112730832B (zh) * 2021-02-04 2022-05-24 厦门稀土材料研究所 一种covid-19抗原检测卡、其制备方法和应用
CN113176411B (zh) * 2021-03-10 2023-12-26 北京大学口腔医学院 利用唾液检测新型冠状病毒感染的生物标志物及其应用
CN113176411A (zh) * 2021-03-10 2021-07-27 北京大学口腔医学院 利用唾液检测新型冠状病毒肺炎的生物标志物及其应用
KR102364997B1 (ko) * 2021-06-30 2022-02-21 에스디바이오센서 주식회사 코로나 바이러스 진단용 조성물 및 이의 용도
KR102399034B1 (ko) * 2021-06-30 2022-05-19 에스디바이오센서 주식회사 코로나 바이러스 진단용 조성물 및 이의 용도
CN114062673A (zh) * 2021-11-23 2022-02-18 济南百博生物技术股份有限公司 一种高灵敏度新冠抗原检测试剂条及制备方法
CN114113597A (zh) * 2021-12-08 2022-03-01 江苏晶红生物医药科技股份有限公司 一种新型冠状病毒抗原检测试剂盒及其制备方法
CN114624447A (zh) * 2022-03-15 2022-06-14 杭州亿米诺生物科技有限公司 一种用于新型冠状病毒的检测试纸及其制备工艺
WO2023206203A1 (zh) * 2022-04-28 2023-11-02 常州市诚鑫环保科技有限公司 具多形态抗原检测试剂
CN114934023A (zh) * 2022-06-08 2022-08-23 万绵水 一种唾液保存液及其制备方法和应用
CN115201474A (zh) * 2022-08-12 2022-10-18 万华普曼生物工程有限公司 一种新型冠状病毒抗体的快速检测试剂盒及其制备方法

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