CN111110694B - 一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物及其用途 - Google Patents
一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111110694B CN111110694B CN201911225110.7A CN201911225110A CN111110694B CN 111110694 B CN111110694 B CN 111110694B CN 201911225110 A CN201911225110 A CN 201911225110A CN 111110694 B CN111110694 B CN 111110694B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- alginic acid
- orlistat
- derivatives
- composition
- alginate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/734—Alginic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种由含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物,所述组合物包括奥利司他、海藻酸或其衍生物,所述组合物中奥利司他与海藻酸或其衍生物的质量比为1:0.01~100,所述海藻酸或其衍生物的重均分子量为1.36kDa~598.56kDa。该组合物中奥利司他、海藻酸或其衍生物对青梅花提取物抑制草绿色链球菌、人葡萄球菌、流感嗜血与粪肠球菌方面具有协同抑制作用,并同时对青梅花提取物抑制前列腺癌、卵巢癌与胰腺癌细胞增殖方面具有协同抗肿瘤细胞增殖作用。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物及及其用途。
背景技术
医院感染是影响医院医疗质量的重要问题。随着现代医学技术的不断发展进步,抗菌药物大量使用,临床病原菌的耐药菌株不断增加。加之,化疗、放疗在肿瘤住院患者治疗中的广泛应用,患者免疫功能下降,而内窥镜及各种导管的使用,更是增加了病原微生物入侵机体的机会,最终导致肿瘤患者院内感染数呈现日益增加的趋势。因此,临床上应用同时具有抗肿瘤与抗细菌性感染的药物,在改善肿瘤合并细菌性感染患者的治疗结局的同时,还能降低其治疗成本。
奥利司他是一种临床上用于治疗超重与肥胖症的脂肪酶抑制,由于其同时能抑制脂肪酸合成酶(FAS),且脂肪酶在众多细菌中均有表达,因此奥利司他也可通过抑制脂肪酶而产生抑制细菌生长的作用,本发明人在前期试验中也证明了这一点。但奥利司他对大多数受试菌的抑制作用均不尽如人意。
海藻酸及其盐类是药物制剂中常用的一类辅料,Han Y等人报道称(Cell DeathDis.2019May 10;10(5):374.)海藻酸寡糖能减弱α2,6-唾液酸化修饰,从而通过Hippo/YAP路径抑制前列腺癌细胞的生长。Baillie LW报道称(J Hosp Infect.1989Aug;14(2):171-4.)海藻酸钠会降低氯己定与庆大霉素的抗菌作用,但不影响环丙沙星的抗菌作用。然而,Pritchard MF等人的研究发现,低重均分子量的海藻酸盐寡聚物能增强粘菌素对铜绿假单胞菌的抗菌作用,但其自身也能降低细菌生物膜的生物量(Antimicrob AgentsChemother.2017Aug 24;61(9).),因而无法判断海藻酸及海藻酸盐与其他药物合用是否存在协同抗菌作用。
植物提取物通常因为其成分组成的复杂性,而具有多种生理功能。比如,Bailly C报道称梅花提取物能同时产生抗菌作用、肝脏保护作用、抗炎作用与抗肿瘤作用(JEthnopharmacol.2019Sep 3;246:112215.)。然而,由于植物提取中有效成分含量往往偏低,因此需要相对较高的剂量才能产生临床意义的治疗作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物,协同地增强青梅花提取物的抗肿瘤与抗菌作用。
为了实现上述目的,本发明一方面提供了一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物,所述组合物包括奥利司他、海藻酸或其衍生物,所述组合物中奥利司他与海藻酸或其衍生物的质量比为1:0.01~100,所述海藻酸或其衍生物的重均分子量为1.36kDa~598.56kDa。
优选的,所述海藻酸或其衍生物选自海藻酸、海藻酸铵、海藻酸钙、海藻酸钾、海藻酸钠与海藻酸丙二醇酯中的一种。
