CN111164217B - 利用Kaistia属的微生物制备D-阿洛酮糖的方法 - Google Patents
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Abstract
提供一种用于制备D‑阿洛酮糖的组合物，其包含Kaistia属的微生物，以及利用所述组合物制备D‑阿洛酮糖的方法。
Description
技术领域
以下公开涉及一种利用Kaistia属的微生物制备D-阿洛酮糖的方法。
背景技术
D-阿洛酮糖(此后称作“阿洛酮糖”)是一种单糖，已知是自然界中存在的量非常少的稀有糖。它几乎没有卡路里，同时具有糖的接近70％甜度，并且由于它的功能性如抑制血液葡萄糖和抑制脂质合成等，作为一种新的食品成分已受到广泛关注。
由于这些特征，考虑将阿洛酮糖在各种食品中用作糖的甜味剂替代物。但是，越来越需要一种高效制备阿洛酮糖的方法，因为它在自然界中的量非常少。
制备阿洛酮糖的已知方法包括利用钼酸盐离子的催化的方法(Bilik,V.,Tihlarik,K.,1973,Reaction of Saccharides Catalyzed by MolybdateIons.IX.Epimerization of Ketohexoses.Chem.Zvesti.28:106–109)，通过将乙醇和三乙胺一起加热从D-果糖制备阿洛酮糖的化学方法(Doner,L.W.,1979,Isomerization of D-Fructose by Base:Liquid-Chromatographic Evaluation and The Isolation of D-Psicose.Carbohydr.Res.70:209–216)，以及利用产生D-阿洛酮糖3-差向异构酶的微生物从D-果糖制备阿洛酮糖的生物学方法(韩国专利公开号10-2011-0035805)。通过化学方法制备阿洛酮糖存在大量副产品出现的问题，因此，需要进行复杂的纯化。此外，生物学方法还具有热稳定性不高和制备成本高的问题，因此需要提供能够从D-果糖产生阿洛酮糖的新微生物。
在这种情况下，本发明人为开发能够产生阿洛酮糖的微生物付出了大量努力，结果，证实当使用Kaistia属的微生物时，可以从D-果糖产生阿洛酮糖，并且完成了本发明。
技术问题
本发明的实施方案涉及提供一种用于制备阿洛酮糖的组合物，其包含Kaistia属的微生物。
本发明的另一个实施方案涉及提供一种制备阿洛酮糖的方法，所述方法包括：使Kaistia属的微生物或用于制备阿洛酮糖的包含Kaistia属的微生物的组合物与D-果糖接触。
本发明的另一个实施方案涉及提供一种可用于制备阿洛酮糖的Kaistia属的微生物。
技术方案
根据本发明的示例性实施方案，提供一种用于制备阿洛酮糖的组合物，其包含：Kaistia属的微生物。
本发明的Kaistia属的微生物可以包含任何微生物没有限制，只要其具有将D-果糖转化为D-阿洛酮糖的能力。在本发明的示例性实施方案中，本发明的Kaistia属的微生物可以是选自Kaistia granuli、Kaistia defluvii、Kaistia adipata、Kaistiageumhonensis、Kaistia dalseonensis、Kaistia hirudinis、Kaistia soli和Kaistiaterrae的Kaistia属的至少一种微生物。具体地，本发明的Kaistia属的微生物可以是选自Kaistia granuli LIS1(保藏号KCCM11916P)、Kaistia defluvii LIS2(保藏号KCCM12020P)、Kaistia granuli KCTC12575、Kaistia defluvii KCTC23766、Kaistiaadipata KCTC12095、Kaistia geumhonensis KCTC12849、Kaistia dalseonensisKCTC12850、Kaistia hirudinis DSM25966、Kaistia soli DSM19436和Kaistia terraeDSM21341的Kaistia属的至少一种微生物。
在示例性实施方案中，本发明的Kaistia属的微生物可以是菌株本身，其培养物，或者微生物的裂解物。本发明的Kaistia属的微生物的培养物或裂解物可以包含制备自Kaistia属的微生物的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶。此外，本发明的Kaistia属的微生物的培养物可以包括或不包括微生物。此外，本发明的Kaistia属的微生物的裂解物可以是通过裂解Kaistia属的微生物或其培养物获得的裂解物，或者通过离心裂解物获得的上清液。
在本发明的另一示例性实施方案中，本发明的用于制备阿洛酮糖的组合物可以进一步包含：D-果糖。
在本发明的另一示例性实施方案中，可以将本发明的Kaistia属的微生物固定在待使用的载体上。能够用于本发明的载体的实例包括但不限于琼脂、琼脂糖、k-角叉菜聚糖、藻酸盐或壳聚糖。
