CN104798982A - 一种制备骨多肽的方法 - Google Patents

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于秀玲
王欣
林波
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Abstract

本发明提供一种骨多肽的制备方法，其包括以下步骤：(1)动物骨骼破碎蒸煮；(2)脱脂；(3)酶解；(4)浓缩干燥，即得；其中步骤(3)中所采用的酶解方式是加入木瓜蛋白酶和风味蛋白酶。所得产品呈淡黄色粉末、气味清新、无苦涩感。分子量200-5000道尔顿多肽的含量占85％以上。

Description

一种制备骨多肽的方法
技术领域
本发明涉及保健食品领域一种多肽的制备方法，特别涉及一种骨多肽的制备方法。
背景技术
近年来生物活性肽结构和功能研究再现高潮，促进了多肽营养的发展与概念更新，饮食中的多肽除了作为营养物具有促进机体新陈代谢、生长发育功能外，还赋予调节机体生理功能和免疫力的双重功能。因此，多肽产品已经成为人体健康的重要物质，受到广大消费者的青睐。
目前国内开发上市的多肽类食品大多为植物多肽，如大豆多肽、枸杞多肽等，但动物多肽较少。研究结果表明动物多肽保健功能显著优于植物多肽。动物多肽食品受资源的影响，现阶段开发的产品主要集中在海洋鱼低聚肽、鸡头骨多肽等产品，其基本方法是将动物鲜骨在高温、高压下蒸煮脱脂后，加入蛋白酶制剂对骨液酶解，酶解后得小分子多肽物质。然而，这些多肽产品虽然具有良好的功效，但是口感均有苦涩感，苦味的产生一直是影响酶解物在实际中应用的一大难题。尤其对于羊骨而言，其本身就具有特殊的膻味，如何改善羊骨多肽的苦味和异味更是难上加难。为了解决羊骨多肽的异味，专利CN1785058A中采用在酶解液中加入5～10％蔗糖、0.5～1％甘氨酸和0.4～0.9％柠檬酸进行酶解液脱苦；继续将脱苦酶解液稀释1～3倍，加入重量比5～8％蔗糖、0.1～0.4％柠檬黄、1～3％蜂蜜，再加入0.05～0.2黄原胶和0.05～0.2％CMC进行酶解液调味。
上述方法比较复杂，而且只是掩盖或者矫正味道，并没有从根本上解决羊骨多肽的异味问题。
为了解决上述问题，本发明提供了一种易被人体吸收利用、无异味的羊骨多肽产品的生产方法。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种骨多肽的制备方法，其包括以下步骤：
(1)动物骨骼破碎蒸煮；(2)脱脂；(3)酶解；(4)浓缩干燥，即得。
其中，步骤(1)中骨骼与水的质量比为1∶1～1∶2，蒸煮压力0.2MPa～0.35MPa，蒸煮温度90℃～100℃，蒸煮时间3～5h；
步骤(2)中蒸煮液脱脂温度为75℃～90℃；
步骤(3)中所采用的酶解方式是加入木瓜蛋白酶和风味蛋白酶，木瓜蛋白酶的用量为骨骼重量的1.0‰～2.0‰，优选为1.5‰。风味蛋白酶的用量为骨骼重量的1.5‰～3.0‰，优选为20‰。
步骤(4)中浓缩骨液相对密度为1.1g/ml～1.3g/ml，采用的喷雾干燥条件为进风温度为150℃～170℃，排风温度为65℃～85℃。
与现有技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：
(1)本发明选用两种酶制剂处理羊骨蒸煮液，一方面通过木瓜蛋白酶对脱脂液进行酶解提高羊骨水解度，另一方面采用风味蛋白酶处理进一步水解，去除水解液的苦味，所得羊骨多肽粉气味清新，可直接服用，易于溶解，未添加任何其它化学试剂达到脱苦效果。
(2)本发明操作工艺简单，原材料易于取材且价格低廉，制备过程中反应条件易于控制，生产成本相对低廉。实验中选用的两种酶制剂易于获得且价格低廉，适合工业化生产。
(3)本发明意外的发现，采用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶酶解所得产品中多肽分子量控制在200-5000道尔顿的占总产物的85％以上，明显高于其他方法所获得的产品。而据文献报道，该分子量范围的多肽活性最好，由此可见，本发明所得产品显著优于其他酶解方式的产品。
具体实施方式
下面详细叙述本发明的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
比较实施1
分别采用不同的酶进行酶解，比较酶解后产品的口味及分子量200-5000道尔顿多肽的含量，步骤如下：
(1)羊骨破碎蒸煮：骨骼与水的质量比为1∶2，蒸煮压力0.3MPa，蒸煮温度90℃～100℃，蒸煮时间4h；(2)脱脂：脱脂温度90℃；(3)酶解；(4)浓缩干燥，即得。
步骤(3)中采用的酶及对应获得的产品如表中所示：