优选的,所述海藻酸的重均分子量为2.73kDa~238.15kDa,海藻酸铵的重均分子量为1.36kDa~595.23kDa海藻酸钙的重均分子量为1.90kDa~598.56kDa,海藻酸钾的重均分子量为1.64kDa~585.75kDa,海藻酸丙二醇酯的重均分子量为1.94kDa~596.19kDa,海藻酸钠的重均分子量为3.92kDa~249.73kDa。
优选的,所述组合物还包括青梅花提取物;所述青梅花提取物与奥利司他、海藻酸或其衍生物二者的质量比为1:0.5。
优选的,所述青梅花提取物的提取方法包括以下步骤:
S1、称取青梅花原料并进行经干燥后,用万能中药粉碎机粉碎后过40目筛,得到青梅花粉;
S2、取S1青梅花粉1kg,加入体积百分浓度为30%的乙醇,使得料液比为1∶10,w/v,然后在60~70℃回流提取2h,按同样的条件提取2次,合并两次的提取液得到混合液;
S3、取S2的混合液,减压浓缩后,采用冷冻干燥得到棕色粉末状样品,随后真空密封包装,经辐射源为60Co-γ,辐射剂量为6kGy辐照灭菌后,在4℃冰箱中保存。
本发明另外一个目的在于提供含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物在制备治疗肿瘤和细菌性感染疾病中药物的用途。
优选的,所述细菌选自草绿色链球菌、人葡萄球菌、流感嗜血与粪肠球菌中的一种,所述肿瘤选自胰腺癌、卵巢癌与前列腺癌中的一种。
优选的,所述组合物配以药学接受的辅料可制成口服固体制剂,所述口服固体制剂包括颗粒剂、片剂与胶囊剂。
优选的,所述辅料选自乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮、淀粉、羟丙甲纤维素、微粉硅胶和硬脂酸镁中的至少一种。
进一步的,本发明通过试验例1抑菌效果实验证明,与单独给药青梅花提取物相比,同时含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制草绿色链球菌、人葡萄球菌、流感嗜血与粪肠球菌具有协同作用,其中以质量比为1.585的ORL-LorMwCaA2-PF组合物的联合用药对青梅花提取物抑制草绿色链球菌协同作用最强,以质量比为0.013组合的ORL-HwSoA1-PF组合物抑制草绿色链球菌效果最佳;在抑制人葡萄球菌方面,以质量比为3.981的ORL-HwAmA3-PF组合物对青梅花提取物抑制人葡萄球菌协同作用最强,以质量比为1的ORL-LorMwAmA1-PF组合物联合用药对抑制人葡萄球菌效果最佳,抑菌率达到94.54%;在抑制流感嗜血菌方面,其中以质量比为0.398的ORL-LorMwCaA2-PF组合物,对青梅花提取物协同抑制流感嗜血菌作用最强,以质量比为1的ORL-LorMwPoA1-PF联合用药时,抑制流感嗜血杆菌效果最佳,对流感嗜血杆菌抑菌率达到94.88%;在抑制粪肠球菌方面,其中以质量比为0.04的ORL-HwAmA1-PF组合物,对青梅花提取物抑制粪肠球菌协同作用最强,以质量比为0.013的ORL-LorMwfAA1-PF组合物抑制粪肠球菌效果最佳,对粪肠球菌抑菌率达到93.89%。
更进一步的,本发明通过试验例2体外研究结果显示,结果表明,与单独给药青梅花提取物相比,同时含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物在抑制胰腺癌细胞、卵巢癌细胞和制前列腺癌细胞增殖方面具有协同抑制作用;在抑制胰腺癌方面,其中以质量比0.04的ORL-HwPgA2-PF组合物对青梅花提取物抑制前列腺癌细胞协同作用最强,以质量比为0.251的ORL-LorMwfAA3-PF组合物抑制胰腺癌细胞增殖效果最好,对胰腺癌细胞增殖抑制率达到94.93%;在抑制卵巢癌方面,其中以质量比为2.512的ORL-LorMwCaA2-PF对青梅花提取物抑制卵巢癌细胞增殖作用协同最强,以质量比为0.2的ORL-LorMwAmA2-PF抑制卵巢癌细胞增殖的效果最佳,对卵巢癌细胞增殖抑制率达到94.95%;在抑制前列腺癌方面,其中以质量比为0.501的ORL-LorMwAmA2-PF组合物对青梅花提取物抑制前列腺细胞增殖作用协同最强,以质量比为0.079的ORL-LorMwPoA1-PF组合物抑制前列腺癌细胞增殖的效果最佳,对前列腺癌细胞增殖抑制率达到94.99%。
与现有技术相比,本发明提供的含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物在制备治疗肿瘤或细菌性感染疾病中,具有以下有益效果:1)同时含有奥利司他、海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制草绿色链球菌、人葡萄球菌、流感嗜血与粪肠球菌方面具有协同抑制作用;2)同时含有奥利司他、海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制前列腺癌、卵巢癌与胰腺癌方面具有协同抑制作用;3)本发明提供的组合物同时具有抗肿瘤与抗细菌性感染的作用,在改善肿瘤合并细菌性感染患者的治疗结局的同时,降低了治疗成本。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。
