CN111505276A - 一种新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒及其检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒及其检测方法,涉及新型冠状病毒检测技术领域。本发明公开的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,包括依次贴于反应支持物上的样品垫、包被了胶体金标记的新型冠状病毒S抗原的胶体金垫、包被了含有抗人IgG单克隆抗体的检测条带T1、含有IgM单克隆抗体的检测条带T2和含有羊抗鼠IgG抗体的质控条带C的硝酸纤维素膜,以及吸水滤纸。该试剂盒能够简化新型冠状病毒的检测流程,覆盖病程的前中后期,减少漏检的风险;不对任何实验仪器、环境或者操作人员具有依赖性,操作简单、方便、检测周期短、易于判读;另外,不需要特殊的仪器设备,不需要专业培训,适应性强,便于随时随地的监测和检验。
Description
技术领域
本发明涉及生物检测领域,特别是涉及一种新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒及其检测方法。
背景技术
新型冠状病毒是一类传染性很强的可引起肺部炎症的病毒。该病毒的持续流行给人们的健康、生活以及社会公共防疫系统带来了极大的干扰和压力,已经成为当前医学领域的主要研究对象。由于目前尚无特效的抗病毒治疗药物,因此对病人进行及时的确诊的收治,对于遏制病毒的扩散,以及后续消灭该病毒,具有极为重要的现实意义。
目前,现有的检测试剂盒具有检测耗时长,步骤繁琐等问题。因此开发一种快速检测新型冠状病毒的试剂盒,对控制新型冠状病毒的疫情具有重要意义。新冠感染会导致机体产生免疫应答,并产生病毒特异性抗体,因此对疑似病例血清中的病毒特异性抗体进行检测,是一个很好的临床诊断方式,具有准确、快速、简便等特点。
发明内容
针对现有技术的缺陷,本发明提供了一种新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒及其检测方法,以克服现有相关技术所存在的检测耗时长,步骤繁琐等问题。
本发明提供一种新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,一种新型冠状病毒 IgG/IgM抗体检测试剂盒,包括样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和反应支持物,所述样品垫、所述胶体金垫、所述硝酸纤维素膜依次设置在所述反应支持物上;其中,所述胶体金垫含有胶体金标记的新型冠状病毒S抗原和胶体金标记的单克隆抗体鼠IgG;所述硝酸纤维素膜上设置有检测条带T1,检测条带T2和质控条带 C;所述检测条带T1含有抗人IgG单克隆抗体,所述检测条带T2含有抗人IgM 单克隆抗体,所述质控条带C含有羊抗鼠IgG多克隆抗体。
优选地,所述试剂盒还包括吸水滤纸,所述吸水滤纸设置在所述反应支持物上。
优选地,所述样品垫设置在所述反应支持物的一端,所述样品垫的一端压住所述胶体金垫的一端并与之粘贴,所述胶体金垫的另一端压住所述硝酸纤维素膜的一端并与之粘贴,所述硝酸纤维素膜的另一端被所述吸水滤纸的一端压住并与之粘贴,所述吸水滤纸设置在所述反应支持物的另一端。
优选地,所述吸水滤纸长度为20.0mm,所述吸水滤纸与所述硝酸纤维素膜重叠粘贴在一起的重叠长度为1.5mm。
优选地,所述胶体金垫的长度为7.0mm,所述胶体金垫与所述硝酸纤维素膜重叠粘贴在一起的重叠长度为1.5mm。
优选地,所述样品垫的长度为20.0mm,所述样品垫与所述胶体金垫重叠粘贴在一起的重叠长度为3.0mm。
优选地,所述检测条带T1,所述检测条带T2和所述质控条带C之分别隔开,所述检测条带T1和所述检测条带T2设置于靠近所述胶体金垫的一侧;所述质控条带C设置于靠近所述吸水滤纸的一侧。
优选地,所述反应支持物为塑料。
本发明还提供了一种使用新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒进行快速检测新型冠状病毒检测的方法,包括以下步骤:
(1)将待检样本用稀释液处理,其中,所述待检样本为血清;
(2)将稀释好的样本滴加至所述新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒的样品垫上,样本将从反应支持物上样品垫一端向反应支持物上另一端的方向移动;;
(3)等待至少10min,观察检测条带T1,检测条带T2和质控条带C处的颜色变化,记录结果:
若所述检测条带T1处出现红色或紫红色,则所述待检样本中含有新型冠状病毒IgG抗体,所述待检样本为阳性;
若所述检测条带T2处出现红色或紫红色,则所述待检样本中含有新型冠状病毒IgM抗体,所述待检样本为阳性;
若所述检测条带T1处和所述检测条带T2处同时出现红色或紫红色,则所述待检样本中同时含有新型冠状病毒IgG抗体和IgM抗体,所述待检样本为阳性;
若所述检测条带T1处和所述检测条带T2处都不出现红色或紫红色,则所述待检样本中不含有新型冠状病毒的IgG/IgM抗体,所述待检样本为阴性;
若所述质控条带C处出现红色或紫红色,则表明实验结果有效;
若所述质控条带C处未出现红色或紫红色,则表明胶体金垫标记的新型冠状病毒S抗原失效或者实验操作有误,实验结果无效。
优选地,在步骤(1)中,所述稀释液为0.01M磷酸盐缓冲液。
本发明的有益效果如下:
本发明提供的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,能够简化新型冠状病毒的检测流程,覆盖病程的前中后期,减少漏检的风险。利用该种检测试剂盒检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体,不对任何实验仪器、环境或者操作人员具有依赖性,操作简单、方便、检测周期短、易于判读;另外,不需要特殊的仪器设备,不需要专业培训,适应性强,便于随时随地的监测和检验。
本发明提供的检测方法操作简单方便、不依赖较高实验室条件、用于快速检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体,进而实现快速简便的临床诊断。
附图说明
图1是本发明一个优选实施例的检测试剂盒的正面示意图;
图2是本发明一个优选实施例的检测试剂盒的侧面示意图;
图3是本发明一个优选实施例的检测试剂盒检测结果为阳性的示意图;
图4是本发明一个优选实施例的检测试剂盒检测结果为阴性的示意图;
图5是本发明一个优选实施例的检测试剂盒结果无效的示意图;
其中:1、吸水滤纸;2、硝酸纤维素膜;3、胶体金垫;4、样品垫;5、反应支持物;T1:IgG检测条带;T2:IgM检测条带;C:质控条带。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式,本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用,本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用,在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。除非另外说明,本发明中所公开的实验方法、检测方法、制备方法均采用本技术领域的常规技术。
以下结合附图对该检测试剂盒进行详细说明:
本发明实施方式为针对新型冠状病毒IgG/IgM抗体的具体检测方式,其他亚型的检测方法,在制得合适的抗原后均可以按照以下思路得到检测方法。
如图1和图2所示,本发明提供的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒由吸水滤纸(1)、硝酸纤维素膜(2)、胶体金垫(3)、样品垫(4)和反应支持物(5)组成。吸水滤纸(1)可以防止样本在硝酸纤维素膜(2)的一端堆积,导致后续的样本无法继续前行。因此,吸水滤纸(1)可以保证反应能够充分在硝酸纤维素膜(2)上进行。硝酸纤维素膜(2)包括含有抗人IgG单克隆抗体检测条带T1和含有抗人IgM单克隆抗体的检测条带T2,以及含有羊抗鼠IgG多克隆抗体的质控条带C。胶体金垫(3)含有胶体金标记的新型冠状病毒S抗原。吸水滤纸(1)、硝酸纤维素膜(2)、胶体金垫(3)、样品垫(4)依次设置在反应支持物(5)上。其中,反应支持物(5)可以为塑料胶板。
具体地,样品垫(4)设置在反应支持物(5)的底端,样品垫(4)的顶端压住胶体金垫(3)的底端并与之粘贴,样品垫(4)的长度为20.0mm,样品垫(4) 与胶体金垫(3)重叠粘贴在一起的重叠长度为3.0mm。
胶体金垫(3)的顶端压住硝酸纤维素膜(2)的底端并与之粘贴,胶体金垫(3)的长度为7.0mm,胶体金垫(3)与硝酸纤维素膜(2)重叠粘贴在一起的重叠长度为1.5mm。
硝酸纤维素膜(2)的顶端被吸水滤纸(1)的底端压住并与之粘贴,吸水滤纸(1)长度为20.0mm,吸水滤纸(1)与硝酸纤维素膜(2)重叠粘贴在一起的重叠长度为1.5mm。
在检测条带T1和T2的方向上硝酸纤维素膜(2)的边缘距离反应支持物(5) 边缘34.0mm,在质控条带C的方向上硝酸纤维素膜(2)的边缘距离反应支持物 (5)的边缘20.0mm。
检测条带T1,检测条带T2和质控条带C之间分别隔开,检测条带T1和检测条带T2设置于靠近胶体金垫(3)的一侧,质控条带C设置于靠近吸水滤纸(1) 的一侧。
为了能够达到检测新型冠状病毒IgG/IgM抗体的目的,需要选用合适的稀释液配方,本实例中使用的是0.01M磷酸盐缓冲液作为稀释液,稀释待检血清样本。
将50~100ul的稀释的待检血清样本直接滴加至检测试剂盒样品垫(4)上,此时样本将从样品垫(4)开始,依次沿着反应支持物(5)上的各个附着物向吸水滤纸(1)的方向移动,过15分钟后可读取实验结果。
如果待检血清样本中含有新型冠状病毒IgG/IgM抗体,则新型冠状病毒 IgG/IgM抗体会分别与胶体金垫(3)上胶体金标记的新型冠状病毒S抗原特异性结合,形成复合物,而后继续前行。
若待检血清样本中含有新型冠状病毒IgG抗体,则与新型冠状病毒S抗原特意结合形成的复合物会与包被在硝酸纤维素膜(2)上的抗人IgG单克隆抗体发生特异性结合,检测条带T1处会出现红色或者紫红色;若待检血清样本中含有新型冠状病毒IgM抗体,则与新型冠状病毒S抗原特意结合形成的复合物会与包被在硝酸纤维素膜(2)上的抗人IgM单克隆抗体发生特异性结合,检测条带T2处会出现红色或者紫红色;若待检血清样本中同时含有新型冠状病毒IgM抗体和IgG 抗体,则检测条带T1和T2处会同时出现红色或者紫红色。
如图3所示,检测条带T1和T2中任意一处出现红色或者紫红色,都表明待检样品中含有新型冠状病毒IgG/IgM抗体,为阳性。
如果待检样本中不含有新型冠状病毒IgG/IgM抗体,就不能与胶体金垫(3) 上胶体金标记的新型冠状病毒S抗原特异性结合,形成足量复合物,如图4所示,检测条带T1和T2处也就不能出现红色或紫红色,为阴性。