结果表明，对于羊骨这类特殊异味的原料，采用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶的效果明显优于其他酶，并且意外的发现，采用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶所得产品中分子量200-5000道尔顿多肽含量明显高于其他产品。
实施例1
取新鲜的羊骨洗净后破碎至1cm～8cm，将破碎后的骨块投掷高压蒸煮罐内蒸煮，高压蒸煮罐内羊骨与水的质量比为1∶1，在温度90℃、蒸煮压力0.2MPa下蒸煮时间5h。关闭压力，将蒸煮液静置放置3h，待温度降至90℃时打开贮液罐，同时打开空气压缩机(压力控制0.05MPa)进行脱脂；将过滤后所得脱脂液放入酶解罐内进行酶解处理，待脱脂液温度达60℃，调节脱脂液pH值至6，加入相当于骨骼重量1.5‰的木瓜蛋白酶(江门市德隆生物科技有限公司，标注活力为8.35*105U/g)，在温度为60℃，pH值6的条件下酶解4h，然后在100℃高温下灭酶60min；待酶解罐内液体降至55℃时，调节处理液pH值至7，加入相当于骨骼重量2.0‰的风味蛋白酶(江苏锐阳生物科技有限公司，标注活力为15000U/g)，在温度为55℃，pH值7的条件下酶解2h，然后在100℃高温下灭酶60min，过滤收集酶解液。使用双效浓缩器将收集的酶解液浓缩至浓缩骨液相对密度为1.10g/ml，采用进风温度为160℃，排风温度为75℃的喷雾干燥条件进行喷雾干燥，所得干粉含水率＜3.5％，将所得干粉进行磨粉过120目筛放入指定容器内贮存。
按以上工艺制得的羊骨多肽粉，经取样、分析测试后，多肽分子量控制在200-5000道尔顿达85％以上，且所得产品呈淡黄色粉末、气味清新、无苦涩感。
实施例2
取新鲜的羊骨洗净后破碎至1cm～8cm，将破碎后的骨块投掷高压蒸煮罐内蒸煮，高压蒸煮罐内羊骨与水的质量比为1∶1.5，在温度95℃、蒸煮压力0.3MPa下蒸煮时间4h。关闭压力，将蒸煮液静置放置5h，待温度降至75℃时打开贮液罐，同时打开空气压缩机(压力控制0.05MPa)进行脱脂；将过滤后所得脱脂液放入酶解罐内进行酶解处理，待脱脂液温度达55℃，调节脱脂液pH值至5，加入相当于骨骼重量1.0‰的木瓜蛋白酶(江门市德隆生物科技有限公司，标注活力为8.35*105U/g)，在温度为55℃，pH值5的条件下酶解5h，然后在100℃高温下灭酶60min；待酶解罐内液体降至50℃时，调节处理液pH值至7，加入相当于骨骼重量3.0‰的风味蛋白酶(江苏锐阳生物科技有限公司，标注活力为15000U/g)，在温度为55℃，pH值7的条件下酶解2h，然后在100℃高温下灭酶60min，过滤收集酶解液。使用双效浓缩器将收集的酶解液浓缩至浓缩骨液相对密度为1.10g/ml，采用进风温度为160℃，排风温度为75℃的喷雾干燥条件进行喷雾干燥，所得干粉含水率＜3.5％，将所得干粉进行磨粉过120目筛放入指定容器内贮存。
按以上工艺制得的羊骨多肽粉，经取样、分析测试后，多肽分子量控制在200-5000道尔顿达85％以上，且所得产品呈淡黄色粉末、气味清新、无苦涩感。
实施例3
取新鲜的羊骨洗净后破碎至1cm～8cm，将破碎后的骨块投掷高压蒸煮罐内蒸煮，高压蒸煮罐内羊骨与水的质量比为1∶2，在温度100℃、蒸煮压力0.35MPa下蒸煮时间3h。关闭压力，将蒸煮液静置放置4h，待温度降至80℃时打开贮液罐，同时打开空气压缩机(压力控制0.05MPa)进行脱脂；将过滤后所得脱脂液放入酶解罐内进行酶解处理，待脱脂液温度达65℃，调节脱脂液pH值至7，加入相当于骨骼重量2.0‰的木瓜蛋白酶(江门市德隆生物科技有限公司，标注活力为8.35*105U/g)，在温度为65℃，pH值7的条件下酶解3h，然后在100℃高温下灭酶60min；待酶解罐内液体降至60℃时，调节处理液pH值至7，加入相当于骨骼重量1.5‰的风味蛋白酶(江苏锐阳生物科技有限公司，标注活力为15000U/g)，在温度为60℃，pH值7的条件下酶解2h，然后在100℃高温下灭酶60min，过滤收集酶解液。使用双效浓缩器将收集的酶解液浓缩至浓缩骨液相对密度为1.10g/ml，采用进风温度为160℃，排风温度为75℃的喷雾干燥条件进行喷雾干燥，所得干粉含水率＜3.5％，将所得干粉进行磨粉过120目筛放入指定容器内贮存。
按以上工艺制得的羊骨多肽粉，经取样、分析测试后，多肽分子量控制在200-5000道尔顿达85％以上，且所得产品呈淡黄色粉末、气味清新、无苦涩感。
实施例4