制备例1青梅花提取物的制备
本发明所用青梅花为萧山大青梅中的大叶青品种,采自浙江杭州市萧山区进化镇梅林,采摘后及时真空干燥(含水量在10%以下),室温避光保存。
青梅花原料经干燥,用万能中药粉碎机粉碎后过40目筛,取1kg,加入乙醇(30%,v/v),使得料液比=1∶10,w/v,在60~70℃回流提取2h,按同样的条件提取2次,合并两次的提取液,经减压浓缩后采用冷冻干燥得到棕色粉末状样品,随后真空密封包装,经辐射源为60Co-γ,辐射剂量为6kGy,辐照灭菌后在4℃冰箱中保存,供后续研究所需,青梅花提取物记作PF。
制备例2从商业可得的高分子海藻酸或其衍生物制备中低分子量的海藻酸或其衍生物
本发明首先通过商业途径购得经GPC法测定分子量如表1所示的高分子量海藻酸或其衍生物,并以表1中各分子量最低的高分子量海藻酸或其衍生物为原料通过微波辅助过氧化氢降解法,制备得到了中等分子量的海藻酸或其衍生物。
表1本发明所用的商业可得的高分子量的海藻酸或其衍生物
分别取1.5g海藻酸或其衍生物加入到100mL去离子水中,搅拌混匀,静置过夜,往所得溶液中逐滴加入30%的过氧化氢溶液,使其终浓度为1.8%,w/w,充分搅拌10min。将上述溶液置于微波反应器中,设定温度为90℃,功率为400w,反应一段时间后,室温下冷却,过滤去除不溶性杂质,冷冻干燥得到固体产品,结果如表2所示。
表2本发明所用的中低分子量的海藻酸或其衍生物
制备例3奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物
制备例3提供了7组含有奥利司他、海藻酸或其衍生物的组合物,所述组合物具体质量比如表2。其中奥利司他(记为ORL)与表1、表2所示的海藻酸或其衍生物的质量比为α形成的组合物,记为组合物A;PF与奥利司他与海藻酸或其衍生物二者以质量比为1:0.5形成的组合物,记为组合物B。
表3奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物配方
注:质量比为:奥利司他与海藻酸及其衍生物的质量比,以“-”连接各成分表示混合物,下同。
试验例1奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抗菌活性的协同增效作用1试验方法
供试样品溶液配制:取一定量制备例3中1-4组别的受试物,用DMF作溶剂,采用特定倍数连续稀释法配制6个浓度的供试样品溶液,同时设置只含有青梅花提取物组和只含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物A组。
菌悬液制备:分别取活化后的草绿色链球菌、人葡萄球菌、流感嗜血与粪肠球菌的菌种接入液体培养基(不加琼脂),摇床培养。细菌用平板稀释法计算菌落数,用无菌生理盐水调节细菌悬液浓度均为107CFU/mL。琼脂-孔洞扩散法测定抑菌活性操作步骤:灭菌培养基冷至50℃,加入5mL菌悬液,混匀,倒入直径9cm培养皿中,每皿20mL,静置40min。在固化后的培养基上用无菌打孔器均匀打孔(直径7mm),记号。每孔加入40μL供试样品溶液,DMF作空白对照。细菌37℃培养24h,测量并记录抑菌圈直径(mm),每个浓度重复3次,取平均值作为测定结果,按下式计算对供试菌种抑制率(IR)。
对于组合物A与PF而言,采用IR对组合物A与PF的受试浓度C(ng/mL)拟合IR-logc曲线,根据线性回归方程计算出产生特定fa的抑制率时各受试物的浓度,分别记为ICfa(A)与ICfa(PF)。对于组合物B而言,采用IR对其中采用IR对组合物A与PF的受试浓度C(ng/mL)作图,根据线性回归方程计算出产生特定fa的抑制率时组合物B中组合物A的浓度,记为ICfa(mixA),再根据质量比推算出产生特定fa的抑制率时组合物B中的PF浓度,记为ICfa(mixPF)。根据下式计算产生特定fa抑制率时的联合用药指数(CI)。
CI<1时,即表示存在协同作用,CI越小,协同作用越强。
2结果
2.1对青梅花提取物抑制草绿色链球菌效果的影响(fa=30.20%)
结果如表4所示,与单独给药青梅花提取物相比,含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制草绿色链球菌具有协同作用,其中以ORL-LorMwCaA2-PF组合物的联合用药指数最小为0.003,此时奥利司他与重均分子量为3.64KDa的海藻酸钙的质量比为1.585,表明奥利司他与重均分子量为3.64KDa海藻酸钙以质量比为1.585组合时,对青梅花提取物抑制草绿色链球菌协同作用最强;以质量比为0.013组合的ORL-HwSoA1-PF组合物抑制草绿色链球菌效果最佳,对草绿色链球菌抑制率达到94.75%。
表4组合物对青梅花提取物抑制草绿色链球菌效果的影响(fa=30.20%)
2.2对青梅花提取物抑制人葡萄球菌效果的影响(fa=30.18%)
