CN111172227A - 一种大鲵小分子多肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种大鲵小分子多肽的制备方法，包括使用负压吸附装置吸附大鲵表面，获得大鲵粘液，在低温状态下真空干燥；用蛋白酶进行酶解；经微孔滤膜过滤后再经为500道尔顿的超滤膜进行超滤；干燥，得到大鲵小分子多肽粉。本发明采用负压装置获取大鲵粘液，可按照每月采集一次大鲵粘液的方法，不会对大鲵造成伤害,可让大鲵健康生长。本发明采用中低温提取和干燥工艺，可防止有效成分的转化丧失，可提高提取率和产品纯度。
Description
技术领域
本发明涉及一种食品加工技术领域，特别涉及一种大鲵小分子多肽的制备方法。
背景技术
大鲵俗称娃娃鱼，起源于起源于三亿五千万年前，早于人类，和恐龙是同时代的产物，它是从水生到陆生过渡的典型两栖动物，在生物进化史上有着划时代的意义，被专家誉为“水中人参”和“软黄金”，是我国独有的国宝，被国外称为“水中大熊猫”，是一种稀、特、珍名贵且面临濒危的野生种物，属国家二级保护动物。自上世纪末以来,我国湖南、湖北、陕西及广西等地开始了大鲵驯养繁殖,逐渐形成相当规模。
早在《山海经》中就有描述：“鲵，出丹洛二水”。《本草纲目》中有“鳞目、大鲵抗衰老特效也.”现代临床观察,娃娃鱼更有滋阴补肾、补血行气、延寿益年的功效。娃娃鱼肉味鲜美，风味独特，是一种名贵佳肴，被视为珍稀名贵补品，对人体滋补有奇效，身价昂贵。娃娃鱼肉蛋白质中含有17种氨基酸，其中包换8种人体必需氨基酸，总量为91.92%，其EAAI指数远高于牛肉和梅花鹿肉。
从大鲵中提取蛋白多肽粉的方法多有文献报道和实际使用，但现有方法一般都是以大鲵肉和其它组织中提取，其前提必须杀死大鲵，提取资源不具有可持续性。也有用电击方法获取大鲵粘液的方法，但电击对大鲵有较大伤害，不利于大鲵健康生长和持续获得粘液。而且现有蛋白多肽粉的方法存在纯度不高、脂肪含量高,不利于人体吸收等问题，影响了产品的营养功效。
发明内容
本发明的目的在于提供一种大鲵大鲵小分子多肽的制备方法，其利用大鲵粘液为原料，不仅可以让大鲵正常生长，而且可以提高产物中小分子多肽的含量，有利于人体吸收。
为实现上述目的，本发明的实施方案为：一种大鲵小分子多肽的制备方法，包括以下步骤：
（1）将成年大鲵体表用水清洗后，使用负压吸附装置吸附大鲵表面，获得大鲵粘液，在低温状态下真空干燥，得大鲵粘液蛋白粉；
（2）将大鲵粘液蛋白粉加入水中，料液比为1:1.5-3（w/w），调温至45-60℃，调整pH值至6-9，然后加入大鲵粘液蛋白粉0.5%-2%（w/w）的蛋白酶在35-40℃下进行酶解，酶解时限15～20小时,灭酶；
（3）经微孔滤膜过滤，通过截留量分子为500道尔顿的超滤膜进行超滤，得到大鲵小分子肽溶液；
（4）将大鲵小分子肽溶液进行干燥，得到大鲵小分子多肽粉。
作为优化，步骤（1）中，所述负压吸附装置采用无油润滑真空泵作为负压源，极限负压值：18KPa±1.5KPa(135±11mmHg)，抽气速率：≥6 L/min，电源：AC220V 50Hz，输入功率30VA。
作为优化，步骤（1）中，所述负压吸附装置的贮液瓶采用PC塑料制成。
作为优化，步骤（2）中，所述料液比为1:2（w/w），酶解pH值6.8，加酶量为大鲵粘液蛋白1.5%（w/w），酶解温度37℃，酶解时间18小时。
作为优化，步骤（2）中，所述灭酶采用物理方法，如超声波。超声波处理条件：温度60~90℃、超声波频率25kHz、功率800 W，时间1-2分钟。
作为优化，步骤（4）中，所述干燥温度不超过85℃。
本发明采用负压装置获取大鲵粘液，可按照每月采集一次大鲵粘液的方法，不会对大鲵造成伤害,可让大鲵健康生长。本发明采用中低温提取和干燥工艺，可防止有效成分的转化丧失，可提高提取率和产品纯度，所得产品小分子肽含量高达95%以上，其分子量分布为：分子量为1 Da～200Da，含量为0.1%～10%；分子量为201Da～300 Da，含量为60%～85%；分子量为301Da～500 Da，含量为10%～40%。
具体实施方式
下面给出本发明的实施例，详细说明其技术方案。下述实施例仅为本发明的优化或具体的实施方法，并不用以限定本发明的保护范围。
实施例1：
一种大鲵小分子多肽的制备方法，具体步骤和方法如下：
（1）真空负压获取大鲵粘液原料：采用真空负压装置在活体成年大鲵体表缓慢移动吸嘴，大鲵因吸嘴刺激溢出粘液，真空负压装置吸引大鲵粘液。真空负压装置采用无油润滑真空泵作为负压源，系统不会产生正压，并设有溢流保护装置；真空负压装置的空气过滤器可以防止负压泵受到污染；负压调节装置具有锁定功能，可根据需要任意设定负压值；收集瓶采用透明塑料瓶。技术参数：极限负压值：18KPa±1.5KPa(135±11mmHg)，负压调节范围：2KPa～极限负压值，抽气速率：≥6 L/min，贮液瓶：5000mL（PC塑料），电源：AC220V 50Hz，输入功率：30VA。
（2）在不超过40℃下真空干燥至含水量10%以下，得大鲵粘液蛋白粉；
（3）将大鲵粘液蛋白粉加入大鲵粘液重量2倍的水，调温至50℃，调整pH值至6.8，然后在搅拌下加入大鲵粘液蛋白粉重量1.5%的蛋白酶在37℃下进行酶解，酶解时限18小时,再在25 kHz、800 W的超声波、80℃下处理1.5 min。
（4）经过φ0.45μm微孔滤膜过滤，然后通过截留量分子为500道尔顿的超滤膜进行超滤，压力0.4Mpa，得到大鲵小分子肽溶液；
（5）将大鲵小分子肽溶液在85℃下干燥至含水量5%以下，得到大鲵小分子多肽粉。
经检测，上述方法得到的大鲵小分子肽含量为96.82%。
