CN107937464A - 喷雾干燥制备牡蛎活性肽粉的方法 - Google Patents

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龙腾云
刘战华
周军
覃春兰
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    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/34—Extraction; Separation; Purification by filtration, ultrafiltration or reverse osmosis

Abstract

本发明公开了一种喷雾干燥制备牡蛎活性肽粉的方法，具体为：取新鲜牡蛎清洗、沥干后打浆，加水，然后加入相当于新鲜牡蛎重量2‑3％的蛋白酶，于50‑60℃、pH＝8.0‑8.5条件下酶解2‑4h，灭活，所得酶解液离心，取上清液用超滤膜过滤以收集分子量小于6kDa的多肽，所得多肽用纳滤膜浓缩后进行喷雾干燥，得到牡蛎活性肽粉；所述的蛋白酶为由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1∶3‑5的重量比组成的混合物。本发明采用由胰蛋白酶和碱性蛋白按1∶3‑5的重量比组成的蛋白酶在具体条件下对牡蛎进行酶解，可以获得39％以上的水解氨基氮生成率。

Description

喷雾干燥制备牡蛎活性肽粉的方法
技术领域
本发明涉及牡蛎肽粉的制备方法，具体涉及一种喷雾干燥制备牡蛎活性肽粉的方法。
背景技术
生物活性肽(biological active peptide)是一类分子量小于6000Da、对生物体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物。活性肽一般含3-40个氨基酸残基，且活性取决于氨基酸组成和排列顺序。现代营养学研究发现，人体摄取的蛋白质经消化道各种酶水解后，不只以氨基酸形式吸收，更多是以小分子肽形式被直接吸收。海洋生物活性肽主要包括两大类：一是自然存在于海洋生物中的活性肽，例如肽类抗生素、激素等生物体的次级代谢产物以及各种组织系统(如骨骼、肌肉、免疫、消化、中枢神经系统中的活性肽)；二是海洋蛋白资源降解产生的活性肽，如通过蛋白酶降解、发酵或食品加工过程降解产生的肽。
牡蛎(Oyster)属于软体动物门(Mollusca)，瓣鳃纲(Lanellibranchia)，异柱目(Anisomyaria)，牡蛎科(Osteridae)，大型牡蛎常附着于低潮线以下的岩石或者深至10-20m附件的浅海岩石，小型牡蛎常于潮间带中区密集生长。粤、闽称之为蚝或蚵，江、浙称之为蛎黄，山东以北称之为蛎子或海蛎子。牡蛎味道鲜美，营养丰富，是我国第一批被列为药食同源的食品之一。它含有丰富的蛋白质、脂肪、钙、磷、铁等营养成分，素有“海底牛奶”之美称，而且自古就有“清肺补心、滋阴养血”之功效。
我国牡蛎资源丰富，且其蛋白质含量高，现有技术中通常采用酶解法制备牡蛎肽粉，但现有方法的水解氨基氮生成率不够理想。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种水解氨基氮生成率较高的喷雾干燥制备牡蛎活性肽粉的方法。
本发明所述的喷雾干燥制备牡蛎活性肽粉的方法为：取新鲜牡蛎清洗、沥干后打浆，加水，然后加入相当于新鲜牡蛎重量2-3％的蛋白酶，于50-60℃、pH＝8.0-8.5条件下酶解2-4h，灭活，所得酶解液离心，取上清液用超滤膜过滤以收集分子量小于6kDa的多肽，所得多肽用纳滤膜浓缩后进行喷雾干燥，得到牡蛎肽活性粉；所述的蛋白酶为由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：3-5的重量比组成的混合物。
申请人的试验结果表明，采用由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：3-5的重量比组成的蛋白酶在具体条件下对牡蛎进行酶解，可以获得39％以上的水解氨基氮生成率。当蛋白酶为由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：4的重量比组成的混合物，可以获得更高的水解氨基氮生成率。
上述方法中，优选蛋白酶的添加量为新鲜牡蛎重量的2％。
上述方法中，水的加入量与现有技术相同，具体可以是新鲜牡蛎重量的2-5倍。