无论样本中是否含有新型冠状病毒IgG/IgM抗体,胶体金垫(3)上胶体金标记的单克隆抗体鼠IgG都会继续前行至质控条带C处,并与此处包被的羊抗鼠IgG 多克隆抗体结合,形成红色或者紫红色条带,即为质控线。如果在检测中此条带不出现红色或者紫红色,如图5所示,则证明胶体金标记的新型冠状病毒S抗原失效或者操作有失误,结果无效,需要重新检测。
本发明提供的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,能够简化血清样本中新型冠状病毒IgG/IgM抗体的检测流程。利用该种检测试剂盒检测新型冠状病毒 IgG/IgM抗体,不对任何实验仪器、环境或者操作人员具有依赖性,操作简单、方便、检测周期短、易于判读;另外,不需要特殊的仪器设备,不需要专业培训,适应性强,便于随时随地的监测和检验。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解,本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此,凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案,皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
Claims (10)
1.一种新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,包括样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和反应支持物,所述样品垫、所述胶体金垫、所述硝酸纤维素膜依次设置在所述反应支持物上;
其中,所述胶体金垫含有胶体金标记的新型冠状病毒S抗原和胶体金标记的单克隆抗体鼠IgG;
所述硝酸纤维素膜上设置有检测条带T1,检测条带T2和质控条带C;所述检测条带T1含有抗人IgG单克隆抗体,所述检测条带T2含有抗人IgM单克隆抗体,所述质控条带C含有羊抗鼠IgG多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,其中,所述试剂盒还包括吸水滤纸,所述吸水滤纸设置在所述反应支持物上。
3.根据权利要求2所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,其中,所述样品垫设置在所述反应支持物上的一端,所述样品垫的一端压住所述胶体金垫的一端并与之粘贴,所述胶体金垫的另一端压住所述硝酸纤维素膜的一端并与之粘贴,所述硝酸纤维素膜的另一端被所述吸水滤纸的一端压住并与之粘贴,所述吸水滤纸设置在所述反应支持物上的另一端。
4.根据权利要求2所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,其中,所述吸水滤纸长度为20.0mm,所述吸水滤纸与所述硝酸纤维素膜重叠粘贴在一起的重叠长度为1.5mm。
5.根据权利要求2所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,其中,所述胶体金垫的长度为7.0mm,所述胶体金垫与所述硝酸纤维素膜重叠粘贴在一起的重叠长度为1.5mm。
6.根据权利要求2所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,其中,所述样品垫的长度为20.0mm,所述样品垫与所述胶体金垫重叠粘贴在一起的重叠长度为3.0mm。
7.根据权利要求2所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,其中,所述检测条带T1、所述检测条带T2和所述质控条带C之间分别隔开,所述检测条带T1和所述检测条带T2设置于靠近所述胶体金垫的一侧;所述质控条带C设置于靠近所述吸水滤纸的一侧。
8.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒,其中,所述反应支持物为塑料。
9.一种使用根据权利要求1-8中任一项所述的新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒进行新型冠状病毒检测的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将待检样本用稀释液处理,其中,所述待检样本为血清;
(2)将稀释好的样本滴加至所述新型冠状病毒IgG/IgM抗体检测试剂盒的样品垫上,样本将从反应支持物上样品垫一端向反应支持物上另一端的方向移动;
(3)等待至少10min,观察检测条带T1,检测条带T2和质控条带C处的颜色变化,记录检测结果:
若所述检测条带T1处出现红色或紫红色,则所述待检样本中含有新型冠状病毒IgG抗体,所述待检样本为阳性;
若所述检测条带T2处出现红色或紫红色,则所述待检样本中含有新型冠状病毒IgM抗体,所述待检样本为阳性;
若所述检测条带T1处和所述检测条带T2处同时出现红色或紫红色,则所述待检样本中同时含有新型冠状病毒IgG抗体和IgM抗体,所述待检样本为阳性;
若所述检测条带T1处和所述检测条带T2处都不出现红色或紫红色,则所述待检样本中不含有新型冠状病毒的IgG/IgM抗体,所述待检样本为阴性;
若所述质控条带C处出现红色或紫红色,则表明实验结果有效;
若所述质控条带C处未出现红色或紫红色,则表明实验结果无效。
10.根据权利要求9所述的新型冠状病毒检测的方法,其中,在步骤(1)中,所述稀释液为0.01M磷酸盐缓冲液。
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