实施例2
一种大鲵大鲵小分子多肽的制备方法，具体步骤和方法如下：
（1）真空负压获取大鲵粘液原料：采用真空负压装置在活体成年大鲵体表缓慢移动吸嘴，吸引大鲵粘液。真空负压装置采用无油润滑真空泵作为负压源，系统不会产生正压，并设有溢流保护装置；真空负压装置的空气过滤器可以防止负压泵受到污染；负压调节装置具有锁定功能，可根据需要任意设定负压值；收集瓶采用透明塑料瓶。技术参数：极限负压值：18KPa±1.5KPa(135±11mmHg)，负压调节范围：2KPa～极限负压值，抽气速率：≥6 L/min，贮液瓶：5000mL（PC塑料），电源：AC220V 50Hz，输入功率：30VA。
（2）将大鲵粘液加入大鲵粘液重量1.5倍的水，调温至55℃，调整pH值至7.2，然后在搅拌下加入大鲵粘液重量1.5%的蛋白酶在40℃下进行酶解，酶解时限20小时,再在105℃下灭酶15min；
（3）经过φ0.45μm微孔滤膜过滤，然后通过截留量分子为500道尔顿的超滤膜进行超滤，压力0.4Mpa，得到大鲵小分子肽溶液；
（4）将大鲵小分子肽溶液在80℃下干燥至含水量5%以下，得到大鲵小分子多肽粉。
经检测，上述方法得到的大鲵小分子肽含量为92.47%。
Claims (6)
1.一种大鲵小分子多肽的制备方法，其特证在于，包括以下步骤：
（1）将成年大鲵体表用水清洗后，使用负压吸附装置吸附大鲵表面，获得大鲵粘液，在低温状态下真空干燥，得大鲵粘液蛋白粉；
（2）将大鲵粘液蛋白粉加入水中，料液比为1:1.5-3，调温至45-60℃，调整pH值至6-9，然后加入大鲵粘液蛋白粉0.5%-2%的蛋白酶在35-40℃下进行酶解，酶解时限15～20小时,灭酶；
（3）经微孔滤膜过滤，通过截留量分子为500道尔顿的超滤膜进行超滤，得到大鲵小分子肽溶液；
（4）将大鲵小分子肽溶液进行干燥，得到大鲵小分子多肽粉。
2.根据权利要求1所述的大鲵小分子多肽的制备方法，其特证在于，步骤（1）中，所述负压吸附装置采用无油润滑真空泵作为负压源，极限负压值：18KPa±1.5KPa(135±11mmHg)，抽气速率：≥6 L/min，电源：AC220V 50Hz，输入功率30VA。
3.根据权利要求1或2所述的大鲵小分子多肽的制备方法，其特证在于，步骤（1）中，所述负压吸附装置的贮液瓶采用PC塑料制成。
4.根据权利要求1所述的大鲵小分子多肽的制备方法，其特证在于，步骤（2）中，所述料液比为1:2，酶解pH值6.8，加酶量为大鲵粘液蛋白1.5%，酶解温度37℃，酶解时间18小时。
5.根据权利要求1所述的大鲵小分子多肽的制备方法，其特证在于，步骤（2）中，所述灭酶采用物理方法，如超声波；超声波处理条件：温度60~90℃、超声波频率25kHz、功率800 W，时间1-2分钟。
6.根据权利要求1所述的大鲵小分子多肽的制备方法，其特证在于，步骤（4）中，所述干燥温度不超过85℃。
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| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract |
Application publication date: 20200519 Assignee: Jiuran Biotechnology (Hunan) Co.,Ltd. Assignor: Shenzhen jiuran Biotechnology Co.,Ltd. Contract record no.: X2022990000670 Denomination of invention: A kind of preparation method of giant salamander small molecule polypeptide License type: Common License Record date: 20220919 |
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| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Country or region after: China Address after: Room B2501, Chuangyi Science and Technology Building, 1st Road, Science and Technology Middle Road, Maling Community, Yuehai Street, Nanshan District, Shenzhen, Guangdong, 518000 Applicant after: Shenzhen jiuran Biotechnology Co.,Ltd. Address before: 518000, C19 Floor, Building 2, Binhai Community Software Industry Base, Yuehai Street, Nanshan District, Shenzhen, Guangdong Province Applicant before: Shenzhen jiuran Biotechnology Co.,Ltd. Country or region before: China |
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| CB02 | Change of applicant information |