取新鲜的牛骨洗净后破碎至1cm～8cm，将破碎后的骨块投掷高压蒸煮罐内蒸煮，高压蒸煮罐内牛骨与水的质量比为1∶1.5，在温度100℃、蒸煮压力0.35MPa下蒸煮时间3h。关闭压力，将蒸煮液静置放置4h，待温度降至80℃时打开贮液罐，同时打开空气压缩机(压力控制0.05MPa)进行脱脂；将过滤后所得脱脂液放入酶解罐内进行酶解处理，待脱脂液温度达65℃，调节脱脂液pH值至7，加入相当于骨骼重量1.5‰的木瓜蛋白酶(江门市德隆生物科技有限公司，标注活力为8.35*105U/g)，在温度为65℃，pH值7的条件下酶解3h，然后在100℃高温下灭酶60min；待酶解罐内液体降至60℃时，调节处理液pH值至7，加入相当于骨骼重量2.0‰的风味蛋白酶(江苏锐阳生物科技有限公司，标注活力为15000U/g)，在温度为55℃，pH值7的条件下酶解2h，然后在100℃高温下灭酶60min，过滤收集酶解液。使用双效浓缩器将收集的酶解液浓缩至浓缩骨液相对密度为1.10g/ml，采用进风温度为160℃，排风温度为75℃的喷雾干燥条件进行喷雾干燥，所得干粉含水率＜3.5％，将所得干粉进行磨粉过120目筛放入指定容器内贮存。
按以上工艺制得的牛骨多肽粉，经取样、分析测试后，多肽分子量控制在200-5000道尔顿达85％以上，且所得产品呈淡黄色粉末、气味清新、无苦涩感。
实施例5
取新鲜的猪骨洗净后破碎至1cm～8cm，将破碎后的骨块投掷高压蒸煮罐内蒸煮，高压蒸煮罐内猪骨与水的质量比为1∶1，在温度95℃、蒸煮压力0.30MPa下蒸煮时间3h。关闭压力，将蒸煮液静置放置5h，待温度降至75℃时打开贮液罐，同时打开空气压缩机(压力控制0.05MPa)进行脱脂；将过滤后所得脱脂液放入酶解罐内进行酶解处理，待脱脂液温度达60℃，调节脱脂液pH值至7，加入相当于骨骼重量1.5‰的木瓜蛋白酶(江门市德隆生物科技有限公司，标注活力为8.35*105U/g)，在温度为65℃，pH值7的条件下酶解3h，然后在100℃高温下灭酶60min；待酶解罐内液体降至60℃时，调节处理液pH值至7，加入相当于骨骼重量2.0‰的风味蛋白酶(江苏锐阳生物科技有限公司，标注活力为15000U/g)，在温度为60℃，pH值7的条件下酶解2h，然后在100℃高温下灭酶60min，过滤收集酶解液。使用双效浓缩器将收集的酶解液浓缩至浓缩骨液相对密度为1.10g/ml，采用进风温度为160℃，排风温度为75℃的喷雾干燥条件进行喷雾干燥，所得干粉含水率＜3.5％，将所得干粉进行磨粉过120目筛放入指定容器内贮存。
按以上工艺制得的猪骨多肽粉，经取样、分析测试后，多肽分子量控制在200-5000道尔顿达85％以上，且所得产品呈淡黄色粉末、气味清新、无苦涩感。
实施例6
对实施例1-5产品依据GB5009.3、GB5009.4、GB/T5009.11、GB5009.12、GB/T5009.17、GB4789.2-15中规定的方法进行食品卫生检验，结果显示：水分含量＜3.5％，灰分≤1.5％，无机砷(以AS计，mg/kg)0.22，铅(以Pb计，mg/kg)0.62，汞(以Hg计，mg/kg)≤0.05，菌落总数(cfu/g)1.0*103，大肠菌群(MPN/100g)≤35，霉菌(cfu/g)≤10，酵母(cfu/g)≤10，致病菌未检出。符合GB16740-1997保健(功能)食品通用标准。

Claims (8)

1.一种骨多肽的制备方法，包括以下步骤：(1)动物骨骼破碎蒸煮；(2)脱脂；(3)酶解；(4)浓缩干燥，即得；其特征在于，步骤(3)中所用的酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶。
2.根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶的用量为骨骼重量的1.0‰～2.0‰。
3.根据权利要求2所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶的用量为骨骼重量的1.5‰。
4.根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，所述风味蛋白酶的用量为骨骼重量的1.5‰～3.0‰。
5.根据权利要求4所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，所述风味蛋白酶的用量为骨骼重量的2.0‰。
6.根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，步骤(1)中骨骼与水的质量比为1∶1～1∶2，蒸煮压力0.2MPa～0.35MPa，蒸煮温度90℃～100℃，蒸煮时间3h～5h。
7.根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中脱脂温度为75℃～90℃。
8.根据权利要求1所述的骨多肽的制备方法，其特征在于，步骤(4)中浓缩骨液相对密度为1.1g/ml～1.3g/ml，采用的喷雾干燥条件为进风温度为150℃～170℃，排风温度为65℃～85℃。
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