结果如表5所示,与单独给药青梅花提取物相比,含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制葡萄球菌具有协同作用,其中以ORL-HwAmA3-PF组合物的联合用药指数最小为0.006,表明奥利司他与重均分子量为595.23KDa海藻酸铵的质量比为3.981,对青梅花抑制人葡萄球菌具有最强协同作用;以质量比为1的ORL-LorMwAmA1-PF组合物联合用药对抑制人葡萄球菌效果最佳,抑菌率达到94.54%。
表5组合物对青梅花提取物抑制人葡萄球菌效果的影响(fa=30.18%)
2.3.对青梅花提取物抑制流感嗜血杆菌效果的影响(fa=30.18%)
结果如表6所示,与单独给药青梅花提取物相比,含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的对青梅花提取物抑制流感嗜血菌具有协同作用,其中以ORL-LorMwCaA2-PF组合物的联合用药指数最小为0.002,此时奥利司他与重均分子量为3.64KDa海藻酸钙的质量比为0.398,联合用药指数最小,对青梅花提取物协同抑制流感嗜血杆菌作用最强;其中以质量比为1的ORL-LorMwPoA1-PF联合用药时,抑制流感嗜血杆菌效果最佳,对流感嗜血杆菌抑菌率达到94.88%。
表6奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制流感嗜血杆菌效果的影响(fa=30.04%)
2.4.对青梅花提取物抑制粪肠球菌效果的影响(fa=30.35%)
结果如表7所示,与单独给药青梅花提取物相比,含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制粪肠球菌具有协同作用,其中以ORL-HwAmA1-PF组合物的联合用药指数最小为0.001,表明奥利司他与重均分子量为11.52KDa海藻酸铵的质量比为0.04,对青梅花提取物抑制粪肠球菌协同作用最强;其中以质量比为0.013的ORL-LorMwfAA1-PF组合物抑制粪肠球菌效果最佳,对粪肠球菌抑菌率达到93.89%。
表7奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制粪肠球菌效果的影响(fa=30.35%)
试验例2奥利司他与海藻酸或其衍生物对青梅花提取物抑制不同肿瘤细胞株增殖效果的影响
1、方法
采用MTT法测定制备例3中5-7组别的受试物对各种肿瘤细胞增殖的抑制作用,同时设置只含有青梅花提取物组和只含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物A组。具体的,用含10%胎牛血清的RMPI-1640培养基培养肿瘤细胞,将呈对数生长期的肿瘤细胞消化并制成细胞悬液,以每孔(3~4)×103个细胞接种于96孔板中,每孔中溶液体积100μL,将培养板放入37℃、5%二氧化碳(CO2)、饱和湿度恒温孵育箱孵育24h后,换液培养,并将配有不同浓度的受试物分别加入每个实验孔中,每个浓度设5个复孔;未加药物的为对照孔,空白孔设为调零孔,每孔中溶液终体积100μL。再将加药后的培养板放入37℃、5%CO2、饱和湿度恒温孵育箱孵育24、48h后,在每孔中加入MTT反应溶液15μL,再在37℃、5%CO2、饱和湿度恒温孵育箱中孵育4h,终止培养,小心吸出每个培养孔中的上清液,再于每孔中加入二甲基亚砜150μL,室温下摇床避光震荡20min,使培养孔中的甲臜充分溶解。将96孔板放入酶标仪中,选择490nm波长,检测各孔的吸光度值。重复3次实验并取平均值进行分析,计算细胞生长抑制率。细胞生长抑制率=(对照孔A值-实验孔A值)/对照孔A值×100%。
对于组合物A与PF而言,采用IR对组合物A与PF的受试浓度(ng/mL)的对数(log(c))作图,根据线性回归方程计算出产生特定fa的抑制率时各受试物的浓度,分别记为ICfa(A)与ICfa(PF)。对于组合物B而言,采用IR对其中采用IR对组合物A与PF的受试浓度(ng/mL)的对数(log(c))作图,根据线性回归方程计算出产生特定fa的抑制率时组合物B中组合物A的浓度,记为ICfa(mixA),再根据质量比推算出产生特定fa的抑制率时组合物B中的PF浓度,记为ICfa(mixPF)。
根据下式计算产生特定fa抑制率时的联合用药指数(CI)。
CI<1时,即表示存在协同作用,CI越小,协同作用越强。
2.结果
2.1对青梅花提取物抑制胰腺癌细胞增殖的效果
结果如表8所示,与单独给药青梅花提取物相比,含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制胰腺癌细胞增殖具有协同作用,其中以ORL-HwPgA2-PF组合物抑胰腺癌细胞最佳,其联合用药指数为0.014,表明奥利司他与重均分子量为315.33kDa海藻酸丙二醇酯以质量比0.04组合时,对青梅花提取物协同抑制胰腺癌细胞增殖作用最强,以质量比为0.251的ORL-LorMwfAA3-PF组合物抑制胰腺癌细胞增殖效果最好,对胰腺癌细胞增殖抑制率达到94.93%。