用于制备本发明的D-阿洛酮糖的组合物可以进一步包含金属。更具体地，本发明的金属可以是至少一种选自以下的金属：锰、钙、镁、铁、锂或钠。更具体地，所述金属可以是金属离子或金属盐，并且更具体地，所述金属盐可以是选自以下的至少一种金属盐：LiCl、Na2SO4、MgCl2、NaCl、FeSO4、MgSO4、MnCl2、MnSO4和CaCl2。本发明的金属离子或金属盐可以具有0.1mM-10mM、0.1mM-7mM、0.1mM-4mM、0.5mM-10mM、0.5mM-7mM、0.5mM-4mM、1mM-10mM、1mM-7mM、1mM-4mM、2mM-10mM、2mM-7mM或2mM-4mM的浓度。
根据本发明的另一示例性实施方案，提供一种制备阿洛酮糖的方法，所述方法包括：使本发明所述的用于制备阿洛酮糖的Kaistia属的微生物或组合物与D-果糖接触。
在一示例性实施方案中，本发明的接触可以在5.0-9.0的pH、40-90℃下进行和/或进行0.5-48小时。
具体地，本发明的接触可以在pH 6.0-9.0、pH 7.0-9.0、pH 7.5-9.0、pH6.0-8.5、pH 7.0-8.5或pH 7.5-8.5下进行。
此外，本发明的接触还可以在40℃-80℃、40℃-75℃、40℃-65℃、50℃-90℃、50℃-80℃、50℃-75℃、50℃-65℃、55℃-90℃、55℃-80℃、55℃-75℃、55℃-65℃、60℃-90℃、60℃-80℃、60℃-75℃、60℃-65℃、65℃-90℃、65℃-80℃或65℃-75℃的温度下进行。
此外，本发明的接触可以进行0.5小时或更长时间、1小时或更长时间、3小时或更长时间、4小时或更长时间、5小时或更长时间、或者6小时或更长时间、和/或48小时或更短时间、36小时或更短时间、24小时或更短时间、18小时或更短时间、12小时或更短时间、9小时或更短时间。
在本发明的另一示例性实施方案中，Kaistia属的微生物比本发明的D-果糖的重量比可以是1:1-1:5。具体地，重量比可以是1:1-1:4、1:1-1:3、1:2-1:5、1:-1:4、1:2-1:3或1:2.5。
在本发明的另一示例性实施方案中，本发明的制备方法可以进一步包括：在与D-果糖接触之前、之后或同时添加金属。
在本发明的另一示例性实施方案中，本发明的制备方法可以进一步包括，在接触D-果糖或添加金属之后，分离和/或纯化阿洛酮糖。本发明的分离和/或纯化没有特别限制，并且可以利用本发明的技术领域中一般使用的方法进行。例如，分离和/或纯化可以通过一种或多种已知方法进行，如透析、沉淀、吸附、电泳、离子交换色谱和分级结晶等，但不限于此。
此外，本发明的制备方法可以进一步包括，在分离和/或纯化之前或之后，分别进行脱色和/或脱盐。通过进行脱色和/或脱盐，可以获得更精制的不含杂质的阿洛酮糖。
在本发明的另一示例性实施方案中，本发明的制备方法可以进一步包括，在与D-果糖接触、添加金属、分离和/或纯化或者进行脱色和/或脱盐之后，结晶D-阿洛酮糖。结晶可以利用常规使用的结晶方法进行。例如，结晶可以利用冷却结晶法进行。
在本发明的另一示例性实施方案中，本发明的制备方法可以进一步包括，在结晶之前，浓缩阿洛酮糖。浓缩可以增加结晶效率。
在本发明的另一实施方案中，本发明的制备方法可以进一步包括，在分离和/或纯化之后，使未反应的D-果糖与Kaistia属的微生物接触，或者可以进一步包括，在结晶之后，重新使用在分离和/或纯化中分离结晶的母液，或者它们的组合。通过额外的步骤，可以以更高收率获得阿洛酮糖，并且可以减少丢弃的D-果糖量，从而提供经济效益。
根据本发明的制备方法从D-果糖至阿洛酮糖的转化率可以是基于重量5％-50％、10％-50％、20％-50％、25％-50％、30％-50％％、5％-40％、10％-40％、20％-40％、25％-40％、30％-40％、5％-35％、10％-35％、20％-35％、25％-35％或30％-35％。
本发明的制备阿洛酮糖的方法中描述的Kaistia属的微生物、D-果糖、阿洛酮糖、金属和载体与上述示例性实施方案中描述的相同。
根据本发明的另一示例性实施方案，提供用保藏号KCCM11916P保藏的Kaistiagranuli LIS1菌株。
根据本发明的另一示例性实施方案，提供用保藏号KCCM12020P保藏的Kaistiadefluvii LIS2菌株。
发明效果
本发明的Kaistia属的微生物可以将D-果糖转化为阿洛酮糖，同时在50℃或更高的温度下具有热稳定性，从而使得可以以工业规模生产阿洛酮糖。因此，如果Kaistia属的微生物用于生产阿洛酮糖，可以经济地提供阿洛酮糖。
附图说明
图1是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案，可以利用Kaistiagranuli LIS1从D-果糖制备阿洛酮糖。
图2是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案，可以利用Kaistiadefluvii LIS2从D-果糖制备阿洛酮糖。
图3是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案，可以利用Kaistiagranuli KCTC12575从D-果糖制备阿洛酮糖。