上述方法中，通常是将所得多肽用纳滤膜浓缩至固形物含量为8-15％时进行喷雾干燥。
上述方法中，所述喷雾干燥操作与现有技术相同，具体的，喷雾干燥时的进风温度为180℃，出风温度为80℃。
上述方法中，酶解过程中的pH值采用现有常规技术手段来保持，如采用NaOH溶液保持。
与现有技术相比，本发明采用由胰蛋白酶和碱性蛋白按1：3-5的重量比组成的蛋白酶在具体条件下对牡蛎进行酶解，可以获得39％以上的水解氨基氮生成率。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的详述,以更好地理解本发明的内容,但本发明并不限于以下实施例。
实施例1
取新鲜牡蛎清洗、沥干后打浆，加入相当于新鲜牡蛎重量3倍的水，然后加入相当于新鲜牡蛎重量2％的蛋白酶(由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：4的重量比组成)，于50℃、pH＝8.0条件下酶解4h，之后加热至100℃灭酶，所得酶解液离心，取上清液用超滤膜过滤以收集分子量小于6kDa的多肽，所得多肽用纳滤膜浓缩至固形物含量为10％时进行喷雾干燥，得到牡蛎活性肽粉。
对比例1
重复实施例1，不同的是：
将蛋白酶改为胰蛋白酶，加入量改为相当于新鲜牡蛎重量的5％。
对比例2
重复实施例1，不同的是：
仅将蛋白酶改为由胰蛋白酶和中性蛋白酶按1：4的重量比组成的混合物。
对比例3
重复实施例1，不同的是：
仅将蛋白酶改为由胰蛋白酶和木瓜蛋白酶按1：4的重量比组成的混合物。
对比例4
重复实施例1，不同的是：
仅将蛋白酶改为由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：2的重量比组成的混合物。
对比例5
重复实施例1，不同的是：
仅将蛋白酶改为由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：6的重量比组成的混合物。
实施例2
取新鲜牡蛎清洗、沥干后打浆，加入相当于新鲜牡蛎重量4倍的水，然后加入相当于新鲜牡蛎重量3％的蛋白酶(由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：3的重量比组成)，于60℃、pH＝8.0条件下酶解3h，之后加热至100℃灭酶，所得酶解液离心，取上清液用超滤膜过滤以收集分子量小于6kDa的多肽，所得多肽用纳滤膜浓缩至固形物含量为8％时进行喷雾干燥，得到牡蛎活性肽粉。
实施例3
取新鲜牡蛎清洗、沥干后打浆，加入相当于新鲜牡蛎重量5倍的水，然后加入相当于新鲜牡蛎重量2.5％的蛋白酶(由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：5的重量比组成)，于55℃、pH＝8.5条件下酶解2h，之后加热至100℃灭酶，所得酶解液离心，取上清液用超滤膜过滤以收集分子量小于6kDa的多肽，所得多肽用纳滤膜浓缩至固形物含量为10％时进行喷雾干燥，得到牡蛎活性肽粉。
对按上述各实施例和各对比例所述方法所得酶解液的水解氨基氮生成率均进行了测定，结果如下述表1所示：
表1：

Claims (5)

1.喷雾干燥制备牡蛎活性肽粉的方法，其特征在于：取新鲜牡蛎清洗、沥干后打浆，加水，然后加入相当于新鲜牡蛎重量2-3％的蛋白酶，于50-60℃、pH＝8.0-8.5条件下酶解2-4h，灭活，所得酶解液离心，取上清液用超滤膜过滤以收集分子量小于6kDa的多肽，所得多肽用纳滤膜浓缩后进行喷雾干燥，得到牡蛎活性肽粉；所述的蛋白酶为由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：3-5的重量比组成的混合物。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的蛋白酶为由胰蛋白酶和碱性蛋白酶按1：4的重量比组成的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述蛋白酶的添加量为新鲜牡蛎重量的2％。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：水的加入量为新鲜牡蛎重量的2-5倍。
5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所得多肽用纳滤膜浓缩至固形物含量为8-15％时进行喷雾干燥。
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