表8组合物抑制胰腺癌细胞增殖的效果的影响(fa=30.87%)
2.2对青梅花提取物抑制卵巢癌细胞增殖的效果(fa=30.69%)
结果如表9所示,与单独给药青梅花提取物相比,含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制卵巢癌细胞增殖具有协同作用,其中以质量比为2.512的ORL-LorMwCaA2-PF协同效果最好,表明奥利司他与重均分子量为3.24kaD的海藻酸钙以质量比为2.512组合时,对青梅花提取物协同抑制卵巢癌细胞作用最强;其中质量比为0.2的ORL-LorMwAmA2-PF抑制卵巢癌细胞增殖的效果最佳,对卵巢癌细胞增殖抑制率达到94.95%。
表9组合物抑制卵巢癌细胞增殖的效果的影响(fa=30.69%)
2.3对青梅花提取物抑制前列腺癌细胞细胞增殖的效果(fa=30.69%)
结果如表10所示,与单独给药青梅花提取物相比,含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物对青梅花提取物抑制前列腺癌细胞增值具有协同作用,其中以质量比为0.501的ORL-LorMwAmA2-PF组合物协同效果最佳,表明奥利司他与重均分子量为2.72kDa的海藻酸铵以质量比为0.501组合时,对青梅花提取物协同抑制前列腺癌细胞增值作用最强;其中以质量比为0.079的ORL-LorMwPoA1-PF组合物抑制前列腺癌细胞增殖的效果最佳,对前列腺癌细胞增殖抑制率达到94.99%。
表10组合物抑制前列腺癌细胞增殖的效果的影响(fa=30.77%)
实施例含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的口服固体制剂及其制备方法
实施例1~36提供了一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物的口服固体制剂及其制备方法,所述口服制剂的配方如表11:
表11含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物的口服固体制剂配方
注:奥利司他处方量为1500单位剂量。
所述口服制剂的制备方法如下:
取实施例1~36配方量的奥利司他、海藻酸或其衍生物与青梅花提取物,均过100目筛。取奥利司他、海藻酸或其衍生物、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮与淀粉充分混匀;取处方量的羟丙甲纤维素,配制成依羟丙甲纤维素计浓度为10%的溶液,用乳酸调节pH至3.0~4.0,加入至上述组合物料中制软材,以16目筛制粒,80℃干燥3~4h。用16目筛整粒,加入处方量的微粉硅胶与硬脂酸镁混合混匀,灌装胶囊,即得胶囊;
取实施例1~36配方量的奥利司他、海藻酸或其衍生物与青梅花提取物,均过100目筛。取奥利司他、海藻酸或其衍生物、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮与淀粉充分混匀;取处方量的羟丙甲纤维素,配制成依羟丙甲纤维素计浓度为10%的溶液,用乳酸调节pH至3.0~4.0,加入至上述组合物料中制软材,以16目筛制粒,80℃干燥3~4h。用16目筛整粒,加入处方量的微粉硅胶与硬脂酸镁混合混匀,分装,即得颗粒剂;
取实施例1~36配方量的奥利司他、海藻酸或其衍生物与青梅花提取物,均过100目筛。取奥利司他、海藻酸或其衍生物、乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮与淀粉充分混匀;取处方量的羟丙甲纤维素,配制成依羟丙甲纤维素计浓度为10%的溶液,用乳酸调节pH至3.0~4.0,加入至上述组合物料中制软材,以16目筛制粒,80℃干燥3~4h。用16目筛整粒,加入处方量的微粉硅胶与硬脂酸镁混合混匀,压片,既得片剂。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效,而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下,对上述实施例进行修饰或改变。因此,举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变,仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (5)