图4是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案，可以利用Kaistiadefluvili KCTC23766从D-果糖制备阿洛酮糖。
图5是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案，可以利用Kaistiageumhonensis KCTC12849从D-果糖制备阿洛酮糖。
图6是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案，可以利用Kaistiaadipata KCTC12095从D-果糖制备阿洛酮糖。
图7是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案，可以利用Kaistiadalseonensis KCTC12850从D-果糖制备阿洛酮糖。
图8是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案可以利用Kaistiahirudinis DSM25966从D-果糖制备阿洛酮糖。
图9是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案可以利用Kaistia soliDSM19436从D-果糖制备阿洛酮糖。
图10是HPLC分析数据，显示根据本发明的示例性实施方案可以利用Kaistiaterrae DSM21341从D-果糖制备阿洛酮糖。
发明详述
此后，通过以下实施例更详细地描述本发明。但是，本发明并不限于以下实施例，并且应当理解本领域技术人员可以在本发明的范围和精神内进行各种修饰和改变。
在本发明的整个说明书中，除非另有说明，用来表示特定物质浓度的“％”是指固体/固体(重量/重量)％、固体/液体(重量/体积)％和液体/液体(体积/体积)％。
实施例
实施例1.将D-果糖转化为阿洛酮糖的土壤微生物的分离
为了分离将D-果糖转化为阿洛酮糖的微生物，使用向其添加1％(w/v)阿洛酮糖的基本培养基(2.4g/L的KH2PO4、5.6g/L的K2HPO4、2.6g/L的(NH4)2SO4、3mM MnSO4、0.1g/L的7H2O、1g/L的酵母提取物)。将1g根际土壤悬浮于10mL的0.85％(w/v)NaCl中，将100μl悬浮液平板接种在琼脂培养基上并在30℃下培养。在琼脂培养基中形成的菌落中选择具有不同形状和大小的菌落，将每个菌落接种于基本培养基(2.4g/L的KH2PO4、5.6g/L的K2HPO4、2.6g/L的(NH4)2SO4、3mM MnSO4、0.1g/L的7H2O、1g/L的酵母提取物)中并在30℃下振荡培养24小时，随后离心以仅回收细胞。将回收的细胞用0.85％(w/v)NaCl洗涤，然后，通过添加其中添加了50％(w/w)D-果糖和3mM MnSO4的50mM Tris-Cl缓冲液(pH 8.0)允许浮动，细胞浓度为20％(w/w)，随后与细胞在55℃反应2小时。将反应产物离心以从反应溶液去除细胞，并且通过上清液的HPLC证实阿洛酮糖的制备。利用装有Aminex HPX-87C柱(BIO-RAD)的HPLC(Agilent,USA)折射率检测器(Agilent 1260RID)进行HPLC分析，其中流动相溶剂是水，温度是80℃，并且流速是0.6ml/min。通过HPLC分析选择从D-果糖制备阿洛酮糖最多的两种菌株(LIS1和LIS2)(图1和2)。
所选菌株LIS1和LIS2的16s核糖体DNA的碱基序列(5'至3')分别如SEQ ID NO:1和2所示。作为序列同源性分析的结果，SEQ ID NO:1与Kaistia granuli Ko04的16s核糖体DNA序列(SEQ ID NO:3)表现出约99％同源性，而SEQ ID NO:2与Kaistia defluvii B6-12的16s核糖体DNA序列(SEQ ID NO:4)表现出约99％同源性。因此，菌株LIS1鉴定为Kaistiagranuli，而菌株LIS2鉴定为Kaistia defluvii，并且分别命名为Kaistia granuli LIS1和Kaistia defluvii LIS2。两个菌株保藏在韩国微生物培养中心(KCCM)，其是布达佩斯条约下的国际存储处，其中Kaistia granuli LIS1在2016年10月20日保藏，并且授予保藏号KCCM11916P，而Kaistia defluvii LIS2菌株在2017年4月24日保藏，并且授予保藏号KCCM12020P。
实施例2.证实通过Kaistia属的微生物制备阿洛酮糖
证实是否可以通过Kaistia granuli LIS1、Kaistia defluvii LIS2、相同物种的其他菌株以及Kaistia属的不同种类的菌株制备阿洛酮糖。
