CN109486884A - 一种大豆小分子肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种大豆小分子肽的制备方法，主要步骤包括蛋白溶液配制、酶解、超滤、喷雾干燥得小分子肽。本发明的方法以大豆分离蛋白为原料，采用分段酶解法将大豆蛋白水解成最理想的小分子肽，并结合超滤膜分离技术和喷雾干燥加工技术，工艺流程简单，生产效率高，成本低，适合规模化的工业生产。本发明所制备的小分子肽产品蛋白含量高，小分子肽（相对分子量介于180～1000Da之间）含量高，是一种高品质的功能性食品配料或功能性饲料原料。
Description
技术领域
在本发明涉及大豆蛋白肽加工技术领域，尤其涉及一种大豆小分子肽的制备方法。
背景技术
大豆蛋白是一种营养价值较高的植物蛋白资源，在食品工业中的应用越来越广泛。利用生物酶解技术可将大豆蛋白制成不同分子量范围和功能特性的大豆蛋白肽。大豆小分子肽是指相对分子量介于180～1000Da之间的二肽、三肽和四肽，大豆小分子肽不仅具有良好的溶解性、抗凝胶形成性、低黏度等特性，而且易于消化吸收，可促进脂肪代谢，增强肌肉运动力，加速肌红细胞的恢复，可降低血压和抑制胆固醇，具有较低的抗原性。另外，大豆小分子肽具有提高动物抗氧化应激能力，促进动物消化道的发育，减少腹泻的发生，增强动物免疫力等生理功能，在动物饲料中添加大豆小分子肽可促进动物生长，进而提高动物的生产性能。因此，采用现代生物工程技术改善大豆蛋白的功能特性，开发高营养价值、高附加值的功能性大豆蛋白肽，以满足食品工业和动物营养领域的需求具有重要意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种大豆小分子肽的制备方法，该方法以大豆分离蛋白为原料，工艺简单，成本低，易于实施，所得产品纯度高，蛋白质含量高，小分子肽含量高，易于消化吸收利用，是一种高品质的功能性食品配料或功能性饲料原料。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案来实现的：一种大豆小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
（1）配制蛋白溶液：将大豆分离蛋白粉加水搅拌均匀，配制成蛋白含量为10-12%（w/w）的大豆蛋白液；
（2）酶解：调整蛋白液PH值7.2-7.5，加入蛋白酶A，保持50-55℃，不断搅拌下酶解3-4h后，调整蛋白液PH值6.0-6.5，加入蛋白酶B，保持50-55℃，不断搅拌继续酶解2-3h，将酶解液升温至85℃灭酶10分钟，即得到酶解液；
（3）超滤：将酶解液经截留分子量为1500Da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液；
（4）喷雾干燥：将所得到的超滤透过液进行喷雾干燥，即得到大豆小分子肽粉。
上述步骤（2）所述的蛋白酶A活力为300000-350000U/ml，蛋白酶A的添加量为大豆蛋白液中蛋白质量的0.5-0.6%；所述的蛋白酶B活力为390000-420000U/ml，蛋白酶B添加量为大豆蛋白液中蛋白质量的 0.1-0.2%。
上述步骤（4）所述的喷雾干燥的进风口温度为200-240℃，出风口温度为70-90℃。
通过实施上述技术方案，本发明具有如下的有益效果：
（1）本发明的方法利用从微生物中提取的高效内切蛋白酶，采用分段酶解法将大豆蛋白水解成最理想的小分子肽，水解效率高。
（2）本发明所制备的大豆小分子肽产品蛋白含量在86%以上，其总蛋白中小分子肽（相对分子量介于180～1000Da之间）含量高达90%以上。
（3）本发明的方法工艺流程简单，生产周期短，生产效率高，成本低，适合规模化的工业生产。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的说明，但是本发明的实施方式并不局限于此实施例表示的范围。
实施例1
（1）配制蛋白溶液：将大豆分离蛋白粉加水搅拌均匀，配制成蛋白含量为10%（w/w）的大豆蛋白液；
（2）酶解：调整蛋白液PH值7.2，添加大豆蛋白液中蛋白质量0.6%的蛋白酶A，保持50-55℃，不断搅拌酶解3h后，调整蛋白液PH值6.0，加入蛋白液中蛋白质量0.1%的蛋白酶B，继续保持50-55℃不断搅拌酶解3h，将酶解液升温至85℃灭酶10分钟，即得到酶解液；
（4）超滤：将酶解液经截留分子量为1500Da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液；
（6）喷雾干燥：将所得到的超滤透过液进行喷雾干燥，即得到豆粕蛋白肽；喷雾干燥的进风口温度为220℃，出风口温度为90℃。
实施例2
（1）配制蛋白溶液：将大豆分离蛋白粉加水搅拌均匀，配制成蛋白含量为10%（w/w）的大豆蛋白液；
（2）酶解：调整蛋白液PH值7.5，添加大豆蛋白液中蛋白质量0.5%的蛋白酶A，保持50-55℃，不断搅拌酶解3h后，调整蛋白液PH值6.5，加入蛋白液中蛋白质量0.1%的蛋白酶B，继续保持50-55℃不断搅拌酶解2h，将酶解液升温至85℃灭酶10分钟，即得到酶解液；
（4）超滤：将酶解液经截留分子量为1500Da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液；
（6）喷雾干燥：将所得到的超滤透过液进行喷雾干燥，即得到豆粕蛋白肽；喷雾干燥的进风口温度为240℃，出风口温度为85℃。
实施例3
（1）配制蛋白溶液：将大豆分离蛋白粉加水搅拌均匀，配制成蛋白含量为12%（w/w）的大豆蛋白液；
（2）酶解：调整蛋白液PH值7.5，添加大豆蛋白液中蛋白质量0.5%的蛋白酶A，保持50-55℃，不断搅拌酶解2h后，调整蛋白液PH值6.0，加入蛋白液中蛋白质量0.2 %的蛋白酶B，继续保持50-55℃不断搅拌酶解3h，将酶解液升温至85℃灭酶10分钟，即得到酶解液；
（4）超滤：将酶解液经截留分子量为1500Da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液；
（6）喷雾干燥：将所得到的超滤透过液进行喷雾干燥，即得到豆粕蛋白肽；喷雾干燥的进风口温度为230℃，出风口温度为80℃。
实施例4
（1）配制蛋白溶液：将大豆分离蛋白粉加水搅拌均匀，配制成蛋白含量为11%（w/w）的大豆蛋白液；
（2）酶解：调整蛋白液PH值7.3，添加大豆蛋白液中蛋白质量0.6%的蛋白酶A，保持50-55℃，不断搅拌酶解2.5h后，调整蛋白液PH值6.3，加入蛋白液中蛋白质量0.15%的蛋白酶B，继续保持50-55℃不断搅拌酶解2.5h，将酶解液升温至85℃灭酶10分钟，即得到酶解液；
（4）超滤：将酶解液经截留分子量为1500Da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液；
（6）喷雾干燥：将所得到的超滤透过液进行喷雾干燥，即得到豆粕蛋白肽；喷雾干燥的进风口温度为200℃，出风口温度为70℃。
对上述实施例得到的产品进行粗蛋白含量与分子量分布检测。
粗蛋白含量采用GB/T6432-94方法测定，分子量分布采用高效凝胶过滤色谱（HPLC）法测定，以已知分子量蛋白质做参照。
结果如表1：
表1：大豆小分子肽的粗蛋白含量及分子量分布
从表1中可以看出，实施例所得的产品中粗蛋白含量均在86%以上，其中相对分子量在180-1000Da的小分子肽组分占总蛋白质的比例达到90%以上，分子量小于180Da的游离氨基酸所占比例在8%以下。
Claims (3)
1.一种大豆小分子肽的制备方法，包括以下步骤：
（1）配制蛋白溶液：将大豆分离蛋白粉加水搅拌均匀，配制成蛋白含量为10-12%（w/w）的大豆蛋白液；
（2）酶解：调整蛋白液PH值7.2-7.5，加入蛋白酶A，保持50-55℃，不断搅拌下酶解3-4h后，调整蛋白液PH值6.0-6.5，加入蛋白酶B，保持50-55℃，不断搅拌继续酶解2-3h，将酶解液升温至85℃灭酶10分钟，即得到酶解液；
（3）超滤：将酶解液经截留分子量为1500Da的超滤膜装置进行超滤，收集透过液；
（4）喷雾干燥：将所得到的超滤透过液进行喷雾干燥，即得到大豆小分子肽粉。
2.根据权利要求1所述的一种大豆小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤（2）所述的蛋白酶A活力为300000-350000U/ml，蛋白酶A的添加量为大豆蛋白液中蛋白质量的0.5-0.6%；所述的蛋白酶B活力为390000-420000U/ml，蛋白酶B添加量为大豆蛋白液中蛋白质量的0.1-0.2%。
3.根据权利要求1所述的一种大豆小分子肽的制备方法，其特征在于：步骤（4）所述的喷雾干燥的进风口温度为200-240℃，出风口温度为70-90℃。
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|---|---|---|---|---|
| CN110584125A (zh) * | 2019-07-30 | 2019-12-20 | 无棣珍康生物科技有限公司 | 一种小分子活性胶原蛋白肽粉剂及其制备方法 |
| CN112869032A (zh) * | 2021-02-04 | 2021-06-01 | 广东美味源香料股份有限公司 | 一种腐乳增鲜肽粉的制备方法 |
| CN115316489A (zh) * | 2022-08-15 | 2022-11-11 | 江南大学 | 一种增强植物蛋白溶解性的方法 |
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