1.一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物,其特征在于,所述组合物包括奥利司他、海藻酸或其衍生物,所述组合物中奥利司他与海藻酸或其衍生物的质量比为1:0.01~100;所述海藻酸或其衍生物选自海藻酸、海藻酸铵、海藻酸钙、海藻酸钾、海藻酸钠与海藻酸丙二醇酯中的一种;所述海藻酸的重均分子量为2.73 kDa~10.69 kDa,海藻酸铵的重均分子量为1.36 kDa~5.95 kDa,海藻酸钙的重均分子量为3.64 kDa,海藻酸钾的重均分子量为7.35 kDa,海藻酸丙二醇酯的重均分子量为3.87 kDa,海藻酸钠的重均分子量为16.86 kDa;所述组合物还包括青梅花提取物;所述青梅花提取物与奥利司他、海藻酸或其衍生物二者的质量比为1:0.5;所述青梅花提取物的提取方法包括以下步骤:
S1、称取青梅花原料并进行经干燥后,用万能中药粉碎机粉碎后过40目筛,得到青梅花粉;
S2、取S1青梅花粉1kg,加入体积百分浓度为30%的乙醇,使得料液比为1∶10,w/v,然后在60~70℃回流提取2h,按同样的条件提取2次,合并两次的提取液得到混合液;
S3、取S2的混合液,减压浓缩后,采用冷冻干燥得到棕色粉末状样品,随后真空密封包装,经辐射源为60Co-γ,辐射剂量为6kGy辐照灭菌后,在4℃冰箱中保存。
2.根据权利要求1所述含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物在制备治疗肿瘤合并细菌性感染疾病中药物的用途。
3.根据权利要求2所述的用途,其特征在于,所述细菌选自草绿色链球菌、人葡萄球菌、流感嗜血与粪肠球菌中的一种,所述肿瘤选自胰腺癌、卵巢癌与前列腺癌中的一种。
4.根据权利要求1所述含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物,其特征在于,所述组合物配以药学接受的辅料可制成口服固体制剂,所述口服固体制剂选自颗粒剂、片剂与胶囊剂。
5.根据权利要求4所述口服固体制剂,其特征在于,所述辅料选自乳糖、微晶纤维素、交联聚维酮、淀粉、羟丙甲纤维素、微粉硅胶和硬脂酸镁中的至少一种。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201911225110.7A CN111110694B (zh) | 2019-12-04 | 2019-12-04 | 一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物及其用途 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201911225110.7A CN111110694B (zh) | 2019-12-04 | 2019-12-04 | 一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物及其用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111110694A CN111110694A (zh) | 2020-05-08 |
CN111110694B true CN111110694B (zh) | 2023-01-24 |
Family
ID=70497523
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201911225110.7A Active CN111110694B (zh) | 2019-12-04 | 2019-12-04 | 一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物及其用途 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN111110694B (zh) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009135353A1 (zh) * | 2008-05-05 | 2009-11-12 | 杭州尤美特科技有限公司 | 梅树提取物的用途 |
CN105943569A (zh) * | 2016-06-06 | 2016-09-21 | 惠州同富康生物科技有限公司 | 一种青梅有效成分的提取方法 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070203236A1 (en) * | 2006-01-11 | 2007-08-30 | Smith Jeffrey W | Novel antagonists of the human fatty acid synthase thioesterase |
WO2009039157A2 (en) * | 2007-09-17 | 2009-03-26 | Dr. Reddy's Laboratories Ltd. | Orlistat pharmaceutical formulations |
-
2019