具体地，8种额外的微生物(相同物种：K.granuli KCTC12575和K.defluviiKCTC23766；不同物种Kaistia geumhonensis KCTC12849；K.dalseonensis KCTC12850、K.hirudinis DSM25966、K.soli DSM19436和K.terrae DSM21341)购自韩国典型菌株保藏中心(KTCT)和德国微生物保藏中心，接种于普通培养基(葡萄糖1g/L、蛋白胨15g/L、NaCl6g/L、酵母提取物3g/L)中并在30℃振荡培养24小时，然后离心以仅回收细胞。将回收的细胞用0.85％(w/v)NaCl洗涤，然后在与实施例1中相同的条件下与50％(w/w)D-果糖反应，其中细胞浓度为20％(w/w)。反应完成之后，通过HPLC分析反应上清液以证实阿洛酮糖的制备量。以与实施例1相同的方式进行HPLC分析。通过反应之后产生的阿洛酮糖的重量比反应之前d-果糖的重量的比例计算阿洛酮糖转化率。
结果，证实全部8种Kaistia属的菌株从D-果糖制备阿洛酮糖，并且这表明Kaistia属的所有种类的微生物均可以在高温下从D-果糖产生阿洛酮糖(表1，图3-10)。
[表1]
| 菌株 | 转化率(％) |
| K.granuli LIS1 | 28 |
| K.granuli KCTC12575 | 25 |
| K.defluvii LIS2 | 28 |
| K.defluvii KCTC23766 | 23 |
| K.geumhonensis KCTC12849 | 11 |
| K.aditapa KCTC12095 | 4 |
| K.dalseonensis KCTC12850 | 1 |
| K.hirudinis DSM25966 | 10 |
| K.soli DSM19436 | 4 |
| K.terrae DSM21341 | 23 |
从以上描述，本领域技术人员会理解本发明可以以其他特定形式进行而不修改技术思想或其基本特征。在这方面，应当理解上述实施方案在所有方面是说明性的而不是限制性的。本发明的范围应当解释为覆盖源自所附权利要求的含义和范围的所有修改或变化而不是详细描述。
序列表
<110> CJ第一制糖株式会社
<120> 利用Kaistia属的微生物制备D-阿洛酮糖的方法
<130> OPA18335
<150> KR 10-2016-0152948
<151> 2016-11-16
<160> 4
<170> KopatentIn 2.0
<210> 1
<211> 1401
<212> DNA
<213> A 16s rDNA sequence of Kaistia granuli LIS1
<400> 1
agggggttgg cggcaggcct accatgcaag tcgacgccct agcaataggg agtggcagac 60
gggtgagtaa cgcgtgggaa tctaccttgt ggtacggaac aaccaaggga aactttggct 120
aataccgtat gagcccttcg ggggaaagat ttatcgccat aagatgagcc cgcgtaggat 180
tagctagttg gtgaggtaat ggctcaccaa ggcgacgatc cttagctggt ctgagaggat 240
gaccagccac actgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag cagtggggaa 300
tattggacaa tgggcgcaag cctgatccag ccatgccgcg tgtgtgatga aggccttagg 360
gttgtaaagc actttcgccg atgaagataa tgactgtagt cggagaagaa gccccggcta 420
acttcgtgcc agcagccgcg gtaatacgaa gggggctagc gttgttcgga attactgggc 480
gtaaagcgta cgtaggcgga tcgttaagtt aggggtgaaa tcccgaggct caacctcgga 540
actgcctctg atactggcga tcttgagtcc gggagaggtg agtggaactc ctagtgtaga 600
ggtgaaattc gtagatatta ggaagaacac cagtggcgaa ggcggctcac tggcccggaa 660
ctgacgctga ggtacgaaag cgtggggagc aaacaggatt agataccctg gtagtccacg 720
ccgtaaacga tggatgctag ccgtcgggga gcttgctctt cggtggcgca gctaacgcat 780
taagcatccc gcctggggag tacggtcgca agattaaaac tcaaaggaat tgacgggggc 840
ccgcacaagc ggtggagcat gtggtttaat tcgaagcaac gcgcagaacc ttaccagctc 900
ttgacatgtc acgtatgggt accggagacg gtatccttca gttcggctgg cgtgaacaca 960
ggtgctgcat ggctgtcgtc agctcgtgtc gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag 1020
cgcaaccctc gcctctagtt gccatcattc agttgggcac tctagaggga ctgccggtga 1080
taagccgaga ggaaggtggg gatgacgtca agtcctcatg gcccttacgg gctgggctac 1140
acacgtgcta caatggcggt gacaatgggc agcgaaaggg cgacctggag ctaatctcaa 1200
aaagccgtct cagttcggat tgcactctgc aactcgagtg catgaagttg gaatcgctag 1260
taatcgtgga tcagcatgcc acggtgaata cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc 1320
acaccatggg agttggtttt acccgaaggc gttgcgctaa cccagcaatg gaggcaggcg 1380
acctctaaag taactactgt g 1401
<210> 2
<211> 1398
<212> DNA
<213> A 16s rDNA sequence of Kaistia defluvii LIS2
<400> 2
gtgctatcgg gtacgctaag atgcttatgg ctcaccctgg ctacagggag tggcagacgg 60
gtgagtaacg cgtgggaatc taccttgtgg tacggaacaa ccaagggaaa ctttggctaa 120
taccgtatga gcccttcggg ggaaagattt atcgccataa gatgagcccg cgtaggatta 180
gctagttggt gaggtaatgg ctcaccaagg cgacgatcct tagctggtct gagaggatga 240
ccagccacac tgggactgag acacggccca gactcctacg ggaggcagca gtggggaata 300
ttggacaatg ggcgcaagcc tgatccagcc atgccgcgtg tgtgatgaag gccttagggt 360
tgtaaagcac tttcgccgat gaagataatg actgtagtcg gagaagaagc cccggctaac 420
ttcgtgccag cagccgcggt aatacgaagg gggctagcgt tgttcggaat tactgggcgt 480
aaagcgtacg taggcggatt gttaagtgag gggtgaaatc ccgaggctca acctcggaac 540
tgcctttcat actggcaatc ttgagtccgg gagaggtgag tggaactcct agtgtagagg 600
tgaaattcgt agatattagg aagaacacca gtggcgaagg cggctcactg gcccggaact 660
gacgctgagg tacgaaagcg tggggagcaa acaggattag ataccctggt agtccacgcc 720
gtaaacgatg gatgctagcc gtcggggagc ttgctcttcg gtggcgcagc taacgcatta 780
agcatcccgc ctggggagta cggtcgcaag attaaaactc aaaggaattg acgggggccc 840
gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc gaagcaacgc gcagaacctt accagctctt 900
gacatgtcac gtatgggtac cggagacggt attcttcagt tcggctggcg tgaacacagg 960
tgctgcatgg ctgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg gttaagtccc gcaacgagcg 1020
caaccctcgc ccttagttgc catcattcag ttgggcactc tagggggact gccggtgata 1080
agccgagagg aaggtgggga tgacgtcaag tcctcatggc ccttacgggc tgggctacac 1140
acgtgctaca atggcggtga caatgggcag cgaaggggcg acctggagct aatctcaaaa 1200
aaccgtctca gttcggattg cactctgcaa ctcgagtgca tgaagttgga atcgctagta 1260
atcgtggatc agcatgccac ggtgaatacg ttcccgggcc ttgtacacac cgcccgtcac 1320
accatgggag tcggttttac ctgtaggcgt tgcgctaacc cagcaagcgt aacaggcgac 1380
cacgaaagga gtaccata 1398
<210> 3
<211> 1429
<212> DNA
<213> A 16s rDNA partial sequence of Kaistia granuli strain Ko04
<400> 3
ccccgtagaa cgaacgctgg cggcaggcct aacacatgca agtcgaacgc cctagcaata 60
gggagtggca gacgggtgag taacgcgtgg gaatctacct tgtggtacgg aacaaccaag 120
ggaaactttg gctaataccg tatgagccct tcgggggaaa gatttatcgc cataagatga 180
gcccgcgtag gattagctag ttggtgaggt aatggctcac caaggcgacg atccttagct 240
ggtctgagag gatgaccagc cacactggga ctgagacacg gcccagactc ctacgggagg 300
cagcagtggg gaatattgga caatgggcgc aagcctgatc cagccatgcc gcgtgtgtga 360
tgaaggcctt agggttgtaa agcactttcg ccgatgaaga taatgactgt agtcggagaa 420
gaagccccgg ctaacttcgt gccagcagcc gcggtaatac gaagggggct agcgttgttc 480
ggaattactg ggcgtaaagc gtacgtaggc ggatcgttaa gttaggggtg aaatcccgag 540
gctcaacctc ggaactgcct ctgatactgg cgatcttgag tccgggagag gtgagtggaa 600
ctcctagtgt agaggtgaaa ttcgtagata ttaggaagaa caccagtggc gaaggcggct 660
cactggcccg gaactgacgc tgaggtacga aagcgtgggg agcaaacagg attagatacc 720
ctggtagtcc acgccgtaaa cgatggatgc tagccgtcgg ggagcttgct cttcggtggc 780
gcagctaacg cattaagcat cccgcctggg gagtacggtc gcaagattaa aactcaaagg 840
aattgacggg ggcccgcaca agcggtggag catgtggttt aattcgaagc aacgcgcaga 900
accttaccag ctcttgacat gtcacgtatg ggtaccggag acggtatcct tcagttcggc 960
tggcgtgaac acaggtgctg catggctgtc gtcagctcgt gtcgtgagat gttgggttaa 1020
gtcccgcaac gagcgcaacc ctcgcctcta gttgccatca ttcagttggg cactctagag 1080
ggactgccgg tgataagccg agaggaaggt ggggatgacg tcaagtcctc atggccctta 1140
cgggctgggc tacacacgtg ctacaatggc ggtgacaatg ggcagcgaaa gggcgacctg 1200
gagctaatct caaaaagccg tctcagttcg gattgcactc tgcaactcga gtgcatgaag 1260
ttggaatcgc tagtaatcgt ggatcagcat gccacggtga atacgttccc gggccttgta 1320
cacaccgccc gtcacaccat gggagttggt tttacccgaa ggcgttgcgc taacccagca 1380
atgggaggca ggcgaccacg gtagggtcag cgacttgggg tgacaaaaa 1429
<210> 4
<211> 1456
<212> DNA
<213> A 16s rDNA partial sequence of Kaistia defluvii strain B6-12
<400> 4
tcagaacgaa cgctggcggc aggcctaaca catgcaagtc gaacgccctg gcaacaggga 60
gtggcagacg ggtgagtaac gcgtgggaat ctaccttgtg gtacggaaca accaagggaa 120
actttggcta ataccgtatg agcccttcgg gggaaagatt tatcgccata agatgagccc 180
gcgtaggatt agctagttgg tgaggtaatg gctcaccaag gcgacgatcc ttagctggtc 240
tgagaggatg accagccaca ctgggactga gacacggccc agactcctac gggaggcagc 300
agtggggaat attggacaat gggcgcaagc ctgatccagc catgccgcgt gtgtgatgaa 360
ggccttaggg ttgtaaagca ctttcgccga tgaagataat gactgtagtc ggagaagaag 420
ccccggctaa cttcgtgcca gcagccgcgg taatacgaag ggggctagcg ttgttcggaa 480
ttactgggcg taaagcgtac gtaggcggat tgttaagtga ggggtgaaat cccgaggctc 540
aacctcggaa ctgcctttca tactggcaat cttgagtccg ggagaggtga gtggaactcc 600
tagtgtagag gtgaaattcg tagatattag gaagaacacc agtggcgaag gcggctcact 660
ggcccggaac tgacgctgag gtacgaaagc gtggggagca aacaggatta gataccctgg 720
tagtccacgc cgtaaacgat ggatgctagc cgtcggggag cttgctcttc ggtggcgcag 780
ctaacgcatt aagcatcccg cctggggagt acggtcgcaa gattaaaact caaaggaatt 840
gacgggggcc cgcacaagcg gtggagcatg tggtttaatt cgaagcaacg cgcagaacct 900
taccagctct tgacatgtca cgtatgggta ccggagacgg tattcttcag ttcggctggc 960
gtgaacacag gtgctgcatg gctgtcgtca gctcgtgtcg tgagatgttg ggttaagtcc 1020
cgcaacgagc gcaaccctcg cccttagttg ccatcattca gttgggcact ctagggggac 1080
tgccggtgat aagccgagag gaaggtgggg atgacgtcaa gtcctcatgg cccttacggg 1140
ctgggctaca cacgtgctac aatggcggtg acaatgggca gcgaaggggc gacctggagc 1200
taatctcaaa aaaccgtctc agttcggatt gcactctgca actcgagtgc atgaagttgg 1260
aatcgctagt aatcgtggat cagcatgcca cggtgaatac gttcccgggc cttgtacaca 1320
ccgcccgtca caccatggga gttggtttta cccgaaggcg ttgcgctaac ccagcaatgg 1380
gaggcaggcg accacggtag ggtcagcgac tggggtgaag tcgtaacaag gtagccgtag 1440
gggaacctgc ggctgg 1456
Claims (7)
1. 组合物用于制备D-阿洛酮糖的用途，所述组合物包含：Kaistia属的微生物，其中所述Kaistia属的微生物是选自以下的Kaistia属的至少一种微生物：Kaistia granuli、Kaistia defluvii和Kaistia geumhonensis、Kaistia adipata、Kaistia dalseonensis、Kaistia hirudinis、Kaistia soli和Kaistia terrae。
2.权利要求1的用途，其中所述组合物进一步包含：D-果糖。
3. 一种制备D-阿洛酮糖的方法，所述方法包括：使Kaistia属的微生物与D-果糖接触，其中所述Kaistia属的微生物是选自以下的Kaistia属的至少一种微生物：Kaistiagranuli、Kaistia defluvii和Kaistia geumhonensis、Kaistia adipata、Kaistiadalseonensis、Kaistia hirudinis、Kaistia soli和Kaistia terrae。
4.权利要求3的方法，其中所述接触在5.0-9.0的pH、40°C-90°C的温度进行，或者进行0.5-48小时。
5.用保藏号KCCM11916P保藏的Kaistia granuli LIS1菌株。
6. 用保藏号KCCM12020P保藏的Kaistia defluvii LIS2菌株。
7. Kaistia属的微生物用于制备D-阿洛酮糖的用途，其中所述Kaistia属的微生物是选自以下的Kaistia属的至少一种微生物：Kaistia granuli、Kaistia defluvii和Kaistiageumhonensis、Kaistia adipata、Kaistia dalseonensis、Kaistia hirudinis、Kaistiasoli和Kaistia terrae。
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