- 2019-12-04 CN CN201911225110.7A patent/CN111110694B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009135353A1 (zh) * | 2008-05-05 | 2009-11-12 | 杭州尤美特科技有限公司 | 梅树提取物的用途 |
CN105943569A (zh) * | 2016-06-06 | 2016-09-21 | 惠州同富康生物科技有限公司 | 一种青梅有效成分的提取方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
A Low-Molecular-Weight Alginate Oligosaccharide Disrupts Pseudomonal Microcolony Formation and Enhances Antibiotic Effectiveness;ManonF.Pritchard等;《Antimicrobial Agents and Chemotherapy》;20170619;第61卷(第9期);摘要,图1-4 * |
Inhibitors of fatty acid synthesis in prokaryotes and eukaryotes as anti-infective, anticancer and anti-obesity drugs;Jingxin Wang等;《Future Med. Chem.》;20120630;第4卷(第9期);摘要,第1191-1141页 * |
青梅资源的研究与应用;石嘉怿等;《食品与发酵工业》;20080630(第06期);全文 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN111110694A (zh) | 2020-05-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN110545820B (zh) | 可利霉素及其药学上可接受的盐在制备治疗和/或预防肿瘤药物方面的应用 | |
CN100464757C (zh) | 一种以吸血水蛭为原料制备水蛭素的方法 | |
CN104825570B (zh) | 一种抑制幽门螺杆菌的组合物及其用途 | |
CN108403725A (zh) | 用于治疗消化道溃疡的组合物及其应用 | |
CN108685892B (zh) | 绿原酸及其组合物在制备治疗鳞状细胞癌的药物中的用途 | |
CN111110694B (zh) | 一种含有奥利司他与海藻酸或其衍生物的组合物及其用途 | |
CN103263433A (zh) | 6-姜烯酚增强胰腺癌对吉西他滨化疗敏感性及其复方药物 | |
CN110898056A (zh) | 含有异吲哚啉酮衍生物混合物的组合物及其用途 | |
CN113952355A (zh) | 一种用于止血抗炎的中药纳米复合物及其制备方法 | |
CN101313928A (zh) | 青蒿油及其制剂的医药用途 | |
CN114652748A (zh) | 一种含有干细胞抑菌因子的医用妇科洗液的制备方法及其应用 | |
CN110804028B (zh) | 一种哌嗪基取代的二芳基亚砜类化合物及其组合物和应用 | |
WO2017006935A1 (ja) | 菌含有口腔内速崩壊性錠剤 | |
CN110746381A (zh) | 由奥利司他与质子泵抑制剂构成的共晶及其组合物与用途 | |
Xu et al. | Application of Atractylodes Macrocephala Koidz Extract in Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus | |
CN111184717A (zh) | 含有吡咯基二羟基庚酸衍生物混合物的组合物及其用途 | |
CN110840871A (zh) | 含有对氨基苯甲酸衍生物与脂肪六元环羧酸衍生物的组合物及其用途 | |
CN100425229C (zh) | 含有抗感染药物组合物的局部药用制剂及其制备方法 | |
CN105687271B (zh) | 酚酸类化合物在制备抗糖尿病足耐药菌感染药物中的应用 | |
CN111388482A (zh) | 聚普瑞锌在制备增强幽门螺杆菌对抗生素敏感性的药物中的应用 | |
CN102188430B (zh) | 司帕沙星化合物的组合物制剂及其制备方法 | |
CN113521067B (zh) | 一种法莫替丁葡萄糖酸锌制剂组合物及其制备方法 | |
CN1259904C (zh) | 一种以新鱼腥草素钠与盐酸氨溴索为活性成分的药用组合物及其用途 | |
CN107625737A (zh) | 一种磷酸特地唑胺组合物片剂的制备方法 | |
KR100788454B1 (ko) | 속효성이 증진된 나테글리니드를 유효성분으로 함유하는약제학적 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |